BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG PHỤ PHẨM NÔNG NGHIỆP TRỒNG NẤM LINH CHI Ganoderma lucidum Ngành học : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực : PHAN HỮU TÍN Niên khóa : 2007 – 2011 Tháng 7/2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU SỬ SỤNG PHỤ PHẨM NÔNG NGHIỆP TRỒNG NẤM LINH CHI Ganoderma lucidum Hướng dẫn khoa học Sinh viên thực KS NGUYỄN MINH QUANG PHAN HỮU TÍN ThS VÕ THỊ THÚY HUỆ Tháng 7/2011 LỜI CẢM ƠN Trong suốt bốn năm đại học dài đằng đẳng học tập, nghiên cứu, rèn luyện… niềm vui nỗi buồn để cuối kết tinh vào luận văn này, xin cảm ơn: Ban giám hiệu trường Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh tạo điều kiện sở vật chất cho học tập nghiên cứu Các thầy cô môn Công Nghệ Sinh Học thầy cô trực tiếp giảng dạy ln tận tình truyền đạt kiến thức q báu giúp em có vốn tri thức vững để vào đời Chân thành gửi lời cảm ơn sâu sắc đến thầy Nguyễn Minh Quang, cô Võ Thị Thúy Huệ, cô Trương Phước Thiên Hồng tận tình giúp đỡ, dạy em hồn thành khóa luận Cảm ơn chị Trương Thị Ngọc Hân, chị Nguyễn Trường Ngọc Tú, chị Trần Thị Quỳnh Diệp giúp đỡ trình làm thí nghiệm vi sinh Cảm ơn em lớp DH08SH trại nấm Nola xây dựng phát triển trại nấm có ngày Cảm ơn bạn Nguyễn Thị Cẩm Tú đồng hành tơi suốt q trình thực đề tài tốt nghiệp Cảm ơn bạn lớp DH07SH, đặc biệt ban cán lớp, vượt qua bao khó khăn, chia sẻ bao niềm vui nỗi buồn suốt bốn năm đại học Cuối cùng, với tất lòng biết ơn xin dành cho cha mẹ sinh thành, dưỡng dục, nuôi dạy thành người Tp HCM, ngày 11 tháng 07 năm 2011 Phan Hữu Tín TĨM TẮT Nấm linh chi loại thảo dược quý thiên nhiên hào phóng ban tặng cho lồi người Qua hàng trăm năm nghiên cứu thử nghiệm, nấm linh chi ngày chứng tỏ khả phòng hỗ trợ điều trị bệnh như: tim mạch, cao huyết áp, giảm cholesterol, ung thư, tiểu đường… Do đó, nhu cầu sử dụng nấm linh chi cao Mặt khác, nước ta lại có nhiều loại chất thích hợp cho nấm linh chi sinh trưởng phát triển Những chất thường phụ phẩm nơng nghiệp Nếu tận dụng triệt để tạo khối lượng sản phẩm nấm linh chi lớn Góp phần cải thiện thu nhập cho người nông dân giảm tác hại ô nghiễm môi trường nhằm hướng tới nên nông nghiệp bền vững Nghiên cứu tiến hành nấm linh chi chuẩn Ganoderma lucidum Bước đầu khảo sát hoạt tính enzyme amylase, cellulase nấm linh chi Sau đó, chọn lọc mơi trường nhân giống cấp 1: PGA, PGAY, MGA, MGAY thích hợp cho nấm linh chi Đồng thời thử nghiệm bổ sung chế phẩm sinh học có chứa xạ khuẩn Streptomyces giúp phân giải nhanh loại chất: mạt cưa cao su, mụn dừa, rơm rạ Khảo sát suất dược tính nấm linh chi trồng loại chất Kết cho thấy trồng nấm linh chi phụ phẩm nông nghiệp Đánh giá khả sinh trưởng phát triển nấm linh chi loại chất khác Xử lý nhanh loại chất chế phẩm sinh học giúp giảm thời gian ủ nguyên liệu tăng suất Đánh giá số dược tính quý nấm linh chi SUMMARY Thesis title “Research used to planting Ganoderma lucidum on agricultural by- products” Ganoderma is a valuable medicinal herb which nature gave us Over hundred years of research and testing, Ganoderma show the abilities in prevention and treatment some diseases like: heart disease, high blood pressure, reducing cholesterol, cancer, diabetes Therefore, the demand for Ganoderma is very high On the other hand, our country has a variety of substrates which suitable for Ganoderma’s growth and development These substrates are usually agricultural by- products If they are fully utilized, they will create a great volume of Ganoderma products, from that, improving farmers’ incomes and reducing environmental harms for a sustainable agriculture This study was carried out on Ganoderma lucidum It is the initial surveys for the activity of amylase and cellulase enzymes of Ganoderma Then, we select the mother spawn: PGA, PGAY, MGA, MGAY which suitable for Ganoderma We also did some experiments of supplying some biological products containing Streptomyces actinobacteria to resolved quickly some substrates: rubber sawdust, coconut sawdust, straw; make a survey on productivity and pharmaceutical value of Ganoderma grown on these substrates Results agricultural by-products can be used for planting Ganoderma lucidum Assess the growth and development of Ganoderma on different kinds of substances Dispose of the substrate was quick by probiotics to help reducing the incubation time and increasing productivity Besides, we evaluated some precious medicinal properties of Ganoderma MỤC LỤC Nội dung Trang Lời cảm ơn i Tóm tắt ii Summary iii Mục lục iv Danh sách chữ viết tắt vii Danh sách bảng viii Danh sách hình ix Chương Mở đầu Chương Tổng quan tài liệu 2.1 Nấm 2.1.1 Khái quát nấm 2.1.2 Hình thái học sợi nấm 2.1.3 Hình thái học thể nấm 2.1.4 Sinh trưởng biến dưỡng nấm 2.2 Nấm linh chi Ganoderma lucidum 2.2.1 Phân loại 2.2.2 Đặc điểm hình thái 2.2.3 Đặc điểm sinh thái 10 2.2.4 Tình hình nghiên cứu nước ngồi nước 10 2.2.5 Thành phần dược tính nấm linh chi 11 2.3 Khái quát xạ khuẩn 15 Chương Vật liệu phương pháp nghiên cứu 17 3.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 17 3.2 Vật liệu 17 3.2.1 Đối tượng nghiên cứu 17 3.2.2 Nguyên liệu 17 3.2.3 Hóa chất 17 3.2.4 Thiết bị 17 3.3 Phương pháp nghiên cứu 18 3.3.1 Xác định hoạt tính enzyme cellulase amylase nấm linh chi 18 3.3.2 Khảo sát môi trường nhân giống cấp I 21 3.3.3 Tuyển chọn dòng xạ khuẩn 22 3.3.4 Khảo sát khả phân giải cellulose xạ khuẩn bổ sung vào trình ủ chất 22 3.3.5 Khảo sát tốc độ lan tơ nấm linh chi chất thí nghiệm 24 3.3.6 Khảo sát suất thu hoạch nấm linh chi 24 3.3.7 Khảo sát dược tính nấm linh chi chất thí nghiệm 25 3.4 Phương pháp xử lý số liệu 38 Chương Kết thảo luận 29 4.1 Xác định hoạt tính enzyme cellulase amylase nấm linh chi 34 4.2 Khảo sát môi trường nhân giống cấp I 34 4.3 Tuyển chọn dòng xạ khuẩn 31 4.4 Khảo sát khả phân giải cellulose xạ khuẩn bổ sung vào trình ủ chất 31 4.5 Khảo sát tốc độ lan tơ nấm linh chi chất thí nghiệm 33 4.6 Khảo sát suất thu hoạch nấm linh chi 34 4.7 Khảo sát dược tính nấm linh chi chất thí nghiệm 35 Chương Kết luận đề nghị 41 5.1 Kết luận 41 5.2 Đề nghị 42 Tài liệu tham khảo 43 DANH SÁCH CHỮ VIẾT TẮT GL Ganoderma lucidum CMC Carboxyl Methyl Cellulase PGA Potato Glucose Agar PGAY Potato Glucose Agar Yeast MGA Malt Glucose Agar MGAY Malt Glucose Agar Yeast DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 2.1 Nồng độ số dạng muối khoáng cần cho nấm trồng Bảng 2.2 Các yếu tố vật lý ảnh hưởng đến nấm linh chi Bảng 2.3 Các hoạt chất triterpenoid có tác dụng chữa bệnh nấm linh chi 14 Bảng 3.1 Xây dựng đường chuẩn glucose 18 Bảng 3.2 Thực phản ứng cellulase 19 Bảng 3.3 Phương pháp dựng đường chuẩn tinh bột 20 Bảng 4.1 Đường kính vòng phân giải cellulose tinh bột 31 Bảng 4.2 Mơ tả hình thái hệ tơ giai đoạn ủ loại chất 33 Bảng 4.3 Đường kính độ dày thể thí nghiệm 34 Bảng 4.4 Trọng lượng thể hiệu suất sinh học nấm linh chi 35 Bảng 4.5 Định tính alkaloid 35 Bảng 4.6 Thử nghiệm tính tạo bọt saponin 36 Bảng 4.7 So sánh độ cao cột bong bóng thử nghiệm Fontan – Kaudel 37 Bảng 4.8 Định tính triterpenoid 37 Bảng 4.9 Định lượng polysaccharide 38 Bảng 4.10 Định tính acid hữu 39 DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 3.1 Phương pháp định lượng cellulose 23 Hình 3.2 Phương pháp định lượng Polysaccharide 27 Hình 4.1 Hoạt độ enzyme cellulase amylase nấm linh chi 29 Hình 4.2 Tốc độ lan tơ nấm linh chi loại mơi trường nhân giống 30 Hình 4.3 Hàm lượng cellulose bị phân giải trình ủ nguyên liệu 32 Hình 4.4 Sự lan tơ nấm Linh Chi 33 Hình 4.5 Tốc độ lan tơ mơi trường thí nghiệm 34 Hình 4.6 Định tính alkaloid với thuốc thử Mayer 35 Hình 4.7 Thử nghiệm hợp chất saponin 36 Hình 4.8 Thử nghiệm Fontan - Kaudel 37 Hình 4.9 Định tính triterpenoid 38 Hình 4.10 Định tính acid hữu 39 10 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Lâm Thị Kim Châu Nguyễn Như Nhứt 2008 Phương pháp kiểm tra số enzyme dùng chăn nuôi Đại học Khoa Học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia TP.HCM Nguyễn Lân Dũng 2001 Công nghệ nuôi trồng nấm, tập Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Nguyễn Hữu Đống 2003 Nuôi trồng chế biến nấm ăn nấm làm thuốc chữa bệnh Nhà xuất Hà Nội Trương Thị Ngọc Hân 2009 Nghiên cứu sinh tổng hợp enzyme cellulase pectinase từ chủng Trichoderma sp Và ứng dụng để xử lý vỏ cà phê sản xuất phân hữu vi sinh Nguyễn Minh Khang 2005 Khảo sát sinh trưởng nấm Linh Chi đen (Auauroderma subresinosum, Corner) phát vùng núi Chứa Chan – Việt Nam Khóa luận tốt nghiệp Kỹ sư Cơng nghệ Sinh học, Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh Trần Văn Mão 2004 Nuôi trồng chế biến nấm ăn nấm làm thuốc chữa bệnh Nhà xuất Nông Nghiệp, Hà Nội Lê Xuân Thám 1996 Nghiên cứu đặc điểm sinh học đặc điểm hấp thu khoáng nấm Linh Chi Ganodrema lucidum (Leyss ex Fr) Karst Luận án phó tiến sỹ khoa học sinh học, Đại học Khoa Học Tự Nhiên, Đại Học Quốc Gia Hà Nội Lê Duy Thắng, 2001 Kỹ thuật nuôi trồng nấm ăn, tập Nhà xuất Nông nghiệp Nguyễn Thị Thủy 2009 Nghiên cứu sản xuất đánh giá hiệu chế phẩm enzyme amylase, cellulase đến khả sinh trưởng suất thịt gà Lương Phượng Khóa luận tốt nghiệp Kỹ sư Cơng nghệ Sinh học, Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh 56 10 Huỳnh Thư 2009 Phân lập, định danh khảo sát khả sinh tổng hợp số enzyme thủy phân, kháng khuẩn, kháng nấm Streptromyces sp Khóa luận tốt nghiệp Kỹ sư Công nghệ Sinh học, Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh 11 Cổ Đức Trọng 2009 Sưu tầm trồng trọt nấm Linh Chi vàng (Ganoderma colossum) thành phố Hồ Chí Minh Trong: Tuyển tập hội nghị cơng nghệ sinh học tồn quốc khu vực phía nam 2009, Sở Khoa học Cơng nghệ TP.HCM, trung tâm Công Nghệ Sinh Học TP.HCM, trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên, Đại Học Quốc Gia TP.HCM pp 182 – 186 TIẾNG NƯỚC NGOÀI Ian K Ross, 1979.Biology of the Fungi United of America Peter Oei, 1991 Manual on Mushroom Cultivation.TOOL Foundation, Amsterdam R Russell M Paterson, 2006 Ganoderma – A therapeutic fungal biofactory Micoteca da Universidade Minho, Centro de Engenharia Biologica, Campus de Gualtar, 4710 – 057 Braga, Portugal 57 PHỤ LỤC Phụ lục A B C D E F G H K Hình Giải phẫu hình thái giai đoạn phát triển nấm GL A:hệ sợi chụp vật kính 40X; B:bào tử chụp vật kính 100X; C:mặt thể; D:mặt thể; E:lát cắt ngang thể; F: nấm dạng nụ; G:nấm dạng cọng; H: nấm dạng tán; K: nấm trưởng thành 58 A B C D Hình Mơi trường nhân giống cấp I sau ngày A: môi trường PGA, B: môi trường PGAY, C: môi trường MGA, D: môi trường MGAY 59 B A B Hình Nấm Linh Chi trồng loại môi trường A: mạt cưa, B: mụn dừa, C: rơm 60 C Phụ lục Bảng Tương quan tuyến tính nồng độ tinh bột ∆OD Nồng độ tinh bột ODtb ,017 ∆OD 0, 066 ,106 0, ,152 049 0, 200 ,089 ,135 10 ,251 0, 183 ,234 y = 0,023x R = 0,9988 0,25 0,2 ∆OD 0,15 0,1 0,05 0 Nồng độ tinh bột (mg/ml) 61 10 12 Bảng Tương quan tuyến tính nồng độ glucose ∆OD Nồng độ glucose 100 200 300 400 (µg/ml) ODtb 0,071 0,111 0,117 0,187 0,211 ∆OD 0,040 0,070 0,116 0,149 0,25 500 0,265 0,194 y = 0,0004x + 0,0013 R = 0,9986 ∆OD 0,2 0,15 0,1 0,05 0 100 200 300 400 Nồng độ glucose (µg/ml) 62 500 600 Phụ lục Bảng Bảng số liệu xử lý thống kê tốc độ lan tơ môi trường nhân giống cấp I Môi trường Ngày Lặp lại Tốc độ lan tơ (cm/ngày) Trung bình 1,4 1,5 1,5 1,6 5,4 5,27 PGA 5,1 5,3 8,5 8,53 8,6 8,5 1,7 1,63 1,5 1,7 PGAY 5,93 5,8 8,97 8,9 2 1,93 1,9 1,9 4,9 MGA 4,7 4,6 4,6 8,7 8,5 8,6 8,6 1,7 1,77 1,9 1,7 5,5 MGAY 5,47 5,5 5,4 8,5 8,5 8,5 8,5 63 Bảng Bảng ANOVA thí nghiệm khảo sát tốc độ lan tơ môi trường nhân giống cấp I -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -MAIN EFFECTS A:TOCDOL1.m_i_tr ng 1.07333 35778 4.760 0079 B:TOCDOL1.ng_y 289.33167 144.66583 1924.601 0000 RESIDUAL 2.2550000 30 0751667 -TOTAL (CORRECTED) 292.66000 35 Bảng Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm khảo sát tốc độ lan tơ môi trường nhân giống cấp I -Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups -MGA 5.0777778 X PGA 5.1000000 X MGAY 5.2444444 X PGAY 5.5111111 X -contrast difference +/limits PGA - PGAY -0.41111 0.26401 * PGA - MGA 0.02222 0.26401 PGA - MGAY -0.14444 0.26401 PGAY - MGA 0.43333 0.26401 * PGAY - MGAY 0.26667 0.26401 * MGA - MGAY -0.16667 0.26401 -* denotes a statistically significant difference Bảng Bảng trắc nghiệp phân hạng thí nghiệm khảo sát tốc độ lan tơ theo ngày -Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups -2 12 1.7083333 X 12 5.3416667 X 12 8.6500000 X -contrast difference +/limits - -3.63333 0.22864 * - -6.94167 0.22864 * - -3.30833 0.22864 * -* denotes a statistically significant difference 64 Bảng Bảng số liệu xử lý thống kê thí nghiệm đo vịng phân giải cellulose Lặp lại Xạ khuẩn Trung bình XK17 24 26 27 25.67 SPC85 14 15 12 13.67 SVCP18 16 13 18 15.67 XK02 26 25 28 26.33 SPC33 25 21 24 23.33 SPC41 23 21 19 21 Bảng Bảng ANOVA thí nghiệm đo vịng phân giải cellulose Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level Between groups 413.61111 82.722222 22.908 0000 Within groups 43.33333 12 3.611111 Total (corrected) 456.94444 17 Bảng Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm đo vịng phân giải cellulose -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -SPC85 13.666667 X SVCP18 15.666667 X SPC41 21.000000 X SPC33 23.333333 XX XK17 25.666667 X XK02 26.333333 X -contrast difference +/limits XK17 - SPC85 12.0000 3.38148 * XK17 - SVCP18 10.0000 3.38148 * XK17 - XK02 -0.66667 3.38148 XK17 - SPC33 2.33333 3.38148 XK17 - SPC41 4.66667 3.38148 * SPC85 - SVCP18 -2.00000 3.38148 SPC85 - XK02 -12.6667 3.38148 * * denotes a statistically significant difference Bảng 10 Bảng số liệu xử lý thống kê thí nghiệm đo vịng phân giải tinh bột Lặp lại Xạ khuẩn Trung bình XK17 28 31 27 28.67 SPC85 16 12 11 13 SVCP18 18 15 21 18 XK02 29 29 30 29.33 65 SPC33 24 23 21 SPC41 18 22 19 Bảng 11 Bảng ANOVA thí nghiệm đo vịng phân giải tinh bột 22.67 19.67 -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 603.11111 120.62222 26.478 0000 Within groups 54.66667 12 4.55556 -Total (corrected) 657.77778 17 Bảng 12 Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm đo vòng phân giải tinh bột -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -SPC85 13.000000 X SVCP18 18.000000 X SPC41 19.666667 XX SPC33 22.666667 X XK17 28.666667 X XK02 29.333333 X -contrast difference +/limits XK17 - SPC85 15.6667 3.79802 * XK17 - SVCP18 10.6667 3.79802 * XK17 - XK02 -0.66667 3.79802 XK17 - SPC33 6.00000 3.79802 * XK17 - SPC41 9.00000 3.79802 * SPC85 - SVCP18 -5.00000 3.79802 * SPC85 - XK02 -16.3333 3.79802 * * denotes a statistically significant difference Bảng 13 Bảng số liệu thống kê thí nghiệm cân trọng lượng thể tươi Lặp lại Cơ chất Trung bình Mạt cưa 52.59 58.26 52.74 54.53 Mụn dừa 37.05 33.99 38.13 36.39 Rơm 42.96 47.07 41.31 43.78 Bảng 14 Bảng ANOVA thí nghiệm cân trọng lượng thể tươi -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 499.23420 249.61710 31.398 0007 Within groups 47.70120 7.95020 -Total (corrected) 546.93540 66 Bảng 15 Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm cân trọng lượng thể tươi -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -M_dua 36.390000 X Rom 43.780000 X M_cua 54.530000 X -contrast difference +/limits M_cua - M_dua 18.1400 5.63499 * M_cua - Rom 10.7500 5.63499 * M_dua - Rom -7.39000 5.63499 * -* denotes a statistically significant difference Bảng 16 Bảng số liệu thống kê thí nghiệm đo độ dày thể Lặp lại Cơ chất Mạt cưa 1.5 1.2 1.1 Mụn dừa 0.6 0.8 0.9 Rơm 0.5 0.6 0.9 Trung bình 1.27 0.77 0.21 Bảng 17 Bảng ANOVA thí nghiệm đo độ dày thể -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 6200000 3100000 8.455 0180 Within groups 2200000 0366667 -Total (corrected) 8400000 Bảng 18 Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm đo độ dày thể -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -Rom 6666667 X M_dua 7666667 X M_cua 1.2666667 X -contrast difference +/limits M_cua - M_dua 0.50000 0.38268 * M_cua - Rom 0.60000 0.38268 * M_dua - Rom 0.10000 0.38268 -* denotes a statistically significant difference Bảng 19 Bảng số liệu thống kê thí nghiệm đo tốc độ lan tơ bịch phôi nấm linh chi Lặp lại Cơ chất Trung bình Mạt cưa 0.89 0.84 0.72 0.82 Mụn dừa 0.6 0.8 0.9 0.67 Rơm 0.5 0.6 0.9 0.87 67 Bảng 20 Bảng ANOVA thí nghiệm đo tốc độ lan tơ bịch phơi nấm linh chi -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 0377556 0188778 838 4777 Within groups 1352000 0225333 -Total (corrected) 1729556 Bảng 21 Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm đo tốc độ lan tơ bịch phôi -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -Rom 6666667 X M_dua 7666667 X M_cua 8233333 X -contrast difference +/limits M_cua - M_dua 0.05667 0.30000 M_cua - Rom 0.15667 0.30000 M_dua - Rom 0.10000 0.30000 -* denotes a statistically significant difference Bảng 22 Bảng số liệu thống kê thí nghiệm hàm lượng cellulose ban đầu Lặp lại Cơ chất Trung bình Mạt cưa 56.75 57.4 56.64 56.93 Mụn dừa 47.25 48.6 48.2 48.02 Rơm 32.25 31.6 32.5 32.12 Bảng 23 Bảng ANOVA thí nghiệm hàm lượng cellulose ban đầu -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 947.95902 473.97951 1643.163 0000 Within groups 1.73073 28846 -Total (corrected) 949.68976 Bảng 24 Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm hàm lượng cellulose ban đầu -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -Rom_0 32.116667 X M_dua_0 48.016667 X M_cua_0 56.930000 X -contrast difference +/limits M_cua_0 - M_dua_0 8.91333 1.07336 * M_cua_0 - Rom_0 24.8133 1.07336 * M_dua_0 - Rom_0 15.9000 1.07336 * -* denotes a statistically significant difference 68 Bảng 25 Bảng số liệu thống kê thí nghiệm hàm lượng cellulose ban đầu Lặp lại Cơ chất Trung bình Mạt cưa 26.54 25.83 27.3 26.56 Mụn dừa 21.6 22.5 22.8 22.3 Rơm 17.63 18.56 18.9 18.36 Bảng 26 Bảng ANOVA thí nghiệm hàm lượng cellulose sau ủ khơng có xạ khuẩn -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 100.74727 50.373633 110.901 0000 Within groups 2.72533 454222 -Total (corrected) 103.47260 Bảng 27 Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm hàm lượng cellulose sau ủ khơng có xạ khuẩn -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -Rom_k 18.363333 X M_dua_k 22.300000 X M_cua_k 26.556667 X -contrast difference +/limits M_cua_k - M_dua_k 4.25667 1.34691 * M_cua_k - Rom_k 8.19333 1.34691 * M_dua_k - Rom_k 3.93667 1.34691 * -* denotes a statistically significant difference Bảng 28 Bảng số liệu thống kê thí nghiệm hàm lượng cellulose ban đầu Lặp lại Cơ chất Trung bình Mạt cưa 18.55 19.6 18.9 19.02 Mụn dừa 11.56 12.35 11.9 11.94 Rơm 12.56 13.5 12.7 12.92 Bảng 29 Bảng ANOVA thí nghiệm hàm lượng cellulose sau ủ khơng có xạ khuẩn -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 88.262689 44.131344 189.116 0000 Within groups 1.400133 233356 -Total (corrected) 89.662822 69 Bảng 30 Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm hàm lượng cellulose sau ủ có xạ khuẩn -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -M_dua_c 11.936667 X Rom_c 12.920000 X M_cua_c 19.016667 X -contrast difference +/limits M_cua_c - M_dua_c 7.08000 0.96541 * M_cua_c - Rom_c 6.09667 0.96541 * M_dua_c - Rom_c -0.98333 0.96541 * -* denotes a statistically significant difference Bảng 31 Bảng số liệu thống kê thí nghiệm hàm lượng polysaccharide Lặp lại Cơ chất Trung bình Mạt cưa 0.15 0.19 0.17 0.17 Mụn dừa 0.12 0.13 0.1 0.12 Rơm 0.08 0.16 0.14 0.13 Bảng 32 Bảng ANOVA thí nghiệm hàm lượng polysaccharide -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 0048222 0024111 3.056 1215 Within groups 0047333 0007889 -Total (corrected) 0095556 Bảng 33 Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm hàm lượng polysaccharide -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -M_dua 1166667 X Rom 1266667 X M_cua 1700000 X -contrast difference +/limits M_cua - M_dua 0.05333 0.05613 M_cua - Rom 0.04333 0.05613 M_dua - Rom -0.01000 0.05613 -* denotes a statistically significant difference 70 ... Dịch chi? ??t nấm Linh Chi trồng mạt cưa, ống 2: dịch chi? ??t nấm Linh Chi trồng mụn dừa, ống 3: dịch chi? ??t nấm Linh Chi trồng rơm, ống 0: ống nước cất Từ kết bảng sơ kết luận rằng, nấm linh chi trồng. .. 11 kinh tế vùng nên không thiết phải trồng nấm Linh Chi loại chất cố định Do đó, đề tài ? ?Nghiên cứu sử dụng phụ phẩm nông nghiệp trồng nấm Linh Chi Ganoderma lucidum? ?? tiến hành ba loại chất: mạt... 0: nước cất sau lắc; Ống 1: dịch chi? ??t nấm Linh Chi trồng mạt cưa sau lắc; Ống 2: dịch chi? ??t nấm Linh Chi trồng mụn dừa sau lắc; Ống 3: dịch chi? ??t nấm Linh Chi trồng rơm sau lắc 49  Thử ngiệm