GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA SƯ PHẠM BỘ MƠN SƯ PHẠM HĨA HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP Ngành Sư Phạm Hóa Học KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO ETHYL ACETATE TỪ TRÁI QUÁCH (Limonia acidissima L.) HỌ CAM (Rutaceae) Ở TỈNH TRÀ VINH Cán hướng dẫn: Ths Ngô Quốc Luân Sinh viên thực hiện: Đặng Huỳnh Giúp Lớp Sư Phạm Hóa Học K37 MSSV: 2111811 Năm Học 2015 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) LỜI CẢM ƠN - Trong q trình thực luận văn, để có kết hơm ngồi nổ lực thân tơi nhận quan tâm, hướng dẫn nhiệt tình q Thầy cơ, cổ vũ, động viên to lớn từ gia đình bạn lớp sư phạm Hóa học khóa 37 Vì với lịng trân trọng biết ơn sâu sắc, tơi xin gửi lời cảm ơn đến: Thầy Ngô Quốc Luân, Bộ mơn Sư phạm Hóa học - Khoa Sư Phạm, trường Đại Học Cần Thơ Người tận tình truyền đạt cho kinh nghiệm quý báu đ ầy tâm huyết suốt q trình tơi thực đề tài Thầy tạo điều kiện tốt cho tơi suốt thời gian nghiên cứu hồn thành luận văn Quý Thầy cô Bộ môn Sư phạm Hóa học, Khoa Sư phạm, Trường Đại học Cần Thơ truyền đạt kiến thức hữu ích làm tảng cho thực đề tài tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình nghiên cứu đến lúc hoàn thành luận văn tốt nghiệp Các anh chị, bạn - người đồng hành tơi động viên, giúp đỡ, góp ý cho nhiều suốt thời gian qua Ba mẹ gia đình giúp đỡ tơi tinh thần vật chất, ln động viên, khích lệ thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn! LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP i ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Cán hướng dẫn: ThS Ngô Quốc Luân Tên đề tài: “Góp phần khảo sát thành phần hóa học trái Quách (Limonia acidissima L.), Họ Cam tỉnh Trà Vinh” Sinh viên thực hiện: Đặng Huỳnh Giúp MSSV: 2111811 Nội dung nhận xét: a Nhận xét hình thức luận văn tốt nghiệp: b Nhận xét nội dung luận văn tốt nghiệp: c Nhận xét sinh viên tham gia thực đề tài: d Kết luận, đề nghị điểm: Cần Thơ, ngày tháng năm 2015 Cán hướng dẫn Ngô Quốc Luân LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ii ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN 1 Cán phản biện: Tên đề tài: “Góp phần khảo sát thành phần hóa học trái Quách (Limonia acidissima L.), Họ Cam tỉnh Trà Vinh” Cán hướng dẫn: Ngô Quốc Luân Sinh viên thực hiện: Đặng Huỳnh Giúp MSSV: 2111811 Lớp Sư Phạm Hóa Học – Khóa 37 Nội dung nhận xét: a Nhận xét hình thức luận văn tốt nghiệp: b Nhận xét nội dung luận văn tốt nghiệp: Đánh giá nội dung thực đề tài: Những vấn đề hạn chế: c Nhận xét sinh viên tham gia thực đề tài: d Kết luận, đề nghị điểm: Cần Thơ, ngày…….tháng……năm 2015 Nguyễn Văn Hùng LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP iii ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN Cán phản biện: Tên đề tài: “Góp phần khảo sát thành phần hóa học trái Quách (Limonia acidissima L.), Họ Cam tỉnh Trà Vinh” Cán hướng dẫn: Ngô Quốc Luân Sinh viên thực hiện: Đặng Huỳnh Giúp MSSV: 2111811 Lớp Sư Phạm Hóa Học – Khóa 37 Nội dung nhận xét: e Nhận xét hình thức luận văn tốt nghiệp: f Nhận xét nội dung luận văn tốt nghiệp: Đánh giá nội dung thực đề tài: Những vấn đề hạn chế: g Nhận xét sinh viên tham gia thực đề tài: h Kết luận, đề nghị điểm: Cần Thơ, ngày…….tháng……năm 2015 Nguyễn Thị Thu Thủy LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP iv ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT 13 C-NMR : Carbon (13) Nuclear Magnetic Resonance (phổ cộng hưởng từ hạt nhân Carbon 13) H-NMR : Proton Nuclear Magnetic Resonance (phổ cộng hưởng từ proton) BuOH : Buthan-1-ol (CH3 CH2 CH2CH2OH) C:M : Chloroform : Methanol CDCl3 : CHCl3 hydro (H) deuteri (D) CSB : Chỉ số tạo bọt d : doublet (Mũi đôi) đđ : Đậm đặc dd : doublet of doublet DEPT : Distortionless Enhancement by Polarization Transfer DMC : Dicholoromethane (CH2Cl2) DMSO : Dimethylsulfoxyde ((CH3 )2SO) DPPH : α,α-diphenyl-β-picrylhydrazyl E:M : Ethyl acetate : Methanol EtOAc : Ethyl acetate(CH3 COOC2 H5) EtOEt : Diethyl ether (C2H5OC2H5) EtOH : Ethanol (C2H5 OH) g : gram Glc : Glucosyde H:E : n-Hexane : Ethyl acetate HMBC : Heteronuclear Multiple Bond Correelation HSQC : Heteronuclear Single Quantum Coherence J : số ghép spin kg : kilogram m : multiplet (Mũi đa) Me- : Methyl (CH3-) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP v ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) MeOH : Methanol (CH3 OH) MHz : Mega Hertz mp : melting point (Nhiệt độ nóng chảy) MPLC : Medium Pressure Liquid Chromatography (Sắc ký cột trung áp) MS : Mass Spectrum/Spectrometry (Phổ khối lượng) NMR : Nuclear Magnetic Resonance (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân) PĐ : Phân đoạn PE : Petroleum Ether (Ete dầu hỏa) ppm : part per million (Phần triệu) q : quartet (Mũi bốn) Rf : Retention factor Rha : Rhamnoglucosyde s : singlet (Mũi đơn) t : triplet (Mũi ba) TLC : Thin Layer Chromatography (sắc ký mỏng) UV-Vis : Ultraviolet Visible Spectroscopy (phổ tử ngoại khả kiến) δ : chemical shift (độ dời hóa học) λmax : maximum absorption wavelength (bước sóng cực đại hấp thu) ν : frequency (tần số dao động) IC50 : Nồng độ ức chế 50% IC50 : Nồng độ ức chế 100% KLPT : Khối lượng phân tử LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP vi ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN ii NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN iii NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN iv DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT v DANH MỤC CÁC HÌNH xi DANH MỤC CÁC BẢNG .xii TÓM TẮT NỘI DUNG LUẬN VĂN xiii MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN I TỔNG QUAN VỀ CÂY QUÁCH II.1 Mô tả I.1.1 Khái quát phân lo ại thực vật I.1.2 Mô tả I.2 Nguồn gốc, phân bố sinh thái I.2.1 Nguồn gốc, phân bố I.2.2 Sinh thái I.3 Ứng dụng y học dân gian trái quách II TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGỒI NƯỚC II.1 Tình hình nghiên cứu ngồi nước II.2 Tình hình nghiên cứu nước III TÍNH CẤP THIẾT, MỚI MẺ VÀ Ý NGHĨA THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI 14 IV MỤC TIÊU, ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHẠM VI NGHIÊN CỨU .15 IV.1 Mục tiêu 15 IV.2 Đối tượng nghiên cứu .15 IV.3 Nội dung phạm vi nghiên cứu đề tài 15 IV.3.1 Nội dung nghiên cứu .15 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP vii ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) IV.3.2 Phạm vi nghiên cứu .16 V PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 V.1 PHƯƠNG PHÁP CÔ LẬP HỢP CHẤT .16 V.1.1 Phương pháp chiết 16 V.1.2 Phương pháp s ắc ký 16 V.2 PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC 17 V.2.1 Phương pháp đo số vật lý 17 V.2.2 Phương pháp phổ 18 V.3 PHƯƠNG PHÁP THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG VI SINH VẬT KIỂM ĐỊNH 19 Chương THỰC NGHIỆM .20 I NGUYÊN LIỆU, HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ 20 I.1 NGUYÊN LIỆU 20 I.1 Thu hái nguyên liệu 20 I.2 Xử lý mẫu nguyên liệu 20 I.2 HÓA CHẤT 20 I.3 THIẾT BỊ 21 II ĐỊNH TÍNH SƠ BỘ THÀNH PHẦN HĨA HỌC CỦA TRÁI QUÁCH 21 II.1 KHẢO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CỦA CÁC HỢP CHẤT STEROID 21 II.2 KHẢO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CỦA CÁC HỢP CHẤT FLAVONOID 22 II.3 KHẢO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CỦA CÁC HỢP CHẤT ALCALOID .22 II.4 KHẢO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CỦA CÁC HỢP CHẤT SAPONIN 22 II.4.1 Dựa vào số tạo bọt để xác định diện saponin 22 II.4.2 Dựa vào phản ứng đặc trưng 23 II.5 KHẢO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CỦA CÁC HỢP CHẤT TANIN 23 II.6 KHẢO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CỦA CÁC HỢP CHẤT GLYCOSIDE 23 II.7 KHẢO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CỦA CÁC HỢP CHẤT COUMARINE 24 III ĐIỀU CHẾ CAO THÔ, CÔ LẬP VÀ TINH CHẾ HỢP CHẤT 25 III.1 ĐIỀU CHẾ CÁC CAO THÔ 25 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP viii ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) III.2 CÔ LẬP VÀ TINH CHẾ CHẤT TỪ CAO EtAOc 27 III.2.1 Cô lập 27 III.2.2 Tinh chế 28 II.2.1.1 Phân đọan FE2 28 II.2.2.2 Phân đoạn FE3 29 Chương KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 32 I KẾT QUẢ ĐỊNH TÍNH THÀNH PHẦN HĨA HỌC 32 II NHẬN DANH CÁC TINH CHẤT CÔ LẬP 33 II.1 MỘT SỐ ĐẶC TÍNH VẬT LÝ CỦA CÁC CHẤT CƠ LẬP 33 II.1.1 Chất LAFE02 33 II.1.2 Chất LAFE03 33 II.2 BIỆN LUẬN PHỔ NGHIỆM VÀ NHẬN DANH CẤU TRÚC 33 II.2.1 Chất LAFE02 33 II.2.2 Chất LAFE03 36 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .45 I KẾT LUẬN 45 II KIẾN NGHỊ 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO 47 DANH MỤC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ 49 PHỤ LỤC Phụ lục 1.1: PHỔ 1H-NMR CỦA LAFE02 PL1 Phụ lục 1.2: PHỔ 1H-NMR GIÃN RỘNG CỦA LAFE02 PL2 Phụ lục 1.3: PHỔ 13 C-NMR CỦA LAFE02 PL3 Phụ lục 1.4: PHỔ 13 C-NMR GIÃN RỘNG CỦA LAFE02 PL4 Phụ lục 1.5: PHỔ DEPT CỦA LAFE02 PL5 Phụ lục 1.6: PHỔ HMBC CỦA LAFE02 PL6 Phụ lục 1.7: PHỔ HMBC GIÃN RỘNG CỦA LAFE01 PL7 Phụ lục 1.8: PHỔ HMBC GIÃN RỘNG CỦA LAFE02 PL8 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ix ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.1 PHỔ 1H-NMR CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-10 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.2 PHỔ 1H-NMR GIÃN RỘNG CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-11 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.3 PHỔ 1H-NMR GIÃN RỘNG CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-12 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.4 PHỔ 13C-NMR CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-13 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.5 PHỔ 13C-NMR GIÃN RỘNG CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-14 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.6 PHỔ DEPT CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-15 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.7 PHỔ DEPT GIÃN RỘNG CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-16 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.8 PHỔ HMBC CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-17 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.9 PHỔ HMBC GIÃN RỘNG CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-18 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.10 PHỔ HMBC GIÃN RỘNG CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-19 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.11 PHỔ HMBC GIÃN RỘNG CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-20 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.12 PHỔ HMBC GIÃN RỘNG CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-21 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.13 PHỔ HSQC CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-22 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) Phụ lục 2.14 PHỔ HSQC GIÃN RỘNG CỦA LAFE03 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-23 ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L.) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP PL-24 ĐẶNG HUỲNH GIÚP ... Grahiphala; Kasayamlaphala (Sanskarit); Divul (Sinhalese); Vilam Palam (Tamil); Vellaga Pandu (Telugu) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẶNG HUỲNH GIÚP GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA. .. PHẦN HÓA HỌC TRÁI QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L. ) NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN 1 Cán phản biện: Tên đề tài: “Góp phần khảo sát thành phần hóa học trái Quách (Limonia acidissima L. ), Họ. .. QUÁCH (LIMONIA ACIDISSIMA L. ) NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN Cán phản biện: Tên đề tài: “Góp phần khảo sát thành phần hóa học trái Quách (Limonia acidissima L. ), Họ Cam tỉnh Trà Vinh? ??