NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG SINH TỔNG HỢP VÀ ĐẶC ĐIỂM ENZYME CELLULASE CỦA MỘT SỐ CHỦNG Bacillus sp.

71 302 0
  NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG SINH TỔNG HỢP VÀ ĐẶC ĐIỂM ENZYME CELLULASE  CỦA MỘT SỐ CHỦNG Bacillus sp.

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG SINH TỔNG HỢP ĐẶC ĐIỂM ENZYME CELLULASE CỦA MỘT SỐ CHỦNG Bacillus sp Ngành học : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực : NGUYỄN THỊ YẾN THU Niên khoá : 2007-2011 Tháng 7/2011 BỘ GIÁO DỤC ĐẠO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG SINH TỔNG HỢP ĐẶC ĐIỂM ENZYME CELLULASE CỦA MỘT SỐ CHỦNG Bacillus sp Hướng dẫn khoa học Sinh viên thực ThS TRẦN NGỌC HÙNG NGUYỄN THỊ YẾN THU KS BIỆN THỊ LAN THANH Tháng 7/2011 TĨM TẮT Cellulase nhóm enzymekhả thuỷ phân liên kết β-1,4-glucoside cellulose Cellulase ứng dụng nhiều ngành công nghiệp nhẹ như: thực phẩm, thức ăn chăn nuôi, dệt, bột giấy,… Nguồn thu nhận cellulase chủ yếu từ vi sinh vật Trong đó, Bacillus nhóm vi sinh vật có khả sinh tổng hợp cellulase cao, enzyme thu nhận từ nhóm có nhiều đặc tính ưu việt, ứng dụng vào nhiều ngành nghề khác Đề tài tiến hành nhằm chọn lọc chủng Bacilluskhả sinh tổng hợp enzyme cellulase có hoạt tính cao, xác định số điều kiện ni cấy đặc điểm xúc tác enzyme Qua trình nghiên cứu, chọn chủng Bacillus có hoạt tính cellulase cao mơi trường thạch đĩa chứa CMC từ 16 chủng ban đầu Các chủngkhả sinh tổng hợp cellulase môi trường bán rắn tốt mơi trường lỏng Trong đó, chủng Bacillus ký hiệu Ba50 nuôi môi trường bán rắn với tỷ lệ bã khoai mì bã đậu nành 7:3 56 cho hoạt độ cellulase cao nhất, đạt 629 UI/g Chế phẩm cellulase tinh với ethanol thu nhận từ chủng Ba50 có khả thủy phân CMC tốt pH 5,4, nhiệt độ 55oC i SUMMARY Cellulases cleave the β-1,4 bond of cellulose, belong to the large family of glycosyl hydrolases Cellulases have a wide range of industrial application such as textile, pulp paper and animal feed additives etc Cellulases can be producted by fungi, bacteria , atinomycetes animal or plant, but the most common producer bacteria In particular, the Bacillus group have capable of biosynthesis of cellulases high Therefore we carried out the thesis: "Study the biosynthesis ability and characteristics of enzyme cellulases from some Bacillus sp strains" with the objectives are select Bacillus strains capable of biosynthesis of cellulases highly active enzyme, determined certain culture conditions and catalytic characteristics of this enzyme In the present study, we selected six strains have high cellulase activity from 16 original Bacillus strains The strains are capable of biosynthesis cellulases on semisolid medium better than the liquid medium Of these, Bacillus strain was denoted by Ba50 culture on semi-solid medium with the rate of cassava bagasse and soybean residue is 7:3 for the most active cellulases, up to 629 IU / g Preparations of crude cellulases derived from preliminary Ba50 Bacillus strains capable of hydrolysing CMC best at pH 5.4, temperature 55oC Key word: Cellulase, Bacillus sp ii LỜI CẢM ƠN Lời cảm ơn chân thành xin gửi đến cha mẹ động viên tạo điều kiện thuận lợi cho học tập Cảm ơn dì yêu thương quan tâm Cảm ơn gia đình thân u ln tin tưởng con, che chở chỗ dựa vững để vượt qua khó khăn Em xin chân thành cảm ơn thầy Th.S Trần Ngọc Hùng tận tình hướng dẫn em suốt thời gian làm đề tài viết khoá luận tốt nghiệp Cám ơn Th.S Nguyễn Như Nhứt tạo điều kiện cho em thực đề tài Cảm ơn anh chị Công ty Gia Tường chi nhánh Bình Dương giúp đỡ em suốt trình thực đề tài tốt nghiệp Xin gửi lời cảm ơn đến người thầy đáng kính TS Lê Đình Đơn, trưởng mơn Cơng nghệ sinh học Cảm ơn thầy cô Bộ môn Công nghệ sinh học giúp đỡ em lúc làm đề tài Gửi lời cảm ơn đến người bạn bên cạnh, động viên, chia sẻ giúp đỡ thời gian qua Cảm ơn bạn bè thân yêu lớp DH07SH học tập chia sẻ suốt năm đại học Lời cảm ơn thân thương đến chị, bạn, em phòng 513 ký túc xá trường đại học Nông Lâm TP HCM Một lần nữa, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến tất cả! TP.HCM ngày tháng năm 2011 NGUYỄN THỊ YẾN THU iii MỤC LỤC TÓM TẮT .i SUMMARY ii LỜI CẢM ƠN iii MỤC LỤC iv DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH SÁCH CÁC HÌNH vii DANH SÁCH CÁC BẢNG viii Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Yêu cầu đề tài 1.3 Nội dung thực Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 2.1 Enzyme cellulase 2.1.1 Phân loại 2.1.2 Tính chất phân tử 2.1.3 Tính chất xúc tác 2.1.4 Tính chất lý hố enzyme cellulase 1.1.4.1 Ảnh hưởng pH 2.1.4.2 Ảnh hưởng nhiệt độ .6 2.1.4.3 Ảnh hưởng chất hóa học 2.1.4.4 Sự điều hòa sinh tổng hợp cellulase 2.1.5 Nguồn thu nhận enzyme cellulase 2.1.6 Ứng dụng enzyme cellulase 2.1.6.1 Trong công nghiệp giấy sản xuất bột giấy .8 2.1.6.2 Trong công nghiệp dệt 2.1.6.3 Trong xử lý môi truờng 2.1.6.4 Trong thức ăn gia súc 2.1.6.5 Trong công nghiệp thực phẩm 2.1.6.6 Công nghiệp chất tẩy rửa sản xuất cồn 10 2.2 Vi khuẩn Bacillus sp 10 2.2.1 Phân loại 10 2.2.2 Đặc điểm Bacillus 10 iv 2.2.3 Ảnh hưởng mơi trường q trình sinh tổng hợp cellulase 11 2.2.3.1 Ảnh hưởng nguồn carbon 11 2.2.3.2 Ảnh huởng nguồn nitơ 11 2.2.3.3 Ảnh hưởng khoáng 12 2.2.4 Hệ enzyme ngoại bào Bacillus 13 2.3 Các nghiên cứu gần enzyme cellulase từ vi sinh vật 16 Chương VẬT LIỆU PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 18 3.2 Vật liệu 18 3.3 Phương pháp 20 3.3.1 Phương pháp phân tích 20 3.3.1.1 Xác định hoạt tính enzyme cellulase theo phương pháp định lượng đường khử Miller .20 3.3.1.2 Pháp xác định mật độ tế bào .21 3.3.1.3 Phương pháp xác định độ ẩm 22 3.3.2 Phương pháp thực 22 3.3.2.1 Định tính khả sinh tổng hợp cellulase môi trường thạch đĩa 22 3.3.2.2 Lựa chọn môi truờng sinh tổng hợp cellulase cho Bacillus sp 22 3.3.2.3 Phương pháp khảo sát ảnh hưởng số yếu tố .23 3.3.2.4 Khảo sát số đặc điểm cellulase tinh 24 Chương KẾT QUẢ THẢO LUẬN 26 4.1.1 Chọn lọc chủng vi khuẩn Bacillus sp phân giải CMC 26 4.1.2 Lựa chọn môi truờng sinh tổng hợp cellulase cho Bacillus sp 28 4.1.2.1 Khả sinh tổng hợp cellulase chủng Bacillus sp môi trường lỏng 28 4.1.2.2 Khả sinh enzyme cellulase môi trường bán rắn .29 4.1.3 Khảo sát ảnh hưởng số yếu tố 32 4.1.3.1 Ảnh hưởng tỷ lệ chất .32 4.1.3.2 Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy 34 4.1.4 Một số đặc tính enzyme cellulase tinh 35 4.1.4.1 Ảnh hưởng cuả pH lên khả thuỷ phân enzyme cellulase 36 4.1.4.2 Ảnh hưởng nhiệt độ lên khả thuỷ phân cellulase .37 Chương KẾT LUẬN ĐỀ NGHỊ 38 5.1 Kết luận 38 5.2 Đề nghị 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO .40 PHỤ LỤC v DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT BDN : Bã đậu nành BKM : Bã khoai mì BM : Bã mía C : Carbon CBD : Cellulose bind domain CG : Cám gạo CM : Cám mì CMC : Carboxymethyl cellulose DNS : Dinitrosalicylic acid MXD : Mụn xơ dừa N : Nitrogen PTS : Proline-threonine-serine box VDP : Vỏ đậu phộng vi DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 2.1 Vi khuẩn Bacillus sp 10 Hình 4.1 Vòng phân giải CMC 27 Hình 4.2 Biểu đồ hoạt tính cellulase chủng Bacillus 29 Hình 4.3.a Đồ thị hoạt tính cellulase mơi trường bán rắn 31 Hình 4.3.b Đồ thị hoạt tính cellulase mơi trường bán rắn 31 Hình 4.4 Biểu đồ ảnh hưởng thời gian 35 Hình 4.5 Biểu đồ ảnh hưởng pH 36 Hình 4.6 Biểu đồ ảnh hưởng thời gian 37 vii DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 2.1 Hệ enzyme ngoại bào Bacillus sp 13 Bảng 3.1 Các chủng Bacillus sp dùng nghiên cứu 18 Bảng 3.2 Cách pha đệm Mc Ilvaine 19 Bảng 3.3 Thành phần cung cấp nguồn C N 23 Bảng 4.1 Vòng phân giải CMC chủng Bacillus 26 Bảng 4.2 Khả sinh enzyme cellulase Bacillus sp 28 Bảng 4.3 Ảnh hưởng thành phần chất 30 Bảng 4.4 Ảnh hưởng tỷ lệ bã khoai mì bã đậu nành 30 Bảng 4.5 Ảnh hưởng tỷ lệ cám gạo bã đậu nành 33 Bảng 4.6 Ảnh hưởng tỷ lệ bã mía bã đậu nành 34 Bảng 4.7 Ảnh hưởng pH lên khả thuỷ phân cellulase 36 Bảng 4.8 Ảnh hưởng nhiệt độ lên khả thuỷ phân 37 viii Method: 95.0 percent LSD thoi gian Count Mean Homogeneous Groups 24 14.0 X 48 20.6667 X 72 25.3333 X 96 30.0 X 120 37.2 X Bảng 11 Vòng phân giải CMC Ba 61 theo thời gian Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 2475.44 618.859 73.67 0.0000 Within groups 100.8 12 8.4 -Total (Corr.) 2576.24 16 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 61 by thoi gian Method: 95.0 percent LSD thoi gian Count Mean Homogeneous Groups 24 19.0 X 48 27.3333 X 72 31.6667 X 96 43.6667 X 120 51.2 X Bảng 12 Vòng phân giải CMC Ba 62 theo thời gian Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 619.749 154.937 23.80 0.0000 Within groups 78.1333 12 6.51111 -Total (Corr.) 697.882 16 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 62 by thoi gian Method: 95.0 percent LSD thoi gian Count Mean Homogeneous Groups 24 5.33333 X 48 13.0 X 72 19.0 X 120 21.2 X 96 21.6667 X Bảng 13 Vòng phân giải CMC Ba 79 theo thời gian Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 2552.73 638.182 150.75 0.0000 Within groups 50.8 12 4.23333 -Total (Corr.) 2603.53 16 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 79 by thoi gian Method: 95.0 percent LSD thoi gian Count Mean Homogeneous Groups 24 19.3333 X 48 29.6667 X 72 36.6667 X 96 45.0 X 120 53.2 X Bảng 14 Vòng phân giải CMC Ba 80 theo thời gian Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 2358.56 589.641 62.51 0.0000 Within groups 113.2 12 9.43333 -Total (Corr.) 2471.76 16 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 80 by thoi gian Method: 95.0 percent LSD thoi gian Count Mean Homogeneous Groups 24 20.0 X 48 31.0 X 72 37.0 X 96 46.0 X 120 52.6 X Bảng 15 Vòng phân giải CMC Ba 81 theo thời gian Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -781.098 195.275 351.49 Between groups 0.0000 Within groups 6.66667 12 0.555556 -Total (Corr.) 787.765 16 Multiple Range Tests for hoat tinh 81 by thoi gian Method: 95.0 percent LSD thoi gian Count Mean Homogeneous Groups 24 13.0 X 48 20.6667 X 72 25.0 X 96 29.0 X 120 32.0 X Bảng 16 Vòng phân giải CMC Ba 89 theo thời gian -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 51.1922 12.798 11.08 0.0005 Within groups 13.8667 12 1.15556 -Total (Corr.) 65.0588 16 Multiple Range Tests for hoat tinh ba89 by thoi gian Method: 95.0 percent LSD thoi gian Count Mean Homogeneous Groups 24 1.0 X 48 1.33333 XX 72 3.0 XX 96 4.0 XX 120 5.4 X Bảng 17 Vòng phân giải CMC chủng Bacillus thời gian 72 Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 2793.15 15 186.21 49.11 0.0000 Within groups 121.333 32 3.79167 -Total (Corr.) 2914.48 47 Multiple Range Tests for hoat tinh by chung Method: 95.0 percent LSD chung Count Mean Homogeneous Groups 89 3.0 X 49 18.0 X 62 19.0 X 23 20.0 XX 22.3333 XX 22.3333 XX 23.3333 X 24.0 XX F 24.3333 XX 81 25.0 XX 50 25.3333 XX 24 26.6667 X 48 27.0 X 61 31.6667 X 79 36.6667 X 80 37.0 X Bảng 18 Hoạt tính cellulase Ba 24 ni mơi trường lỏng lắc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 2.24475 0.748251 0.79 0.5349 Within groups 6.59647 0.942352 -Total (Corr.) 8.84122 10 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 24 by moi truong long Method: 95.0 percent LSD moi truong Count Mean Homogeneous Groups 3.43 X 3.66333 X 4.37 X 3 4.54 X 1: CMC 2: Bột giấy 3: Bã khoai mì 4: Bơng thấm Bảng 19 Hoạt tính cellulase Ba 48 ni môi trường lỏng lắc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 9.65624 3.21875 2.01 0.2016 Within groups 11.2243 1.60346 -Total (Corr.) 20.8805 10 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 48 by moi truong long Method: 95.0 percent LSD moi truong longCount Mean Homogeneous Groups 1.725 X 2.41667 X 3 3.71333 X 4.15667 X 1: CMC 2: Bột giấy 3: Bã khoai mì 4: Bơng thấm Bảng 20 Hoạt tính cellulase Ba 50 ni môi trường lỏng lắc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 16.354 5.45132 91.58 0.0000 Within groups 0.416667 0.0595238 -Total (Corr.) 16.7706 10 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 50 by moi truong long Method: 95.0 percent LSD moi truong longCount Mean Homogeneous Groups 1.21 X 3 2.59 X 3.24667 X 4.77 X 1: CMC 2: Bột giấy 3: Bã khoai mì 4: Bơng thấm Bảng 21 Hoạt tính cellulase Ba 61 nuôi môi trường lỏng lắc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 1.26682 0.422275 0.78 0.5389 Within groups 4.34687 0.543358 Total (Corr.) 5.61369 11 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 61 by moi truong long Method: 95.0 percent LSD moi truong longCount Mean Homogeneous Groups 3 4.58333 X 5.04667 X 5.33333 X 5.41333 X 1: CMC 2: Bột giấy 3: Bã khoai mì 4: Bơng thấm Bảng 22 Hoạt tính cellulase Ba 79 nuôi môi trường lỏng lắc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 31.0134 10.3378 14.73 0.0013 Within groups 5.61633 0.702042 -Total (Corr.) 36.6297 11 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 79 by moi truong long Method: 95.0 percent LSD moi truong longCount Mean Homogeneous Groups 3 2.89333 X 3.13 X 5.92 X 6.47667 X 1: CMC 2: Bột giấy 3: Bã khoai mì 4: Bơng thấm Bảng 23 Hoạt tính cellulase Ba 80 nuôi môi trường lỏng lắc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 12.0062 4.00208 3.35 0.0762 Within groups 9.55707 1.19463 -Total (Corr.) 21.5633 11 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 80 by moi truong long Method: 95.0 percent LSD moi truong longCount Mean Homogeneous Groups 3 3.88333 X 4.83667 XX 5.56333 XX 6.61667 X 1: CMC 2: Bột giấy 3: Bã khoai mì 4: Bơng thấm Bảng 24 Hoạt tính cellulase chủng Ba 24 ni mơi trường bán rắn Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 43870.1 8774.01 17.36 0.0000 Within groups 6571.62 13 505.509 -Total (Corr.) 50441.7 18 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 24 by moi truong ban ran Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups 82.2233 X 113.37 X 168.01 X 180.517 X 194.895 XX 3 225.833 X 1:Cám gạo 2:Cám mì 3:Bã khoai mì 4:Bã mía 5:Vỏ đậu phộng 6:Mụn xơ dừa Bảng 25 Hoạt tính cellulase chủng Ba 48 ni môi trường bán rắn Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue Between groups 10463.5 2092.69 4.08 0.0190 Within groups 6668.56 13 512.966 Total (Corr.) 17132.0 18 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 48 by moi truong ban ran Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups 227.917 X 262.13 XX 276.53 XX 3 278.197 XX 296.157 XX 299.873 X 1:Cám gạo 2:Cám mì 3:Bã khoai mì 4:Bã mía 5:Vỏ đậu phộng 6:Mụn xơ dừa Bảng 26 Hoạt tính cellulase chủng Ba 50 nuôi môi trường bán rắn Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 84071.0 16814.2 43.59 0.0000 Within groups 4628.8 12 385.733 -Total (Corr.) 88699.8 17 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 50 by moi truong ban ran Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups 133.0 X 156.11 X 201.317 X 218.787 XX 247.13 X 3 343.9 X 1:Cám gạo 4:Bã mía 2:Cám mì 5:Vỏ đậu phộng 3:Bã khoai mì 6:Mụn xơ dừa Bảng 27 Hoạt tính cellulase chủng Ba 61 nuôi môi trường bán rắn Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 97095.3 19419.1 263.20 0.0000 Within groups 1032.93 14 73.7805 -Total (Corr.) 98128.2 19 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 61 by moi truong ban ran Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups 18.87 X 20.35 X 61.7233 X 126.557 X 127.518 X 226.517 X 1:Cám gạo 4:Bã mía 2:Cám mì 5:Vỏ đậu phộng 3:Bã khoai mì 6:Mụn xơ dừa Bảng 28 Hoạt tính cellulase chủng Ba 79 ni mơi trường bán rắn Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 26571.1 5314.22 48.54 0.0000 Within groups 1751.73 16 109.483 -Total (Corr.) 28322.8 21 Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups 5 36.808 X 46.4533 X 84.5333 X 102.93 X 116.97 XX 124.363 X 1:Cám gạo 4:Bã mía 2:Cám mì 5:Vỏ đậu phộng 3:Bã khoai mì 6:Mụn xơ dừa Bảng 29 Hoạt tính cellulase chủng Ba 80 ni mơi trường bán rắn Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 55258.6 11051.7 97.93 0.0000 Within groups 1354.23 12 112.853 -Total (Corr.) 56612.8 17 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 80 by moi truong ban ran Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups 34.9333 X 56.0033 X 58.05 X 120.683 X 145.2 X 3 189.57 X 1:Cám gạo 4:Bã mía 2:Cám mì 5:Vỏ đậu phộng 3:Bã khoai mì 6:Mụn xơ dừa Bảng 30 Ảnh hưởng tỷ lệ BKM:BDN lên khả sinh enzyme cellulase Ba 50 Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 184164.0 30693.9 15.66 0.0000 Within groups 27435.3 14 1959.66 -Total (Corr.) 211599.0 20 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 50 by ty le Method: 95.0 percent LSD ty le Count Mean Homogeneous Groups 28 343.295 X 46 344.432 X 55 350.116 X 37 362.165 X 64 378.761 X 82 517.899 X 73 594.97 X Bảng 31 Ảnh hưởng tỷ lệ CG:BDN lên khả sinh enzyme cellulase Ba 48 Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 62763.0 10460.5 11.24 0.0001 Within groups 13032.9 14 930.919 -Total (Corr.) 75795.8 20 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 48 by ty le Method: 95.0 percent LSD ty le Count Mean Homogeneous Groups 82 191.882 X 37 270.771 X 28 272.363 X 73 273.045 X 55 306.465 X 46 313.058 X 64 387.742 X Bảng 32 Ảnh hưởng tỷ lệ BM:BDN lên khả sinh enzyme cellulase Ba 48 Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 40461.1 6743.51 30.91 0.0000 Within groups 3054.25 14 218.161 -Total (Corr.) 43515.3 20 Multiple Range Tests for Ba 48 by ty le -Method: 95.0 percent LSD ty le Count Mean Homogeneous Groups 82 59.1867 X 73 68.43 X 64 109.28 X 28 142.323 X 46 151.113 X 37 163.84 XX 55 181.727 X Bảng 33 Ảnh hưởng thời gian lên khả sinh enzyme cellulase Ba 50 Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -10 31424.0 93.70 Between groups 314240.0 0.0000 Within groups 7377.74 22 335.352 -Total (Corr.) 321618.0 32 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 50 by thoi gian Method: 95.0 percent LSD thoi gian Count Mean Homogeneous Groups 16 297.067 X 24 348.753 X 96 415.59 X 32 445.49 XX 88 446.813 XX 40 476.86 X 48 516.76 X 72 522.597 X 80 524.72 X 64 622.63 X 56 628.997 X Bảng 34 Khảo sát ảnh hưởng pH lên hoạt tính cellulase tinh ANOVA Table for hoat tinh Ba 50 by pH Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 2.90144E6 13 223187.0 87.45 0.0000 Within groups 71461.3 28 2552.19 -Total (Corr.) 2.9729E6 41 Multiple Range Tests for hoat tinh Ba 50 by pH Method: 95.0 percent LSD pH Count Mean Homogeneous Groups 2.6 16.3333 X 3 65.6667 XX 3.4 123.333 XX 3.8 198.333 X 4.2 452.333 X 7.8 552.333 X 7.4 570.333 X 594.0 XX 6.6 607.0 XX 6.2 630.0 XXX 4.6 657.667 XX 5.8 698.333 X 796.667 X 5.4 839.333 X Bảng 35 Ảnh hưởng nhiệt độ lên khả thuỷ phân enzyme cellulase tinh Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio PValue -Between groups 1.05454E6 10 105454.0 42.18 0.0000 Within groups 85010.4 34 2500.3 -Total (Corr.) 1.13955E6 44 Multiple Range Tests for hoat tinh by nhiet Method: 95.0 percent LSD nhiet Count Mean Homogeneous Groups 572.222 X 6 618.518 X 70 620.743 XX 35 694.813 X 768.888 X 65 798.15 XX 40 862.59 XX 60 933.703 XX 45 942.963 XX 50 977.777 X 55 1003.33 X Phụ lục Mật độ tế bào dịch tăng sinh Ba 50 môi trường MT2 Lặp lại Erlen Erlen Erlen 10-5 10-6 10-7 10-5 10-6 10-7 10-5 10-6 10-7 Số khuẩn lạc điã 225 64 21 235 52 17 230 33 Mật độ tế bào Ba 50 theo cơng thức mục 3.3.1.2 A= 25×107 tế bào/ml Số khuẩn lạc đĩa 245 35 20 230 45 25 243 41 Số khuẩn lạc đĩa 266 43 245 40 252 15 10 Phụ lục Các bảng số liệu thu đươc đề tài Bảng Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy lên khả sinh tổng hợp cellulase chủng Bacillus Ba50 Thời gian ni cấy (giờ) Hoạt tínhc cellulase Hoạt tính trung bình (UI/g) 296 16 294 297a±2 302 356 24 323 349b±13 368 450 32 427 446cd±10 459 495 40 477 477d±10 458 547 48 485 517e±18 518 633 56 617 629f±6 637 630 64 623 623f±4 615 535 72 527 523e±8 507 542 80 494 523e±16 538 434 88 447 447cd±10 459 400 96 413 416c±9 433 ... DỤC VÀ ĐẠO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG SINH TỔNG HỢP VÀ ĐẶC ĐIỂM ENZYME CELLULASE CỦA MỘT SỐ CHỦNG Bacillus. .. chọn lọc chủng Bacillus có khả sinh tổng hợp enzyme cellulase có hoạt tính cao, xác định số điều kiện nuôi cấy đặc điểm xúc tác enzyme Qua trình nghiên cứu, chọn chủng Bacillus có hoạt tính cellulase. .. cứu khả sinh tổng hợp đặc điểm enzyme cellulase số chủng Bacillus sp. đề tài thực phòng thí nghiệm cơng ty Gia Tường chi nhánh Bình Dương 1.2 Yêu cầu đề tài  Chọn chủng Bacillus có khả sinh tổng

Ngày đăng: 13/06/2018, 08:35

Từ khóa liên quan

Mục lục

  • TÓM TẮT

  • SUMMARY

  • LỜI CẢM ƠN

  • MỤC LỤC

  • DANH SÁCH CÁC HÌNH

  • DANH SÁCH CÁC BẢNG

  • Chương 1 MỞ ĐẦU

  • Đặt vấn đề

  • Yêu cầu của đề tài

  • Nội dung thực hiện

  • Chương 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

  • 2.1. Enzyme cellulase

  • 2.1.1. Phân loại

  • 2.1.2. Tính chất phân tử

  • 2.1.3. Tính chất xúc tác

  • 2.1.4. Tính chất lý hoá của enzyme cellulase

  • 1.1.4.1. Ảnh hưởng của pH

  • 2.1.4.2. Ảnh hưởng của nhiệt độ

  • 2.1.4.3. Ảnh hưởng của các chất hóa học

  • 2.1.4.4. Sự điều hòa sinh tổng hợp cellulase

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan