BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NI – THÚ Y *************** KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA MỘT SỐ LOẠI THẢO DƯỢC TRÊN VI KHUẨN E COLI Sinh viên thực : LÊ THỊ HUYỀN TRANG Lớp : DH07DY Ngành : Dược Thú Y Niên khóa : 2007 – 2012 Tháng 8/2012 BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NI – THÚ Y *************** LÊ THỊ HUYỀN TRANG KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA MỘT SỐ LOẠI THẢO DƯỢC TRÊN VI KHUẨN E COLI Khóa luận đệ trình để đáp ứng u cầu cấp Bác sỹ thú y chuyên ngành Dược Thú Y Giáo viên hướng dẫn PGS TS NGUYỄN NGỌC HẢI Tháng 8/2012 i XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN Họ tên sinh viên thực tập: LÊ THỊ HUYỀN TRANG Tên luận văn: “KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA MỘT SỐ LOẠI THẢO DƯỢC TRÊN VI KHUẨN E COLI” Đã hoàn thành luận văn theo yêu cầu giáo viên hướng dẫn ý kiến nhận xét đóng góp hội đồng chấm thi tốt nghiệp khóa ngày: 17 / / 2012 Giáo viên hướng dẫn PGS TS NGUYỄN NGỌC HẢI ii LỜI CẢM TẠ Con xin gửi lời cảm ơn chân thành đến ba mẹ chăm lo cho mặt sống để học tập lớn khôn Trong suốt trình học tập ba mẹ nguồn động lực mạnh mẽ giúp vượt qua tất khó khăn để có ngày hơm Em xin chân thành cảm ơn PGS TS Nguyễn Ngọc Hải, Người thầy đón nhận tận tâm hướng dẫn, dìu dắt tạo hội tốt cho em suốt q trình làm việc đến lúc hồn thành khóa luận Em xin chân thành cảm ơn thầy phụ trách phòng thực hành Vi Sinh – Bộ môn Vi Sinh – Truyền Nhiễm – khoa Chăn Nuôi Thú Y trường Đại Học Nơng Lâm, TP Hồ Chí Minh giúp đỡ em trình thực tập Em xin chân thành cảm ơn quý thầy cô khoa Chăn Nuôi Thú Y trường Đại Học Nông Lâm, TP Hồ Chí Minh tận tình truyền đạt kiến thức quý báu hết lòng dạy bảo cho em suốt năm năm học tập Em xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu trường Đại Học Nông Lâm, TP Hồ Chí Minh Cảm ơn bạn đồng thực tập môn vi sinh giúp đỡ, chia sẻ với vấn đề học tập làm việc Cảm ơn tất bạn lớp DH07DY giúp đỡ suốt thời gian học tập Mặc dù cố gắng hồn thiện khóa luận chắn khó tránh khỏi thiếu sót Em kính mong thầy tận tình bảo Một lần xin gửi đến tồn thể thầy cơ, gia đình, bạn bè lời cảm ơn chân thành lời chúc sức khỏe, thành cơng iii TĨM TẮT Đề tài nghiên cứu “Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn số loại thảo dược vi khuẩn E coli” thực nhằm mục đích tìm hiểu khả kiểm soát E coli thực vật Đề tài tiến hành phòng thực hành Vi sinh – Bộ mơn Vi sinh – Truyền nhiễm – Khoa Chăn Nuôi Thú Y – trường Đại học Nông Lâm Tp HCM, thời gian từ ngày 10/10/2011 đến 25/04/2012 Kết nghiên cứu ghi nhận sau: Kết thử kháng sinh đồ phương pháp khuếch tán thạch mẫu dịch chiết tỏi, gừng, nghệ (chiết thô) ghi nhận: mẫu dịch chiết tỏi có khả ức chế vi khuẩn E coli mạnh Các mẫu dịch chiết gừng nghệ khơng ức chế E coli 20µl dịch chiết từ loại tỏi đĩa môi trường thử kháng sinh đồ cho đường kính vòng vơ khuẩn trung bình lớn 26,2mm dịch chiết tỏi tím Phan Rang nhỏ 20,5mm tỏi Lý Sơn Dịch chiết loại tỏi bảo quản nhiệt độ phòng nhanh khả ức chế E coli dịch chiết tỏi bảo quản nhiệt độ lạnh (2 – 40C) Trong đó, dịch chiết tỏi trắng Phan Rang bảo quản có khác biệt nhiều (ở nhiệt độ phòng dịch chiết khả ức chế vi khuẩn ngày, nhiệt độ lạnh dịch chiết khả ức chế vi khuẩn 103 ngày) Hỗn hợp dịch chiết theo tỷ lệ (4:1) tỏi trắng Phan Rang tỏi Lý Sơn kết cho hoạt tính kháng khuẩn tốt đường kính vòng vơ khuẩn gần tỏi trắng Phan Rang (24,4mm) Kết tương đương kết hợp loại tỏi khác với tỏi Lý Sơn Thí nghiệm thử hoạt tính kháng khuẩn phương pháp pha lỗng dịch chiết tỏi cho thấy: tất dịch chiết tỏi độ pha lỗng 1/8 có khả ức chế hoàn toàn vi khuẩn E coli tương đương với streptomycin nồng độ 6,25µg/ml Kết thử kháng sinh đồ phương pháp khuếch tán thạch dịch chiết tỏi chủng E coli đề kháng kháng sinh colistin ghi nhận: dịch chiết tỏi có khả ức chế vi khuẩn E coli mạnh 20µl dịch chiết từ loại tỏi đĩa iv môi trường thử kháng sinh đồ cho đường kính vòng vơ khuẩn trung bình 24mm dịch chiết tỏi trắng Phan Rang dịch chiết tỏi tím Phan Rang; 20mm tỏi Lý Sơn Thí nghiệm thử hoạt tính kháng khuẩn phương pháp pha lỗng dịch chiết tỏi cho thấy: dịch chiết loại tỏi trắng Phan Rang, tỏi Lý Sơn, tỏi đơn độ pha lỗng 1/4 tỏi tím Phan Rang, tỏi Trung Quốc độ pha loãng 1/8 có khả ức chế hồn tồn vi khuẩn E coli đề kháng kháng sinh colistin v MụC LụC TRANG Trang tựa i Phiếu xác nhận giáo viên hướng dẫn ii Lời cảm tạ iii Tóm tắt iv Mục lục vi Danh sách chữ viết tắt ix Danh sách bảng .x Danh sách hình xi Danh sách biểu đồ xii Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề .1 1.2 Mục đích yêu cầu .2 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu .2 Chương TỔNG QUAN 2.1 Sơ lược vi khuẩn Escherichia coli (E coli) .3 2.1.1 Đại cương 2.1.2 Đặc điểm sinh học 2.2 Bệnh tiêu chảy heo vi khuẩn E coli gây 2.2.1 Định nghĩa bệnh tiêu chảy 2.2.2 Dịch tễ học 2.2.3 Nguyên nhân gây bệnh .6 2.2.4 Đường xâm nhập 2.2.5 Triệu chứng 2.2.6 Bệnh tích 2.2.7 Chẩn đoán vi 2.2.8 Điều trị .8 2.2.9 Phòng bệnh 2.3 Kháng sinh đề kháng kháng sinh .10 2.3.1 Kháng sinh .10 2.3.2 Sự đề kháng kháng sinh 10 2.4 Đại cương số thảo dược nghiên cứu 12 2.4.1 Tỏi 12 2.4.2 Gừng 16 2.4.3 Nghệ 19 2.5 Một số nghiên cứu việc sử dụng dược liệu thú y 22 Chương NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 3.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu .24 3.2 Đối tượng nghiên cứu 24 3.3 Nội dung nghiên cứu 24 3.4 Môi trường hóa chất .24 3.4.1 Môi trường .24 3.4.2 Hóa chất 25 3.5 Phương pháp nghiên cứu 25 3.5.1 Thí nghiệm đánh giá tác dụng kháng khuẩn dịch chiết tác dụng kháng khuẩn tương tác dịch chiết thảo dược theo phương pháp khuếch tán thạch 26 3.5.2 So sánh khả ức chế thảo dược E coli nhạy cảm với kháng sinh streptomycin phương pháp đặt đĩa giấy 27 3.5.3 So sánh khả ức chế dịch chiết thảo dược phương pháp tạo giếng với kháng sinh streptomycin đĩa giấy có tác dụng kháng khuẩn vi khuẩn E coli nhạy cảm kháng sinh streptomycin kháng sinh colistin vi khuẩn đề kháng colistin .28 3.5.4 Xác định giá trị MIC dược liệu so với giá trị MIC kháng sinh có tác dụng kháng khuẩn vi khuẩn E coli 29 vii 3.6 Xử lý số liệu 31 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 32 4.1 Kết thử nghiệm khả kháng khuẩn dịch chiết thảo dược môi trường MHA 32 4.2 Hiệu kháng khuẩn dịch chiết tỏi theo nhiệt độ bảo quản nhiệt độ phòng nhiệt độ lạnh (2 – 40C) 34 4.3 Kết đánh giá khả tương tác dịch chiết tỏi Lý Sơn dịch chiết tỏi trắng Phan Rang, tỏi tím Phan Rang, tỏi Trung Quốc, tỏi đơn .36 4.4 Kết đánh giá khả ức chế vi khuẩn E coli kháng sinh đĩa giấy dịch chiết loại tỏi theo hai phương pháp đĩa giấy tạo giếng 38 4.5 Kết xác định giá trị MIC dịch chiết tỏi so với MIC kháng sinh streptomycin 39 4.6 Kết đánh giá khả ức chế vi khuẩn E coli đề kháng colistin dịch chiết loại tỏi theo phương pháp khuếch tán thạch MHA .40 4.7 Kết xác định giá trị MIC dịch chiết tỏi so với MIC kháng sinh colistin .41 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 43 5.1 Kết luận .43 5.2 Đề nghị 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 PHỤ LỤC 48 viii DANH SÁCH CÁC CHữ VIếT TắT TSA Tryptone Soya Agar MHA Mueller – Hinton Agar MIC Minimal Inhibitory Concentration E coli Escherichia coli PRTr Tỏi trắng Phan Rang PRT Tỏi tím Phan Rang CĐ Tỏi cô đơn LS Tỏi Lý Sơn TQ Tỏi Trung Quốc ix Bảng 4.4 MIC dịch chiết tỏi kháng sinh streptomycin Loại tỏi kháng sinh Độ pha loãng lớn MIC Tỏi trắng Phan Rang 1/8  Tỏi tím Phan Rang 1/8  Tỏi Lý Sơn 1/8  Tỏi Trung Quốc 1/8  Tỏi đơn 1/8  Streptomycin 1/32 6,25 µg/ml Nồng độ ban đầu streptomycin 200µg/ml Giá trị MIC streptomycin l: 200 ì 1/32 = 6,25 (àg/ml) Qua ú thí nghiệm ghi nhận: MIC dịch chiết loại tỏi 1/8 tương đương với giá trị MIC streptomycin vi khuẩn E coli 6,25µg/ml Kết điều tra Dương Thanh Liêm (2004) khu vực thành phố Hồ Chí Minh, Tiền Giang Bà Rịa - Vũng Tàu cho thấy vi khuẩn E.coli có 91,61% kháng streptomycin (http://www.vcn.vnn.vn/PrintPreview.aspx?ID=6804) Điều trị vi khuẩn E coli kháng sinh streptomycin khơng đạt hiệu nên việc thử nghiệm dịch chiết loại tỏi điều trị đem lại hiệu tốt 4.6 Kết đánh giá khả ức chế vi khuẩn E coli đề kháng colistin dịch chiết loại tỏi theo phương pháp khuếch tán thạch MHA Kết thí nghiệm cho thấy dịch chiết loại tỏi có tác dụng ức chế vi khuẩn E coli đề kháng kháng sinh colistin khả ức chế vi khuẩn dịch chiết tỏi khác 40 1: Tỏi trắng Phan Rang 2: Tỏi tím Phan Rang 3: Tỏi Lý Sơn 4: Tỏi Trung Quốc 5: Tỏi đơn 6: Colistin Hình 4.7 Tác dụng dịch chiết tỏi ức chế vi khuẩn E coli đề kháng colistin Bảng 4.5 Đường kính vòng vơ khuẩn trung bình dịch chiết tỏi ức chế E coli đề kháng colistin Loại tỏi Đường kính vòng vơ khuẩn (mm) X ± SD Tỏi Lý Sơn 20,00a ± 1,000 Tỏi cô đơn 22,60b ± 1,140 Tỏi Trung Quốc 23,20b ± 0,837 Tỏi trắng Phan Rang 24,00c ± 0,707 Tỏi tím Phan Rang 24,00c ± 0,000 8,00d ± 0,447 Colistin Ghi chú: a, b, c, d kí tự giống sai khác khơng có ý nghĩa thống kê Theo kết thí nghiệm ghi nhận đường kính vòng vơ khuẩn dịch chiết tỏi tím Phan Rang, tỏi trắng Phan Rang lớn (24 mm) đường kính vòng vơ khuẩn dịch chiết tỏi Lý Sơn nhỏ (20 mm) Độ lớn đường kính vòng vơ khuẩn dịch chiết tỏi khác có ý nghĩa mặt thống kê (P < 0,001) 4.7 Kết xác định giá trị MIC dịch chiết tỏi so với MIC kháng sinh colistin Để xác định nồng độ dịch chiết tối thiểu ức chế vi khuẩn E coli loại tỏi, tiến hành thí nghiệm pha lỗng dịch chiết loại tỏi kháng sinh colistin môi trường canh lên men đường glucose 41 Bảng 4.6 MIC dịch chiết tỏi kháng sinh colistin Loại tỏi kháng sinh Độ pha loãng lớn MIC Tỏi trắng Phan Rang 1/4  Tỏi tím Phan Rang 1/8  Tỏi Lý Sơn 1/4  Tỏi Trung Quốc 1/8  Tỏi cô đơn 1/4  Colistin 1/32 6,25µg/ml Theo kết thí nghiệm hàm lượng hoạt chất kháng khuẩn loại tỏi để ức chế vi khuẩn E coli đề kháng kháng sinh khác Nồng độ ban đầu colistin 200µg/ml Giá trị MIC colistin l: 200 ì 1/32 = 6,25 (àg/ml) Qua ú thớ nghiệm ghi nhận: MIC dịch chiết loại tỏi 1/4 1/8 tương đương với giá trị MIC colistin vi khuẩn E coli đề kháng colistin 6,25µg/ml Theo nghiên cứu Khổng Quang Vũ (2006) ghi nhận 100% , Đào Thị Phương Lan (2009) ghi nhận 38% Lê Thị Thu Hiền (2010) ghi nhận 100% vi khuẩn E coli phân lập đề kháng hoàn toàn với colistin Như vậy, nghiên cứu cho thấy colistin khơng có hiệu điều trị vi khuẩn E coli Do đó, việc thử nghiệm dịch chiết tỏi điều trị vấn đề cần quan tâm 42 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Theo kết nghiên cứu kết luận sau: Các loại dịch chiết tỏi chiết thô có tác dụng ức chế vi khuẩn E coli gây bệnh tiêu chảy heo (đường kính vòng vơ khuẩn trung bình lớn 26,2mm dịch chiết tỏi tím Phan Rang nhỏ 20,5mm tỏi Lý Sơn) Các loại dịch chiết gừng nghệ chiết thơ khơng có tác dụng ức chế E coli (khơng có đường kính vòng vơ khuẩn) Dịch chiết loại tỏi bảo quản nhiệt độ phòng nhanh khả ức chế E coli dịch chiết tỏi bảo quản nhiệt độ lạnh (2 – 40C) Trong đó, dịch chiết tỏi trắng Phan Rang bảo quản có khác biệt nhiều (ở nhiệt độ phòng dịch chiết khả ức chế vi khuẩn ngày, nhiệt độ lạnh dịch chiết khả ức chế vi khuẩn 103 ngày) Nồng độ tối thiểu dịch chiết loại tỏi có tác dụng ức chế hồn tồn vi khuẩn E coli độ pha loãng 1/8, tương đương với nồng độ tối thiểu streptomycin 6,25µg/ml Nồng độ tối thiểu dịch chiết loại tỏi có tác dụng ức chế hoàn toàn vi khuẩn E coli đề kháng kháng sinh colistin độ pha loãng 1/4 dịch chiết tỏi trắng Phan Rang, tỏi Lý Sơn, tỏi đơn độ pha lỗng 1/8 dịch chiết tỏi tím Phan Rang, tỏi Trung Quốc tương đương với nồng độ tối thiểu colistin 6,25µg/ml 43 5.2 Đề nghị Dựa theo kết nghiên cứu số kinh nghiệm thực đề tài này, có số đề nghị sau: Nghiên cứu cách chiết tách hoạt chất có khả ức chế E coli tỏi Dịch chiết tỏi tươi nên bảo quản nhiệt độ lạnh (2 – 40C) Đĩa giấy tẩm dịch chiết tỏi nên sấy chân không Thực nghiên cứu lâm sàng để xác nhận kết nghiên cứu phòng thí nghiệm Nghiên cứu tác dụng dịch chiết loại tỏi bổ sung vào thức ăn chăn nuôi để phòng tiêu chảy 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Võ Thị Trà An, 2010 Dược lý thú y Nhà xuất Nông Nghiệp, Tp HCM, 320 trang [2] Tơ Minh Châu Trần Thị Bích Liên, 2001 Vi khuẩn nấm gây bệnh thú y Tủ sách trường Đại học Nông Lâm TP HCM [3] Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phượng Lê Ngọc Mỹ, 1995 Bệnh đường tiêu hóa lợn Nhà xuất Nơng Nghiệp, Hà Nội, trang 43 – 70 [4] Nguyễn Ngọc Hải, 2012 Thực hành nghiên cứu vi sinh vật Nhà xuất Lao Động, Tp HCM, 125 trang [5] Lê Thị Thu Hiền, 2010 Khảo sát hoạt tính kháng sinh chất chiết hành, tỏi, hẹ, móng tay vi khuẩn E.coli Luận văn tốt nghiệp Bác sỹ Thú y trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh, Việt Nam [6] Heinrich P Kock, Larry D Lawson, 2002 Tỏi – Khoa học tác dụng chữa bệnh (Trần Tất Thắng dịch) Nhà xuất Y học, trang - 27 [7] Đỗ Tất Lợi, 2004 Những thuốc vị thuốc Việt Nam Nhà xuất Y Học, trang 181, 227, 366 [8] Bùi Thị Lưu Ly, 2005 Nghiên cứu số đặc tính sinh học vi khuẩn E coli gây phù heo Trang – [9] Nguyễn Như Pho, 2001 Phòng ngừa bệnh tiêu chảy heo giai đoạn cai sữa phương pháp sử dụng kháng sinh khống chế thức ăn Tập san KHKT Nông Lâm nghiệp 2/2001, trang 80 – 86 [10] Nguyễn Vĩnh Phước, 1977 Vi sinh vật học thú y – Tập II Nhà xuất Đại học Trung học Chuyên nghiệp, Hà Nội, trang 134 – 160 [11] Phạm Xuân Sinh, 2002 Dược Học Cổ Truyền Nhà xuất Y Học Hà Nội [12] Phạm Hồng Sơn, 2008 Giáo trình vi sinh vật học thú y Nhà xuất Huế 45 [13] Huỳnh Công Tuấn, 2000 Phân lập giám định vi khuẩn E coli gây bệnh tiêu chảy heo cai sữa Thử khả nhạy cảm chúng số kháng sinh Luận văn tốt nghiệp bác sỹ thú y, Đại Học Nông Lâm TP.HCM, Việt Nam [14] Nguyễn Thái Anh Tuấn, 2005 Tình hình tiêu chảy tỷ lệ nhiễm E coli, Rotavirus heo tiêu chảy xí nghiệp chăn nuôi Chợ Gạo tỉnh Tiền Giang Luận văn tốt nghiệp Bác Sỹ Thú Y, Đại học Nông Lâm TP HCM, Việt Nam [15] Lê Minh Trí Huỳnh Thị Ngọc Phương, 2011 Hóa dược Nhà xuất Giáo Dục, trang 91 [16] Khổng Quang Vũ, 2006 Tìm hiểu khả đề kháng kháng sinh vi khuẩn Escherichia coli phân lập heo theo mẹ heo cai sữa Luận văn tốt nghiệp Bác sỹ Thú y trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh, Việt Nam [17] Xyguang, 1986 Tác dụng tỏi (Trần Quốc Bảo dịch) Trang 39 – 40 [18] Đào Thị Phương Lan, 2009 Khảo sát mức độ mẫn cảm với kháng sinh vi khuẩn Escherichia coli phân lập từ phân gia súc Luận văn tốt nghiệp ngành Thú y trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh, Việt Nam Tiếng nước [19] Gonzalesn Foandox cộng sự, 1994 Qualitativeattributes and cónumet perception of oganic and free – range poltry meat Poultry Science 64: 500 – 512 Tài liệu tham khảo từ hệ thống internet [20] Lê Văn Chương, 2012, ““Đệ tỏi” Lý Sơn”, 06/05/2012 [21] Nguyễn Văn Mạnh, 2009, “Cây tỏi ta”, Sở Nông Nghiệp Pháp Triển Nông Thôn tỉnh Ninh Thuận, 06/05/2012 [22] Phạm Tất Thắng, Lã Văn kính Đỗ Hữu Phương, “ Thực trạng nhờn thuốc vi khuẩn gây bệnh tiêu chảy hội chứng hô hấp lợn thịt khu vực miền Dông Nam Bộ, Viện KHHT Nông Nghiệp Miền Nam, 07/05/2012 < http://www.vcn.vnn.vn/PrintPreview.aspx?ID=6804> 46 [23] “Tỏi lý sơn, tỏi cô đơn, tỏi một”, 06/05/2012 [24] “Nga Truật”, 06/05/2012 47 PHỤ LỤC Môi trường 1.1 Môi trường lên men đường glucose Thành phần: Cao thịt 5g Peptone bột 10g Đường glucose 10g Phenol red 0,01g Nước cất pH 1000ml 6,7 – 7,1 1.2 Môi trường TSB (Tryptone Soya Broth) Thành phần: Pancreatic digest of casein 17g/l Papaic digest of soyabean meal 3g/l Sodium chloride 5g/l Dipotassium hydrogen phosphate 2,5g/l Dextrose 2,5g/l pH (ở 250C) 7,3 ± 0,2 Cân 30g môi trường cho vào lít nước Hấp autoclave 1210C / 15 phút 1.3 Môi trường TSA (Tryptone Soya Agar) Gồm thành phần mơi trường TSB thêm vào 14g agar/lít 1.4 Môi trường MHA (Mueller Hinton Agar) Thành phần: Cao thịt bò 300g/l Casein acid hydrolysate 17,5g/l Starch 1,5g/l Agar 17g/l pH (ở 250C) 7,3 ± 0,1 Cân 38g môi trường cho vào lít nước Hấp autoclave 1210C / 15 phút 48 Bảng biểu Bảng 2.1 Đường kính vòng vơ khuẩn dịch chiết tỏi Loại tỏi Đường kính vòng vơ khuẩn (mm) Lần Lần Lần Lần Lần Tỏi trắng Phan Rang 25 24 24 25 25 Tỏi tím Phan Rang 26 27 27 25 26 Tỏi Lý Sơn 21 22 20 20 21 Tỏi Trung Quốc 22 21 23 22 21 Tỏi cô đơn 22 22 21 22 22 Bảng 2.2 Đường kính vòng vơ khuẩn dịch chiết tỏi theo thời gian nhiệt độ phòng Tỏi PRTr Tỏi PRT Tỏi LS Tỏi TQ Tỏi CĐ (mm) (mm) (mm) (mm) (mm) 24,4 25 17,6 21,2 21 20 20,2 17 18,4 17,4 20 17 15 16,4 14,2 18 15,8 14,8 14 13,2 15,8 13 0 14,2 0 0 13,6 0 0 0 0 0 0 Ngày 49 Bảng 2.3 Đường kính vòng vơ khuẩn dịch chiết tỏi theo thời gian nhiệt độ lạnh Tỏi PRTr Tỏi PRT Tỏi LS Tỏi TQ Tỏi CĐ (mm) (mm) (mm) (mm) (mm) 24,4 25 17,6 21,2 21 10 22 21,6 16 16,4 17,2 20 20,6 20 14,4 14,6 16 30 18,2 18,2 13,2 13,4 13,8 40 17,4 16,4 12 12,2 11,2 50 16,2 10,2 11,4 11,8 9,2 60 15 11 11 76 14 0 0 103 0 0 Ngày Bảng 2.4 Đường kính vòng vơ khuẩn tương tác dịch chiết tỏi trắng Phan Rang tỏi Lý Sơn theo tỷ lệ Đường kính vòng vơ khuẩn (mm) Tỷ lệ pha lỗng PRTr : LS Lần Lần Lần Lần Lần 4:1 24 25 24 24 24 3:2 24 24 22,5 23,5 23 2:3 22 22 21,5 22,5 23 1:4 20,5 20,5 20 19 19 1:1 24 24 22 23 22 5:0 24 25 25 24 24 0:5 20 20 19 19 20 50 Bảng 2.5 Đường kính vòng vơ khuẩn dịch chiết tỏi kháng sinh đĩa giấy Loại tỏi kháng sinh Đường kính vòng vô khuẩn (mm) Lần Lần Lần Lần Lần Tỏi trắng Phan Rang 21 21 20 19 19 Tỏi tím Phan Rang 20 21 19 20 20 Tỏi Lý Sơn 18 17,5 16,5 16 17 19,5 20 21,5 20,5 18,5 Tỏi cô đơn 19 18 20 20 19 Streptomycin 24 22 23 22 24 Tỏi Trung Quốc Bảng 2.6 Đường kính vòng vơ khuẩn dịch chiết tỏi giếng kháng sinh đĩa giấy Loại tỏi kháng sinh Đường kính vòng vơ khuẩn (mm) Lần Lần Lần Lần Lần Tỏi trắng Phan Rang 24 25 27 24 26 Tỏi tím Phan Rang 26 26 27 26 27 Tỏi Lý Sơn 20 22 22 21 20 Tỏi Trung Quốc 26 26 24 25 24 Tỏi cô đơn 24 25 24 24 23 Streptomycin 22 23 22 24 24 51 Bảng 2.7 Đường kính vòng vơ khuẩn dịch chiết tỏi vi khuẩn E coli đề kháng colistin Loại tỏi Đường kính vòng vơ khuẩn (mm) Lần Lần Lần Lần Lần Tỏi trắng Phan Rang 24 24 25 23 24 Tỏi tím Phan Rang 24 24 24 24 24 Tỏi Lý Sơn 19 19 21 20 21 Tỏi Trung Quốc 24 22 23 24 23 Tỏi cô đơn 22 23 23 24 21 Colistin 8,5 7,5 8 52 Kết xử lý thống kê 3.1 Trung bình đường kính vòng vơ khuẩn loại tỏi môi trường MHA One-way ANOVA: ĐKVVK1 versus LOAI TOI MHA Source LOAI TOI MHA Error Total S = 0.7211 Level N 5 5 DF 20 24 SS 102.560 10.400 112.960 MS 25.640 0.520 R-Sq = 90.79% Mean 24.600 26.200 20.800 21.800 21.800 StDev 0.548 0.837 0.837 0.837 0.447 F 49.31 P 0.000 R-Sq(adj) = 88.95% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ ( * ) ( * ) ( * ) ( * ) ( * ) -+ -+ -+ -+ 22.0 24.0 26.0 28.0 Pooled StDev = 0.721 3.2 Trung bình đường kính vòng vơ khuẩn tỏi trắng Phan Rang tỏi Lý Sơn theo tỉ lệ khác One-way ANOVA: ĐKVVK2 versus TI LE Source TI LE Error Total DF 28 34 S = 0.6682 Level N 5 5 5 SS 116.171 12.500 128.671 MS 19.362 0.446 R-Sq = 90.29% Mean 24.200 23.400 22.200 19.800 23.000 24.400 19.600 StDev 0.447 0.652 0.570 0.758 1.000 0.548 0.548 F 43.37 P 0.000 R-Sq(adj) = 88.20% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( -* -) ( -* -) ( -* -) ( -* -) ( -* -) ( * -) ( * -) -+ -+ -+ -+ -19.2 20.8 22.4 24.0 Pooled StDev = 0.668 53 3.3 Kết so sánh đường kính vòng vơ khuẩn loại tỏi theo phương pháp đĩa giấy phương pháp giếng One-way ANOVA: ĐKVVK3 versus TA & TG Source TA & TG Error Total DF 40 49 S = 0.9260 Level 10 N 5 5 5 5 5 SS 439.780 34.300 474.080 MS 48.864 0.858 R-Sq = 92.76% Mean 20.000 20.000 17.000 20.000 19.200 25.200 26.400 21.000 25.000 24.000 StDev 1.000 0.707 0.791 1.118 0.837 1.304 0.548 1.000 1.000 0.707 F 56.98 P 0.000 R-Sq(adj) = 91.14% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( *-) ( *-) ( *-) ( *-) ( * ) ( * ) ( * ) ( * ) (-* ) ( * ) + -+ -+ -+ 18.0 21.0 24.0 27.0 Pooled StDev = 0.926 3.4 Kết đường kính vòng vơ khuẩn loại tỏi vi khuẩn E coli đề kháng kháng sinh colistin One-way ANOVA: ĐKVVK4 versus TOI Source TOI Error Total DF 24 29 S = 0.7773 Level N 5 5 5 SS 962.300 14.500 976.800 MS 192.460 0.604 R-Sq = 98.52% Mean 24.000 24.000 20.000 23.200 22.600 8.000 StDev 0.707 0.000 1.000 0.837 1.140 0.354 F 318.55 P 0.000 R-Sq(adj) = 98.21% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -(*) (*) (*) (*-) (*-) (*) -+ -+ -+ -+ -10.0 15.0 20.0 25.0 Pooled StDev = 0.777 54 ... việc Cảm ơn tất bạn lớp DH07DY giúp đỡ suốt thời gian học tập Mặc dù cố gắng hồn thi n khóa luận chắn khó tránh khỏi thi u sót Em kính mong thầy tận tình bảo Một lần xin gửi đến tồn thể thầy cơ,... độ pha lỗng 1/8 có khả ức chế hồn tồn vi khuẩn E coli đề kháng kháng sinh colistin v MụC LụC TRANG Trang tựa i Phiếu xác nhận giáo viên hướng dẫn ii Lời cảm tạ ... Micrococcus, Staphylococcus aureus (Gonzalesn Fandox ctv, 1994; Xyguang, 1986) 2.4.2 Gừng Còn gọi khương, sinh khương, can khương Tên khoa học Zingiber officinale Rosc Thuộc họ gừng Zinggiberaceae