Xây dựng mô hình gây rối loạn lipid máu hỗn hỢp dẩu cholesterol chứa lượng thấp acid cholic chuột cống trắng Nguyễn Trọng Thông, Vũ Thị Ngọc Thanh, Nguyễn Phương Thanh, Đàm Đình Tranh Trường Đợi học YHà Nội SUMMARY Lowering-lipid effect o f drug is evaluated based on dyslipidemia model on animals The objective o f this study is to build a dyslipidemia model in rats using cholesterol mixed oil with low amount o f cholic acid Wistar rats were used in this study Exogenous model o f hyperlipidemia was induced by cholesterol mixed oil (1 mL cholesterol mixed oil includes 0.1 g cholesterol, low-amount o f acid cholic: 0.7 g; 0.03 g propylthiouracil and peanut oil): Rats were divided into groups: (1) Control group: received drinking water m ĩ 00 body weighưday; (2) Model group: received cholesterol mixed oil m l 00 g body weight/day: (3) Positive group: received cholesterol mixed oil 1m U l 00 g body weight and treated with lovastatin 10 mg/kg for weeks Results showed that cholesterol mixed oil caused significant changes in blood lipid: increased TC 103.2%, LDL-C 153.2%, and triglyceride 16.4%, it did not affect HDL - c lovastatin significantly decreased TC, LDL - c, triglycerid and increased HDL - c In conclusion, cholesterol mixed oil with low amount o f cholic acid was effective in causing model ofdyslipidemia on animals Từ khóa: Acid cholic, cholesterol, mô hình rối loạn lipid máu Đặt vấn đề Để nghiên cứu thuốc điều trị rối loạn lipid máu, trước hết phải gây mô hình tăng lipid máu Nhiều loài động vật sử dụng nhiểu mô hình dược lý nghiên cứu áp dụng động vật thực nghiệm Các mô hình thuộc loại: gây tăng cholesterol lipid máu ngoại sinh (đưa cholesterol mỡ theo đường thức ăn), gây tăng cholesterol máu nội sinh (gây tăng tổng hợp cholesterol) phối hợp hai loại Động vật sử dụng mô hình tăng cholesterol máu thường là: thỏ, chuột cống, chuột nhắt, hamster, dùng khỉ, lợn, chim cút Trên thỏ, mô hình Anichkov coi mô hình kinh điển tiến hành cách cho thỏ ăn V cholesterol 0,3 - 0,5 g/kg/ngày năm Tại Việt Nam, Đoàn Thị Nhu cộng gây mô hình tăng cholesterol máu cách cho thỏ đực uống cholesterol hoà tan dầu lạc với liểu 0,5 g/kg/ ngày kéo dài liên tục tuẩn [1].Tuy nhiên thỏ loài động vật thường ăn thực vật, nên mô hình gây rối loạn lipid máu thỏ có nhiểu điểm không tương với người Nhiều nhà nghiên cứu giới sử dụng chuột cống trắng trưởng thành với mô hình gây tăng cholesterol bổ sung vào chế độ ăn 1% cholesterol, 1% acid mật (acid cholic) 0,5% kháng giáp trạng propỵlthiouracil vòng tuẩn Bổ sung acid cholic làm tăng hấp thu cholesterol nồng độ cholesterol huyết tăng mạnh sử dụng thêm thuốc kháng giáp trạng Nassiri cộng sựđã cải tiến mô hình cách cho chuột uống lOml/kgcân nặng hỗn hợp dầu cholesterol gổm: 1Omg cholesterol, g propylthiouracil 10 g acid cholic, dầu lạc vừa đủ 100 ml Kết cho thấy nhóm sử dụng 10 ml hỗn hợp dầu cholesterol/ kg/ngày, cholesterol toàn phần tăng lên 9,65 ± 0,1 mmol/l nhóm đối chứng 3,7 ± 0,1 mmol/l, tức tăng lên 160% [2], Tuy mô hình cho kết tốt hàm lượng acid cholic sử dụng cao, giá thành đắt Để xây dựng mô hình thực nghiệm có tính khả thi cao, chi phí rẻ có nhiểu đặc điểm tương với rối loạn lipid máu người, tiến hành nghiên cứu với mục tiêu: Xây dựng mô hình rối loạn lipid máu chuột cống trâng bòng hỗn hợp dâu cholesterol chứa lượng thấp add cholic Đối tượng, nguyên liệu - thiết bị phường pháp nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu Chuột cống trắng chủng Wistar hai giống, khoẻ mạnh, trọng lượng 150 - 180 g Chuột cống trắng cung cấp Trung tâm Chăn nuôi, Học viện Quân y Chuột cống trắng nuôi ngày trước nghiên cứu suốt thời gian nghiên cứu cho ăn thức ăn chuẩn riêng Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương cung cấp Nguyên liệu - thiết bị Lovastatin viên nén 20 mg (BRAWN - Ấn Độ) Kít định lượng chất chuyển hóa máu: Cholesterol toàn phẩn, triglycerid, HDL-cholesterol hãng DIALAB Máy móc: Máy Screen master hãng Hospitex Diagnostics (Italy) Phương pháp nghiên cứu Xây dựng mô hình gây rối loạn lipidmáu ngoại sinh: Áp dụng điểu chỉnh mô hình theo Nassiri cộng (2009) cách sử dụng hỗn hợp dầu cholesterol chứa hàm lượng thấp acid cholic propylthiouracil (PTU) chuột cống trắng (bảng 1) [2] Trong mô hình này, sử dụng hàm lượng thấp acid cholic PTU với lý hạn chế gia tăng mức số lipid máu, đánh giá xác tác dụng thuốc Đồng thời với việc sử dụng hàm lượng thấp hai chất tiết kiệm chi phí nghiên cứu Báng l ĩhònh phán hỗn hợp dâu cholesterol Thành phán Mô hình Nassiri (2009) Mô hình điéu chình Cholesterol (g/ml) 0,1 0,1 Acid cholic (g/ml) 0,1 0,01 PTU (g/ml) 0,03 0,005 Dẩu lạc vừa đủ ml ml Chuột cống chia thành lô, lô 15 với tỉ lệ đực/cái lô, lô uống thuốc tuần sau: lô (lô chứng, n = 15): hàng ngày chuột uống nước lọc với thể tích ml/IOOg chuột Lô (lô mô hình, n = 15): hàng ngày chuột uống hỗn hợp dầu cholesterol ml/100 g chuột Lô (đối chứng dương, n = 15): hàng ngày chuột uống hỗn hợp dẩu cholesterol lô 2, sau uống lovastatin liểu 10 mg/kg Tiến hành cân kiểm tra trọng lượng chuột tất lô thời điểm trước, sau thí nghiệm 1,2 tuẩn Vào ngày đẩu tiên ngày thứ 29 (sau tuần), cho chuột lô nhịn ăn qua đêm, uống nước tự Lấy máu đuôi chuột tiến hành định lượng cholesterol toàn phần (TC), triglycerid (TG), HDL cholesterol (HDL - C) Tính LDL cholesterol (LDL - C) theo công thức Frieldewald: (LDL - C) = (TC) - (HDL - C) - (TG/5) Kết nghiên cứu * Thay đổi cân nặng lô chuột nghiên cứu □ Chíniạtrắna 0Mòhùih ^Loi'astatin Trướ c Tuần Tuần Tuần M Sựthayđổi cân nặng chuột cóng trông SQU tuán f x ± SD, g) Kết cho thấy cân nặng lô chuột đểu tăng cân sau 1,2 tuắn, khác biệt có ý nghĩa thống kê lô chứng, lô mô hình lô uống lovastatin thời điểm trước nghiên cứu, sau 1,2 4tuắn * Kết quà gây mô hình rối loạn lipid máu chuột cống hỗn hợp dâu cholesterol: Bàng ĩ Mô hình íỗi loạn lipid máu bồng hỗn hợp dâu áoìesteioi Chỉ số (sau tu án ) x ± S O ,m g /d L Lô n TG TC HDL-C LDL-C (Phẩn trăm thay đổi so với lô chứng trắng) Chứng trắng 15 132,2 ± 2 ,0 119,7 ± 1 ,5 15,8 ± ,1 77,4 ± ,7 Mô hình 15 153,8 ± 2,6 * (T16,4% ) 243,2 ± 47,8” " (t1 ,2 % ) 16,4 ± ,0 (T ,8% ) 196,0 ± ,4 " ' (t1 ,2 % ) Lovastatin lO m g/kg 15 134,6 + 24,1+ 181,4 ±29,0++ 19,4 ± 4,1+ 135,5 ±30,7++ Chú thích: Khác biệt so với lô chứng yãp < 0,05; " :p ... với lô mô hình Bàn luận Kết cho thấy mô hình rối loạn lipid máu chuột gây dựng thành công hỗn hợp dẩu cholesterol chứa lượng thấp acid cholic Mô hình có đặc điểm giống với rối loạn lipid máu người,... Hỗn hợp dẩu cholesterol với lượng thấp acid cholic sau tuẩn gây tình trạng rối loạn lipid máu rõ rệt số TC (103%), TG (16%), LDL - c (154%) chuột cống trắng máu hỗn hợp dầu cholesterol chứa lượng. .. lô mô hình lô uống lovastatin thời điểm trước nghiên cứu, sau 1,2 4tuắn * Kết quà gây mô hình rối loạn lipid máu chuột cống hỗn hợp dâu cholesterol: Bàng ĩ Mô hình íỗi loạn lipid máu bồng hỗn hợp