Đang tải... (xem toàn văn)
Thạc sĩ, tiến sĩ, cao học, luận văn, khóa luận
BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI ðINH QUYẾT TÂM NGHIÊN CỨU PHÁT SINH, GÂY HẠI VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ VI BÀO TỬ Nosema ceranae KÝ SINH TRÊN ONG Apis mellifera Ở VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI, NĂM 2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI ðINH QUYẾT TÂM NGHIÊN CỨU PHÁT SINH, GÂY HẠI VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ VI BÀO TỬ Nosema ceranae KÝ SINH TRÊN ONG Apis mellifera Ở VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: Bảo vệ thực vật Mã số: 62.62.10.01 Người hướng dẫn khoa học: GS. TS. Hà Quang Hùng HÀ NỘI, NĂM 2011 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ………………………………. i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan rằng, ñây là công trình nghiên cứu riêng của tôi. Các số liệu, hình ảnh, kết quả nghiên cứu trong luận án là trung thực và chưa ñược sử dụng ñể bảo vệ một học vị nào. Tôi xin cam ñoan rằng, mọi sự giúp ñỡ cho việc thực hiện luận án này ñã ñược cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận án ñều ñược ghi rõ nguồn gốc. Tác giả luận án NCS. ðinh Quyết Tâm Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ………………………………. ii LỜI CẢM ƠN ðể hoàn thành luận án, tôi ñã nhận ñược sự giúp ñỡ tận tình của thầy hướng dẫn khoa học: GS.TS. NGƯT. Hà Quang Hùng, nguyên trưởng Bộ môn côn trùng, khoa Nông học, ðại học Nông nghiệp Hà Nội. Tôi xin trân trọng cảm ơn các thầy, cô cùng tập thể cán bộ công nhân viên Viện ðào tạo Sau ñại học, Bộ môn Côn trùng, Khoa Nông học, Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội ñã giúp ñỡ và góp ý cho tôi trong quá trình học tập, triển khai thực hiện luận án này. Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám ñốc và tập thể cán bộ công nhân viên của Trung tâm Nghiên cứu và PT Ong, Công ty cổ phần Ong Trung ương, ñã tạo ñiều kiện thuận lợi cho tôi trong nghiên cứu và phối hợp thực hiện luận án. Tôi xin chân thành cảm ơn lãnh ñạo Bộ Nông nghiệp và PTNT, cùng các Vụ, Cục thuộc Bộ; các ñơn vị và cá nhân tại các xí nghiệp: Giống ong Gia Lai, Giống ong Khu IV, các trại nuôi ong ở Sơn La, Hòa Bình, Bắc Giang, Nghệ An, Gia Lai, ðồng Nai, Tiền Giang ñã giúp ñỡ và cộng tác nhiệt tình với tôi trong quá trình nghiên cứu. Tôi xin cảm ơn sự giúp ñỡ tận tình của các GS.TS. Ingemar Fries, Bộ môn Sinh thái, Trường ðại học Nông nghiệp Thụy ðiển và GS. TS. Robert Paxton, Bộ môn Côn trùng, Trường ðại học Nữ hoàng Belfast, Vương quốc Anh, trong công tác ñịnh loại mẫu vật loài Nosema, GS. TS. Gard Otis, Khoa Các khoa học về môi trường, Trường ðại học Guelph, Canada ñã cung cấp một số tài liệu và dụng cụ nghiên cứu. Tôi xin cảm ơn cơ quan tài trợ, các nhà khoa học trong và ngoài nước, các bạn ñồng nghiệp ñã cộng tác, ñóng góp ý kiến trong quá trình tôi thực hiện luận án. Cuối cùng, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc ñối với gia ñình, bạn bè, mọi người thân ñã ñộng viên, giúp ñỡ tôi thực hiện và hoàn thành luận án này. Hà Nội, ngày 16 tháng 6 năm 2011 Tác giả luận án NCS. ðinh Quyết Tâm Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ………………………………. iii MỤC LỤC Nội dung Trang Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục các chữ viết tắt vi Danh mục các bảng vii Danh mục các hình xi MỞ ðẦU 1 1 Tính cấp thiết của ñề tài 1 2 Mục ñích và yêu cầu của ñề tài 4 3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của ñề tài 4 4 ðối tượng và phạm vi nghiên cứu 5 5 Những ñóng góp mới của luận án 6 Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 7 1.1 Cơ sở khoa học của ñề tài 7 1.2 Tình hình nghiên cứu trên thế giới 8 1.2.1 Giới thiệu chung về bệnh do vi bào tử (Microsporidia) loài Nosema ký sinh ñộng vật, ong mật 8 1.2.2 Nosema spp. tác nhân gây hại cho ong Apis 9 1.2.3 Triệu chứng bệnh Nosema trên ong Apis 13 1.2.4 Phát sinh và lan truyền bệnh Nosema trên ñàn ong Apis 20 1.2.5 Phát sinh bệnh Nosema 23 1.2.6 ðặc ñiểm sinh học và chu kỳ phát triển của bào tử Nosema spp. 25 1.2.7 Phòng trị bệnh Nosema trên ong mật Apis 28 1.3 Tình hình nghiên cứu trong nước 32 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ………………………………. iv 1.3.1 Tình hình nghiên cứu vi bào tử (Microsporidia) Nosema spp. ở Việt Nam 32 1.3.2 Tình hình nghiên cứu bệnh Nosema trên ong Apis ở Việt Nam 33 1.3.3 Phòng trị bệnh Nosema tại Việt Nam 34 Chương 2 ðỊA ðIỂM, THỜI GIAN, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2.1 ðịa ñiểm và thời gian nghiên cứu 35 2.1.1 ðịa ñiểm nghiên cứu 35 2.1.2 Thời gian nghiên cứu 36 2.2 Vật liệu, dụng cụ nghiên cứu 36 2.2.1 Thiết bị, dụng cụ nghiên cứu 36 2.2.2 Vật liệu nghiên cứu 37 2.3 Nội dung và phương pháp nghiên cứu 37 2.3.1 ðiều tra mức ñộ phát sinh, lan truyền bệnh Nosema trên các ñàn ong A. mellifera 37 2.3.2 Phương pháp phân loại, nghiên cứu ñặc ñiểm hình thái, sinh học, gây hại của N. ceranae trên ong A. mellifera 42 2.3.3 Nghiên cứu phòng trị N. ceranae ký sinh trên ong A. mellifera 51 2.4 Phương pháp xử lý số liệu 59 Chương 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 60 3.1 Nguyên nhân gây bệnh Nosema trên các ñàn ong A. mellifera ở Việt Nam 60 3.1.1 Triệu chứng, mức ñộ và tỷ lệ nhiễm bệnh Nosema 60 3.1.2 Tác nhân gây bệnh - vi bào tử loài N. ceranae 81 3.2 ðặc ñiểm gây hại, lây nhiễm và dịch tễ của loài N. ceranae 95 3.2.1 ðặc ñiểm gây hại của loài N. ceranae trên ong thợ A. mellifera 95 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ………………………………. v 3.2.2 Lây nhiễm và dịch tễ của loài N.ceranae trên ñàn ong mật A. mellifera 104 3.3 Biện pháp phòng trị loài N. ceranae gây hại ong A. mellifera 121 3.3.1 Biện pháp kỹ thuật quản lý ñàn ong 121 3.3.2 ðiều trị N. ceranae bằng Fumagillin 124 3.3.3 Nghiên cứu ñiều trị N. ceranae bằng các axit hữu cơ 127 3.3.4 Nghiên cứu ñiều trị N. ceranae bằng các loại thảo dược 132 3.3.5 Hiệu quả ñiều trị N. ceranae của một số hóa chất và thảo dược trên ñàn ong A. mellifera 135 3.3.6 Bước ñầu xây dựng mô hình thực nghiệm phòng trị tổng hợp loài N. ceranae 142 3.3.7 ðề xuất qui trình phòng trị tổng hợp loài N. ceranae vụ mật hoa ðơn buốt (Bidens pillosa) tại Sơn La 146 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 148 1 Kết luận 148 2 ðề nghị 149 Danh mục các công trình ñã công bố liên quan ñến luận án 150 Tài liệu tham khảo 151 Phụ lục 161 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ………………………………. vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT A. mellifera Apis mellifera A. cerana Bệnh Nosema Apis cerana Bệnh do vi bào tử Nosema ký sinh CNA Mẫu ong A. cerana thu ở Nghệ An CMC Mẫu ong A. cerana thu ở Sơn La CTG Mẫu ong A. cerana thu ở Tiền Giang F Xuôi (Forward) DNA/ADN Acid deoxyribonucleic MBG Mẫu ong A. mellifera thu ở Bắc Giang MGL Mẫu ong A. mellifera thu ở Gia Lai MMC Mẫu ong A. mellifera thu ở Sơn La MNA Microsporidia Mẫu ong A. mellifera thu ở Nghệ An Vi bào tử N. apis Nosema apis N. ceranae Nosema spp. Nosema ceranae Nhóm loài thuộc giống Nosema PCR R Polymerase Chain Reaction Ngược (Reverse) RFLP Restriction fragment length polymorphism rRNA Ribosomal ribonucleic acid RT-PCR Real time Polymerase Chain Reaction SSU Small Subunit µl Microliter =10 -6 L µm Micrometer = 10 -6 m Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ………………………………. vii DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang 3.1 Một số triệu chứng bên ngoài của bệnh Nosema trên các ñàn ong A. mellifera (2009) 62 3.2 Biến ñộng số lượng bào tử N. ceranae và tỷ lệ bệnh Nosema trên ong thợ A. mellifera tại Sơn La (2005-2007) 65 3.3 Biến ñộng số lượng bào tử N. ceranae và tỷ lệ bệnh trên ong thợ A. mellifera tại Bắc Giang (2005-2007) 67 3.4 Biến ñộng số lượng bào tử N.ceranae và tỷ lệ bệnh trên ong thợ A. mellifera tại Nghệ An (2005-2007) 69 3.5 Biến ñộng số lượng bào tử N.ceranae và tỷ lệ bệnh trên ong thợ A. mellifera tại Gia Lai (2005-2007) 71 3.6 Biến ñộng số lượng bào tử N. ceranae và diễn biến tỷ lệ bệnh trên ong thợ A. mellifera tại ðồng Nai (2005-2007) 73 3.7 Số lượng bào tử N.ceranae trung bình và tỷ lệ bệnh trung bình của ong A. mellifera ở các ñịa ñiểm ñiều tra (2005-2007) 78 3.8 Kết quả xác ñịnh loài Nosema gây hại trên ong A. mellifera ở các ñịa ñiểm ñiều tra (2008) 86 3.9 Kết quả xác ñịnh loài Nosema bằng cặp PCR ña mồi ñặc hiệu ký sinh loài ong A. mellifera và A.cerana ở Việt Nam 88 3.10 Kích thước bào tử N.ceranae trên ong mật A. mellifera ở các ñịa ñiểm ñiều tra (2007) 94 3.11 Ảnh hưởng của N. ceranae ñến tỷ lệ sống sót của ong thợ A. mellifera trên ñàn (Hà Nội, 2008) 98 3.12 Ảnh hưởng của N. ceranae ñến thế ñàn ong A. mellifera (Bắc Giang, 2008) 100 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ………………………………. viii 3.13 Ảnh hưởng của N. ceranae ñến năng suất mật của ñàn ong A. mellifera (Gia Lai, năm 2006) 102 3.14 Ảnh hưởng của N. ceranae ñến năng suất mật của ñàn ong A. mellifera (Sơn La, 2007) 103 3.15 Kết quả lây nhiễm nhân tạo N. ceranae trên ong thợ A. mellifera trong phòng thí nghiệm (Hà Nội, 2006) 105 3.16 Kết quả lây nhiễm nhân tạo N. ceranae trên ong thợ A. mellifera trong phòng thí nghiệm (Hà Nội, 2007) 107 3.17 Số lượng bào tử N. ceranae trong các các pha phát dục của ong thợ và sản phẩm của ñàn ong A. mellifera (Bắc Giang, 2008) 109 3.18 Mối quan hệ giữa số lượng bào tử N. ceranae/ong thợ A. mellifera với một số yếu tố khí hậu tại Sơn La (2005-2007) 111 3.19 Mối quan hệ giữa số lượng bào tử N. ceranae/ong thợ A. mellifera với một số yếu tố khí hậu tại Bắc Giang (2005-2007) 113 3.20 Mối quan hệ giữa số lượng bào tử N. ceranae/ong thợ A. mellifera với một số yếu tố khí hậu tại Nghệ An (2005-2007) 115 3.21 Mối quan hệ giữa số lượng bào tử N. ceranae/ong thợ A. mellifera với một số yếu tố khí hậu tại Gia Lai (2005 -2007) 117 3.22 Mối quan hệ giữa số lượng bào tử N. ceranae/ong thợ A. mellifera với một số yếu tố khí hậu tại ðồng Nai (2005 – 2007) 119 3.23 Ảnh hưởng của một số biện pháp kỹ thuật ñến số lượng bào tử N.ceranae/ong thợ (Gia Lai, 2006) 121 3.24 Hiệu quả của biện pháp kỹ thuật ñến số lượng bào tử N.ceranae/ong thợ (Sơn La, 2007) 123 3.25 Hiệu quả ñiều trị N. ceranae bằng Fumagillin trong phòng thí nghiệm (Hà Nội, 2005) 125 . tài nghiên cứu: Nghiên cứu phát sinh, gây hại và biện pháp phòng trị vi bào tử Nosema ceranae ký sinh trên ong Apis mellifera ở Vi t Nam 2 Mục ñích và. ðINH QUYẾT TÂM NGHIÊN CỨU PHÁT SINH, GÂY HẠI VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ VI BÀO TỬ Nosema ceranae KÝ SINH TRÊN ONG Apis mellifera Ở VI T NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG