BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA NÔNG HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KH O S T NH HƢ NG C A MỘT SỐ CHẤT ĐIỀU HÕA SINH TRƢ NG THỰC VẬT VÀ MỘT SỐ CHẤT HỮU CƠ TRONG NUÔI CẤY IN VITRO S M NG C LINH (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) S v t ự : TH N TH MINH PHƢƠNG Ngành: NÔNG H C Niên Khóa: 2007 – 2011 TP Hồ C í M , t g 08/2011 KH O S T NH HƢ NG C A MỘT SỐ CHẤT ĐIỀU HÕA SINH TRƢ NG THỰC VẬT VÀ MỘT SỐ CHẤT HỮU CƠ TRONG NUÔI CẤY IN VITRO S M NG C LINH (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) Tác giả T â T ịM K c P ƣơ g ứ g g N c cấ g ọc GIÁO VI N HƯỚNG D N: TS P T ịM Tâ T S H T ị L TP Hồ C í M , t g 08/2011 i gK L I C M ƠN C i c A c ịe cù g ọi iề C â ấ c ại â â c c giú N ọc g ọc ỗ v v T Hồ C iề Mi i ic B c ủ i i gq ọc ả ữ g iế vi củ T ức q ý g c ịT ả c ị V (các giú v iề i g â ấ c i C g Ng g Si q ề i T N g ọc 33 v v ực i ề i T –T P g ời gi g â ực i C â â Học T HCM) g g Si gi giú v ộ g vi c g g K i g T ời gi giú ề i Em i gởi ời i â C i Q â ực i i ộ g vi g Lâ g ọc Học T HCM) A ic g q ọc g củ g gi g ại ọc N q Q ý A giá : i g ọc i ữ g g ời i  Ban Giá N g c ế c P T ị Mi Tâ g v T S H T ị L v giú (T g e T HCM g 08 ă 2011 THÂN THỊ MINH PHƯƠNG ii TÓM TẮT T â T ị Mi P g Đại ọc N g Lâ Hồ C Mi g 08 ă 2011 Đề i “K ả sát ả số ƣở g ủ ất ữu tr g uô ột số ất đ ều ò s in vitro sâ Ngọ L trƣở g t ự vật v ột (Panax vietnamensis Ha et Grus v.)” Giá vi g : TS P T ị Mi Tâ T S H T ị L Đề i C g g c Si ục i ực i ọc Hồ C g ộ v i g Ngọc Li Ng i g ả â gồ c e ớc g i g :T ă g ổ 1: Ng i ả g â Ngọc Li T Ngọc Li T ự ă g g c ồi â g g i c ổ g i 2: gv 3: Ng i ự i c ồi g củ Ngọc Li g g c ồi â g i ả ữ c Các g i i : g MS c i cấ ực v với g ộ NAA i â g â g 6/2011.Với g c ồi v 4: Ng i 1: Đ i với c TDZ M i i với g ộ NAA ế g c ò i i g ế i Kế q ả T g i ộc T g 2/2011 ế ừc ự ă g ọc T ực v iề g ộ BA ế T khoai tây g g i g ộ BA ế Ngọc Li Si ả ă g ế g củ Mi i gồ g củ i cấ g g củ c ấ ă g in vitro Đề ả i c củ 4-D v TDZ ế â ại P ò g C g â ổ Ngọc Li g1 4-D c ác ụ g g 2,4-D/l MS mô cc g 15 33 i g MS c v ấ , sau 30 ọ g g i 441 67 mg T g i ấ c 2: T ự ă g g g i â i 22,00 mm ă g 75 833,33 mg ă g 17 60 g Ngọc Li ổ in vitro Sau 60 ngày nu i cấ 60 g i cấ iii g mg BA/l 0,5 mg NAA/l i cấ v ọ g g g i T g i 3: T thêm mg BA/l v vitro S i s ế c ỉ i g c NAA 60 g i cấ c ồi i e ấ c õi ự i c c iề c 25 33 i g MS c c ồi â v ổ g Ngọc Li in ọ g g 331,67 mg T ế g ự ă g 30 g g i 4: T g c ồi â i cấ ữ c Ngọc Li c ồi ọ g ớc v Ở g ộ 10 g i cấ iv i â c ả ớc / MS i 225,00 mg ă g 81 g ấ 30 g M CL C Nội T g trang g ự i Lời ii T iii Mục ục v D ác c ữ viế viii Danh ác ả g ix D ác C ƣơ g M 1.1 Đ vấ 1.2 Mục viii ĐẦU ề c 1.2.1 Mục 1.2.2 Y ả c c c 1.3 Giới ề i C ƣơ g TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới i ổ gq 2.1.1 P â câ â Ngọc Li (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) ại â 2.1.2 Ng g c â 2.1.3 Đ c i â â Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) Ngọc Li 2.1.4 Đ c i i â â 2.1.5 Giá ị c i v giá ị i (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) Ngọc Li ế củ (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) â Ngọc Li (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 2.2 T 2.3 Mộ g â g i Ngọc Li ại Vi N i cấ in vitro â Ngọc Li (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 10 v c 2.3.1 S g 2.3.2 Các g i i cấ in vitro 10 i cấ in vitro â Ngọc Li 13 C ƣơ g VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PH P NGHIÊN CỨU 3.1 Nội g g i 3.2 T ời gi v 3.3 V g i i 3.4 Các 16 ị i g i 16 16 g i iế 18 3.4.1 Thí nghi m 1: Khảo sát ả ởng 2,4-D v TDZ ến tạo mô s o từ cu ng sâm Ngọc Linh in vitro 18 3.4.2 T g i NAA ế ự ă g 3.4.3 T g i NAA ế ự i 3.4.4 T g i ă g 2: K ả ả g 3: K ả Ngọc Li ả c ồi â 4: K ả g c ồi â i â g củ g củ Ngọc Li ả Ngọc Li g ộ BA ế với g ộ in vitro 19 g ộ BA ế với g ộ in vitro 21 g củ g ộ i â ớc ế ự in vitro 23 C ƣơ g KẾT QU VÀ TH O LUẬN 4.1 Thí nghi m 1: Ả ởng 2,4-D v TDZ ến tạo mô s o cu ng sâm Ngọc Linh in vitro 25 4.1.1 Ả ởng 2,4-D TDZ ến cảm ứng tạo mô s o từ cu ng sâm Ngọc Linh 25 4.1.2 Ả ởng 2,4-D v TDZ ến trọ g gv ờng kính mô s o sâm Ngọc Linh 26 4.2 Thí nghi ế ự ă g 4.2.1 Ả 2: K ả g ả i â g củ Ngọc Li g ộ BA ế với g ộ NAA in vitro 28 ởng nồ g ộ BA kết h p với nồ g ộ NAA ến ă g ờng kính phôi sâm Ngọc Linh 28 vi 4.2.2 Ả ởng nồ g ộ BA kết h p với nồ g ộ NAA ến trọ g g i phôi sâm Ngọc Linh 29 4.3 Thí nghi ế ự i 4.3.1 Ả 3: K ả c ồi â ả g củ Ngọc Li g ộ BA ế với g ộ NAA in vitro 31 ởng nồ g ộ BA kết h p với NAA ến tái sinh chồi sâm Ngọc Linh in vitro q 4.3.2 Ả gi i ạn 31 ởng nồ g ộ BA kết h p với nồ g ộ NAA ến s lá/chồi tái sinh sâm Ngọc Linh in vitro 34 4.3.3 Ả ởng nồ g ộ BA kết h p với nồ g ộ NAA ến chiều cao chồi tái sinh trọ g 4.4 T g i g c ồi â 4.4.1 Ả trọ g g 4: K ả Ngọc Li i c ồi tái sinh sâm Ngọc Linh in vitro 36 ả g củ g ộ i â ớc ế ự ă g in vitro 39 ởng nồ g ộ i â ớc dừ ến ă g c iều cao chồi ng chồi sâm Ngọc Linh 39 C ƣơ g KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGH 5.1 Kết lu n 42 5.2 Đề nghị 42 TÀI LIỆU THAM KH O 43 PH L C 1: GI TR CHUYỂN ĐỔI SỐ LIỆU 46 PH L C 2: KẾT QU XỬ LÝ THỐNG KÊ 49 vii DANH S CH C C CHỮ VIẾT TẮT V ết tắt V ết đầy đủ 2,4-D : 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid BA : – Benzyladenine CV : Coefficient of Variation (H CW : Coconut Water EDTA : Ethylene Diamino Tetra Acetic Acid IAA : Indole-3-Acetic Acid MS : NAA : α – napthylacetic acid NSC : Ng cấ NT : Ng i ức PO : Potato TB : Trung bình TDZ : N-phenyl1-1,2,3-thiadiazol-5ylurea UV : Ultra-Violet i gM ige v S viii iế ộ g) g (1962) DANH S CH C C B NG Nộ du g trang Bả g 3.1 M i Bả g 4.1 Tỷ gc Bả g 4.2 Đ g v Bả g 4.3 Đ g Bả g 4.4 T ọ g g Bả g 4.5 Tỷ i Bả g 4.6 S ả MS (M g ige v S â Ngọc Li ọ g g q Ngọc Li i g c ồi â /c ồi i Bả g 4.7 C iề c c ồi i Bả g 4.8 T ọ g g Bả g 4.9 C iề c c ồi v ọ g 25 Ngọc Li 60 g â Ngọc Li â â 60 g in vitro q Ngọc Li â q Ngọc Li Ngọc Li g c ồi â ix 30 g i cấ 26 i cấ 28 Ngọc Li c ồi i i c ồi i gi i â i â g, 1962) 17 Ngọc Li i cấ 30 gi i gi i i cấ 32 i cấ 35 60 g i cấ 37 60 g 30 g i cấ 38 i cấ 39 B B B B B A A A C C C 0.81650 BA2NAA1 0.81423 BA2NAA3 0.80960 BA1NAA3 0.70710 BA2NAA2 0.70710 BA1 TỶ LỆ TÁI SINH CHỒI SÂM NGỌC LINH 30 NSC Class Levels Values BA 2 NAA 0.1 0.5 DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.09628018 0.01375431 67.83 F BA NAA BA*NAA 3 0.00370265 0.04114713 0.05143040 0.00370265 0.01371571 0.01714347 18.26 67.64 84.54 0.0006 [...]... senticosus ọ A i ce e): cò gọi sâm Siberi, sâm Liên Xô V tN * :c iề c i c â c ụ g â ời ở Vi N : B c â ấ ởQ ả gB (Hibiscus sagittifolius v q i q e ừ Lạ g S Hò B ại củ Vi N (Eleutherine subaphylla ọ I i ce e): Ngọc Li ực (Panax vietnamensis ọ A - T ớc â ại ới á ừ g ọc gở i T K ộ g ớ ộc ái i ái q i ce e): v Q ả gN ọc ở ộc g ở các 1.500 m - 2.100 ố sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) ự ộc á i i ộ... ại c ỉ c D vù g ấ ở g câ ộ 40 Mộ câ Ngọc Li i i chúng ả ở g ực i ề i“ trƣở g t ự vật v L ột số ất (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 1.2 M đí 1.2.1 M , y u ầu đí -T â c ồ g ộ Ngọc Li -T i â c ồ g ộ củ BA ế -T với NAA ự ạ ừc g á c ế ự ă g ở g in vitro c ồ g ộ củ BA ế với NAA c ế ự ạ c ồi â in vitro -T c ồi â củ 2 4-D v TDZ ế in vitro Ngọc Li Ngọc Li c c ồ g ộ củ Ngọc Li i â ớc ừ c ế ự ă g in vitro... Bộ ấ v ới ấ củ â Ngọc Li (á q ảv â ở, 2010) (Bác 2.1.4 Đ để Câ i c s t á â â c á Ngọc Li Ngọc Li ộ ấ â sâ gọ i ới á c ở ộc ừ 1.200 v Q ả gN ở c T úi c 2.578 m Sâm ọc c ủ ế ág 50 c i với c ờ g ộ á ừ g (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) ởK ấ v g Ngọc Li Ngọ L N i ộ Sâ ới ọc c á g ế 1/3 á g ới á ộ ới c ỉ á ới c â úi ừ g gi ù c c i á g g Sâ ờ g ả g 20 - 250C g ) ọc 15 - 180C (H T ị Dụ g và Grushvitzky... c ồi củ õi các c ỉ i ở g 2 g á â i â â Ngọc Li Ngọc Li Ngọc Li ở g củ -T e õi các c ỉ i 1.3 G v ở g c ồi â Ngọc Li đề t Đề gian c về ự ă g ạ ự ă g i c ực i c ỉc ở g củ c ồi c trong 4 tháng ừ g i á g 2/2011 ế ạ ực i 3 ă g g i ạ á g 6/2011 V ở g phôi, ái i v ạ câ ời c ồi c ỉ C g 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 G t u tổ g u về ây sâ Ngọ L (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 2.1.1 P â sâ Hi ế giới v ở Vi... câ C c g ế c ạ 20 c gồ g ác iề củ i ục ại vù g ồ g â q ả Tổ g cộ g i c g i â v củ ớc, Ngọc Li ồ g â ại K T Ngọc Li ồ g â ạ ộc i (T ả M , 2010) 2.3 Một số g ứu về uô ấy in vitro sâ Ngọ L (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 2.3.1 Sơ ƣ về ƣơ g 2.3.1.1 Cơ sở ọ v Cơ sở ọ g ộ g i ạ v ả ả ă g â củ ế t ự t cứ ý ức cụ (T i ạ g á ời g c i ớ c củ c ỉ ề ă g củ ế ừ ế c c i ở các ộ c gọi â sự g i ác ụ g g i ữ g gg... ả c cứ “Ả i e â ạ c ấ ừ – 20 g ọc v i ế ờ gv Ngọc Li i ế i M i â i i ế i g củ g i iv ờ g MS với ỷ c Học vi i g ế ở g i i c ự giú ọc H ự ă g với ồ g ộ g ự c ồ g ộ 30 ạ ờ g ực i i â ề i “B ớc Ngọc Li ả (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) in vitro” Đ cc / 8 g g / 3 ấ 2 á g ự c ọ về â i cấ M i i Nă g 2 4D/ c â Ngọc Li c Đế ă ả g 50.000 cá Nă câ i ổ â 2010 D Ngọc Li ấ c ỷ ạ 2010 ò g c ở gv c g A á cá iề... củ ừ g g i 3.5 Xử (m /c ồi): ức v g i ứ 30 c các v ù g g ề SAS cấ u i g ề E ce v 9.1.3 24 ý g C g4 KẾT QU VÀ TH O LUẬN 4.1 T í g 1: sâ in vitro Ngọ L ƣở g ủ 2,4-D và TDZ đế sự t ô sẹ ủ uố g á ƣởng của 2,4-D v TDZ đến sự cảm ứng t o mô sẹo từ cuống lá sâm 4.1.1 Ngọc Linh Bả g 4.1: Tỷ Mô trƣ ạ â Ngọc Li q các gi i ạ Ng y s u ấy g 7 NSC 14 NSC 21 NSC 28 NSC 1 mg 2,4-D/l MS 0,60a 0,74a 0,80a 0,80a 2 mg... : Ngọc Li ấ với ộ ờ gc v M i g ác ái â củ Các H Mỗi á c 60 - 100 v g gc ả g 0,5 - 0,7 cm giữ ớ i 10 - 20 c T i ce e ờ g g ồ v ă gc - H : Câ 4 - 5 ă ớc ớc ọA ại Sâ ọc vò g với 3 - 5 ục g 40 - 100 c T c á i ởc P c i g ă ả gc iề c â vị c ọc ò g g ộ ấ ộc K củ i i e e i 1-2c - Lá: Lá â c g ă ụ g ỉ ả g1-3c ứ g với P iế i g ă ới ớc Lộc g g â ục úi Ngọc Li ực ị ại â â ả ứ g K (Panax vietnamensis Ha et Grushv.). .. v.) v ạ cứ â gi g câ g i cấ i c ù â gc g ạ ế c g Tấ N ự v cộ g ự â i i ” ề ờ g 2006 D i 18 Ngọ L ực i (Panax vietnamensis H e G g; g Bú 2011) mg; photpho 57 mg; kali 421 mg; natri 6 mg (T 2.3.2 Cá i 12 củ ác ị â ực i ề i “B ớc g i Ngọc Li (Panax vietnamensis – ng ồ v i i i củ ờ g 13 c ự á i ừ â Ngọc Li g V i i ờ g MS c ờ g i v i i e c c ổ ự c g 3 mg NAA/l 30 g/ â i i c â i i T gT v cộ g ự i cấ ế ở... v â â ới ấ củ Ngọc Li â in vitro s ở g củ 2 4-D v TDZ ế Ngọc Li ụ g (á q ảv g ự ạ g i ừc â ) 7 16 g á â Ngọc Li i cấ 28 Hình 4.2 Ả i â trang ở g củ Ngọc Li 4.3 Ả in vitro ở g củ Linh in vitro 60 g H ở g củ 4.4 Ả ồ g ộ BA ế p với ồ g ộ NAA ế 60 g ự ă g ở g i cấ 30 ồ g ộ BA ế với NAA ế ự ái i c ồi â Ngọc i cấ 38 ớc ừ v i â ế ự ă g ở g c ồi â Ngọc Linh in vitro