1 T VN U nguyờn bo thn kinh m - Glioblastoma (GB) l loi u nóo nguyờn phỏt ca h thn kinh trung ng, chim khong 15-20% cỏc u ni s [1] T chc Y t Th gii phõn loi U nguyờn bo thn kinh m l loi ỏc tớnh nht ( IV) [2] T l U nguyờn bo thn kinh m nam cao hn n gii, tui phỏt hin trung bỡnh khong 64 tui [3] U nguyờn bo thn kinh m l loi u rt ỏc tớnh, thng hỡnh thnh cht trng nóo, phỏt trin nhanh chúng, v cú th thnh u ln trc xut hin triu chng Biu hin lõm sng u tiờn thng bng hi chng tng ỏp lc ni s nng, can thip iu tr thng khụng em li hiu qu, thi gian sng thờm ca bnh nhõn sau m trung bỡnh ch 10-12 thỏng [4] Do vy, vic tỡm cn nguyờn, c ch bnh sinh v quỏ trỡnh sinh bnh hc ca u nguyờn bo thn kinh m cú th can thip chớnh xỏc v hiu qu, ng thi a tiờn lng bnh l iu rt cn thit Cỏc nh khoa hc trờn th gii ó tỡm thy s bin i mt s gen nh RTEL1,TP53, RB1,NF1, PIK3R1, ERBB2, EGFR,IDHl [5-8] ú gen RTEL1 c phõn loi nh mt gen c ch u, gen b t bin, t bo b tn thng, DNA s khụng c sa cha v kim soỏt dn n hỡnh thnh v phỏt trin thnh u [9-12] Gen RTEL1 nm trờn cỏnh di nhim sc th 20, di 40,889kb, gm 40 exon Cỏc t bin hay gp ca gen trờn u nguyờn bo thn kinh m l cỏc t bin im Ngoi ra, nghiờn cu gn õy cho thy mt s a hỡnh gen nh SNPrs6010620, SNPrs2297440 trờn intron 12 ca gen RTEL1 cú liờn quan mt thit ti nguy c mc bnh u nguyờn bo thn kinh m [9-14] Ti Vit Nam cha cú nghiờn cu no v xỏc nh mt s a hỡnh trờn gen RTEL1 bnh u nguyờn bo thn kinh m Chớnh vỡ vy ti: a hỡnh n gen RTEL1 trờn bnh nhõn u nguyờn bo thn kinh m c tin hnh vi mc tiờu sau: Xỏc nh a hỡnh n SNPrs6010620, SNPrs2297440 gen RTEL1 trờn bnh nhõn u nguyờn bo thn kinh m Phõn tớch mi liờn quan ca a hỡnh thỏi n gen RTEL1 (SNPrs6010620, SNPrs2297440) vi bnh u nguyờn bo thn kinh m CHNG TNG QUAN Tng quan u nóo nh ngha u nóo U nóo l mt ca cỏc t bo bt thng hỡnh thnh nóo Cú loi u nóo chớnh l: u ỏc tớnh (hay ung th) v u lnh tớnh [15] Cỏc u ỏc tớnh cú th c chia thnh u nguyờn phỏt v u di cn ca nóo [16] Phõn loi u nóo: Theo phõn loi ca WHO 2007, u ca h thn kinh trung ng cú loi sau õy: U biu mụ thn kinh (neuroepithelial tissue), U ca dõy thn kinh s v thn kinh ngoi biờn (crainial and paraspinal nerves), U mng nóo (meninges), Ung th hch v t bo to mỏu (lymphoma and hematopoietic), U t bo mm (germ cell tumous), U vựng h yờn (tumor of the sellar region), U di cn (metastatic tumou SNPrs) Tỡnh hỡnh mc bnh nc v trờn th gii Ngy nay, ung th ó tr thnh mt sc kho mang tớnh cht ton cu Theo thng kờ ca t chc ung th th gii (IARC) hng nm trờn th gii cú khong 12,7 triu ca mc mi vi 7,6 triu ca t vong, trung bỡnh mi ngy trờn th gii cú khong 21.000 trng hp t vong ung th [15,16] c tớnh n nm 2050 th gii s cú thờm khong 27 triu ca ung th mi mi nm vi khong 17,5 triu bnh nhõn t vong Cú mt thc t rng t l mc ung th ang chm li cỏc nc phỏt trin, nhng li tng cao ti cỏc nc ang phỏt trin ú cú Vit Nam Rừ rng chỳng ta cn phi cú nhng bin phỏp kp thi ngn nga s hỡnh thnh v tin trin cng nh nõng cao hiu qu vic iu tr ung th [17] T nhng nghiờn cu t phỏ Y hc, c ch phõn t ca ung th dn c sỏng t Theo ú, chớnh s tớch ly t bin gen theo thi gian dn ti s phỏt sinh, phỏt trin mi dng t bo ung th c th Quỏ trỡnh chuyn dng t bo sang ỏc tớnh thng c ỏnh du bng s kớch hot cỏc gen gõy ung th v t bin gõy bt hot cỏc gen ỏp ch ung th nm ti mt s v trớ ch cht trờn cỏc ng tớn hiu t bo [18,19] C ch iu hũa gen hot ng nhp nhng v cht ch cng b ri lon khin h thng cỏc enzym sa cha thng tn gen ca t bo khụng th khc phc dn ti vic tớch ly mt s lng ln cỏc t bin, phỏt quỏ trỡnh ung th [20,21] Nhng cng chớnh cỏc t bin li lm tng ỏi lc ca thuc iu tr ớch vi cỏc phõn t ny v c ch s dn truyn tớn hiu cỏc t bo ung th Nh ú chỳng lm tng hiu qu ca thuc iu tr ớch vic tiờu dit cỏc t bo ung th [22] Chớnh vỡ vy vic nõng cao hiu qu iu tr, theo dừi tiờn lng bnh ung th hin luụn cn cú cỏc xột nghim phõn tớch t bin gen tng ng vi mi loi hỡnh ung th U nguyờn bo thn kinh m (GB) l mt cỏc u nóo ph bin nht hin [23,24] Bnh nhõn mc loi ung th ny thng cú tiờn lng khụng tt s tin trin nhanh chúng v xõm ln cỏc t chc mụ nóo, thn kinh ca u hp s [25] Tuy nhiờn vi nhng hiu bit v c ch phõn t v s kt hp nhiu phng phỏp iu tr, ú cú liu phỏp iu tr ớch da trờn phõn tớch tỡnh trng t bin gen, ó lm gia tng ỏng k thi gian sng ca bnh nhõn nhng nm qua [26] Bờn cnh ú, xỏc nh t bin gen ca cỏc i tng cựng huyt thng ó ch nhng yu t nguy c gúp phn vo vic lm gim t l mc v ngn nga s phỏt sinh, phỏt trin ung th [27] Tng quan v U nguyờn bo thn kinh m U nguyờn bo thn kinh m (Glioblastoma) l mt cỏc u nóo ph bin nht, chim khong 12 l 15% ca tt c cỏc u nóo U nguyờn bo thn kinh m thng hỡnh thnh cht trng nóo, phỏt trin nhanh chúng, v cú th thnh u ln trc xut hin nhng triu chng u tiờn nờn biu hin lõm sng bng hi chng tng ỏp lc ni s nng n [15,17] V mụ hc, u c c trng bi vựng mụ hoi t, bao quanh l cỏc t bo bit húa kốm theo l hin tng tng sinh mch T chc Y t Th gii phõn loi U nguyờn bo thn kinh m nh mt u t bo hỡnh (Astrocytoma) cp III v IV vi ỏc tớnh cao [33,34] Hu ht cỏc bnh nhõn u nguyờn bo thn kinh m c chn oỏn l u nguyờn phỏt v mt s bnh nhõn l u th phỏt v phỏt trin t u thn kinh m cú mc ỏc tớnh thp hn T l mc U nguyờn bo thn kinh m trờn th gii c thng kờ l khong 3-5 ca trờn 100.000 dõn Nghiờn cu ca Richard Johnson v cng s cho thy nm 2010 cú khong 10.800 bnh nhõn ti Hoa K c chn oỏn u nguyờn bo thn kinh m, ú cú gn 10 nghỡn ca t vong T l mc u nguyờn bo thn kinh m nam gii xp x 1.6 ln so n gii T l U nguyờn bo thn kinh m phỏt hin nhiu nht vo tui t 45 n 62 v di 10% cỏc trng hp ung th dng ny xy tr em [25,26] 1.3 c im mụ bnh hc ca u nguyờn bo thn kinh m Cỏc t bo ca u nguyờn bo thn kinh m cú ngun gc phụi thai gim bit hoỏ tng sn c chia thnh loi da vo ngun gc phỏt sinh l u phụi thai tiờn phỏt (60%) v u th phỏt t t bo hỡnh [34] Hỡnh nh i th ca u nguyờn bo thn kinh m khỏ in hỡnh vi ranh gii hỡnh vũng cung khụng rừ rt, ct ngang u cú th gp mu xỏm hay hng, cú im hoi t mu vng hoc vựng cú xut huyt thỡ mu hoc nõu thõm Thnh mch mỏu u tng sinh dy, cú th gp u th nang hay nhiu ụ, u thng cú mt mm v ch cng xõm ln dỏnh vo mng nóo gõy chy mỏu [35,36] Hỡnh nh vi th ca cỏc u nguyờn bo thn kinh m rt khỏc Khi u luụn dy c t bo, nhng cú th ng dng hoc a hỡnh vi nhiu giai on trung gian gia hai loi t bo Tớnh bit hoỏ thp, to s gim thiu cỏc nhỏnh bo tng v nhõn bt mu m, a hỡnh thỏi [35,36] Cú th u ch yu sau: - U nguyờn bo thn kinh m a hỡnh: gm ch yu nhng nguyờn bo thn kinh a hỡnh xem k mt s neuron ca v nóo Cỏc t bo ny ớt bit hoỏ, nhõn bt mu m, thụ, nhiu nhõn chia co cm cung quanh mt s im hoi t nh Mao mch u thnh dy, tng sn mnh t bo ni mụ, nhiu im xut huyt ri rỏc cú ch lũng mch b chớt hp v t chc hoỏ hay vụi hoỏ [36] Hỡnh 1.1 Tiờu bn nhum HE mụ u nguyờn bo thn kinh m U nguyờn bo thn kinh m phúng i x400 ln; trờn tiờu bn cho thy mt u dy c, a hỡnh dng, cú d nhõn, nhõn quỏi, nhõn chia T bo bit hoỏ theo hng khỏc nhau, hoi t hỡnh bn , tng sinh mi mch dng cun Kt qu c thc hin ti Khoa Gii phu bnh, Bnh vin Vit c -U nguyờn bo thn kinh m th hn hp vi saccoma x: mụ nóo lnh lin k xen k vi tn thng sỏt b mt u gm dy c t bo a hỡnh thỏi Ch yu l dng t bo thoi, ớt nhỏnh thn kinh m Vựng nóo lnh xung quanh cú mt s t bo u lan trn nhng khụng cú phn ng mch mỏu [34-36] -U nguyờn bo thn kinh m th t bo khng l: u dy gm dy c cỏc t bo a hỡnh thỏi, kớch thc khỏc nhau, phn ln l cỏc t bo hỡnh trũn hay ụ van vi nhõn bt mu kim m, thụ, hay gp hỡnh nh nhõn chia Ngoi cú mt s t bo khng l, nhõn bt mu thụ m dng hỡnh thỏp hay a din vi ht nhõn rừ, nhiu hỡnh nh phõn bo C hai loi t bo ny u ớt t thn kinh Trong t chc u cú nhiu im hoi t thõm nhp bi cỏc vi bo m thn kinh v mt s vựng xut huyt ri rỏc [34-36] Mch mỏu u nguyờn bo thn kinh m: thay i liờn quan n s phỏt trin ca u v cỏc vựng lõn cn Bin i hỡnh thỏi quan trng nht l tng sn ni mụ mch mỏu nh nuụi u, c bit cú th gp cỏc bỳi t bo ni mụ xp li thnh tng cm [37] Nhõn t bo ni mụ tri rng hay gp hỡnh nhõn chia ụi cú mt s bin i nh cỏc im mao mch thnh dy lũng mao mch gión rng to hỡnh nh mch [38] Theo phõn loi trờn u biu mụ thn kinh cú loi, ú cú u t bo U t bo gm cú u t bo th lụng, u biu mụ t bo khng l mng ni ty ( I), u biu mụ t bo hn hp mu vng, u t bo lan ta l II, cú ỏc tớnh thp U t bo thoỏi trin ( III), u nguyờn bo thn kinh m ( IV) cú ỏc tớnh cao [2] 1.4 Chn oỏn u nguyờn bo thn kinh m 1.4.1.Triu chng lõm sng v nhng du hiu thng gp Trong giai on sm, bnh nhõn khụng cú cỏc triu chng in hỡnh v thng d dng b b qua [32] Trong giai on bnh tin trin, bnh nhõn xut hin cỏc triu chng ca tng ỏp lc ni s s phỏt trin ca u Cỏc triu chng bao gm nhng cn au u d di vo cỏc bui sỏng v gim hn ngy Cỏc hot ng lm gia tng ỏp lc ni s nh ho, ht hi, cỳi xung hoc lm cỏc cụng vic nng u lm gia tng mc ca cỏc cn au Tng ỏp lc ni s khin bnh nhõn cú th b ri lon tm nhỡn v ri lon kh nng thng bng [33,34] Ngoi ra, bnh nhõn cũn cú th xut hin mt s triu chng liờn quan n v trớ ca u nh: thay i v tớnh cỏch v trớ tu, khú khn vic din t ngụn ng, khú khn vic thc hin cỏc di chuyn phi hp, lit hoc suy yu na ngi[31,32] Soi ỏy mt bnh nhõn cú th cú phự gai th, mt du hiu ca tng ỏp lc ni s 1.4.2 Cỏc xột nghim chn oỏn hỡnh nh Chp ct lp vi tớnh nóo (CT-Scanner): cú th chp thụng thng hoc s dng thuc cn quang tng cng hỡnh nh ti mt s vựng nht nh ca nóo Phng phỏp ny cho phộp xỏc nh chớnh xỏc v trớ v kớch thc ca u [38, 44, 45] Chp cng hng t (MRI): c ỏp dng cn xỏc nh chi tit v trớ u MRI cho bit t trng, mt , cu trỳc v cú th phỏt hin c nhng thay i rt nh bờn v cỏc vựng lõn cn ca u [38, 44, 45] Chp positron ct lp (chp PET-CT): phng phỏp ny cung cp hỡnh nh ng ca nóo bng vic tiờm ng glucose cú gn vi mt lng nh cht phúng x Lng thuc phúng x s dng s khụng nhiu hn liu lng ca mt tia x thụng thng.Khi u thng hp th glucose v cht phúng x hin th trờn hỡnh chp Bn chp PET cú th cung cp cỏc thụng tin liu u cú ang tip tc phỏt trin hay khụng, l u lnh tớnh hay ỏc tớnh Ngoi PET-CT cũn c bit cú giỏ tr trng hp chn oỏ s di cn ca ung th v ỏnh giỏ mc ỏc tớnh ca u [38, 44, 45] Chp ng mch nóo : ng mch hin th cu trỳc ca mch mỏu v cú th hin th v trớ ca u bờn nóo õy l bin phỏp hu ớch cho cỏc bỏc s lờn k hoch phu thut loi b u cho bnh nhõn [38, 44, 45] Tiờu bn mụ bnh hc: bnh nhõn sau c phu thut loi b u thỡ mu mụ ung th s c lm tiờu bn gii phu bnh chn oỏn chớnh xỏc th bnh cng nh mc bit hoỏ ca ung th da trờn hỡnh nh t bo v cu trỳc mụ bnh hc [41,43] 1.4.3 iu tr Nguyờn tc iu tr v phũng bnh iu tr ch yu phu thut ct u, tia x, hoỏ cht v iu tr triu chng [31] Tuy nhiờn cỏc can thip ny em li kt qu rt hn ch Phu thut Mc tiờu ca vic phu thut l loi b u v khụng gõy tn thng n t chc nóo lnh Tuy nhiờn mc tiờu ú t c hay khụng cũn ph thuc vo v trớ u nụng hay sõu, u cú gii hn rừ hay khụng Liờn quan vi u, lng u v trỡnh chuyờn khoa ca phu thut viờn Nh chp ct lp vi tớnh v kớnh hin vi phu thut ngi ta cú th ly b u mt cỏch trit hn Tuy 10 nhiờn khụng phi loi u no cng cú th ly b trit c, u mng nóo cú gii hn rừ nhng ụi cng ch ly c mt phn U nóo sõu, hnh nóo, thõn nóo, cỏc mch mỏu ln, nn s thỡ vic ly b u s rt khú khn vỡ gn trung khu hụ hp, tim mch v khú cm mỏu iu tr tia x Tia phúng x trc ht c dựng dit nhng t bo ỏc tớnh cũn li sau ct b hoc nhng u ỏc tớnh sõu m ngi ta ch phu thut ti thiu Stereotaxy vi kt qu gii phu bnh kốm theo Ngi ta cũn dựng ngn khụng cho cỏc u lnh tớnh hoc tng i lnh tớnh tỏi phỏt nh Adenoma tuyn yờn hoc Craniopharynoma Núi chung nhng nm qua iu tr cỏc u nóo bng tia phúng x ó cú nhng bc tin ỏng k s tin b ca trang thit b mỏy múc Hin nay, ngi ta dựng dao gamma iu tr u nóo, phu thut an ton, hiu qu cao iu tr hoỏ cht Hin kt qu iu tr u ỏc tớnh bng hoỏ cht rt ỏng khớch l, nhng i vi u ca mụ nóo cha thay i rừ rt v tiờn lng Ngi ta khuyờn ch nờn dựng cỏc hoỏ cht nhng trng hp u ỏc tớnh phỏt trin nhanh, c th i vi cỏc loi U nguyờn bo thn kinh m, Astrocytoma III v IV Nhiu tỏc gi ó cho rng hoỏ cht ó lm cho kt qu iu tr tt hn Cỏc hoỏ cht c dựng iu tr u nóo cú th k mt vi loi sau: Cyclophosphamide (Endoxan), Fluoro-Uracyle (5FU), Methotrexate (Aethopterin), Vincristine (Oncovin), Mythramycine (Mithrancin), Doxorabicine (Adriamycine) Hoỏ cht dựng sau tia phúng x, c hai phng phỏp ny dựng iu tr b sung sau phu thut 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 ng Th Ph ng Th Q Nguyn Th Phng Th Ngụ Khỏnh V Dng Vn M Lờ Vn Q Lờ Th T u Khỏnh L Trnh Xuõn Kh Nguyn Th Th H Minh T Trn Cụng H Lờ Vn Phm Vit A Trn Th Ph Bựi Vn H V Thỳy V Nguyn Th S Li Vn M Nguyn Vn Lu Th H Th H Ngc Q Lng Trung S Dng Danh Hong Thanh T Lờ Bỏ H V Duy K Dng c T Phm Thnh H Trng Th M N Vn M Lờ Th T Bựi Linh Ch Nguyn Th H Lờ Vn Tr Nguyn Vn M Lờ Quang 58 64 13 49 51 53 76 69 55 25 21 48 69 49 42 48 58 46 52 48 66 62 49 52 34 56 10 44 49 31 45 73 58 49 45 56 60 N N N N Nam Nam N N Nam N N Nam Nam Nam N Nam N N Nam Nam N N Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nam N N Nam N N N Nam Nam Nam 0983599 0988112 0978063 01688798 0987858 0948408 0962252 01689714 0987985 01683771 0948780 0946075 0971074 0942483 0928955 0979148 01697644 0988464 01672062 01649299 0978560 0949937 0987460 01665301 0945384 01653338 01678748 0966646 0916744 0984798 01272890 0978659 0962252 0983818 0966646 01698380 0984896 01693096 Tuyờn Quang Cm Khờ Thỏi Bỡnh Phỳ Th Bc Ninh H Tnh Ninh Bỡnh Ngh An H Ni Qung Ninh Thanh Húa H Ni Bc Giang H Nam Nam nh Thanh Húa Bc Giang Thỏi Bỡnh Tuyờn Quang Nam nh Thanh Húa Hi Phũng Lai Chõu Hi Phũng Bc Giang Sn La Thanh Húa H Ni Qung Bỡnh Ngh An Qung Ninh H Ni Ninh Bỡnh H Ni H Ni Thanh Húa Thanh Húa Phỳ Th Chng nhn Khoa Huyt Hc Chng nhn Phũng K Hoch Tng Hp Bnh vin Vit c Bnh vin Vit c B GIO DC V O TO B Y T TRNG I HC Y H NI Lấ TH HNG ĐA HìNH ĐƠN GEN RTEL1 TRÊN BệNH NHÂN U NGUYÊN BàO THầN KINH ĐệM LUN VN THC S Y HC H NI 2016 B GIO DC V O TO B Y T TRNG I HC Y H NI Lấ TH HNG ĐA HìNH ĐƠN GEN RTEL1 TRÊN BệNH NHÂN U NGUYÊN BàO THầN KINH ĐệM Chuyờn ngnh : Húa sinh Mó s : 60720106 LUN VN THC S Y HC Ngi hng dn khoa hc: PGS.TS TRN VN KHNH H NI 2016 MC LC T VN CHNG TNG QUAN Tng quan u nóo nh ngha u nóo Tỡnh hỡnh mc bnh nc v trờn th gii Tng quan v U nguyờn bo thn kinh m 1.3 c im mụ bnh hc ca u nguyờn bo thn kinh m 1.4 Chn oỏn u nguyờn bo thn kinh m 1.4.1.Triu chng lõm sng v nhng du hiu thng gp .8 1.4.2 Cỏc xột nghim chn oỏn hỡnh nh 1.4.3 iu tr Nguyờn tc iu tr v phũng bnh iu tr ch yu phu thut ct u, tia x, hoỏ cht v iu tr triu chng [31] Tuy nhiờn cỏc can thip ny em li kt qu rt hn ch 1.4.4 Tiờn lng u nguyờn bo thn kinh m 11 1.5 C ch bnh sinh bnh u nguyờn bo thn kinh m 11 1.5.1 Cỏc yu t nguy c .11 1.5.2.C ch bnh sinh 12 1.6.Tớnh a hỡnh ca gen RTEL1 13 1.6.1 Tớnh a hỡnh gen SNP .13 1.6.2 Gen RTEL1 15 1.7 Cỏc phng phỏp xỏc nh kiu gen RTEL1 16 1.7.1 K thut polymerase chain reaction (PCR) .16 1.7.2 K thut gii trỡnh t gen 18 CHNG 21 I TNG V PHNG PHP NGHIấN CU .21 2.1 i tng nghiờn cu .21 2.2 Dng c, trang thit b v húa cht s dng nghiờn cu 21 2.2.1 Trang thit b nghiờn cu 21 2.2.2 Dng c nghiờn cu 21 2.2.3 Húa cht nghiờn cu 22 2.3 Phng phỏp nghiờn cu: 23 2.3.1 Thit k nghiờn cu: Mụ t ct ngang 23 2.3.2 a im nghiờn cu 26 2.3.3 Quy trỡnh tỏch chit DNA 26 2.3.4 Xỏc nh nng v tinh sch ca DNA tng s sau tỏch chit 28 2.3.5 K thut gii trỡnh t gen 31 2.4 X lý s liu .32 2.5 Lp k hoch thc hin 32 2.6 Vn o c nghiờn cu 32 CHNG 34 KT QU NGHIấN CU 34 3.1 c im ca nhúm nghiờn cu .34 3.1.1 c im v tui 34 3.1.2 c im v gii 35 3.2 Xỏc nh a hỡnh n SNPrs6010620, SNPrs2297440 gen RTEL1 .35 3.2.1.Kt qu tỏch chit DNA tng s 36 3.2 Kt qu khuch i sn phm PCRca vựng gen SNP SNPrs6010620 v SNP SNPrs2297440 37 3.3.Kt qu gii trỡnh t gen xỏc nh a hỡnh ca gen RTEL1 39 3.3.1 Kt qu xỏc nh a hỡnh SNPrs6010620 ca nhúm bnh v nhúm chng .39 3.3.2 Kt qu xỏc nh a hỡnh SNPrs2297440 ca nhúm bnh v nhúm chng .43 3.3 Mi liờn quan ca a hỡnh thỏi n SNPrs6010620, SNPrs2297440 gen RTEL1 vi bnh u nguyờn bo thn kinh m 48 CHNG 52 BN LUN 52 4.1.c im ca nhúm nghiờn cu: 55 4.1.1 c im v tui ca nhúm u nguyờn bo thn kinh m .55 4.1.2 c im v gii ca nhúm u nguyờn bo thn kinh m .56 4.2 V kt qu tỏch chit DNA 56 4.3 Kt qu PCR .58 4.4 T l kiu gen SNPrs6010620 vSNPrs2297440 gen RTEL1trong nhúm bnh v nhúm chng 60 KT LUN 66 KIN NGH, XUT .67 Kt qu nghiờn cu ny chng minh gen CC ca SNPrs 6010620 v gen GG ca SNPrs2297440 l yu t nguy c phỏt trin bnh u nguyờn bo thn kinh m Chỳng tụi xut mt hng nghiờn cu tip cho cho gen RTEL1 l tin hnh xỏc nh tớnh a hỡnh thỏi n ca gen RTEL1 cng ng, trung vo nhúm i tng cao tui 67 D TR KINH PH 68 TI LIU THAM KHO PH LC DANH MC BNG - Húa cht chy in di: 23 Bng 3.1 c im tui ca nhúm nghiờn cu 34 Bng 3.2 c im v gii ca nhúm nghiờn cu 35 Bng 3.3 T l kiu gen ca SNPrs6010620 .40 Bng 3.4 T l kiu gen ca SNP SNPrs2297440 .44 Bng3.5 T l kiu gen ca nhúm bnh 48 Bng3.6:T l kiu gen ca nhúm chng 49 Bng 3.7: T l gen CC (GG) theo nhúm bnh v nhúm chng 50 Kt qu o nng v tinh sch cỏc mu DNA tỏch t mỏu ngoi vi ca cỏc i tng nghiờn cu .74 DANH MC BIU Biu 3.1 T l phõn b gii tớnh hai nhúm A: nhúm bờnh B: nhúmchng 35 Biu 3.2 T l kiu gen SNPrs6010620 ca nhúm bnh .40 v nhúm chng .40 Biu 3.3 T l kiu gen SNPrs2297440 ca nhúm bnh v nhúm chng 45 Biu 3.4: T l kiu gen CC v TC+TT nhúm bnh vi nhúm chng 51 DANH MC HèNH Hỡnh 1.1 Tiờu bn nhum HE mụ u nguyờn bo thn kinh m U nguyờn bo thn kinh m Hỡnh 1.2 Hỡnh nhminh hin tng a hỡnh thỏi n nucleotid SNP 14 Hỡnh 3.1 Kt qu xỏc nh nng v tinh sch ca DNA trờn mỏyNano Drop ca bnh nhõn mó s GB2 .36 Hỡnh 3.2 Hỡnh nh in di DNA tng s trờn gel agarose 1% 37 Hỡnh 3.3 Hỡnh nh in di sn phm PCR on gen RTEL1 38 Hỡnh 3.4 Hỡnh nh gii trỡnh t i din kiu gen AA; GA v GG ca SNP SNPrs6010620 39 Hỡnh 3.5 Hỡnh nh gii trỡnh t i din kiu gen CC; TC v TT ca SNP SNPrs2297440 44 LI CM N Trong sut thi gian hc tp, thc hin lun ny, tụi ó nhn c rt nhiu s quan tõm, ng viờn quý bỏu t cỏc Thy Cụ giỏo, ng nghip, gia ỡnh v bn bố Bng tt c s kớnh trng v tỡnh cm chõn thnh nht, tụi xin by t lũng bit n sõu sc ti PGS.TS Trn Võn Khỏnh, Phú Giỏm c Trung tõm Nghiờn cu Gen-Protein, Trng B mụn Bnh hc phõn t, Khoa K thut Y hc, Trng i hc Y H Ni, ngi Thy ó ht lũng quan tõm giỳp , tn tỡnh ch bo, trc tip hng dn tụi t nhng ngy u lm lun Cụ luụn khớch l, ng viờn tụi nhng lỳc tụi gp khú khn hc cng nh cuc sng Tụi xin by t lũng bit n sõu sc ti GS.TS T Thnh Vn, Phú Hiu trng, Giỏm c Trung tõm Nghiờn cu Gen-Protein, Trng B mụn Húa sinh, Trng i hc Y H Ni, ngi Thy ó truyn t nhng kin thc v kinh nghim quý bỏu cng nh to mi iu kin thun li giỳp tụi hon thnh lun ny Tụi xin by t lũng bit n sõu sc ti cỏc Thy, Cụ B mụn Húa sinh, Trng i hc Y H Ni ó dy d v truyn t nhng kin thc quý bỏu quỏ trỡnh hc v nghiờn cu Tụi cng xin gi li cm n n CN Nguyn Quý Hoi cựng ton th cỏc anh, ch, em ca trung tõm Trung tõm Gen-Protein, Trng i hc Y H Ni ó giỳp tụi quỏ trỡnh hc k thut, hon thin quy trỡnh k thut nghiờn cu Tụi xin by t lũng bit n n Khoa Huyt Hc, Khoa Thn Kinh I, Khoa Thn Kinh II, Khoa Gii phu Bnh Bnh vin Vit c Tụi xin gi li cm n chõn thnh ti: Ban Giỏm hiu, Phũng o to Sau i hc, Trng i hc Y H Ni Ban Giỏm c, lónh o Khoa Húa sinh, cựng cỏc cỏn b khoa ca Vin Dinh Dng ó to iu kin cho tụi quỏ trỡnh hc v nghiờn cu Xin c gi li cm n ti bnh nhõn bnh nhõn , ngi nh bnh nhõn ó giỳp tụi cú c s liu lun ỏn ny Cui cựng, tụi xin ghi nh cụng n sinh thnh, nuụi dng v tỡnh yờu thng ca Cha m tụi, cựng s ng h ca gia ỡnh, bn bố, ng nghip, nhng ngi ó luụn bờn cnh ng viờn, ng h, giỳp v to iu kin cho tụi v giỳp tụi hon thin lun ny H Ni, ngy 10 thỏng 12 nm 2016 Hc viờn Lờ Th Hng LI CAM OAN Kớnh gi: Phũng qun lý o to Sau i hc-Trng i hc Y H Ni B mụn Húa Sinh- Trng i hc Y H Ni Hi ng bo v Lun Thc s Y hc nm 2016 Tụi l Lờ Th Hng, hc viờn cao hc khúa 23 Trng i hc Y H Ni, chuyờn ngnh Húa Sinh, xin cam oan: õy l lun bn thõn tụi trc tip thc hin di s hng dn ca PGS.TS Trn Võn Khỏnh Cụng trỡnh ny khụng trựng lp vi bt k nghiờn cu no khỏc ó c cụng b ti Vit Nam Cỏc s liu v thụng tin nghiờn cu l hon ton chớnh xỏc, trung thc v khỏch quan Tụi xin hon ton chu trỏch nhim trc phỏp lut v nhng cam kt ny H Ni, ngy 10 thỏng 12 nm 2016 Ngi vit cam oan Lờ Th Hng DANH MC CC CH VIT TT GB DNA cDNA RNA mRNA NST Kb Bp Glioblastoma Deoxyribonucleic Acid Complementary Deoxyribonucleic Acid Ribonucleic Acid Messenger Ribonucleic Acid (RNA thụng tin) Nhim sc th Kilo base Base pair SNP Single Nucleotide Polymorphism NCBI dNTP National Center for Biotechnology Information Deoxyribonucleoside triphosphate ddNTP PCR EDTA Dideoxyribonucleoside triphosphate Polymerase Chain Reaction Ethylendiamin Tetraacetic Acid SNP Single Nucleotide Polymorphism A C G T Adenin Cytosine Guanine Thymine ... RTEL1 bệnh u nguyên bào thần kinh đệm Chính đề tài: Đa hình đơn gen RTEL1 bệnh nhân u nguyên bào thần kinh đệm tiến hành với mục ti u sau: Xác định đa hình đơn SNPrs6010620, SNPrs2297440 gen. .. gen RTEL1 bệnh nhân u nguyên bào thần kinh đệm Phân tích mối liên quan đa hình thái đơn gen RTEL1 (SNPrs6010620, SNPrs2297440) với bệnh u nguyên bào thần kinh đệm 3 CHƯƠNG TỔNG QUAN Tổng quan u. .. nhánh bào tương nhân bắt m u đậm, đa hình thái [35,36] Có thể u chủ y u sau: - U nguyên bào thần kinh đệm đa hình: gồm chủ y u nguyên bào thần kinh đa hình xem kẽ số neuron vỏ não Các tế bào biệt