ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ HÀ NGHIÊN CỨU SỰ LƢU HÀNH CỦA VI KHUẨN PASTEURELLA MULTOCIDA TRONG BỆNH TỤ HUYẾT TRÙNG Ở TRÂU, BÕ TẠI MỘT SỐ HUYỆN CÓ DỊCH TRÊN ĐỊA BÀN TỈNH HÀ GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÕNG TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Thái Nguyên, năm 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ HÀ NGHIÊN CỨU SỰ LƢU HÀNH CỦA VI KHUẨN PASTEURELLA MULTOCIDA TRONG BỆNH TỤ HUYẾT TRÙNG Ở TRÂU, BÕ TẠI MỘT SỐ HUYỆN CÓ DỊCH TRÊN ĐỊA BÀN TỈNH HÀ GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÕNG TRỊ Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.62.50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Đặng Xuân Bình Thái Nguyên, năm 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu trực tiếp thực với giúp đỡ TS Đặng Xuân Bình Các số liệu, hình ảnh kết luận văn trung thực chưa công bố công trình khác Tôi xin đảm bảo thông tin, trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Tác giả luận văn Nguyễn Thị Hà Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, nỗ lực thân, nhận giúp đỡ quý báu, bảo tận tình thầy suốt trình thực đề tài Nhân dịp này, cho phép bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc thầy: T.S Đặng Xuân Bình, người trực tiếp hướng dẫn trình nghiên cứu hoàn thành luận văn Tôi xin trân trọng cảm ơn Khoa Sau đại học - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, tập thể cán nghiên cứu Bộ môn Công nghệ Vi Sinh - Viện Khoa học Sự sống, Chi cục Thú y Hà Giang, gia đình, bạn bè đồng nghiệp tạo điều kiện thuận lợi nhất, giúp đỡ trình hoàn thành luận văn Thái Nguyên, ngày… tháng….năm 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn MỤC LỤC Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình Trang MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu đề tài Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tình hình nghiên cứu bệnh tụ huyết trùng nước 1.1.1 Tình hình nghiên cứu nước 1.1.2 Tình hình nghiên cứu nước 1.2 Đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng 1.2.1 Quá trình sinh dịch 1.2.1.1 Nguồn bệnh 1.2.1.2 Yếu tố truyền lây 1.2.1.3 Động vật mẫn cảm 1.2.2 Tuổi mắc bệnh 1.2.3 Mùa vụ phát bệnh tần suất xuất dịch 10 1.2.4 Vùng phát bệnh 12 1.2.5 Hiện tượng mang vi khuẩn Pasteurella multocida đường hô hấp động vật khoẻ 13 1.3 Các đặc tính sinh học mầm bệnh 15 1.3.1 Phân loại vi khuẩn Pasteurella multocida 15 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 1.3.2 Đặc điểm hình thái tính chất bắt màu 16 1.3.3 Đặc tính nuôi cấy 16 1.3.4 Đặc tính sinh hoá 19 1.3.5 Kháng nguyên vi khuẩn P multocida 21 1.3.6 Sức đề kháng vi khuẩn P multocida 24 1.4 Bệnh tụ huyết trùng vi khuẩn P multocida gây 25 1.4.1 Biểu đặc trưng trâu, bò mắc bệnh tụ huyết trùng 25 1.4.1.1 Triệu chứng trâu, bò mắc bệnh tụ huyết trùng 25 1.4.1.2 Bệnh tích 27 1.4.2 Chẩn đoán bệnh 27 1.4.2.1 Chẩn đoán lâm sàng 27 1.4.2.2 Chẩn đoán vi khuẩn học 27 1.4.2.3 Chẩn đoán huyết học 28 1.4.3 Phòng trị bệnh 29 1.4.3.1 Phòng bệnh 29 1.4.3.2 Điều trị bệnh 30 CHƢƠNG 2: NỘI DUNG - NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.1 Đối tượng, thời gian địa điểm nghiên cứu 32 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 32 2.1.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 32 2.2 Nội dung nghiên cứu 32 2.2.1 Điều tra số đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng tỉnh Hà Giang 32 2.2.2 Phân lập vi khuẩn Pasteurella multocida từ dịch ngoáy mũi gia súc khoẻ 32 2.2.3 Đề xuất biện pháp phòng chống bệnh tụ huyết trùng tỉnh Hà Giang 33 2.3 Nguyên liệu dùng cho nghiên cứu 33 2.3.1 Mẫu bệnh phẩm dùng phân lập vi khuẩn 33 2.3.2 Động vật thí nghiệm 33 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 2.3.3 Hóa chất và dụng cụ nghiên cứu 33 2.4 Phương pháp nghiên cứu 34 2.4.1 Phương pháp nghiên cứu dịch tễ học 34 2.4.2 Phương pháp tính tỷ lệ hệ số 34 2.4.3 Phương pháp xác định tương quan yếu tố khí hậu số gia súc mắc bệnh tụ huyết trùng 35 2.4.4 Phương pháp nuôi cấy, phân lập xác định vi khuẩn Pasteurella multocida 37 2.4.4.1 Phương pháp nuôi cấy, phân lập 37 2.4.4.2 Phương pháp xác định tính chất sinh vật, hoá học P multocida 38 2.4.5 Kiểm tra độc lực vi khuẩn vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập 41 2.4.5.1 Kiểm tra độc lực vi khuẩn chuột bạch 41 2.4.5.2 Phương pháp làm kháng sinh đồ 42 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 43 3.1 Đặc điểm dịch tễ học bệnh tụ huyết trùng gia súc Hà Giang 43 3.1.1 Tình hình bệnh tụ huyết trùng trâu, bò, lợn địa bàn tỉnh Hà Giang từ năm 2007 - 2009 43 3.1.2 Tần suất xuất dịch bệnh tụ huyết trùng trâu, bò huyện từ năm 2007 - 2009 45 3.1.3 Kết điều tra trâu, bò mắc bệnh chết bệnh tụ huyết trùng trâu, bò theo loài gia súc 47 3.1.4 Kết điều tra trâu, bò mắc bệnh chết bệnh tụ huyết trùng trâu, bò theo mùa vụ 49 3.1.5 Kết điều tra trâu, bò mắc bệnh chết bệnh tụ huyết trùng trâu, bò theo lứa tuổi 51 3.1.6 Triệu chứng đặc trưng trâu, bò mắc bệnh tụ huyết trùng 55 3.2 Nghiên cứu mức độ thời gian xảy dịch bệnh 56 3.2.1 Nghiên cứu mức độ dịch hệ số năm dịch 56 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 3.2.2 Nghiên cứu thời điểm phát dịch, mùa dịch 57 3.3 Nghiên cứu yếu tố tự nhiên ảnh hưởng đến bệnh tụ huyết trùng trâu, bò 60 3.3.1 Kết điều tra trâu, bò mắc bệnh chết bệnh tụ huyết trùng trâu, bò theo vùng địa lý 61 3.3.2 Ảnh hưởng yếu tố khí hậu 64 3.4 Kết phân lập, xác định số đặc tính sinh vật hoá học, độc lực Pasteurella multocida từ dịch ngoáy mũi gia súc tỉnh Hà Giang 68 3.4.1 Kết phân lập vi khuẩn Pasteurella multocida từ dịch ngoáy mũi gia súc khoẻ 68 3.4.2 Kết giám định số đặc tính sinh vật hoá học chủng vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập 69 3.4.3 Kết thử độc lực chủng vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập 70 3.4.4 Kết thử tính mẫn cảm với kháng sinh hoá dược chủng Pasteurella multocida phân lập 72 3.4.5 Kết xác định type Pasteurella multocida kỹ thuật PCR 73 3.4.6 Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tụ huyết trùng trâu, bò 73 3.4.7 Biện pháp phòng trị bệnh tụ huyết trùng trâu, bò Hà Giang 75 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 77 DANH MỤC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ 79 TÀI LIỆU THAM KHẢO 80 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT ADN : acid deoxyribonucleic BHI : Brain Heart Infusion Cs : Cộng FAO : Food and Agriculture Oganization HSND : Hệ số năm dịch HSTD : Hệ số tháng dịch MR : Methylen Red PCR : Polymerase Chain Reaction P multocida : Pasteurella multocida THT : Tụ huyết trùng TT : Thể trọng VP : Voges Proskauer Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Phân biệt loài Pasteurella 21 Bảng 1.2 Mối quan hệ hai hệ thống phân loại Carter - Robert 22 Bảng 1.3 Hệ thống phân loại serotype P multocida 24 Bảng 3.1 Kết điều tra tình hình bệnh tụ huyết trùng gia súc Hà Giang từ năm 2007 - 2009 43 Bảng 3.2 Tần suất xuất dịch tụ huyết trùng Hà Giang 45 Bảng 3.3 Kết xác định tỷ lệ trâu bò mắc bệnh, chết, tử vong bệnh tụ huyết trùng theo loài gia súc 48 Bảng 3.4 Kết xác định tỷ lệ trâu bò mắc bệnh, chết, tử vong bệnh tụ huyết trùng theo mùa vụ 50 Bảng 3.5 Kết xác định tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh, chết, tử vong bệnh tụ huyết trùng theo lứa tổi 53 Bảng 3.6 Kết theo dõi triệu chứng đặc trưng trâu bò mắc bệnh tụ huyết trùng 55 Bảng 3.7 Hệ số năm dịch tụ huyết trùng trâu, bò từ năm 2007 - 2009 56 Bảng 3.8 Hệ số tháng dịch tụ huyết trùng trâu, bò 58 Bảng 3.9 Kết xác định tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh, chết, tử vong bệnh tụ huyết trùng theo vùng địa lý 63 Bảng 3.10 Mối tương quan yếu tố khí hậu với trâu, bò mắc bệnh tụ huyết trùng trung bình/tháng từ năm 2007 - 2009 65 Bảng 3.11 Kết phân lập Pasteurella multocida từ dịch ngoáy mũi gia súc khoẻ 68 Bảng 3.12 Kết giám định số đặc tính sinh vật hoá học vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập 70 Bảng 3.13 Kết thử độc lực chủng Pasteurella multocida phân lập 71 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read ... NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ HÀ NGHIÊN CỨU SỰ LƢU HÀNH CỦA VI KHUẨN PASTEURELLA MULTOCIDA TRONG BỆNH TỤ HUYẾT TRÙNG Ở TRÂU, BÕ TẠI MỘT SỐ HUYỆN CÓ DỊCH TRÊN ĐỊA BÀN TỈNH HÀ GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÕNG TRỊ... Nghiên cứu thời điểm phát dịch, mùa dịch 57 3.3 Nghiên cứu yếu tố tự nhiên ảnh hưởng đến bệnh tụ huyết trùng trâu, bò 60 3.3.1 Kết điều tra trâu, bò mắc bệnh chết bệnh tụ huyết trùng trâu,. .. tễ bệnh tụ huyết trùng tỉnh Hà Giang 32 2.2.2 Phân lập vi khuẩn Pasteurella multocida từ dịch ngoáy mũi gia súc khoẻ 32 2.2.3 Đề xuất biện pháp phòng chống bệnh tụ huyết trùng tỉnh Hà Giang