MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG xiii MỞ ĐẦU 1.1 Quá trình sinh máu .3 1.2 Bệnh bạch cầu cấp 1.3 Tình hình nghiên cứu giới nhuộm hóa học tế bào Hình 1.3 H2O2 bị khử xúc tác peroxidaza tạo oxi nguyên tử .11 1.4 Ứng dụng phương pháp nhuộm hóa học tế bào y học .15 Bảng 1.4 Bảng phân loại dòng tế bào theo FAB có bổ sung thêm marker di truyền [26] .20 1.5 Nghiên cứu nước nhuộm hóa học tế bào .24 Hinh 1.8 Quy trình thường quy nhuộm hóa học tế bào chẩn đoán thể bệnh bạch cầu cấp theo FAB 30 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 Đối tượng nghiên cứu 28 2.2 Phương pháp nghiên cứu 28 2.3 Thực nghiệm .30 Bảng 2.4 Nhuộm nhân 34 Bảng 2.5 Nhuộm tăng màu 34 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 37 3.1 Đặc điểm chung nhóm bệnh nhân nghiên cứu 37 3.2 Nhóm bạch cầu cấp dòng lympho 39 Bảng 3.3 Bảng phân loại bạch cầu cấp dòng lympho theo giới tính .39 Hình 3.4 Ảnh nhuộm giemsa 42 mẫu tủy bệnh nhân Doãn Hữu T- thể L1 42 Hình 3.5 Ảnh nhuộm giemsa mẫu tủy 42 bệnh nhân Nguyễn Hữu T - thể L2 42 Hình 3.6 Ảnh nhuộm PAS 43 bệnh nhân Doãn Hữu T - Thể L1 43 Hình 3.7 Ảnh nhuộm PAS 43 bệnh nhân Nguyễn Hiền A- Thể L2 43 Hình 3.8 Ảnh nhuộm PER 44 bệnh nhân Doãn Hữu T - Thể L1 44 Hình 3.9 Ảnh nhuộm PER 44 bệnh nhân Nguyễn Hữu T- Thể L2 44 Hình 3.10 Ảnh nhuộm SD 45 Hình 3.11 Ảnh nhuộm SD 45 Bảng 3.7 Kết nhuộm photphataza axit phân loại dòng lympho T 48 Hình 3.12 Ảnh nhuộm photphataza axit 49 3.3 Nhóm bạch cầu cấp dòng tủy .49 Bảng 3.8 Bảng phân bố bệnh bạch cầu cấp dòng tủy theo giới tính .49 Bảng 3.9 Kết phân loại thể bệnh bạch cầu cấp dòng tủy theo giới tính 50 Hình 3.13 Tỷ lệ bệnh nhân bạch cầu cấp dòng tủy theo độ tuổi giới 51 Hình 3.14 Tỷ lệ bệnh nhân bạch cầu cấp theo kết chẩn đoán 52 Viện Huyết học-Truyền máu trung ương .52 Bảng 3.10 Kết phân loại thể bệnh kit nhuộm HICYTEC .52 Bảng 3.11 Kết chẩn đoán thể bệnh bạch cầu cấp dòng tủy kít HICYTEC kết luận viện Huyết học-Truyền máu TW đôi 54 Hình 3.15 Ảnh nhuộm giemsa mẫu tủy Vũ Thị N-thể M1 57 Hình 3.16 Ảnh nhuộm peroxidaza mẫu tủy Vũ Thị N-thể M1 57 Hình 3.17 Ảnh nhuộm sudan B mẫu tủy Vũ Thị N-thể M1 .57 Hình 3.18 Ảnh nhuộm esteraza 57 đặc hiệu mẫu tủy Vũ Thị N-thể M1 57 Hình 3.19 Ảnh nhuộm giemsa 58 mẫu tủy Bùi Thị T - thể M2 58 Hình 3.20 Ảnh nhuộm giemsa 58 mẫu tủy Hồ Ngọc A - thể M2 58 Hình 3.21 Ảnh nhuộm peroxidaza 58 mẫu tủy Đào Minh H-thể M2 58 Hình 3.22 Ảnh nhuộm sudan B 58 mẫu tủy Đào Minh H-thể M2 58 Hình 3.23 Ảnh nhuộm giemsa mẫu tủy Nguyễn Văn T-thể M3 59 Hình 3.24 Ảnh nhuộm giemsa 60 mẫu tủy Hà Thị Thu H-thể M4 60 Hình 3.25 Ảnh nhuộm peroxidaza 60 mẫu tủy Hà Thị Thu H-thể M4 60 Hình 3.26 Ảnh nhuộm sudan B 60 mẫu tủy Hà Thị Thu H-thể M4 60 Hình 3.27 Ảnh nhuộm esteraza 60 đặc hiệu mẫu tủy Hà Thị Thu H-thể M4 60 Hình 3.28 Ảnh nhuộm giemsa 61 mẫu tủy Trần Thị T-thể M5a 61 Hình 3.29 Ảnh nhuộm giemsa 61 mẫu tủy Đặng Thị Thu M-thể M5b 61 Hình 3.30 Ảnh nhuộm giemsa 61 mẫu tủy Dương Quang T-thể M6 61 Hình 3.31 Ảnh nhuộm PAS 61 mẫu tủy Dương Quang T-thể M6 61 Hình 3.32 Ảnh nhuộm giemsa mẫu tủy Nguyễn Thanh T- Thể M0 62 Hình 3.33 Ảnh nhuộm giemsa mẫu tủy Nguyễn Thanh T- Thể M0 62 Hình 3.34 Ảnh nhuộm peroxidaza 63 mẫu tủy Nguyễn Thanh T 63 Hình 3.35 Ảnh nhuộm PAS 63 mẫu tủy Nguyễn Thanh T 63 Hình 3.36 Ảnh nhuộm sudan B 63 mẫu tủy Nguyễn Thanh T 63 Hình 3.37 Ảnh nhuộm esteraza đặc hiệu mẫu tủy Nguyễn Thanh T 63 Hình 3.40 Ảnh nhuộm sudan B 65 mẫu tủy bệnh nhân Đỗ Thị P 65 Hình 3.41 Ảnh nhuộm esteraza 65 đặc hiệu mẫu tủy bệnh nhân Đỗ Thị P 65 Hình 3.42 Ảnh nhuộm esteraza không đặc hiệu mẫu tủy bệnh nhân Đỗ Thị P 65 Hình 3.43 Ảnh nhuộm esteraza không đặc hiệu ức chế NaF mẫu tủy bệnh nhân Đỗ Thị P .65 Hình 3.44 Ảnh nhuộm Giemsa 68 mẫu tủy bệnh nhân Lý Trọng Đ 68 Hình 3.45 Ảnh nhuộm Giemsa 68 mẫu tủy bệnh nhân Trần Văn C 68 Hình 3.46 Ảnh nhuộm PAS 69 mẫu tủy bệnh nhân Trương Thị T 69 Hình 3.47 Ảnh nhuộm PAS 69 mẫu tủy bệnh nhân Trần Văn C 69 Hình 3.48 Ảnh nhuộm peroxidaza 69 mẫu tủy bệnh nhân Trương Thị T 69 Hình 3.49 Ảnh nhuộm peroxidaza 69 mẫu tủy bệnh nhân Trần Văn C 69 Hình 3.50 Ảnh nhuộm Sudan B 70 mẫu tủy bệnh nhân Trương Thị T 70 Hình 3.51 Ảnh nhuộm Sudan B 70 mẫu tủy bệnh nhân Trần Văn C 70 Hình 3.52 Ảnh nhuộm esteraza đặc hiệu mẫu tủy bệnh nhân Trương Thị T .70 Hình 3.53 Ảnh nhuộm esteraza đặc hiệu mẫu tủy bệnh nhân Tr Văn C 70 Hình 3.54 Ảnh nhuộm esteraza không đặc hiệu ức chế NaF mẫu tủy bệnh nhân Trương Thị T 71 Hình 3.55 Ảnh nhuộm esteraza không đặc hiệu mẫu tủy bệnh nhân Trần Văn C 71 3.5 Kết nhuộm photphataza kiềm bạch cầu 72 Hình 3.56 Ảnh nhuộm photphataza kiềm mẫu tủy bệnh nhân Trần Văn C .73 Bảng 3.14 Kết nhuộm Perls mẫu tủy bị bệnh bạch cầu cấp 73 Hình 3.57 Ảnh nhuộm Perls tế bào lưới nội mô sắt mẫu tủy bệnh nhân Trương Thị T 73 KẾT LUẬN 73 KIẾN NGHỊ 75 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH KHOA HỌC 76 CỦA TÁC GIẢ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP 76 TÀI LIỆU THAM KHẢO 77 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TT Tên viết tắt ALL AML Bệnh bạch cầu cấp dòng tủy Acute myeloid leukemia BCC Bạch cầu cấp Leukemia CE Cacboxyl esteraza Carboxyl esterase CS Cộng et al CD Dấu ấn miễn dịch Cluster of Differenciation Tên Tiếng Việt Bệnh bạch cầu cấp dòng lympho Tên Tiếng Anh Acute lymphoblastic leukemia FAB HHTB HLA - DR 10 LA 11 L1 12 L2 13 L3 14 M0 15 M1 16 M2 17 M3 18 M4 19 M5 20 M6 21 M7 22 NE 23 NE - NaF Hội nhà huyết học Pháp Mỹ - Anh French - American - British Nhuộm Hóa học tế bào Cytochemistry Kháng nguyên bạch cầu người Human Leukocyte antigen Bệnh bạch cầu cấp Acute leukemia Bệnh bạch cầu cấp dòng lympho biệt hóa Bệnh bạch cầu cấp dòng lympho chưa biệt hóa Bệnh bạch cầu cấp dòng lympho loại Burkitt Homogenous small blast type Heterogenous blast type Homogenous lager blast type Bệnh bạch cầu cấp dòng tủy Minimally differentiated acute biệt hóa tối thiếu myeloid Bệnh bạch cầu cấp dòng tủy Acute myeloblastic leukemia, tế bào trưởng thành without maturation Bệnh bạch cầu cấp dòng tủy có Acute myeloblastic leukemia, tế bào trưởng thành with granulocytic maturation Bệnh bạch cầu cấp dòng tiền tủy Acute promyelocytic leukemia Bệnh bạch cầu cấp dòng tủy - Acute myelomonocytic mono leukemia Bệnh bạch cầu cấp dòng mono Acute mono Bệnh bạch cầu cấp dòng hồng cầu Acute erythroid leukemia Bệnh bạch cầu cấp dòng Acute megakaryoblastic tiểu cầu leukemia Esteraza không đặc hiệu Non-specific esterase Esteraza không đặc hiệu ức chế Non-specific esteraza - NaF NaF inhibitor 24 PA Photphataza axit Acid photphatase 25 PAL Photphataza kiềm Alkaline photphatase 26 PAS Periodic Axit Schiff Periodic -Acid - Schiff 27 PER Peroxydaza Peroxidase 28 SD Sudan đen Sudan black 29 SLTBT Số lượng tế bào tủy The number of myeloid cells 30 WHO Tổ chức Y tế giới World Heath Organization DANH MỤC HÌNH DANH MỤC BẢNG xiii MỞ ĐẦU Hình 1.3 H2O2 bị khử xúc tác peroxidaza tạo oxi nguyên tử .11 Bảng 1.4 Bảng phân loại dòng tế bào theo FAB có bổ sung thêm marker di truyền [26] .20 Hinh 1.8 Quy trình thường quy nhuộm hóa học tế bào chẩn đoán thể bệnh bạch cầu cấp theo FAB 30 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 Bảng 2.4 Nhuộm nhân 34 Bảng 2.5 Nhuộm tăng màu 34 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 37 Bảng 3.3 Bảng phân loại bạch cầu cấp dòng lympho theo giới tính .39 Hình 3.4 Ảnh nhuộm giemsa 42 mẫu tủy bệnh nhân Doãn Hữu T- thể L1 42 Hình 3.5 Ảnh nhuộm giemsa mẫu tủy 42 bệnh nhân Nguyễn Hữu T - thể L2 42 Hình 3.6 Ảnh nhuộm PAS 43 bệnh nhân Doãn Hữu T - Thể L1 43 Hình 3.7 Ảnh nhuộm PAS 43 bệnh nhân Nguyễn Hiền A- Thể L2 43 Hình 3.8 Ảnh nhuộm PER 44 bệnh nhân Doãn Hữu T - Thể L1 44 Hình 3.9 Ảnh nhuộm PER 44 bệnh nhân Nguyễn Hữu T- Thể L2 44 Hình 3.10 Ảnh nhuộm SD 45 Hình 3.11 Ảnh nhuộm SD 45 Bảng 3.7 Kết nhuộm photphataza axit phân loại dòng lympho T 48 Hình 3.12 Ảnh nhuộm photphataza axit 49 Bảng 3.8 Bảng phân bố bệnh bạch cầu cấp dòng tủy theo giới tính .49 Bảng 3.9 Kết phân loại thể bệnh bạch cầu cấp dòng tủy theo giới tính 50 Hình 3.13 Tỷ lệ bệnh nhân bạch cầu cấp dòng tủy theo độ tuổi giới 51 Hình 3.14 Tỷ lệ bệnh nhân bạch cầu cấp theo kết chẩn đoán 52 Viện Huyết học-Truyền máu trung ương .52 Bảng 3.10 Kết phân loại thể bệnh kit nhuộm HICYTEC .52 Bảng 3.11 Kết chẩn đoán thể bệnh bạch cầu cấp dòng tủy kít HICYTEC kết luận viện Huyết học-Truyền máu TW đôi 54 Hình 3.15 Ảnh nhuộm giemsa mẫu tủy Vũ Thị N-thể M1 57 Hình 3.16 Ảnh nhuộm peroxidaza mẫu tủy Vũ Thị N-thể M1 57 Hình 3.17 Ảnh nhuộm sudan B mẫu tủy Vũ Thị N-thể M1 .57 Hình 3.18 Ảnh nhuộm esteraza 57 đặc hiệu mẫu tủy Vũ Thị N-thể M1 57 Hình 3.19 Ảnh nhuộm giemsa 58 mẫu tủy Bùi Thị T - thể M2 58 Hình 3.20 Ảnh nhuộm giemsa 58 mẫu tủy Hồ Ngọc A - thể M2 58 Hình 3.21 Ảnh nhuộm peroxidaza 58 mẫu tủy Đào Minh H-thể M2 58 Hình 3.22 Ảnh nhuộm sudan B 58 mẫu tủy Đào Minh H-thể M2 58 Hình 3.23 Ảnh nhuộm giemsa mẫu tủy Nguyễn Văn T-thể M3 59 Hình 3.24 Ảnh nhuộm giemsa 60 mẫu tủy Hà Thị Thu H-thể M4 60 Hình 3.25 Ảnh nhuộm peroxidaza 60 mẫu tủy Hà Thị Thu H-thể M4 60 Hình 3.26 Ảnh nhuộm sudan B 60 mẫu tủy Hà Thị Thu H-thể M4 60 Hình 3.27 Ảnh nhuộm esteraza 60 đặc hiệu mẫu tủy Hà Thị Thu H-thể M4 60 Hình 3.28 Ảnh nhuộm giemsa 61 mẫu tủy Trần Thị T-thể M5a 61 Hình 3.29 Ảnh nhuộm giemsa 61 mẫu tủy Đặng Thị Thu M-thể M5b 61 Hình 3.30 Ảnh nhuộm giemsa 61 mẫu tủy Dương Quang T-thể M6 61 Hình 3.31 Ảnh nhuộm PAS 61 mẫu tủy Dương Quang T-thể M6 61 Hình 3.32 Ảnh nhuộm giemsa mẫu tủy Nguyễn Thanh T- Thể M0 62 Hình 3.33 Ảnh nhuộm giemsa mẫu tủy Nguyễn Thanh T- Thể M0 62 Hình 3.34 Ảnh nhuộm peroxidaza 63 mẫu tủy Nguyễn Thanh T 63 Hình 3.35 Ảnh nhuộm PAS 63 mẫu tủy Nguyễn Thanh T 63 Hình 3.36 Ảnh nhuộm sudan B 63 mẫu tủy Nguyễn Thanh T 63 Hình 3.37 Ảnh nhuộm esteraza đặc hiệu mẫu tủy Nguyễn Thanh T 63 Hình 3.40 Ảnh nhuộm sudan B 65 tiêu tế bào blast tủy hỗn hợp dòng lympho dòng tủy Ở hình 3.44, tế bào blast dòng lympho có kích thước nhỏ so với tế bào dòng tủy, kích thước to nhỏ không đều, nhân không đồng nhất, số tế bào blast lympho có hạt nhân nhìn rõ, tỷ lệ nhân bào tương lớn, bào tương ưa bazơ đậm Blast lympho chiếm số lượng nhiều blast dòng tủy Hình 3.45, lam nhuộm Giemsa tế bào blast tủy chiếm số lượng có kích thước lớn nhiều lần so với tế bào blast lympho, nhân không đồng nhất, tỷ lệ nhân bào tương thấp, bào tương ưa bazơ Hình 3.44 Ảnh nhuộm Giemsa Hình 3.45 Ảnh nhuộm Giemsa mẫu tủy bệnh nhân Lý Trọng Đ mẫu tủy bệnh nhân Trần Văn C Trên hình 3.46 3.47 ảnh nhuộm PAS với độ phóng đại 1.000 lần bệnh nhân bạch cầu cấp thể lai lympho - tủy (Trương Thị T Trần Văn C) Hình 3.46, cho thấy tế bào blast dòng tủy dương tính lan tỏa màu đỏ tươi mịn không thành hạt Các tế bào blast dòng lympho dương tính PAS dạng hạt nhỏ nằm rìa nguyên sinh chất tế bào Trên hình 3.47, tương tự hình 3.46 tiêu nhuộm giemsa xuất hai loại tế bào blast dòng tủy lympho Các tế bào blast lympho dương tính với kỹ thuật nhuộm PAS, hạt to phân bố bào tương giả túc tế bào; bên cạnh số tế bào dòng tủy dương tính lan tỏa hồng cầu màu xanh thuộc tế bào dòng tủy 68 Hình 3.46 Ảnh nhuộm PAS Hình 3.47 Ảnh nhuộm PAS mẫu tủy bệnh nhân Trương Thị T mẫu tủy bệnh nhân Trần Văn C Hình 3.48 3.49 ảnh nhuộm peroxidaza bệnh nhân bạch cầu cấp dòng lai lympho - tủy Các tế bào blast dòng tủy dương tính mạnh có màu vàng nâu bào tương Các tế bào blast lympho âm tính không bắt màu vàng nâu nguyên sinh chất Hình 3.48 Ảnh nhuộm peroxidaza Hình 3.49 Ảnh nhuộm peroxidaza mẫu tủy bệnh nhân Trương Thị T mẫu tủy bệnh nhân Trần Văn C Hình 3.50 3.51 ảnh nhuộm Sudan bệnh nhân bạch cầu cấp lai lympho - tủy Các tế bào blast dòng tủy cho kết dương tính mạnh, có nhiều hạt to màu đen bào tương chí che kín nhân tế bào Trên tiêu có tế bào blast dòng lympho cho kết âm tính 69 Hình 3.50 Ảnh nhuộm Sudan B Hình 3.51 Ảnh nhuộm Sudan B mẫu tủy bệnh nhân Trương Thị T mẫu tủy bệnh nhân Trần Văn C Trên hình 3.52 3.53 kết nhuộm esteraza đặc hiệu mẫu lai lympho-tủy Các tế bào blast dòng tủy bắt màu đỏ đậm nguyên sinh chất xen lẫn tế bào blast dòng lympho cho kết âm tính Hình 3.52 Ảnh nhuộm esteraza đặc hiệu Hình 3.53 Ảnh nhuộm esteraza đặc mẫu tủy bệnh nhân Trương Thị hiệu mẫu tủy bệnh nhân Tr Văn T C Phản ứng esteraza không đặc hiệu không đặc hiệu ức chế NaF để phân định dòng mono dòng hạt Hình 3.54 3.55 hình ảnh nhuộm bệnh nhân bạch cầu cấp thể lai lympho - tủy Các tế bào lai lympho không bị ức chế chất, tế bào lai dòng tủy bị ức chế 70 Hình 3.54 Ảnh nhuộm esteraza không đặc Hình 3.55 Ảnh nhuộm esteraza không đặc hiệu ức chế NaF mẫu tủy bệnh hiệu mẫu tủy bệnh nhân Trần Văn nhân Trương Thị T C 71 Qua phản ứng nhuộm trên, vi trường vừa có tế bào blast nhuộm dương tính với dòng lympho (PAS) tế bào blast nhuộm dương tính với dòng tủy (peroxidaza, sudanB esteraza đặc hiệu), điều chứng tỏ mẫu tủy xuất tế bào blast hai dòng tủy lympho gọi thể lai lympho-tủy 3.5 Kết nhuộm photphataza kiềm bạch cầu Bảng 3.13 Kết nhuộm photphataza kiềm bệnh nhân bạch cầu cấp Điểm nhuộm Số lượng Tỷ lệ 146 1,7% Tổng 60 100% Trong tổng số 60 trường hợp chẩn đoán bạch cầu cấp hầu hết giảm điểm nhuộm (71,7%) 20 điểm, có trường hợp tăng điểm có định hướng nhiễm trùng (xem Bảng 3.13) Nhuộm photphataza kiềm bạch cầu dùng để phân biệt bệnh bạch cầu kinh bệnh bạch cầu cấp hội chứng nhiễm trùng bạch cầu đơn nhân Nếu bệnh bạch cầu kinh thường có tượng giảm điểm nhuộm (có thể giảm đến mức điểm Trong trường hợp bạch cầu cấp điểm nhuộm mẫu tuỷ thường nằm mức giảm vừa có tăng cao tế bào blast Nếu trường hợp bị nhiễm trùng (một triệu chứng bệnh) điểm nhuộm mẫu tăng lên dấu giúp bác sỹ lâm sàng theo dõi tiên lượng bệnh Tuy vậy, biến động lớn tế bào thành phần tế bào mẫu tuỷ bệnh nhân bạch cầu cấp nên xét nghiệm thường có giá trị có giá trị theo dõi mang tính động học [40] Hình 3.56 thể phản ứng nhuộm photphataza kiềm dương tính, nguyên sinh chất tế bào bắt màu đỏ nhân hồng cầu màu xanh 72 Hình 3.56 Ảnh nhuộm photphataza kiềm mẫu tủy bệnh nhân Trần Văn C 3.6 Kết nhuộm sắt mẫu tủy bệnh nhân bạch cầu cấp Viện HH-TM trung ương Bảng 3.14 Kết nhuộm Perls mẫu tủy bị bệnh bạch cầu cấp Giới Có tế bào mạng lưới nội mô sắt Không có tế bào mạng lưới nội mô sắt Tổng Số trường hợp 54 60 Tỷ lệ 10,0% 90,0% 100% Nhuộm sắt (Perls) phát nguyên hồng cầu sắt tế bào mạng lưới nội mô sắt [42] (hình 3.57) Kết nhuộm Perls kít nhuộm hóa học tế bào HICYTEC cho thấy 60 bệnh nhân bạch cầu cấp có trường hợp (chiếm 10,0%) có tế bào mạng lưới nội mô sắt (xem bảng 3.14) Theo Elisabeth Rybo cs tế bào mạng lưới nội mô sắt có giá trị theo dõi tình trạng ứ sắt tốt so với nguyên hồng cầu sắt [50] Hình 3.57 Ảnh nhuộm Perls tế bào lưới nội mô sắt mẫu tủy bệnh nhân Trương Thị T KẾT LUẬN 73 Sử dụng kít nhuộm hóa học tế bào HICYTEC đồng 10 kỹ thuật để phân loại thể bệnh chẩn đoán bệnh bạch cầu cấp 202 mẫu tủy bệnh nhân chọc tủy lần đầu chưa điều trị có triệu chứng nằm tiêu chuẩn mặt lâm sàng chẩn đoán bệnh bạch cầu cấp, đề tài thu số kết sau: Tỷ lệ mắc bệnh bạch cầu cấp 31,2%, cao bạch cầu cấp dòng tủy chiếm 50,0%, bạch cầu cấp dòng lympho chiếm 41,7% thấp bạch cầu cấp lai lympho - tủy chiếm 8,3% Bạch cầu cấp dòng lympho chủ yếu trẻ em chiếm 60% có tỷ lệ nam giới mắc bệnh cao nữ giới, nam/nữ = 1,3 Đã đánh giá giá trị sử dụng kít phân loại thể bệnh bạch cầu cấp theo tiêu chuẩn FAB đạt phù hợp 100% dòng lympho 93,3% dòng tủy so với kết chẩn đoán Viện Huyết học - Truyền máu trung ương phương pháp hình thái học, miễn dịch di truyền Có trường hợp bạch cầu cấp thể lai lympho-tủy, mức độ phù hợp chẩn đoán đạt 100% Đã đánh giá giá trị kít nhuộm hóa học tế bào đồng HICYTEC nhuộm photphataza axit bạch cầu, nhuộm photphataza kiềm nhuộm Perls bệnh nhân bạch cầu cấp: 20% mẫu tủy có photphataza axit dương tính định hướng dòng lympho T; 1,7% có điểm nhuộm photphataza kiềm tăng định hướng có nguy nhiễm trùng; 3,3% mẫu tủy gặp tế bào mạng lưới nội mô sắt có giá trị theo dõi tình trạng ứ sắt tốt so với nguyên hồng cầu sắt 74 KIẾN NGHỊ Sử dụng kít nhuộm HICYTEC đồng 10 kỹ thuật để nhuộm mẫu tủy chọc tủy lần đầu phòng xét nghiệm Huyết học để xác định thể bệnh 75 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH KHOA HỌC CỦA TÁC GIẢ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP Trần Văn Tính, Vũ Thị Thủy, Lê Thị Thanh Thủy, Ngô Thị Thảo, Đoàn Văn Thuyết, Bùi Phương Thuận (2015), “Đánh giá kết kít nhuộm HICYTEC chẩn đoán bệnh bạch cầu bệnh nhân chọc tủy lần đầu viện Huyết học-Truyền máu trung ương”, Tạp chí Y học thành phố Hồ Chí Minh, tập 19 (4) tr 508-513 76 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Nguyễn Thị Minh An cộng (1995), “Tình hình bệnh lơ xê mi cấp số bệnh viện địa phương bệnh viện bạch mai”, Kỷ yếu công trình nghiên cứu khoa học, Đại học Y Hà Nội, tr.185-192 Đỗ Thị Vinh An, Phạm Quang Vinh, Phan Văn Chi, Nguyễn Thị Bích Nhi (2010), “Bước đầu tìm hiểu số biến đổi protein bệnh nhân lơ xê mi cấp dòng lympho khoa Huyết học Truyền máu bệnh viện Bạch Mai”, Tạp chí Y học Việt Nam, Tập 373, tr.267-270 Bộ môn Huyết học-Truyền máu (1984), Kỹ thuật xét nghiệm huyết học truyền máu, NXB Y học, Hà Nội Nguyễn Trọng Biểu, Từ Văn Mặc (1978), Thuốc thử hữu cơ, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Trần Thị Hồng Hà (2004), Nghiên cứu đặc điểm, giá trị số yếu tố sinh học lâm sàng trẻ em bị lơ xê mi cấp dòng lympho bệnh viện nhi Trung ương, Luận án Tiến sỹ Y học, Đại học Y Hà Nội Nguyễn Thị Hằng (2004), “Thiếu máu thiếu sắt”, Giáo trình Huyết học-Truyền máu, NXB Y học, Hà Nội Trần Thị Minh Hương, Đỗ Trung Phấn (2002), “Tình hình bệnh máu Viện Huyết học truyền máu, bệnh viện Bạch Mai”, Kỷ yếu công trình nghiên cứu khoa học Huyết học Truyền máu 1999-2000, NXB Y học, tr.15-24 Nguyễn Công Khanh cộng (1987), “Phân loại bệnh lơ xê mi cấp trẻ em”, Y học Việt Nam (140), tr 28-32 Bùi Ngọc Lan (2007), Nghiên cứu lâm sàng, cận lâm sàng bệnh lơ xê mi cấp dòng lympho điều trị thể nguy không cao trẻ em, Luận án Tiến sỹ Y học, Đại học Y Hà Nội 10 Lâm Thị Mỹ, Trần Thái Bình, Nguyễn Thanh Hưng, Huỳnh Nghĩa (2004), “Đặc điểm bệnh bạch cầu cấp khu vực phía Nam năm 2002-2003”, Tạp chí Y học Thành phố Hồ Chí Minh, 1(8), tr 98-102 11 Đỗ Trung Phấn (2008), “Lơ xê mi cấp”, Bệnh lí tế bào nguồn, NXB Y học, tr 96 - 107 77 12 Đỗ Trung Phấn (2008), “Sinh máu”, Bệnh lí tế bào nguồn, NXB Y học, tr 13-17 13 Trần Văn Tính (2014), “Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ chất, pH, muối điazo phản ứng nhuộm photphataza axit”, Tạp chí Y học thực hành (05), tr.29-30 14 Trần Văn Tính, Bùi Thanh Hương, Nguyễn Đắc Thảo, Đinh Ngọc Quân (2015), Nghiên cứu chế tạo kít nhuộm hóa học tế bào để chẩn đoán dòng tế bào bệnh ung thư máu, Đề tài cấp Bộ, Bộ Công an 15 Trần Văn Tính, Lê Đức Ngọc (1993), “Cải tiến phương pháp đánh giá số thay đổi hóa sinh tế bào bạch cầu ung thư dòng tuỷ”, Kỷ yếu Hội nghị hóa học toàn quốc Việt Nam lần thứ 3, tr.179 16 Trần Văn Tính, Phạm Hoài Thu, Nguyễn Anh Trí, Lưu Văn Bôi (2011), “Tổng hợp nghiên cứu ảnh hưởng hiệu ứng electron phản ứng nhuộm esteraza đặc hiệu tế bào bạch cầu người naphtol AS cloaxetat”, Tạp chí Hóa học, Tập 49 (4), tr 479-488 17 Trần Văn Tính, Nguyễn Anh Trí, Nguyễn Đình Triệu (2000), “Nghiên cứu áp dụng chương trình Hyperchem để tính toán chế động học tối ưu hoá phản ứng nhuộm Esteraza không đặc hiệu bạch cầu người”, Tạp chí thông tin y dược học (03), tr.18-24 18 Trần Văn Tính, Nguyễn Anh Trí, Nguyễn Đình Triệu (2000), “Nghiên cứu tối ưu hoá phản ứng nhuộm Esteraza không đặc hiệu phương pháp đơn hình”, Tạp chí thông tin y dược học (06), tr.31-35 19 Nguyễn Hữu Toàn (1999), Nghiên cứu phân loại leukemia cấp người lớn, rối loạn tạo máu tế bào miễn dịch thể M1, M2, M3, Luận án Tiến sĩ Y dược, Học viện Quân y 20 Phan Nguyễn Thanh Vân, Nguyễn Tấn Bỉnh (2006), “Triển khai kỹ thuật FISH RT-PCR nhằm phát bất thường nhiễm sắc thể gen bệnh lý huyết học bệnh viện Truyền máu Huyết học thành phố Hồ Chí Minh” Tạp Chí Y Học Thực Hành, tập 545, tr 73-79 21 Phan Nguyễn Thanh Vân (2013), Ứng dụng kỹ thuật khuếch đại gen khảo sát tổ hợp gen thường gặp bệnh lý bạch cầu cấp, Luận án Tiến sỹ Y học, Đại học Y dược thành phố Hồ Chí Minh 78 22 Nguyễn Triệu Vân cộng (2004), “Giá trị số dấu ấn miễn dịch (marker) chẩn đoán phân loại lơ xê mi cấp dòng lympho người lớn Viện Huyết học truyền máu”, Tạp Chí Y học Thực hành, tập 497, tr.27-29 23 Nguyễn Triệu Vân (2014), “Một số hiểu biết bệnh nguyên, bệnh sinh, điều trị tiên lượng bệnh lơ xê mi cấp”, Một số chuyên đề Huyết họcTruyền máu, Tập 5, NXB Y học, tr 225-244 24 Phạm Quang Vinh (2003), Các biến đổi nhiễm sắc thể bệnh nhân lơ xê mi cấp Viện Huyết học- Truyền máu, bệnh viện Bạch Mai, Luận án Tiến sỹ Y học 25 Trần Ngọc Vũ, Nguyễn Duy Thăng, Phan Thị Thu Hoa, Trần Thị Phương Túy, Phan Hoàng Duy, Ngô Tứ Cương, Hoàng Thị Thanh Trang, Tôn Nữ Trà Mai (2014), “Nghiên cứu ứng dụng hóa học tế bào giá trị bổ sung dấu ấn miễn dịch chẩn đoán, phân loại lơ xê mi cấp”, Tạp chí Y học Việt Nam, Tập 423, tr 189-195 Tiếng Anh 26 Barnes A (1994), Acute leukemias: The F.A.B classification and more, Resource exchange intern'l-Vietnam 27 Bennett J M and et al (1976), "Proposals for the classification of the acute leukaemias French-American-British (FAB) co-operative group", Br J Haematol, 33 (4), pp.451-458 28 Brennan M L., Penn M S., Van Lente F., Nambi V., Shishehbor M H., Aviles R J., Goormastic M., Pepoy M L., McErlean E S., Topol E J., Nissen S E., Hazen S L (2003), "Prognostic value of myeloPeroxidaza in patients with chest pain", N Engl J Med 349 (17), pp 1595-604 29 Burstone, M S (1957), “Esteraza activity of developing bones and teeth”, A M A Arch Path Vol 60, pp 164 - 167 30 Chayen J., Bitensky L (1994), Practical histochemistry, Wiley, London 31 Connor J R , Dodds R A , James I E , Gowen M (1995), “Human osteoclast and giant cell differentiation, The apparent switch from nonspecific esteraza to tartrate resistant acid photphataza activity coincides with the in situ expression of osteopontin mRNA”, J Histochemistry and Cytochemistry Vol 43 (12), pp 1193-1201 79 32 Craig F E., Foon K A (2008), "Flow cytometric immunophenotyping for hematologic neoplasms", Blood, 111 (8), pp 3941-67 33 Dacie J V., Lewis S M (1994), Practical Haematology, Longman Group Ltd, Hong Kong 34 David Swirsky and Barbara J Bain (2006), Practical Haematology, Churchill Livingstone, Hong kong 35 Dissing J., Svensmark O (1990), "Human red cell acid photphataza: purification and properties of A, B and C isozymes", Biochim Biophys Acta Vol 1041, pp 232-42 36 Drexler H G (1987) "Classification of acute myeloid leukemias-a comparison of FAB and immunophenotyping", Leukemia, (10), pp 697-705 37 Estey E , Dohner H (2006), "Acute myeloid leukaemia" Lancet, 368 (9550), pp 1894-907 38 Gignac S M., Hu Z B., Denkmann S A., Uphoff C C., Drexler H G (1996), “Esteraza isoenzyme profiles of 255 leukemia-lymphoma cell lines from all hematopoietic cell lineages”, Leuk lymphoxítsm Vol 22, pp 143-151 39 Greer J P., Foerster J., Rodgers G M., Paraskevas F., Glader B., Arber D A., Means Jr T R (2009), Wintrobe’s clinical hematology Vol 1, Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, USA 40 Hann I M ; Smith O P (2006), Pediatric hematology, Wiley-Blackwell, USA 41 Hayhoe F G J., Quaglino D (1994), Haematological cytochemistry, Edinburgh Churchill Livingstone, London 42 Heslop C L , Frohlich J J , Hill J S (2010), "MyeloPeroxidaza and C-reactive protein have combined utility for long-term prediction of cardiovascular mortality after coronary angiography" J Am Coll Cardiol 55 (11), pp 1102-9 43 Kantarjian H M., Deisseroth A., Kurzrock R., Estrov Z., Talpaz M (1993) "Chronic myelogenous leukemia: a concise update", Blood, 82, pp 691-703 44 Leong A S-Y, Cooper K., Leong F J W-M (2003), Manual of Diagnostic Antibodies for Immunohistology, Greenwich Medical Media, London, pp 325326 80 45 Mathy-Hartert M., Bourgeois E., Grülke S., Deby-Dupont G., Caudron I., Deby C., Lamy M., Serteyn D (1998), "Purification of myeloPeroxidaza from equine polymorphonuclear leucocytes", Can J Vet Res, Vol 62 (2), pp 127-132 46 Merck (1995), “Enzyme cytochemistry Leucognost/HematoGnost Fe; Working intructions for simpified cytochemical staining for differentiation of leukaemias and myelodysplastic syndromes”, E.Merck, D-64271 Darmstadt 47 Moe W and et al (2008), “Diagnosis of acute myeloid leukemia according to the WHO classification in the Japan adult leukemia study group AML-97 protocol”, International Journal of Hematology Vol 87 (2), pp 144-151 48 Pui C H., Sallan S., Relling M V., Masera G., Evans W E (2001), “International Childhood Acute Lymphoblastic Leukemia”, Leukemia, 15, pp 707-715 49 Pui C H., Robinson L L., Look A T (2008) “Acute lymphoblastic leukemia”, Lancet, 371 (9617), pp 1030-1072 50 Rybo E and Bengtsson C (1985), "Sideroblast count and examination of bone marrow reticuloendothelial iron in the diagnosis of iron deficiency", Scandinavian Journal of Haematology, Vol 34(S43), pp 77-85 51 Siegel M P H R., Deepa Naishadham MA, MS and Ahmedin Jemal DVM, PhD (2013), Cancer statistics, Vol 63(1), pp 11-30 52 Siegel M P H R., Deepa Naishadham MA, MS and Ahmedin Jemal D V M., PhD (2015), Cancer statistics, CA Cancer J Clin, vol 65(1), pp 5-29 53 Sigma (2006), Accustain iron stain, Procedure No HT20, Revised 2014-09, United Kingdom 54 Sigma-Aldrich (2008), Hematology & Histiology, Product guide, USA 55 Sigma (2014), Lymphocyte enzyme, Procedure No 181, Revised 2014-09, USA 56 Stok J E., Goloshchapov A., Cheng Song, Wheelock C E., M B H Derbel, C Morisseau, Hammock B D (2004), “Investigation of the role of a second conserved serine in carboxylesterazas via site-directed mutagenesis”, Archives of Biochemistry and Biophysics Vol 430, pp 247-255 57 William H E (1941), Stain technique, The Science press printing company 81 lancaster 82