BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NI – THÚ Y KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG BẢO HỘ SAU TIÊM PHÒNG VẮC XIN NHŨ DẦU TỤ HUYẾT TRÙNG TRÂU BÒ CHỦNG P52 TRÊN BÒ SỮA TẠI MỘT SỐ QUẬN, HUYỆN THUỘC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Sinh viên thực hiện: LÊ VĂN TRUNG Lớp: DH07DY Ngành: Dược Thú Y Niên khóa: 2007 – 2012 Tháng 08/2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NI – THÚ Y LÊ VĂN TRUNG KHẢO SÁT KHẢ NĂNG BẢO HỘ SAU TIÊM PHÒNG VẮC XIN NHŨ DẦU TỤ HUYẾT TRÙNG TRÂU BÒ CHỦNG P52 TRÊN BÒ SỮA TẠI MỘT SỐ QUẬN, HUYỆN THUỘC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Khóa luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp Bác sỹ thú y Giáo viên hướng dẫn TS LÊ ANH PHỤNG Tháng 08/2012 XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN Họ tên sinh viên thực hiện: LÊ VĂN TRUNG Tên luận văn: “Khảo sát khả bảo hộ sau tiêm phòng vắc xin nhũ dầu tụ huyết trùng trâu bò chủng P52 bò sữa số quận, huyện thuộc Tp HCM” Đã hoàn thành luận văn theo yêu cầu giáo viên hướng dẫn ý kiến đóng góp hội đồng chấm thi tốt nghiệp khoa Chăn nuôi – Thú y, trường đại học Nông Lâm Tp HCM Ngày tháng năm 2012 Giáo viên hướng dẫn TS LÊ ANH PHỤNG i LỜI CẢM TẠ Chúng chân thành cảm ơn: Ban giám hiệu trường đại học Nông Lâm Tp HCM Ban chủ nhiệm khoa quý Thầy Cô Khoa Chăn nuôi – Thú y Thầy Cô trường đại học nơng lâm Tp HCM Đã tận tình dạy dỗ, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu cho suốt quãng đời sinh viên Chúng tơi xin bày tỏ lòng biết ơn đến: TS Lê Anh Phụng ThS Huỳnh Thị Thu Hương Anh Chị môn Siêu vi – Huyết thuộc chi cục thú y Tp HCM Đã tận tình giúp đỡ, hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn: Ban lãnh đạo chi cục thú y Tp HCM Ban lãnh đạo công ty thuốc thú y NAVETCO Đã tạo điều kiện giúp đỡ cho suốt thời gian thực tập tốt ngiệp Tôi xin cảm ơn bạn lớp Dược Y 33 trãi qua thời gian dài học tập, sẻ chia buồn vui, khó khăn vất vả suốt năm qua trình thực đề tài Sau hết tơi xin dành tình cảm chân thành gửi đến người bạn thân thuộc bên cạnh động viên giúp đỡ suốt quãng thời gian dài Lê Văn Trung ii TÓM TẮT KHÓA LUẬN Đề tài nghiên cứu “Khảo sát khả bảo hộ sau tiêm phòng vắc xin nhũ dầu tụ huyết trùng trâu bò chủng P52 bò sữa số quận, huyện thuộc Tp HCM” tiến hành Trạm Chẩn Đoán Xét Nghiệm Điều Trị thuộc Chi Cục Thú Y Tp HCM công ty thuốc thú y Trung Ương II – NAVETCO thời gian từ tháng 01/2012 đến tháng 07/2012 Thí nghiệm bố trí theo kiểu nghiên cứu cắt ngang xác định kháng thể huyết bò sữa sau tiêm phòng số quận, huyện thuộc Tp HCM (ngoại thành: Bình Chánh, Hóc Mơn, Củ Chi quận ven: quận 12, Bình Tân, Thủ Đức, quận 9) kỹ thuật ELISA Kết thu được: Tỷ lệ mẫu huyết có kháng thể đạt bảo hộ 81,25% Tỷ lệ mẫu huyết có kháng thể đạt bảo hộ bò sữa khu vực ngoại thành 81,85%, khu vực quận ven 80,15% Tỷ lệ mẫu huyết có kháng thể đạt bảo hộ bò sữa thời điểm tháng sau tiêm phòng 85,22%, tháng 75,32% Tỷ lệ mẫu huyết có kháng thể đạt bảo hộ bò sữa thấp bò sữa – < 24 tháng tuổi (78,43%), bò sữa > 36 tháng tuổi (81,75%) cao bò sữa 24 – 36 tháng tuổi (84,76%) Tỷ lệ mẫu huyết có kháng thể đạt bảo hộ bò sữa cao quy mô chăn nuôi 10 – 20 (84,06%), quy mô > 20 (80,20%), thấp quy mô < 10 (77,27%) Tỷ lệ mẫu huyết có kháng thể đạt bảo hộ bò sữa cao nhóm máu lai F3 (86,14%), F2 (77,61%) thấp hệ F1 (76,47%) iii MỤC LỤC Trang Trang tựa Phiếu xác nhận giáo viên hướng dẫn i Lời cảm tạ ii Tóm tắt khóa luận iii Mục lục iv Danh sách chữ viết tắt vii Danh sách bảng xiii Danh sách hình ix Danh sách sơ đồ biểu đồ ix Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu Chương TỔNG QUAN 2.1 Lịch sử bệnh tụ huyết trùng trâu bò 2.1.1 Lịch sử nghiên cứu bệnh giới 2.1.2 Lịch sử nghiên cứu nước 2.2 Một số đặc điểm dịch tễ học 2.2.1 Phân bố bệnh giới 2.2.2 Phân bố bệnh nước 2.2.3 Động vật cảm thụ 2.3 Bệnh tụ huyết trùng trâu bò iv 2.3.1 Phân loại, đặc điểm hình thái nhuộm màu vi khuẩn 2.3.2 Đặc điểm nuôi cấy 2.3.3 Đặc tính sinh hóa 2.3.4 Cấu trúc kháng nguyên độc tố 2.3.5 Khả tồn vi khuẩn 10 2.3.6 Cách sinh bệnh lây lan 11 2.3.7 Chẩn đốn bệnh tụ huyết trùng trâu bò 12 2.4 Điều trị phòng bệnh tụ huyết trùng trâu bò 12 2.4.1 Điều trị 12 2.4.2 Phòng bệnh 13 2.5 Vắc xin miễn dịch 14 2.5.1 Vắc xin 14 2.5.2 Miễn dịch 15 2.5.3 Các yếu tố ảnh hướng đến khả đáp ứng miễn dịch thú sau tiêm phòng vắc xin 17 2.6 Sơ lược sản xuất sử dụng vắc xin tụ huyết trùng trâu bò Việt Nam 17 2.7 Một số phương pháp kiểm tra đáp ứng miễn dịch 20 2.7.1 Phương pháp bảo hộ thụ động chuột (Passive Mouse Protection Test – PMPT) 20 2.7.2 Kỹ thuật ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) 20 2.8 Một số cơng trình có liên quan 21 Chương NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 3.1 Thời gian địa điểm 22 3.2 Đối tượng nghiên cứu 22 3.3 Nội dung nghiên cứu 22 3.4 Phương pháp nghiên cứu 22 3.4.1 Dụng cụ hóa chất 22 v 3.4.2 Phương pháp tiến hành 23 3.4.3 Các tiêu theo dõi 29 3.5 Phương pháp xử lý số liệu 30 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 4.1 Tỷ lệ bò sữa có kháng thể đạt bảo hộ sau tiêm phòng vắc xin nhũ dầu tụ huyết trùng trâu bò chủng P52 31 4.2 Tỷ lệ bảo hộ bệnh tụ huyết trùng bò sữa tiêm phòng thời điểm khảo sát 33 4.3 Tỷ lệ bảo hộ bệnh tụ huyết trùng bò sữa theo lứa tuổi khảo sát 34 4.4 Tỷ lệ bảo hộ bệnh tụ huyết trùng bò sữa theo khu vực khảo sát 35 4.5 Tỷ lệ bảo hộ bệnh tụ huyết trùng bò sữa thời điểm khảo sát theo khu vực 37 4.6 Tỷ lệ bảo hộ bệnh tụ huyết trùng bò sữa theo quy mô chăn nuôi 39 4.7 Tỷ lệ bảo hộ bệnh tụ huyết trùng bò sữa theo nhóm máu lai 40 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 42 5.1 Kết luận 42 5.2 Đề nghị 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO 43 PHỤ LỤC 47 vi DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT DNA : Deoxyribonucleic acid Ctv : Cộng tác viên ELISA : Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay ET : ELISA titration NAVETCO : National Veterinary Company OD : Optical Density PBS : phosphate buffer saline PBST : phosphate buffer saline Tween TMB : tetra methyl benzidine Tp HCM : Thành phố Hồ Chí Minh PCR : Polymerase Chain Reation PMPT : Passive Mouse Protection test IHA : Indirect Haemagglutination YPC : yeast extract pepton L – cystine vii DANH SÁCH CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1 Một số đặc tính sinh hóa P multocida 9  Bảng3.1 Phân bố mẫu huyết bò sữa kiểm tra kháng thể tụ huyết trùng 24  Bảng 4.1 Tỷ lệ mẫu huyết bò sữa có kháng thể đạt bảo hộ 31  Bảng 4.2 Tỷ lệ mẫu huyết bò sữa có kháng thể đạt bảo hộ thời điểm khảo sát 33  Bảng 4.3 Tỷ lệ mẫu huyết bò sữa có kháng thể đạt bảo hộ theo lứa tuổi 34  Bảng 4.4 Tỷ lệ mẫu huyết bò sữa có kháng thể đạt bảo hộ theo khu vực 35  Bảng 4.5 Tỷ lệ mẫu huyết bò sữa có kháng thể đạt bảo hộ thời điểm khảo sát theo khu vực 38  Bảng 4.6 Tỷ lệ huyết bò sữa có kháng thể bảo hộ theo quy mơ chăn nuôi 39  Bảng 4.7 Tỷ lệ mẫu huyết bò sữa có kháng thể đạt bảo hộ theo nhóm máu lai 40  viii Bảng 4.5 Tỷ lệ mẫu huyết bò sữa có kháng thể đạt bảo hộ thời điểm khảo sát theo khu vực Thời điểm sau tiêm phòng tháng tháng Tổng Khu vực ngoại thành Số mẫu Số mẫu Tỷ lệ xét đạt bảo hộ (%) nghiệm 210 176 83,81 38 27 71,05 248 203 81,85 Khu vực quận ven Số mẫu Số mẫu Tỷ lệ xét đạt bảo hộ (%) nhiệm 20 20 100,00 116 89 76,72 136 109 80,15 Qua Bảng 4.5 cho thấy thời điểm khảo sát tháng sau tiêm phòng tỷ lệ bảo hộ hai khu vực đạt cao Khu vực ngoại thành, vào thời điểm tháng khảo sát 210 mẫu huyết có 176 mẫu có kháng thể đạt bảo hộ, tỷ lệ bảo hộ 83,81% thời điểm tháng giảm xuống 71,05%, so sánh thống kê trắc nghiệm 2 khác biệt hai thời điểm khảo sát khơng có ý nghĩa (p>0,05) Ở thời điểm tháng sau tiêm phòng tỷ lệ bảo hộ giảm xuống, nguyên nhân chăm sóc quản lý hay chế độ dinh dưỡng khơng hợp lý làm ảnh hưởng sức khỏe bò sữa, lượng kháng thể giảm nhanh tỷ lệ bảo hộ giảm theo Khu vực quận ven, thời điểm tháng tỷ lệ bảo hộ (100%) cao so với thời điểm tháng (76,72%) so sánh thống kê khác biệt tỷ lệ có ý nghĩa (p 0,05 Qua Bảng 4.6 cho thấy tỷ lệ mẫu huyết có kháng thể đạt bảo hộ quy mô chăn nuôi cao, đạt mức bảo hộ vắc xin Tỷ lệ bảo hộ đạt cao quy mô 10 – 20 (84,06%), quy mô >20 đạt tỷ lệ bảo hộ 80,20% thấp quy mơ 0,05 Kết nhận định, bò sữa đối tượng vật ni có giá trị kinh tế cao nên chủ ni đặc biệt đầu tư chăm sóc, theo dõi bảo vệ đàn bò sữa Hơn Tp HCM, bò sữa thường ni theo kiểu hộ gia đình mật độ ni bố trí hợp lý Các hộ ni bò sữa với số lượng nhân cơng lao động người gia đình, việc đầu tư chăm sóc tốt Ở hộ chăn ni bò sữa với số lượng nhiều, trình độ chủ ni cao nên việc đầu tư bảo vệ đàn bò sữa tốt Ngoài ra, vắc xin nhũ dầu tụ huyết trùng trâu bò chủng P52 có hiệu lực bảo hộ tốt nên kết khảo sát đạt cao Vậy, kết khảo sát cho thấy quy mô chăn nuôi không ảnh hưởng đến tỷ lệ đáp ứng miễn dịch bò sữa sau tiêm phòng 39 4.7 Tỷ lệ bảo hộ bệnh tụ huyết trùng bò sữa theo nhóm máu lai Chăn ni bò sữa Việt Nam phát triển, người ta ni giống bò lai giữa: bò đực Hà Lan lai với bò ta Việt Nam Quần thể bò lai đa số gồm nhóm: F1, F2 F3 Để có sở cho việc đánh giá khả đáp ứng miễn dịch cá thể mang nhóm máu lai khác nhau, chúng tơi tiến hành kiểm tra đáp ứng miễn dịch đối tượng Kết trình bày Bảng 4.7 Bảng 4.7 Tỷ lệ mẫu huyết bò sữa có kháng thể đạt bảo hộ theo nhóm máu lai Nhóm máu lai F1 F2 F3 Tổng Số mẫu xét nghiệm 17 201 166 384 Số mẫu đạt bảo hộ 13 156 143 312 Tỷ lệ (%) 76,47 77,61 86,14 81,25 P >0,05 Từ kết Bảng 4.7 cho thấy tỷ lệ mẫu huyết có kháng thể đạt bảo hộ nhóm máu lai cao đạt mức bảo hộ vắc xin Tỷ lệ bảo hộ đạt cao nhóm máu lai F3 (86,14%), tỷ lệ bảo hộ tương đối đồng nhóm máu lai F1 F2 Bò sữa mang nhóm máu lai F3 thường cho suất tốt bò sữa mang nhóm máu lai F2 thích hợp với điều kiện chăn nuôi Việt Nam nhiều Từ kết khảo sát chúng tơi, bò sữa mang nhóm máu lai F3 đạt tỷ lệ bảo hộ cao nhất, nguyên nhân nhóm máu lai F3 mang gen bò ngoại nhiều nên đáp ứng miễn dịch tốt Hơn nữa, vắc xin sử dụng phù hợp với nhóm máu lai F3 nên đáp ứng miễn dịch tốt nhóm máu lai F1 F2 Trong bò sữa mang nhóm máu lai F2 thích nghi với điều kiện chăn nuôi địa phương hơn, tỷ lệ đáp ứng miễn dịch lại thấp nhóm máu lai F3 trình trạng khai thác sữa đối tượng mức ảnh hưởng đến đáp ứng miễn dịch 40 Số bò sữa mang nhóm máu lai F1 mà chúng tơi lấy mẫu khảo sát (17 mẫu) nên kết mang tính chất tham khảo Qua phân tích thống kê trắc nghiệm 2, kết cho thấy khác biệt tỷ lệ bảo hộ nhóm máu lai khơng có ý nghĩa với p > 0,05 Vậy, kết khảo sát cho thấy nhóm máu lai khơng ảnh hưởng đến tỷ lệ đáp ứng miễn dịch sau tiêm vắc xin tụ huyết trùng bò sữa 41 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Qua thời gian thực đề tài “Khảo sát khả bảo hộ sau tiêm phòng vắc xin nhũ dầu tụ huyết trùng trâu bò chủng P52 bò sữa số quận, huyện thuộc Tp HCM” Trạm Chẩn Đoán Xét Nghiệm Điều Trị thuộc Chi Cục Thú Y Tp HCM công ty thuốc thú y Trung ương – NAVETCO, chúng tơi có kết luận sau: Tỷ lệ bảo hộ 384 bò sữa khảo sát đạt cao 81,25% Tỷ lệ đáp ứng miễn dịch bò sữa sau tiêm phòng vắc xin thời điểm tháng sau tiêm phòng 85,22% thời điểm tháng 75,32% Các yếu tố như: khu vực, lứa tuổi, quy mơ chăn ni, nhóm máu lai khơng có ảnh hưởng đến tỷ lệ đáp ứng miễn dịch bò sữa sau tiêm phòng vắc xin nhũ dầu tụ huyết trùng trâu bò chủng P52 5.2 Đề nghị Đối với cán thú y cần tuyên truyền cơng tác tiêm phòng nâng cao tỷ lệ tiêm phòng, chủ ni cần ý chăm sóc tốt cho bò sữa có nhóm máu lai F2 khu vực quận ven Nghiên cứu với số mẫu nhiều thời gian kéo dài từ đến tháng 12 tháng sau tiêm phòng Nghiên cứu thời gian bảo hộ kháng thể mẹ truyền bệnh tụ huyết trùng bò sữa bê tháng tuổi 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Nguyễn Đình Bảng Nguyễn Thị Kim Hương, 2003 Vaccine chế phẩm miễn dịch phòng điều trị Nhà xuất y học Bộ Nông Nghiệp Phát Triển Nông Thôn, 2005 Danh mục bệnh truyền nhiễm phải tiêm phòng bắt buộc Quyết định số 63/2005/QĐ – BNN, ngày 25/03/2005 Tô Minh Châu Trần Thị Bích Liên, 2006 Vi khuẩn nấm gây bệnh thú y Tủ sách Đại Học Nơng Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh Võ Minh Châu Nguyễn Văn Dư, 2005 Dịch tễ học bệnh tụ huyết trùng Chuyên đề dịch tễ Đỗ Tuấn Cương, Tơ Long Thành, Đặng Vũ Hồng Trương Văn Dung, 2004 Thiết lập phương pháp miễn dịch chẩn đốn bệnh tụ huyết trùng trâu bò Khoa học kỹ thuật thú y, tập XI, tr 46 – 52 Trương Văn Dung ctv, 1998 Nghiên cứu đặc tính định type huyết học vi khuẩn tụ huyết trùng trâu bò phân lập số tỉnh phía Bắc Khoa học kỹ thuật thú y, tập V, tr 49 – 54 Đỗ Được, 1998 Vài nét tình hình bệnh đàn trâu bò Lạng Sơn năm 1991 – 1996 Khoa học kỹ thuật thú y, tập V, tr 92 – 93 Trần Xn Hạnh, 2010 Hồn thiện qui trình sản xuất sử dụng vắc xin nhủ dầu tụ huyết trùng trâu bò chủng P52 phòng bệnh tụ huyết trùng cho đàn trâu bò ni Việt Nam Chương trình khoa học công nghệ trọng điểm cấp nhà nước KC 04/06 – 10 dự án sản xuất thử nghiệm Trần Xuân Hạnh, Tô Thị Phấn, Phạm Hào Quang, Nguyễn Thiên Thu, Phạm Quang Thái, Trần Thị Lâm Huỳnh Khương Hữu Duyên, 2009 Kiểm tra đáp ứng miễn dịch trâu bò sau tiêm vắc xin tụ huyết trùng trâu bò phương pháp ELISA Khoa học kỹ thuật thú y, tập XVI, tr 31 – 38 10 Trần Xuân Hạnh ctv, 2007 Độ dài bảo quản độ dài miễn dịch vắc xin tụ huyết trùng trâu bò, chủng P52 Khoa học kỹ thuật thú y, tập XIV, số 43 11 Bùi Quý Huy, 1998 Một số đặc điểm bệnh tụ huyết trùng trâu bò Việt Nam năm qua Khoa học kỹ thuật thú y, tập V, tr 94 – 95 12 Trương Thị Hồng Hoa, 2006 Sản xuất sử dụng kháng thể cộng hợp dê kháng IgG thỏ gắn men peroxidase phương pháp miễn dịch bệnh lý chẩn đốn bệnh tụ huyết trùng trâu bò Khoa học kỹ thuật thú y, tập VIII 13 Cao Văn Hồng, Nguyễn Như Thanh Trương Quang, 2002 Nghiên cứu mùa dịch ảnh hưởng yếu tố khí hậu đến bệnh tụ huyết trùng gia súc Đắc Lắc Khoa học kỹ thuật thú y, tập IX, tr 29 – 34 14 Lâm Thị Thu Hương, 2009 Miễn dịch học thú y Tủ sách Đại Học Nông Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh 15 Dương Thế Long, 1994 Ảnh hưởng thời tiết, khí hậu tới tình hình dịch tụ huyết trùng trâu bò Sơn La Khoa học kỹ thuật thú y, tập I, tr 59 – 63 16 Nguyễn Ngã, Lê Minh Tâm, Nguyễn Thiên Thu, Nguyễn Văn Sa Nguyễn Thị Xuân Liên, 1995 Tính chất kháng nguyên độc lực vi trùng tụ huyết trùng trâu bò khu vực miền Trung biện pháp phòng trừ Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập II, tr 53 – 62 17 Hoàng Xuân Nghinh, Trương Văn Dung, Nguyễn Văn Huyến, Tô Long Thành, Lê Thị Bình, Đỗ Tuấn Cương, Nguyễn Lại Hồn, Trần Ngọc Ánh, Đặng Vũ Hoàng, Lê Huỳnh Anh Lê Văn Phan, 2004 Nghiên cứu khả đáp ứng miễn dịch vắc xin phòng bệnh tụ huyết trùng trâu bò Nhà xuất nông nghiệp Hà Nội, Việt Nam 18 Trần Thanh Phong, 2003 Một số bệnh truyền nhiễm bò Tủ sách Đại Học Nơng Lâm Tp HCM 19 Lê Anh Phụng, 2011 Bài giảng bệnh truyền nhiễm trâu bò Tủ sách Đại Học Nơng Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh 20 Nguyễn Vĩnh Phước, 1979 Bệnh tụ huyết trùng trâu bò Giáo trình bệnh truyền nhiễm gia súc Nhà xuất nông thôn 44 21 Trần Văn Phương, 2012 Điều tra tỷ lệ bệnh tụ huyết trùng trâu bò huyện Lộc Ninh tỉnh Bình Phước đánh giá hiệu phòng bệnh vắc xin Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 22 Phan Thanh Phượng, Đào Trọng Đạt, Trần Minh Tứ, Hoàng Xuân Nghinh, Nguyễn Xuân Bình, Lê Lập Lê Thị Soa, 1994 Nghiên cứu chế tạo sử dụng vắc xin tụ huyết trùng Khoa học kỹ thuật thú y, tập I, tr – 12 23 Phạm Quang Thái, Trần Xuân Hạnh, Tô Thị Phấn, Nguyễn Thiên Thu, Phạm Hào Quang Đỗ Văn Dũng, 2007 An toàn hiệu lực vắc xin tụ huyết trùng nhũ hóa chủng P52 Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XIV, tr 16 – 23 24 Đoàn Thị Băng Tâm, 1987 Bệnh động vật nuôi Nhà xuất khoa học kỹ thuật Hà Nội 25 Nguyễn Mạnh Thắng, Nguyễn Ngọc Hải Trần Đình Từ, 2008 Khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến phát triển vi khuẩn Pasteurella multocida Khoa học kỹ thuật thú y, tập XV, tr 52 – 57 26 Trần Đình Từ, Nguyễn Mạnh Thắng, Võ Công Minh, Trần Đức Minh, Nguyễn Tấn, Đỗ Văn Dũng, Đỗ Thị Lợi, Phạm Quang Thái, Nguyễn Thị Bích Hà Lê Cơng Tiến, 2000 Nghiên cứu quy trình cơng nghệ lên men vi khuẩn để áp dụng sản xuất loại vaccine phòng bệnh tụ huyết trùng cho gia súc gia cầm Trong báo cáo khoa học sở Khoa học – công nghệ thành phố Hồ Chí Minh TÀI LIỆU TIẾNG NƯỚC NGỒI 27 Bain R.V.S., De Alwis M.C.L., Carter G.R and Gupta B.K., 1982 Haemorrhagic septicaemia Animal production and health Paper No 33, FAO, Rome 28 De Alwis M.C.L., 1992 Pasteurellosis in production animals In an international workshop sponsed by ACIAR held Bali, Indonesia, 10 – 13 August 1992 29 Gilmour N.J.L., 1992 Pasteurellosis in production animal ACIAR proceedings 43 30 El – Eragi A.M., Mukhtar M.M and Bakiker S.H., 2001 Specific antibodies of Pasteurella multocida in newborn calves of vaccinated dams Trop Amin Health Prod 33: 275 – 286 45 31 Heddleston K.L and Reber P.A., 1972 Fowl cholera cross – immunity induce in tuckeys with formaline – killed in vivo propagated Pasteurella multocida 16: 578 – 586 32 Namioka S., 1978 Pasteurella multocida biochemical characteristic and serotype Cornell Veterinarian 51: 261 – 278 33 Neramitmansook P., 1992.Country report – Thailand In: Pasteurellosis in production animals, An international workshop at Bali, Indonesia, 10 – 13 August 1992, ACIAR Proceeding No 43, pp 234 – 236 34 OIE, 2004 Manual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals 46 PHỤ LỤC Phụ lục Công thức dung dịch đệm Coating buffer 10X: (Carbonate/bicarbonate buffer pH 9,6; 0,1M) Na2CO3 4.24g NaHCO3 5.04g Nước cất vừa đủ 1000 ml Chỉnh pH đến 9.6 Bảo quản độ C Khi cần sử dụng pha thành dung dịch 1X Dung dịch PBS 10X (Phosphate Buffered Saline): NaCl 85 g Na2HPO4 16,7 g NaH2P04 5,7 g Nước cất lần vừa đủ 1000 ml Chỉnh pH 7,2 – 7,4 Khi cần sử dụng pha thành dung dịch 1X Dung dịch đệm dùng để rửa (PBST): PBS 1X 1000 ml Tween 20 0,5 ml Dung dịch sữa không kem 5% Dung dịch PBS 1X 100 ml Bột sữa không kem (Oxoid) 5g Substrate solution: ml acetate buffer 1X + 80 µl 3, 5’, 5, 5’ – Tetramethyl benzidine (TMB – Sigma) + 1µl H2O2 30% 47 Phụ lục Xử lý thống kê Tỷ lệ huyết bò sữa có kháng thể bảo hộ theo thời điểm khảo sát Chi-Square Test Không bảo hộ 34 43,13 1,931 Bảo hộ 196 186,88 0,446 Total 230 38 28,88 2,884 116 125,13 0,665 154 Total 72 312 384 Chi-Sq = 5,925 DF = P-Value = 0,015 Tỷ lệ huyết bò sữa có kháng thể bảo hộ theo lứa tuổi Chi-Square Test Không bảo hộ 33 28,69 0,648 Bảo hộ 120 124,31 0,150 Total 153 16 19,69 0,691 89 85,31 0,159 105 23 23,63 0,017 103 102,38 0,004 126 Total 72 312 384 Chi-Sq = 1,668 DF = P-Value = 0,434 48 Tỷ lệ huyết bò sữa có kháng thể bảo hộ theo khu vực Chi-Square Test Không bảo hộ 45 46,50 0,048 Bảo hộ 203 201,50 0,011 Total 248 27 25,50 0,088 109 110,50 0,020 136 Total 72 312 384 Chi-Sq = 0,168 DF = P-Value = 0,682 Tỷ lệ huyết bò sữa có kháng thể bảo hộ khu vực ngoại thành Chi-Square Test Không bảo hộ 4,54 0,520 Bảo hộ 22 20,46 0,115 Total 25 38 27,04 4,446 111 121,96 0,986 149 13,43 6,619 70 60,57 1,467 74 Total 45 203 248 Chi-Sq = 14,153 DF = P-Value = 0,001 49 Tỷ lệ huyết bò sữa có kháng thể bảo hộ khu vực quận ven Chi-Square Test Không bảo hộ 21 13,70 3,892 Bảo hộ 48 55,30 0,964 Total 69 4,76 0,012 19 19,24 0,003 24 6,15 6,154 31 24,85 1,524 31 2,38 0,802 11 9,62 0,199 12 Total 27 109 136 Chi-Sq = 13,550 DF = P-Value = 0,004 Tỷ lệ huyết bò sữa có kháng thể bảo hộ thời điểm khảo sát theo khu vực ngoại thành Chi-Square Test Không bảo hộ 34 38,10 0,442 Bảo hộ 176 171,90 0,098 Total 210 11 6,90 2,444 27 31,10 0,542 38 Total 45 203 248 Chi-Sq = 3,526 DF = P-Value = 0,060 50 Tỷ lệ huyết bò sữa có kháng thể bảo hộ thời điểm khảo sát theo khu vực quận ven Chi-Square Test Không bảo hộ 3,97 3,971 Bảo hộ 20 16,03 0,984 Total 20 27 23,03 0,685 89 92,97 0,170 116 Total 27 109 136 Chi-Sq = 5,808 DF = P-Value = 0,016 Tỷ lệ huyết bò sữa có kháng thể bảo hộ theo quy mô chăn nuôi Chi-Square Test Không bảo hộ 10 8,25 0,371 Bảo hộ 34 35,75 0,086 Total 44 22 25,88 0,580 116 112,13 0,134 138 40 37,88 0,119 162 164,13 0,028 202 Total 72 312 384 Chi-Sq = 1,318 DF = P-Value = 0,517 51 Tỷ lệ huyết bò sữa có đủ kháng thể bảo hộ theo nhóm máu lai Chi-Square Test Không bảo hộ 3,19 0,207 Bảo hộ 13 13,81 0,048 Total 17 45 37,69 1,419 156 163,31 0,327 201 23 31,13 2,121 143 134,88 0,489 166 Total 72 312 384 Chi-Sq = 4,612 DF = P-Value = 0,100 52 ... Pasteurella boviseptica (trên bò), Pasteurella oviseptica (trên cừu) Pasteurella lepseptica (trên thỏ) Năm 1929, Toyley Wilson đề nghị đặt tên cho vi khuẩn Pasteurella septic Sau đó, đến năm 1939,... 1980 đến 1993 biến động từ 21 đến 155 con/tháng (Dương Thế Long, 1994) Miền Trung Bệnh tụ huyết trùng trâu bò tỉnh miền Trung xảy chủ yếu vào lúc giao mùa (tháng – tháng – 10), tỷ lệ trâu bò bị... Heddleston ctv (1972) xác định vi khuẩn P multocida có 16 type kháng nguyên thân (O) khác ký hiệu từ – 16 Hiện để xác định serotype vi khuẩn P multocida kết hợp cách phân loại Carter – Heddleston,