Tuyển chọn chủng Bacillus subtilis ứng dụng trong phòng và trị bệnh đường tiêu hóa trên gà

234 205 0
Tuyển chọn chủng Bacillus subtilis ứng dụng trong phòng và trị bệnh đường tiêu hóa trên gà

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

CHƢƠNG 1: GIỚI THIỆU 1.1 . Tính cấp thiết của đề tài Sự phát triển mạnh mẽ của ngành chăn nuôi gà công nghiệp trong những thập niên gần đây đã mang lại nhiều lợi ích kinh tế - xã hội to lớn, nhưng cũng làm nảy sinh nhiều vấn đề cần được quan tâm xem xét. Một trong những vấn đề cần quan tâm giải quyết là việc sử dụng rộng rãi các chất kháng sinh để phòng bệnh và kích thích tăng trưởng trong chăn nuôi. Việc này đã làm gia tăng các dòng vi khuẩn kháng thuốc trong tự nhiên, có ảnh hưởng rất lớn tới hiệu quả sử dụng kháng sinh trong điều trị các bệnh viêm nhiễm trên người. Do vậy, nhiều nước tiên tiến đã quyết định hạn chế việc sử dụng các chất kháng sinh trong chăn nuôi. Để thay thế kháng sinh trong chăn nuôi, các nhà khoa học đã đưa ra nhiều giải pháp khác nhau trong đó có biện pháp sử dụng probiotic - những vi sinh vật sống hữu ích cho hoạt động tiêu hóa và có tác dụng tăng cường sức khỏe nói chung cho người và động vật. Bacillus subtilis là một vi khuẩn rất phổ biến trong tự nhiên, hầu như không có độc tính trên người cũng như nhiều loài động vật và có sức đề kháng cao với nhiều tác nhân vật lý và hóa học. Do vậy, từ lâu vi khuẩn này được chọn nghiên cứu để làm probiotic cho người và vật nuôi theo mô hình công nghiệp. Tuy nhiên, B. subtilis rất đa dạng về các đặc tính sinh học nên không phải tất cả các chủng đều có thể sử dụng làm probiotic và mỗi chủng probiotic chỉ phù hợp và có hiệu quả khi sử dụng cho một đối tượng nhất định. Đề tài “Tuyển chọn chủng Bacillus subtilis ứng dụng trong phòng bệnh nhiễm khuẩn đường tiêu hóa trên gà” được thực hiện nhằm nghiên cứu tìm giải pháp mới thay thế sử dụng kháng sinh trong chăn nuôi, nâng cao năng suất, hiệu quả trong chăn nuôi gà công nghiệp và giảm bớt nguy cơ lan rộng các dòng vi khuẩn đề kháng kháng sinh trong tự nhiên. 1.2. Mục tiêu - Phân lập được ít nhất 01 chủng Bacillus subtilis tại một số tỉnh ĐBSCL có các đặc tính probiotic như: khả năng sinh enzyme tiêu hóa (amylase, protease, lipase); chịu được tác động của dịch tiêu hóa (dịch vị, muối mật), khả năng bám dính vào niêm mạc ruột và đối kháng với một số vi khuẩn gây bệnh đường ruột (S. enterica, E. coli). - Xác định được liều dùng hiệu quả của chủng probiotic phân lập được trong phòng bệnh đường ruột ở gà do E. coli và S. enterica gây ra.

BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ LÊ THỊ HẢI YẾN TUYỂN CHỌN CHỦNG BACILLUS SUBTILIS ỨNG DỤNG TRONG PHÕNG BỆNH NHIỄM KHUẨN ĐƯỜNG TIÊU HÓA TRÊN LUẬN ÁN TIẾN SĨ CHUYÊN NGÀNH BỆNH LÝ HỌC CHỮA BỆNH VẬT NUÔI MÃ SỐ: 62 64 01 02 CẦN THƠ, 2018 MỤC LỤC Lời cam kết kết i Lời cảm ơn ii Tóm lược iii Abstract v Danh sách bảng x Danh sách hình xii Danh mục từ viết tắt xv CHƢƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu 1.3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 1.4 Những đóng góp luận án 1.5 Ý nghĩa thực tiễn luận án CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU …………………………… 2.1 Tổng quan probiotic 2.1.1 Lịch sử probiotic 2.1.2 Các định nghĩa probiotic 2.1.3 Xu hướng sử dụng probiotic 2.1.4 Vai trò chế tác động probiotic 2.1.5 Cơ chế tác động probiotic gia cầm 2.1.6 Các chủng vi khuẩn thường dùng làm probiotic 12 2.1.7 Các tiêu để chọn vi sinh vật làm probiotic 13 2.1.8 Yêu cầu an toàn chủng vi sinh vật probiotic 14 2.2 Tổng quan Bacillus subtilis 15 2.2.1 Đặc điểm chung giống Bacillus 15 2.2.2 Đặc điểm loài Bacillus subtilis 16 vii 2.2.3 Dinh dưỡng tăng trưởng 22 2.2.4 Các chất B subtilis sinh 23 2.2.5 Tính đối kháng B subtilis 25 2.2.6 Một số phương pháp nghiên cứu tính đối kháng B subtilis vi sinh vật gây bệnh 26 2.3 Hệ tiêu hóa vi sinh vật đƣờng ruột 27 2.3.1 Hệ tiêu hóa gia cầm khác biệt so với động vật hữu nhũ 27 2.3.2 Vi sinh vật đường ruột tác động chúng đến vật nuôi 30 2.4 Một số vi khuẩn gây bệnh đƣờng tiêu hóa thƣờng gặp 31 2.4.1 Salmonella 31 2.4.2 E coli 36 2.4.3.Clostridium perfringens 39 2.5 Một số nghiên cứu probiotic giới Việt Nam 42 2.5.1 Trên giới 42 2.5.2 Tại Việt Nam 43 2.6 Một số nghiên cứu ứng dụng B subtilis 44 2.6.1 B subtilis ứng dụng cho người vật nuôi 44 2.6.2 B subtilis sử dụng cho gia cầm 45 CHƢƠNG PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 47 3.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 47 3.2 Phƣơng tiện nghiên cứu 47 3.2.1 Vật liệu 47 3.2.2 Dụng cụ 47 3.2.3 Thiết bị 47 3.2.4 Hóa chất môi trường phân lập nuôi cấy vi khuẩn 48 3.3 Nội dung nghiên cứu phƣơng pháp nghiên cứu 49 3.3.1 Nội dung nghiên cứu 49 3.3.2 Phân lập chủng Bacillus subtilis 50 viii 3.3.3 Tuyển chọn chủng B subtilis có đặc tính probiotic 56 3.3.4 Đánh giá tính an tồn tác dụng chế phẩm 61 3.4 Xử lý số liệu 65 CHƢƠNG KẾT QUẢ THẢO LUẬN 66 4.1 Phân lập định danh vi khuẩn Bacillus subtilis 66 4.1.1 Kết phân lập vi khuẩn Bacillus spp 66 4.1.2 Kết định danh Bacillus spp 67 4.2 Kết khảo sát đặc tính probiotic 77 4.2.1 Kết khảo sát khả chịu nhiệt độ cao 77 4.2.2 Khả nhạy/ kháng kháng sinh 78 4.2.3 Kết khảo sát khả sinh enzyme ngoại bào 81 4.2.4 Khả đối kháng với chủng vi sinh vật gây bệnh 85 4.2.5 Khả chịu acid dày muối mật 98 4.2.6 Khả bám dính 104 4.2.7 Khả sống vi khuẩn đường ruột 109 4.3 Kết thí nghiệm, đánh giá tác dụng chế phẩm 111 4.3.1 Kết thí nghiệm 1… 111 4.3.2 Kết thí nghiệm 114 4.3.3 Kết thí nghiệm 123 4.4 Đăng ký trình tự B subtilis Genbank…………………… 131 CHƢƠNG KẾT LUẬN ĐỀ NGHỊ 133 5.1 Kết luận 133 5.2 Đề nghị 134 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ 135 TÀI LIỆU THAM KHẢO 136 PHỤ LỤC 154 ix DANH SÁCH BẢNG Bảng 2.1 Bậc phân loại Bacillus subtilis 15 Bảng 2.2 Một số đặc điểm Bacillus subtilis 22 Bảng 2.3 Một số loại enzyme B subtilis sinh tổng hợp 23 Bảng 3.1 Phân bố mẫu 50 Bảng 3.2 Thành phần hóa chất cho phản ứng PCR 54 Bảng 3.3 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 62 Bảng 3.4 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 64 Bảng 3.5 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 65 Bảng 4.1 Đặc điểm khuẩn lạc hình thái tế bào quan sát kính hiển vi 296 chủng vi khuẩn 66 Bảng 4.2 Kết sàng lọc vi khuẩn test sinh hóa 68 Bảng 4.3 Kết định danh 29 chủng vi khuẩn kit API CH50B 70 Bảng 4.4 Kết định danh phương pháp giải trình tự gen 16S rRNA 74 Bảng 4.5 Kết khảo sát khả chịu nhiệt chủng B subtilis 77 Bảng 4.6 Kết kháng sinh đồ 21 chủng B subtilis chọn lọc 79 Bảng 4.7 Khả sinh enzyme ngoại bào 21 chủng B subtilis 81 Bảng 4.8 Kết hoạt lực enzyme amylase, protease, lipase 10 chủng B subtilis khảo sát 83 Bảng 4.9 Khoảng cách kháng khuẩn chủng B subtilis phương pháp kẻ vạch vng góc 86 Bảng 4.10 Kết đối kháng trực tiếp B subtilis AG27, AG60, VL05 VL28 E coli 88 Bảng 4.11 Kết đối kháng trực tiếp B subtilis AG27, AG60, VL05 VL28 S enterica 91 Bảng 4.12 Kết đối kháng trực tiếp B subtilis AG27, AG60, VL05 VL28 Staphylococcus spp 93 Bảng 4.13 Kết đối kháng trực tiếp B subtilis AG27, AG60, VL05 VL28 Streptococcus spp 96 x Bảng 4.14 Kết khảo sát acid- muối mật pH pH 99 Bảng 4.15 Kết khảo sát acid- muối mật pH 101 Bảng 4.16 Kết khảo sát acid- muối mật pH 103 Bảng 4.17 Kết khảo sát khả tự bám dính 105 Bảng 4.18 Kết khảo sát khả bám dính với E coli S enterica 107 Bảng 4.19 Khả sống B subtilis VL28 đường ruột 109 Bảng 4.20 Tăng trọng, thức ăn tiêu thụ FCR qua tuần thí nghiệm 112 Bảng 4.21 Tỉ lệ chết, tăng trọng FCR giai đoạn 1-14 ngày tuổi thí nghiệm 115 Bảng 4.22 Tỉ lệ chết, tăng trọng FCR giai đoạn 15- 28 ngày tuổi…117 Bảng 4.23 Tăng trọng FCR giai đoạn 29-56 ngày tuổi thí nghiệm 120 Bảng 4.24 Tỉ lệ chết, tăng trọng FCR giai đoạn 1-56 ngày tuổi thí nghiệm 122 Bảng 4.25 Tỉ lệ chết, tăng trọng FCR giai đoạn 1-14 ngày tuổi… 123 Bảng 4.26 Tỉ lệ chết, tăng trọng FCR giai đoạn 15- 28 ngày tuổi…124 Bảng 4.27 Kết test sinh hóa E coli bệnh phẩm gan……………… 127 Bảng 4.28 Tỉ lệ chết, tăng trọng FCR giai đoạn 29-56 ngày tuổi thí nghiệm 129 Bảng 4.29 Tỉ lệ chết, tăng trọng FCR giai đoạn 1-56 ngày tuổi thí nghiệm 130 xi DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1 Biểu đồ tăng trưởng sử dụng probiotic Hình 2.2 Sơ đồ tổng hợp vai trò chế probiotic sức khỏe Hình 2.3 Sơ đồ mơ tả tác động qua lại vk probiotic niêm mạc ruột Hình 2.4 Sự tương tác sản phẩm loại trừ cạnh tranh, probiotic chất kích thích miễn dịch, khả miễn dịch đường ruột gia cầm 11 Hình 2.5 Mơ hình cấu tạo tế bào vi khuẩn Bacillus spp 16 Hình 2.6 Mơ hình vị trí nhiễm sắc thể gen B subtilis 17 Hình 2.7 Sơ đồ trình hình thành bào tử B subtilis 19 Hình 2.8 Sự biệt hóa tế bào B subtilis 21 Hình 2.9 Sơ đồ hệ tiêu hóa 28 Hình 3.1 Sơ đồ sàng lọc, định danh vi khuẩn B subtilis 55 Hình 3.2 Sơ đồ kiểm tra khả chịu acid dày muối mật vi khuẩn B subtilis……………………………………………………………………… 59 Hình 3.3 Chuồng thí nghiệm……………………………………………… 62 Hình 4.1 Khuẩn lạc vi khuẩn Bacillus spp mơi trường TSA hình thái kính hiển vi 67 Hình 4.2 Kết test sinh hóa 69 Hình 4.3 Định danh kit API CH50B 71 Hình 4.4 Sản phẩm PCR chủng B subtilis nghiên cứu 73 Hình 4.5 Sơ đồ chọn lọc định danh vi khuẩn B subtilis 76 Hình 4.6 Khả chịu nhiệt chủng B subtilis phân lập 78 Hình 4.7 Mức độ nhạy cảm kháng sinh 21 chủng vi khuẩn B subtilis…….80 Hình 4.8 Kết kháng sinh đồ chủng B subtilis AG27 VL28 81 Hình 4.9 Khả sinh enzyme ngoại bào chủng B subtilis AG27 82 Hình 4.10 Khả đối kháng vi khuẩn gây bệnh chủng B subtilis 87 Hình 4.11 Hiệu kháng khuẩn AG27, AG60, VL05 VL28 E coli 90 xii Hình 4.12 Hiệu đối kháng AG27, AG60, VL05 VL28 S enterica 92 Hình 4.13 Hiệu đối kháng AG27, AG60, VL05 VL28 Staphylococcus spp 94 Hình 4.14 Hiệu đối kháng AG27, AG60, VL05 VL28 Streptococcus spp 97 Hình 4.15 Hoạt tính đối kháng VL28 với E coli, S enterica, Staphylococcus spp Streptococcus spp 98 Hình 4.16 Khả chịu pH chủng B subtilis 100 Hình 4.17 Khả chịu pH chủng B subtilis 102 Hình 4.18 Khả chịu pH chủng B subtilis 104 Hình 4.19 Khả tự bám dính chủng B subtilis 105 Hình 4.20 Khả bám dính với vi khuẩn gây bệnh AG27 VL28 108 Hình 4.21 Khả bám dính chủng VL28 AG27 biểu mô ruột 108 Hình 4.22 Khả tồn B subtilis VL28 ruột non, manh tràng, ruột già 110 Hình 4.23 Tóm tắt q trình phân lập chọn lọc vi khuẩn probiotic……….111 Hình 4.24 Biểu đồ tăng trọng FCR qua tuần thí nghiệm 113 Hình 4.25 FCR tăng trọng giai đoạn 1-14 ngày tuổi thí nghiệm 116 Hình 4.26 Tăng trọng FCR giai đoạn 15-28 ngày tuổi 118 Hình 4.27 Bệnh tích thí nghiệm gây nhiễm S enterica 119 Hình 4.28 Khuẩn lạc S enterica mơi trường SS kết test sinh hóa 119 Hình 4.29 Kết giải trình tự vi khuẩn S enterica phân lập từ lách bệnh 120 Hình 4.30 Tăng trọng FCR giai đoạn 29-56 ngày tuổi thí nghiệm 121 Hình 4.31 Tăng trọng FCR giai đoạn 15-28 ngày tuổi thí nghiệm 125 Hình 4.32 Bệnh tích thí nghiệm gây nhiễm E coli 126 Hình 4.33 Khuẩn lạc E coli môi trường Mac Conkey EMB 126 Hình 4.34 Test sinh hóa vi khuẩn E coli 127 xiii Hình 4.35 Kết giải trình tự vi khuẩn E coli phân lập từ gan bệnh 128 Hình 4.36 Tăng trọng FCR giai đoạn 29-56 ngày tuổi thí nghiệm 129 Hình 4.37 Kết đăng ký trình tự gen B subtilis VL28 ngân hàng gen NCBI………………………………………………………………………… 131 xiv DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT Viết tắt APC ATCC BAU CE CFU CLSI DSM FCR HE MHA MIC NA PBS PCR SC TCA TSB Viết đầy đủ (tiếng Anh) Tiếng Việt Antigen presenting cells Tế bào trình diện kháng nguyên (tế bào đuôi gai hay đại thực bào) American Type Culture Collection Bảo tàng giống chuẩn Hoa Kỳ Bacterial Amylase Units Đơn vị hoạt lực amylase vi khuẩn Competitive exclusion Loại trừ cạnh tranh Colony-forming unit Đơn vị hình thành khuẩn lạc Clinical and Laboratory Viện Tiêu chuẩn lâm sàng Standards Institute Xét nghiệm Difco sporulation Medium Môi trường bào tử hóa Feed conversion ratio Hệ số chuyển hóa thức ăn Hematoxylin- eosin Thuốc nhuộm tiêu mô Mueller Hinton agar Môi trường làm kháng sinh đồ Minimum inhibitory concentration Nồng độ ức chế tối thiểu Nutrient agar Thạch dinh dưỡng Phosphate buffered saline Muối đệm phosphate Polymerase Chain Reaction Phản ứng chuỗi trùng hợp Secretory component Thành phần kích thích tiết immunoglobulin Trichloroacetic acid Hóa chất dùng cho phản ứng kết tủa protein Tryptone Soya Broth Môi trường dinh dưỡng xv Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 67.69 0.4018 ĐC (+) 68.32 0.4018 NT1 68.71 0.4018 NT2 69.40 0.4018 NT3 68.42 0.4018 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT2 69.40 A NT1 68.71 A NT3 68.42 A ĐC (+) 68.32 A ĐC (-) 67.69 A Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: Tăng trọng 1-14 ngày versus Nghiệm thức Factor Type Levels Values Nghiệm thức fixed ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for Tăng trọng 0-14 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 53.829 53.829 13.457 15.09 0.000 Error 10 8.918 8.918 0.892 Total 14 62.746 Least Squares Means for Tăng trọng 1-14 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 125.4 0.5452 ĐC (+) 124.7 0.5452 NT1 129.7 0.5452 NT2 125.1 0.5452 NT3 127.5 0.5452 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT1 129.7 A NT3 127.5 A B ĐC (-) 125.4 B C NT2 125.1 B C ĐC (+) 124.7 C Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: Thức ăn 1-14 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for Thức ăn 0-14 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 305.500 305.500 76.375 7.99 0.004 Error 10 95.618 95.618 9.562 Total 14 401.117 Least Squares Means for Thức ăn 1-14 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 248.9 1.785 ĐC (+) 247.2 1.785 NT1 248.9 1.785 NT2 255.7 1.785 NT3 258.7 1.785 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence 210 Nghiệm thức NT3 NT2 NT1 ĐC (-) ĐC (+) N 3 3 Mean 258.7 255.7 248.9 248.9 247.2 Grouping A A B B C B C C Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: FCR 1-14 ngày versus Nghiệm thức Factor Type Levels Values Nghiệm thức fixed ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for FCR 0-14 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 0.0240589 0.0240589 0.0060147 15.74 0.000 Error 10 0.0038209 0.0038209 0.0003821 Total 14 0.0278798 Least Squares Means for FCR 1-14 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 1.985 0.01129 ĐC (+) 1.982 0.01129 NT1 1.919 0.01129 NT2 2.027 0.01129 NT3 2.029 0.01129 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT3 2.029 A NT2 2.027 A ĐC (-) 1.985 A ĐC (+) 1.982 A NT1 1.919 B Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: % số chết 1-14 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for % số chết 7-21 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 11.616 11.616 2.904 1.00 0.452 Error 10 29.040 29.040 2.904 Total 14 40.656 Least Squares Means for % số chết 7-21 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 2.200 0.9839 ĐC (+) 2.200 0.9839 NT1 2.200 0.9839 NT2 3.300 0.9839 NT3 4.400 0.9839 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT3 4.400 A NT2 3.300 A ĐC (+) 2.200 A ĐC (-) 2.200 A NT1 2.200 A Means that not share a letter are significantly different 211 General Linear Model: Tăng trọng 15-28 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for Tăng trọng 15-28 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 33378.7 33378.7 8344.7 127.94 0.000 Error 10 652.2 652.2 65.2 Total 14 34030.9 Least Squares Means for Tăng trọng 15-28 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 226.0 4.663 ĐC (+) 122.2 4.663 NT1 252.8 4.663 NT2 234.4 4.663 NT3 239.2 4.663 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT1 252.8 A NT3 239.2 A B NT2 234.4 A B ĐC (-) 226.0 B ĐC (+) 122.2 C Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: Thuc an 15-28 versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for Thuc an 15-28 ngay, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 36757.2 36757.2 9189.3 38.86 0.000 Error 10 2365.0 2365.0 236.5 Total 14 39122.2 Least Squares Means for Thuc an 15-28 Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 508.0 8.879 ĐC (+) 450.7 8.879 NT1 548.2 8.879 NT2 572.2 8.879 NT3 588.6 8.879 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N NT3 NT2 NT1 ĐC (-) ĐC (+) Means that Mean 588.6 572.2 548.2 508.0 450.7 not Grouping A A A B B C share a letter are significantly different 212 General Linear Model: FCR 15-28 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Analysis of Variance for Source DF Seq SS Nghiệm thức 4.6289 Error 10 0.1029 Total 14 4.7319 Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 FCR 15-28 ngày, using Adjusted SS for Tests Adj SS Adj MS F P 4.6289 1.1572 112.43 0.000 0.1029 0.0103 Least Squares Means for FCR 15-28 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 2.248 0.05858 ĐC (+) 3.691 0.05858 NT1 2.169 0.05858 NT2 2.444 0.05858 NT3 2.463 0.05858 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping ĐC (+) 3.691 A NT3 2.463 B NT2 2.444 B ĐC (-) 2.248 B C NT1 2.169 C Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: Tỉ lệ chết 29-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Analysis of Variance for Source DF Seq SS Nghiệm thức 721.04 Error 10 120.51 Total 14 841.55 Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Tỉ lệ chết 29-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Adj SS Adj MS F P 721.04 180.26 14.96 0.000 120.51 12.05 Least Squares Means for Tỉ lệ chết 29-56 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 2.299 2.004 ĐC (+) 20.370 2.004 NT1 1.110 2.004 NT2 4.806 2.004 NT3 7.418 2.004 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping ĐC (+) 20.370 A NT3 7.418 B NT2 4.806 B ĐC (-) 2.299 B NT1 1.110 B Means that not share a letter are significantly different 213 General Linear Model: tăng trọng 29-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for tăng trọng 29-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Source Nghiệm thức Error Total DF 10 14 Seq SS 105627 762 106388 Adj SS 105627 762 Adj MS 26407 76 F 346.76 P 0.000 Least Squares Means for tăng trọng 29-56 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 518.2 5.038 ĐC (+) 307.5 5.038 NT1 542.3 5.038 NT2 493.5 5.038 NT3 496.8 5.038 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT1 542.3 A ĐC (-) 518.2 B NT3 496.8 B C NT2 493.5 C ĐC (+) 307.5 D Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: thức ăn 29-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for thức ăn 29-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 527211 527211 131803 56.13 0.000 Error 10 23481 23481 2348 Total 14 550692 Least Squares Means for thức ăn Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 1738 27.98 ĐC (+) 1480 27.98 NT1 1877 27.98 NT2 1956 27.98 NT3 1999 27.98 29-56 ngày Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT3 1999 A NT2 1956 A NT1 1877 A ĐC (-) 1738 B ĐC (+) 1480 C Means that not share a letter are significantly different 214 General Linear Model: FCR 29-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for FCR Source Nghiệm thức Error Total DF 10 14 Seq SS 4.0071 0.0970 4.1041 29-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Adj SS 4.0071 0.0970 Least Squares Means for FCR Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 3.354 0.05687 ĐC (+) 4.811 0.05687 NT1 3.462 0.05687 NT2 3.965 0.05687 NT3 4.023 0.05687 Adj MS 1.0018 0.0097 F 103.24 P 0.000 29-56 ngày Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping ĐC (+) 4.811 A NT3 4.023 B NT2 3.965 B NT1 3.462 C ĐC (-) 3.354 C Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: tang 1-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for tang 0-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 260185 260185 65046 2552.44 0.000 Error 10 255 255 25 Total 14 260440 Least Squares Means for tang 0-56 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 869.7 2.915 ĐC (+) 554.4 2.915 NT1 924.8 2.915 NT2 852.9 2.915 NT3 863.5 2.915 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT1 924.8 A ĐC (-) 869.7 B NT3 863.5 B C NT2 852.9 C ĐC (+) 554.4 D Means that not share a letter are significantly different 215 General Linear Model: Thuc an 1-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for Thuc an 0-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Source Nghiệm thức Error Total DF 10 14 Seq SS 960410 3908 964317 Adj SS 960410 3908 Adj MS 240102 391 F 614.41 P 0.000 Least Squares Means for Thuc an 0-56 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 2495 11.41 ĐC (+) 2101 11.41 NT1 2674 11.41 NT2 2757 11.41 NT3 2792 11.41 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT3 2792 A NT2 2757 A NT1 2674 B ĐC (-) 2495 C ĐC (+) 2101 D Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: FCR 1-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for FCR 0-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 1.66602 1.66602 0.41651 643.16 0.000 Error 10 0.00648 0.00648 0.00065 Total 14 1.67250 Least Squares Means for FCR 0-56 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 2.869 0.01469 ĐC (+) 3.790 0.01469 NT1 2.892 0.01469 NT2 3.232 0.01469 NT3 3.234 0.01469 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping ĐC (+) 3.790 A NT3 3.234 B NT2 3.232 B NT1 2.892 C ĐC (-) 2.869 C Means that not share a letter are significantly different 216 Thí nghiệm 3: Đánh giá khả bảo vệ probiotic gây nhiễm với E.coli so với kháng sinh General Linear Model: tỉ lệ chết 1-14 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for tỉ lệ chết 0-14 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 4.436 4.436 1.109 0.50 0.737 Error 10 22.178 22.178 2.218 Total 14 26.613 Least Squares Means for tỉ lệ chết 0-14 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 2.220 0.8598 ĐC (+) 2.220 0.8598 NT1 2.220 0.8598 NT2 3.330 0.8598 NT3 3.330 0.8598 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT3 3.330 A NT2 3.330 A ĐC (+) 2.220 A ĐC (-) 2.220 A NT1 2.220 A Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: Thức ăn 1-14 ngày versus Nghiệm thức Factor Type Levels Values Nghiệm thức fixed ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for Thuc an 0-14 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 178.70 178.70 44.67 3.71 0.042 Error 10 120.32 120.32 12.03 Total 14 299.02 Least Squares Means for Thuc an 0-14 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 246.6 2.003 ĐC (+) 247.1 2.003 NT1 246.6 2.003 NT2 255.2 2.003 NT3 251.7 2.003 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT2 255.2 A NT3 251.7 A ĐC (+) 247.1 A NT1 246.6 A ĐC (-) 246.6 A Means that not share a letter are significantly different 217 General Linear Model: Tang 1-14 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for Tang 0-14 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 87.950 87.950 21.987 26.42 0.000 Error 10 8.323 8.323 0.832 Total 14 96.272 Least Squares Means for Tang 0-14 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 124.2 0.5267 ĐC (+) 123.5 0.5267 NT1 130.3 0.5267 NT2 126.2 0.5267 NT3 124.8 0.5267 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT1 130.3 A NT2 126.2 B NT3 124.8 B C ĐC (-) 124.2 B C ĐC (+) 123.5 C Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: FCR 1-14 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for FCR 0-14 ngày, using Adjusted SS for Tests Source Nghiệm thức Error Total DF 10 14 Seq SS 0.033609 0.010176 0.043785 Adj SS 0.033609 0.010176 Adj MS 0.008402 0.001018 F 8.26 P 0.003 Least Squares Means for FCR 0-14 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 1.986 0.01842 ĐC (+) 2.001 0.01842 NT1 1.893 0.01842 NT2 2.022 0.01842 NT3 2.017 0.01842 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT2 2.022 A NT3 2.017 A ĐC (+) 2.001 A ĐC (-) 1.986 A NT1 1.893 B Means that not share a letter are significantly different 218 General Linear Model: FCR 15-28 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for FCR 15-28 ngày, using Adjusted SS for Tests Source Nghiệm thức Error Total DF 10 14 Seq SS 7.5204 0.0410 7.5614 Adj SS 7.5204 0.0410 Adj MS 1.8801 0.0041 F 458.07 P 0.000 Least Squares Means for FCR 15-28 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 2.191 0.03699 ĐC (+) 4.011 0.03699 NT1 2.235 0.03699 NT2 2.249 0.03699 NT3 2.297 0.03699 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping ĐC (+) 4.011 A NT3 2.297 B NT2 2.249 B NT1 2.235 B ĐC (-) 2.191 B Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: tăng trọng 15-28 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for tăng trọng 15-28 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 36368.8 36368.8 9092.2 165.61 0.000 Error 10 549.0 549.0 54.9 Total 14 36917.8 Least Squares Means for tăng trọng 15-28 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 238.2 4.278 ĐC (+) 119.1 4.278 NT1 246.9 4.278 NT2 242.2 4.278 NT3 240.6 4.278 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT1 246.9 A NT2 242.2 A NT3 240.6 A ĐC (-) 238.2 A ĐC (+) 119.1 B Means that not share a letter are significantly different 219 General Linear Model: Thức ăn 15-28 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for Thức ăn 15-28 ngày, using Adjusted SS for Tests Source Nghiệm thức Error Total DF 10 14 Seq SS 12034.7 3866.5 15901.2 Adj SS 12034.7 3866.5 Adj MS 3008.7 386.6 F 7.78 P 0.004 Least Squares Means for Thức ăn 15-28 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 521.8 11.35 ĐC (+) 477.5 11.35 NT1 551.9 11.35 NT2 544.4 11.35 NT3 552.5 11.35 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT3 552.5 A NT1 551.9 A NT2 544.4 A ĐC (-) 521.8 A B ĐC (+) 477.5 B Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: tỉ lệ chết 15-28 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for tỉ lệ chết 15-28 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 2290.77 2290.77 572.69 50.12 0.000 Error 10 114.26 114.26 11.43 Total 14 2405.03 Least Squares Means for tỉ lệ chết 15-28 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 1.111 1.952 ĐC (+) 35.249 1.952 NT1 4.559 1.952 NT2 5.747 1.952 NT3 8.046 1.952 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping ĐC (+) 35.249 A NT3 8.046 B NT2 5.747 B NT1 4.559 B ĐC (-) 1.111 B Means that not share a letter are significantly different 220 General Linear Model: tỉ lệ chết 29-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for tỉ lệ chết 29-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 59.96 59.96 14.99 1.24 0.356 Error 10 121.30 121.30 12.13 Total 14 181.26 Least Squares Means for tỉ lệ chết 29-56 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 4.483 2.011 ĐC (+) 6.576 2.011 NT1 1.149 2.011 NT2 6.041 2.011 NT3 6.180 2.011 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping ĐC (+) 6.576 A NT3 6.180 A NT2 6.041 A ĐC (-) 4.483 A NT1 1.149 A Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: tăng trọng 29-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for tăng trọng 29-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 130433 130433 32608 466.64 0.000 Error 10 699 699 70 Total 14 131132 Least Squares Means for tăng trọng 29-56 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 480.8 4.826 ĐC (+) 283.3 4.826 NT1 545.6 4.826 NT2 513.1 4.826 NT3 502.7 4.826 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT1 545.6 A NT2 513.1 B NT3 502.7 B C ĐC (-) 480.8 C ĐC (+) 283.3 D Means that not share a letter are significantly different 221 General Linear Model: Thức ăn 29-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for Thức ăn 29-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 729505 729505 182376 117.65 0.000 Error 10 15502 15502 1550 Total 14 745006 Least Squares Means for Thức ăn 29-56 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 1666 22.73 ĐC (+) 1258 22.73 NT1 1791 22.73 NT2 1816 22.73 NT3 1864 22.73 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT3 1864 A NT2 1816 A NT1 1791 A ĐC (-) 1666 B ĐC (+) 1258 C Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: FCR 29-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Type Levels Values Nghiệm thức fixed ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for FCR 29-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 2.40420 2.40420 0.60105 165.82 0.000 Error 10 0.03625 0.03625 0.00362 Total 14 2.44045 Least Squares Means for FCR Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 3.465 0.03476 ĐC (+) 4.440 0.03476 NT1 3.283 0.03476 NT2 3.539 0.03476 NT3 3.708 0.03476 29-56 ngày Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping ĐC (+) 4.440 A NT3 3.708 B NT2 3.539 C ĐC (-) 3.465 C NT1 3.283 D Means that not share a letter are significantly different 222 General Linear Model: FCR 1-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for FCR 0-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Source Nghiệm thức Error Total DF 10 14 Seq SS 1.52635 0.03138 1.55773 Adj SS 1.52635 0.03138 Adj MS 0.38159 0.00314 F 121.59 P 0.000 Least Squares Means for FCR 1-56 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 2.887 0.03234 ĐC (+) 3.690 0.03234 NT1 2.806 0.03234 NT2 2.930 0.03234 NT3 3.033 0.03234 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping ĐC (+) 3.690 A NT3 3.033 B NT2 2.930 B C ĐC (-) 2.887 B C NT1 2.806 C Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: Thuc an 1-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for Thuc an 0-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 928683 928683 232171 166.98 0.000 Error 10 13904 13904 1390 Total 14 942587 Least Squares Means for Thuc an 1-56 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 2435 21.53 ĐC (+) 1961 21.53 NT1 2589 21.53 NT2 2583 21.53 NT3 2633 21.53 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT3 2633 A NT1 2589 A NT2 2583 A ĐC (-) 2435 B ĐC (+) 1961 C Means that not share a letter are significantly different 223 General Linear Model: tang 1-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for tang 0-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Source Nghiệm thức Error Total DF 10 14 Seq SS 308927 413 309340 Adj SS 308927 413 Adj MS 77232 41 F 1870.33 P 0.000 Least Squares Means for tang 1-56 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 843.2 3.710 ĐC (+) 525.9 3.710 NT1 922.7 3.710 NT2 881.5 3.710 NT3 868.0 3.710 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping NT1 922.7 A NT2 881.5 B NT3 868.0 B ĐC (-) 843.2 C ĐC (+) 525.9 D Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: tỉ lệ chết 1-56 ngày versus Nghiệm thức Factor Nghiệm thức Type fixed Levels Values ĐC (-), ĐC (+), NT1, NT2, NT3 Analysis of Variance for tỉ lệ chết 0-56 ngày, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Nghiệm thức 2574.81 2574.81 643.70 86.90 0.000 Error 10 74.07 74.07 7.41 Total 14 2648.89 Least Squares Means for tỉ lệ chết 1-56 ngày Nghiệm thức Mean SE Mean ĐC (-) 5.556 1.571 ĐC (+) 42.222 1.571 NT1 7.778 1.571 NT2 14.444 1.571 NT3 16.667 1.571 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nghiệm thức N Mean Grouping ĐC (+) 42.222 A NT3 16.667 B NT2 14.444 B C NT1 7.778 C D ĐC (-) 5.556 D Means that not share a letter are significantly different 224 ... B subtilis đa dạng đặc tính sinh học nên khơng phải tất chủng sử dụng làm probiotic chủng probiotic phù hợp có hiệu sử dụng cho đối tượng định Đề tài Tuyển chọn chủng Bacillus subtilis ứng dụng. .. trình nghiên cứu chọn lọc chủng B subtilis địa có hiệu phòng bệnh đường tiêu hóa gà vùng Đồng sơng Cửu Long, đặc biệt bệnh S enterica E coli gây - Đã phân lập giám định xác 21 chủng B subtilis địa... sử dụng cho vật nuôi Việc lựa chọn chủng vi sinh vật, tiêu chuẩn phải an tồn cho q trình sản xuất ứng dụng, có khả sống sót chiếm lĩnh đường tiêu hóa vật chủ Các tiêu chuẩn lựa chọn hợp lý hóa

Ngày đăng: 11/05/2018, 11:06

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan