CÁC TRƯỜNG HỢP CÓ THAI BẰNG PHƯƠNG PHÁP THỤ TINH TRONG ỐNG NGHIỆM SỬ DỤNG TINH TRÙNG TỪ MÔ TINH HOÀN TRỮ LẠNH Trương Thị Thanh Bình*, Nguyễn Thành Như**, Nguyễn Thị Mai***, Mai Công Minh Tâm***, Hồ Mạnh Tường*, Đặng Quang Vinh*** TÓM TẮT Mở ñầu: Nhờ có vi thao tác tiêm tinh trùng vào bào tương trứng, thụ tinh ống nghiệm thực với tinh trùng từ mô tinh hoàn trữ lạnh Mục tiêu: mô tả trường hợp có thai sau thụ tinh ống nghiệm sử dụng tinh trùng phân lập từ mô tinh hoàn trữ lạnh Đối tượng phương pháp: Nghiên cứu mô tả loạt ca Các mẫu mô tinh hoàn bệnh nhân vô tinh bế tắc ñược lấy bệnh nhân ñược phẫu thuật thám sát bìu, ñược trữ lạnh Tinh trùng phân lập từ mô tinh hoàn rã ñông ñược tiêm vào bào tương trứng Phôi tạo thành ñược chuyển vào buồng tử cung người vợ Thai kỳ ñược ghi nhận Kết quả: Trong thời gian từ tháng 03/2009 ñến tháng 08/2009, có 4/13 (30,8%) trường hợp có thai Tỉ lệ trứng thụ tinh sau tiêm tinh trùng trường hợp 80,9% (38/47) Tất trứng thụ tinh ñều phát triển thành phôi 2/4 trường hợp có thai ñầu tiên phôi trữ lạnh Kết luận: Sử dụng tinh trùng phân lập từ mô tinh hoàn rã ñông ñể thụ tinh ống nghiệm kỹ thuật thực Việt Nam Từ khoá: Mô tinh hoàn trữ lạnh, thụ tinh ống nghiệm, tiêm tinh trùng vào bào tương noãn ABSTRACT PREGNANCIES FOLLOWING INVITRO FERTILIZATION WITH SPERMATOZOA FROM FROZEN-THAWED TESTICULAR TISSUE Introduction: With intracytoplasmic sperm injection micromanipulation, invitro fertilization could be performed with spermatozoa from frozen testicular tissue Objective: We reported clinical pregnancies after intracytoplasmic sperm injection of spermatozoa extracted from frozen-thawed testicular tissue Materials and methods: A case-series report Testicular tissues of obstructive azoospermic men were taken when scrotal exploration done, then frozen Extracted spermatozoa were injected into mature eggs Generated embryos were then transferred to the uteri of their wifes Clinical pregnancies were noted Results: From March to August 2009, 4/13 (30.8%) pregnancies were noted Fertilization rate was 80.9% (38/47) All fertilized eggs developed to embryos 2/4 pregnant cases had extra embryos frozen Conclusion: Sperm extracted from frozen-thawed testicular tissue for intracytoplasmic sperm injection can be applied in Vietnam Key words: Frozen testicular tissue, intracytopplasmic serm injection, Invitrofertilization MỞ ĐẦU Từ ñời vào năm 1993(1,6), kỹ thuật ICSI với tinh trùng ñược trích từ mô tinh hoàn (TESE) ñã trở thành phương pháp ñiều trị muộn hiệu dành cho bệnh nhân vô tinh Tuy nhiên, việc phẫu thuật tinh hoàn nhiều lần ñể tìm tinh trùng (TESE) tạo áp lực lớn tâm lý cho bệnh nhân, tăng chi phí ñiều trị, nguy biến chứng (tụ máu bìu) gây tổn thương không hồi phục mô tinh hoàn Do ñó, việc nghiên cứu trữ lạnh mô * Đơn vị Hỗ Trợ Sinh Sản, bệnh viện An Sinh, TP Hồ Chí Minh Khoa Nam học, bệnh viện Bình Dân, TP Hồ Chí Minh *** Khoa Hiếm Muộn, bệnh viện Vạn Hạnh, TP Hồ Chí Minh Địa liên lạc: ThS.Trương Thị Thanh Bình ĐT: 0989960903 Email: thanhbinhbct@yahoo.com ** 565 tinh hoàn giúp khắc phục vấn ñề Từ tháng 08 ñến tháng 12 năm 2008, ñã tiến hành nghiên cứu ñánh giá hiệu quy trình trữ lạnh – rã ñông – nuôi cấy mô tinh hoàn trường hợp vô tinh bế tắc Tinh trùng từ mô tinh hoàn sau trữ lạnh, rã ñông nuôi cấy có tỉ lệ di ñộng tương ñối tốt (32,2%) sử dụng cho ICSI(7) Mục tiêu Trong nghiên cứu này, báo cáo trường hợp có thai lâm sàng ñầu tiên phương pháp ICSI sử dụng tinh trùng từ mô tinh hoàn trữ lạnh – rã ñông – nuôi cấy ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đây nghiên cứu mô tả loạt ca lâm sàng Báo cáo mô tả trường hợp thụ tinh ống nghiệm (TTTON) có thai ñầu tiên với tinh trùng phân lập từ mô tinh hoàn ñông lạnh Các mẫu mô tinh hoàn bệnh nhân vô tinh bế tắc ñược lấy bệnh nhân ñược phẫu thuật thám sát bìu khoa Nam Học, bệnh viện Bình Dân, ñược trữ lạnh – rã ñông khoa Hiếm Muộn, bệnh viện Vạn Hạnh ñơn vị Hỗ Trợ Sinh Sản, bệnh viện An Sinh Sau nuôi cấy, tinh trùng phân lập từ mô tinh hoàn rã ñông ñược tiêm vào bào tương trứng Phôi tạo thành ñược chuyển vào buồng tử cung người vợ Ghi nhận mô tả trường hợp có thai ñầu tiên KẾT QUẢ Từ tháng ñến tháng năm 2009, ñã thực ICSI sử dụng tinh trùng từ mô tinh hoàn trữ lạnh cho 13 trường hợp vô tinh bế tắc Đặc ñiểm trường hợp có thai lâm sàng ñược trình bày bảng Bảng 1: Bốn trường hợp có thai với tinh trùng phân lập từ mô tinh hoàn trữ lạnh – rã ñông Đặc ñiểm TH TH TH TH Tuổi vợ (năm) 30 32 32 36 Tuổi chồng (năm) 30 61 37 37 Số trứng ICSI (n) 08 18 17 04 Số trứng thụ tinh (n) 07 14 14 03 Số phôi (n) 07 14 14 03 Số phôi chuyển ngày 04 04 04 03 thứ hai (n) Số phôi trữ (n) 03 08 TH : trường hợp BÀN LUẬN Việc trữ lạnh tinh trùng ñã ñược áp dụng TTTON từ năm 1983, khởi ñầu với tinh trùng từ tinh dịch(2) Tiếp sau ñó, tinh trùng từ mào tinh ñược ñông lạnh sử dụng cho ICSI Năm 1996, trường hợp có thai ñầu tiên phương pháp ICSI với tinh trùng từ mô tinh hoàn trữ lạnh ñược công bố(2,4,5) Kể từ ñó, trữ lạnh mô tinh hoàn với ưu ñiểm thuận tiện cho bệnh nhân ñược áp dụng rộng rãi trung tâm TTTON giới Ở Việt Nam, kỹ thuật ICSI sử dụng tinh trùng tươi trích từ tinh hoàn (TESE) ñược áp dụng thành công vào năm 2003(3) Nghiên cứu lần ñầu tiên tinh trùng trích từ mô tinh hoàn trữ lạnh ñược sử dụng cho ICSI Trong trữ lạnh tinh trùng, tỉ lệ sống sót sau rã ñông phụ thuộc vào nhiều yếu tố như: chất lượng tinh trùng trước trữ, chất bảo quản, quy trình trữ lạnh – rã ñông, trình pha loãng, trình rửa sau rã ñông Với quy trình trữ lạnh mô tinh hoàn tại, tỉ lệ sống sót tinh trùng từ mô tinh hoàn sau rã ñông – nuôi cấy tương ñối tốt Tinh trùng sử dụng cho trường hợp ICSI nghiên cứu ñều có di ñộng tiến tới Tỉ lệ thụ tinh bốn trường hợp có thai 80,9% Tỉ lệ cao so với tỉ lệ trứng thụ tinh trung bình sau ICSI với tinh trùng bình thường trung tâm chúng tôi, vào khoảng 70% Tất trứng thụ tinh ñều phát triển tiếp thành phôi vào ngày thứ hai, cho thấy trình thụ tinh diễn bình 566 thường Hai bốn trường hợp có thai phôi dư trữ lạnh Các trường hợp có thai ñược mô tả cho thấy qui trình trữ lạnh – rã ñông – nuôi cấy tinh trùng từ mô tinh hoàn ñược xây dựng có hiệu hoàn toàn ứng dụng ñiều trị trung tâm hỗ trợ sinh sản Việt nam KẾT LUẬN Đây có lẽ lần ñầu tiên Việt Nam, tinh trùng phân lập từ mô tinh hoàn rã ñông ñược sử dụng ñể thụ tinh ống nghiệm cho kết có thai cách khả quan Qua ñó cho thấy kỹ thuật ứng dụng trung tâm hỗ trợ sinh sản Việt nam Từ viết tắt ICSI : intracytoplasmic sperm injection (tiêm tinh trùng vào bào tương trứng) TESE : testicular sperm extraction (trích tinh trùng tinh hoàn) TÀI LIỆU THAM KHẢO Craft I, Bennett V, Nicholson N Fertilising ability of testicular spermatozoa Lancet, 1993, 342, 864 Fischer R, Baukloh V, Naether OGJ, Schulze W, Salzbrunn A, Benson DM Pregnancy after intracytoplasmic sperm injection of spermatozoa extracted from frozen-thawed testicular biopsy Human Reproduction, 1996, 11, 2197-2199 Nguyễn Thành Như, Phạm Hữu Đương, Nguyễn Ngọc Tiến, Vũ Lê Chuyên, Vương Thị Ngọc Lan, Hồ Mạnh Tường, Phùng Huy Tuân, Đỗ Quang Minh, Đặng Quang Vinh, Nguyễn Thị Ngọc Phượng Nhân 300 trường hợp trích tinh trùng từ mào tinh tinh hoàn ñể thực vi thao tác tiêm tinh trùng vào bào tương trúng Y học Việt Nam, 2005, 313, 849 – 903 Romero J, Remohi J, Minguez Y, Rubio C, Pellicer A, Gil-Salom M Fertilization after intracytoplasmic sperm injection with cryopreserved testicular spermatozoa Fertil Steril, 1996, 65, 877-879 Salzbrunn A, Benson D, Holstrin A et al A new concept for the extraction of testicular spermatozoa as a tool for assisted fertilization (ICSI) Human Reproduction, 1996, 11, 752 – 755 Schoysman R, Vanderzwalmen P, Nijs M et al Pregnancy after fertilisation with human testicular spermatozoa Lancet, 1993, 342, 1237 Trương Thị Thanh Bình, Nguyễn Thành Như cs Trữ lạnh mô tinh hoàn trường hợp vô tinh bế tắc nam giới Thời y học, 2008, 36, 3-5 567 ... mô tả trường hợp có thai ñầu tiên KẾT QUẢ Từ tháng ñến tháng năm 2009, ñã thực ICSI sử dụng tinh trùng từ mô tinh hoàn trữ lạnh cho 13 trường hợp vô tinh bế tắc Đặc ñiểm trường hợp có thai lâm... thường Hai bốn trường hợp có thai phôi dư trữ lạnh Các trường hợp có thai ñược mô tả cho thấy qui trình trữ lạnh – rã ñông – nuôi cấy tinh trùng từ mô tinh hoàn ñược xây dựng có hiệu hoàn toàn... ñông – nuôi cấy tương ñối tốt Tinh trùng sử dụng cho trường hợp ICSI nghiên cứu ñều có di ñộng tiến tới Tỉ lệ thụ tinh bốn trường hợp có thai 80,9% Tỉ lệ cao so với tỉ lệ trứng thụ tinh trung