ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Hoàng Thị Phƣợng NGHIÊN CỨU PHÁT TRIỂN PHƢƠNG PHÁP LC-MS/MS PHÂN TÍCH CHLOTETRACYCLINE, OXYTETRACYCLINE VÀ TETRACYCLINE TRONG THỰC PHẨM TRÊN ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ HẠ LONG LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HÀ NỘI – 2017 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Hoàng Thị Phƣợng NGHIÊN CỨU PHÁT TRIỂN PHƢƠNG PHÁP LC-MS/MS PHÂN TÍCH CHLOTETRACYCLINE, OXYTETRACYCLINE VÀ TETRACYCLINE TRONG THỰC PHẨM TRÊN ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ HẠ LONG Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG PGS.TS Nguyễn Văn Ri NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC PGS.TS Tạ Thị Thảo HÀ NỘI – 2017 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu thân Các số liệu kết nêu luận văn trung thực chƣa đƣợc công bố cơng trình trƣớc Hà Nội, ngày 28 tháng năm 2018 Tác giả Hoàng Thị Phƣợng Lời cảm ơn Lời đầu tiên, xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới BS.CK2 Ninh Văn Chủ – Giám đốc Trung tâm Y tế dự phòng, Sở Y tế tỉnh Quảng Ninh TS.Vũ Quyết Thắng -PGĐ Trung tâm Y tế dự phòng, Sở Y tế tỉnh Quảng Ninh tạo điều kiện nguồn lực để tơi hồn thành luận văn Xin gửi lời trân trọng cảm tới PGS TS Tạ Thị Thảo thầy khoa Hóa học , Trường Đại học Khoa học Tự nhiên đã tạo điề u kiê ̣n , giúp đỡ trình triển khai nghiên cứu, thực đề tài Cuối xin gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình, bạn bè thầy cô lớp Cao học khóa 2015- 2017 giúp đỡ động viên tơi suốt trình học tập làm luận văn Hà nội, ngày 21 tháng 12 năm 2017 Học viên Hoàng Thị Phƣợng MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG - TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan kháng sinh nhóm Tetracycline 1.1.1 Giới thiệu chung 1.1.2 Tính chất lý hóa nhóm tetracycline 1.2 Các phƣơng pháp chuẩn bị mẫu thực phẩm phân tích tetracycline .7 1.2.1 Phƣơng pháp chiết tách tetracycline khỏi mẫu thực phẩm 1.2.1.1 Phƣơng pháp chiết lỏng rắn có hỗ trợ lực học 1.2.1.2 Phƣơng pháp chiết lỏng rắn có hỗ trợ áp suất (PLE) 1.2.2 Các phƣơng pháp làm dịch chiết mẫu 1.2.2.1 Phƣơng pháp chiết pha rắn (SPE) 1.2.2.2 Phƣơng pháp chiết lỏng lỏng 1.3.Các phƣơng pháp phân tích kháng sinh tetracycline 1.3.1 Phƣơng pháp sắc ký lỏng 1.3.1.1 Phƣơng pháp sắc kí lỏng ghép nối detector Diode array ( LC/DAD) 1.3.1.2 Phƣơng pháp sắc kí lỏng ghép nối detector huỳnh quang (LC/FL) 10 1.3.1.3 Phƣơng pháp sắc ký lỏng ghép nối detector khối phổ (LC-MS/MS) 10 1.3.2 Phƣơng pháp điện di mao quản 11 1.3.3 Phƣơng pháp sử dụng kit elisa 12 CHƢƠNG - THỰC NGHIỆM .14 2.1 Hóa chất thiết bị 14 2.1.1 Hóa chất 14 2.1.2 Thiết bị 15 2.1.3 Dụng cụ .16 2.2 Nội dung phƣơng pháp nghiên cứu 17 2.2.1 Nội dung .17 2.2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 17 2.2.2.1 Lấy mẫu, bảo quản mẫu .17 2.2.2.2 Phƣơng pháp xử lý mẫu .18 2.2.2.3 Phƣơng pháp phân tích 19 2.2.2.4 Xác nhận giá trị sử dụng phƣơng pháp phân tích 23 CHƢƠNG - KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 26 3.1.Tối ƣu hóa điều kiện phân tích tetracycline hệ thống sắc kí lỏng khối phổ LC/MS-MS 26 3.1.1.Nghiên cứu tối ƣu hóa thơng số detector MS/MS 26 3.1.2 Tối ƣu hóa điều kiện sắc kí lỏng 30 3.2 Nghiên cứu tối ƣu hóa q trình xử lý mẫu 33 3.2.1 Chiết tách chất phân tích khỏi mẫu: 33 3.2.1.1 Lựa chọn dung mơi chiết chất phân tích 33 3.2.1.2 Lựa chọn pH 36 3.2.2.Tối ƣu hóa trình làm mẫu 37 3.3 Các kết xác nhận giá trị sử dụng phƣơng pháp .42 3.3.1 Giới hạn phát thiết bị 42 3.3.2 Giới hạn phát phƣơng pháp (MDL) .43 3.3.4 Phƣơng trình hồi qui tuyến tính 45 3.3.5 Độ xác phƣơng pháp 49 3.3.6.Đánh giá kết phân tích mẫu so sánh liên phòng 51 3.3.7 Độ đặc hiệu/chọn lọc phƣơng pháp 51 3.3.8 Độ ổn định phƣơng pháp 53 3.3.9 Độ không đảm bảo đo 53 3.4 Phân tích mẫu thực tế 55 KẾT LUẬN 63 TÀI LIỆU THAM KHẢO 65 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT AOAC Hiệp hội nhà phân tích hóa học thống(Association of Official Analytical Chemists) CTC Kháng sinh Chlotetracycline DAD Detetctor bán dẫn sử dụng mảng diode (DiodeArray Detector) HPLC Thiết bị sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography) IDL Giới hạn phát thiết bị (Identify detection limit) MDL Giới hạn phát (Minimum detection limit) MQL Giới hạn định lƣợng (Maximum quantitation limit) MRL Giới hạn tối đa cho phép (Maximum Residue Limit) MS Detectơ khối phổ (Mass Spectrometry) OTC Kháng sinh Oxytetracycline PLE Chiết lỏng hỗ trợ áp suất (Pressure liquid extraction) R Hiệu suất thu hồi (Recovery) RSD Độ lệch chuẩn tƣơng đối (Relative Standard Devitation) SD Độ lệch chuẩn (Standard Devitation) TC Kháng sinh Tetracycline TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam tR Thời gian lƣu (Rettention time) WHO Tổ chức y tế giới (World Helth Organization) DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1Thơng tin nhóm tetracycline Bảng 2.1Thơng số phân tích đƣợc cài đặt phần mềm phân tích hệ MS/MS 19 Bảng 2.2 Các điều kiện phân tích cho hệ thống sắc kí lỏng .22 Bảng 3.1 Kết tối ƣu hóa MS/MS 26 Bảng 3.2 Cơ chế phân mảnh cho tetracycline, oxytetracycline chlotetracycline 27 Bảng 3.3 Chương trình Gradient dung môi tối ưu .30 Bảng 3.4 Độ thu hồi lặp lại chiết đệm McILvaine EDTA acetonitril 33 Bảng 3.5 Độ thu hồi lặp lại mẫu trắng thêm chuẩn chiết đệm McILvaine pH 3-4-5-6 .36 Bảng 3.6 Hiệu suất thu hồi thay đổi điều kiện chiết pha rắn SPE 37 Bảng 3.7Tỷ số S/N chất (TC,OTC,CTC) nồng độ chuẩn (lặp lại 10 lần) 42 Bảng 3.8 Kết tính S/N chất (TC,OTC,CTC) nồng độ mẫu thêm chuẩn 43 Bảng 3.9 : Độ lặp lại, thu hồi phƣơng pháp nồng độ MQL =5,0 µg/kg chất (TC,OTC,CTC) 44 Bảng 3.10 Sự phụ thuộc diện tích pic vào nồng độ TC,OTC CTC .45 Bảng 3.11Độ chệch điểm chuẩn đƣờng chuẩn xác định tetracycline 46 Bảng 3.12 Độ chệch điểm chuẩn đƣờng chuẩn xác định oxytetracycline 47 Bảng 3.13 Độ chệch điểm chuẩn đƣờng chuẩn xác định chlotetracycline 48 Bảng 3.14 Độ lặp lại, thu hồi phƣơng pháp nồng độ 20 µg/kg, n=12 chất (TC,OTC CTC) 49 Bảng 3.15 Độ lặp lại, thu hồi phƣơng pháp nồng độ 50 µg/kg, n=12đối với chất (TC, OTC, CTC) .50 Bảng 3.16 Kết quảphân tích chất TC,OTC CTC mẫu chuẩn so sánh 51 Bảng 3.17 Áp suất bơm diện tích peak so sánh lần bơm lần bơm thứ 1000 53 Bảng 3.18 Tính độ khơng đảm bảo đo 54 Bảng 3.19 Kết phân tích mẫu thủy sản 57 Bảng 3.20 Kết phân tích mẫu thịt 60 Bảng 3.20 Kết phân tích mẫu thịt STT Kí hiệu Loại Địa điểm lấy Thời Hoạt Hàm Giới hạn mẫu mẫu chất lƣợng phát (µg/kg) MDL gian mẫu lấy mẫu (µg/kg) TC TH1 TH2 TH3 TH4 TH5 Thịt lợn Thịt lợn Thịt gà Thịt gà Thịt vịt 24,27 Chợ Hạ Long 9/2017 OTC 25,25 CTC 11,22 TC 14,25 Chợ Hạ Long 9/2017 OTC 21,77 CTC 22,98 TC 24,91 Chợ Hạ Long 9/2017 OTC 26,88 CTC 28,99 TC 29,99 Chợ Hạ Long 9/2017 OTC 32,89 CTC 31,87 TC 25,77 OTC 28,72 Chợ Hạ Long 9/2017 60 STT Kí hiệu Loại Địa điểm lấy Thời Hoạt Hàm Giới hạn mẫu mẫu chất lƣợng phát (µg/kg) MDL gian mẫu lấy mẫu (µg/kg) CTC 6 10 11 TH6 TH6 TH7 TH8 TH9 TH10 TH11 Thịt vịt Thịt vịt Thịt lợn Thịt lợn Thịt lợn Thịt bò Thịt trâu Chợ Hạ Long 9/2017 TC Chợ Hạ Long 9/2017 26,88 22,67 OTC 25,45 CTC 27,67 TC 31,24 Chợ Hạ Long 9/2017 OTC 30,56 CTC 32,67 TC 31,76 Chợ Hạ Long 9/2017 OTC 33,87 CTC 30,76 TC 29,02 Chợ Hạ Long 9/2017 OTC KPH CTC KPH TC KPH Chợ Hạ Long 9/2017 OTC KPH CTC KPH Chợ Hạ Long 9/2017 TC 61 KPH 1,6 STT Kí hiệu Loại Địa điểm lấy Thời Hoạt Hàm Giới hạn mẫu mẫu chất lƣợng phát (µg/kg) MDL gian mẫu lấy mẫu (µg/kg) OTC KPH CTC KPH 12 TH12 Thịt bê Chợ Hạ Long 9/2017 TC 12 TH12 Thịt bò Chợ Hạ Long 9/2017 13 14 15 16 TH13 TH14 TH15 TH16 Thịt lợn Thịt gà Thịt gà Thịt lợn KPH OTC KPH CTC KPH TC KPH Chợ Hạ Long 9/2017 OTC KPH CTC KPH TC KPH Chợ Hạ Long 9/2017 OTC KPH CTC KPH TC KPH OTC 7,8 CTC 7,6 TC 6,6 Chợ Hạ Long 9/2017 Chợ Hạ Long 9/2017 OTC 6,9 CTC 6,3 1,6 Nhận xét: Qua kết phân tích nhận thấy, mẫu thủy sản thịt tồn dƣ kháng sinh, theo thơng tƣ 24/2013/TT-BYT giới hạn tồn dƣ cho phép mẫu thịt thủy sản 200 µg/kg, số mẫu khơng phát thấy tồn dƣ 62 kháng sinh nhóm tetracycline Qua kết nhận thấy chất lƣợng thủy sản thịt xét dƣ lƣợng kháng sinh ngƣời ni trồng có ý thức chấp hành qui định thời gian đào thải trƣớc đƣa thị trƣờng KẾT LUẬN Trên sở kết thực nghiệm nghiên cứu để xác định dƣ lƣợng kháng sinh nhóm tetracycline mẫu thực phẩm phƣơng pháp sắc ký lỏng khối phổ, thu đƣợc kết sau: Nghiên cứu tối ƣu hóa đƣợc điều kiện chạy sắc ký lỏng khối phổ bao gồm: trƣơng trình gradient thành phần pha động từ 0,5 đến 3,5 phút tỉ lệ kênh B 10%, từ 3,5 –đến 6,5 phút tỉ lệ kênh B 80%, từ 6,5 đến 13 phút tỉ lệ kênh B 10%, bắn phá bát cực Q2 (CE) TC, OTC, CTC lần lƣợt với mảnh m/z = 410, 427, 426, 443, 444,462 -19, -16, -20, -14, -29 -11 (V) Nghiên cứu đánh giá đƣợc khoảng tuyến tính (5-200 µg/kg), giới hạn phát thiết bị 0,4 ppb, giới hạn phát phƣơng pháp 1,6 µg/kg giới hạn định lƣợng phƣơng pháp µg/kg, độ khồng đảm bảo đo với lần lƣợt chất tetracycline, oxytetracycline, chlortetracycline 11.32%, 7,91%, 10,11% Nghiên cứu đƣa điều kiện tối ƣu để chiết tách làm hợp chất tetracycline mẫu thực phẩm, lựa chọn dung môi chiết đệm MacILvaine –EDTA (pH= ± 0,05) sử dụng cột C18 để làm mẫu Đƣa quy trình phân tích xác định đồng thời dƣ lƣợng kháng sinh tetracycline, oxytetracycline, chlotetracycline phƣơng pháp sắc ký lỏng khối phổ Tiến hành phân tích 16 mẫu thịt 16 mẫu thủy sản địa bàn thành phố Hạ Long, cho kết phù hợp với qui định dƣ lƣợng kháng sinh theo thông tƣ 24/2013/BYT 63 Từ kết thu đƣợc nhận thấy áp dụng phân tích dƣ lƣợng kháng sinh nhóm tetracycline thực phẩm labo phòng thí nghiệm trung tâm Y tế dự phòng Quảng Ninh Đây phƣơng pháp có nhiều ƣu điểm kĩ thuật xác để sử dụng kết phân tích kiểm tra, quản lý nhà nƣớc vệ sinh an toàn thực phẩm Kiến nghị: Do thời gian gấp rút, phƣơng pháp nghiên cứu tồn số vấn đề nhƣ chƣa nghiên cứu mẫu nội tạng nơi tồn dƣ nhiều dƣ lƣợng kháng sinh Vì thời gian tới đề tài tiếp tục hoàn thiện vấn đề tiến hành nghiên cứu xây dựng phƣơng pháp xác định dƣ lƣợng nhóm kháng sinh khác nhƣ penicinyl, sulphanilamide, nhóm flocacin… 64 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT AGL 03/2016/ Tài liệu bổ sung cho phòng thử nghiệm lĩnh vực hóa 2.Dƣợc điển.net (2017), Tổng quan sản xuất kháng sinh nhóm tetracycline Dược điển Việt Nam (2013) 4.Nguyễn Văn Ri (2011), Giáo trình Các phương pháp tách, Trƣờng ĐH Khoa học Tự nhiên – ĐH Quốc Gia Hà Nội Trần Cao Sơn (2010), Thẩm định phương pháp phân tích hóa học vi sinh, nhà xuất khoa học kĩ thuật, Hà Nội Tạ Thị Thảo (2009), Giáo trình giảng dạy thống kê hóa phân tích, Trƣờng ĐH khoa học Tự nhiên- ĐH Quốc gia Hà Nội Tiêu chuẩn ISO /IEC 17025: 2005 – Hệ thống quản lý chất lƣợng phòng thử nghiệm/hiệu chuẩn TCVN 5276:990 – Thủy sản Lấy mẫu chuẩn bị mẫu TCVN 4833-1:2002 – Thịt sản phẩm từ thịt Lấy mẫu chuẩn bị mẫu thử Phần 1: lấy mẫu 10 TCVN 8349:2010 - Xác định Tetracycline thủy sản- Phƣơng pháp sắc ký khí lỏng 11.TCVN 8544: 2010 - Xác định Tetracycline thức ăn chăn nuôi- Phƣơng pháp sắc ký khí lỏng 12.TCVN 8743: 2011: Xác định Tetracycline thịt - Phƣơng pháp sắc ký lỏng 13.Thông tƣ 14/2011/TT-BYT Hƣớng dẫn chung lấy mẫu thực phẩm phục vụ kiểm tra nhà nƣớc an tồn vệ sinh thực phẩm 14 Thơng tƣ 24/2013/TT-BYT qui định mức tối đa dƣ lƣợng thuốc tú y thực phẩm 65 15 Thông tƣ 06/2016/TT-BNNPTNT ban hành danh mục, hàm lƣợng kháng sinh đƣợc phép sử dụng thức ăn chăn nuôi gia súc gia cầm với mục đích kích thích sinh trƣởng Việt Nam 16.Thơng tƣ 10/2016/TT-BNNPTNT qui định danh mục thuốc thú y đƣợc phép lƣu hành, cấm sử dụng Việt Nam bố mã hồ sơ thuốc thú Y nhập đƣợc phép lƣu hành Việt Nam 17.Văn phòng cơng nhận chất lƣợng BOA(2008) Hƣớng dẫn tính tốn độ khơng đảm bảo đo TÀI LIỆU TIẾNG ANH 18 AOAC Official Method 995.04,( 2012), “Multiple Tetracycline Residues in Milk Metal Chelate Affinity-Liquid Chromatographic Method”,AOAC international, (79)389 19 AOAC Official Method 995.09, (2012), “Chlotetracycline, oxytetracycline and tetracycline in Endible animal tissues liquid chromatographic method” AOAC international,(79)405 20.Comission Decission 2002/657/EC (2002), performance of analytical methods and the interpretation of results, Eur Union, (221),8–36 21.De Almeida, Marcos Pego et al 2015 “Optimization and Validation Method to Evaluate the Residues of β-Lactams and Tetracyclines in Kidney Tissue by UPLCMS/MS.” Talanta 144: 922–32 http://dx.doi.org/10.1016/j.talanta.2015.07.048 22.Andersen, Wendy C et al 2005 “Determination of Tetracycline Residues in Shrimp and Whole Milk Using Liquid Chromatography with Ultraviolet Detection and Residue Confirmation by Mass Spectrometry.” Analytica Chimica Acta 529(1– SPEC ISS.): 145–50 23 Anderson, Collin R., Heidi S Rupp, and Wen Hsin Wu 2005 “Complexities in Tetracycline Analysis - Chemistry, Matrix Extraction, Cleanup, and Liquid Chromatography.” Journal of Chromatography A 1075(1–2): 23–32 24.Blanchflower, W John, Robert J McCracken, Audrey S Haggan, and D Glenn Kennedy 1997 “Confirmatory Assay for the Determination of Tetracycline, 66 Oxytetracycline, Chlortetracycline and Its Isomers in Muscle and Kidney Using Liquid Chromatography-Mass Spectrometry.” Journal of Chromatography B: Biomedical Applications 692(2): 351–60 25.Blasco, Cristina, Antonio Di Corcia, and Yolanda Picó 2009 “Determination of Tetracyclines in Multi-Specie Animal Tissues by Pressurized Liquid Extraction and Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry.” Food Chemistry 116(4) 26.Bohm, D A., C S Stachel, and P Gowik 2009 “Multi-Method for the Determination of Antibiotics of Different Substance Groups in Milk and Validation in Accordance with Commission Decision 2002/657/EC.” Journal of Chromatography A 1216(46): 8217–23 27.Bolzern, Paolo, Patrizio Colaneri, and Giuseppe De Nicolao 2010 “Markov Jump Linear Systems with Switching Transition Rates: Mean Square Stability with Dwell-Time.” Automatica 46(6): 1081–88 28.Cháfer-Pericás, Consuelo et al 2010 “Immunochemical Determination of Oxytetracycline in Fish: Comparison between Enzymatic and Time-Resolved Fluorometric Assays.” Analytica Chimica Acta 662(2): 177–85 29 Chen, Ligang et al 2009 “Preparation of Magnetic Molecularly Imprinted Polymer for the Separation of Tetracycline Antibiotics from Egg and Tissue Samples.” Journal of Chromatography A 1216(18): 3710–19 30 Chen, Yong et al 2011 “Photoproducts of Tetracycline and Oxytetracycline Involving Self-Sensitized Oxidation in Aqueous Solutions: Effects of Ca2+and Mg2+.” Journal of Environmental Sciences 23(10): 1634–39 31 Cherlet, Marc, Mario Schelkens, Siska Croubels, and Patrick De Backer 2003 “Quantitative Multi-Residue Analysis of Tetracyclines and Their 4-Epimers in Pig Tissues by High-Performance Liquid Chromatography Combined with Positive-Ion Electrospray Ionization Mass Spectrometry.” Analytica Chimica Acta 492(1–2): 199–213 67 32 Deng, Biyang et al 2012 “Pharmacokinetics and Residues of Tetracycline in Crucian Carp Muscle Using Capillary Electrophoresis on-Line Coupled with Electrochemiluminescence Detection.” Food Chemistry 134(4): 2350–54 33.Elisa, Tetracyclines, and Microtiter Plate “Tetracyclines ELISA, Microtiter Plate.” (215) 34 Goto, Tomomi et al 2005 “High-Throughput Analysis of Tetracycline and Penicillin Antibiotics in Animal Tissues Using Electrospray Tandem Mass Spectrometry with Selected Reaction Monitoring Transition.” Journal of Chromatography A 1100(2): 193–99 35 Huq, Shahana, Michael Garriques, and Krishna M R Kallury 2006 “Role of Zwitterionic Structures in the Solid-Phase Extraction Based Method Development for Clean up of Tetracycline and Oxytetracycline from Honey.” Journal of Chromatography A 1135(1): 12–18 36 Ibarra, Israel S et al 2011 “Magnetic Solid Phase Extraction Based on Phenyl Silica Adsorbent for the Determination of Tetracyclines in Milk Samples by Capillary Electrophoresis.” Journal of Chromatography A 1218(16): 2196–2202 37 Jackson, Phil, and Moetaz I Attalla 2010 “N-Nitrosopiperazines Form at High pH in Post-Combustion Capture Solutions Containing Piperazine: A Low-Energy Collisional Behaviour Study.” Rapid communications in mass spectrometry : RCM 24(24): 3567–77 38 Journal, An Indian 2011 “An Indian Journal.” Biochemistry 5(2) 39 Karageorgou, Eftichia, Marina Armeni, Ioulia Moschou, and Victoria Samanidou 2014 “Ultrasound-Assisted Dispersive Extraction for the High Pressure Liquid Chromatographic Determination of Tetracyclines Residues in Milk with Diode Array Detection.” Food Chemistry 150: 328–34 40 Kit, Tetracyclines Elisa 1801 “Tetracyclines ELISA Kit.” (408): 4273–74 41 Kowalski, P 2008 “Capillary Electrophoretic Method for the Simultaneous Determination of Tetracycline Residues in Fish Pharmaceutical and Biomedical Analysis 47(3): 487–93 68 Samples.” Journal of 42 Lian, Lili, Jinyi Lv, Xiyue Wang, and Dawei Lou 2017 “Magnetic Solid-Phase Extraction of Tetracyclines Using Ferrous Oxide Coated Magnetic Silica Microspheres from Water Samples.” Journal of chromatography A 43 Lillenberg, Merike et al 2009 “Simultaneous Determination of Fluoroquinolones, Sulfonamides and Tetracyclines in Sewage Sludge by Pressurized Liquid Extraction and Liquid Chromatography Electrospray IonizationMass Spectrometry.” Journal of Chromatography A 1216(32): 5949–54 44 Liu, Yu et al 2013 “High-Performance Liquid Chromatography Using Pressurized Liquid Extraction for the Determination of Seven Tetracyclines in Egg, Fish and Shrimp.” Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences 917–918: 11–17 45 L P Garrod' and Pamela M.Waterworth.(1971), '' A study of antibiotic sensitivity testing with proposals for simple uniform methods'', The Department of Bacteriology Royal Postgraduate Medical School London,(24), 779-789 46 Luo, Yeli et al 2015 “A Novel Colorimetric Aptasensor Using CysteamineStabilized Gold Nanoparticles as Probe for Rapid and Specific Detection of Tetracycline in Raw Milk.” Food Control 54: 7–15 43 Mookantsa, S O S, S Dube, and M M Nindi 2016 “Development and Application of a Dispersive Liquid-Liquid Microextraction Method for the Determination of Tetracyclines in Beef by Liquid Chromatography Mass Spectrometry.” Talanta 148: 321–28 47 Moreno-González, David, and Ana M García-Campa 2017 221 Food Chemistry Salting-out Assisted Liquid–liquid Extraction Coupled to Ultra-High Performance Liquid Chromatography–tandem Mass Spectrometry for the Determination of Tetracycline Residues in Infant Foods 48 Oka, Hisao, Yuko Ito, and Hiroshi Matsumoto 2000 “Chromatographic Analysis of Tetracycline Antibiotics in Foods.” Journal of Chromatography A 882(1–2): 109–33 49 Pena, Angelina, Celeste M Lino, Rosa Alonso, and Damia Barcelo 2007 “Determination of Tetracycline Antibiotic Residues in Edible Swine Tissues by 69 Liquid Chromatography with Spectrofluorometric Detection and Confirmation by Mass Spectrometry.” Journal of Agricultural and Food Chemistry 55(13): 4973–79 50 Peres, Gustavo Tayar, Susanne Rath, and F G R Reyes 2010 “A HPLC with Fluorescence Detection Method for the Determination of Tetracyclines Residues and Evaluation of Their Stability in Honey.” Food Control 21(5): 620–25 51 Qiao, Min et al 2012 “Fate of Tetracyclines in Swine Manure of Three Selected Swine Farms in China.” Journal of Environmental Sciences (China) 24(6): 1047–52 52 Šala, Martin et al 2015 “Rapid Identification of Atypical Tetracyclines Using Tandem Mass Spectrometric Fragmentation Patterns.” Rapid Communications in Mass Spectrometry 29(17): 1556–62 53 Sánchez-Polo, M., I Velo-Gala, Jesús J López-Palver, and J Rivera-Utrilla 2015 “Molecular Imprinted Polymer to Remove Tetracycline from Aqueous Solutions.” Microporous and Mesoporous Materials 203(C): 32–40 54 Schneider, Marilyn J., Susan E Braden, Ixchel Reyes-Herrera, and Dan J Donoghue 2007 “Simultaneous Determination of Fluoroquinolones and Tetracyclines in Chicken Muscle Using HPLC with Fluorescence Detection.” Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences 846(1–2): 8–13 55 Shalaby, A R et al 2011 “Validation of HPLC Method for Determination of Tetracycline Residues in Chicken Meat and Liver.” Food Chemistry 124(4): 1660– 66 56 “Simultaneous Determination of Tetracycline Antibiotics in Beehives by Liquid Chromatography – Triple Quadrupole Mass Spectrometry.” 2012 3(1): 462–68 57 Solliec, Morgan, Audrey Roy-Lachapelle, and Sébastien Sauvé 2015 “Quantitative Performance of Liquid Chromatography Coupled to Q-Exactive High Resolution Mass Spectrometry (HRMS) for the Analysis of Tetracyclines in a Complex Matrix.” Analytica Chimica Acta 853(1): 415–24 70 58 Spielmeyer, Astrid, Bettina Breier, Kathrin Groißmeier, and Gerd Hamscher 2015 “Elimination Patterns of Worldwide Used Sulfonamides and Tetracyclines during Anaerobic Fermentation.” Bioresource Technology 193: 307–14 59 Spisso, Bernardete Ferraz et al 2009 “A Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry Confirmatory Assay for the Simultaneous Determination of Several Tetracyclines in Milk Considering Keto-Enol Tautomerism and Epimerization Phenomena.” Analytica Chimica Acta 656(1–2): 72–84 60 Tet, Tetracycline, and Elisa Kit “Tetracycline (TET) ELISA Kit.” : 1–12 61 Tölgyesi, Ádám et al 2014 “Determination of Tetracyclines in Pig and Other Meat Samples Using Liquid Chromatography Coupled with Diode Array and Tandem Mass Spectrometric Detectors.” Meat Science 96(3): 1332–39 62 Vargas Mamani, Mónica Cecilia, Felix Guillermo Reyes Reyes, and Susanne Rath 2009 “Multiresidue Determination of Tetracyclines, Sulphonamides and Chloramphenicol in Bovine Milk Using HPLC-DAD.” Food Chemistry 117(3): 545–52 63 Wang, Sai et al 2014 “Development of an Indirect Competitive Assay-Based Aptasensor for Highly Sensitive Detection of Tetracycline Residue in Honey.” Biosensors and Bioelectronics 57: 192–98 64 WHO (1999), “ Evaluation of Certain Veterinary Drug Residues in Food”,WHO Technical Report Series, 15, 100-988 65 Xu, Hui et al 2017 “Residue Analysis of Tetracyclines in Milk by HPLC Coupled with Hollow Fiber Membranes-Based Dynamic Liquid-Liquid MicroExtraction.” Food Chemistry 232: 198–202 66 Xu, Jin Zhong et al 2008 “Analysis of Tetracycline Residues in Royal Jelly by Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry.” Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences 868(1–2): 42–48 67 Yu, Hong Yan et al 2009 “Protective Effect of Bicyclol on TetracyclineInduced Fatty Liver in Mice.” Toxicology 261(3): 112–18 71 68 Yu, Huan et al 2011 “Development of an HPLC-UV Method for the Simultaneous Determination of Tetracyclines in Muscle and Liver of Porcine, Chicken and Bovine with Accelerated Solvent Extraction.” Food Chemistry 124(3): 1131–38 69 Yue, Zhenfeng, Yueming Qiu, Xiuyun Liu, and Caini Ji 2006 “Determination of Multi-Residues of Tetracyclines and Their Metabolites in Milk by High Performance Liquid Chromatography-Tandem Positive-Ion Electrospray Ionization Mass Spectrometry.” Chinese Journal of Analytical Chemistry 34(9): 1255–59 70 Zheng, Wen li et al 2012 “Determination of Tetracyclines and Their Epimers in Agricultural Soil Fertilized with Swine Manure by Ultra-High-Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry.” Journal of Integrative Agriculture 11(7): 1189–98 71 Zurhelle, Georg, Erika Müller-Seitz, and Michael Petz 2000 “Automated Residue Analysis of Tetracyclines and Their Metabolites in Whole Egg, Egg White, Egg Yolk and Hen’s Plasma Utilizing a Modified ASTED System.” Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications 739(1): 191–203 72.Zusshi, ,Phyllis RBrown, BurnabyMunson, 2010 “Mass spectral characterization of tetracyclines by electrospray ionization, H/D exchange, and multiple stage mass spectrometry” Analytica Chimica Acta 10(1): (100 – 137) 72 PHỤ LỤC 73 Phụ lục F - AOAC 2016/qui định giới hạn độ lặp lại thu hồi theo nồng độ 74 ... Thị Phƣợng NGHIÊN CỨU PHÁT TRIỂN PHƢƠNG PHÁP LC- MS/ MS PHÂN TÍCH CHLOTETRACYCLINE, OXYTETRACYCLINE VÀ TETRACYCLINE TRONG THỰC PHẨM TRÊN ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ HẠ LONG Chun ngành: Hóa phân tích Mã số:... LCMS /MS phân tích chlortetracycline, oxytetracycline tetracycline thực phẩm địa bàn thành phố Hạ Long với mục tiêu :xây dựng phƣơng pháp xác định hàm lƣợng chlotetracycline, oxytetracycline tetracycline. .. chế phẩm bổ sung vào thức ăn chăn nuôi Tại Việt Nam sử dụng phổ biến loại kháng sinh Tetracycline, Oxytetracycline Chlortetracycline Do vậy, thực đề tài nghiên cứu phát triển phương pháp LCMS/MS