BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM  BÙI THỊ THU HUYỀN NGHIÊN CỨU VẬT LIỆU KHỞI ĐẦU PHỤC VỤ CHỌN TẠO GIỐNG ĐẬU XANH KHÁNG BỆNH KHẢM VÀNG Chuyênngành : Di truyền và chọn giống trồ ng Mãsố : 62.62.01.11 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SỸ NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI – 2016 Công trình hoàn thành tại: VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Hà Viết Cường, Học viện Nông nghiệp Việt Nam TS Trần Danh Sửu, Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam Phản biện 1: ……………………………………………… Phản biện ……………………………………………… Phản biện 3: ……………………………………………… Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp Viện họp Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam Vào hồi ngày tháng năm 2016 Có thể tìm hiểu luận án tại: Thư Viện Quốc gia Thư Viện Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Đậu xanh thực phẩm họ đậu quan trọng giới Việt Nam Bệnh khảm vàng bệnh phổ biến đậu xanh số nước có phổ ký chủ rộng Nguyên nhân gây bệnh nhiều virus thuộc chi Begomovirus gây lan truyền bọ phấn theo chế không bền vững Chỉ thị phân tử liên kế t với tính kháng bê ̣nh đã đươ ̣c báo cáo liên kết xa với tính trạng Tại Việt Nam, bệnh quan sát từ năm 1980 chưa có nghiên cứu xác định virus gây bệnh xác định gen kháng Vì thế, công tác đánh giá tập đoàn đậu xanh để tìm nguồn gen kháng bệnh, nghiên cứu xác định sở di truyền tính kháng, lập đồ định vị gen kháng góp phần thúc đẩy công tác khai thác, sử dụng nguồn gen kháng làm nguồn vật liệu cho chương trình chọn tạo giống đậu xanh kháng bệnh nước ta Xuất phát từ yêu cầu thực tế sản xuất đậu xanh, nhằm cung cấp thêm sở khoa học vật liệu cho công tác chọn tạo giống đậu xanh kháng bệnh, đề tài: "Nghiên cứu vật liệu khởi đầu phục vụ chọn tạo giống đậu xanh kháng bệnh khảm vàng" tiến hành Mục tiêu đề tài Tìm hiểu, xác định chất di truyền tính kháng bệnh khảm vàng đậu xanh mức phân tử, giới thiệu nguồn vật liệu cho công tác chọn tạo giống đậu xanh kháng bệnh Mục tiêu cụ thể đề tài: - Xác định virus gây bệnh khảm vàng đậu xanh Việt Nam - Xác định di truyền tính kháng bệnh khảm vàng đậu xanh - Xác định QTL kháng bệnh khảm vàng - Giới thiệu số nguồn gen đậu xanh triển vọng làm vật liệu khởi đầu cho công tác chọn tạo giống đậu xanh kháng bệnh khảm vàng suất cao Việt Nam Ý nghiã khoa ho ̣c và thư ̣c tiễn của đề tài Việc xác định nguyên nhân gây bệnh khảm vàng đậu xanh Việt Nam MYMV, xác định nguồn gen kháng bệnh, đánh giá đa dạng di truyền, thiết lập đồ gen kháng giống đậu xanh làm sở khoa ho ̣c cho công tác chọn tạo giống đậu xanh kháng bệnh Xác định di truyền tính kháng bệnh thị SNP liên kết với gen kháng bệnh khảm vàng giống đậu xanh nhập nội NM94 không nhằm xác định nguồn gen kháng mà có ý nghĩa thực tiễn cao việc khai thác hiệu các nguồ n gen kháng bênh ̣ phục vụ công tác cho ̣n ta ̣o giố ng đâ ̣u xanh kháng bênh ̣ Những đóng góp luận án Đây đề tài Việt Nam xác định virus gây bệnh khảm vàng đậu xanh MYMV Đã thiết lập đồ di truyền gồm 11 liên kết tương ứng với 11 nhiễm sắc thể gen đậu xanh dựa thị SNP phương pháp GBS Đã xác định vị trí các QTL kháng bệnh khảm vàng đồ di truyền đồ vật lý ở nguồ n gen đâ ̣u xanh nhâ ̣p nô ̣i NM94 Bố cục luận án Luận án trình bày 121 trang (không kể phần Tài liệu tham khảo Phụ lục): Mở đầu (4 trang), Chương 1: Tổng quan sở khoa học Đề tài (39 trang), Chương 2: Vật liệu, nội dung phương pháp nghiên cứu (14 trang), Chương 3: Kết nghiên cứu thảo luận (62 trang), Kết luận đề nghị (2 trang) Tài liệu tham khảo sử dụng 158, có 20 tài liệu tiếng Việt 138 tài liệu tiếng Anh Luận án có 31 bảng, 40 hình, 13 phụ lục, công trình công bố CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀ I LIỆU VÀ CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA ĐỀ TÀI Luận án tham khảo tổng quan 20 tài liệu tiếng Việt 138 tài liệu tiếng Anh, với nội dung liên quan bao gồm: Giới thiệu chung đậu xanh; Nghiên cứu đa dạng di truyền đậu xanh; Những nghiên cứu bệnh khảm vàng đậu xanh; Nghiên cứu lập đồ di truyền tiềm ứng dụng cải tiến giống đậu xanh; Nghiên cứu sử dụng thị phân tử lập đồ phân tử Việt Nam Với tài liệu thu thập khẳng định đậu xanh (Vigna radiata (L.) Wilczek.) có nguồn gốc Ấn Độ hóa từ 1500 năm trước công nguyên (Mogotsi, 2006) Đậu xanh giàu cân đối protein, thời gian sinh trưởng ngắn, có khả chịu hạn, thích ứng rộng với môi trường (Phạm Văn Thiều, 2009) Diện tích trồng đậu xanh toàn giới đạt triệu suất đậu xanh thấp (Nair et al., 2012) Đậu xanh trồng tự thụ, nhiễm sắc thể 2n=2x=22, kích thước gen khoảng 579 Mbp (Somta Srinives, 2007) có di truyền hẹp (Nair et al., 2012) Bệnh khảm vàng (Mungbean yellow mosaic virus – MYMV) bệnh hại nghiêm trọng đến canh tác đậu xanh Bệnh quan sát thấy lần vào năm 1955 Viện nghiên cứu Nông nghiệp Ấn Độ (IARI) (Nariani, 1960), sau phát số quốc gia khác thuộc khu vực Nam Á Đông Nam Á Philippines (Benigno Favali-Hedayat, 1977), Thái Lan (Thongmeearkom et al., 1981), Papua New Guinea (Pearson, 1981), SriLanka (Shivanathan, 1983), Bangladesh (Akanda et al., 1992), Pakistan (Saleem et al., 1998), Myammar (Han et al., 2001) cho thấy bệnh quan trọng gây hại đậu xanh Bệnh có phổ ký chủ rộng, không gây hại đậu xanh mà gây hại số loài họ đậu khác đậu xanh đen, đậu tương, đậu cowpea … (Varma, 1992) Nguyên nhân gây bệnh nhiều virus thuộc chi Begomovirus (họ Geminivirus) gây lan truyền vectơ truyền bệnh bọ phấn (Bemisia tabaci Genn.) theo chế không bền vững (Nariani, 1960) Bệnh gây hại nghiêm trọng, làm 100% suất Thái Lan Ấn Độ (Thogmeearkhom et al., 1981; Manjunath et al., 2013), gây thiệt hại kinh tế 300 triệu USD (Varma, 1992) Tại Việt Nam, đậu xanh đậu đỗ đứng thứ ba sau lạc đậu tương Đậu xanh trồng từ Bắc vào Nam Diện tích trồng đậu xanh Việt Nam năm 2015 90.950 tỉnh Bắc Trung Bộ, Nam Trung Bộ Tây Nguyên vùng trồng với 67,8% diện tích trồng nước (2015) Bệnh khảm vàng đậu xanh quan sát Việt Nam với triệu chứng điển hình từ năm 1980 (Phan Hữu Trinh cs., 1986) chưa có nghiên cứu thức thiệt hại MYMV gây đậu xanh có ước đoán thiệt hại bệnh gây suất từ 20-70% (Phạm Văn Thiều, 2009) Sử dụng giống kháng bệnh đánh giá mang lại hiệu tối ưu, cách ổn định an toàn để quản lý dịch bệnh Nghiên cứu xác định nguồn gen kháng tiến hành nhiều quốc gia khác giới Việt Nam Một số nguồn gen kháng bệnh khảm vàng đậu xanh phát hiê ̣n (Shad et al., 2006; Habib et al., 2007) Một số công trình nghiên cứu di truyền tính kháng MYMV kiểm soát đa gen Tính kháng quy định đơn gen lặn (Singh Patel, 1977; Reddy, 2009; Sudha et al., 2013a), gen trội (Gupta et al., 2005), hai gen lặn (Ammavasai et al., 2004; Singh et al., 2013) gen lặn bổ sung (Dhole Reddy, 2012) Với phát triển nhanh chóng công nghệ thị phân tử, nhiều locut gen kháng sâu bệnh định vị đồ gen đậu xanh (Chen et al., 2007; Zang et al., 2008) Chỉ thị phân tử liên kế t với gen kháng bênh ̣ khảm vàng đâ ̣u xanh cũng đã đươ ̣c báo cáo thị liên kết xa với tính trạng (Somta Srinives, 2007; Dhole Reddy, 2013) Trong số thị phân tử, SNP thị hệ mới, có số lượng cao gen ứng dụng tốt cho tăng mật độ thị, lập đồ QTL chọn lọc nhờ thị phân tử với nhiều thông tin (Choudhary et al., 2012) Sự phát triển nhanh chóng công nghệ giải trình tự hệ giúp dễ dàng phát SNP toàn hệ gen Công tác đánh giá khả kháng bệnh khảm vàng tập đoàn đậu xanh để tìm nguồn gen kháng bệnh, lập đồ định vị gen kháng góp phần thúc đẩy công tác khai thác, sử dụng nguồn gen kháng làm nguồn vật liệu cho chương trình chọn tạo giống đậu xanh kháng bệnh Việt Nam CHƯƠNG VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Vật liệu nghiên cứu - Giống đậu xanh: + Thí nghiệm sàng lọc nguồn gen đậu xanh kháng bệnh khảm vàng: gồm 96 nguồn gen đậu xanh địa phương nhập nội lưu giữ ngân hàng gen trồng Quốc bao gồm giống đối chứng nhiễm bệnh chuẩn KPS2 (Akatar et al., 2011) có nguồn gốc từ AVRDC (Bảng 2.1 Phụ lục 1) + Thí nghiệm đánh giá đa dạng di truyền đậu xanh: gồm 94 nguồn gen có nguồn gốc từ Việt Nam (50 nguồn gen), AVRDC (13 nguồn gen) Úc (31 nguồn gen) (chi tiết Phụ lục 2) + Quần thể lập đồ: 200 dòng quần thể đậu xanh F3 AVRDC khu vực Nam Á đóng ICRISAT, Hyderabad, Ấn Độ tạo từ tổ hợp lai NM94 (kháng MYMV) KPS2 (nhiễm MYMV) - Nguồn bệnh: đậu xanh bị bệnh khảm vàng thu thập Phú Yên với triệu chứng điển hình - Các vật liệu hóa chất dùng sinh học phân tử 2.2 Nội dung nghiên cứu Nội dung 1: Phân lập xác định virus gây bệnh khảm vàng Việt Nam Nội dung 2: Nghiên cứu khả kháng bệnh khảm vàng đặc điểm nông sinh học mẫu giống tập đoàn đậu xanh Nội dung 3: Nghiên cứu đa dạng di truyền đậu xanh Nội dung 4: Nghiên cứu lập đồ gen đậu xanh 2.3.1 Thời gian nghiên cứu: từ năm 2011 đến năm 2015 2.3.2 Địa điểm nghiên cứu - Các nghiên cứu đánh giá tính kháng bệnh đồng ruộng thực Nam An Nghiệp, Tuy An, Phú Yên - Các thí nghiệm đánh giá bệnh điều kiện lây nhiễm nhân tạo thực hệ thống nhà lưới chống côn trùng Trung tâm Bệnh nhiệt đới, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Trung tâm Tài nguyên Thực vật - Các thí nghiệm nghiên cứu sinh học phân tử thực Bộ môn Đa dạng Sinh học Nông nghiệp - Trung tâm Tài nguyên Thực vật, Trung tâm Bệnh nhiệt đới – Học viện Nông nghiệp Việt Nam, Phòng virus học Phòng thị phân tử Trung tâm Rau giới (AVRDC, Đài Loan) 2.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.4.1 Phương pháp xác định virus gây bệnh khảm vàng đậu xanh Phương pháp thu mẫu bệnh: Thu thập bảo quản mẫu bệnh tiến hành theo AVRDC sau: Thu mẫu bệnh non ngẫu nhiên đồng ruộng và ghi chép thông tin liên quan vùng trồng đậu xanh họ đậu khác theo biểu mẫu của DSMZ Mẫu làm khô silicagen tự thị bảo quản lọ ống falcon kín chứa silicagen bảo quản điề u kiêṇ thường Tách chiết ADN tổng số Tách chiết ADN tổng số dung dịch đệm CTAB (Doyle Doyle, 1987) Kiểm tra chất lượng ADN gel agarose 0,8% Tinh ADN Kit ZR-96 DNA clean and concentratorTM-5 (Zymo Research) Nồng độ xác đo máy quang phổ nanodrop Điện di sản phẩm PCR gel agarose 1,2 % TBE 0,5X Phương pháp tách dòng giải trình tự ADN begomovirus Dựa vào việc trình tự sản phẩm PCR 1,5kb trình tự nucleotide thu GenBank, thiết kế mồi khuếch đại đoạn ADN-A ADN-B hoàn chỉnh chủng MYMV từ Việt Nam Các đoạn ADN-A ADN-B hoàn chỉnh sau tách dòng giải trình tự Nhân dòng vectơ pGEM-T Easy theo dẫn nhà sản xuất (Promega, WI, USA) Sản phẩm nhân dòng nhuộm BigDye® Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit giải trình tự thiết bị ABI PRISM® 3100 Genetic Analyzer (Applied Biosystems, San Francisco, CA, USA) công ty Yourgene (Đài Loan) Phân tích trình tự ADN begomovirus Sử dụng BLASTn NCBI để tìm kiếm trình tự geminivirus sở liệu GenBank tương đồng với trình tự ADN hoàn chỉnh thu (Altschul et al., 1990) Phần mềm ClustalX2 2.0 (Larkin et al., 2007) sử dụng để trình tự so sánh trình tự Cây đa dạng di truyền (Phylogenetic tree) ADN-A ADN-B virus tạo phần mềm MEGA6 (Tamura et al., 2013) Kỹ thuật ELISA Kỹ thuật ELISA TAS-ELISA (Triple antibody sandwich –ELISA) sử dụng để chẩn đoán virus phổ biến đậu đỗ Việt Nam Bean common mosaic virus Kit ELISA Viện DSMZ (Đức) cung cấp qui trình thực theo hướng dẫn nhà sản xuất 2.4.2 Phương pháp đánh giá đa dạng di truyền sử dụng DArT Tách chiết ADN Các nguồn gen nghiên cứu gieo trồng, thu non từ cây/nguồn gen để tách chiết ADN Phòng thị phân tử, AVRDC - Đài Loan Tách chiết ADN theo phương pháp chiết ADN tổng số dung dịch đệm CTAB (Doyle Doyle, 1987) Sau tách chiết ADN đậu xanh, mẫu ADN gửi đến công ty Diversity Arrays Technology, Bldg 3, Lv D, University of Canberra, Kirinari st., Bruce, ACT 2617, Australia để thực bước quy trình DArT nhận lại số liệu thô cho phân tích đa dạng di truyền Phân tích số liệu DarT Các dòng DArT đa hình với P lớn 80 lựa chọn để phân tích đa dạng di truyền đậu xanh sử dụng phần mềm DARwin Sơ đồ hình xây dựng dựa khoảng cách di truyền Nei (1978) theo phương pháp UPGMA phần mềm DARwin 2.4.3 Phương pháp đánh giá khả kháng bệnh khảm vàng đậu xanh 2.4.3.1 Đánh giá điều kiện áp lực bệnh tự nhiên Địa điểm thí nghiệm: Nam An Nghiệp, Tuy An, Phú Yên vụ Hè (là vùng xuất bệnh nhiều năm liên tục) Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm sàng lọc nguồn gen kháng bệnh tập đoàn đậu xanh: bố trí theo khối ngẫu nhiên hoàn chỉnh (RCBD) với lần lặp, khoảng cách hàng x hàng: 40cm, x cây: 10cm, 15 cây/hàng/lần lặp Thí nghiệm đánh giá khả kháng bệnh khảm vàng dòng quần thể F2:3: bố trí không nhắc lại, khoảng cách hàng x hàng: 40 cm, x cây: 10 cm, 30 cây/dòng Các đeo thẻ từ 35 ngày sau trồng để phục vụ cho trình đánh giá Quy trình kỹ thuật chăm sóc chung đậu xanh áp dụng cho thí nghiệm, không sử dụng thuốc bảo vệ thực vật để không ảnh hưởng đến quần thể bọ phấn - vector truyền bệnh Cấp bệnh đánh giá theo thang điểm cấp (được cung cấp AVRDC) thời điểm 35 55 ngày trồng 2.4.3.2 Đánh giá điều kiện lây nhiễm nhân tạo nhờ bọ phấn Chuẩn bị nguồn nhiễm bệnh lây nhiễm nhân tạo nhờ vi khuẩn (Agroinoculation) Lây nhiễm nhân tạo phương pháp ủ hạt qua đêm (Mandal et al., 1997) Lây nhiễm nhân tạo sử dụng bọ phấn Các dòng đánh giá gieo khay xốp, dòng trồng 30 cây, gieo hạt/hốc, đặt nhà lưới Khi mọc 10 ngày sau gieo tiến hành cho lây nhiễm nhờ bọ phấn Chuyển bị bệnh (cây nguồn) vào lồng kín, thả bọ phấn khỏe với mật độ 4-6 con/cây Sau thời gian ngày, tiếp tục chuyển không bị bệnh vào lồng chứa bọ phấn mang bệnh sau mang bị bệnh Chăm sóc hàng ngày theo dõi kết sau tuần lây nhiễm 100% giống mẫn cảm KPS2 biểu triệu chứng điển hình bệnh có kết dương tính với MYMV (PRC test) Mỗi đeo thẻ đánh số để đánh giá bệnh theo thang điểm AVRDC giai đoạn 35 ngày 55 ngày sau trồng 2.4.3.3 Phân tích thống kê: Tính tỷ lệ bệnh (TLB) theo phương pháp Vũ Đình Ninh (1972) số cấp bệnh trung bình (CBTB) tính theo Fang (2010) 2.4.4 Phương pháp đánh giá kiểu gen giải trình tự (GBS) 2.4.4.1 Thiết lập thư viện cho GBS theo mô tả chi tiết công bố Elshire et al., 2011 2.4.4.2 Xử lý số liệu phần mềm tin sinh học Sử dụng công cụ STACKS 1.21 (Catchen et al., 2013) Bộ công cụ GATK (https://www.broadinstitute.org/gatk/) chạy hệ điều hành Linux 32G-RAM để gọi thị SNP 2.4.5 Phân tích QTLs (Quantitative Trait Loci) Sử dụng phần mềm QTL Icimapping 4.0 (Li et al., 2007) Qgene 4.3 (Li et al., 2007) để phân tích QTLs 11 legumovirus, MYMV Có địa phương phát mẫu đậu xanh nhiễm MYMV, địa phương phát MYMV họ đậu khác (Bảng 3.3) Trong 100% mẫu bệnh thu đậu xanh Bình Định Phú Yên dương tính với MYMV Kết chuẩn đoán ELISA để phát BCMV với 68 mẫu bệnh thu cho thấy: 11 mẫu bệnh họ đậu khác không nhiễm BCMV, 14 57 mẫu bệnh đậu xanh thu dương tính với BCMV, mẫu âm tính với begomovirus Bảng 3.3: Tổng hợp kết thu thập theo nhóm trồng Loại STT trồng Đậu xanh Số mẫu dương tính với Số lượng Begomo Legumo mẫu virus virus Địa phương phát MYMV BCMV mẫu bệnh Bình Định (3), Phú 57 25 25 25 14 Yên (16), Sơn La (3), Thái Bình (3), Yên Bái (2), Quảng Đậu khác 11 11 11 11 Ninh (4), Sơn La (3), Bắc Cạn (1), Hà Nội (1) Tổng 68 36 36 36 14 3.1.4 Kết giải phân tích trình tự ADN-A begomovirus Kết xác định chủng begomovirus gây bệnh khảm vàng đậu xanh từ Nam Trung Bộ MYMV có tương đồng cao trình tự ADN-A với isolate phân lập Campuchia (SĐK GenBank: AY271892) isolate phân lập Thái Lan (SĐK GenBank: AB017341 D14703), có độ tương đồng cao trình tự ADN-B với isolate phân lập Thái Lan (SĐK GenBank: D14704) 3.1.5 Kết phân tích nguồn gốc phát sinh loài MYMV từ trình tự ADN-A ADN-B hoàn chỉnh Việt Nam Từ kết phân tích phát sinh loài so sánh tương đồng trình tự với nhóm 12 ADN-A ADN-B xác định MYMV giới chia làm nhóm, nhóm I từ Việt Nam, Thái Lan, Campuchia, nhóm II từ Ấn Độ, nhóm III từ Ấn Độ Pakistan Ba nhóm thuộc chủng virus MYMV khác dựa vào tương đồng trình tự ADN-A nucleotide, chủng A isolate thuộc nhóm I II, chủng B isolate thuộc nhóm III 3.2 Đánh giá khả kháng bệnh khảm vàng đồng ruộng đặc điểm nông sinh học mẫu giống đậu xanh 3.2.1 Đánh giá khả kháng bệnh khảm vàng nguồn gen đậu xanh Đánh giá 96 nguồn gen đậu xanh qua năm có 65 nguồn gen (chiếm 67,7%) biểu nhiễm đến nhiễm nặng bệnh khảm vàng, 24 nguồn gen (chiếm 25%) nhiễm bệnh mức trung bình Bảng 3.6: Thống kê mức độ nhiễm bệnh khảm vàng tập đoàn đậu xanh Phú Yên vụ Hè 2012 2013 Chỉ số bệnh trung bình 2,0 - [...]... nghiên cứu, đánh giá các chỉ thị SNP để sử dụng cho việc chọn lọc cá thể cho chọn tạo giống đậu xanh kháng bệnh khảm vàng ở Việt Nam 2 Đề nghị sử dụng các giống đậu xanh NM92, NM94, VC3960-88 từ AVRDC làm vật liệu trong các chương trình chọn tạo giống đậu xanh kháng bệnh khảm vàng và các dòng đậu xanh 148 (VN2011-2-189), 178 (VN2011-2-223) chọn lọc từ quần thể lập bản đồ cho các chương trình chọn tạo. .. QUÁ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Phân lập và xác định virus gây bệnh khảm vàng trên đậu xanh 3.1.1 Kết quả thu mẫu bệnh khảm vàng trên cây đậu xanh, các cây họ đậu khác tại Việt Nam Mẫu bệnh khảm vàng đã được thu thập tại 17 tỉnh, thành trong cả nước Tổng cộng đã thu được 68 mẫu bệnh, 57 mẫu bệnh trên đậu xanh, 11 mẫu bệnh trên các cây họ đậu khác Trong đó 16 mẫu bệnh thu tại Phú Yên trên cây đậu xanh, ... năng kháng bệnh khảm vàng trên đồng ruộng và đặc điểm nông sinh học của các mẫu giống đậu xanh 3.2.1 Đánh giá khả năng kháng bệnh khảm vàng của các nguồn gen đậu xanh Đánh giá 96 nguồn gen đậu xanh qua 2 năm có 65 nguồn gen (chiếm 67,7%) biểu hiện nhiễm đến nhiễm nặng bệnh khảm vàng, 24 nguồn gen (chiếm 25%) nhiễm bệnh ở mức trung bình Bảng 3.6: Thống kê mức độ nhiễm bệnh khảm vàng của tập đoàn đậu xanh. .. tài đã chọn lọc được hai dòng đậu xanh triển vọng 148 (VN2011-2-189) và 178 (VN2011-2-223) có năng suất cao lần lượt là 2.437 và 2.910 kg/ha, kháng bệnh khảm vàng có thể giới thiệu trực tiếp cho sản xuất hoặc sử dụng làm vật liệu khởi đầu cho công tác chọn tạo giống đậu xanh kháng bệnh 4 Kết quả nghiên cứu khoảng cách di truyền và các tính trạng hình thái nông học cho thấy các nguồn gen đậu xanh có... 98 nguồn gen đậu xanh nghiên cứu, chúng tôi đã chọn lọc 17 nguồn gen đậu xanh triển vọng dựa trên tiêu chí năng suất cao hoặc có khả năng kháng bệnh khảm vàng từ mức trung bình đến kháng cao giới thiệu cho sản xuất góp phần là làm phong phú bộ giống đậu xanh trong sản 14 xuất (Bảng 3.11) Bảng 3.11: Danh sách các giống đậu xanh triển vọng trong tập đoàn đậu xanh vụ Hè 2013 STT SĐK Tên giống Cao Ngày... Nghiên cứu lập bản đồ gen ở cây đậu xanh 3.4.1 Đánh giá kiểu hình tính kháng bệnh khảm vàng Kết quả đánh giá kiểu hình tính kháng bệnh khảm vàng của quần thể đậu xanh trong điều kiện áp lực bệnh tự nhiên trên đồng ruộng cho thấy phân bố kiểu hình kháng bệnh của quần thể F2:3 được chia thành 4 nhóm: kháng, kháng trung bình, nhiễm trung bình và nhiễm Chỉ số bệnh trung bình của quần thể là 3,57, chỉ số bệnh. .. của các mẫu giống đậu xanh Các đặc điểm nông sinh học chính và các yếu tố cấu thành năng suất là những tính trạng cần thiết được đánh giá để từ đó chọn ra các nguồn gen triển vọng có thể trực tiếp giới thiệu ra sản xuất hoặc sử dụng làm nguồn vật liệu ban đầu cho chọn tạo giống năng suất, chất lượng Đồng thời, trong công tác chọn tạo giống kháng bệnh, các nhà chọn tạo giống phải kết hợp chọn tổ hợp... nguồn gen đậu xanh (NM92, NM94, VC3960-88), nhập nội từ AVRDC và 5 dòng VR 2011-2-19, VR 2011-2-104, VR 2011-2-189, VR 24 2011-2-223 và VR 2011-2-245 từ tổ hợp lai NM94xKPS2 kháng cao với virus bệnh khảm vàng tại Phú Yên Hai nguồn gen NM92 và NM94 có năng suất thực thu cao lần lượt là 1.105 và 1.151 kg/ha, các nguồn đậu xanh này là vật liệu khởi đầu có giá trị cho chọn tạo giống đậu xanh vừa kháng bệnh. .. bệnh tự nhiên và có độ ổn định tính kháng là các nguồn gen: SĐK 3198 (V Glabrescens), NM92, NM94 và CV3960-88 có nguồn gốc từ AVRDC Đây là những nguồn gen kháng hữu hiệu cho vùng sản xuất đậu xanh tại Phú Yên và vùng Duyên Hải nước ta Bên cạnh đó đã chọn ra được 17 dòng /giống có triển vọng từ tập đoàn đậu xanh làm nguồn vật liệu phục vụ cho công tác nghiên cứu chọn tạo giống tiếp theo (Bảng 3.6 và 3.7)... Phú Yên trên cây đậu xanh, 10 mẫu bệnh thu tại Hà Nội (9 mẫu bệnh trên đậu xanh, 1 mẫu bệnh trên đậu đen), 7 mẫu bệnh thu tại Thái Bình trên đậu xanh, còn lại các mẫu bệnh khác được thu rải rác trên các tỉnh thành khác (Bảng 3.1, Hình 3.2) Triệu chứng của cây bị bệnh khảm vàng thu mẫu bệnh được thể hiện trong Hình 3.1 Bảng 3.1: Tổng hợp kết quả điều tra, thu thập mẫu bệnh Begomovirus theo vùng địa lý