:ỉf BỌ GIAO DỤC VA ĐAO TẠO :ỉf BỌ GIAO DỤC VA ĐAO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH NGUYỄN THỊ BÍCH THẢO NGUYỄN THỊ BÍCH THẢO NGHIÊN CỬU KHẢ NẰNG PHÒNG TRỪNGHIÊN SÂU KHOANG CỨU KHẢ (Spodoptera NĂNG Utura Fabricius) CỦA NẤM KỶ SINH CÔN TRÙNG LUẬN VÃN THẠC sĩ KHOA HỌC SINH HỌC LUẬN VĂN THẠC sĩ KHOA HỌC SINH HỌC Người hướng dân khoa học: NGHỆ AN-2013 LÒI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu khoa học riêng Các số liệu kết trình bày luận văn hoàn toàn trung thực, chưa 11 LỜI CẢM ƠN Tác giả xin gửi tới thầy cô lời cảm ơn lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Trần Ngọc Lân, TS Nguyễn Thị Thanh, người quan tâm giúp đỡ tận tình, sát chu hoàn thành đề tài nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn ban giám hiệu Truông Đại học Vinh, Nghệ An, tháng 10 năm 2013 Tác giả 111 MỤC LỤC Trang LỜICAMDOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC VIÉT TẮT V DANII MỤC Sơ ĐÒ BẢNG BIẺƯ vi DANH MỤC HÌNH ANH viii MỞ ĐẦU .1 Tầm quan trọng nghĩa việc nghiên cứu đề tài Mục đích nghiên cún Nội dung nghiên cứu Phạm vi nghiên cứu .3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Chương TỎNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cơ sở khoa học 1.1.1 Nấm ký sinh côn trùng (Entomopathogenic fungi - EPF) 1.1.2 Đặc điếm sinh học sinh thái sâu khoang 1.1.3 Cơ chế tác động nấm lên côn trùng 1.2 Tình hình nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng giới Việt Nam 1.2.1 Tình hình nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng giới 1.2.2 .Tình hình nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng Việt Nam .16 Chương ĐÓI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu .19 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu .19 V DANH MỤC IV VIÉT TẮT Chương KÉT QUẢ NGHIÊN cífu VÀ THẢO LUẬN 23 3.1 Đặc điểm sinh học, sinh thái dạng vô tính Isaria javanica VN1478 23 Ánh hưởng độ ấm ốn định 70% nhiệt độ khác đến khả gây bệnh chủng nấm Isaria ịavanica vật chủ sâu khoang .24 Ảnh hưởng độ ẩm ổn định 70% nhiệt độ khác đến hiệu lực phòng trừ chủng nấm Isariaịavanica đến sâu khoang 24 3.2.2 Ảnh hưởng độ ẩm ổn định 70% nhiệt độ khác 3.2.1 đến vòng đời phát triển chủng nấm Isana ịavanica đến sâu khoang 37 3.2.3 .Ke 3.3 t luận thí nghiệm độ ấm ổn định 70% nhiệt độ khác .49 Ảnh hưởng nhiệt độ ổn định 25° độ ẩm khác đến khả gây bệnh chủng nấm Isaria javanica vật chủ sâu khoang 50 3.3.1 Ảnh hưởng nhiệt độ ổn định 25° độ ẩm khác đến hiệu lực phòng trừ chủng nấm Isaria javanica đến sâu khoang 50 3.3.2 Ảnh hưởng nhiệt độ ổn định 25° độ ẩm khác đến vòng đời phát triển chủng nấm Isaria javanica đến sâu khoang 65 PHU LUC VI DANH MỤC Sơ ĐÒ BẢNG BIỂU Trang Bảng 3.2.1: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun Isaria javanica VN1472 dạng lỏng với nhiệt độ khác 25 Bảng 3.2.2: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang Isaria javanica VN1472 dạng lỏng với mức nhiệt độ khác 26 Bảng 3.2.3: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun ỉsaria javanica VN1482 dạng lỏng với nhiệt độ khác 27 Bảng 3.2.4: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang chủng Isaria javanica VN1482 mức nhiệt độ khác 28 Bảng 3.2.5: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun Isaria javanica VN1487 dạng lỏng với nhiệt độ khác 29 Bảng 3.2.6: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang Isaria javamca VN1487 dạng lỏng với mức nhiệt độ khác 31 Bảng 3.2.7: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun Isaria javanica VN18011 dạng lỏng với nhiệt độ khác 32 Bảng 3.2.8: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang ỉsana javanica VN1801 dạng lỏng với mức nhiệt độ khác 33 Bảng 3.2.9: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun Isaria javanica VN1802 dạng lỏng với nhiệt độ khác 35 Bảng 3.2.10: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang Isaria javanica VN1802 dạng lỏng với mức nhiệt độ khác 36 Bảng 3.2.11: Vòng đời phát triển chủng nấm VN1472 thí nghiệm nhiệt độ .40 Bảng 3.2.12: Vòng đời phát triển chủng nấm VN1482 thí nghiệm nhiệt độ .41 Bảng 3.2.13: Vòng đời phát triển chủng nấm VN1487 thí nghiệm nhiệt Bảng 3.3.2: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang Isaria javanica VN1472 dạng lỏng với độ ẩm khác .52 Bảng 3.3.3: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun Isaria javamca VN1482 dạng lỏng với độ ẩm khác .54 Bảng 3.3.5: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun Isaria javanica VN1487Ở dạng lỏng với độ ấm khác 57 Bảng 3.3.4: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang Isaria javanica VN1482 dạng lỏng với độ ẩm khác .55 Bảng 3.3.6: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang Isaria javamca VN1487 dạng lỗng với độ ẩm khác .58 Bảng 3.3.7: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun Isaria javanica VN1801 dạng lỗng với độ ẩm khác .60 Bảng 3.3.8: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang ỉsana javanica VN1801 dạng lỏng với độ ẩm khác .61 Bảng 3.3.9: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun Isaria javamca VN1802 dạng lỏng với độ ẩm khác .63 Bảng 3.3.10: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang Isana javamca VN1802 dạng lỏng với độ ẩm khác .64 Bảng 3.3.11: Vòng đời phát triển chủng nấm VN1472 thí nghiệm độ ấm 68 Bảng 3.3.12: Vòng đời phát triển chủng nấm VN1482 thí nghiệm độ ấm 69 Bảng 3.3.13: Vòng đời phát hiển chủng nấm VN1487 thí nghiệm độ ẩm 73 Vlll DANH MỤC HÌNH ANH Trrang Ilình 3.1: Iliệu lực phòng trừ chế phẩm VN1472 thí nghiệm nhiệt độ 25 Hình 3.2: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang chủng VN1472 26 Ilình 3.3: Iliệu lực phòng trừ sâu khoang VN1487 thí nghiệm nhiệt độ30 Hình 3.4: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang chủng VN1487 thí nghiệm nhiệt độ 31 Hình 3.5: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang Isana javanica VN1801 dạng lỏng với mức nhiệt độ khác .34 Hình 3.6: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun Isaria ịavamca VN1802 dạng lỏng với nhiệt độ khác 35 Hình 3.7: Tỷ lệ nhiểm nấm sâu non sâu khoang sau phun Isaria javanica VN1802 dạng lỏng với nhiệt độ khác .37 Hình 3.8: Vòng đời phát triển chủng nấm Isaria javanica VN1487 ừên sâu khoang 42 Hình 3.9: Vòng đời phát triển chủng nấm VN1801 thí nghiệm nhiệt độ sâu khoang 44 I lình 3.10: Vòng đời phát triển chủng nấm VN1802 thí nghi ệm nhiệt độ 49 Hình 3.11: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun ỉsaria iavanica VN1472 dạng lỗng với độ ấm khác 51 Hình 3.12 Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang Isaria iavanica VN1472 dạng lỏng với độ ấm khác 52 Hình 3.13: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun Isaria ịavanica VN1482 dạng lỏng với độ ẩm khác 54 Hình 3.14: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang Isaria javanica VN1482 dạng lỏng với độ ẩm khác .56 Hình 3.15: Hiệu lực phòng trừ chế phấm VN1487 TN ảnh hưởng độ ẩm57 Hình 3.16: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang chủng VN1487 58 Hình 3.17: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun Isaria ịavamca IX Hình 3.18: Hiệu lực phòng trừ sâu khoang nấm Isana javanica VN1802 mức độ ẩm khác 62 Hình 3.19: Tỷ lệ chết sâu non sâu khoang sau phun Isaria javamca VN1802 dạng lỗng với độ ấm khác 63 Hình 3.20: Tỷ lệ nhiễm nấm sâu khoang Isariaịavanica VN1802 dạng lỏng với độ ấm khác .65 Hình 3.21: Vòng đời phát triến chủng nấm VN1472 thí nghiệm độ ấm .66 Hình 3.22: Vòng đời phát triển chủng nấm Isaria javanica VN1482 sâu khoang thí nghiệm độ ấm 67 Hình 3.23: Vòngđời phát triển chủngnấm VN1487 thí nghiệm độ ẩm 71 Hình 3.24: Vòngđời phát triển chủngnấm VN1801 thí nghiệm độ ấm 72 70 3.3.23 Anh hưỏng aìa nhiệt độ ổn định 25° độ ẩm khác đến vòng đòi phát triển chủng nam Isaria javamca VN1487 sâu khoang Qua kết thể bảng 3.3.13 sâu khoang hại lạc thời gian từ nấm ỉ.ịavanica VN1487 tiếp xúc xâm nhiễm đến làm sâu khoang chết Ghi chú: Các chữ a, b,c cột sai khác có ỷ nghĩa mặt thống kê mức p< 0,05 trung bình ngắn 3,10 ± 0,45 ngày (ở độ ấm 80%) dài 3,61 ± 0,34 ngày (ở độ ẩm 70%) Thời gian trung bình đến nấm bắt đầu mọc bên xác sâu chết lớn ở độ ấm 80% nhiệt độ khác 3,06 ± 0,35 ngày ngan CT2 (ở độ ẩm 70%) 2,06 ± 1,00 ngày , giai đoạn kéo dài ừong khoảng từ 2,06- 3,06 ngày Thời gian trung bình đến thấy nấm bao phủ hoàn toàn mọt nhanh 2,36 ± 1,09 ngày(ở độ ẩm 90%), chậm 2,44 ± 0,14; thời gian trung bình đến bào tử nấm bắt đau hình thành nhanh 2,40 ± 0,77 ngày (ở độ ẩm 70%) chậm 2.93 ± 0,31 ngày (ở độ ấm 60%), thời gian giai đoạn nâm 71 B TPT io 'S BP =D □ CT4 o g NTVI vcc - -1 -1 - -1 - -1- - - -1 - -1 Ngày 33.2.4 Ảnh hưởng nhiệt độ ổn định 25° độ ẩm khác đến vòng đòi phát triển chủng nam Isaria ịavanica VN 1801 sâu khoang Sau phun chế phẩm I ịavanica VN1801 lên sâu khoang hại lạc thời gian từ nấm tiếp xúc xâm nhiễm đến làm sâu khoang chết trung bình ngan 3,23 ± 0,34 ngày (ở độ ẩm 70%) dài 3,98 ± 0,45 ngày (ở độ ẩm 80%) Thời gian trung bình đến nấm bắt đầu mọc bên xác sâu chết lớn ở độ ẩm 90% 2,41 ± 0,99 ngày ngắn CT2 2,30 ± 1,00 ngày, giai đoạn Công thức Nấm bao 74 73 72 Bảng 3.3.14: 3.3.13: Vòng đời dời phát triển chủng nấm VN1487 VN1801 thí nghiệm nhiệt dộ ổn định 25° độ ẩm khác Ở vòng đời ngắn thời gian nấm gây chết sâu khoang trung bình 3,60 + 0,34 ngày, sau trình biến đổi bệnh bên trung bình sau 2,07 ± 1,00 ngày sợi nấm phát triển bên thể thời gian để hệ sợi nấm Công thức bao phủ thể sâu khoang trung bình 2,30 ± 0,78 ngày Cùng với qúa trình hình thành sợi nấm bắt đầu phát sinh bào tử nhanh, bào tử xuất sợi nấm bào phủ phần sâu khoang, nhung sau 2,67 ± 0,76 ngày sợi nấm bao phủ hoàn toàn thể sâu bào tử nấm hình Ghi chú: Các chữ a,b,c cột sai khác có ý nghĩa mặt thống kê mức p[...]... trừ sâu khoang chủ yếu sử dụng thuốc hóa học nhưng hiệu quả không cao Loài nấm Isaria javanica thu thập ở 3 3 Nội dung nghiên cửu (1) Đặc điểm sinh học của nấm ký sinh côn trùng Isaria javamca\ (2) Vòng đời gây bệnh của nấm ký sinh côn trùng Isaria ịavanica trên vật chủ sâu khoang (Spodoptera litiira); (3) Ảnh hưởng của các yếu tố nhiệt độ, độ ẩm đến khả năng gây bệnh của nấm ký sinh côn trùng Isaria. .. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 2.1 Thòi gian và địa điểm nghiên cứư * Thòi gian nghiên cứu: từ 3/2011 - 6/2013 * Địa điếm nghiên cứu: - Nhân nuôi sinh khối trên môi trường rắn tại phòng thí nghiệm công nghệ nấm ký sinh côn trùng, tổ Bảo vệ thực vật, khoa Nông Lâm Ngư, Đại học Vinh - Phòng trừ sâu hại cây trồng trong phòng thí nghiệm tại phòng công nghệ nấm ký sinh côn trùng và phòng thí nghiệm côn trùng nông... trong phòng trừ sinh học sâu hại cây ừồng và làm dược liệu Khái niệm “Nấm ký sinh côn trùng - Entomology pathogenic íimgi (EPF)” hay “nấm côn trùng - Insect íiingi” được các nhà khoa học sử dụng như là một thuật ngữ đồng nghĩa, đề cập về nhóm sinh vật (nấm) ký sinh gây bệnh cho côn trùng Nấm ký sinh côn trùng được chia thành 4 nhóm chính: (1) Ký sinh trong tức là nấm ký sinh trong các nội quan, khoang. .. chất sinh học cao (cordycepine, adenosine, ) Hiện nay, tập trung nghiên cứu nhiều về 2 loài Đông trùng hạ thảo là Cordycep militaris, Cordyceps sinensis và loài Isana temupes 1.2.2 Tình hình nghiên cừu nam kỷ sinh côn trùng ở Việt Nam Nghiên cứu về sử (lụng nấm ký sinh côn trùng trong phòng trù sâu hại Cũng như ngành lâm nghiệp, ngành nông nghiệp hiện nay đang phải đối mặt mới các loại dịch hại côn trùng. .. sinh trong các nội quan, khoang cơ thế của côn trùng: (2) Ký sinh ngoài tức là nấm phát triển trên lóp cuticun vỏ cơ thể côn trùng và gây nên bệnh hại 5 Như vậy, nấm ký sinh côn trùng (EPF) được dùng để mô tả hiện tượng nấm ký sinh ừên hoặc trong ký chủ côn trùng Theo Tzean và cs (1997), khái niệm này cũng được dùng cho nấm ký sinh trên nhện bởi vì nhện và côn trùng là 2 nhóm (lóp) trong một ngành (phyllum)... phòng trừ bằng một số nấm ký sinh côn trùng như phòng trừ sâu hại rau thập tự, rầy nâu bằng nấm Metarhizium anisopliae; B.bassiana; B.amorpha Ket quả cho thấy khả năng phòng trừ côn trùng gây hại nông nghiệp của nấm ký sinh côn trùng khá cao và bộc lộ nhiều điểm ưu việt Tuy nhiên, trên đối tượng sâu sâu khoang hại cây trồng, công việc này chưa thật sự được chú tâm Đặc biệt, việc nghiên 19 Chương 2 ĐÓI... trên vật chủ sâu khoang {Spodoptera litura); (4) Đánh giá khả năng sử dụng chủng nấm ký sinh côn trùng Isaria javanica phòng trừ sâu khoang (Spodoptera liturà) trong điều kiện thí nghiệm 4 1.1 Cơ sỏ' khoa học 1.1.1 Nấm kỷ sinh côn trùng (Entomopathogenic fungi - EPF) Các loài nấm ký sinh côn trùng thường phân bố ừong các khu rùng nhiệt đói đậc biệt ở những cánh rừng nhiệt đới nguyên sinh Đây là nguồn... cứu ban đầu của Trần Ngọc Lân và cs (2008) Có thể nói, nấm ký sinh côn trùng là nhóm chưa được quan tâm đúng mức, nghiên cứu ứng dụng nấm ký sinh côn trùng trong kiểm soát sinh học, dược liệu và bảo tồn đa dạng sinh học đang còn là khoảng trống ở Việt Nam cũng như trên thế giới Trong nhóm nấm ký sinh côn trùng, các giống Cordyceps, Isaria được đánh giá vừa đa dạng và có nhiều đặc tính sinh học quý... loài, Nghiên cứu về đa dạng các loài nấm ký sinh côn trùng tại Bắc Mỹ phát 15 Luangsa-ard, 2006) [14] Các nhà khoa học Biotec đã phân loại nấm ký sinh côn trùng về hình thái, sinh học (Janet Jennifer Luangsa-ard, 2006, 2007) [34]; phân loại các loài Cordyceps bằng sinh học phân tử DNA (Sung G H., 2007) [21] Ket quả nghiên cứu của Liu z Y et al (2001) [20] đã phát hiện ra tác nhân gây bệnh mói của côn trùng. .. Âu trùng tuổi 2 có thời gian gây chết 50% (LT50) ngắn hơn các tuổi còn lại Mặt khác, các tác giả này còn nghiên cứu phương pháp nhiễm bào tử của 3 loài nấm ký sinh côn trùng nói trên vào đất và kỹ thuật nhúng trực tiếp ấu trùng vào dịch chiết bào tử để phòng trừ nhộng của sâu xanh ở trong đất Ket quả thí nghiệm cho thấy cả 3 loài nấm ký sinh côn trùng nói trên, đậc biệt là p fumosoroseus, có tiềm năng ... hình nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng giới Việt Nam 1.2.1 Tình hình nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng giới 1.2.2 .Tình hình nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng Việt Nam. .. ký sinh côn trùng chia thành nhóm chính: (1) Ký sinh tức nấm ký sinh nội quan, khoang côn trùng: (2) Ký sinh tức nấm phát triển lóp cuticun vỏ thể côn trùng gây nên bệnh hại Như vậy, nấm ký sinh. .. bệnh nấm ký sinh côn trùng Isaria ịavanica vật chủ sâu khoang (Spodoptera litiira); (3) Ảnh hưởng yếu tố nhiệt độ, độ ẩm đến khả gây bệnh nấm ký sinh côn trùng Isaria javanica vật chủ sâu khoang