ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÃ THỊ THU HẰNG NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG IN VITRO VÀ TRỒNG CÂY HOA CHUÔNG (SINNINGIA SPECIOSA) TẠI TỈNH THỪA THIÊN HUẾ LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP HUẾ, 2015 ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÃ THỊ THU HẰNG NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG IN VITRO VÀ TRỒNG CÂY HOA CHUÔNG (SINNINGIA SPECIOSA) TẠI TỈNH THỪA THIÊN HUẾ Chuyên ngành: Khoa học trồng Mã số: 62 62 01 10 LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Lê Thị Khánh PGS.TS Trần Thị Thu Hà HUẾ, 2015 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu thực Các số liệu kết nghiên cứu luận án trung thực chưa công bố công trình khác Tất nguồn thông tin trích dẫn luận án liệt kê tài liệu tham khảo Nếu có sai sót xin chịu hoàn toàn trách nhiệm./ Tác giả luận án Lã Thị Thu Hằng ii LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn Chính phủ Việt Nam hỗ trợ kinh phí học tập nghiên cứu thông qua đề án 911 Tôi xin cảm ơn giúp đỡ tạo điều kiện lãnh đạo Đại học Huế, Lãnh đạo Trường Đại học Nông Lâm - Đại học Huế Để hoàn thành luận án này, nỗ lực thân, xin chân thành cảm ơn hướng dẫn, giúp đỡ tận tình mặt khoa học PGS.TS Lê Thị Khánh PGS.TS Trần Thị Thu Hà Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu quý Thầy, Cô giáo khoa Nông học, Đại học Nông Lâm, Đại học Huế cho góp ý quý báu giúp đỡ hoàn thành luận án Tôi xin gửi lời cảm ơn đến hộ nông dân vùng trồng hoa truyền thống tỉnh Thừa Thiên Huế: xã Phú Dương, huyện Phú Vang; phường Thủy Dương, thị xã Hương Thủy; xã Quảng An, huyện Quảng Điền giúp xây dựng mô hình thực nghiệm đề tài Luận án dành tặng Bố Mẹ - người sinh thành, chịu nhiều vất vả để nuôi dưỡng nên người Cảm ơn động viên chồng - người truyền nhiệt huyết để hoàn thành luận án Cuối cùng, xin gửi lời cảm sâu sắc đến tất người giúp việc hoàn thành luận án mà không kể tên hết Xin trân trọng cảm ơn./ Lã Thị Thu Hằng iii MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH xi MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài 2.1 Mục tiêu tổng quát 2.2 Mục tiêu cụ thể 3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 4 Phạm vi nghiên cứu đề tài Những đóng góp luận án Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung hoa chuông 1.1.1 Nguồn gốc phân loại 1.1.2 Đặc điểm thực vật học 1.1.3 Yêu cầu ngoại cảnh hoa chuông 10 1.1.4 Tình hình sản xuất, tiêu thụ hoa chuông giới Việt Nam 11 1.2 Kỹ thuật nhân giống hoa chuông yếu tố ảnh hưởng 14 1.2.1 Nhân giống hữu tính 14 1.2.2 Nhân giống vô tính 15 iv 1.2.3 Nhân giống vô tính in vitro hoa chuông 16 1.2.4 Đặc điểm thời tiết khí hậu Thừa Thiên Huế miền Trung Việt Nam 24 1.3 Kỹ thuật ươm, trồng hoa chuông yếu tố ảnh hưởng 25 1.3.1 Thời vụ 25 1.3.2 Giá thể trồng 26 1.3.3 Phân bón 28 1.3.4 Bấm 32 1.4 Những kết nghiên cứu hoa chuông 34 1.4.1 Nhân giống in vitro 34 1.4.2 Những nghiên cứu kỹ thuật vườn ươm vườn sản xuất 38 1.4.3 Các nghiên cứu khác hoa chuông 40 Chương ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 44 2.1 Đối tượng nghiên cứu 44 2.1.1 Giống 44 2.1.2 Giá thể 45 2.1.3 Phân bón 45 2.1.4 Chất kích thích sinh trưởng 45 2.2 Nội dung nghiên cứu 46 2.3 Phương pháp nghiên cứu 47 2.3.1 Nội dung 47 2.3.2 Nội dung 51 2.3.3 Nội dung 54 2.3.4 Nội dung 56 2.4 Các tiêu theo dõi phương pháp xác định 58 2.4.1 Các tiêu nuôi cấy in vitro 58 2.4.2 Các tiêu sinh trưởng phát triển 59 v 2.4.3 Các tiêu hoa, suất chất lượng hoa 60 2.4.4 Các tiêu đặc điểm sinh học 61 2.4.5 Phương pháp đánh giá chất lượng chồi in vitro giống in vitro 61 2.4.6 Các tiêu theo dõi sâu bệnh hại 61 2.4.7 Đánh giá hiệu kinh tế 62 2.5 Phương pháp xử lý số liệu 62 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 63 3.1 Kết nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật nhân giống in vitro hoa chuông 63 3.1.1 Giai đoạn tạo nguồn vật liệu khởi đầu 63 3.1.2 Giai đoạn tạo phát sinh hình thái nhân nhanh 65 3.1.3 Giai đoạn tạo hoàn chỉnh 70 3.2 Kết nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật ươm giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm 73 3.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng khối lượng giống in vitro đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm 74 3.2.2 Nghiên cứu xác định thời vụ phù hợp để đưa giống hoa chuông in vitro trồng vườn ươm 76 3.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng loại giá thể trồng đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm 78 3.2.4 Nghiên cứu ảnh hưởng loại phân bón đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm 83 3.3 Kết nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật trồng hoa chuông thương phẩm - giai đoạn vườn sản xuất 89 3.3.1 Ảnh hưởng thời vụ trồng đến khả sinh trưởng, phát triển hoa chuông 89 3.3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng loại phân bón đến sinh trưởng, phát triển hai giống hoa chuông - giai đoạn vườn sản suất 98 vi 3.3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng thời điểm bấm đến khả sinh trưởng phát triển hai giống hoa chuông - giai đoạn vườn sản xuất 109 3.4 Tình hình sâu bệnh hại hoa chuông 115 3.5 Kết thực nghiệm trồng hoa chuông thương phẩm tỉnh Thừa Thiên Huế 119 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 127 4.1 Kết luận 127 4.2 Đề nghị 128 CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 129 TÀI LIỆU THAM KHẢO 130 PHỤ LỤC Error! Bookmark not defined vii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT ABA - Axít abscicic ADN - Axít Deoxyribo Nucleic ARN - Axít ribonucleic ATP - Adenosin triphosphat BA - 6-benzyl adenine BVTV - Bảo vệ thực vật cs - cộng CCC - Chlormequat chlorid CEC - Khả trao đổi cation (Cation exchange capacity) đ/c - Đối chứng EU - Liên minh Châu Âu GA3 - Gibberellic axít IAA - Axít indolylacetic IBA - Axít indolyl butyric lux - đơn vị đo cường độ ánh sáng MS - môi trường Murashige Skoog NAA- Axít naphthylacetic NADPH2 - nicotinamide adenine dinucleotide hydrogen phosphate ppm - đơn vị minigam/lít Q (calo) - Nhiệt lượng TDZ - Thidiazuron UDS - Đô la Mỹ VCR - value cost ratio 2,4-D - Axít diclorophenoxy acetic viii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Nồng độ thời gian xử lý nấm khuẩn bề mặt mẫu 20 Bảng 2.1 Các công thức thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng quan nuôi cấy đến tạo nguồn vật liệu khởi đầu hai giống hoa chuông .48 Bảng 2.2 Các công thức thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng phối hợp BA -NAA đến khả tái sinh chồi in vitro hai giống hoa chuông 49 Bảng 3.1 Ảnh hưởng thời gian khử trùng quan nuôi cấy đến tạo nguồn vật liệu khởi đầu hai giống hoa chuông .64 Bảng 3.2 Ảnh hưởng phối hợp BA -NAA đến khả tái sinh chồi in vitro hai giống hoa chuông .67 Bảng 3.3 Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả tăng hệ số nhân chồi sinh trưởng chồi in vitro hai giống hoa chuông .69 Bảng 3.4 Ảnh hưởng nồng độ α-NAA đến hình thành rễ chồi in vitro hai giống hoa chuông 71 Bảng 3.5 Ảnh hưởng khối lượng giống in vitro đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm .75 Bảng 3.6 Ảnh hưởng thời vụ ươm đến tỷ lệ sống khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm .77 Bảng 3.7 Ảnh hưởng loại giá thể trồng đến tỷ lệ sống thời gian sinh trưởng hai hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm 79 Bảng 3.8 Ảnh hưởng loại giá thể trồng đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm 80 Bảng 3.9 Một số đặc điểm sinh học hai giống hoa chuông in vitro trồng loại giá thể khác 82 Bảng 3.10 Ảnh hưởng loại phân bón đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm 84 128 - Tiêu chuẩn giống xuất vườn ươm là: - 10 lá/cây, rễ nhiều, chiều cao - cm, khối lượng tươi - g/cây 3) Xác định quy trình trồng hoa chuông thương phẩm phù hợp địa bàn Thừa Thiên Huế - Thời vụ trồng thích hợp vụ Đông (tháng 11/2013), thu hoạch vào dịp Tết nguyên đán Số hoa/cây 28,53 - 28,87 hoa, đường kính hoa 7,56 - 8,09 cm thời gian nở hoa dài 38,67 - 46,67 ngày - Phân bón Đầu trâu 005 thích hợp cho sinh trưởng phát triển hoa chuông, giúp tăng suất chất lượng hoa: Thời gian hoa nở sớm từ 64 - 68 ngày, số hoa/cây 30 - 32 hoa, tỷ lệ hoa hữu hiệu 93,84 - 96,21%, độ bền hoa: - 11 ngày - Bấm vào thời kỳ sinh trưởng sinh sản (sau trồng 50 ngày) giúp tăng chất lượng hoa thương phẩm : đường hoa 7,81 - 8,25 cm, độ bền hoa - 12 ngày 4) Thực thành công thực nghiệm trồng hoa chuông thương phẩm ba địa điểm tỉnh, hai giống hoa nghiên cứu, mang lại hiệu kinh tế cao 4.2 Đề nghị - Phổ biến rộng rãi kỹ thuật nhân giống biện pháp kỹ thuật ươm trồng hoa chuông vào sản xuất, để mở rộng diện tích trồng hoa chuông địa bàn tỉnh khu vực miền Trung - Thực phương pháp vật lý hóa học để tạo giống hoa đột biến mới, đa dạng màu sắc, kiểu dáng hoa hình thái 129 CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống hoa chuông (Sinningia speciosa) invitro Tạp chí Nông nghiệp Phát triển nông thôn, 2013, Số: Tháng 6, Trang: 102 - 107 Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể khối lượng giống in vitro đến khả sinh trưởng hoa chuông (Sinningia speciosa) giai đoạn vườn ươm Tạp chí Nông nghiệp Phát triển nông thôn, 2014, Số: Tháng 4, Trang: 41 - 47 Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật trồng hoa chuông (Sinningia speciosa) in vitro giai đoạn vườn ươm Thừa Thiên Huế Tạp chí Nông nghiệp Phát triển nông thôn, 2015, chấp nhận đăng 130 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt [1] Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn (2010), Quy chuẩn kỹ thuật qu c gia ph ơng ph p điều tra ph t dịch hại t ồng, QCVN 01-38: 2010/BNNPTNT- Cục Bảo vệ thực vật, Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn ban hành Thông tư số 71/2010/TT-BNNPTNT ngày 10 tháng 12 năm 2010 [2] Lê Hữu Cần Nguyễn Thị Hồng Minh (2005), Nghiên cứu ứng dụng công nghệ in vitro nhân nhanh hoa chuông Thanh Hóa, Tạp chí Nông nghiệp ph t t iển nông thôn, kỳ 1- tháng 12/2005, tr 39 - 41 [3] Lê Văn Chi (1992), C ch s d ng ch t điều hoà sinh t ởng vi ng đạt hiệu cao, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, Hà Nội [4] Đặng Văn Đông Nguyễn Văn Tỉnh (2008), Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật tiên tiến sản xuất hoa lily áp dụng cho tỉnh miền Bắc Việt Nam, Tạp chí Nông nghiệp ph t t iển nông thôn, tr 32 - 36 [5] Lê Huy Hàm, Nguyễn Thị Kim Lý, Lê Đức Thảo, N K Dadlani, Nguyễn Xuân Linh, Phạm Thị Lý Thu, Trịnh Xuân Hoạt (2011), Kỹ thuật sản xu t s loại hoa Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội [6] Lã Thị Thu Hằng, Nguyễn Tiến Long, Trần Thị Triêu Hà, Trần Văn Minh (2012), Đánh giá khả sinh trưởng, phát triển sâu bệnh giống hoa chuông giá thể khác Thừa Thiên Huế vụ Đông Xuân năm 2009-2010, Tạp chí Nông nghiệp Ph t t iển nông thôn, tr, 158-163 [7] Nguyễn Xuân Linh (2006), Nghiên cứu ảnh hưởng chế phẩm đến suất phẩm chất giống cúc CN97, Tạp chí Nông nghiệp ph t t iển nông thôn, 1, tr 97- 99 [8] Nguyễn Bá Lộc (2003), Xác định hệ số điều chỉnh r để tính diện tích theo phương pháp đo kích thước thẳng lá, Thông b o khoa học, T ờng Đại học s phạm Huế, (46), tr 169-173 [9] Nguyễn Thị Kim Lý (2007), Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật nâng cao 131 chất lượng giống hoa Tô liên Torenia fournier, Tạp chí Nông nghiệp ph t triển nông thôn, 15, tr 28 - 31 [10] Nguyễn Thị Kim Lý (2009), Nghiên cứu biện pháp kỹ thuật điều khiển hoa cúc CNO1 Chrysanthemum sp trái vụ vụ đông cho vùng đồng sông Hồng, Tạp chí Nông nghiệp ph t t iển nông thôn, tr 33-37 [11] Vũ Triệu Mân, Lê Lương Tề (1999), Gi o t ình bệnh nông nghiệp Nhà xuất Nông nghiệp, Tr 55-177 [12] Dương Tấn Nhựt, Nguyễn Thị Xuân Nguyên, Phan Xuân Huyên (2005), Nhân nhanh in vitro hoa chuông phương pháp nuôi cấy đốt xử lý rễ ex vitro, Tạp chí Sinh học, 27 (4), tr 66-69 [13] Vũ Quang Sáng, Hoàng Minh Tấn, Nguyễn Quang Thạch (2006), Gi o t ình sinh ý thực vật, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, 392 tr [14] Vũ Quang Sáng, Nguyễn Thị Nhẫn, Mai Thị Tân, Nguyễn Thị Kim Thanh (2007), Gi o t ình sinh ý thực vật ứng d ng, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, 162 tr [15] Nguyễn Quang Thạch, Vũ Ngọc Lan, Nguyễn Xuân Trường, Nguyễn Công Hoan, Nguyễn Thị Lý Anh (2004), Nghiên cứu nhân nhanh hoa chuông (Sinningia speciosa), Tạp chí Khoa học kỹ thuật Nông nghiệp, 4, tr 239-244 [16] Lê Nguyễn Lan Thanh, Nguyễn Thị Vân Anh, Nguyễn Thị Hương Lan Nguyễn Văn Sơn (2014), Khảo sát sinh trưởng phát triển giống hoa chuông (Sinningia speciosa) từ nguồn gen in vitro Tiền Giang, Tạp chí Khoa học T ờng Đại học Cần Thơ, 4, tr 162-167 [17] Nguyễn Đức Thành (2000), Nuôi c y mô tế bào thực vật - Nghiên cứu ứng d ng, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội [18] Nguyễn Hạc Thúy (2001), Cẩm nang s d ng ch t dinh d ỡng t ồng phân bón cho su t cao, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội [19] Lê Văn Tri (2001), Hỏi đ p phân bón, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội [20] Nguyễn Văn Uyển (1995), Phân bón c c ch t kích thích sinh t ởng, Nhà xuất Nông nghiệp, Thành phố Hồ Chí Minh 132 [21] Viện Thổ nhưỡng nông hóa (1998), Sổ tay phân tích đ t, n ớc, phân bón t ồng, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Tài liệu tiếng nước [22] Addicott F T., H R Carns, J W Cornforth, J L Lyon, B V Milborrow, K Ohkuma, G Ryback, O E Smith, W E Thiessen and P.F Wareing (1968), Abscisic acid: a proposal for the redesignation of abscisin II (dormin) (Wightman F & Setterfield G, eds.), Biochemistry and physiology of plant growth substances, Ottawa, Canada: Runge Press, pp 1527-1529 [23] Alexander A., M Schroeder (1987), Modern trends in foliar fertilization, Journal of Plant Nutrition, 10(9), pp 1391-1399 [24] Alfieri S A (1970), Crown rot of gloxinia, Plant Pathology Circular , No 96 [25] Alfieri S A., and D E Stokes (1968), A floliar nematode and a phytophthora parasitic to gloxinia, Florida state horticultural society, 3145, pp 376-380 [26] Alice N A P., P M Adriana, L E.P Peres and E N Higashi (2009), Adjustment of mineral elements in the culture medium for the micropropagation of three vriesea bromeliads from the Brazilian Atlantic forest: the importance of calcium, Hort Science, 44(1), pp.106-112 [27] Angiosperm Phylogeny Group (1998), An ordinal classification of the families of flowering plants, Annals of the Missouri Botanical Garden, 85,pp 531-553 [28] Ann P J (1992), New diseases and records of some important flower plants caused by phytophthora parasitica in Taiwan, Plant Pathology, 1, pp.166-173 [29] Anonymous (1985), TNA Principles of Foliar Feeding, Trans National Agronomy, Grand Rapids, pp [30] Barbara E., F Amoding, A Krishnan (2014), Social and economic upgrading in floriculture global value chains: Flowers and cuttings GVCs in Uganda, Capturing the Gains 2014, Working paper 42, Online available at: http://www.capturingthegains.org/pdf/ctg-wp-2014-42.pdf 133 [31] Bharati K., Y D Sharma, S R Dhiman (2003), Performance of in vitro raised plants of gloxinia (Sinningia speciosa Hierm.) and African violet (Saintpaulia ionantha Wendl.) in different growing media, Journal of Ornamental Horticulture, 8(3), pp.180 - 185 [32] Bhojwani S S., and M K Razdan (1996), Plant Tissue Culture: Theory and Practice, Elsevier science B.V, Amsterdam, The Neitherlands, pp 766 [33] Borochov A., and T Shahar (1989), Effects of Mefluidide and Paclobutrazol on Growth, Flowering and Chilling Response of Gloxinia, Scientia Horticulturae, 39, pp 331-339 [34] Bostrack J M., and B E Struckmeyer (1967), Effect of gibberellic acid on the growth and anatomy of Coleus blumei, Antirrhinum majus and Salvia splendens, New Physiologist, 66, pp 539-544 [35] Busch L V., and E A Smith (1978), Control of root and crown rot of African Violet and of Gloxinia caused by Phytophthora nicotianae var nicotianae, Can Plant, Dí Surv, 58, pp 73-74 [36] Chae S C., H H Kim, and S U Park (2012), Ethylene inhibitors enhance shoot organogenesis of Gloxinia (Sinningia speciosa), The scientific world journal, pp 1-4 [37] Cole J C., and L Newll (1996), Recycled paper influences container substrate physical properties, leachate mineral content, and growth of roseof-Sharon and Forsythia, Hort Technology, 6, pp 79-83 [38] Coste S., C Baraloto, C Leroy ,É Marcon, A Renaud, A D Richardson, J C Roggy, H Schimann, J Uddling, B Hérault (2010), Assessing foliar chlorophyll contents with the SPAD-502 chlorophyll meter: a calibration test with thirteen tree species of tropical rainforest in French Guiana, Ann For Sci., 67, pp 607 [39] David Z (2012), Intraspecific diversity in Sinningia speciosa (Gesneriaceae: Sinningieae), and possible origins of the cultivated florist’s gloxinia, University of Kentucky, 1401 University Drive, Lexington, KY 40546, USA, pp 1-17 134 [40] David Z., and A J Pierce (2010), Nuclear DNA content in Sinningia (Gesneriaceae); intraspecific genome size variation and genome characterization in S speciosa, Genome, 53, pp 1066-1082 [41] Don G (1838), A general history of the dichlamydeous plants, Vol IV – Corollifloræ, London: J.G and F Rivington, etc [42] El-Fouly M M (2002), Quality of foliar fertilizers, Acta Hort (ISHS), 594, pp 277-281 [43] Eui P H., H Bae, W T Park, Y B Kim, S C Chae, S U Park (2012), Improved shoot organogenesis of gloxinia (Sinningia speciosa) using silver nitrate and putrescine treatment, Plant Ormit Journal, 5(1), tr 6-9 [44] Fageria N K., M P Barbosa-Filho, A Moreira, C.M Gumaraes (2009), Foliar Fertilization of Crop plants, Journal of plant nutrition, 32(4-6), pp 1044-1064 [45] Fernández V., and T Eichert (2009), Uptake of hydrophilic solutes through plant leaves: current state of knowledge and perspectives of foliar fertilization, Critical Reviews in Plant Sciences, 28(182), pp 36-68 [46] Fráguas C B., E A Chagas, M M Ferreira, J G De Carvalho, M Pasqua (2003), Gloxinia micropropagation in different ammonium nitrate and urea concentrations, Ciênc Ag otec, 27, pp 811-815 [47] Gill R I S., S S Gill and S S Gosal (1994), Vegetative propagation of Eucalypus tereticorns Sm Through tissue culture, Plant tissue cuulture, Bangladesh association for plant tissue culture, 4(1), pp 59-67 [48] Gonçalves S., P J Correia, M A Martins-Loução, and A Romano (2005), A new formulation for in vitro rooting of carob tree based on leaf macronutrients concentrations, Biol Plant, 49, pp 277-280 [49] Grimstad S O (1987), The effect of supplemental Irrdiation with different light sources on growth and flowering of Gloxinia (Sinningia speciosa (Lodd.) Hiern), Scientia Horticulturae, 32, pp 297-305 [50] Hartmann H T., D E Kester (1983), Plant propagation: Principles and practices, 4th ed New Jersey: Prentice Hall, pp 840 135 [51] Hazarika B N (2003), Acclimatization of tissue culture plants, Devision of Horticulture, ICAR Research complex, uniam 793 103, India, pp 1704 1712 [52] Heather A O., and D M Benson (2010), First Report of Crown Rot Caused by Phytophthora tropicalis on Gloxinia in North Carolina, Department of Plant Pathology, North Carolina State University, Campus [53] Himphies E C (1960), Kintine.inhibinited root formation On leaf of detached leaves of rulgaris (dwarp bean), Physicial plant,13, pp 654 - 663 [54] Horst R.K (1990), Handbook of plant cell culture, Vol5, New York, pp 215 - 217 [55] Hui C H., Q Cronk, C N Wang (2009), Inheritance and molecular genetics of floral symmetry in Darwin’s gloxinia peloria (Sinningia speciosa), Mechanisms of development, I26, pp 251 [56] Huiying H., L Qingying (2003), The propagation of Sinningia speciosa, Journal of Agricultural and Biological Science, 22(1), pp 35-49 [57] Ioja-Boldura F., S Ciulca (2013), Assessment of “in vitro” propagation potential for some gloxinia (Sinningia speciosa) genotypes, Journal of Horticulture, Forestry and Biotechnology, 17(3), pp 7- 11 [58] Jie L Y (2004), Establishment of tissue culture system of Sinningia speciosa and cymbidium grandiflorium and pilot study on cycd2 gene transformation to cymbidium grandiflorium, Master's thesis, Sichuan Agricultural University [59] Jiliang P., W Lilin, X Taihe, Z Dan, Y Hong (2012), High-frequency Floral Bud Regeneration from Petal Segment Cultures of Sinningia speciosa Hiern, Chinese Journal of Cell Biology , 34(3), pp 279 - 285 [60] John T M., C.M Tucker, C.M Tompkins (1944), A disease of gloxinia caused by phytophthora cryptogea, Journal of agricultural research, Washington D.C, 68 (11), pp 405-413 [61] John M D., F W Harold (1999), Floriculture Principles and species, pp 79 - 89 136 [62] Kannan S (2010), Foliar fertilization for sustainable Crop production, Sustainable Agriculture reviews, 1, Genetic Engineering, Biofertilization, Soil quality and Organic Farming, 4, pp 371-402 [63] Kessler J R (1999), Gloxinia, Commercial green house production Auburn University Online available at: http://www.ag.auburn.edu/hort/landscape/Gloxinia.htm [64] Khan N A (1996), Effect of gibberellic acid on carbonic anhydrase, photosynthesis, growth and yield of mustard, Biologia Plantarum, 38, pp 145-147 [65] Kurosawa E (1926), Experimental studies on the secretion of Fusarium heterosporum on rice plant, Trans Nat Hist Soc Formosa, 16, pp 213 [66] Kvist L P., and L E Skog (1993), The genus Columnea (Gesneriaceae) in Ecuador, Allertonia , 6, pp 327-400 [67] Laneri U., R Franconi, P Altavista (1990), Somatic mutagenesis of Gerbera jamesonii hybro: irradiation and in vitro culture, Acta Horticulturae, 280, pp 395-402 [68] Lecoufle M (1981), Orchidées extiques, La Maison Rustique, Paris, pp 215-217 [69] Lehman P S (1991), A disease of gloxinia caused by foliar nematodes Nematology circular , pp.195 [70] Lester G E., J L Jifon, D J Makus (2006), Supplemental foliar potassium applications with or without a surfactant can enhance netted muskmelon quality, Hort Sci, 4, pp 741-744 [71] Li X., H Bian, D Song, S Ma, N Han, J Wang and M Zhu (2013), Flowering time control in ornamental gloxinia (Sinningia speciosa) by manipulation of miR159 expression, Annals of Botany, 111 (5), pp 791-799 [72] Lia M., O Sicora, C Chis, M Caprar, G Hranean, C Sicora (2009), In vitro multiplication and acclimatization at Sinningia hybrid, Annals of RSCB, 14 (2), pp 289-291 [73] Liu W C., and H R Carns (1961), Isolation of abscisin, an abscission 137 accelerating subtance Science ,134, pp 384 [74] Loddiges C., and Sons (1817), Gloxinia speciosa, Botanical Cabinet 1, 28 [75] Mamaril J C., A M Lopez (1996), Effect of growth hormone extracts from coconut water on the growth of reflasked dendrobium protocorms, Philippines-Journal-of-Crop-Science, tr 21-30 [76] Mamaril J C., A M Lopez (1997), Comparative effect of coconut water growth hormone extracts on the growth of reflasked Vanda, Phalaenopsis (grandiflora) and Dendrobium protocorms, Philippine journal of coconut studies, 23 [77] Mantell S H., J A Mathews, and R A McKee (1985), Principles of Plant Biotechnology, Blackwell Scientific Publications, Oxford [78] Martín M., R., E Villanueva-Couob, V Uicab-Quijano, A Larque-Saavedra (2003), Positive effect of salicylic acid on the flowering of gloxinia, In; Proceedings 31st Annual Meeting, August 3-6, 2003, Plant Growth Regulation Society of America, Vancouver, Canada, pp 149 - 151 [79] Mathieu P., A Chautems, R Spichiger, G Kite, and V Savolainen (2003), Systematics and evolution of tribe sinningieae (Gesneriaceae): Evidence from phylogenetic analyses of six plastid DNA regions and nclear NCPGS, American journal of Botany, 90 (3), pp 445-460 [80] Morard P., and M Henry (1998), Optimization of the mineral composition of in vitro culture medium, Journal Plant Nutr, 21, pp 1565-1576 [81] Murashige T and F Skoog (1962), A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco cultures, Physiol Plant, 15, pp 473-497 [82] Murashige T (1974), Plant propagation through tissue culture, Annu Rev Plant Phys, 25, pp 135-166 [83] Naz S., A Ali, F A Siddiqui, J Iqbal (2001), In vitro propagation of gloxinia (sinningia speciosa), Pakistan Journal of Botany, 33, pp 125-129 [84] Navarro L., R Bari, P Achard, P Lison, A Nemri, N.P Harberd, J.D Jones (2008), DELLAs control plant immune responses by modulating the balance 138 of jasmonic acid and salicylic acid signaling, Curr Biol, 18, pp 650-655 [85] Nhut D.T., J.A Teixeirada silva, and C.R.Aswth (2003), The importance of the explant on regeneration in thin cell layer technology, In vitro cell Dev Biol Plant, 39, pp 266 - 276 [86] Nhut D T., N A Nguyet, H T Phuc, N P Huy, P N Uyen, T K Vi, N T Hai, N V Binh and N Q Thien (2005), Primary designs of tube-shaped nylon film culture system in shoot regeneration of Sinningia spp Leaf explants, Proceedings of international Workshop on Biotechnology in Agriculture, Nong lam university Ho Chi Minh City, pp 131-133 [87] Nhut D T., N T Don, N H Vu, N Q Thien, D T T Thuy, N D Jaime, A Teixeira da Silva (2005), Advanced technology in micropropagation of some important plants, Floriculture, Ornamental and plant Biotechnology, Volume II, Global science books, UK, pp 333 [88] Niedz R P., and T J Evens (2007), Regulation of plant tissue growth by mineral nutrition, In Vitro Cell Dev Biol Plant, 43, pp 370-381 [89] Ohira K., I Makoto, K Ojima (1976), Thiamine requirements of various plant cells in suspension culture, Plant Cell Physiol, 17(3), pp 583-590 [90] Ohkuma K., J L Lyon, F T Addicott, O E Smith (1963), Abscisin II, an Abscission-Accelerating Substance from Young Cotton, Fruit Science, 142 (3599), pp 1592-1593 [91] Okamoto T., O, Kitani, T Torii (2002), Robotic transplanting of orchid protocorm in mericlone culture, Journal of the Japanese Society of Agricultural Machinery, pp.103-110 [92] Olmstead R G., B Bremer, K.Scott, and J D Palmer (1993), A parsimony analysis of the Asteridae sensu lato based on rbcL sequences, Annals of the Missouri Botanical Garden, 80, pp 700-722 [93] Pavlova A., T Michailova (2009), Foliar fertilization-profitable technology, Laktofol - 20 years science and practice, Sofia, Bulgarian, pp 455 - 465 [94] Pierik R L M (1997), In vitro culture of higher plants, Dordrecht: Klower Acad, Publication, 312 pp 139 [95] Pradera E S., E Fernandez, O Calderin (1942), Coconutbwater, a clinical and experimental study, Am J Dis Chil., 64, pp 977 - 995 [96] Prakash S., M I Hoque, T Brinks (2002), Culture media and containers In: International Atomic Energy Agency (ed.): Low cost options for tissue culture technology in developing countries, Proceedings of a technical meeting, 26-30 August 2002, Vienna, Austria, 536 pp [97] Randy C P., A W Engelhard (1980a), Chemical control of myrothecium disease of gloxini, Proc Fla State Hort Soc, 93, pp 181-183 [98] Randy C P., A W Engelhard (1980b), Crown and root rot of Gloxinia and other Gesneriads caused by phytophthora parasitica, Plant Disease, 64(5), pp 487-490 [99] Raviv M., R Wallach, A Silber, and A Bar-Tal (2002), Substrates and their analysis D Savvas and H Passam (Eds), Hydroponic Production of Vegetables and Oranmentals, Empryo Publishcations, Athens Greece, pp 25 -101 [100] Rikken (2011), The global competitiveness of the kenyan flower industry, Prepared for the Fifth Video Conference on the Global Competitiveness of the Flower Industry in Eastern Africa, World Bank Group and Kenya Flower Council, 29pp [101] Robbins J A and M R Evans (2004), Growing Media for Container Production in a Greenhouse or Nurseries Part 1: Components and Mixes Agriculture and Natural Resources, Division of Agriculture, University of Arkansas, Fayetteville, 4pp [102] Salvador E D., K Minami (2008), Evaluation of different substrates on gloxinia (Sinningia speciosa lood hiern.) growth, International Symposium on Growing Media http://www.actahort.org/books/779/779_71.htm [103] Satter R L and D F Wetherell (1968), Photomorphogenesis in Sinningia speciosa, cv Queen Victoria - II Stem Elongation: Interaction of a Phytochrome Controlled Process and a Red-requiring, Energy Dependent Reaction, Plant Physiol, 43, pp 961-967 140 [104] Scaramuzzi F., G Apollonio and S D’Emerico (1999), Adventitious shoot regeneration from Sinningia speciosa leaf discs in vitro and stability of ploidy level in subcultures, In Vitro Cellular & Developmental Biology Plant, Springer Berlin/Heidelberg, 35 (3), pp 217-221 [105] Shagufta N., Ali A, Siddqui F A and J Iqbal (2001), In vitro propagation of Gloxinia (Sinningia speciosa) Pak J Bot, 33, pp 575-579 [106] Sharma S., M Sharma (2013), Improved protocol for in vitro propagation of gloxinia (Sinningia sp.), Journal of Cell and Tissue Research, 13(1), pp 3545-3548 [107] Siddiqui F A., S Naz, J Iqbal (1993), In vitro propagation of Carnation Advances in plant tisue culture Pakistan, pp 43-47 [108] Silva A.B., M Pasqual, A L R Maciel, and L F Dutra (2003), BAP and substrates on gloxinia (Sinningia speciosa Lood Hiern.) Plantlets from tissue culture acclimatization, Ciênc Ag otec, 27(n.2), pp 255-260 [109] Skoog F (1955), Growth factors, polarity and morphogenesis, Ann Biol., 31, pp 201-213 [110] Skoog F., and C.O Miller (1957), Chemical regulation of growth and organ formation plant tissue cultured in vitro, Symp Soc London, 114, pp 317-339 [111] Smith J F (1994), Systematics of Columnea section Pentadenia and section Stygnanthe (Gesneriaceae) Systematic Botany Monographs , 44, pp 1-89 [112] Smith J F., J C Wolfram, K D Brown, C L Carroll, and D S Denton (1997), Tribal relationships in the Gesneriaceae: evidence from DNA sequences of the chloroplast gene ndhF, Annals of the Missouri Botanical Garden, 84, pp 50-66 [113] Smith J F., L C Hileman, M P Powell, D A Baum (2004), Evolution of GCYC, a Gesneriaceae homolog of CYCLOIDEA, within Gesneriodeae (Gesneriaceae), Molecular Phylogenetics and Evolution, 31, pp 765– 779 [114] Sudhagar S M C., and M Phil (2013), Production and maketing of cut flower (Rose and Gerbera) in Hosur Taluk, International Journal of Business and Management Invention, (5), pp 15-25 141 [115] Tamaki V., and H Mercier (2007), Cytokinins and auxin communicate nitrogen availability as long-distancesignalmolecules in pineapple, Journal of Plant Physiology, 164(11), pp 1543-1547 [116] Teresa C U., E H Fajerska, and Adam Świderski (2007), Effect of Light Wavelength on In Vitro Organogenesis of a Cattleya hybrid, Acta Biologica Cracoviensia Series Botanica, 49(1), pp 113-118 [117] Thorpe T.A (2006), Plant Cell Culture Protocols, Second Edition Edited by: V M Loyola-Vargas and F Vázquez-Flota © Humana Press Inc., Totowa, New Jersey [118] Torres K C (1989), Editor, Tissue culture techniques for horticultural crops, New York, London, Chapman and Hall [119] Tulecke W., L H Weinstein, A Rutner, and H J Laurencot (1961), The biochemical composion of coconut water (coconut milk) as related to its use in plant tissue culture Contributions, Boyce Thompson Institute of Plant Research, 21, pp 115-128 [120] Verdan M H., A C Cervi, F R Campos, A Barison, M E A Stefanello (2009), Anthraquinones and ethylcyclohexane derivatives from Sinningia speciosa ‘‘Fyfiana’’, Biochemical Systematics and Ecology, 37, pp 40-42 [121] Vince-Pure D (1994), Photomorphogenesis and plant development In: Lumsden PJ, Nicholas JR and Davies WJ [eds.], Physiology, growth and development of plants in culture, 19-30, Kluwer Academic Publishers, Dordrecht [122] Vinterhalter D., B S Vinterhalter (1997), Micropropagation of Dracaena sp, In: Bajaj YPS (ed.) Biotechnology in agriculture and forestry 40, Hightech and Micropropagation VI, Berlin, Heidelberg, Springer, pp 131- 146 [123] Weinbaum S (1988), Foliar nutrition of fruit trees, In: P.M Neumann (ed.), Plant growth and leaf-applied chemicals, Boca Raton Florida, pp 81-100 [124] Went F W (1928), Wuchsstoff und Wachstum Rec Trav Bot Neerl, 25, pp - 116 [125] Wentsai W., P Kaiyu, L Zhenyu, A L Weitzman, and L E Skog (1998), 142 Gesneriaceae, In W Zheng-yi and P H Raven (co-chairs, Editorial Committee), Flora of China, Science Press, Beijing, China, and Missouri Botanical Garden Press, St Louis, Missouri, USA, 18, pp 244 - 401 [126] White P R (1943), Nutrient deficiency studies and improved inorganic nutrients for cultivation of excised tomato roots, Growth, 7, pp 53 - 65 [127] Wiehler H (1983), A synopsis of the neotropical Gesneriaceae Selbyana, 6, pp 1-219 [128] Williams R R (1991), Factors determining mineral uptake in vitro, Acta Hort., 289, pp 165-169 [129] Xu Q., L Zhe Hu, C Y Li, X Y Wang, C Y Wang (2009), Tissue culture of Sinningia speciosa and analysis of the in vitro-generated tricussate whorled phyllotaxis (twp) variant In Vitro Cellular & Developmental Biology - Plant, 45(5), pp 583-590 [130] Yabuta T., Y Sumiki (1938) On the crystal of gibberellin, a substance to promote plant growth, Journal Agricultural Chemical Japan, 14, pp 1526 [131] Yildiz M (2012), The Prerequisite of the Success in Plant Tissue Culture: High Frequency Shoot Regeneration In Recent Advances in Plant in vitro Culture, in the book "Recent Advances in Plant in vitro Culture", edited by Annarita Leva and Laura M R Rinaldi, ISBN 978-953-51-0787-3 [132] Zaitlin D., Pierce AJ (2010), Nuclear DNA Content in Sinningia (Gesneriaceae); intraspecific genome size variation and genome characterization in S speciosa, Genome, 53, pp 1066 - 1082 Trang thông tin điện tử [133] Công ty công nghệ sinh học Sài Gòn xanh (2014), Đất dinh dưỡng Tribat, Online ngày tháng năm 2014 website: http://tribat.com.vn/vn/san-pham/gia-the-trong-cay/dat-sach-dinh-duongtribat.aspx [...]... Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống in vitro và trồng cây hoa chuông (Sinningia speciosa) tại tỉnh Thừa Thiên Huế 2 Mục tiêu của đề tài 2.1 Mục tiêu tổng quát Xác định được quy trình kỹ thuật hoàn chỉnh từ khâu sản xuất cây giống hoa chuông in vitro có chất lượng tốt, đến trồng cây hoa chuông thương phẩm có năng suất, chất lượng hoa cao và phát triển diện tích trồng cây hoa chuông ở tỉnh Thừa Thiên Huế 2.2... và nghiên cứu khoa học, trong lĩnh vực công nghệ sinh học, công nghệ sản xuất giống và kỹ thuật trồng hoa chậu 3.1 Ý nghĩa thực tiễn - Kết quả nghiên cứu cung cấp 3 quy trình kỹ thuật bao gồm: Quy trình kỹ thuật nhân giống in vitro cây hoa chuông; quy trình kỹ thuật ươm cây giống hoa chuông sau nuôi cấy mô; quy trình kỹ thuật trồng cây hoa chuông thương phẩm, phù hợp với điều kiện sinh thái Thừa Thiên. .. nghĩa khoa học - Kết quả nghiên cứu sẽ cung cấp những dẫn liệu khoa học nhằm bổ sung thông tin về cây hoa chuông, kỹ thuật nhân giống in vitro, kỹ thuật trồng cây hoa chuông thương phẩm có năng suất cao, chất lượng hoa tốt để áp dụng vào sản xuất có hiệu quả - Kết quả nghiên cứu làm cơ sở khoa học cho những nghiên cứu tiếp theo về chọn tạo giống và ứng dụng kỹ thuật di truyền đối với cây hoa chuông. .. được quy trình kỹ thuật nhân giống in vitro cây hoa chuông có chất lượng tốt đáp ứng nhu cầu sản xuất ở quy mô lớn - Xây dựng được quy trình kỹ thuật ươm cây giống hoa chuông in vitro ở giai đoạn vườn ươm - Xây dựng được quy trình kỹ thuật trồng cây hoa chuông thương phẩm phù hợp với điều kiện sinh thái Thừa Thiên Huế và phát triển diện tích trồng cây hoa chuông ra diện rộng 4 3 Ý nghĩa khoa học và thực... giống in vitro cây hoa chuông bằng nuôi cấy đoạn thân mang mắt ngủ 73 Hình 3.2 Sơ đồ quy trình kỹ thuật ươm cây hoa chuông in vitro 89 Hình 3.3 Sơ đồ quy trình kỹ thuật trồng cây hoa chuông thương phẩm 119 Hình 3.4 Sơ đồ tóm tắt quy trình kỹ thuật nhân giống và trồng cây hoa chuông 126 1 MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Hoa chuông (Sinningia speciosa) thuộc họ tai voi (Gesneriaceae), bộ hoa môi (Lamiales),... 3: Tại vườn của gia đình ông Lê Bá Thông, phường Thủy Dương, thị xã Hương Thủy, tỉnh Thừa Thiên Huế 5 Những đóng góp mới của luận án  Cung cấp được quy trình kỹ thuật nhân giống in vitro cây hoa chuông, để tạo ra cây giống có chất lượng cao đáp ứng nhu cầu sản xuất ở quy mô lớn  Cung cấp được quy trình kỹ thuật ươm cây giống hoa chuông in vitro phù hợp với điều kiện sinh thái của tỉnh Thừa Thiên Huế. .. độ này, vụ Đông Xuân ở tỉnh Thừa Thiên Huế có thể đáp ứng để cây hoa chuông sinh trưởng phát triển tốt, cho năng suất và chất lượng hoa cao - Ánh sáng: Ánh sáng có ảnh hưởng rất lớn đến sự phân hóa mầm hoa và sự nở hoa của cây hoa chuông Hoa chuông ưa ánh sáng tán xạ Ánh sáng trực tiếp sẽ làm cháy lá, trong thời kỳ ngủ nghỉ cây không cần ánh sáng Quang kỳ thích hợp nhất để hoa chuông phát triển là khoảng... nhu cầu sản xuất Đây là kỹ thuật nhân giống đã được ứng dụng rộng rãi ở các nước có ngành sản xuất hoa tiên tiến Kỹ thuật nhân giống in vitro luôn được hoàn thiện để đưa vào ứng dụng trong thực tiễn sản xuất 1.2.3 Nhân giống vô tính in vitro cây hoa chuông Nhân giống in vitro hay còn gọi là vi nhân giống, thường được sử dụng cho việc ứng dụng các kỹ thuật nuôi cấy mô để nhân giống thực vật, bằng việc... lại hiệu quả kinh tế cao Những năm gần đây, nhóm nghiên cứu hoa của Trường Đại học Nông Lâm, Huế đã thu thập, đánh giá khả năng sinh trưởng phát triển của một số giống hoa chuông trên các loại giá thể khác nhau tại Thừa Thiên Huế, đã chọn được hai giống 3 hoa chuông tốt nhất (giống hoa màu đỏ cánh kép, giống hoa màu trắng cánh đơn), phù hợp với điều kiện sinh thái Thừa Thiên Huế và giá thể trồng thích... các giống hoa mới có giá thị thẩm mỹ và kinh tế cao nói chung và cây hoa chuông nói riêng sẽ có nhiều cơ hội để phát triển mở rộng diện tích trồng và thị trường tiêu thụ ngay trên địa bàn Thừa Thiên Huế và các vùng trồng hoa trọng điểm cả cả nước 1.2 Kỹ thuật nhân giống hoa chuông và những yếu tố ảnh hưởng Trong tự nhiên cây hoa chuông được nhân giống bằng 2 phương pháp: nhân giống hữu tính và nhân giống ...ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÃ THỊ THU HẰNG NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG IN VITRO VÀ TRỒNG CÂY HOA CHUÔNG (SINNINGIA SPECIOSA) TẠI TỈNH THỪA THIÊN HUẾ Chuyên ngành: Khoa học trồng Mã... xây dựng quy trình kỹ thuật phục vụ sản xuất Xuất phát từ vấn đề trên, thực đề tài Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống in vitro trồng hoa chuông (Sinningia speciosa) tỉnh Thừa Thiên Huế Mục tiêu đề... Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học - Kết nghiên cứu cung cấp dẫn liệu khoa học nhằm bổ sung thông tin hoa chuông, kỹ thuật nhân giống in vitro, kỹ thuật trồng hoa chuông thương