Đang tải... (xem toàn văn)
Phân lập, đánh giá đa dạng và khả năng sinh kháng sinh của xạ khuẩn nội cộng sinh trên cây quế tại tỉnh Hòa Bình (Luận văn thạc sĩ)Phân lập, đánh giá đa dạng và khả năng sinh kháng sinh của xạ khuẩn nội cộng sinh trên cây quế tại tỉnh Hòa Bình (Luận văn thạc sĩ)Phân lập, đánh giá đa dạng và khả năng sinh kháng sinh của xạ khuẩn nội cộng sinh trên cây quế tại tỉnh Hòa Bình (Luận văn thạc sĩ)Phân lập, đánh giá đa dạng và khả năng sinh kháng sinh của xạ khuẩn nội cộng sinh trên cây quế tại tỉnh Hòa Bình (Luận văn thạc sĩ)Phân lập, đánh giá đa dạng và khả năng sinh kháng sinh của xạ khuẩn nội cộng sinh trên cây quế tại tỉnh Hòa Bình (Luận văn thạc sĩ)Phân lập, đánh giá đa dạng và khả năng sinh kháng sinh của xạ khuẩn nội cộng sinh trên cây quế tại tỉnh Hòa Bình (Luận văn thạc sĩ)Phân lập, đánh giá đa dạng và khả năng sinh kháng sinh của xạ khuẩn nội cộng sinh trên cây quế tại tỉnh Hòa Bình (Luận văn thạc sĩ)Phân lập, đánh giá đa dạng và khả năng sinh kháng sinh của xạ khuẩn nội cộng sinh trên cây quế tại tỉnh Hòa Bình (Luận văn thạc sĩ)
VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT - QUÁCH NGỌC TÙNG PHÂN LẬP, ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG VÀ KHẢ NĂNG SINH KHÁNG SINH CỦA XẠ KHUẨN NỘI CỘNG SINH TRÊN CÂY QUẾ TẠI TỈNH HỊA BÌNH Chun ngành: Vi sinh vật học Hà Nội - 2014 Quách Ngọc Tùng - K16 MỞ ĐẦU Vi khuẩn gây bệnh cókhả kháng thuốc kháng sinh làvấn đề nghiêm trọng vàthu hút mối quan tâm lớn cộng đồng Vìvậy, việc nghiên cứu, lựa chọn tác nhân kháng khuẩn từ tự nhiên ưu tiên hàng đầu nhà khoa học công ty dược phẩm giới Cho đến nay, nhà khoa học không ngừng tìm kiếm nguồn hợp chất tự nhiên khác để phát triển loại thuốc kháng sinh loại thuốc khác nhằm chăm sóc sức khỏe cộng đồng, giảm thiểu tác dụng phụ tới sức khỏe người bệnh số thuốc tổng hợp hóa học gây [3] Nhiều nghiên cứu chứng minh thực vật làmột nguồn tự nhiên quan trọng điều trị bệnh gây vi sinh vật vàcác bệnh khác Chẳng hạn, quế (Cinamomum loureiri) chứa dược chất tinh dầu lá, vỏ với 90% cinnamaldehyde có hoạt tí nh kháng khuẩn cao vi khuẩn Gram (+) vàvi khuẩn Gram (-) [5] Carvacrol tinh dầu bạc hàphá hủy màng tế bào vi khuẩn Gram (-) làm tăng tính lưu động màng tế bào, dẫn đến thay đổi tí nh thẩm thấu màng tế bào [24] Ngoài giátrị khoa học, thành phần mang lại, dược liệu cịn làmơi trường cho xạ khuẩn nội cộng sinh (sống loại mơthực vật) cókhả sinh tổng hợp chất kháng sinh [49] Theo nghiên cứu Berdy, 2005 ước tí nh khoảng 70% kháng sinh cónguồn gốc tự nhiên sử dụng y học lâm sàng sản sinh xạ khuẩn [11] Gần đây, số cơng bố cho thấy hợp chất chuyển hóa thứ cấp xạ khuẩn nội cộng sinh tạo dược liệu khơng cósố lượng phong phúmàcịn cósự đa dạng chức tính kháng vi sinh vật, chống ơxi hóa, chống sốt rét vàkiểm sốt sinh học Các dược liệu Việt Nam phong phú đa dạng [3] Trong số đó, quế lồi dược liệu cónhiều cơng dụng kháng nấm, chống dị ứng, ung thư dày, chống oxy hóa Ngồi giátrị khoa học thành phần mang lại, qua khảo sát ban đầu cho thấy quế cịn mơi trường cho xạ Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Quách Ngọc Tùng - K16 khuẩn nội cộng sinh cókhả sinh tổng hợp chất kháng sinh, chất chống ung thư Tuy nhiên, số lượng nghiên cứu xạ khuẩn nội cộng sinh quế nói riêng dược liệu nói chung Việt Nam cịn hạn chế Xuất phát từ định hướng trên, thực nghiên cứu đề tài: “Phân lập, đánh giá đa dạng vàkhả sinh kháng sinh xạ khuẩn nội cộng sinh quế tỉnh HồBì nh” Đề tài đươ ̣c thực hiê ̣n ta ̣i phòng Công nghê ̣ lên men, Viê ̣n Công nghê ̣ sinh học, Viê ̣n Hàn lâm Khoa ho ̣c và Công nghê ̣ Viê ̣t Nam, gồm nội dung chiń h: - Phân lập đánh giá đa dạng xạ khuẩn nội cộng sinh mẫu quế thu thập tỉnh Hịa Bình - Đánh giá khả kháng vi sinh vật kiểm định chủng xạ khuẩn nội cộng sinh xác định có mặt ba gen mãhóa enzyme tham gia vào trình tổng hợp kháng sinh gồm polyketide synthases (PKS-I, PKS-II) vànonribosomal peptide synthetase (NRPS) - Tuyển chọn, nghiên cứu đặc điểm sinh học phân loại chủng xạ khuẩn có khả sinh tổng hợp kháng sinh cao - Nghiên cứu tách dịng phân tích trình tự gen mã hóa PKS-I, PKS-II chủng xạ khuẩn tuyển chọn Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Quách Ngọc Tùng - K16 CHƢƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Xạ khuẩn nội cộng sinh thực vật dƣợc liệu 1.1.1 Khái niệm xạ khuẩn nội cộng sinh Hiện nay, nhiều cơng trì nh nghiên cứu giới công bố tương tác thực vật vàvi sinh vật (VSV), VSV đóng vai trị tác nhân ức chế sinh vật gây bệnh, tổng hợp chất kích thích sinh trưởng thực vật, phân giải phospho khó hồtan, cố định nitơ tự do, tăng độ phìcủa đất [17, 51] Phần lớn VSV bao gồm vi khuẩn, nấm mốc vàxạ khuẩn phân lập từ đất, vùng rễ, bề mặt môthực vật Khái niệm xạ khuẩn nội cộng sinh đưa Smith cộng (1957) phân lập thành cơng xạ khuẩn Micromonospora sp có khả ức chế nấm gây bệnh Fusarium oxysporum mơ càchua khơng nhiễm bệnh [57] Từ đó, có nhiều định nghĩa khác VSV nội cộng sinh định nghĩa Bacon vàWhite (2000): ‘‘VSV nội cộng sinh lànhững VSV sinh trưởng mô tế bào thực vật, không gây hiệu ứng xấu tới chủ’’ nhàVSV học thừa nhận [10] Theo tài liệu, định nghĩa hàm chứa ýrất quan trọng: VSV nội cộng sinh không gây ảnh hưởng mà tăng cường khả trao đổi chất, kích thích sinh trưởng, miễn dịch cho vật chủ cách tổng hợp sản phẩm trao đổi chất [8] Trong số VSV nội cộng sinh, xạ khuẩn chúýbởi khả tổng hợp kháng sinh ức chế VSV gây bệnh [38] Song song với tác dụng dược lýthu nhận từ xạ khuẩn nội cộng sinh, số nhà sinh vật học nghiên cứu khả kiểm soát sinh học (biocontrol) xạ khuẩn nội cộng sinh suốt hai thập kỷ qua [59, 60] Xạ khuẩn chứng minh khả tăng cường, thúc đẩy tăng trưởng chủ, giảm nguy nhiễm mầm bệnh tăng cường khả sống sót chủ điều kiện khác [4] Những hiểu biết sinh lývàmối tương tác phân tử xạ khuẩn vàthực vật lànhững đặc tính quan trọng để khai thác đặc tí nh cólợi xạ khuẩn nội cộng sinh kích thích sinh trưởng thực vật lĩnh vực khác Nhiều nghiên cứu giới khẳng định vai trò quan trọng xạ khuẩn sinh tổng hợp chất kháng sinh Sự đa dạng xạ khuẩn cộng sinh môthực vật làrất phong phú, hứa hẹn tiềm khai thác hợp chất có Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Quách Ngọc Tùng - K16 hoạt tính sinh học chủng xạ khuẩn sinh nhiều lĩnh vực đời sống Các hợp chất có hoạt tí nh sinh học từ xạ khuẩn nội cộng sinh chứng minh làrất đa dạng mặt số lượng vàhoạt tính sinh học như: chất kiểm sốt sinh học, chất kháng VSV, kháng ung thư, chống oxy hóa, chống sốt rét, chất diệt cỏ, chất kích thích sinh trưởng [10, 49] Vìvậy, nghiên cứu sàng lọc hợp chất có hoạt tính sinh học nói chung vàhoạt tí nh kháng sinh nói riêng từ xạ khuẩn cộng sinh dược liệu tự nhiên hướng nghiên cứu triển vọng nhàkhoa học giới 1.1.2 Các phƣơng pháp phân lập xạ khuẩn nội cộng sinh Xạ khuẩn cư trú mô thực vật bị ảnh hưởng lớn yếu tố môi trường như: pH đất, thành phần chất vô chất hữu đất, lượng mưa, cường độ ánh sáng mặt trời, khơng khí,nhiệt độ Thêm vào đó, mật độ xạ khuẩn nội cộng sinh nhì n chung thấp vàphụ thuộc vào loại mô khác thực vật [49] Theo cơng trì nh cơng bố, qtrì nh phân lập xạ khuẩn nội cộng sinh cần xử lý bề mặt thực vật nhằm loại bỏ vi khuẩn, vi nấm bề mặt Do đó, phải khử trùng bề mặt mẫu vàcắt mẫu thành mảnh dụng cụ khử trùng trước phân lập Sodium hypochlorite (NaOCl) làmột tác nhân oxy hóa phổ biến sử dụng để khử trùng bề mặt Mẫu thực vật ngâm ethanol 70-99% từ 1-5 phút 1-5% NaOCl khoảng 3-20 phút, rửa nhiều lần nước vơtrùng nhằm loại bỏ lượng NaOCl cịn dư Ngoài ra, hydro peroxide vàclorua thủy ngân sử dụng chất khử trùng bề mặt hiệu [42] Năm 1992, Sardi vàcộng công bố sử dụng propylen oxit để khử trùng bề mặt thay vìhóa chất khử trùng dạng lỏng [60] Qua nhiều nghiên cứu thực nghiệm cho thấy xử lýbề mặt với ethanol khơng hiệu với qua trì nh phân lập VSV nội cộng sinh Nếu tăng gấp hai ba lần bước khử trùng bề mặt hỗn hợp ethanol vàmột số chất khử trùng khác thìkhơng phân lập xạ khuẩn nội sinh Hiệu khử trùng bề mặt tăng cường việc sử dụng chất hoạt hóa bề mặt Tween 20 Tween 80, làm tăng hiệu tác động chất khử trùng với bề mặt thực vật [12] Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Quách Ngọc Tùng - K16 Phần mẫu khử trùng đặt vào môi trường thạch thích hợp, ni cấy nhiệt độ thích hợp từ 25-30°C Trong trình phân lập, nhà nghiên cứu thường gặp phải làVSV phát triển mạnh hai tuần làvi khuẩn nấm tạp nhiễm phần mẫu thực vật Để ngăn chặn sinh trưởng vi khuẩn nấm không mong muốn tìm kiếm lồi xạ khuẩn mới, số mơi trường chọn lọc sử dụng như: môi trường thạch humic acid-vitamin, môi trường thạch casein tinh bột, cao nấm men, mơi trường S… [14, 35, 38] Ngồi ra, bổ sung hợp chất kháng sinh acid nalidixic vàtrimethoprim, nystatin cycloheximide để ức chế vi khuẩn, nấm nội cộng sinh vànâng cao khả phát triển chọn lọc xạ khuẩn vìxạ khuẩn phát triển chậm so với vi khuẩn vànấm [29, 49] 1.1.3 Ứng dụng xạ khuẩn nội cộng sinh thực vật Phần lớn xạ khuẩn nội cơng sinh sống mô thực vật không gây bệnh tác động bất lợi tới quátrì nh phát triển bình thường Ngồi ra, xạ khuẩn nội sinh cịn nhiều nhàkhoa học nghiên cứu khả sinh kháng sinh, chất kháng ung thư, enzyme, chất kích thích sinh trưởng thực vật, ức chế vàkiểm soát bệnh thực vật 1.1.3.1 Kháng ung thư, kháng viêm Trong năm gần đây, nhu cầu tìm kiếm chất cóhoạt tính kháng, ức chế tế bào ung thư từ xạ khuẩn nội cộng sinh hướng nghiên cứu nhàkhoa học giới Nhiều công bố khẳng định, xạ khuẩn nội cộng sinh cómối quan hệ phức tạp, chặt chẽ với chủ Một số giả thuyết nhận định gen liên quan tới tổng hợp hợp chất có hoạt tí nh sinh học tiếp nhận từ q trình trao đổi chất VSV vàthực vật thơng qua hệ thống chuyển gen ngang (horizontal gene transfer, HGT) Nhờ nhàVSV học mở triển vọng sản xuất hợp chất sinh học có nguồn gốc từ thực vật nhờ q trì nh ni cấy VSV, vídụ chất kháng tế bào ung thư paclitaxel phổ biến thông đỏ (Taxus sp.) tách chiết từ xạ khuẩn Kitasatospora sp số nấm cộng sinh khác [38] Một số nghiên cứu gần cho thấy, tỷ lệ phát kháng sinh xạ khuẩn nội cộng sinh cótỷ lệ khácao so với xạ khuẩn phân lập từ đất bề mặt thực vật Chẳng hạn kháng sinh có tên naphthomycin K (dẫn xuất kháng sinh ansamycin có gắn thêm nhóm chức chlorine) phát Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Quách Ngọc Tùng - K16 lần từ Streptomyces sp CS nội cộng sinh mỹ đăng mộc (Maytenus hookeri) - loại thuốc có tác dụng điều trị ung thư, hoạt huyết Kết kiểm tra hoạt tính sinh học naphthomycin K cho thấy, hoạt tính gây độc ức chế dòng tế bào P388 vàA-549 nồng độ ức chế là0,07 và3,17 µM, khơng có hoạt tính kháng Staphylococcus aureus vi khuẩn lao [39, 68] Ngoài ra, năm chất thuộc phân lớp 16 nhóm macrolide tách chiết vàcho kết ức chế mạnh dòng tế bào MDA-MB-435 điều kiện in vitro [68]; hai chất thuộc nhóm macrolide thu nhận từ Streptomyces sp ls9131 gần phân lập mỹ đăng mộc (M hookeri), hợp chất dimeric dinactin có tác động kháng ung thư mạnh vàhoạt tí nh kháng nhiều loại vi khuẩn gây bệnh cao [39] Trước đây, hai hợp chất 5, 7-dimetoxy-4-phenylcoumarin 5, 7dimetoxy-4-p-methoxylphenylcoumarin có hoạt tính kháng tế bào ung thư mạnh, thường thu nhận từ nhiều loài thực vật khác Nhưng gần đây, nhiều cơng trì nh cơng bố hai hợp chất tì m thấy S aureofaciens CMUAc130 nội cộng sinh [61, 62] Hoạt tí nh kháng ung thư hai chất khơng hì nh thành nhóm nitric oxide, prostaglandin E2 vàtác nhân hoại tử khối u (TNF-α), mà cảm ứng nitric oxide synthase cyclooxygenase-2 lipopolysaccharide gây đại thực bào tế bào RAW 264,7 Tác dụng ức chế phụ thuộc vào nồng độ chất vàức chế hì nh thành TNF-α [61] Do vậy, xạ khuẩn nội cộng sinh lànguồn tiềm cần quan tâm nhằm khai thác chất có hoạt tí nh sinh học thúc đẩy tìm kiếm loại thuốc 1.1.3.2 Kiểm sốt sinh học Trong năm gần đây, xạ khuẩn nội cộng sinh thu hút ý nhàVSV khả kiểm soát sinh học mầm bệnh đặc tí nh cộng sinh vàtổng hợp sản phẩm trao đổi chất kháng VSV gây bệnh Nhiều nghiên cứu chứng minh đặc tí nh bảo vệ chủ xạ khuẩn nội cộng sinh chống lại VSV gây bệnh từ đất Rhizoctonia solani, Verticillium dahliae, Plectosporium tabacinum, Gaeumannomyces graminis var tritici, F Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Quách Ngọc Tùng - K16 oxysporum, Pythium aphanidermatum vàColletotrichum orbiculare [12, 18, 22, 23] Cơ chế kiểm soát sinh học tập trung chủ yếu vào sản phẩm trao đổi chất chất kháng sinh, enzyme thủy phân, phytohormone Ngoài ra, chủng xạ khuẩn giúp tăng cường hệ thống miễn dịch thực vật nhờ kí ch thích thụ thể tế bào Vídụ chủng S galbus R-5 khơng sinh cellulase, pectinase màcòn sản xuất actinomycin X2 fungichromin giúp tăng cường sức đề kháng đỗ quyên, tăng cường sản sinh jasmonate kích thích hệ thống miễn dịch [55] Conn cộng (2008) công bố kết nghiên cứu gây nhiễm Streptomyces sp EN27 Micromonospora sp EN43 hạt giống Arabidopsis thaliana nhằm làm tăng sức đề kháng chống lại nấm bệnh Erwinia carotovora vàF oxysporum; kích hoạt biểu gen tổng hợp acid jasmonic, acid salicilic vàetylen [16] Mối liên hệ xạ khuẩn nội cộng sinh với chủ sản phẩm tự nhiên có hoạt tí nh sinh học sinh xạ khuẩn nội cộng sinh giúp tìm loại thuốc đặc hiệu cótiềm ứng dụng bảo vệ tăng suất trồng 1.1.3.3 Một số dược chất khác từ xạ khuẩn nội cộng sinh Ngồi đóng vai trị quan trọng chu trì nh tuần hồn vật chất thơng qua enzyme thủy phân ngoại bào vàkhả sinh chất kháng sinh khoa học biết đến từ lâu Gần đây, nghiên cứu xạ khuẩn phát nhiều sản phẩm trao đổi chất nhóm VSV có ý nghĩa quan trọng sức khỏe người Một số chủng xạ khuẩn có khả sinh chất pháhủy tế bào hồng cầu động vật (như haemolysin Rhodococcus equi) Các nhàkhoa học phát tiềm lớn hợp chất xạ khuẩn cótác dụng làm tan phần máu đông tụ người bị bệnh tim mạch Trong phịng thí nghiệm, việc sàng lọc chất cóhoạt tí nh chống đông máu (phá hủy hồng cầu) từ xạ khuẩn tiến hành mẫu máu động vật máu ngựa, máu thỏ [51] Một vídụ khác làviệc tạo hợp chất cókhả chống lại tác nhân gây oxy hóa, làm tăng tuổi thọ tế bào Nguyên lý hoạt động Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Quách Ngọc Tùng - K16 chất chống ơxy hóa tìm thấy xạ khuẩn tương tự axit ascorbic (vitamin C) hay tocopherol (vitamin E), tức làtrung hịa thể oxy hóa cao hợp chất oxy hóa (được tạo trình trao đổi chất tế bào hay tác dụng tia cực tím) vàlàm giảm tác dụng oxy hóa chúng [60] Năm 2011, nhóm nghiên cứu Sri phân lập 65 xạ khuẩn nội cộng sinh 13 dược liệu chữa bệnh tiểu đường lô hội (Alloe vera), dây ký ninh (Tinospora crispa), xuyên tâm liên (Andrographis paniculata), nghệ xanh (Curcuma aeruginosa), rau má (Centela asiatica) Trong đó, chủng thể hoạt tính alpha glucosidase ức chế qtrì nh thủy phân tinh bột thành glucose thẩm thấu vào ruột non Kết nghiên cứu tuyển chọn chủng BWA65 có hoạt tính ức chế alpha glucosidase gấp hai lần so với chất cóhoạt tính tương tự thu từ dịch chiết dây kýninh [58] Mặc dù ý nghĩa khoa học hợp chất trao đổi chất kể sinh trưởng vàcạnh tranh xạ khuẩn mơi trường tự nhiên cịn chưa rõ ràng tác dụng mà chúng mang lại lĩnh vực y dược, dược phẩm, nông nghiệp chứng minh Chính vìlý này, nhàkhoa học quan tâm tới việc sàng lọc hợp chất cóhoạt tí nh sinh học cao từ xạ khuẩn nói chung vàxạ khuẩn nội cộng sinh nói riêng 1.1.4 Tình hình nghiên cứu xạ khuẩn nội cộng sinh 1.1.4.1 Tì nh hì nh nghiên cứu giới Trong vài thập kỷ qua chứng kiến nhiều thành tựu tìm kiếm lồi xạ khuẩn vàcác hợp chất cóhoạt tí nh sinh học từ xạ khuẩn môtế bào thực vật Do tiềm ứng dụng lớn xạ khuẩn nội cộng sinh nên đối tượng VSV quan tâm vànghiên cứu nhiều nước giới như: Nhật, Mỹ, Trung Quốc, Hàn Quốc, Ấn Độ, Nhật Bản… Sơ lược tì nh hì nh nghiên cứu xạ khuẩn nội cộng sinh thực vật 10 năm gần thể bảng 1.1 [49] Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Quách Ngọc Tùng - K16 Bảng 1.1 Tổng hợp số nghiên cứu giới loài xạ khuẩn nội cộng sinh thực vật Loài thực vật Chi xạ khuẩn Tài liệu tham khảo Cây trồng Lúa mì (Triticum aestivum) Dưa leo (Cucumis sativus) Ngô(Zea mays) Streptomyces, Microbispora, Micromonospora, Nocardioides Streptomyces [18] [55] Microbispora, Streptomyces, Streptosporangium [9] Cơm cháy (Sambucus adnata) Riềng nếp (Alpinia galangal) Glycomyces [49] Streptomyces, Nocardia, Microbispora, Micromonospora [62] Mộc lan (Kennedia nigricans) Sầu đâu Streptomyces [14] Streptomyces, Streptosporangium, Microbispora, Streptoverticillium, Saccharomonospora, Nocardia [30] Cây dƣợc liệu (Azadirachta indica) Sự đa dạng xạ khuẩn cộng sinh môthực vật phong phúhứa hẹn tiềm ứng dụng hợp chất có hoạt tí nh sinh học chủng xạ khuẩn sinh nhiều lĩnh vực đời sống Tuy nhiên, so với đa dạng giới thực vật, số lượng nghiên cứu xạ khuẩn nội cộng sinh thực vật hạn chế Trong 10 năm gần (2001-2012), nhà khoa học thuộc Viện VSV học Vân Nam, Trung Quốc khơng ngừng nghiên cứu, cải tiến, tối ưu hóa điều kiện phân lập đưa vào bảo tàng giống 5.000 chủng xạ khuẩn nội cộng sinh phân lập từ 100 loài thực vật [49] Các hợp chất chuyển hóa thứ cấp chủng xạ khuẩn sinh chứng minh làrất đa dạng mặt số lượng vàhoạt tí nh sinh học chất kiểm soát sinh Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật ... chung Việt Nam hạn chế Xuất phát từ định hướng trên, thực nghiên cứu đề tài: ? ?Phân lập, đánh giá đa dạng v? ?khả sinh kháng sinh xạ khuẩn nội cộng sinh quế tỉnh HồBì nh” Đề tài đươ ̣c thực hiê ̣n... nghê ̣ sinh học, Viê ̣n Hàn lâm Khoa ho ̣c và Công nghê ̣ Viê ̣t Nam, gồm nội dung chiń h: - Phân lập đánh giá đa dạng xạ khuẩn nội cộng sinh mẫu quế thu thập tỉnh Hịa Bình - Đánh giá khả kháng. .. xạ Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Quách Ngọc Tùng - K16 khuẩn nội cộng sinh c? ?khả sinh tổng hợp chất kháng sinh, chất chống ung thư Tuy nhiên, số lượng nghiên cứu xạ khuẩn nội cộng sinh quế