Nghiên cứu xác định hàm lượng các axit amin trong một số loài nấm lớn ở vùng Bắc Trung Bộ bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC

96 527 0
Nghiên cứu xác định hàm lượng các axit amin trong một số loài nấm lớn ở vùng Bắc Trung Bộ bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH PHẠM THỊ NGUYỆT NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG CÁC AXIT AMIN TRONG MỘT SỐ LOÀI NẤM LỚN Ở VÙNG BẮC TRUNG BỘ BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO HPLC LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC NGHỆ AN - 2014 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH PHẠM THỊ NGUYỆT NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG CÁC AXIT AMIN TRONG MỘT SỐ LOÀI NẤM LỚN Ở VÙNG BẮC TRUNG BỘ BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO HPLC Chuyên ngành: Hóa phân tích Mã số: 60.44.01.18 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS TS TRẦN ĐÌNH THẮNG NGHỆ AN - 2014 LỜI CẢM ƠN Luận văn thực phòng thí nghiệm Trung tâm Kiểm định An toàn Thực phẩm Môi trường - Trường Đại học Vinh Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc đến PGS.TS Trần Đình Thắng - Phó trưởng khoa Hoá học, Trường Đại học Vinh giao đề tài, tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện thuận lợi suốt trình nghiên cứu hoàn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn thầy giáo Th.S Hoàng Văn Trung - Khoa Hóa học - Trường Đại học Vinh giúp đỡ bảo tận tình cho hoàn thành luận văn PGS TS Ngô Anh Trường Đại học Khoa học Huế giúp định danh mẫu nấm ThS Chu Thị Thanh Lâm - Trung tâm kiểm định An toàn thực phẩm Môi trường - T.T Thực hành thí nghiệm - Trường Đại học Vinh tạo điều kiện thuận lợi cho trình sử dụng máy HPLC để đo mẫu Nhân dịp này, xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô, cán Khoa Hoá học - trường Đại học Vinh tạo điều kiện cho học tập nghiên cứu môi trường học tập khoa học Cuối xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình, người thân bạn bè động viên giúp đỡ hoàn thành luận văn Vinh, tháng 10 năm 2014 Học viên Phạm Thị Nguyệt MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Đối tượng phạm vi nghiên cứu Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Nấm 1.1.1 Định nghĩa nấm lớn 1.1.2 Phân loại nấm 1.1.3 Đặc điểm dinh dưỡng nấm 1.1.4 Vai trò nấm tự nhiên đời sống người 1.2 Axit amin 12 1.2.1 Định nghĩa cấu trúc 12 1.2.2 Phân loại 14 1.2.3 Tính chất hóa lý axit amin 16 1.2.4 Vai trò axit amin 17 1.2.5 Axit amin nấm 22 1.3 Các phương pháp tách xác định đồng thời axit amin 24 1.3.1 Các phương pháp sắc ký cổ điển 24 1.3.2 Phương pháp sắc ký khí 26 1.3.3 Phương pháp điện di mao quản 27 1.3.4 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 28 Chƣơng PHƢƠNG PHÁP VÀ THỰC NGHIỆM 31 2.1 Thiết bị, dụng cụ hóa chất 31 2.1.1 Thiết bị dụng cụ 31 2.1.2 Hóa chất 31 2.2 Phương pháp nghiên cứu 34 2.3 Thực nghiệm 34 2.3.1 Thu thập mẫu nấm 34 2.3.2 Xử lí mẫu 36 2.3.3 Tiến hành phân tích máy 39 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 40 3.1 Nghiên cứu xử lý mẫu tối ưu 40 3.1.1 Khảo sát nồng độ HCl 40 3.1.2 Khảo sát thời gian thủy phân mẫu 44 3.2 Đánh giá phương pháp 48 3.2.1 Xây dựng phương trình đường chuẩn xác định khoảng tuyến tính 48 3.2.2 Xác định giới hạn phát LOD giới hạn định lượng LOQ phương pháp 54 3.2.3 Xác định độ lặp lại, độ thu hồi phương pháp 57 3.3 Xác định hàm lượng axit amin mẫu nấm 61 3.3.1 Kết phân tích hàm lượng axit amin thủy phân 62 3.3.2 Kết phân tích hàm lượng axit amin tự 70 KẾT LUẬN 77 TÀI LIỆU THAM KHẢO 79 BẢNG KÍ HIỆU CÁC TỪ VIẾT TẮT DM Tên đầy đủ Hiệp hội nhà hoá học phân tích thống Aminoquinolil- Nhydroxysuccinimidyl cacbamat Chất khô Tên tiếng Anh Association of Official Analytical Chemists Aminoquinolil- Nhydroxysuccinimidyl carbamate dry matter EAA Axit amin thiết yếu Essential amino acid FMOC 9-florenylmetyl cloroformat 9-florenylmethyl cloroformate GC Sắc ký khí Sắc ký khí detector ion hóa lửa Gas chromatography Gas chromatography/ flame ionization detector Gas chromatography/ mass spectrometry High performance liquid chromatography Viết tắt AOAC AQC GC/FID GC/MS Sắc ký khí khối phổ HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao KPH Không phát MeOH Metanol Methanol NEAA Axit amin không thiết yếu ortho-phtalandehit/ orthophtaldiandehit Phenylisothioxyanat RP-HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao pha ngược TAA Tổng axit amin Nonessential amino acid ortho-phthalaldehyd/ orthophthaldialdehyde Phenylisothiocyanate Reversed phase - High performance liquid chromatography Total amino acid TEA Trietylamin Triethylamine THF Tetrahydrofuran Tetrahydrofuran OPA PITC DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Cấu trúc 20 axit amin tiêu chuẩn 13 Bảng 1.2: Trị số ước lượng lượng đòi hỏi axit amin cần thiết (mg/kg cân nặng/ngày) 21 Bảng 1.3: Đối chiếu loại axit amin thiết yếu 21 Bảng 1.4: Thành phần axit amin thiết yếu số loài nấm hoang (g/100g protein thô) 22 Bảng 1.5: Hàm lượng axit amin tự loài nấm Calvatia gigantea phía Nam Thỗ Nhĩ Kỳ (mg/100 g ± SD) 23 Bảng 1.6: Thành phần axit amin thiết yếu hai loài nấm Hàn Quốc (g/100g) 24 Bảng 1.7: Thành phần axit amin không thiết yếu hai loài nấm Hàn Quốc (g/100g) 24 Bảng 3.1: Ảnh hưởng nồng độ HCl đến hiệu suất thu hồi 40 Bảng 3.2: Ảnh hưởng thời gian thủy phân đến hiệu suất thu hồi 44 Bảng 3.3: Sự phụ thuộc diện tích pic sắc ký vào nồng độ (pmol/ l ) axit amin 48 Bảng 3.4: Giá trị LOD LOQ axit Aspartic 56 Bảng 3.5: Giới hạn phát giới hạn định lượng phương pháp 56 ảng 3.6: Độ lặp lại (n 5) hàm lượng axit amin mẫu nấm lỗ 58 Bảng 3.7: Hiệu suất thu hồi axit amin nấm lỗ 60 Bảng 3.8: Hàm lượng axit amin nấm lỗ 62 Bảng 3.9: Hàm lượng (μg/g) axit amin thủy phân mẫu nấm 66 Bảng 3.10: Hàm lượng axit amin thủy phân mẫu nấm tự nhiên 69 Bảng 3.11: Hàm lượng axit amin tự mẫu nấm lỗ 71 Bảng 3.12: Hàm lượng axit amin tự mẫu nấm (μg/g) 75 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Hệ thống máy sắc ký HPLC Agilent 1100 series 30 Hình 2.1: Mẫu nấm 03………………………………………………………35 Hình 2.2: Mẫu nấm 04………………………………………………………35 Hình 2.3: Mẫu nấm 05 35 Hình 2.4: Mẫu nấm lỗ……………………………………………………….35 Hình 2.5: Mẫu nấm 01………………………………………………………35 Hình 2.6: Mẫu nấm 02 35 Hình 2.7: Mẫu nấm 608 …………………………………………………….36 Hình 2.8: Mẫu nấm 619 …………………………………………………….36 Hình 2.9: Mẫu nấm 621 36 Hình 2.10: Mẫu nấm HKG 401 …………………………………………….36 Hình 2.11: Mẫu nấm HKG 406 36 Hình 2.12: Quy trình phân tích axit amin thủy phân 37 Hình 2.13: Quy trình phân tích axit amin tự 38 Hình 3.1: Sự phụ thuộc hiệu suất thu hồi axit amin vào nồng độ HCl 41 Hình 3.2: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm 01 nồng độ HCl 5M 42 Hình 3.3: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm 01 nồng độ HCl 5,5M 42 Hình 3.4: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm 01 nồng độ HCl 6M 43 Hình 3.5: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm 01 nồng độ HCl 6,5M 43 Hình 3.6: Sự phụ thuộc hiệu suất thu hồi axit amin vào thời gian thủy phân 45 Hình 3.7: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm 01 thời gian thủy phân 16h 46 Hình 3.8: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm 01 thời gian thủy phân 18h 46 Hình 3.9: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm 01 thời gian thủy phân 20h 47 Hình 3.10: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm 01 thời gian thủy phân 24h 47 Hình 3.11: Đường chuẩn định lượng Asp 49 Hình 3.12: Đường chuẩn định lượng His 49 Hình 3.13: Đường chuẩn định lượng Thr 49 Hình 3.14: Đường chuẩn định lượng Tyr 50 Hình 3.15: Đường chuẩn định lượng Ile 50 Hình 3.16: Đường chuẩn định lượng Glu 50 Hình 3.17: Đường chuẩn định lượng Ser 50 Hình 3.18: Đường chuẩn định lượng Gly 51 Hình 3.19: Đường chuẩn định lượng Ala 51 Hình 3.20: Đường chuẩn định lượng Arg 51 Hình 3.21: Đường chuẩn định lượng Leu 51 Hình 3.22: Đường chuẩn định lượng Cys - SS - Cys 52 Hình 3.23: Đường chuẩn định lượng Val 52 Hình 3.24: Đường chuẩn định lượng Met 52 Hình 3.25: Đường chuẩn định lượng Phe 52 Hình 3.26: Đường chuẩn định lượng Lys 53 Hình 3.27: Đường chuẩn định lượng Pro 53 Hình 3.28: Sắc đồ hỗn hợp chuẩn 17 axit amin nồng độ 10 pmol/ l 53 Hình 3.29: Sắc đồ hỗn hợp chuẩn 17 axit amin nồng độ 25 pmol/ l 54 Hình 3.30: Sắc đồ chạy hỗn hợp chuẩn 17 axit amin nồng độ 100 pmol/ l 54 Hình 3.31: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm lỗ 60 Hình 3.32: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân nấm lỗ thêm chuẩn 61 Hình 3.33: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm 02 63 Hình 3.34: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm 608 63 Hình 3.35: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm 619 64 Hình 3.36: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm 621 64 Hình 3.37: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm HKG401 65 Hình 3.38: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm HKG406 65 Hình 3.39: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm 03 67 Hình 3.40: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm 04 68 Hình 3.41: Sắc đồ tách axit amin dịch thủy phân mẫu nấm 05 68 Hình 3.42: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm lỗ 72 Hình 3.43: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm 01 72 Hình 3.44: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm 02 73 Hình 3.45: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm 619 73 Hình 3.46: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm 621 73 Hình 3.47: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm HKG 401 74 Hình 3.48: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm HKG 406 74 72 Hình 3.42: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm lỗ Hàm lượng mẫu nấm 01, 02, 619, HKG 401, HKG 406, 621 tính toán tương tự, kết bảng 3.12 sắc đồ từ hình 3.43 đến 3.48 Hình 3.43: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm 01 73 Hình 3.44: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm 02 Hình 3.45: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm 619 Hình 3.46: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm 621 74 Hình 3.47: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm HKG 401 Hình 3.48: Sắc đồ tách axit amin mẫu nấm HKG 406 75 Bảng 3.12: Hàm lượng axit amin tự mẫu nấm (μg/g) TT Axit amin Thr 136,36 80,25 205,95 7,22 Nấm HKG 401 128,72 Val KPH 11,49 KPH 0,09 KPH 3,65 Met 56,06 0,57 52,72 6,60 6,69 35,57 Ile 71,19 62,43 211,49 13,93 195,95 127,56 Leu 15,26 KPH KPH 3,13 KPH 3,00 Phe 10,06 KPH 20,82 15,48 11,30 23,30 Lys 113,82 84,46 205,40 95,10 173,95 121,09 Nấm 01 Nấm 02 Nấm 619 Nấm 621 Nấm HKG 406 207,22 His Tổng axit amin thiết yếu Asp 7,87 KPH 20,19 KPH 12,84 29,03 410,62 239,20 716,57 141,55 529,45 550,42 KPH KPH KPH KPH KPH KPH 10 Glu 77,14 53,72 110,27 9,43 126,57 144,07 11 Ser 1,82 4,75 6,19 13,23 9,83 9,03 12 KPH KPH KPH KPH KPH KPH 81,36 28,03 143,12 11,54 172,57 12,37 14 Gly CysSSCys Ala 10,91 8,52 14,17 1,47 22,93 31,96 15 Arg 16,63 KPH 24,87 11,54 39,95 36,71 16 Tyr 265,18 140,33 337,96 33,23 285,73 221,41 17 Pro Tổng axit amin không thiết yếu 49,54 53,92 280,45 17,76 320,25 112,18 502,58 289,27 917,03 98,20 977,83 567,73 913,20 528,47 1633,60 239,75 1507,28 1118,15 44,96% 45,26% 43,86% 59,04% 35,13% 49,23% 13 Tổng EAA/TAA 76 Kết bảng 3.11 3.12 cho thấy, loại nấm nghiên cứu nấm 619 có tổng hàm lượng axit amin tự cao (1633,60 μg/g), sau nấm HKG 401 (1507,28 μg/g) thấp nấm 621 (239,75 μg/g) Khi so sánh với loài nấm tự nhiên C gigantean (ở bảng 2.2 mục 1.2.5) (có tổng hàm lượng axit amin tự = 199,65mg/100g = 1996,5 (μg/g)) cao so với loài nấm nuối cấy Các axit amin thiết yếu lysin, isoleucin, threonin, tyrosin có hàm lượng cao Trong nấm HKG 406 có đầy đủ axit amin thiết yếu Tỉ lệ EAA/TAA nấm lỗ cao (63,00%) thấp nấm HKG 401 (35,13%), tỉ lệ hàm lượng axit amin thiết yếu nấm nghiên cứu cao Hàm lượng axit aspartic glycin loại nấm; histidin nấm lỗ, nấm 02 nấm 621; valin nấm lỗ, nấm 01, nấm 619 nấm HKG 401; leucin nấm lỗ, nấm 02, nấm 619 HKG 401 nhỏ nên không định lượng So sánh bảng 3.8, 3.9 với bảng 3.11, 3.12 cho thấy loại nấm tổng hàm lượng axit amin thủy phân lớn nhiều so với axit amin tự 77 KẾT LUẬN Trên sở nhiệm vụ đặt kết đạt rút số kết luận sau: Đã khảo sát tối ưu hóa số điều kiện quy trình thủy phân xử lý mẫu xác định hàm lượng axit amin nấm: + Thời gian thủy phân mẫu tối ưu 24h + Nồng độ HCl thủy phân tối ưu 6M Đã xây dựng phương trình đường chuẩn 17 axit amin xác định khoảng nồng độ nghiên cứu nằm khoảng tuyến tính Xác định giới hạn phát LOD giới hạn định lượng LOQ phương pháp nhỏ: LOD từ 0,016 - 0,042 pmol, LOQ từ 0,053 0,14 pmol Quy trình phân tích đưa đánh giá đường chuẩn, độ lặp lại, độ thu hồi Độ lặp lại phương pháp tốt với độ lệch chuẩn tương đối từ 0,9 - 4,6% Độ thu hồi với loại axit amin nằm khoảng 85,6 102,7% vùng đường chuẩn tuyến tính Xác định hàm lượng axit amin thủy phân axit amin tự trong: + Tám mẫu nấm nuôi cấy Hexagonia apiaria (thủy phân 4094,05 tự 1014,35 μg/g); Ganoderma lucidum (thủy phân 1457,33 tự 913,20 μg/g); Amauroderma niger (thủy phân 1247,91 tự 528,47 μg/g); Ganoderma spongium (thủy phân 3176,06 tự 1633,60 μg/g); Ganoderma microporus (thủy phân 667,51 tự 239,75 μg/g); Ganoderma pfleifferi (thủy phân 1249,01 tự 1507,28 μg/g); Amauroderma schmburgki (thủy phân 4806,30 tự 1118,15 μg/g); Ganoderma sessile (thủy phân 3177,31 μg/g) 78 + Ba mẫu nấm tự nhiên: Amauroderma niger (thủy phân 11862,79 μg/g); Ganoderma lucidum (thủy phân 4595,52 μg/g); Ganoderma pfleifferi (thủy phân 12805,11μg/g) Từ kết thu thấy phương pháp phân tích hàm lượng axit amin mẫu nấm có độ tin cậy cao đề nghị áp dụng phương pháp phân tích axit amin cho nhiều đối tượng thực phẩm khác Chúng mong muốn tiếp tục nghiên cứu để hoàn chỉnh mở rộng đề tài khác, tiếp tục đánh giá kết để so sánh hàm lượng axit amin loài nấm khác từ đánh giá giá trị loài nấm bổ sung số liệu vào bảng thành phần thực phẩm Việt Nam 79 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Nguyễn Trung thuần, Phạm Thị Thu, (2002), Bách khoa dinh dưỡng, Nhà xuất Phụ Nữ-Hà Nội, trang 28-52 Phạm Luận (1987), Cơ sở lý thuyết sắc ký lỏng hiệu cao, Khoa Hóa học, Trường Đại học Tổng hợp Hà Nội Phạm Luận (1999), Cơ sở lý thuyết sắc ký điện di mao quản hiệu suất cao, Khoa Hóa học - Trường ĐHKHTN, Hà Nội Phạm Văn Sổ, Bùi Thị Như Thuận (1978), Kiểm nghiệm lương thực thực phẩm, Nhà xuất Khoa học Kĩ thuật-Hà Nội, trang 128183 Trịnh Tam Kiệt (2011), Nấm lớn Việt Nam tập I, Nhà xuất khoa học Tự nhiên Công nghệ Trịnh Tam Kiệt, Trịnh Tam Bảo (2008), Thành phần loài nấm dược liệu Việt Nam, Tạp chí di truyền học ứng dụng – chuyên san công nghệ sinh học, 4, 39-42 Tiếng Anh AOAC Official Method (2000), Monosodium Glutamate in food, Potentiometric Titration Method, C 970.37 Bailey J.L (1962), Estimation of amino acids by ninhydrin, Techniques in Protein Chemistry, Elsevier, Amsterdam, pp 73-81 Bano Z., Rajarathnam S (1988), Pleurotus mushroom, CRC Crit Rev Food Sci Nutr, 27, 87–158 10 Bano Z., Rajathnam S (1982), Tropical Mushroom Biological Nature and Cultivation Methods, Chinese University Press, Hong Kong, 363-380, 1982 80 11 Barros L., Baptista P., Correira D M., Casa, S., Oliveira, B., & Ferreira, I C F R (2007a), Fatty acid and sugar compositions, and nutritional value of five wild edible mushrooms from Northeast Portugal, Food Chem., 105, 140–145 12 Barros L., Cruz T., Baptista P., Estevinho L.M., Ferreira I.C.F.R (2008), Food Chem Toxicol., 46, 2742–7 13 Barros L., Venturini B A., Baptista P., Estevinho L M., & Ferreira, I C F R (2008), Chemical composition and biological properties of Portuguese wild mushrooms: A comprehensive study, J Agric Food Chem., 56(10) 3856-62 14 Bauer-Petrovska, B (2001), Protein fractions in edible Macedonian mushrooms Eur Food Res Technol., 212, 469–472 15 Belitz H.D., & Grosch W (1999), Food Chem., Berlin: Springer 16 Cavalieri C., Bolzoni L., & Bandini M (2010), Nicotine determination in mushrooms by LC-MS/MS with preliminary studies on the impact of drying on nicotine formation Learning, Media and Technology, 27, 473 17 Chang S.T (1980), Mushroom as human food, Bioscience, 30, 399401 18 Chen S.Y., Ho K.J., Hsieh Y.J., Wang L.T., & Mau J.L (2012), Contents of lovastatin, c-aminobutyric acid and ergothioneine in mushroom fruiting bodies and mycelia, LWT-Food Science and Technology, 47, 274–278 19 Colak A., Faiz Z., & Sesli E (2009), Nutritional composition of some wild edible mushrooms, Turkish Journal of Biochemistry, 34, 25–31 20 Colak A., Kolcuoglu Y., Sesli E., & Dalman O (2007), Biochemical composition of some Turkish fungi, Asian J Chem., 19, 2193-2199 81 21 Constantinos K Z., Georgios A T., Anastasios N V (2005), Coupling of sequential injection with liquid chromatography for the automated derivatization and on-line determination of amino acids, Talanta, 68, 448-458 22 Dany H., Genevieve L., Christophe F., Eric V (1988), Full automated precolumn derivatization, on-line dialysis and highperformance liquid chromatographic analysis of amino acids in food, beverages and feedstuff, Journal of chromatography A, 798, 917 23 Díez A A., & Alvarez A (2001), Compositional and nutritional studies on two wild edible mushrooms from northwest Spain, Food Chem., 75, 417-422 24 Diplock A.T., Aggett P.J., Ashwell M., Bornet F., Fern E.B., Roberfroid M.B (1999), Br J Nutr., 81 S1–S27 25 Eva G., Ana G L., Miguel L., Matilde D., Mauricio A R., Ana V., José A M (2010), Edible mushrooms: Role in the prevention of cardiovascular diseases, Fitoterapia, 81, 715-723 26 Falandysz J (2008), J Environ Sci Health C Environ Carcinog Ecotoxicol Rev.; 26,256–99 27 FAO (Food and Agriculture Organization) (1991), Protein Quality Evaluation, Rome: Food and Agricultural Organization of the United Nations 28 Gratzfeld-Huesgen A (1999), Sensitive and Reliable Amino Acid Analysis in Protein Hydrolysates using the Agilent 1100 Series HPLC, Technical Note, Agilent Technologies Publication Number 5968-5658E 29 Gross B., & Asther M (1989) Flavour of Basidiomycetes: 82 Characteristics, analysis and production, Sciences des Aliments, 9, 427–454 30 Guo Y J., Deng G F., Xu X R., Wu S., Li S., Xia E Q., et al (2012), Antioxidant capacities, phenolic compounds and polysaccharide contents of 49 edible macro-fungi, Food & Function, 3, 1195–1205 31 Hayes W.A., Haddad N (1976), The foof value of the cultivated mushroom and its importance to the mushroom industry, Mushroom J., 40, 104-110 32 Ibrahim K., Seyda K., Mansur H., (2014), Free amino acid profiling in the giant puffball mushroom (Calvatia gigantea) using UPLC– MS/MS, Food Chem., 158, 88-92 33 Kim M Y., Chung L M., Lee S J., Ahn J K., Kim E H., Kim, M J., et al (2009), Comparison of free amino acid, carbohydrates concentrations in Korean edible and medicinal mushrooms, Food Chem., 113, 386–393 34 Kwang J L., In J Y., Kyung H K., Sang H L,, Hun J H., Won S E., Jin H J (2011), Amino acid and fatty acid compositions of Agrocybe chaxingu, an edible mushroom, J Food Comp Anal 24, 175–178 35 Li G S F., Chang S.T (1982), Tropical Mushroom Biological Nature and Cultivation Methods, Chinese University Press, Hong Kong, 199-219 36 Liu P., Li H M., & Tang Y J (2012), Comparison of free amino acids and 5’ -nucleotides between Tuber fermentation mycelia and natural fruiting bodies, Food Chem., 132, 1413–1419 37 Liu Y T., Sun J., Luo Z Y., Rao S Q., Su,Y J., Xu R., et al (2012), 83 Chemical composition of five wild edible mushrooms collected fromsouthwest China and their antihyperglycemic and antioxidant activity, Food Chemi Toxicol 50, 1238–1244 38 Lourdes B., Amparo A., Rosaura F (2006), Application of the 6aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate (AQC) reagent to the RP-HPLC determination of amino acids in infant foods, J Chromatog B, 831, P 176-183 39 M Ummadi, B C.Weiner (2002), Use of capillary electrophoresis and laser-induced fluorescence for attomole detection of amino acids, J Chromatog A, 964, 243-253 40 Mantovani M.S., Bellini M.F., Angeli J.P.F., Oliveira R.J., Silva A.F., Ribeiro L.R.(2008), Mutat Res., 658:154–61 41 Manzi P., Grambelli L., Marconi S., Vivanti V., Pizzoferrato L (1999), Food Chem., 65, 477–82 42 Manzi P., Marconi P., Aguzzi A., & Pizzoferrato L (2004), Commercial mushrooms: Nutritional quality and effect of cooking, Food Chem, 84, 201–206 43 Marekov L., Momchilova S., Grung B., Nikolova D B (2012), Fatty acid composition of wild mushroom species of order Agaricales— Examination by gas chromatography–mass, J Chromatog B, Volume 910, 54-60 44 Mattilda P, Könkö K, Eurola M, Pihlava JM, Astola J, Vahteristo L, et al.( 2001), Contents of vitamins, mineral elements, and some phenolic compounds in cultivated mushrooms, J Agric Food Chem., 49, 2343–8 45 Molnar-Per (2000), Role of chromatography in the analysis of sugars, carboxylic acids and amino acids in food, Journal of chromatography 84 A, 891, 1-32 46 Moore S., Stein W.H., (1948), Photometric ninhydrin method for use in the chromatography of amino acids, J Biol Chem., 176, 367-388 47 Moore S., Stein W.H., (1951), Determination amino acid by postcolumm derivatization, J.Biol Chem 192, 663 48 Moore S., Stein W.H., (1954), A modified ninhydrin reagent for the photometric determination of amino acids and related compounds, J Biol Chem., 211, 907-913 49 Nathalie L F., Bernard S (2007), Biological roles of tryptophan and its metabolism: Potential implications for pig feeding, Livestock Science, 112(1-2) 23–32 50 Nedelcheva D., Antonova D., Tsvetkova S., Marekov I., Momchilova, S., Nikolova D., B., et al (2007) TLC and GC–MS probes into the fatty acid composition of some Lycoperdaceae mushrooms J Liquid Chromatogr & Related Tech., 30, 2717–2727 51 Pavel K (2009), Chemical composition and nutritional value of European species of wild growing mushrooms, Food Chem., 113, 916 52 Rai M., Tidke G., & Wasser S P (2005), Therapeutic potential of mushrooms, Nat Prod Rad., 246–257 53 Satoshi M (2014), Current topics in the biotechnological production of essential amino acids, functional amino acids, and dipeptides, Curr Opinion Biotech., 26, 38–44 54 Shu-ting Chang and Philip G.Miles (1930), Mushroom culvation, nutritional value, medicinal effect, and environmental impact, 2nd ed 55 Sun C., Lin J.,Wan Y P., Liu Y., & Xu H K (2012), Amino acids contents of common wild edible mushrooms in Yunnan province, 85 Plant Diversity and Resources, 34, 89–92 56 Sun S.W., Lin Y C., Weng Y.M., Chen M J (2006), Effciency improvement on ninhydrin method for amino acids quantification, J Food Analys., 19, 112-117 57 U.S Department of Agriculture, Agricultural Research Service, USDA Nutrient Data Laboratory (2009), USDA National Nutrient Database for Standard Reference, Release 22 www.ars.usda.gov/nutrientdata 58 University of Maryland Medical Center (2009) "Lysine", Retrieved 59 Vaz J A., Barros L., Martins A., Santos B C., Vasconcelos M H., & Vasconcelos I C F R (2011), Chemical composition of wild edible mushrooms and antioxidant properties of their water soluble polysaccharidic and ethanolic fractions, Food Chemistry, 126, 610– 616 60 Vetter J (2000), Trypsin inhibitor activity of basidiomycetous mushrooms, European Food Research and Technology, 211, 346– 348 61 Wang X M., Zhang Z., Wu L., H., Zhao Y L., Li T., Li Z Q., Wang Y Z., Liu H G (2014), A mini-review of chemical composition and nutritional value of edible wild-grown mushroom from China, Food Chemistry, 151, 279–285 62 Whittaker R H (1969), New concepts of kingdoms of organisms, Science, 163, 150–160 63 Wu G (2009), Amino acids: metabolism, functions, and nutrition, Amino Acids, 37, 1-17 64 Yaru S., Ming S.W., Zhao S.L., Hou D.Y., Liu Y.M (2005), Enantiomeric separation of amino acids derivatized with 7-fluoro-4- 86 nitrobenzoxadiazole by capillary liquid chromatographyltandem mass spectrometry, J Chromatog A, 1091, 102-109 65 Yiannis C F., Constantine D S (2006), Gas chromatographic determination of amino acids via one-step phase-transfer catalytic pentafluorobenzylation-preconcentration, J Chromatog., 1110(1-2) 66-72 66 Yin J Z., & Zhou L X (2008), Analysis of nutritional components of kinds of wild edible fungi in Yunnan, Food Research and Development, 29, 133–136 .. .B GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH PHẠM THỊ NGUYỆT NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG CÁC AXIT AMIN TRONG MỘT SỐ LOÀI NẤM LỚN Ở VÙNG B C TRUNG B B NG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO. .. cứu xác định hàm lƣợng axit amin số loài nấm lớn vùng B c Trung B phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao HPLC Mục đích nghiên cứu Xây dựng phương pháp tách định lượng đồng thời 17 axit amin loại nấm. .. thu hồi axit amin nấm lỗ 60 B ng 3.8: Hàm lượng axit amin nấm lỗ 62 B ng 3.9: Hàm lượng (μg/g) axit amin thủy phân mẫu nấm 66 B ng 3.10: Hàm lượng axit amin thủy phân mẫu nấm tự nhiên

Ngày đăng: 08/05/2017, 21:19

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan