Đang tải... (xem toàn văn)
NGHIÊN CỨU CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN QUI TRÌNH TĂNG SINH Bacillus subtilis Rd2.11 VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG CỦA SẢN PHẨM B. subtilis Rd2.11 LỎNG LÊN SỰ PHÁT TRIỂN CỦA CÂY DƯA LEO
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH ….WUX… TRẦN THỊ NGỌC HIỀN NGHIÊN CỨU CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN QUI TRÌNH TĂNG SINH Bacillus subtilis Rd2.11 VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG CỦA SẢN PHẨM B subtilis Rd2.11 LỎNG LÊN SỰ PHÁT TRIỂN CỦA CÂY DƯA LEO (Cucumis sativus L.) LUẬN VĂN THẠC SĨ CƠNG NGHỆ SINH HỌC Thành Phố Hồ Chí Minh Tháng 4/2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH ….WUX… TRẦN THỊ NGỌC HIỀN NGHIÊN CỨU CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN QUI TRÌNH TĂNG SINH Bacillus subtilis Rd2.11 VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG CỦA SẢN PHẨM B subtilis Rd2.11 LỎNG LÊN SỰ PHÁT TRIỂN CỦA CÂY DƯA LEO (Cucumis sativus L.) Chuyên ngành : Công nghệ Sinh học Mã số : 60.42.80 LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Hướng dẫn Khoa học: TS LÊ ĐÌNH ĐƠN TS NGUYỄN VĂN HÙNG Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 4/2011 NGHIÊN CỨU CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN QUI TRÌNH TĂNG SINH Bacillus subtilis Rd2.11 VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG CỦA SẢN PHẨM B subtilis Rd2.11 LỎNG LÊN SỰ PHÁT TRIỂN CỦA CÂY DƯA LEO (Cucumis sativus L.) TRẦN THỊ NGỌC HIỀN Hội đồng chấm luận văn: Chủ tịch: TS BÙI MINH TRÍ Đại học Nơng Lâm TP HCM Thư ký: TS TRẦN THỊ LỆ MINH Đại học Nông Lâm TP HCM Phản biện 1: TS HOÀNG QUỐC KHÁNH Viện Sinh học Nhiệt đới TP HCM Phản biện 2: TS TỪ THỊ MỸ THUẬN Đại học Nông Lâm TP HCM Ủy viên: TS LÊ ĐÌNH ĐƠN Đại học Nơng Lâm TP HCM ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH HIỆU TRƯỞNG i LÝ LỊCH CÁ NHÂN Tôi tên Trần Thị Ngọc Hiền sinh ngày 19 tháng 01 năm 1983 huyện Cần Giuộc - tỉnh Long An Con Ông Trần Văn Dèo Bà Trương Thị Nhứt Tốt nghiệp tú tài Trường Trung học phổ thông huyện Cần Giuộc, tỉnh Long An năm 2001 Tốt nghiệp Đại học ngành Công nghệ Sinh học hệ quy Đại học Cần Thơ, tỉnh Cần Thơ năm 2006 Tháng 09 năm 2007 theo học Cao học ngành Công nghệ Sinh học Đại học Nơng Lâm, Thủ Đức, thành phố Hồ Chí Minh Tình trạng gia đình: chưa lập gia đình Địa liên lạc: 129/A1, ấp 2/5, xã Long Hậu – Cần Giuộc – Long An Điện thoại: 0838903167, 0988415536 Email ( Fax): hienbl1901@gmail.com ii LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố công trình khác Tác giả luận văn Trần Thị Ngọc Hiền iii LỜI CẢM TẠ Chân thành bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc đến, Quý thầy cô tận tâm truyền đạt kiến thức cho suốt thời gian học TS Lê Đình Đơn, Viện trưởng - Trưởng Bộ môn Công nghệ Sinh học TS Nguyễn Văn Hùng, Trưởng Bộ môn Cơ điện tử, trường Đại học Nơng Lâm TP HCM tận tình hướng dẫn, giúp đỡ động viên tơi hồn thành tốt luận văn PGS.TS Nguyễn Ngọc Tuân tập thể cán Phòng Đào tạo Sau Đại học trường Đại học Nơng Lâm TP HCM nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi thời gian học tập hồn thành luận văn tốt nghiệp Cơ Phạm Thị Minh Kiều, Bộ môn Bảo vệ Thực vật – Khoa Nông học – Trường Đại học Nông Lâm TP HCM nhiệt tình giúp đỡ hỗ trợ thực tốt luận văn TS Trần Thị Lệ Minh, Bộ môn Công nghệ Sinh học, Đại học Nông Lâm TP HCM dìu dắt lớp tơi suốt thời gian học Rất cảm ơn, Tất bạn lớp cao học Công nghệ Sinh học 2007 ủng hộ động viên suốt thời gian học Anh Hồ Hoài Bảo anh Đào Duy Vinh, Bộ mơn Cơ điện tử – Khoa Cơ khí Cơng nghệ – Trường Đại học Nông Lâm TP HCM nhiệt tình giúp đỡ tơi q trình sửa chữa vận hành hệ thống thiết bị lên men Cuối cùng, Xin chân thành bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình, người sinh thành, ni dưỡng giáo dục tơi để tơi có ngày hơm Tác giả luận văn, Trần Thị Ngọc Hiền iv TÓM TẮT Đề tài “Nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng đến qui trình tăng sinh Bacillus subtilis Rd2.11 đánh giá tác động sản phẩm B subtilis Rd2.11 lỏng lên phát triển dưa leo (Cucumis sativus L.)” tiến hành Trại thực nghiệm – Bộ mơn Cơng nghệ Sinh học, phòng thí nghiệm – Bộ môn Bảo vệ Thực vật – Khoa Nông học – Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh, thời gian từ tháng năm 2009 đến tháng năm 2010 B subtilis có khả đối kháng với nhiều loài nấm gây bệnh trồng, nhiều nước giới nghiên cứu chế tạo chế phẩm phòng trừ sinh học loại bệnh trồng Trong đề tài tập trung nghiên cứu dòng B subtilis Rd2.11 với thí nghiệm xác định thông số tối ưu yếu tố ảnh hưởng đến qui trình tăng sinh B subtilis Rd2.11, tính ổn định qui trình thí nghiệm sinh học đánh giá tác động sản phẩm B subtilis Rd2.11 lỏng lên phát triển dưa leo trồng đồng Kết qui hoạch thực nghiệm mức độ ảnh hưởng đến chất lượng sản phẩm (mật số B subtilis) yếu tố môi trường, tốc độ khuấy thời gian lên men tìm qui trình tăng sinh đạt mật số cao với mơi trường có thành phần gồm: 2% bột đậu nành, 0,05% mật rỉ 0,3% KH2PO4; tốc độ khuấy 200 vòng/phút thời gian nuôi cấy B subtilis Rd2.11 48 thích hợp Mật số B subtilis Rd2.11 chưa ổn định lần tăng sinh khác có suy giảm mạnh mật số dung dịch sau thời gian tồn trữ tháng B subtilis Rd2.11 lưu giữ đặc tính trình ni cấy có tác động kích thích phát triển dưa leo trồng đồng v ABSTRACT The thesis “Studying the effects of the fermented process of Bacillus subtilis Rd2.11 and assessing the effects of the finished product of liquid B subtilis Rd2.11 on the growth of cucumber (Cucumis sativus L.)” was conducted at the Department of Biotechnology, Laboratory of the Plant Protection Department, the Faculty of Argonomy, Nong Lam University in Ho Chi Minh city from April 2009 through April 2010 B subtilis was abled to antagonize different kinds of plant fungus, has been studied and used to make preventive products for plant diseases This thesis focuses on studing B subtilis Rd2.11 with the experiment defining optimal data of the effects of the fermentation of B subtilis Rd2.11, the stability of fermentation and biological experiments assessing the effects of the liquid B subtilis Rd2.11 on the growth of the cucumber in the field The experiment of the effects of factors including the fermented medium, stirring velocity and fermented time on the product quality (density of B subtilis) showed that the fermented process of B subtilis Rd2.11 reached high density in the fermented medium of including 2% soy-bean flour, 0.05% molasses and 0.3% KH2PO4, with the stirring velocity of 200 rpm and the most appropriate fermented condition of 48 hours With the ratios for monitoring the density of B subtilis Rd2.11 in the liquid B subtilis Rd2.11, after a period of months, it indicates that there is a drastic decrease in the density of the B subtilis Rd2.11 Thus, B subtilis Rd2.11 does not show high stability because the fermentation equipment is defective For biological experiment assessing the effects of the liquid B subtilis Rd2.11 on the growth of cucumber in the field, all the results showed that B subtilis Rd2.11 had useful effects of stimulating the growth of cucumber This showed the stable activity of B subtilis Rd2.11 in the culture processing vi MỤC LỤC CHƯƠNG TRANG Trang tựa Trang chuẩn y i Lý lịch cá nhân ii Lời can đoan iii Cảm tạ iv Tóm tắt v Abstract vi Mục lục vii Danh sách hình xi Danh sách bảng xiii MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Yêu cầu TỔNG QUAN VÀ LÝ THUYẾT 2.1 Bacillus subtilis 2.1.1 Lịch sử phát 2.1.2 Phân loại Bacillus subtilis 2.1.3 Đặc điểm hình thái Bacillus subtilis 2.1.4 Sự phân bố, sinh trưởng phát triển Bacillus subtilis 2.1.4.1 Sự phân bố B subtilis 2.1.4.2 Sự sinh trưởng phát triển B subtilis 2.1.5 Bào tử khả tạo bào tử Bacillus subtilis 2.1.6 Tính đối kháng Bacillus subtilis vii 2.1.7 Những ứng dụng từ Bacillus subtilis 10 2.1.8 Tình hình nghiên cứu Bacillus subtilis ngồi nước 14 2.1.8.1 Tình hình nghiên cứu B subtilis nước 14 2.1.8.2 Tình hình nghiên cứu B subtilis nước 15 2.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển Bacillus subtilis trình nhân sinh khối 17 2.3 Sơ lược hệ thống lên men tạo chế phẩm sinh học 18 2.3.1 Kỹ thuật lên men 18 2.3.2 Các phương pháp lên men 18 2.3.3 Hệ thống lên men 19 2.3.3.1 Thiết bị lên men nước 19 2.3.3.2 Hệ thống thiết bị lên men nước 25 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 3.1 Thời gian thực 28 3.2 Địa điểm 28 3.3 Nội dung nghiên cứu 28 3.4 Vật liệu nghiên cứu 28 3.4.1 Nguyên vật liệu 28 3.4.2 Môi trường - Hóa chất 29 3.4.3 Dụng cụ trang thiết bị thí nghiệm 29 3.5 Phương pháp nghiên cứu 29 3.5.1 Phương pháp nuôi cấy Bacillus subtilis Rd2.11 29 3.5.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 30 3.5.2.1 Cơ sở chọn yếu tố đầu vào (X) đầu (Y) 30 3.5.2.2 Giả định toán hộp đen 30 3.5.2.3 Phương pháp bố trí thí nghiệm 32 3.5.3 Phương pháp đánh giá chất lượng sản phẩm B subtilis Rd2.11 lỏng 35 3.5.3.1 Phương pháp xác định mật số B subtilis Rd2.11 35 viii Bảng 3.3 Chiều cao dưa leo thí nghiệm Số thứ tự 10 Chỉ tiêu chiều cao dưa leo (cm) ngày 10 ngày 15 ngày Cây không Cây không Cây không Cây xử lý Cây xử lý Cây xử lý xử lý xử lý xử lý B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis 10 3,5 6,5 11 10 3,5 2,5 4,5 10 11 15 10 13 11 3,5 2,5 14 11 12 Bảng 3.4 Chiều cao dưa leo thí nghiệm Số thứ tự 10 Chỉ tiêu chiều cao dưa leo (cm) ngày 10 ngày 15 ngày Cây không Cây không Cây không Cây xử lý Cây xử lý Cây xử lý xử lý xử lý xử lý B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis 3,5 11 3,5 2,5 6,5 10 2,5 10 8 15 10 3,5 15 5,5 11 12 14 11 12 4,5 2,5 10 13 79 Bảng 3.5 Chiều cao dưa leo thí nghiệm Số thứ tự 10 Chỉ tiêu chiều cao dưa leo (cm) ngày 10 ngày 15 ngày Cây không Cây không Cây không Cây xử lý Cây xử lý Cây xử lý xử lý xử lý xử lý B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis 6,5 14 10 13 10 4,5 10 16 12 15 12 2,5 5,5 11 10 17 10 7,5 14 4,5 13 4,5 12 10 15 11 Bảng 3.6 Chiều cao dưa leo thí nghiệm Số thứ tự 10 Chỉ tiêu chiều cao dưa leo (cm) ngày 10 ngày 15 ngày Cây không Cây không Cây không Cây xử lý Cây xử lý Cây xử lý xử lý xử lý xử lý B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis 4,5 2,5 11 15 10 14 11 4,5 2,5 12 10 12 13 10 2,5 12 11 2,5 10 5,5 12 3,5 2,5 8,5 6,5 11 5,5 12 9,5 80 Bảng 3.7 Chiều cao dưa leo thí nghiệm Số thứ tự 10 Chỉ tiêu chiều cao dưa leo (cm) ngày 10 ngày 15 ngày Cây không Cây không Cây không Cây xử lý Cây xử lý Cây xử lý xử lý xử lý xử lý B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis 12 5,5 3,5 10 15 12 4,5 2,5 14 10 4,5 12,5 10 13 12 10 4,5 2,5 8,5 6,5 12 9 14 11 15 12 5,5 3,5 10 16 13 Bảng 3.8 Chiều cao dưa leo thí nghiệm Số thứ tự 10 Chỉ tiêu chiều cao dưa leo (cm) ngày 10 ngày 15 ngày Cây không Cây không Cây không Cây xử lý Cây xử lý Cây xử lý xử lý xử lý xử lý B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis 5,5 3,5 16 11 17 12 4,5 15 13 3,5 10 6,5 19 12 5,5 16 11 4,5 11 20 14 2,5 8,5 15 10 4,5 3,5 10 18 12 11 21 14 10 17 11 81 Bảng 3.9 Chiều cao dưa leo thí nghiệm Số thứ tự 10 Chỉ tiêu chiều cao dưa leo (cm) ngày 10 ngày 15 ngày Cây không Cây không Cây không Cây xử lý Cây xử lý Cây xử lý xử lý xử lý xử lý B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis B.subtilis 5,5 15 10 5,5 3,5 8,5 16 11 14 3,5 13 11 4,5 16 3,5 12,5 5,5 15 10 14 10 8,5 16 12 3,5 10 17 12 Bảng 3.10 Kết so sánh chiều cao dưa leo có xử lý khơng xử lý sản phẩm Bacillus subtilis Rd2.11 lỏng sau ngày Multiple range analysis for HIEN5DAY.NS by HIEN5DAY.NT Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups K C 90 90 2.5388889 4.1111111 X X contrast C - K difference 1.57222 limits 0.16287 * * denotes a statistically significant difference Table of Least Squares Means for HIEN5DAY.NS 95% Confidence Level Count Average Stnd Error for mean GRAND MEAN 180 3.3250000 0399653 3.2460624 3.4039376 A:HIEN511.NT C1 10 3.0000000 1695582 2.6650962 3.3349038 K1 10 1.9500000 1695582 1.6150962 2.2849038 C2 10 3.6500000 1695582 3.3150962 3.9849038 K2 10 2.2500000 1695582 1.9150962 2.5849038 C3 10 3.4500000 1695582 3.1150962 3.7849038 K3 10 2.4000000 1695582 2.0650962 2.7349038 C4 10 3.8000000 1695582 3.4650962 4.1349038 K4 10 2.3500000 1695582 2.0150962 2.6849038 82 C5 10 4.3500000 1695582 4.0150962 4.6849038 K5 10 2.6500000 1695582 2.3150962 2.9849038 C6 10 4.2500000 1695582 3.9150962 4.5849038 K6 10 2.5500000 1695582 2.2150962 2.8849038 C7 10 4.6500000 1695582 4.3150962 4.9849038 K7 10 2.9000000 1695582 2.5650962 3.2349038 C8 10 5.0500000 1695582 4.7150962 5.3849038 K8 10 2.9000000 1695582 2.5650962 3.2349038 C9 10 4.8000000 1695582 4.4650962 5.1349038 K9 10 2.9000000 1695582 2.5650962 3.2349038 - Multiple range analysis for HIEN5DAY.NS by HIEN5DAY.NT Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups K1 10 1.9500000 X K2 10 2.2500000 XX K4 10 2.3500000 XX K3 10 2.4000000 XX K6 10 2.5500000 XX K5 10 2.6500000 XX K7 10 2.9000000 X K8 10 2.9000000 X K9 10 2.9000000 X C1 10 3.0000000 XX C3 10 3.4500000 XX C2 10 3.6500000 X C4 10 3.8000000 XX C6 10 4.2500000 XX C5 10 4.3500000 XX C7 10 4.6500000 XXX C9 10 4.8000000 XX C8 10 5.0500000 X - Bảng 3.11 Kết so sánh chiều cao dưa leo có xử lý không xử lý sản phẩm Bacillus subtilis Rd2.11 lỏng sau 10 ngày Multiple range analysis for HIEN10DAY.NS by HIEN10DAY.NT Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups K C 90 90 5.7888889 7.8777778 X X contrast C - K difference 2.08889 limits 0.31658 * * denotes a statistically significant difference 83 Table of Least Squares Means for HIEN10DAY.NS 95% Confidence Level Count Average Stnd Error for mean GRAND MEAN 180 6.8333333 0802623 6.6748028 6.991864 A:HIEN511.NT C1 10 6.1500000 3405243 5.4774117 6.822588 K1 10 4.5500000 3405243 3.8774117 5.222588 C2 10 7.0500000 3405243 6.3774117 7.722588 K2 10 4.9000000 3405243 4.2274117 5.572588 C3 10 7.0500000 3405243 6.3774117 7.722588 K3 10 5.3500000 3405243 4.6774117 6.022588 C4 10 7.5500000 3405243 6.8774117 8.222588 K4 10 5.0500000 3405243 4.3774117 5.722588 C5 10 8.5500000 3405243 7.8774117 9.222588 K5 10 6.2000000 3405243 5.5274117 6.872588 C6 10 8.3500000 3405243 7.6774117 9.022588 K6 10 5.7500000 3405243 5.0774117 6.422588 C7 10 8.4500000 3405243 7.7774117 9.122588 K7 10 6.7500000 3405243 6.0774117 7.422588 C8 10 9.5500000 3405243 8.8774117 10.222588 K8 10 6.8500000 3405243 6.1774117 7.522588 C9 10 8.2000000 3405243 7.5274117 8.872588 K9 10 6.7000000 3405243 6.0274117 7.372588 - Multiple range analysis for HIEN10DAY.NS by HIEN10DAY.NT Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups K1 10 4.5500000 X K2 10 4.9000000 XX K4 10 5.0500000 XX K3 10 5.3500000 XXX K6 10 5.7500000 XXX C1 10 6.1500000 XXX K5 10 6.2000000 XXX K9 10 6.7000000 XXX K7 10 6.7500000 XX K8 10 6.8500000 XX C2 10 7.0500000 XX C3 10 7.0500000 XX C4 10 7.5500000 XX C9 10 8.2000000 XX C6 10 8.3500000 XX C7 10 8.4500000 XX C5 10 8.5500000 X C8 10 9.5500000 X - 84 Bảng 3.12 Kết so sánh chiều cao dưa leo có xử lý khơng xử lý sản phẩm Bacillus subtilis Rd2.11 lỏng sau 15 ngày Multiple range analysis for HIEN15DAY.NS by HIEN15DAY.NT Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups K C 90 90 9.422222 13.100000 X X contrast C - K difference 3.67778 limits 0.49611 * * denotes a statistically significant difference Table of Least Squares Means for HIEN15DAY.NS 95% Confidence Level Count Average Stnd Error for mean GRAND MEAN 180 11.261111 1238389 11.016510 11.505712 A:HIEN511.NT C1 10 10.300000 5254040 9.262246 11.337754 K1 10 7.300000 5254040 6.262246 8.337754 C2 10 11.800000 5254040 10.762246 12.837754 K2 10 8.450000 5254040 7.412246 9.487754 C3 10 11.300000 5254040 10.262246 12.337754 K3 10 8.700000 5254040 7.662246 9.737754 C4 10 12.300000 5254040 11.262246 13.337754 K4 10 8.400000 5254040 7.362246 9.437754 C5 10 14.000000 5254040 12.962246 15.037754 K5 10 9.700000 5254040 8.662246 10.737754 C6 10 12.400000 5254040 11.362246 13.437754 K6 10 9.550000 5254040 8.512246 10.587754 C7 10 13.550000 5254040 12.512246 14.587754 K7 10 10.500000 5254040 9.462246 11.537754 C8 10 17.400000 5254040 16.362246 18.437754 K8 10 12.000000 5254040 10.962246 13.037754 C9 10 14.850000 5254040 13.812246 15.887754 K9 10 10.200000 5254040 9.162246 11.237754 - 85 Multiple range analysis for HIEN15DAY.NS by HIEN15DAY.NT Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups K1 10 7.300000 X K4 10 8.400000 XX K2 10 8.450000 XX K3 10 8.700000 XX K6 10 9.550000 XX K5 10 9.700000 XX K9 10 10.200000 XX C1 10 10.300000 XX K7 10 10.500000 XXX C3 10 11.300000 XXX C2 10 11.800000 XX K8 10 12.000000 X C4 10 12.300000 XX C6 10 12.400000 XX C7 10 13.550000 XX C5 10 14.000000 X C9 10 14.850000 X C8 10 17.400000 X - Phụ lục 4: Kết phân tích thống kê kiểm tra mật số Bacillus subtilis Rd2.11 tháng Bảng 4.1 Kết so sánh khác biệt mật số Bacillus subtilis Rd2.11 ban đầu sau tháng lưu trữ Multiple range analysis for VKHIEN.Y by VKHIEN.X Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups Y4 Y3 Y2 Y1 9 9 9.3333E0006 3.3667E0007 6.0889E0007 3.8600E0009 X X X X contrast Y1 - Y2 Y1 - Y3 Y1 - Y4 Y2 - Y3 Y2 - Y4 Y3 - Y4 difference 3.79911E9 3.82633E9 3.85067E9 2.72222E7 5.15556E7 2.43333E7 limits 1.96013E9 * 1.96013E9 * 1.96013E9 * 1.96013E9 1.96013E9 1.96013E9 * denotes a statistically significant difference 86 Table of Least Squares Means for VKHIEN.Y Level Count Average 95% Confidence for mean Stnd Error GRAND MEAN A:VKHIEN.X Y1 Y2 Y3 Y4 36 9.9097E0008 3.4014E0008 2.9796E0008 1.6840E0009 9 9 3.8600E0009 6.0889E0007 3.3667E0007 9.3333E0006 6.8029E0008 2.4740E0009 6.8029E0008 -1.3251E0009 6.8029E0008 -1.3524E0009 6.8029E0008 -1.3767E0009 5.2460E0009 1.4469E0009 1.4197E0009 1.3954E0009 Analysis of Variance for VKHIEN.Y - Type III Sums of Squares Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level MAIN EFFECTS A:VKHIEN.X 9.8788E0019 RESIDUAL 1.3328E0020 32 4.1651E0018 3.2929E0019 7.906 0004 TOTAL (CORRECTED) 2.3207E0020 35 missing values have been excluded All F-ratios are based on the residual mean square error 87 Phụ lục 5: Một số hình ảnh hệ thống thiết bị lên men kiểm tra mật số B subtilis Rd2.11 Hình 5.1 Hệ thống thiết bị lên men (50 lít/mẽ) sản phẩm B subtilis lỏng Hình 5.2 Thiết bị lên men (50 lít/mẽ) sữa chữa phận làm kín 88 Hình 5.3 Bacillus subtilis Rd2.11 nồng độ pha lỗng 10-4 Hình 5.4 Khuẩn lạc B subtilis môi trường PGA, ủ 48 (cấy chuyền giữ mẫu) (a) (b) (c) Hình 5.5 Khuẩn lạc B.subtilis môi trường PGA (ủ 24 giờ) (a) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 1; (b) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 2; (c) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 89 (a) (b) (c) Hình 5.6 Khuẩn lạc B.subtilis môi trường PGA (ủ 24 giờ) (a) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 4; (b) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 5; (c) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm (a) (b) (c) Hình 5.7 Khuẩn lạc B.subtilis môi trường PGA (ủ 24 giờ) (a) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 7; (b) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 8; (c) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm (a) (b) (c) Hình 5.8 Khuẩn lạc B.subtilis môi trường PGA (ủ 24 giờ) (a) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 10; (b) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 11; (c) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 12 90 (a) (b) (c) Hình 5.9 Khuẩn lạc B.subtilis môi trường PGA (ủ 24 giờ) (a) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 13; (b) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 14; (c) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 15 (a) (b) (c) Hình 5.10 Khuẩn lạc B.subtilis môi trường PGA (ủ 48 giờ) (a) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 1; (b) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 2; (c) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm (a) (b) (c) Hình 5.11 Khuẩn lạc B.subtilis môi trường PGA (ủ 48 giờ) (a) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 4; (b) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 5; (c) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 91 (a) (b) (c) Hình 5.12 Khuẩn lạc B.subtilis môi trường PGA (ủ 48 giờ) (a) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 7; (b) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 8; (c) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm (a) (b) (c) Hình 5.13 Khuẩn lạc B.subtilis môi trường PGA (ủ 48 giờ) (a) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 10; (b) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 11; (c) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 12 (a) (b) (c) Hình 5.14 Khuẩn lạc B.subtilis môi trường PGA (ủ 48 giờ) (a) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 13; (b) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 14; (c) Khuẩn lạc B.subtilis thí nghiệm 15 92 Hình 5.15 Một số hình ảnh dưa leo sau tháng cho trái 93 ... effects of stimulating the growth of cucumber This showed the stable activity of B subtilis Rd2.11 in the culture processing vi MỤC LỤC CHƯƠNG TRANG Trang tựa Trang chuẩn y i Lý lịch cá... vệ rễ Arabidopsis thaliana (http://www.wattpad.com/110103-thien-nhien-dac-biet) Ngoài khả tổng hợp kháng sinh, B subtilis có khả cạnh tranh dinh dưỡng nên B subtilis có tính đối kháng đồng loại... 28 3.4.1 Nguyên vật liệu 28 3.4.2 Mơi trường - Hóa chất 29 3.4.3 Dụng cụ trang thi t bị thí nghiệm 29 3.5 Phương pháp nghiên cứu 29 3.5.1 Phương pháp nuôi cấy