BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA NƠNG HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT PHẢN ỨNG CỦA MỘT SỐ GIỐNG CA CAO VÀ SẦU RIÊNG ĐỐI VỚI Phytophthora palmivora TRONG ĐIỀU KIỆN PHỊNG THÍ NGHIỆM SINH VIÊN THỰC HIỆN: NGUYỄN TIẾN ĐẠT NGÀNH: BẢO VỆ THỰC VẬT KHÓA: 2008 – 2012 Tháng 07/2012 KHẢO SÁT PHẢN ỨNG CỦA MỘT SỐ GIỐNG CA CAO VÀ SẦU RIÊNG ĐỐI VỚI Phytophthora palmivora TRONG ĐIỀU KIỆN PHỊNG THÍ NGHIỆM Tác giả: NGUYỄN TIẾN ĐẠT Khóa luận đệ trình để đáp ứng u cầu cấp kỹ sư ngành Bảo vệ thực vật Hội đồng hướng dẫn: PGS TS LÊ ĐÌNH ĐƠN ThS LÊ CAO LƯỢNG Tp Hồ Chí Minh, tháng 7/ 2012 ii LỜI CẢM ƠN Lời em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới PGS.TS Lê Đình Đơn ThS Lê Cao Lượng tận tình hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi để em hồn thành tốt khóa luận tốt nghiệp Em xin cảm ơn quý thầy cô khoa Nông Học tận tâm truyền dạy cho em kiến thức suốt trình học tập trường Con xin cảm ơn cha, mẹ cậu, mợ tám sinh thành nuôi dạy nên người ngày hôm Em xin cảm ơn KS Nguyễn Văn anh chị phòng nghiên cứu bệnh Viện cơng nghệ sinh học mơi trường nhiệt tình bảo em thời gian thực đề tài tốt nghiệp Và cuối tất bạn đồng hành giúp đỡ thời gian học trường thời gian tiến hành đề tài Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2012 Nguyễn Tiến Đạt iii TÓM TẮT Đề tài “Khảo sát phản ứng số giống ca cao sầu riêng Phytophthora palmivora điều kiện phòng thí nghiệm” – Nguyễn Tiến Đạt, tháng 07/ 2012 Hội đồng hướng dẫn: PGS.TS Lê Đình Đơn ThS Lê Cao Lượng Đề tài thực từ tháng 02 đến tháng 06/ 2012 Viện công nghệ sinh học môi trường – trường đại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh Qua thí nghiệm chúng tơi theo dõi thu số kết sau: Phân lập, định danh chọn bốn dòng P palmivora để tiến hành thí nghiệm có hai dòng P palmivora phân lập từ ca cao hai dòng P palmivora phân lập từ sầu riêng Thí nghiệm khảo sát phản ứng trái số giống ca cao sầu riêng Phytophthora palmivora phân lập từ ca cao sầu riêng điều kiện phòng thí nghiệm Trong thí nghiệm 1, tiến hành chủng dòng P palmivora phân lập từ ca cao lên trái giống ca cao giống trái sầu riêng Thí nghiệm ghi nhận chưa có trường hợp nhiễm chéo P palmivora phân lập từ ca cao lên trái sầu riêng Giống ca cao TD1 giống nhiễm với P palmivora so với giống thí nghiệm với đường kính vết bệnh trung bình 48,50 ± 3,18 mm (PC – HĐ) 26,17 ± 0,87 mm (PC – AK) Trong giống TD9 (64,61 ± 3,09 mm), TD3 (58,72 ± 0,67 mm), giống TD8 (57,22 ± 1,93 mm) giống nhiễm nặng chủng dòng P palmivora PC – HĐ, chủng dòng P palmivora PC – AK giống TD2 (49,95 ± 3,75mm), TD3 (53,33 ± 1,09 mm), TD5 (52,05 ± 1,57 mm), TD6 (47,94 ± 2,88 mm), TD9 (43,33 ± 13,12 mm), TD14 (41,28 ± 5,75 mm) giống nhiễm nặng Trong thí nghiệm nhận thấy dòng P palmivora PC – HĐ có tính độc cao so với dòng P palmivora PC – AK Thí nghiệm 2, tiến hành chủng dòng P palmivora phân lập từ sầu riêng lên trái giống ca cao trái giống sầu riêng Trong thí nghiệm ghi nhận chưa có trường hợp nhiễm chéo dòng P palmivora phân lập từ sầu riêng lên ca cao Dòng PS – LT (71,11 ± 1,23 mm) có độc tính cao so với dòng PS – LK (45,56 ± 0,59 mm) chủng lên giống sầu riêng Mongthong iv Thí nghiệm khảo sát phản ứng số giống ca cao sầu riêng Phytophthora palmivora phân lập từ ca cao sầu riêng điều kiện phòng thí nghiệm Thí nghiệm 1, chủng dòng P palmivora PC – HĐ PC – AK lên giống ca cao TD5, TD6 giống sầu riêng Mongthong, Ri6 Qua thí nghiệm chưa ghi nhận có trường hợp nhiễm chéo dòng P palmivora phân lập từ ca cao lên sầu riêng Đường kính vết bệnh giống ca cao thí nghiệm khơng có khác biệt Tính độc hai dòng P palmivora PC – HĐ PC – AK khơng có khác biệt chủng lên giống ca cao TD5 TD6 Thí nghiệm 2, tiến hành với dòng P palmivora PS – LT PS – LK chủng lên giống ca cao TD5, TD6 giống sầu riêng Mongthong, Ri6 Qua thí nghiệm chưa ghi nhận có trường hợp nhiễm chéo dòng P palmivora lên ca cao Cũng thí nghiệm giống Mongthong (19,87 ± 0,51 mm 22,67 ± 0,50 mm) kháng với dòng P palmivora giống Ri6 (21,00 ± 0,44 mm 25,22 ± 1,06 mm) thí nghiệm có gây vết thương thu kết tương tự thí nghiệm khơng gây vết thương Độc tính dòng P palmivora PS – LT cao dòng P palmivora PS – LK v MỤC LỤC DANH SÁCH CÁC BẢNG xi DANH SÁCH CÁC HÌNH ẢNH VÀ BIỂU ĐỒ xiii Chương GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài 1.4 Giới hạn đề tài Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung ca cao 2.1.1 Nguồn gốc, vị trí phân loại cơng dụng ca cao 2.1.2 Yêu cầu ngoại cảnh 2.1.3 Đặc điểm thực vật học 2.1.3.1 Thân 2.1.3.2 Lá 2.1.3.3 Rễ 2.1.3.4 Hoa 2.1.3.5 Sự thụ phấn 2.1.3.6 Trái hạt 2.1.4 Giá trị dinh dưỡng 2.1.5 Giá trị kinh tế 2.1.5.1 Tình hình sản xuất tiêu thụ ca cao Việt Nam 2.1.5.2 Tình hình sản xuất tiêu thụ ca cao giới 11 2.2 Giới thiệu chung sầu riêng 12 vi 2.2.1 Đặc điểm hình thái 12 2.2.1.1 Hình thái sầu riêng 12 2.2.1.2 Đặt điểm số giống sầu riêng phổ biến 13 2.2.2 Yêu cầu ngoại cảnh 15 2.2.2.1 Nhiệt độ ẩm độ 15 2.2.2.2 Lượng mưa 15 2.2.2.3 Đất đai 15 2.2.2.4 Các yếu tố khác 15 2.3 Giới thiệu chung Phytophthora palmivora 16 2.3.1 Vị trí phân loại phổ ký chủ 16 2.3.2 Phân biệt Phytophthora sp với Pythium sp 16 2.3.3 Đặc điểm phát sinh phát triển Phytophthora palmivora 17 2.3.4 Chu kỳ sống Phytophthora palmivora 17 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 3.1 Thời gian địa điểm 19 3.1.1 Thời gian nghiên cứu 19 3.1.2 Địa điểm nghiên cứu 19 3.2 Vật liệu nghiên cứu 19 3.2.1 Đối tượng nghiên cứu 19 3.2.2 Trang thiết bị, dụng cụ vật liệu thí nghiệm 19 3.3 Nội dung nghiên cứu 19 3.4 Phương pháp nghiên cứu 20 3.4.1 Phân lập Phytophthora sp 20 3.4.2 Xác định dạng lai mẫu Phytophthora sp 20 vii 3.4.3 Phương pháp định danh 21 3.4.4 Nhân sinh khối Phytophthora palmivora 21 3.4.5 Mơ tả hình thái Phytophthora palmivora môi trường CRA 21 3.4.6 Phương pháp tạo động bào tử Phytophthora palmivora 22 3.4.7 Chuẩn bị nồng độ dịch động bào tử 23 3.5 Khảo sát phản ứng trái số giống ca cao trái sầu riêng Phytophthora palmivora phân lập từ ca cao sầu riêng điều kiện phòng thí nghiệm 24 3.6 Khảo sát phản ứng số giống ca cao sầu riêng Phytophthora palmivora phân lập từ ca cao sầu riêng điều kiện phòng thí nghiệm 26 3.7 Xử lý số liệu 27 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 Phân lập định danh mẫu Phytophthora sp 28 4.1.1 Phân lập mẫu Phytophthora sp 28 4.1.2 Định danh mẫu Phytophthora sp dựa vào đặc điểm hình thái 29 4.1.3 Xác định dạng lai mẫu Phytophthora sp 32 4.2 Khảo sát phản ứng trái số giống ca cao trái sầu riêng Phytophthora palmivora phân lập từ ca cao sầu riêng điều kiện phòng thí nghiệm 35 4.3 Khảo sát phản ứng số giống ca cao sầu riêng Phytophthora palmivora phân lập từ ca cao sầu riêng điều kiện phòng thí nghiệm 45 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 50 5.1 Kết luận 50 5.2 Đề nghị 50 viii TÀI LIỆU THAM KHẢO 52 PHỤ LỤC 56 PHỤ LỤC 71 ix DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT ACIAR: (Research that works for developing countries and Australia) Trung tâm Nghiên cứu Nông nghiệp Quốc tế Australia ĐBSCL: Đồng sông Cửu Long ĐNB: Đông nam NN & PTNT: Nông nghiệp phát triển nông thôn P palmivora: Phytophthora palmvora PC – HĐ: Phytophthora palmvora phân lập từ ca cao lấy Hữu Định – Bến Tre PC – AK: Phytophthora palmvora phân lập từ ca cao lấy An Khánh – Bến Tre PS – LT: Phytophthora palmvora phân lập từ sầu riêng lấy Long Tiên – Đồng Nai PS – LK: Phytophthora palmvora phân lập từ sầu riêng lấy Long Khánh – Đồng Nai VCC: Ban điều phối phát triển ca cao Việt Nam WTO: (World Trade Organization) tổ chức thương mại giới x Bảng 5: Kết xử lý thống kê ANOVA chủng dòng P palmivora PC – AK lên trái giống ca cao giống sầu riêng Data file: &k0S&k2GTCC&k0S Title: chung trai bang dong nam phan lap tu ca cao Function: ANOVA-1 Data case no to 25 One way ANOVA grouped over variable (nt) with values from to Variable (ak) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 2039.093 291.299 7.847 0.0003 Within 16 593.957 37.122 Total 23 2633.050 Coefficient of Variation = 14.11% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 3.00 78.510 26.170 0.87 3.52 3.00 149.840 49.947 3.75 3.52 3.00 160.000 53.333 1.09 3.52 3.00 156.160 52.053 1.57 3.52 3.00 143.830 47.943 2.88 3.52 3.00 94.500 31.500 8.07 3.52 3.00 130.000 43.333 13.12 3.52 3.00 123.840 41.280 5.75 3.52 -Total 24.00 1036.680 43.195 10.70 2.18 Within 6.09 Bartlett's test Chi-square = 17.757 Number of Degrees of Freedom = Approximate significance = 0.000 58 Bảng 6: Kết trắc nghiệm phân hạng chủng dòng P palmivora PC – AK lên trái giống ca cao giống sầu riêng Data File : &k0S&k2GTCC&k0S Title : chung trai bang dong nam phan lap tu ca cao Case Range : 40 - 47 Variable : ak Function : &k0S&k2GRANGE&k0S Error Mean Square = 37.12 Error Degrees of Freedom = 16 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 14.53 s_ = 3.518 at alpha = 0.010 x &k2S Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean &k0S&k2G = = = = = = = = 26.17 49.95 53.33 52.05 47.94 31.50 43.33 41.28 C A A A A BC AB ABC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Ranked Order = = = = = = = = 53.33 52.05 49.95 47.94 43.33 41.28 31.50 26.17 A A A A AB ABC BC C Bảng 7: Kết xử lý T – test so sánh dòng P palmivora PC – HĐ PC – AK chủng lên trái giống ca cao giống sầu riêng Data file: Title: &k0S&k2GAK-HD&k0S t-test hai dong nam ak-hd Function: T-TEST SAMPLE ONE: -Variable : hd Cases through 25 Mean: Variance: Standard Deviation: 54.813 31.733 5.633 SAMPLE TWO: -Variable : ak Cases through 25 Mean: 43.195 Variance: 114.480 Standard Deviation: 10.700 F-TEST FOR THE HYPOTHESIS "VARIANCE = VARIANCE 2" F Value: 3.6076 Numerator degrees of freedom: 23 Denominator degrees of freedom: 23 Probability: 0.0032 59 Result: Significant F - Reject the Hypothesis T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: Standard Deviation of the difference: t' Value: Effective degrees of freedom: Probability of t': 5.2364 2.2883 5.0769 23 0.0000 Result: Significant t - Reject the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.01): 11.617 plus or minus 6.424 (5.193 through 18.042) (Ghi chú: Prob (t) = 0,0000 < 0,01 : giá trị trung bình mẫu có khác có ý nghĩa , từ chối giả thiết “giá trị trung bình mẫu nhau”) Bảng 8: Số liệu thu thí nghiệm chủng dòng P palmivora PC – HĐ PC – AK lên trái giống ca cao giống sầu riêng Dòng nấm PS - LK PS - LT LLL 46,17 72,50 LLL 45,50 70,17 LLL 45,00 70,67 TB 45,56 71,11 Bảng 9: Kết xử lý T – test so sánh đường kính vết bệnh chủng dòng P.palmivora PS – LT PS – LK lên trái giống sầu riêng Mongthong Data file: Title: &k0S&k2GT37&k0S dong nam PS-LT va PS-LK Function: T-TEST SAMPLE ONE: -Variable : d3 Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 45.557 0.345 0.587 SAMPLE TWO: -Variable : d7 Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 71.113 1.505 1.227 F-TEST FOR THE HYPOTHESIS "VARIANCE = VARIANCE 2" F Value: 4.3659 Numerator degrees of freedom: Denominator degrees of freedom: Probability: 0.3727 Result: Non-Significant F - Accept the Hypothesis T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" - 60 Variance of the difference between the means: Standard Deviation of the difference: t Value: Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.2328 0.4825 -52.9627 0.0004 Result: Significant t - Reject the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.01): 25.557 plus or minus 4.789 (20.768 through 30.346) (Ghi chú: Prob (t) = 0,0004 < 0,01 : giá trị trung bình mẫu có khác có ý nghĩa , từ chối giả thiết “giá trị trung bình mẫu nhau”) Bảng 10: Số liệu thu thí nghiệm chủng dòng P palmivora PC – HĐ lên giống ca cao giống sầu riêng điều kiện có vết thương Giống TD5 TD6 Mongthong Ri6 LLL 19,00 18,83 0,00 0,00 LLL 18,83 18,67 0,00 0,00 LLL 19,17 19,17 0,00 0,00 TB 19,00 18,89 0,00 0,00 Bảng 11: Kết xử lý T – test so sánh đường kính vết bệnh chủng dòng P.palmivora PC - HĐ lên giống ca cao TD5 TD6 có gây vết thương Data file: Title: &k0S&k2GLCC&k0S chung bang dong nam phan lap tu ca cao Function: T-TEST SAMPLE ONE: -Variable : 58g Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 19.000 0.029 0.170 SAMPLE TWO: -Variable : 68g Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 18.890 0.065 0.255 F-TEST FOR THE HYPOTHESIS "VARIANCE = VARIANCE 2" F Value: 2.2561 Numerator degrees of freedom: Denominator degrees of freedom: Probability: 0.6142 Result: Non-Significant F - Accept the Hypothesis T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 0.0030 61 Standard Deviation of the difference: t Value: Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0551 1.9973 0.1839 Result: Non-Significant t - Accept the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.01): 0.110 plus or minus 0.547 (-0.437 through 0.657) (Ghi chú: Prob (t) = 0,1839 > 0,05 : giá trị trung bình mẫu khơng có khác biệt, chấp nhận giả thiết “giá trị trung bình mẫu nhau”) Bảng 12: Số liệu thu thí nghiệm chủng dòng P palmivora PC – HĐ lên giống ca cao giống sầu riêng điều kiện không vết thương Giống TD5 TD6 Mongthong Ri6 LLL 15,33 15,17 0,00 0,00 LLL 15,83 15,67 0,00 0,00 LLL 16,17 16,17 0,00 0,00 TB 15,78 15,67 0,00 0,00 Bảng 13: Kết xử lý T – test so sánh đường kính vết bệnh chủng dòng P.palmivora PC - HĐ lên giống ca cao TD5 TD6 không gây vết thương Data file: Title: &k0S&k2GLCC&k0S chung bang dong nam phan lap tu ca cao Function: T-TEST SAMPLE ONE: -Variable : 58k Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 15.777 0.179 0.423 SAMPLE TWO: -Variable : 68k Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 15.670 0.250 0.500 F-TEST FOR THE HYPOTHESIS "VARIANCE = VARIANCE 2" F Value: 1.4003 Numerator degrees of freedom: Denominator degrees of freedom: Probability: 0.8332 Result: Non-Significant F - Accept the Hypothesis T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: Standard Deviation of the difference: t Value: Effective degrees of freedom: 0.0028 0.0533 2.0000 62 Probability of t: 0.1835 Result: Non-Significant t - Accept the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.01): 0.107 plus or minus 0.529 (-0.423 through 0.636) (Ghi chú: Prob (t) = 0,1835 > 0,05 : giá trị trung bình mẫu khơng có khác biệt, chấp nhận giả thiết “giá trị trung bình mẫu nhau”) Bảng 14: Số liệu thu thí nghiệm chủng dòng P palmivora PC – AK lên giống ca cao giống sầu riêng điều kiện có vết thương Giống TD5 TD6 Mongthong Ri6 LLL 17,33 17,83 0,00 0,00 LLL 17,50 18,17 0,00 0,00 LLL 18,17 18,33 0,00 0,00 TB 17,67 18,11 0,00 0,00 Bảng 15: Kết xử lý T – test so sánh đường kính vết bệnh chủng dòng P.palmivora PC - AK lên giống ca cao TD5 TD6 có gây vết thương Data file: Title: &k0S&k2GLCC&k0S chung bang dong nam phan lap tu ca cao Function: T-TEST SAMPLE ONE: -Variable : 515g Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 17.667 0.197 0.444 SAMPLE TWO: -Variable : 615g Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 18.110 0.065 0.255 F-TEST FOR THE HYPOTHESIS "VARIANCE = VARIANCE 2" F Value: 3.0251 Numerator degrees of freedom: Denominator degrees of freedom: Probability: 0.4969 Result: Non-Significant F - Accept the Hypothesis T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: Standard Deviation of the difference: t Value: 0.0225 0.1499 -2.9570 63 Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0979 Result: Non-Significant t - Accept the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.01): 0.443 plus or minus 1.488 (-1.045 through 1.931) (Ghi chú: Prob (t) = 0,0979 > 0,05 : giá trị trung bình mẫu khơng có khác biệt, chấp nhận giả thiết “giá trị trung bình mẫu nhau”) Bảng 16: Số liệu thu thí nghiệm chủng dòng P palmivora PC – AK lên giống ca cao giống sầu riêng điều kiện không vết thương Giống TD5 TD6 Mongthong Ri6 LLL 14,83 15,17 0,00 0,00 LLL 15,00 14,83 0,00 0,00 LLL 15,33 15,83 0,00 0,00 TB 15,05 15,28 0,00 0,00 Bảng 17: Kết xử lý T – test so sánh đường kính vết bệnh chủng dòng P.palmivora PC - AK lên giống ca cao TD5 TD6 không gây vết thương Data file: Title: &k0S&k2GLCC&k0S chung bang dong nam phan lap tu ca cao Function: T-TEST SAMPLE ONE: -Variable : 515k Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 15.053 0.480 0.693 SAMPLE TWO: -Variable : 615k Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 15.277 0.259 0.508 F-TEST FOR THE HYPOTHESIS "VARIANCE = VARIANCE 2" F Value: 1.8552 Numerator degrees of freedom: Denominator degrees of freedom: Probability: 0.7005 Result: Non-Significant F - Accept the Hypothesis T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: Standard Deviation of the difference: t Value: Effective degrees of freedom: Probability of t: Result: 0.0499 0.2233 -1.0000 0.4226 Non-Significant t - Accept the Hypothesis 64 Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.01): 0.223 plus or minus 2.217 (-1.993 through 2.440) (Ghi chú: Prob (t) = 0,4226 > 0,05 : giá trị trung bình mẫu khơng có khác biệt, chấp nhận giả thiết “giá trị trung bình mẫu nhau”) Bảng 18: Kết xử lý T – test so sánh đường kính vết bệnh chủng dòng P.palmivora PC – HĐ PC – AK lên giống ca cao TD5 TD6 Data file: Title: &k0S&k2G8-15&k0S so sanh dong nam PC-HD va PC-AK Function: T-TEST SAMPLE ONE: -Variable : d8 Cases through 14 Mean: Variance: Standard Deviation: 17.180 3.364 1.834 SAMPLE TWO: -Variable : d15 Cases through 14 Mean: 21.692 Variance: 341.240 Standard Deviation: 18.473 F-TEST FOR THE HYPOTHESIS "VARIANCE = VARIANCE 2" F Value: 101.4393 Numerator degrees of freedom: 12 Denominator degrees of freedom: 12 Probability: 0.0000 Result: Significant F - Reject the Hypothesis T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: Standard Deviation of the difference: t' Value: Effective degrees of freedom: Probability of t': 28.8951 5.3754 -0.8393 12 0.4177 Result: Non-Significant t - Accept the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.01): 4.512 plus or minus 16.419 (-11.908 through 20.931) (Ghi chú: Prob (t) = 0,4177 > 0,05 : giá trị trung bình mẫu khơng có khác biệt, chấp nhận giả thiết “giá trị trung bình mẫu nhau”) 65 Bảng 19: Số liệu thu thí nghiệm chủng dòng P palmivora PS – LK lên giống ca cao giống sầu riêng điều kiện có vết thương Giống TD5 TD6 Mongthong Ri6 LLL 0,00 0,00 19,33 20,67 LLL 0,00 0,00 20,00 20,83 LLL 0,00 0,00 20,33 21,50 TB 0,00 0,00 19,89 21,00 Bảng 20: Kết xử lý T – test so sánh đường kính vết bệnh chủng dòng P.palmivora PS – LK lên giống sầu riêng Mongthong Ri6 có gây vết thương Data file: &k0S&k2GLA&k0S Title: chung la bang dong nam phan lap tu sau rieng Function: T-TEST SAMPLE ONE: -Variable : m3g Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 19.887 0.260 0.510 SAMPLE TWO: -Variable : r3g Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 21.000 0.194 0.440 F-TEST FOR THE HYPOTHESIS "VARIANCE = VARIANCE 2" F Value: 1.3390 Numerator degrees of freedom: Denominator degrees of freedom: Probability: 0.8551 Result: Non-Significant F - Accept the Hypothesis T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: Standard Deviation of the difference: t Value: Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0225 0.1499 -7.4259 0.0177 Result: Non-Significant t - Accept the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.01): 1.113 plus or minus 1.488 (-0.375 through 2.601) (Ghi chú: Prob (t) = 0,0177 < 0,05 : giá trị trung bình mẫu có khác có ý nghĩa , từ chối giả thiết “giá trị trung bình mẫu nhau”) 66 Bảng 21: Số liệu thu thí nghiệm chủng dòng P palmivora PS – LK lên giống ca cao giống sầu riêng điều kiện không vết thương Giống TD5 TD6 Mongthong Ri6 LLL 0,00 0,00 16,33 19,17 LLL 0,00 0,00 15,83 18,17 LLL 0,00 0,00 16,50 18,67 TB 0,00 0,00 16,22 18,67 Bảng 22: Kết xử lý T – test so sánh đường kính vết bệnh chủng dòng P.palmivora PS – LK lên giống sầu riêng Mongthong Ri6 không gây vết thương Data file: &k0S&k2GLA&k0S Title: chung la bang dong nam phan lap tu sau rieng Function: T-TEST SAMPLE ONE: -Variable : m3k Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 16.220 0.121 0.348 SAMPLE TWO: -Variable : r3k Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 18.670 0.250 0.500 F-TEST FOR THE HYPOTHESIS "VARIANCE = VARIANCE 2" F Value: 2.0610 Numerator degrees of freedom: Denominator degrees of freedom: Probability: 0.6534 Result: Non-Significant F - Accept the Hypothesis T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: Standard Deviation of the difference: t Value: Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0404 0.2011 -12.1842 0.0067 Result: Significant t - Reject the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.01): 2.450 plus or minus 1.996 (0.454 through 4.446) (Ghi chú: Prob (t) = 0,0067 < 0,01 : giá trị trung bình mẫu có khác có ý nghĩa , từ chối giả thiết “giá trị trung bình mẫu nhau”) 67 Bảng 23: Số liệu thu thí nghiệm chủng dòng P palmivora PS – LT lên giống ca cao giống sầu riêng điều kiện không vết thương Giống TD5 TD6 Mongthong Ri6 LLL 0,00 0,00 22,17 24,00 LLL 0,00 0,00 22,67 25,83 LLL 0,00 0,00 23,17 25,83 TB 0,00 0,00 22,67 25,22 Bảng 24: Kết xử lý T – test so sánh đường kính vết bệnh chủng dòng P.palmivora PS – LT lên giống sầu riêng Mongthong Ri6 có gây vết thương Data file: Title: &k0S&k2GLA&k0S chung la bang dong nam phan lap tu sau rieng Function: T-TEST SAMPLE ONE: -Variable : m7g Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 22.670 0.250 0.500 SAMPLE TWO: -Variable : r7g Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 25.220 1.116 1.057 F-TEST FOR THE HYPOTHESIS "VARIANCE = VARIANCE 2" F Value: 4.4652 Numerator degrees of freedom: Denominator degrees of freedom: Probability: 0.3660 Result: Non-Significant F - Accept the Hypothesis T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: Standard Deviation of the difference: t Value: Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.1504 0.3879 -6.5746 0.0224 Result: Non-Significant t - Accept the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.01): 2.550 plus or minus 3.849 (-1.299 through 6.399) (Ghi chú: Prob (t) = 0,0224 < 0,05 : giá trị trung bình mẫu có khác có ý nghĩa , từ chối giả thiết “giá trị trung bình mẫu nhau”) 68 Bảng 25: Số liệu thu thí nghiệm chủng dòng P palmivora PS – LT lên giống ca cao giống sầu riêng điều kiện không vết thương Giống TD5 TD6 Mongthong Ri6 LLL 0,00 0,00 17,33 19,83 LLL 0,00 0,00 17,33 19,67 LLL 0,00 0,00 17,17 19,33 TB 0,00 0,00 17,28 19,61 Bảng 26: Kết xử lý T – test so sánh đường kính vết bệnh chủng dòng P.palmivora PS – LT lên giống sầu riêng Mongthong Ri6 không gây vết thương Data file: Title: &k0S&k2GLA&k0S chung la bang dong nam phan lap tu sau rieng Function: T-TEST SAMPLE ONE: -Variable : m7k Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 17.277 0.009 0.092 SAMPLE TWO: -Variable : r7k Cases through Mean: Variance: Standard Deviation: 19.610 0.065 0.255 F-TEST FOR THE HYPOTHESIS "VARIANCE = VARIANCE 2" F Value: 7.6406 Numerator degrees of freedom: Denominator degrees of freedom: Probability: 0.2315 Result: Non-Significant F - Accept the Hypothesis T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: Standard Deviation of the difference: t Value: Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0096 0.0982 -23.7595 0.0018 Result: Significant t - Reject the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.01): 2.333 plus or minus 0.975 (1.359 through 3.308) (Ghi chú: Prob (t) = 0,0018 < 0,01 : giá trị trung bình mẫu có khác có ý nghĩa , từ chối giả thiết “giá trị trung bình mẫu nhau”) 69 Bảng 27: Kết xử lý T – test so sánh đường kính vết bệnh chủng dòng P.palmivora PS – LT PS – LK lên giống sầu riêng Mongthong Ri6 Data file: Title: &k0S&k2G3-7&k0S so sanh dong nam PS-LT va PS-LK Function: T-TEST SAMPLE ONE: -Variable : Cases through 13 Mean: Variance: Standard Deviation: 18.944 3.589 1.895 SAMPLE TWO: -Variable : Cases through 13 Mean: Variance: Standard Deviation: 21.194 10.146 3.185 F-TEST FOR THE HYPOTHESIS "VARIANCE = VARIANCE 2" F Value: 2.8267 Numerator degrees of freedom: 11 Denominator degrees of freedom: 11 Probability: 0.0990 Result: Non-Significant F - Accept the Hypothesis T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: Standard Deviation of the difference: t Value: Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.1831 0.4279 -5.2583 11 0.0003 Result: Significant t - Reject the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.01): 2.250 plus or minus 1.329 (0.921 through 3.579) (Ghi chú: Prob (t) = 0,0003 < 0,01 : giá trị trung bình mẫu có khác có ý nghĩa , từ chối giả thiết “giá trị trung bình mẫu nhau”) 70 PHỤ LỤC Chuẩn bị môi trường PGA (Potato – Glucose – Agar) Thành phần gồm: 200 g khoai tây, 20 g glucose, 15 g agar, 1.000 ml nước cất vừa đủ Đầu tiên khoai tây gọt vỏ cắt nhỏ hình khối khoảng cm3, sau hầm với 1.000 ml nước cất giờ, tiếp tục lọc bỏ cặn điều chỉnh hỗn hợp với nước cất cho thể tích tổng cộng 1.000 ml cho glucose agar vào, cuối hấp khử trùng để đổ môi trường vào đĩa petri Chuẩn bị môi trường CRA (Carrot – Calcium carbonate – Agar) Thành phần gồm: 600 g cà rốt, 15 g CaCO3, 15 g agar, 1.000 ml nước cất vừa đủ Đầu tiên cà rốt gọt vỏ xay nhuyễn, sau hầm với 1.000 ml nước cất giờ, tiếp tục lọc bỏ cặn điều chỉnh hỗn hợp với nước cất cho thể tích tổng cộng 1.000 ml, để nguội cho CaCO3 vào, khuấy từ 30 phút để lắng giờ, tiếp tục lọc bỏ cặn CaCO3 cho agar vào, cuối hấp khử trùng để đổ môi trường vào đĩa petri Chuẩn bị môi trường WA (water – Agar) Thành phần gồm: 15g agar, 1.000 ml nước cất Cho 15 g agar vào 1.000 ml nước cất vừa đủa, hấp khử trùng để đổ môi trường vào đĩa Petri Định danh Phytophthora sp đặc điểm hình thái Đối với Phytophthora số lồi định danh cách dễ dàng Tuy nhiên, chúng có khác biệt khơng nhiều gây khó khăn việc định danh xác lồi Đặc trưng chủ yếu để phân biệt Phytophthora sp gồm: hình thành túi bào tử, hình thành cấu trúc phận hữu tính túi đực, túi nỗn, bào tử nỗn, chlamydospore hình thành sợi nấm (Andre Drenth Barbara Sennall, 2001) Theo Anonymous (1976) trích dẫn Ho H H (1995), kích thước túi bào tử (sporangia) P palmivora nằm khoảng 36 – 87 x 18 – 48 µm Tỷ lệ D/ R túi bào tử nằm khoảng 1,4 – 2,0 Kích thước túi noãn (oogonia) biến thiên 71 khoảng 24 – 32 µm Kích thước bào tử nỗn (oospore) biến thiên khoảng 20 – 28 µm Và kích thước bào tử hậu (chlamydospore) biến thiên khoảng 32 – 42 µm Theo Huang et al (1978) trích dẫn Ho H H (1995), kích thước túi bào tử (sporangia) P palmivora nằm khoảng 36 – 87 x 18 – 48 µm, trung bình 21 – 33 µm Tỷ lệ D/ R túi bào tử nằm khoảng 1,4 – 2,5 Theo Chen Hsieh (1977) trích dẫn Ho H H (1995), tỷ lệ D/ R túi bào tử P palmivora 1,54 Theo Chen Hsieh (1977) trích dẫn Ho H H (1995), kích thước túi bào tử (sporangia) P palmivora nằm khoảng (47 –) 54,4 (– 65) x (25 –) 32,5 (– 37,5) µm Tỷ lệ D/ R túi bào tử nằm khoảng (1,4 –) 1,6 (– 1,8) Kích thước túi nỗn (oogonia) biến thiên khoảng (15,5 –) 24,4 (– 30,9) µm Kích thước bào tử nỗn (oospore) biến thiên khoảng (13,6 –) 21,9 (– 30) µm Kích thước túi đực (antheridia) nằm khoảng (12 –) 21,9 (– 28) x (9 –) 14,7 (– 26) µm Và kích thước bào tử hậu (chlamydospore) biến thiên khoảng 30 – 40 µm 72 ... giống sầu riêng Mongthong iv Thí nghiệm khảo sát phản ứng số giống ca cao sầu riêng Phytophthora palmivora phân lập từ ca cao sầu riêng điều kiện phòng thí nghiệm Thí nghiệm 1, chủng dòng P palmivora. .. palmivora phân lập từ sầu riêng Thí nghiệm khảo sát phản ứng trái số giống ca cao sầu riêng Phytophthora palmivora phân lập từ ca cao sầu riêng điều kiện phòng thí nghiệm Trong thí nghiệm 1, tiến hành... cao sầu riêng điều kiện phòng thí nghiệm 35 4.3 Khảo sát phản ứng số giống ca cao sầu riêng Phytophthora palmivora phân lập từ ca cao sầu riêng điều kiện phòng thí nghiệm