Luận văn Thạc sỹ Khoa học Sinh học thực nghiệm ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN NGUYỄN THỊ THỦY NỒNG ĐỘ HOMOCYSTEIN VÀ MỘT SỐ CHỈ SỐ HÓA SINH HUYẾT TƢƠNG Ở BỆNH NHÂN ĐÁI THÁO ĐƢỜNG TÝP TẠI BỆNH VIỆN TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y KHOA THÁI NGUYÊN LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HÀ NỘI - 2017 Nguyễn Thị Thủy Cao học 22 (QH 2013 – 2015) Luận văn Thạc sỹ Khoa học Sinh học thực nghiệm ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN NGUYỄN THỊ THỦY NỒNG ĐỘ HOMOCYSTEIN VÀ MỘT SỐ CHỈ SỐ HÓA SINH HUYẾT TƢƠNG Ở BỆNH NHÂN ĐÁI THÁO ĐƢỜNG TÝP TẠI BỆNH VIỆN TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y KHOA THÁI NGUYÊN Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60420114 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Cán hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hoa PGS TS Trịnh Hồng Thái HÀ NỘI - 2017 Nguyễn Thị Thủy Cao học 22 (QH 2013 – 2015) Luận văn Thạc sỹ Khoa học Sinh học thực nghiệm LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố công trình Tác giả Nguyễn Thị Thủy Nguyễn Thị Thủy Cao học 22 (QH 2013 – 2015) Luận văn Thạc sỹ Khoa học Sinh học thực nghiệm LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban giám hiệu trường Đại học Khoa học tự nhiên, Phòng đào tạo Sau đại học, Ban chủ nhiệm Khoa Sinh học tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ trình học tập nghiên cứu Tôi xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc đến TS Nguyễn Thị Hoa người tận tình hướng dẫn, bảo truyền đạt kinh nghiệm để giúp tôiđạt kết tốt Trong trình làm việc, cô đưa nhận xét, góp ý quý báu để thực tốt nghiên cứu Tôi xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc đếnPGS.TS Trịnh Hồng Thái, thầy quan tâm nhắc nhở, đưa lời dẫn, động viên giúp hoàn thành luận văn Sự say mê khoa học thầy luôn gương sáng để học trò noi theo Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn tới thầy cô Khoa Sinh học trường Đại học Khoa học tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội truyền đạt kiến thức sở để thực luận văn thạc sỹ vận dụng công việc sau Tôi xin trân trọng cảm ơn tập thể cán môn Giải phẫu bệnh-Ung thư học, môn Sinh Hóa trường Đại học Y dược Thái Nguyên luôn dành cho quan tâm giúp đỡ đặc biệt để hoàn thành công việc Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn kính trọngđến thầy hội đồng chấm luận văn dành nhiều thời gian công sức, giúp đỡ hoàn thành luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè người thân quan tâm, động viên tinh thần, tạo điều kiện tốt suốt trình học tập thực luận văn Một lần xin trân trọng cảm ơn giúp đỡ quý báu đó! Hà Nội, tháng 02 năm 2017 Nguyễn Thị Thủy Cao học 22 (QH 2013 – 2015) Luận văn Thạc sỹ Khoa học Sinh học thực nghiệm Nguyễn Thị Thủy MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 BỆNH ĐÁI THÁO ĐƢỜNG 1.1.1 Định nghĩa 1.1.2 Dịch tễ học 1.1.3 Tiêu chuẩn chẩn đoán bệnh ĐTĐ theo WHO (1999) 1.1.4 Phân loại bệnh đái tháo đường 1.1.5 Một số yếu tố liên quan đến bệnh đái tháo đường 1.1.6 Các rối loạn chuyển hóa bệnh đái tháo đường 11 1.1.7 Biến chứng bệnh nhân đái tháo đường 14 1.2 TỔNG QUAN VỀ HOMOCYSTEIN 18 1.2.1 Cấu trúc phân tử homocystein 18 1.2.2 Quá trình chuyển hóa homocystein 19 1.2.3 Tác động gây hại homocystein 21 1.2.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến nồng độ homocysteine máu 25 1.2.5 Tình hình nghiên cứu homocysteine giới nước 27 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 2.1 Đối tượng nghiên cứu 31 2.1.1 Tiêu chuẩn chọn bệnh nhân 31 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ 32 2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 32 2.2.1 Địa điểm nghiên cứu 32 2.2.2 Thời gian nghiên cứu 32 Nguyễn Thị Thủy Cao học 22 (QH 2013 – 2015) Luận văn Thạc sỹ Khoa học Sinh học thực nghiệm 2.3 Phương pháp nghiên cứu .32 2.3.1 Thiết kế nghiên cứu 32 2.3.2 Cỡ mẫu 32 2.4 Chỉ tiêu nghiên cứu .33 2.4.1 Đặc điểm chung nhóm bệnh nhân nghiên cứu 33 2.4.2 Chỉ tiêu lâm sàng 33 2.4.3 Chỉ tiêu cận lâm sàng 33 2.5 Tiêu chuẩn chẩn đoán cách đánh giá 33 2.5.1 Chẩn đoán đái tháo đường 33 2.5.2 Tiêu chuẩn chẩn đoán rối loạn lipid máu 34 2.5.3 Chẩn đoán THA phân độ THA 35 2.5.4 Chẩn đoán tăng Hcy máu 35 2.5.5 Tiêu chuẩn đánh giá kiểm soát glucose 35 2.5.6 Đánh giá số khối thể 35 2.6 Thiết bị, hóa chất 36 2.6.1 Thiết bị 36 2.6.2 Hóa chất 36 2.6.3 Chất liệu nghiên cứu 36 2.7 Phương pháp thu thập số liệu 36 2.7.1 Phỏng vấn 36 2.7.2 Khám lâm sàng 36 2.7.3 Kỹ thuật định lượng tiêu cận lâm sàng 37 2.8 Xử lý số liệu 43 CHƢƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 44 3.1 Đặc điểm chung nhóm nghiên cứu 44 3.2 Nồng độ homocystein số số hóa sinh huyết tương nhóm nghiên cứu ……………………………………………………………………………50 3.3 Mối liên quan nồng độ homocystein huyết tương với số yếu tố nghiên cứu .55 Nguyễn Thị Thủy Cao học 22 (QH 2013 – 2015) Luận văn Thạc sỹ Khoa học Sinh học thực nghiệm THẢO LUẬN CHUNG 64 KẾT LUẬN 69 KIẾN NGHỊ 70 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Tóm tắt chế bệnh sinh đái tháo đường týp Error! Bookmark not defined Hình 1.2 Sơ đồ chuyển hóa homocystein Error! Bookmark not defined Hình 1.3 Cơ chế gây xơ vữa mạch, tạo huyết khối homocystein Error! Bookmark not defined Hình 1.4 Rối loạn chức nội mạc mạch máu XVĐM Error! Bookmark not defined Hình 2.1: Hệ thống máy AU 480 hãng Beckman Coulter Error! Bookmark not defined DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Phân loại tăng huyết áp theo JNC VI Error! Bookmark not defined Bảng 2.2 Phân loại tăng homocystein huyết tương [32] Error! Bookmark not defined Bảng 2.3 Tiêu chuẩn kiểm soát glucose theo Hiệp hội đái tháo đường châu Á – Thái Bình Dương năm 2005 [92] Error! Bookmark not defined Bảng 3.1 Đặc điểm tuổi Error! Bookmark not defined Bảng 3.2 Đặc điểm giới Error! Bookmark not defined Bảng 3.3 Đặc điểm nghề nghiệp Error! Bookmark not defined Bảng 3.4 Đặc điểm dân tộc Error! Bookmark not defined Bảng 3.5 Đặc điểm BMI Error! Bookmark not defined Bảng 3.6 Đặc điểm thời gian mắc bệnh Error! Bookmark not defined Bảng 3.7 Nồng độ homocystein huyết tương theo giới Error! Bookmark not defined Nguyễn Thị Thủy Cao học 22 (QH 2013 – 2015) Luận văn Thạc sỹ Khoa học Sinh học thực nghiệm Bảng 3.8 Nồng độ glucose HbA1C nhóm nghiên cứu Error! Bookmark not defined Bảng 3.9 Nồng độ số thành phần lipid huyết tương Error! Bookmark not defined Bảng 3.10 Nồng độ homocystein huyết tương theo mức độ kiểm soát glucose Error! Bookmark not defined Bảng 3.11 Nồng độ homocystein theo số BMI Error! Bookmark not defined Bảng 3.12 Nồng độ Hcy theo thời gian mắc bệnh Error! Bookmark not defined Bảng 3.13 Tương quan nồng độ Hcy với số thành phần lipid huyết tương ………………………………………………………………………… Er ror! Bookmark not defined CÁC CHỮ VIẾT TẮT ADA American Diabetes Association (Hội đái tháo đường Hoa Kỳ) BMI Body mass index (chỉ số khối thể) BN Bệnh nhân CS Cộng ĐTĐ Đái tháo đường Hcy Homocystein HDL-C High density lipoprotein cholesterol (Cholesterol lipoprotein tỷ trọng cao) IDF International Diabetes Federation (Hiệp hội đái tháo đường quốc tế) Nguyễn Thị Thủy Cao học 22 (QH 2013 – 2015) Luận văn Thạc sỹ Khoa học LDL-C Sinh học thực nghiệm Low density lipoprotein cholesterol (Cholesterol lipoprotein tỷ trọng thấp) MAU Microalbuminuria (Albumin niệu vi thể) THA Tăng huyết áp WHO World Health Organization (Tổ chức Y tế giới) YTNC Yếu tố nguy MTHFR 5,10-methylenetetrahydrofolate reductase Nguyễn Thị Thủy Cao học 22 (QH 2013 – 2015) Luận văn Thạc sỹ Khoa học Sinh học thực nghiệm MỞ ĐẦU Theo Tổ chức Y tế giới WHO (World Health Organization-WHO) kỷ 21 kỷ bệnh không lây nhiễm Trong bệnh lây nhiễm nguy hiểm đậu mùa, lao, MERS, Ebola… bước khống chế đẩy lùi bệnh không lây bệnh tim mạch, tâm thần, ung thư v.v…và đặc biệt rối loạn chuyển hóa glucid lipid ngày gia tăng Đái tháo đường (ĐTĐ) bệnh rối loạn chuyển hóa glucid mạn tính, phổ biến giới Việt Nam Tỷ lệ bệnh có xu hướng tăng dần theo thời gian theo tốc độ phát triển xã hội Ước tính có khoảng 422 triệu người trưởng thành bị ĐTĐ vào năm 2014 so với 108 triệu người mắc vào năm 1980 Tỷ lệ ĐTĐ toàn giới gia tăng gần gấp lần so với năm 1980 (4,7% năm 1980 so với 8,5% năm 2014) Trong vài thập kỷ vừa qua, tỷ lệ ĐTĐ tăng nhanh nước có thu nhập thấp thu nhập trung bình so với nước có thu nhập cao [89] Tại Việt Nam, tỷ lệ ĐTĐ gia tăng cách nhanh chóng Tại Việt Nam 10 năm vừa qua tăng tới 200% Tỷ lệ tiền đái tháo đường gia tăng nhanh chóng từ 7,7% lên gần 14% [9] Năm 2012, có 1,2 triệu BN ĐTĐ tử vong Hơn nữa, BN có nồng độ gluocse cao mức mong đợi nguyên nhân gây tử vong thêm 2,2 triệu người gia tăng nguy bệnh tim mạch bệnh khác [89] ĐTĐ gây nhiều biến chứng tất phận thể bệnh tim mạch, đột quị, suy thận, giảm thị lực phải cắt cụt chi [89] Sự nguy hiểm bệnh ĐTĐ bệnh rối loạn chuyển hóa nặng với nhiều biến chứng mạn tính cấp tính Ở BN ĐTĐ có tỷ lệ bệnh tim mạch gấp 2-4 lần so với người bình thường nguyên nhân gây tử vong hàng đầu BN ĐTĐ [55] Vì vậy, việc điều chỉnh số yếu tố nguy bệnh tim mạch bệnh nhân quan trọng Homocystein (Hcy) coi yếu tố nguy bệnh tim mạch [55], [56], [65] Tăng Hcy liên quan đến xơ vữa động mạch BN ĐTĐ mối liên quan mạnh so với đối Nguyễn Thị Thủy Cao học 22 (QH 2013 – 2015) Luận văn Thạc sỹ Khoa học Sinh học thực nghiệm Về mối liên quan nồng độ homocystein huyết tƣơng với số yếu tố khác Nồng độ Hcy huyết tương nhóm BN ĐTĐ không kiểm soát tốt glucose máu 13,15±3,79 μmol/L cao có ý nghĩa so với nhóm BN ĐTĐ kiểm soát tốt glucose máu 10,09±3,32μmol/L (p 23 coi yếu tố nguy ĐTĐ týp Kết nghiên cứu cho thấy: nồng độ Hcy huyết tương nhóm BN ĐTĐ thừa cân cao có ý nghĩa so với nhóm BN ĐTĐ không thừa cân Điều giải thích BN béo phì thường liên quan đến tình trạng kháng insulin, chế giải thích cho tăng nồng độ Hcy máu [19], [74] Theo nghiên cứu chúng tôi, nồng độ Hcy máu nhóm ĐTĐ thời gian Nguyễn Thị Thủy Cao học 22 (QH 2013 – 2015) 67 Luận văn Thạc sỹ Khoa học Sinh học thực nghiệm phát bệnh năm 9,38±1,62µmol/l, nhóm BN ĐTĐ týp có thời gian phát – 10 năm 12,32±3,29, thời gian phát bệnh 10 năm 16,63±4,08 µmol/l, p < 0,05 Sự khác biệt nồng độ Hcy nhóm có ý nghĩa thống kê Thời gian mắc bệnh ĐTĐ dài tần suất xuất biến chứng nguy tử vong cao Nghiên cứu cúng cho thấy có mối tương quan thuận, chặt, có ý nghĩa nồng độ Hcy huyết tương với thời gian mắc bệnh (n=60, r=0,73, p