Nghiên cứu quy trình tách chiết tinh chế mangostin vỏ măng cụt Garcinia mangostana L làm thuỗc hỗ trợ điều trị ung thư Mai Thị Hiên Trường Đại học Khoa học Tự nhiên; Khoa Sinh học Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm; Mã số: 60 42 30 Người hướng dẫn: TS Đỗ Thị Tuyên Năm bảo vệ: 2011 Abstract Tổng quan măng cụt; hợp chất xanthone có vỏ măng cụt; hoạt tính sinh học mangostin dẫn xuất xanthone khác; peroxidase; peroxy hóa lipid Giới thiệu số vi sinh vật gây bệnh người Staphylococcus aureus, pseudomonas aeruginosa, Candida albicans Nghiên cứu mangostin Việt Nam giới Trình bày ngun liệu hóa chất; thiết bị thí nghiệm; phương pháp nghiên cứu -mangostin xác định cấu trúc, tối ưu điều kiện tách(tách chiết chiết, phương pháp tinh sạch, sắc kí mỏng, xác định làm lượng malondialdehyde, xác định hoạt độ peroxidase, định lượng protein, ) -mangostin từ vỏĐưa kết thảo luận: tách chiết tinh -mangostin; hoạt tính chống oxiquả măng cụt; hoạt tính kháng khuẩn -mangostin.hóa Keywords Sinh học thực nghiệm; Cơng nghệ tách chiết; Điều trị ung thư; Quả măng cụt Content Mở đầu Các hợp chất có nguồn gốc tự nhiên vinblastine từ dừa cạn (Catharanthus roseus), taxol thông đỏ (Taxus brevifolia), colchicine từ tỏi độc (Colchicum autunale), scutebalcaletone từ bán chi liên (Scutellaria barbata), số hoạt chất từ chè xanh (Camellia sinensis), sử dụng để điều trị cho bệnh nhân ung thư Trong đó, măng cụt Garcinia mangostana L ăn trồng nhiều miền Nam, Việt Nam Theo kinh nghiệm dân gian, vỏ măng cụt dùng để điều trị nhiều loại bệnh nhiễm trùng Tuy nhiên việc khai thác ứng dụng hoạt chất sinh học từ vỏ măng cụt nước ta chưa quan tâm nhiều Xuất phát từ thực tế đề tài “Nghiên cứu quy trình cơng nghệ tách chiết tinh chế mangostin vỏ măng cụt Garcinia mangostana L làm thuốc hỗ trợ điều trị ung thư” thực với mục tiêu: tách chiết tinh chế -mangostin từ vỏ măng cụt nghiên cứu số hoạt tính sinh học -mangostin Tổng quan Măng cụt có tên khoa học Garcinia mangostana L thuộc họ Bứa (Clusiaceae), loại ăn trồng vùng khí hậu nhiệt đới, đặc biệt phổ biến vùng Đông Nam Á, Ấn Độ, Sri Lanka Ở Việt Nam măng cụt chủ yếu trồng vùng đồng sông Cửu Long với tổng diện tích lên tới 4900 ha, cho sản lượng khoảng 4500 Theo dự án phát triển sản xuất xuất rau, hoa tươi Việt Nam, dự kiến phát triển diện tích trồng măng cụt vùng đồng sông Cửu Long lên khoảng 11300 ha, cho sản lượng 24000 Trong tập trung trồng chủ yếu tỉnh Bến Tre, Vĩnh Long, Trà Vinh Bình Dương Măng cụt đòi hỏi điều kiện thổ nhưỡng khắt khe, khí hậu nóng ẩm Do đó, măng cụt phân bố vùng có khí hậu ấm áp, khơng tiến xa vùng khí hậu lạnh phía bắc mà dừng lại Huế Măng cụt loài thực vật giàu dẫn xuất xanthone phát Trong số 200 dẫn xuất xanthone tìm thấy thực vật có đến 60 dẫn xuất măng cụt, chủ yếu tập trung phần vỏ Trong số dẫn xuất xanthone có vỏ măng cụt -mangostin có hàm lượng cao nhất, chiếm khoảng 0,02-0,2% trọng lượng khô Tiếp đến -mangostin -mangostin, chiếm khoảng 0,016-0,07% Hàm lượng chất gacinone, đặc biệt garcinone E chiếm khoảng 0,01-0,035%, chất có hoạt tính ức chế mạnh phát triển nhiều loại tế bào ung thư, nhiều nhà khoa học quan tâm Hiện nay, dẫn xuất xanthone từ măng cụt, nhà khoa học quan tâm nhờ hoạt tính sinh học quan trọng hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm, kháng viêm, chống oxi hóa, đặc biệt hoạt tính chống ung thư, nhằm mục đích tìm hoạt chất có nguồn gốc tự nhiên làm thuốc hỗ trợ điều trị ung thư Nguyên liệu phương pháp Chủng P aeruginosa JN 592444.1 cung cấp Phòng Vi sinh vật đất, Viện Cơng nghệ sinh học, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam Chủng S aureus cung cấp Phòng Vi sinh vật, Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Chủng nấm C albicans ATCC 10231 mua từ bảo tàng giống chuẩn Mỹ, 10801 University Boulevard Manassas, VA 20110, USA Chủng P aeruginosa JN 592444.1 cung cấp Phòng Vi sinh vật đất, Viện Công nghệ sinh học, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam Chủng S aureus cung cấp Phòng Vi sinh vật, Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Chủng nấm C albicans ATCC 10231 mua từ bảo tàng giống chuẩn Mỹ, 10801 University Boulevard Manassas, VA 20110, USA Chuột nhắt trắng, giống đực, chủng, dòng Swiss, trưởng thành, khỏe mạnh, trọng lượng 22  g (n = 72) cung cấp từ Ban chăn nuôi Học viện Quân Y Chuột nhắt trắng, giống đực, chủng, dòng Swiss, trưởng thành, khỏe mạnh, trọng lượng 22  g (n = 72) cung cấp từ Ban chăn nuôi Học viện Quân Y Vỏ măng cụt thu thập từ khu vực Hà Nội Nguyên liệu sấy khô tủ ấm 60C, nghiền thành bột mịn Bảo quản điều kiện khơ ráo, thống mát Các phương pháp sử dụng: Phương pháp tách chiết mangostin từ vỏ măng cụt; Phương pháp sắc kí, phương pháp xác định hàm lượng protein Bradford; Phương pháp xác định hàm lượng MDA; Phương pháp xác định hoạt độ peroxidase Kết Dung mơi an tồn, hiệu kinh tế phù hợp cho trình tách chiết mangostin từ vỏ măng cụt ethanol, tỷ lệ dung môi : nguyên liệu 3:1, 60C, Sản phẩm thu có độ 98,5%, chiếm 0,13% khối lượng nguyên liệu ban đầu Chế phẩm tinh có khả kháng lại số vi khuẩn nấm gây bệnh người S aureus, P aeruginosa, C albicans Diệt 100% vi khuẩn S aureus nồng độ 15 g/ml; ức chế 70% phát triển P aeruginosa nồng độ 1000 g/ml, 50% phát triển nấm C albicans nồng độ 1500 g/ml Hoạt chất -mangostin có khả chống oxi hóa, bảo vệ gan khỏi cơng chất độc có tính oxi hóa mạnh CCl4 Thể tác dụng làm tăng hoạt độ peroxidase làm giảm hàm lượng MDA gan chuột nhóm nghiên cứu, đặc biệt hai nhóm nghiên cứu: nhóm chuột uống -mangostin liều 0,1 mg/10 g thể trọng, hoạt độ peroxidase gan tăng 45% so với nhóm đối chứng, 57% so với nhóm nhiễm độc CCl4; nhóm chuột uống -mangostin liều 0,2 mg/10 g thể trọng, hàm lượng MDA gan chuột giảm 6% so với nhóm đối chứng, giảm 60% so với nhóm nhiễm độc CCl4 Kiến nghị Thử nghiệm hoạt tính chống ung thư -mangostin số dòng tế bào ung thư từ chuột Sản xuất -mangostin qui mơ pilot để làm thuốc hỗ trợ phòng chống điều trị ung thư chống oxi hóa ...được thực với mục tiêu: tách chiết tinh chế  -mangostin từ vỏ măng cụt nghiên cứu số hoạt tính sinh học  -mangostin Tổng quan Măng cụt có tên khoa học Garcinia mangostana L thuộc họ Bứa (Clusiaceae),... dẫn xuất măng cụt, chủ yếu tập trung phần vỏ Trong số dẫn xuất xanthone có vỏ măng cụt  -mangostin có hàm lượng cao nhất, chiếm khoảng 0,02-0,2% trọng lượng khô Tiếp đến  -mangostin  -mangostin, ... biệt hoạt tính chống ung thư, nhằm mục đích tìm hoạt chất có nguồn gốc tự nhiên làm thuốc hỗ trợ điều trị ung thư Nguyên liệu phương pháp Chủng P aeruginosa JN 592444.1 cung cấp Phòng Vi sinh