BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT NGÔ VĂN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ BIỆN PHÁP KỸ THUẬT TẠO GIỐNG CÂY MUN (Diospyros mun A Chev ex Lecomte) Ở MIỀN BẮC VIỆT NAM Chuyên ngành: Lâm sinh Mã số: 62 62 02 05 Hà Nội - Luận án hoàn thành tại: Trường Đại học Lâm nghiệp Hướng dẫn khoa học: TS Lê Xuân Trường PGS TS Phạm Đức Tuấn Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ: Trước Hội đồng chấm luận án cấp trường vào lúcgiờ .ngày tháng .năm , Có tìm hiếu Luận án tại: Thư viện Trường Đại học Lâm nghiệp viện Quốc gia Thư CÁC BÀI BÁO CỦA TÁC GIẢ LIÊN QUAN ĐÉN LUẬN ÁN ĐÃ ĐƯỢC CÔNG BỐ Ngô Văn Nhương, Vũ Đình Duy, Phan Minh Quang, Lê Xuân trường, Phạm Đức Tuấn, Ngô Thị Mai, Hoàng Thị Thu Trang (2014), “Nghiên cứu đặc điểm di truyền loài Mun (Diospyros mun A Chev ex Lecomte) Việt Nam sở phân tích trình tự nucleotide vùng gene rbcL” Tạp chí Nông nghiệp & Phát triển Nông thôn 14 (2): 103-110, Bộ Nông nghiệp phát triển nông thôn, Hà Nội Ngô Văn Nhương (2014), “Đặc điểm sinh lý phương pháp bảo quản hạt Mun (Diospyros mun A.chev Ex lecomte)” Tạp chí khoa học Lâm nghiệp, (1), Viện khoa học Lâm nghiệp Việt Nam, Hà Nội Ngô Văn Nhương (2014), “Một số đặc điểm lâm học Mun (Diospyros mun A.chev Ex lecomte) VQG Cúc Phương” Tạp chí khoa học Lâm nghiệp, (2), Viện khoa học Lâm nghiệp Việt Nam, Hà Nội Ngô Văn Nhương, Vũ Đình Duy, Hoàng Thị Thu Trang, Phan Minh Quang, Bùi Thị Tuyết Xuân, Đỗ Thị Phương Thảo (2014), “Đánh giá mối quan hệ di truyền quần thể Mun (Diospyros mun A Chev ex Lecomte) Việt Nam sở phân tích trình tự nucleotide vùng gen ITS-rDNA” Tạp chí Công nghệ Sinh học 12 (2): 269- 279, 2014, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, Hà Nội MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Mun loài địa, đặc hữu Việt Nam, trước loài có phân bố tự nhiên nhiều tỉnh nước Ninh Bình, Hòa Bình, Tuyên Quang, Quảng Bình, Khánh Hòa, Ninh Thuận Hiện chúng số Vườn quốc gia, Khu bảo tồn thiên nhiên rừng cấm, theo tiêu chí IUCN (2013) loài Mun xếp tình trạng nguy cấp (A1cd) Tại Việt Nam loài dẫn sách đỏ Việt Nam (2007) mức độ nguy cấp EN A1c,d, B1 + 2a pháp luật bảo vệ (nằm gỗ nhóm I) Tuy nhiên, có công trình nghiên cứu loài quý này, mà đa số tập trung nghiên cứu phân loại phân bố, đánh giá tài nguyên bảo tồn loài mang tính chất chung chung Hiện nay, Mun trồng thử nghiệm từ hạt, song hiểu biết đặc điểm sinh học loài ít, chưa có quy trình gieo ươm cách hệ thống, chưa có hướng dẫn kỹ thuật tạo kỹ thuật trồng Mun nên chưa đủ sở khoa học để xây dựng giải pháp kỹ thuật bảo tồn có hiệu Vì vậy, “Nghiên cứu số đặc điểm sinh học biện pháp kỹ thuật tạo giống Mun (Diospyros mun A.Chev ex Lecomte) miền Bắc Việt Nam” góp phần đề xuất kỹ thuật bảo tồn loài miền Bắc nói riêng Việt Nam nói chung, đề tài nghiên cứu sinh lựa chọn thực nhằm giải tồn Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 2.1 Ý nghĩa khoa học Đề tài bổ sung thông tin đặc điểm lâm học, sinh thái học loài Mun góp phần cho việc bảo tồn nguồn gen 2.2 Ý nghĩa thực tiễn (1) Đề tài xác định xây dựng hướng dẫn kỹ thuật tạo Mun phục vụ cho trồng rừng; (2) Những kết đề tài sử dụng làm tài liệu tham khảo cho cán kỹ thuật lâm nghiệp, học sinh, sinh viên, nông dân định5hướng phát triển loài gỗ quý Những đóng góp đề tài (1) Bổ sung thêm số thông tin đặc điểm sinh học loài Mun; (2) Bổ sung, hoàn thiện kỹ thuật tạo Mun vườn ươm trồng thử nghiệm Mun giai đoạn tuổi xuất vườn khác Đối tượng nghiên cứu Mun rừng tự nhiên, rừng trồng vườn thực vật, rừng trồng thử nghiệm vườn ươm Giới hạn đề tài 5.1 Giới hạn nội dung nghiên cứu (1) Đề tài nghiên cứu số đặc điếm sinh học có liên quan trực tiếp đến sinh trưởng Mun; (2) “Tạo giống” đề tài việc tạo từ hạt; nghiên cứu đặc điếm sinh học Mun thực số địa điếm miền Bắc; nghiên cứu mối quan hệ di truyền quần Mun thực số địa điếm Việt Nam 5.2 Giới hạn địa bàn nghiên cứu Các nghiên cứu đề tài thực VQG Cúc Phương- Ninh Bình, KBTTN Ngọc Sơn- Ngổ Luông- Hòa Bình, KBTTN Na Hang- Tuyên Quang, VQG Phong Nha- Kẻ Bàng, Quảng Bình; VQG Núi Chúa- Ninh Thuận; xã Cam Thịnh Đông Cam Thịnh Tây thuộc Thành phố Cam Ranh, tỉnh Khánh Hòa 5.3 Giới hạn thời gian nghiên cứu Các thí nghiệm tạo vườn ươm theo dõi từ cấy vào bầu đến lúc tháng tuổi Thí nghiệm rừng trồng thử nghiệm theo dõi sau trồng 12 tháng Chương TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU Trên sở nghiên cứu 118 tài liệu tham khảo về: kỹ thuật tạo - - - thân gỗ, hệ gen sử dụng giống từ hạt, kỹ thuật gây trồng nghiên cứu phân loại phân tử thực vật, số thành tựu nghiên cứu đa dạng di truyền tiến hóa phân tử nghiên cứu có liên quan đến đề tài tác giả nước Đề tài tổng quan nội dung đế phục vụ cho nghiên cứu số đặc điếm sinh học biện pháp kỹ thuật tạo giống Mun Từ kết tổng quan này, đề tài có nhận xét nêu lên số quan điếm chung (về nghiên cứu đặc điếm sinh học, vật hậu, hạt giống kỹ thuật trồng Mun), nêu lên tồn đế từ xác định nội dung cần thực tiếp: Về đặcđiếm sinh học Mun: Chưa có nghiên cứu đề cập đến tọa độ địa lý, tổ thành mối quan hệ Mun với loài khác quần thế, thành phần giới hóa học đất lâm phần có Mun phân bố, tái sinh tự nhiên, sinh trưởng hàng năm Mun rừng trồng với độ tuổi khác nhau, cấu tạo hiến vi gỗ Mun mối quan hệ di truyền quần Mun Về vật hậu, nghiên cứu Mun chưa cho biết thời kỳ chín thu hái quả, đặc biệt chưa có nghiên cứu toàn diện, chi tiết thời kỳ sinh dưỡng sinh sản Mun Về hạt giống, tác giả cho biết hạt thu hái xử lý nước nóng chế phẩm cho tỉ lệ nảy mầm cao (trên 90%), chưa có nghiên cứu phương pháp bảo quản đế trì sống hạt xử lý hạt giống Các nghiên cứu tỷ lệ che sáng, thành phần ruột bầu cho Mun giai đoạn tuổi khác xác định sinh trường đường kính chiều cao, chưa có nghiên cứu ảnh hưởng chế độ tưới nước tới sinh trường phát triển Mun giai đoạn tuổi khác vườn ươm, đặc biệt thí nghiệm chưa nghiên cứu sinh khối ươm, cấu tạo giải phẫu Mun, hàm lượng sắc tố vườn ươm - Về kỹ thuật trồng: Hiện Mun7chưa nghiên cứu đế mờ rộng gây trồng nhiều, chủ yếu trồng nơi mà có Mun phân bố theo kinh nghiệm, chưa rõ sờ khoa học công tác tạo giống, tiêu chuẩn trồng, chưa có nghiên cứu xác định tuổi xuất vườn Chương MỤC TIÊU, NỘI DUNG, PHƯƠNG PHÁP VÀ VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 2.1 Mục tiêu đề tài Mục tiêu chung: Nghiên cứu số đặc điếm sinh học biện pháp kỹ thuật tạo giống Mun (Diospyros mun A.Chev ex Lecomte) miền Bắc- Việt Nam nhằm bảo tồn loài gỗ quý Mục tiêu cụ thể gồm: (1) Xác định số đặc điếm sinh học Mun miền Bắc- Việt Nam: Hình thái, phân bố, đặc điếm lâm học, cấu tạo hiến vi gỗ, mối quan hệ di truyền quần Mun; (2) Xác định số tiêu kỹ thuật gieo ươm hạt kỹ thuật tạo Mun từ hạt giai đoạn vườn ươm; (3) Đề xuất số biện pháp kỹ thuật tạo Mun miền BắcViệt Nam 2.2 Nội dung nghiên cứu 2.2.1 Nghiên cứu số đặc điểm sinh học Mun (1) Nghiên cứu hình thái phân bố; (2) Nghiên cứu đặc điếm lâm học; (3) Nghiên cứu cấu tạo hiến vi gỗ Mun; (4) Nghiên cứu mối quan hệ di truyền số quần Mun Việt Nam 2.2.2 Nghiên cứu kỹ thuật hạt giống (1) Xác định thời điếm thu hái hạt Mun; (2) Xác định số tiêu gieo ươm hạt Mun; (3) Nghiên cứu điều kiện xử lý nảy mầm hạt; (4) Nghiên cứu phương pháp bảo quản hạt Mun 2.2.3 Nghiên cứu kỹ thuật tạo (1) Nghiên cứu ảnh hưởng nhân tố sinh thái (ánh sáng, hỗn hợp ruột bầu, chế độ tưới nước) đến sinh trưởng xuất vườn khác giai đoạn vườn ươm; (2) Ánh hưởng tuổi đến sinh trưởng Mun đế xác định tuổi xuất vườn 2.2.4 Đề xuất số biện pháp kỹ thuật tạo Mun miền Bắc- Việt Nam 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Phương pháp nghiên cứu chung Áp dụng phương pháp điều tra khảo sát kết hợp với bố trí thí nghiệm phân tích phòng đế xây dựng sở khoa học cho việc đề xuất kỹ thuật tạo Mun 2.3.2 Các phương pháp nghiên cứu cụ thể 2.3.2.1 Phương pháp nghiên cứu hình thái phân bố - Nghiên cứu hình thái Quan sát, mô tả đặc điếm thân cây, vỏ cây, lá, hoa tiêu chuẩn rừng tự nhiên KBTTN Ngọc SơnNgổ Luông- Hòa Bình, KBTTN Na Hang- Tuyên Quang, VQG Cúc Phương- Ninh Bình theo phương pháp hình thái so sánh thường dùng nghiên cứu phân loại thực vật - Nghiên cứu phân bố thông qua cán lâm Tiếp cận nắm bắt thông tin ban đầu nghiệp địa điếm nghiên cứu người dân địa phương, thu thập số liệu vị trí địa lý, điều kiện khí hậu, kế thừa tài liệu có Mun kết hợp với điều tra thực địa đế từ xác định số địa điếm có Mun, mô tả đặc điếm đất có Mun phân bố khuvực nghiên cứu Điều tra đất phẫu diện ô tiêu chuẩn (OTC) điều tra 23.2.2 Nghiên cứu đặc điểm lâm học - Điều tra tầng gỗ lớn Tại trạng thái rừng tự nhiên VQG Cúc Phương lập OTC, KBTTN Ngọc Sơn- Ngổ Luông- Hòa Bình lập OTC, KBTTN Na Hang- Tuyên Quang lập OTC nơi có Mun phân bố nhiều chủ yếu, OTC sơ cấp có diện tích 1000m2 (20x50m) Trong OTC thu thập tiêu tất có đường kính ngang ngực từ 6cm trở lên, bao gồm: tên loài cây, chu vi (C) đế xác định đường kính ngang ngực (D13), chiều cao vút (Hvn), chiều cao cành (Hdc), đường kính tán, phẩm chất - Xác định cấu trúc tổ thành lâm phần Mỗi loài xác định tỷ lệ tổ thành IV%: N (%) + G(%) IV% - Xác định quan hệ Mun với số loài ưu Thông qua tiêu thống kê c (Nguyễn Hải Tuất, 1991) sau: _ (|ad -bc\ - 0,5)2 n ^ (a + b)(c + d )(a + c)(b + a) Nếu zỉ < 3,84 mối quan hệ hai loài ngẫu nhiên Nếu zỉ > 3,84 hai loài có quan hệ với - Điều tra tái sinh Mỗi OTCsơ cấp 1000 m2chia thành 10 OTC thứ cấp nhau, OTC thứ cấp gọi ô dạng có diện tích 100 m2 để điều tra tái sinh Các tiêu điều tra cây1 tái sinh (có đường kính ngang ngực < cm) Từ số liệu tái sinh thu được, tiến hành thống kê số cây/ha theo cấp chiều cao xác định tỷ lệ triển vọng (cây có chiều cao m trở lên) cho loài ưu đối dốc (dưới 250) 3.Ỉ.2.2 Điều kiện sinh thái - khí hậu Qua nghiên cứu, tác giả thấy Mun có khả năngsống nơi có nhiệt độ trung bình năm cao, lượng mưa thấp Nên Việt Nam có nhiều vùng có khả phát triến gây trồng Mun, đặc biệt nơi mà tác giả nghiên cứu bắt gặp Mun - Về đất đai Qua thu thập phân tích mẫu đất khu vực nghiên cứu cho thấy Mun phân bố tự nhiên nhóm đất sau: đất renzin vàng, vàng nâu đất Feralit vàng, vàng xám, xám vàng, tập trung nhiều khu vực núi đá vôi, hàm lượng mùn tương đối khá, đất có pH=4,0- 6,5 Ít gặp Mun khu vực phẳng núi đất 3.1.3 Đặc điểm cấu trúc lâm phần có Mun phân bố 3.Ỉ.3.Ỉ Cấu trúc tổ thành lâm phần có Mun phân bố Qua nghiên cứu cấu trúc tổ thành lâm phần có Mun phân bố cho thấy, Mun loài có số IV% tương đối cao so với loài ưu lại (11,02% VQG Cúc Phương; 18,87% KBTTN Na Hang; 24,09% KBTTN Ngọc Sơn- Ngổ Luông) Điều chứng tỏ Mun có tỷ lệ tổ thành chiếm ưu hẳn so với loài khác lâm phần nghiên cứu Mun trồng hỗn giao với loài ưu như: Chà vải, Trai thảo, Ô rô, Nghiến Ỉ.3.2 Quan hệ Mun với loài ưu lâm phần Kết nghiên cứu mối quan hệ Mun với loài ưu rừng thường xanh địa điếm nghiên cứu cho thấy, Mun loài ưu khác có quan hệ ngẫu nhiên tồn lâm phần rừng tự nhiên Đây sở đế chọn loài trồng rừng hỗn giao với Mun như: Chà vải, Vải vàng, Rì rì, Chành chạ, Trai thảo, Ô rô, Trường sâng, Nghiến, Trâm trắng, Kháo 3.I.3.3 Cấu trúc tầng thứ mặt phang thẳng đứng: Mun1 rừng thường xanh VQG Cúc Phương, KBTTN Ngọc Sơn- Ngổ Luông KBTTN Na Hang nằm tầng khác Cấu trúc rừng rõ tầng mặt phẳng nằm ngang: Kết nghiên cứu cho thấy Mun VQG Cúc Phương có mật độ phân bố Mun cao KBTTN Ngọc Sơn- Ngổ Luông KBTTN Na Hang, khu vực thời điếm nghiên cứu Mun có khả tận dụng khoảng không gian lớn lâm phần 3.1.4 Đặc điểm tái sinh tự nhiên Mun Qua nghiên cứu đặc điếm tái sinh tự nhiên Mun, cho thấy Mun có khả tái sinh hạt tốt đất xấu, đất kèm đá vôi, chặt cứng, đất tốt Mun có khả tái sinh tốt hơn; Tái sinh VQG Cúc Phương cao hẳn KBTTN Ngọc Sơn- Ngổ Luông KBTTN Na Hang tỷ lệ triến vọng khu vực nghiên cứu thấp 3.1.5 Sinh trưởng Mun rừng trồng Bảng 3.8 Sinh trưởng Mun rừng trồng VQG Cúc Phương sau năm theo dõi (Tháng 08 năm 2013- Tháng 08 năm 2014) N Tu Dung T Đường kính Chiều ă ổi lượng ỷ D (cm) Si cao H (m) Si Đất m (n l A mẫu trồng nh nh tr ă ệ q/s trưở trưở m s n ) ố ng Đất 99y ng renzin (trồ 20 0,6 0, , 0,12 13 25 mầu vàng ng phát triển đá Đất renzin 20 2,5 0, , 0,22 35 08 , 43 mầu vàng phát triển đá Đất 1 renzin 19 23 0, 86 1, , 0,26 91 48 mầu xám vàng phát triển Qua nghiên cứu phân tích kết cho thấy, Mun độ tuổi khác có tỷ lệ sống cao khả (câ ) Mun chậm sinh trưởng chiều cao, đường kính 3.1.6 Đặc điểm vật hậu Mun Bảng 3.9 Diễn biến pha vật hậu Mun Thời kỳ vật hậu Diễn biến thời gian Thời kỳ nảy chồi, non từ tháng 12 năm trước đến tháng 02 năm sau Thời kỳ đủ từ tháng - Thời kỳ hoa, nụ từ tháng - Thời kỳ hoa nở rộ từ tháng - Thời kỳ hình thành từ tháng - xanh Thời kỳ già từ tháng - Thời kỳ chín từ tháng - 11 3.1.7 Nghiên cứu cấu tạo hiển vi gỗ Mun Kết phân tích mẫu gỗ Mun khu vực nghiên cứu cho thấy cấu tạo hiến vi mẫu gỗ Mun tương đối giống nhau, có biến động mật độ kích thước mạch tia gỗ Mun không lớn, biến động khoảng nhỏ số lượng mạch (2 mạch/mm2), số lượng tia (3,7 tia/mm2), đường kính mạch (12 mm), độ rộng tia (1,3 m m) biến động lớn độ cao tia, có chênh lệch trung bình tia cao tia thấp 123,5 m m 3.1.8 Mối quan hệ di truyền số quần thể Mun Việt Nam 3.1.8.1 Kết tách chiết làm DNA tổng số từ 21 mẫu Mun Đã tách chiết làm DNA tổng số từ 21 mẫu Mun thu từ quần Kết kiếm tra chất lượng tách chiết DNA tổng số gel agarose 0,8% cho thấy DNA hoàn toàn đảm bảo cho nghiên cứu số OD260/OD280 mẫu nằm khoảng 1,8 đến 2,0 (chỉ số cho biết hàm lượng DNA có độ tinh khiết cao) 3.1.8.2 Kết nhân DNA Kết nhân DNA (PCR) đế giải mã trình tự nucleotide vùng gen lục lạp (rbcL) vùng gen nhân (ITSrDNA) 21 mẫu Mun từ quần cho thấy sản phấm PCR xuất 01 băng có kích thước khoảng 7001bp Kết phù hợp với kích thước lý thuyết dự đoán Do vậy, sản phấm PCR tiếp tục tinh đế giải mã trình tự nucleotide theo chiều (chiều xuôi chiều ngược) 3.1.8.3 Mối quan hệ di truyền số quần thể Mun Việt Nam sở phân tích trình tự nucleotide vùng gen lục lạp Nghiên cứu đặc điếm di truyền quần Mun Việt Nam giải mã 509 nucleotide vùng gen lục lạp (rbcL) cho tổng số 21 cá đại diện cho loài Mun Việt Nam trình tự nucleotide đăng ký Genbank với mã số từ KJ557222 đến KJ557239 KJ650092 đến KJ650094 Các quần có khoảng cách di truyền thấp đồng nghĩa chúng tương đồng mặt di truyền cao >99% Tổng số 21 cá Mun thu từ quần chia làm nhóm chính: nhóm gồm quần miền Nam (Cam Thịnh Đông, Cam Thịnh Tây VQG Núi Chúa) Nhóm gồm quần lại quần Miền Trung (V QG Phong Nha - Kẻ Bàng) tách riêng so với quần phía Bắc (V QG Cúc Phương, KBTTN Na Hang Ngọc Sơn) 3.1.8.4 Mối quan hệ di truyền số quần thể Mun Việt Nam sở phân tích trình tự nucleotide vùng gen nhân (ITS - rDNA ) Nghiên cứu đặc điếm di truyền quần Mun Việt Nam giải mã 543 nucleotide vùng gen ITS-rDNA (ITS1, 5,8S, ITS2) cho tổng số 21 cá đại diện cho quần loài Mun Việt Nam trình tự nucleotide đăng ký Genbank từ KJ650083 đến KJ650091 KJ653246 đến KJ653257 Các quần có khoảng cách di truyền thấp đồng nghĩa chúng tương đồng mặt di truyền cao Tổng số 21 cá Mun thu từ quần Mun chia làm nhóm chính: nhóm gồm quần miền Nam (Cam Thịnh Đông, Cam Thịnh Tây VQG Núi Chúa) Nhóm 2gồm quần lại quần miền Trung (V QG Phong Nha - Kẻ Bàng) tách riêng so với quần phía Bắc (VQG Cúc phương, KBTTN Na Hang Ngọc Sơn) Qua kết nghiên cứu mối quan hệ di truyền số quần Mun Việt Nam sở phân tích trình tự nucleotide vùng gen lục lạp (RBCL) vùng gen nhân (ITS rDNA ) khẳng định được: (1) Mức độ tương đồngvề mặt di truyền cácquần phânbố phía Bắc, phía Nam miền trung la cao; (2) loài chi thị (Diospyros) có nguồn gốc tiến hóa; (3) Các cá thu quần có sai khác trình tự số nucleotide 3.2 Kết nghiên cứu kỹ thuật hạt giống Mun 3.2.1 Một số tiêu gieo ươm hạt Mun Bảng 3.13 Khối lượng độ ẩm ban đầu hạt Mun Dung Chỉ tiêu X Sx V lượng % mẫu 1, 11, Khối lượng hạt (g) 100 16,33 95 92 Độ ẩm hạt sau thu hái 0, 2,8 100 21,55 (%) 60 Kết cho thấy: 1kg hạt có khoảng từ 5394 - 6854 hạt, trung bình có 6124 hạt Độ ẩm tự nhiên hạt chiếm khoảng 21,55±0,60(%) tính theo khối lượng Từ bảng ta thấy khối lượng trung bình 100 hạt (3 lần lặp) 16,33g, nên khối lượng 1000 hạt 163,3g - Độ hạt: 95,02% - Thế nảy mầm Ge (%): Hạt Mun bắt đầu nảy mầm trung bình sau 5,25 ngày gieo ươm đạt tỷ lệ nảy mầm cao vào ngày thứ 12 Sau 19 ngày,số lượng hạt nảy mầm không đáng kế Hạt2 Mun có sức sống trung bình với lực nảy mầm hạt 45% 3.2.2 Nghiên cứu điều kiện xử lý nảy mầm hạt Bảng 3.15 Khả nảy mầm hạt Mun công thức xử lý Ngày bắt Thời gian Tỷ lệ đầu nảy nảy mầm nảy mầm mầm (ngày) (ngày (%) Công thức V thứ) V V X X (%) X ( ( % % CT1 - Không ngâm 10 22 9, 4, hạt ,5 ,1 ,0 8, CT2 - Ngâm hạt 11 20 7, 10 , 5, nước lã ,8 ,3 ,5 7 (nhiệt độ ban đầu 20 C) -' ' Ngâm hạt CT3 6 11 19 3, 7, , 4, nước có ,8 ,7 nhiệt độ ban đầu 40 C -' ' Ngâm hạt CT4 20 19 9, 6, , 1, nước có ,4 ,0 7 nhiệt độ ban đầu 60 C -' ' Ngâm hạt CT5 14 16 4, 4, , 3, nước có ,1 ,7 2 nhiệt độ ban đầu 80 C.bảng ' ' cho thấy biện pháp xử lý hạt tốt Qua ngâm hạt Mun nước có nhiệt độ ban đầu 600C thời gian giờ, để nguội dần, sau vớt ra, rửa sạch, ủ cát ẩm, sau 5,7 ngày hạt bắt đầu nảy mầm, thời gian nảy mầm 19 ngày tỷ lệ nảy mầm đạt 71,7% 3.2.3 Nghiên cứu phương pháp bảo quản hạt Mun Bảng 3.16 Ảnh hưởng phương pháp thời gian bảo quản đến tỷ lệ nảy mầm hạt Mun Tỷ lệ nảy mầm theo công thức Thời gian bảo quản CT1 CT2 CT3 tháng 45,3 63,0 58,8 tháng 39,5 57,8 51,3 tháng 30,8 52,0 41,8 tháng 16,8 41,0 30,5 tháng 9,0 33,0 24,3 tháng 5,3 25,3 18,5 Phân tích kết thí nghiệm tiến hành bảo quản hạt sau tháng cho thấy, công thức bảo quản khác ảnh hưởng rõ rệt đến tỷ lệ nảy mầm hạt Mun (Sig < 0,05) Thông qua tiêu chuẩn Duncan, xác định công thức tốt cho bảo quản hạt Mun sau tháng công thức (hạt đựng túi nilon bảo quản tủ lạnh 5oC) cho tỷ lệ nảy 25,3% 3.3 Kết nghiên cứu kỹ thuật tạo Mun 3.3.1 Ảnh hưởngcủa tỷlệ che sáng đến sinh trưởng Mun giai đoạn vườn ươm 3.3.1.1 Anh hưởng tỷ lệ che sáng đến sinh trưởng Bảng 3.17 Một số tiêu sinh trưởng2của Mun tỷ lệ che sáng khối Tỷ lệ che Tỷ lệ sống H (cm) D0 (mm) Sinh (%) Cây tháng tuổi (g/cây) Không che 70,7 11,2 1,4 1,0 Che 88,7 14,5 1,7 1,4 25% Che 50% 89,3 16,3 2,1 1,8 13,5 Che 75% 80,0 1,6 1,2 F 32,94 2,27 8,67 0,00 0,00 Sig 0,00 Cây tháng tuổi Không che 70,0 20,1 2,6 2,3 Che 25,7 2,8 2,4 86,0 25% Che 50% 86,0 28,8 3,1 2,8 22,3 Che 75% 76,0 2,4 2,2 F 62,33 31,59 13,3 Sig 0,00 0,00 0,00 Cây tháng tuổi Không che 70,0 39,4 4,5 5,3 Che 25% 85,3 46,1 4,9 6,0 Che 50% 84,7 42,0 4,2 4,9 Che 75% 75,3 36,1 4,0 3,6 F 83,28 75,94 6,13 Sig 0,00 0,00 0,018 Qua kết nghiên cứu phân tích trên, cho thấy phạm vi nghiên cứu này, tháng đầu cần che sáng 50%, sau giảm cần che sáng 25% phù hợp với nhu cầu sinh thái giai đoạn vườn ươm Với chế độ che sáng trình bày, sau tháng kế từ cấy mầm vào bầu, đường kính gốc đạt > 0,4cm chiều cao đạt >36cm đủ tiêu chuẩn xuất vườn trồng 3.3.1.2 Anh hưởng tỷ lệ che sáng đến cấu tạo giải phẫu Bảng 3.18 Cấu tạo giải phẫu Mun tỷ lệ che sáng Tỷ lệ che Số Mô lượng Chiều dày ( m m) dậu/mô khí Mô Mô Lá khuy khổng ^ dậu ết Cây tháng (cái/mm tuổi khu 58, 168 Không che 90,3 85,7 0,68 348, ,0 78,3 148 0,61 Che 25% 74,3 029, ,3 74,0 116 0,40 Che 50% 70,0 720, ,0 Che 75% 44,7 56,0 95, 0,36 Cây tháng tuổi 106, 12 154, 314 Không che 0,82 794,3 6,3 0140, ,3 Che 25% 97, 270 0,69 067, 0112, ,0 210 0,60 Che 50% 74,0 054, 3105, ,3 177 0,52 Che 75% 64,7 ,7 Cây tháng tuổi 134, 13 160, 335 Không che 0,81 7119, 0,0 7155, ,3 114 310 0,74 Che 25% 094,0 ,3 0114, ,3 Che 50% 75, 225 0,66 062, 7107, ,0 Che 75% 84,7 200 0,59 Trong giai đoạn từ đến tháng tuổi 0số lượng ,0 khí khổng, chiều dày mô dậu, chiều dày mô khuyết chiều dày Mun tăng theo tuổi cây, giai đoạn tuổi tiêu lại giảm dần theo tăng lên tỷ lệ che sáng Mun số rừng rộng khác, giai đoạn vườn ươm thích nghi với điều kiện che sáng, số lượng khí khổng giảm tỷ lệ che sáng tăng,tỷ lệ mô dậu mô khuyết thấp chiều dày giảm tỷ lệ che sáng tăng 3.3.1.3 Ảnh hưởng tỷ lệ che sáng đến hàm lượng sắc tố Bảng 3.19 Hàm lượng sắc tố 2cây Mun tỷ lệ che sáng Hàm lượng diệp lục (mg/g tươi) Tỷ lệ che a/b Caroten oit (mg/g ) a+ a b b Cây tháng tuổi 1,4 2,8 Không che 1,04 0,36 0,72 01,7 92,3 1,2 0,83 Che 25% 0,53 1,4 0,6 2,1 2,2 0,88 Che 50% 71,3 50,6 22,0 62,2 0,86 Che 75% Cây tháng tuổi8 2,0 2,4 Không che 1,46 0,6 0,86 1,8 2,5 2,4 0,98 Che 25% 0,73 01,8 32,5 72,4 0,7 1,05 Che 50% 2,2 2,3 Che 75% 1,55 0,66 0,95 Cây tháng tuổi Không 2,7 2,4 1,93 0,78 0,98 che 12,9 72,4 Che 1,06 2,05 0,85 25% Che 2,7 2,3 0,98 1,95 0,82 50% Che 2,5 2,3 0,95 1,80 0,76 Ở tất75% tỷ lệ che sáng, hàm lượng6 diệp lục7 Mun tăng theo tuổi Mun chịu bóng giai đoạn vườn ươm, lớn thiên phía ưa sáng Tỷ lệ che sáng thích hợp cho tổng hợp sắc tố Mun giai đoạn tháng tuổi 50%, giai đoạn tháng tuổi 25%, công thức sinh trưởng tốt 3.3.2 Ảnh hưởng hỗn hợp ruột bầu đến sinh trưởng Mun giai đoạn vườn ươm Bảng 3.20 Một số tiêu sinh trưởng Mun _ở công thức hỗn hợp ruột bầu D Sinh khối Tỷ lệ H Công thức thí o sống nghiệm (cm) (m khô Cây tháng tuổi (%) (g/cây) 11, 1, CT1 - 100% đất mặt 86,7 1,0 2 CT2 - 89% đất mặt + 14, 1, 88,0 1,4 10% phân chuồng hoai + 1% supe lân CT3- 87% đất mặt + 16, 2, 88,0 1,7 10% phân chuồng 0 hoai + 3% supe lân CT4- 85% đất mặt + 12, 1, 87,3 1,1 10% phân chuồng hoai + 5% supe lân Cây tháng tuổi 21, 2, CT1 - 100% đất mặt 86,0 2,1 327, 43, CT2 - 89% đất mặt + 87,3 2,8 10% phân chuồng CT3- 87% đất mặt + 30, 3, 87,3 3,1 10% phân chuồng 3 hoai + 3% supe lân CT4- 85% đất mặt + 25, 2, 84,7 2,4 10% phân chuồng Cây tháng tuổi 36, 4, CT1 - 100% đất mặt 86,0 3,9 143, 24, CT2 - 89% đất mặt + 86,7 5,5 8 10% phân chuồng hoai + 1% supe lân CT3- 87% đất mặt + 5, 87,3 46 6,2 10% phân chuồng hoai + 3% supe lân CT4- 85% đất mặt + 41, 4, 84,7 5,1 6 10% phân chuồng Qua phân tích cho thấy hỗn hợp ruột bầu có tác dụng rõ đến khả sinh trường mức độ đồng giai đoạn vườn ươm Trong phạmvi nghiên cứu hỗn hợp ruộtbầu công thức (3% supe lân) tốt hơn, công thức (1% supe lân) công thức (5% supe lân) công thức đối chứng đến sinh trưởng Ảnh hưởng chế độ tưới nước Mun giai đoạn vườn ươm Bảng 3.21 Một số tiêu sinh trưởng Mun _ở công thức tưới nước H D Sinh Tỷ lệ (c (mo Công thức thí nghiệm khối sống m m) khô (%) ) Cây tháng tuổi (g/cây) CT1 - Tưới ngày lần 9, 1, 86,0 1,1 (4,7 /lần)1 ngày lần 21, CT2l/m - Tưới 88,0 9,8 1,2 (6,2l/m /lần)2 ngày lần CT3 - Tưới 8, 1, 83,3 0,9 (7,5 /lần)3 ngày lần 17, 01, CT4 l/m - Tưới 0,8 75,3 (9,6 629 09, F l/m /lần) 13,9 20,00 ,9 0, 0, Sig 00 Cây tháng tuổi CT1 - Tưới ngày lần 17 2, 86,0 1,9 (4,7 /lần)1 ngày lần ,8 12, CT2l/m - Tưới 19 88,0 2,1 (6,2l/m /lần)2 ngày lần ,5 CT3 - Tưới 15 1, 82,0 1,6 (7,5 /lần)3 ngày lần ,8 91, CT4 l/m - Tưới 15 1,5 74,0 (9,6 ,2 89, 28,7 15 F l/m /lần) 50,00 3,9 0, 0, Sig 00 Qua kết phân tích cho thấy, tưới nước theo CT20(tưới nước đạt đến độ ẩm bão hòa ngày lần, lượng nước tưới 6,2 lít/m2) cho tỷ lệ sống Mun cao sinh trường tốt 3.3.4 Ảnh hưởng tuổi xuất vườn khác đến sinh trưởng Mun rừng trồng Bảng 3.22 Sinh trưởng Mun sau năm trồng Cây xuất vườn Cây năm tuổi rừng trồng T Tuổi Sinh Sin H ỷ xuất H trưởn h D D lệ ( ( vườn 0 g trư số (cm) (cm) m m chiều ởng ng ) ) ( cao đườ % 0, 0,2 0, 0,1 84 (m) ng tháng 0,1 0,079 10, 23 37 80,2 ,7 tháng 44 0,2 0,3 0,103 0, 90 54 58 54 ,0 0,4 0, 0, 0,1 0, 0,2 96 tháng 02 25 68 ,0 Qua kết phân tích cho thấy, sau năm trồng, sinh trưởng chiều cao đường kính Mun tuổi 3.3.3 khác (sig < xuất vườn tháng, tháng, tháng 0,05), kiểm tra tiêu chuẩn Duncan cho thấy xuất vườn tháng tuổi cho sinh trưởng chiều cao đường kính cao Vì vậy, Mun tháng tuổi xuất vườn tốt lựa chọn 3.4 Bước đầu đề xuất biện pháp kỹ thuật tạo Mun miền Bắc- Việt Nam 3.4.1 Chuẩn bị hạt giống (1) Thu hái Mun vỏ chuyển từ màu xanh sang màu xám, xám đen màu đen, thu hái từ tháng đến hết tháng 11; (2) Bảo quản hạt giống 180 ngày cách để hạt túi nilon đen đặt tủ lạnh 50C cho tỷ lệ nảy mầm 25,3% 3.4.2 Gieo ươm (1) Với loài Mun ta chọn giá thể cát Gieo ươm Mun từ tháng 12 đến tháng tùy thuộc vào thời vụ trồng rừng Vật liệu che gồm lưới che nắng màu đen dùng phên đan mắt cáo để hạn chế ánh nắng trực xạ làm nóng hạt nước; (2) Trước gieo nên tách hạt khỏi xử lý nảy mầm trước gieo cách ngâm hạt nước có nhiệt độ ban đầu 600C giờ; (3) Bầu nuôi sử dụng túi bầu polietylen có kích thước 10 x 15cm, thành phần hỗn hợp ruột bầu gồm 87% đất mặt vườn + 10% phân chuồng hoai + 3% supe lân; (4) Từ cấy vào bầu đến tháng tuổi đặt giàn che có tỷ lệ che sáng 50%, sau tháo bớt giàn che 25%; (5) Trong tháng ngày tưới lần vào - sáng, tưới nước đạt đến độ ẩm bão hòa, lượng nước tưới 6,2 lít/m2; (6) Cây tháng tuổi, khỏe mạnh, không bị sâu bệnh, không cụt ngọn, chiều cao tối thiếu 36 cm, đường kính cổ rễ - mm thích hợp đế trồng rừng KẾT LUẬN VÀ KIẾN2NGHỊ Kết luận đặc điểm sinh học Mun (1) Cây Mun mà tác giả điều tra địa điếm bắt gặp có phân bố tự nhiên rộng không liên tục theo vĩ độ từ Bắc vào Nam theo độ cao so với mặt biến 700 m, độ dốc phổ biến 180 Mun thường gặp đất Renzin vàng vàng nâu phát triến đá vôi, Feralit vàng phát triến đá vôi; (2) Mun phân bố phổ biến rừng thường xanh với loài ưu Chà vải, Chành chạ, Trai thảo, Ô rô, Trường sâng, Trâm trắng, Nghiến, Kháo Mun có quan hệ ngẫu nhiên với loài ưu sinh thái nói trên; (3) Mun tái sinh tự nhiên chồi hạt, mật độ tái sinh tán rừng tự nhiên không lớn Mun tái sinh mạnh nơi đất tơi xốp; (4) Mun có xanh quanh năm, thời kỳ nảy chồi, non từ tháng 12 năm trước đến tháng năm sau, hoa bắt đầu xuất đến nụ có hoa nở rộ từ tháng đến hết tháng 6, thời kỳ quả, xanh từ cuối tháng đến cuối tháng 8, thời kỳ chín tháng từ - 11; (5) Cấu tạo hiến vi mẫu gỗ Mun khu vực nghiên cứu cho thấy cấu tạo hiến vi mẫu gỗ Mun tương đối giống nhau, biến động mật độ kích thước mạch tia gỗ Mun không lớn; (6) Nghiên cứu mối quan hệ di truyền số quần Mun sở phân tích trình tự nucleotide vùng gen lục lạp (RBCL) vùng gen nhân (ITS - rDNA ) cho thấy mối quan hệ di truyền quần Mun miền Bắc giống khẳng định quần Mun Việt Nam có nguồn gốc tiến hóa từ chi thị (Diospyros) Về kỹ thuật hạt giống Thu hái Mun vỏ có màu xám, xám đen hay đen, khối lượng 1000 3698,1g khối lượng 1000 hạt 95,02%, hàm lượng 163,3g, độ trung bình hạt nước trung bình hạt 21,55 ± 0,60(%), nảy mầm 45%, tỷ lệ nảy mầm sau thu hái 48 - 71,7% Trong điều kiện sản xuất bảo quản hạt giống 180 ngày cách đế hạt túi nilon đen đặt tủ lạnh 50C cho tỷ lệ nảy mầm đạt 25,3% Hạt Mun tách khỏi vỏ xử lý cách ngâm nước có nhiệt độ ban đầu 600C đế nguội dần, sau vớt ủ cát, hàng ngày kiếm tra hạt nảy mầm, cho tỷ lệ nảy mầm 71,7% kỹ thuật tạo (1) Ở giai đoạn vườn ươm Mun chịu bóng, tỷ lệ che sáng thích hợp cho tháng tuổi 50%, tháng tuổi 25% Hỗn hợp ruột bầu thích hợp cho gieo ươm Mun 87% đất mặt vườn + 10% phân chuồng hoai + 3% supe lân Cây giai đoạn vườn ươm tưới nước ngày lần với lượng nước tưới 6,2 lít/m2 (bầu có kích thước 10 x 15cm) cho Mun thích hợp; (2) Kết nghiên cứu đề tài bước đầu cho thấy Mun loài địa sinh trưởng chậm, có khả tạo hạt, Mun thích hợp cho trồng rừng tháng tuổi, khỏe mạnh, không bị sâu bệnh, không cụt ngọn, chiều cao tối thiếu 36 cm, đường kính cổ rễ - 5mm Tồn tại: Mới đánh giá trồng rừng dừng lại 12 tháng, ngắn so với đời sống rừng Chưa xác định xác chu kỳ sai Mun Chưa xác định hàm lượng nước tiêu chuẩn hạt Kiến nghị: Cần có nghiên cứu sâu sinh lý hạt giống loài Mun Cần tiếp tục theo dõi sinh trưởng rừng trồng Mun thực nghiệm lâu hơn, xác định xác chu kỳ sai Mun, xác định hàm lượng nước tiêu chuẩn hạt [...]... 2.3.2.3 Nghiên cứu về cấu tạo hiển vi c a gỗ Mun Mẫu gỗ: Lấy theo phương pháp khoan tăng trưởng và các mảnh gỗ ở rừng tự nhiên c a các khu vực nghiên cứu Sau đó được chuyển về phòng thí nghiệm khoa học gỗ- Bộ môn Khoa học gỗ c a Viện Nghiên cứu Công nghiệp rừng thuộc Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam để giám định và phân tích 2.3.2.4 Nghiên cứu mối quan hệ di truyền một số quần thể Mun ở Việt Nam Thu thập... phần 3.1.4 Đặc điểm tái sinh tự nhiên c a Mun Qua nghiên cứu đặc điếm tái sinh tự nhiên c a Mun, cho thấy Mun có khả năng tái sinh hạt tốt trên đất xấu, trên đất kèm đá vôi, chặt cứng, ở đất tốt Mun có khả năng tái sinh tốt hơn; Tái sinh ở VQG Cúc Phương luôn cao hơn hẳn ở KBTTN Ngọc Sơn- Ngổ Luông và KBTTN Na Hang và tỷ lệ cây triến vọng ở các khu vực nghiên cứu thấp 3.1.5 Sinh trưởng c a Mun ở rừng trồng... Tổng số 21 cá thế Mun thu từ 7 quần thế Mun được chia làm 2 nhóm chính: nhóm 1 gồm 3 quần thế ở miền Nam (Cam Thịnh Đông, Cam Thịnh Tây và VQG Núi Ch a) Nhóm 2 2gồm 4 quần thế còn lại trong đó quần thế ở miền Trung (V QG Phong Nha - Kẻ Bàng) được tách riêng so với 3 quần thế ph a Bắc (VQG Cúc phương, KBTTN Na Hang và Ngọc Sơn) Qua kết quả nghiên cứu mối quan hệ di truyền một số quần thế Mun ở Việt Nam. .. 0,76 Ở tất75% cả các tỷ lệ che sáng, hàm lượng6 diệp lục7 c a lá Mun đều tăng theo tuổi cây Mun là cây chịu bóng ở giai đoạn vườn ươm, cây càng lớn càng thiên về ph a a sáng Tỷ lệ che sáng thích hợp hơn cả cho tổng hợp sắc tố lá cây Mun ở giai đoạn 3 và 6 tháng tuổi là 50%, giai đoạn 9 tháng tuổi là 25%, ở những công thức này cây sinh trưởng tốt 3.3.2 Ảnh hưởng c a hỗn hợp ruột bầu đến sinh trưởng cây. .. lít/m2) cho tỷ lệ sống c a cây Mun cao hơn và sinh trường cũng tốt hơn 3.3.4 Ảnh hưởng c a tuổi cây con xuất vườn khác nhau đến sinh trưởng Mun ở rừng trồng Bảng 3.22 Sinh trưởng c a Mun sau 1 năm trồng Cây xuất vườn Cây 1 năm tuổi ở rừng trồng T Tuổi cây Sinh Sin H ỷ con xuất H trưởn h D D lệ ( ( vườn 0 0 g trư số (cm) (cm) m m chiều ởng ng ) ) ( cao đườ % 0, 0,2 0, 0,1 84 (m) ng 3 tháng 0,1 0,079 10,... đến tháng 2 năm sau, hoa bắt đầu xuất hiện rồi đến nụ và có hoa nở rộ từ tháng 4 đến hết tháng 6, thời kỳ ra quả, quả xanh từ cuối tháng 5 đến cuối tháng 8, thời kỳ quả chín tháng từ 9 - 11; (5) Cấu tạo hiến vi 7 mẫu gỗ Mun ở 3 khu vực nghiên cứu cho thấy cấu tạo hiến vi các mẫu gỗ Mun tương đối giống nhau, sự biến động về mật độ và kích thước c a mạch và tia gỗ Mun không lớn; (6) Nghiên cứu mối quan... ra hoa, nụ từ tháng 4 - 5 Thời kỳ ra hoa nở rộ từ tháng 5 - 6 Thời kỳ hình thành quả và quả từ tháng 5 - 8 xanh Thời kỳ quả già từ tháng 7 - 9 Thời kỳ quả chín từ tháng 9 - 11 3.1.7 Nghiên cứu cấu tạo hiển vi c a gỗ Mun Kết quả phân tích 7 mẫu gỗ Mun ở 3 khu vực nghiên cứu cho thấy cấu tạo hiến vi các mẫu gỗ Mun tương đối giống nhau, trong đó có sự biến động về mật độ và kích thước c a mạch và tia... quản, xử lý nảy mầm hạt giống và các thí nghiệm về tạo cây con trong vườn ươm Chương 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Một số đặc điểm sinh học c a cây Mun 3.1.1 Đặc điểm hình thái c a Mun Hình thái thân, cành: Mun là cây gỗ trung bình, chiều cao đến 18 m, đường kính thân cây có thế đạt 40 cm hoặc hơn Mun có thân tương đối thẳng, thân hình tròn đều, ít có bạnh vè hay u bướu, tán cây hình ô, phân cành... Kết quả nghiên cứu về kỹ thuật tạo cây con Mun 3.3.1 Ảnh hưởngc a tỷlệ che sáng đến sinh trưởng c a cây Mun giai đoạn vườn ươm 3.3.1.1 Anh hưởng c a tỷ lệ che sáng đến sinh trưởng c a cây Bảng 3.17 Một số chỉ tiêu sinh trưởng2c a Mun ở các tỷ lệ che sáng khối Tỷ lệ che Tỷ lệ sống H (cm) D0 (mm) Sinh cây (%) Cây 3 tháng tuổi (g /cây) Không che 70,7 11,2 1,4 1,0 Che 88,7 14,5 1,7 1,4 25% Che 50% 89,3 16,3... tia gỗ Mun không lớn, biến động trong khoảng nhỏ như số lượng mạch (2 mạch/mm2), số lượng tia (3,7 tia/mm2), đường kính mạch (12 mm), độ rộng c a tia (1,3 m m) và biến động lớn hơn là độ cao c a tia, có chênh lệch trung bình gi a tia cao nhất và tia thấp nhất là 123,5 m m 3.1.8 Mối quan hệ di truyền một số quần thể Mun ở Việt Nam 3.1.8.1 Kết quả tách chiết và làm sạch DNA tổng số từ 21 mẫu Mun Đã tách