BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP CHUYÊN NGÀNH VI SINH VẬT HỌC KHẢO SÁT KHẢ NĂNG PHÒNG TRỊ BỆNH CHÁY BÌA LÁ LÚA CỦA VI KHUẨN Bacillus safensis TRÊN RUỘNG LÚA TỈNH AN GIANG VÀ TIỀN GIANG CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN TS NGUYỄN ĐẮC KHOA NGUYỄN HOÀNG THÔNG MSSV: 3113758 Lớp: VSV K37 Cần Thơ, tháng 12/2014 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP CHUYÊN NGÀNH VI SINH VẬT HỌC KHẢO SÁT KHẢ NĂNG PHÒNG TRỊ BỆNH CHÁY BÌA LÁ LÚA CỦA VI KHUẨN Bacillus safensis TRÊN RUỘNG LÚA TỈNH AN GIANG VÀ TIỀN GIANG CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN TS NGUYỄN ĐẮC KHOA NGUYỄN HOÀNG THÔNG MSSV: 3113758 Lớp: VSV K37 Cần Thơ, tháng 12/2014 PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN TS Nguyễn Đắc Khoa Nguyễn Hoàng Thông DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày .tháng năm 2014 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG LỜI CẢM TẠ Trong thời gian thực luận văn tốt nghiệp Trường Đại học Cần Thơ, nhận nhiều quan tâm động viên từ gia đình, hướng dẫn dạy tận tình quý Thầy Cô giúp đỡ nhiệt tình bạn bè để hoàn thành luận văn tốt nghiệp Đầu tiên xin chân thành cảm ơn Ban Lãnh đạo tất quý Thầy Cô Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học tận tình truyền đạt kiến thức tạo điều kiện cho em học tập, nghiên cứu Xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Thầy Nguyễn Đắc Khoa, người tận tâm dìu dắt, dẫn truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu học tập sống cho em suốt thời gian học tập trình thực thí nghiệm viết luận văn Xin chân thành biết ơn Anh (Chú) Nguyễn Văn Rô, Nguyễn Văn Bé Tư nông dân địa điểm thí nghiệm tỉnh Tiền Giang An Giang hỗ trợ tạo điều kiện tốt cho suốt trình làm thí nghiệm thời gian thực luận văn tốt nghiệp Đại học Thân gửi đến Anh (chị) Trần Quốc Tuấn, Nguyễn Đặng Ngọc Giàu, Nguyễn Đan Vân, Trần Văn Dương, Trương Văn Xạ, Trần Kim Thoa bạn Tô Anh Khoa lời cảm ơn chân thành hỗ trợ nhiều trình thực luận văn Chân thành cảm ơn bạn nhóm bệnh nhiệt tình giúp đỡ, động viên cho lời khuyên bổ ích thời gian học tập lúc thực đề tài Xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Cha Mẹ ủng hộ phương diện, sức mạnh tinh thần giúp vươn lên sống Cuối lời, xin kính chúc Cha Mẹ, quý Thầy Cô Anh Chị dồi sức khỏe thành công lĩnh vực Cần Thơ, ngày… tháng… năm 2014 Nguyễn Hoàng Thông Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT TÓM LƯỢC Hiệu phòng trị bệnh cháy bìa (bạc lá) lúa Xanthomonas oryzae pv oryzae (Xoo) vi khuẩn đối kháng Bacillus safensis (VTTS1) khảo sát ruộng lúa địa điểm Cái Bè – Tiền Giang Long Xuyên – An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Mục tiêu đề tài khảo sát khả phòng trị bệnh cháy bìa lúa vi khuẩn đối kháng B safensis ruộng lúa tỉnh An Giang Tiền Giang Các nghiệm thức xử lý với vi khuẩn đối kháng (B safensis) biện pháp ngâm hạt, phun qua chủng vào đất bố trí theo khối hoàn toàn ngẫu nhiên với lần lặp lại, nghiệm thức đối chứng xử lý thuốc hóa học theo nông dân địa điểm nghiệm thức không xử lý Cả nghiệm thức xử lý với vi khuẩn đối kháng (B safensis) cho hiệu khống chế bệnh cháy bìa lá, nghiệm thức chủng vi khuẩn vào đất 24 trước sạ cho hiệu cao nghiệm thức ngâm hạt, phun qua cho hiệu tương đương với phun thuốc hóa học khác biệt có ý nghĩa so với đối chứng Hiệu ghi nhận đến 60 ngày sau sạ Nghiệm thức chủng vi khuẩn vào đất cho suất cao giảm tỉ lệ lem lép hạt so với nghiệm thức đối chứng không xử lý cho hiệu tương đương so với đối chứng sử dụng thuốc hóa học Biện pháp phun vi khuẩn vào đất 24 trước sạ vừa cho hiệu cao vừa thuận tiện ứng dụng nên có triển vọng trình quản lý bệnh cháy bìa đồng ruộng nông dân Từ khóa: Lúa, Xanthomonas oryzae pv oryzae, cháy bìa lá, phòng trừ sinh học, đối kháng, Bacillus safensis Chuyên ngành Vi sinh vật học i Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT MỤC LỤC Trang PHẦN KÝ DUYỆT LỜI CẢM TẠ TÓM LƯỢC i MỤC LỤC ii DANH SÁCH BẢNG v DANH SÁCH HÌNH vi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT viii CHƯƠNG 1: GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài CHƯƠNG 2: LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Bệnh cháy bìa lúa 2.1.1 Triệu chứng 2.1.2 Mầm bệnh 2.1.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến phát triển bệnh 2.1.4 Chu kỳ phát triển bệnh 2.1.5 Biện pháp quản lý bệnh 2.2 Phòng trừ bệnh vi khuẩn đối kháng 2.2.1 Phòng trừ bệnh hại trồng vi sinh vật đối kháng 2.2.2 Phòng trừ bệnh cháy bìa lúa vi khuẩn đối kháng 11 2.2.3 Vi khuẩn đối kháng Bacillus safensis 12 2.3 Đặc điểm giống lúa IR 50404 HMT1 13 2.3.1 Đặc điểm giống lúa IR 50404 13 2.3.2 Đặc điểm giống lúa HMT1 14 2.4 Sự kháng bệnh trồng 14 2.4.1 Khái niệm 14 2.4.2 Kháng thụ động 14 Chuyên ngành Vi sinh vật học ii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT 2.4.3 Kháng chủ động 15 CHƯƠNG 3: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP 16 3.1 Phương tiện nghiên cứu 16 3.1.1 Dụng cụ, thiết bị 16 3.1.2 Vật liệu 16 3.1.3 Hóa chất 16 3.2 Phương pháp nghiên cứu 17 3.2.1 Bố trí thí nghiệm 17 3.2.2 Các bước thực 18 3.2.3 Lấy tiêu 21 3.2.3 Xử lý số liệu 24 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 4.1 Kết khảo sát khả làm giảm bệnh cháy bìa lúa vi khuẩn B safensis vụ Hè Thu năm 2014 An Giang 25 4.1.1 Tỉ lệ chồi bệnh 25 4.1.2 Tỉ lệ bệnh 27 4.1.3 Chỉ số bệnh diện tích 29 4.1.4 Năng suất tỉ lệ lem lép hạt 31 4.2 Kết khảo sát khả làm giảm bệnh cháy bìa lúa vi khuẩn B safensis vụ Hè Thu năm 2014 Tiền Giang 33 4.2.1 Tỉ lệ chồi bệnh 33 4.2.2 Tỉ lệ bệnh 35 4.2.3 Chỉ số bệnh diện tích 37 4.2.4 Năng suất tỉ lệ lem lép hạt 39 4.3 Thảo luận chung 40 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 44 5.1 Kết luận 44 5.2 Kiến nghị 44 Chuyên ngành Vi sinh vật học iii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 PHỤ LỤC Chuyên ngành Vi sinh vật học iv Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 1: Các chủng vi khuẩn đối kháng với mầm bệnh lúa 11 Bảng 2: Hiệu phòng trừ bệnh nghiệm thức xử lý An Giang vào vụ Hè Thu năm 2014 30 Bảng 3: Năng suất tỉ lệ lem lép hạt An Giang vào vụ Hè Thu năm 2014 31 Bảng 4: Hiệu phòng trừ nghiệm thức xử lý Tiền Giang vào vụ Hè Thu năm 2014 39 Bảng 5: Năng suất tỷ lệ lem lép Tiền Giang vào vụ Hè Thu năm 2014 40 Chuyên ngành Vi sinh vật học v Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 1: Triệu chứng bệnh cháy bìa lúa đồng Hình 2: Giọt dịch vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae Hình 3: Tế bào vi khuẩn Xoo kính hiển vi điện tử Hình 4: Vòng vô khuẩn Bacillus safensis đối kháng với Xoo 11 Hình 5: Khuẩn lạc Bacillus safensis môi trường NA 12 Hình 6: Sơ đồ bố trí thí nghiệm 17 Hình 7: Vi khuẩn Bacillus safensis môi trường 18 Hình 8: Xử lý đất trước sạ 19 Hình 9: Hạt giống ngâm với vi khuẩn Bacillus safensis 19 Hình 10: Gieo sạ tay nông dân 19 Hình 11: Các bước tiến hành phun vi khuẩn Bacillus safensis đồng ruộng 20 Hình 12: Vi khuẩn Xoo đĩa thạch; B: Bình chứa vi khuẩn Xoo máy lắc 20 Hình 13: Chủng bệnh cháy bìa đồng 21 Hình 14: Ruộng lúa thí nghiệm 21 Hình 15: Vị trí đặt khung lấy tiêu bệnh cháy bìa lô thí nghiệm 22 Hình 16: Lấy tiêu bệnh cháy bìa ruộng lúa 22 Hình 17: Thu hoạch ruộng lúa thí nghiệm 24 Hình 18: Biểu đồ tỉ lệ chồi nhiễm bệnh vào thời điểm 50, 55, 60 ngày sau sạ nghiệm thức An Giang vụ Hè Thu năm 2014 25 Hình 19: Biểu đồ tỉ lệ chồi nhiễm bệnh nghiệm thức thời điểm 50, 55, 60 ngày sau sạ An Giang vụ Hè Thu năm 2014 26 Hình 20: Biểu đồ tỉ lệ nhiễm bệnh vào thời điểm 50, 55, 60 ngày sau sạ nghiệm thức An Giang vụ Hè Thu năm 2014 27 Hình 21: Biểu đồ tỉ lệ nhiễm bệnh nhiệm thức thời điểm 50, 55, 60 ngày sau sạ An Giang vụ Hè Thu năm 2014 28 Chuyên ngành Vi sinh vật học vi Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Immanuel, J, E., 2006 Molecular analysis of 2,4-diacetylphloroglucinol (DAPG) production by strains of Pseudomonas fluorescens in rice Biological control of rice diseases: 42-45 IRRI., 1996 Standard evaluation and utilization system for 1996 IRRI publisher Philippines Ishiyama, S., 1922 Studies on the white leaf disease of rice plants Report of the Agricultaral experiment station, Tokyo 45, pp.233-251 Ji G.H, L.F Wei, Y.Q He, Y.P Wua and X.H Bai., 2008 Biological control of rice bacterial blight by Lysobacter antibioticus strain 13-1 Biological Control, 45(3): 288-296 Jorgensen H J L., 2010 “Control of plant disease by induced resistance”, Wordshop on intergrated disease and nutrient management in rice production systems, pp 35-36 Karganilla, A., M Paris-Natural and S.H Ou., 1973 A comparative study of culture media for Xanthomonas oryzae Philippine Agriculture, 57:141–152 Krishnamurthy K And S.S Gnanamanickam., 1997 “Biology control of sheath blight on rice: induction of systemic resistance in rice by plant associated Pseudomonas spp”, Current Science 72, pp 331-334 Mc Kinney H.H., 1923 Influence of soil temperature and moisture on infection of wheat seedlings by Helminthosporium sativum Journal of Agricultural Research, 26: 195-217 Mageshwaran, V., S Walia and K Annapurna,, 2012 Isolation and partial characterization of antibacterial lipopeptide produced by Paenibacillus polymyxa HKA-15 against phytopathogen Xanthomonas campestria pv phaseoli M-5 World J Microbiol Biotechnol, 28 (3):909-917 Mew T W and R J Nelson., 1992 “Advance of research on bacterial blight of (Xanthomonas oryzae pv oryzae)”, in Lemattre M., S Freigoun, K Rudolph and J G Swings, Plant Pathogenic Bacteria, pp 25-36 Mizukami, T and S Wakimoto., 1969 Epidemioly and control of Bacteral blight of rice Annu Rev Phytopathol, 7:51-72 Chuyên ngành Vi sinh vật học 48 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Mew, T.W., B Cottyn, R Pamplona, L Xiangmin, L Fan, N Nilpant, P Arunyanart, P.V Kim and P.V Du., 2004 Applying rice seed-asociated antagonistic bacteria to manage rice sheath blight in developing countries Plant Dis 88 (5):557-564 Ndonde, M.J.M and E Semu., 2000 Preliminary characterization of some Stepromyces species from four Tanzanian soils and their antimicrobial potential against selected plant and animal pathogenic bacteria World J Microbiol Biotechnol 16 (7):595-599 Ou, S.H., 1985 Rice disease, Common wealth, Mycological Institute, Kew, Surrey, England Pp 51-79 Ou, S.H., 1972 Rice disease Commonwealth Mycological Instiute Kew, Surrey, England, pp.51-79 Pal, K K and B MeSpadden Gardener., 2006 Biological Control of Plant Pathogen The Plant Health Instructor DOI: 10.1094/PHI-A-2006-1117-02 25pp Reitma, J and P.S.J Schure., 1950 “Kresek”, a bacterial blight disease of rice Contribution, General Agricultural Research Station, Bogor, 117: 1-17 Sharma, P.D., 2006 Plant pathology Alpha Science International Ltd, India: 70-84 Skiip R A., B J Deverall., 1973 “Studies on cross protection in the anthranose disease of bean” Siddiqui, Z.A., 2006 PGPR: Prospective biocontrol agents of plant pathogens In siddiqi Z.A (ed), PGPR: Biocontrol and Biofertilization, Springer: 111-142 Swings J., Van den Mooter M., Vauterin L., Hoste B., Gillis M., Mew T and K Kersters., 1990 Reclassification of the causal agents of bacterial blight (Xanthomonas campestris pv oryzae) and bacterial leaf streak (Xanthomonas campestris pv oryzicola) of rice as pathovars of Xanthomonas oryzae (ex Ishizama 1922) sp Rev., Int., J Syst Bacteriol, 40: 309-311 Sasser, M., 1990 Identification of bacteria by gas chromatography of cellular fatty acids Technical Note 101 Newark, DE: MIDI, Inc Steiner H Y and Hunt M D., 1996 “Systemic acquired resistance”, Plant cell, pp 1809-1819 Smibert, R M & Krieg, N R., 1994 Phenotypic characterization In Methods for General and Molecular Bacteriology, pp 607–654 Edited by P Gerhardt, R G Chuyên ngành Vi sinh vật học 49 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT E Murray, W A Wood, & N R Krieg Washington, DC: American Society for Microbiology Sticher L., B Manch-Mani and J P Metraux., 1997 “Systemic acquired resistance”, Annual Review of Phytopathology 35, pp 235-270 Tabei H and H Muko., 1960 Anotomical studies of rice plant leaves affected with bacterial leaf blight (Xanthomonas oryzae) in particular reference to the structure of water exudation system Bull Natl Inst Agric Sci Tokyo C11:37-43 Tagami, Y and T.Mizukami., 1962 Historia review of the researches on bacterial leaf blight of rice caused by Xanthomonas oryzae Special report of the plant disease and insect pets forecasting service 10 Plant protection Division Ministry of agriculture and Forestry Tokyo, Japan, 10 112pp Ryals J A, Neuenschwander U H., Willits M.G., Molina A., Steiner H Y and Hunt M D., 1996 “Systemic acquired resistance”, Plant cell, pp 1809-1819 Van Loon L C., P A H M Bakker and C M J Peiterse., 1998 “Systemic resistance induced by rhizosphere bacteria”, Annual Review Phytopathology 36, pp 453483 Walters D., A Newton, G Lyon., 2007 Induced resistance for plant defence, Blackwell Publishing, 258 pages Walters D., D Walsh, A Newton, and G Lyon., 2005 “Induced resistance for plant disease control: Maximizing the efficacy of resistance elicitors”, Phytopathology 95, pp 1368-1373 Zaragosa B S and T W Mew., 1979 Relationship of root injury to the “kresek” phase of bacterial blight of rice Plant Dis Rep., 63: 1007-1011 Cheremisinow., 1973 N A Obshchaya potologiya Moscow [Russ.] Federation of Brit Pl Patholigists A guide to the use of terms in plant pathology Phytopath Pap 17, 55pp Trang web http://www.robinson.vn/forum/viewtopic.php?f=38&t=462.(ngày 24/02/2014) https://sites.google.com/site/kysuhodhinhhai/bao-ve-thuc-vat/dich-hai-lua/benhlua/benh-do-vi-khuan/benh-chay-bia-la-lua (ngày 27/02/2014) http://bacmap.wishartlab.com/organisms/303 (ngày 26/06/2014) Chuyên ngành Vi sinh vật học 50 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT http://www.thaibinhseed.com.vn/tu-van/ho-tro-ky-thuat/benh-bac-la-lua nguyennhan-va-cach-phong-tranh-10267.html (ngày 28/2/2014) http://baovecaytrong.com/kythuatsanphambvtvchitiet.php?Id=45 (ngày 4/3/2014) Theo báo Nông nghiệp http://www.gao24h.net/2014/04/giong-lua-ir-50404.html (ngày 19/6/2014) Chuyên ngành Vi sinh vật học 51 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT PHỤ LỤC Phụ chương Các bảng phân tích thống kê An Giang Phụ bảng 1.1 Phân tích tỉ lệ chồi nhiễm bệnh vào thời điểm 50 NSS An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Lặp lại Nhóm a Đối chứng 9,7367 Chủng vào đất Phun qua 3 14,0433 Ngâm hạt Thuốc hóa học Mức ý nghĩa b c 14,0433 19,5200 19,5200 19,6100 19,6100 20,9133 0,153 0,085 0,644 Trung bình bình phương = 11,656 Phụ bảng 1.2 Phân tích tỉ lệ nhiễm bệnh vào thời điểm 50 NSS An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Chủng vào đất Thuốc hóa học Ngâm hạt Đối chứng Phun qua Mức ý nghĩa Nhóm Lặp lại 3 3 a 3,1233 3,6367 3,6700 4,1767 0,132 b 3,6367 3,6700 4,1767 4,6800 0,136 Trung bình bình phương = 0,539 Phụ bảng 1.3 Phân tích tỉ lệ chồi nhiễm bệnh vào thời điểm 55 NSS An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a b c Thuốc hóa học Chủng vào đất Ngâm hạt 27,9467 Đối chứng 31,2667 Phun qua Mức ý nghĩa d 13,9267 20,6400 31,2667 32,0700 1,000 1,000 0,087 0,656 Trung bình bình phương = 4,607 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Phụ bảng 1.4 Trường ĐHCT Phân tích tỉ lệ nhiễm bệnh vào thời điểm 55 NSS An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a 2,9767 b Thuốc hóa học Ngâm hạt 5,1967 Chủng vào đất 5,8000 Đối chứng 6,5900 Phun qua Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 0,899 Phụ bảng 1.5 c 6,5900 7,6767 1,000 0,116 0,191 Phân tích tỉ lệ chồi nhiễm bệnh vào thời điểm 60 NSS An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Thuốc hóa học Chủng vào đất Ngâm hạt Phun qua Đối chứng Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 2,941 Phụ bảng 1.6 Nhóm Lặp lại a 7,1067 b c d e 11,7033 16,5733 21,4067 1,000 1,000 1,000 1,000 32,3667 1,000 Phân tích tỉ lệ nhiễm bệnh vào thời điểm 60 NSS An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a Thuốc hóa học 1,6900 Chủng vào đất 2,2033 Ngâm hạt Phun qua Đối chứng Mức ý nghĩa b c d 4,6233 6,1700 7,9867 0,321 1,000 1,000 1,000 Trung bình bình phương = 0,362 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Phụ bảng 1.7 Trường ĐHCT Phân tích số bệnh diện tích vào thời điểm 50 NSS An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại Chủng vào đất Ngâm hạt 1,9333 Phun qua 2,0033 Thuốc hóa học 2,0433 Đối chứng 2,0500 Mức ý nghĩa 1,6667 1,000 0,121 2,0033 0,307 Trung bình bình phương = 0,003 Phụ bảng 1.8 Phân tích số bệnh diện tích vào thời điểm 55 NSS An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a b Thuốc hóa học 1,3233 Chủng vào đất 1,5667 1,5667 Phun qua 1,5833 1,5833 Ngâm hạt Đối chứng Mức ý nghĩa c 1,8100 2,3200 0,117 0,140 1,000 Trung bình bình phương = 0,031 Phụ bảng 1.9 Phân tích số bệnh diện tích vào thời điểm 60 NSS An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a Thuốc hóa học 1,2533 Chủng vào đất 1,2767 Ngâm hạt 1,3467 Phun qua Đối chứng Mức ý nghĩa b c 1,4900 3,1167 0,121 1,000 1,000 Trung bình bình phương = 0,004 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Phụ bảng 1.10 Phân tích hiệu phòng trừ sinh học nghiệm thức vào thời điểm 50 NSS An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại Thuốc hóa học Phun qua Ngâm hạt Chủng vào đất Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 7,112 a 0,3100 2,2667 b c 2,2667 5,7100 0,395 0,152 18,7133 1,000 Phụ bảng 1.11 Phân tích hiệu phòng trừ sinh học nghiệm thức vào thời điểm 55 NSS An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Lặp lại Nhóm a Ngâm hạt 21,7267 Phun qua 30,8667 Chủng vào đất 32,1300 Thuốc hóa học 42,7900 Mức ý nghĩa 0,069 Trung bình bình phương = 133,115 Phụ bảng 1.12 Phân tích hiệu phòng trừ sinh học nghiệm thức vào thời điểm 60 NSS An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại Phun qua Ngâm hạt Chủng vào đất Thuốc hóa học Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 6,339 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học a 52,2067 56,7467 0,058 b 56,7467 59,0400 59,7733 0,196 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Phụ bảng 1.13 Phân tích tỉ lệ suất lúa An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a b c Đối chứng Phun qua 7,4933 Ngâm hạt 7,5333 Chủng vào đất 7,6333 Thuốc hóa học 7,6533 Mức ý nghĩa 7,4033 1,000 0,158 0,464 Trung bình bình phương = 0,001 Phụ bảng 1.14 Phân tích tỉ lệ hạt lem An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại Phun qua Chủng vào đất Thuốc hóa học Ngâm hạt Đối chứng Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 0,212 a 11,0500 11,5733 b c d 12,6233 14,8767 0,194 1,000 1,000 17,9600 1,000 Phụ bảng 1.15 Phân tích tỉ lệ hạt lép An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại Thuốc hóa học Chủng vào đất Ngâm hạt Đối chứng Phun qua Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 0,262 a 12,4433 b c d e 17,8500 19,8800 21,8733 1,000 1,000 1,000 1,000 23,3133 1,000 Phụ bảng 1.16 Phân tích tỉ lệ hạt lem lép An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Thuốc hóa học Chủng vào đất Phun qua Ngâm hạt Nhóm Lặp lại 3 3 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học a 25,0633 b c d 29,4267 34,3667 34,7533 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Đối chứng Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 0,439 Trường ĐHCT 1,000 1,000 0,491 39,8333 1,000 Phụ chương Các bảng phân tích thống kê Tiền Giang Phụ bảng 2.1 Phân tích tỉ lệ chồi nhiễm bệnh vào thời điểm 50 NSS Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Phun qua Ngâm hạt Chủng vào đất Thuốc hóa học Đối chứng 3 3 Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 0,746 Phụ bảng 2.2 Nhóm Lặp lại a 10,7633 11,0600 11,1200 b c 14,1200 20,8867 0,640 1,000 1,000 Phân tích tỉ lệ nhiễm bệnh vào thời điểm 50 NSS Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Lặp lại Nhóm a b Đối chứng 2,9400 Thuốc hóa học 3,0933 Phun qua 4,1200 Chủng vào đất 4,2000 Ngâm hạt 4,7033 Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 0,181 Phụ bảng 2.3 0,669 0,140 Phân tích tỉ lệ chồi nhiễm bệnh vào thời điểm 55 NSS Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a Thuốc hóa học Phun qua Chủng vào đất Ngâm hạt Đối chứng Mức ý nghĩa b c d e 8,1833 10,5667 13,3367 16,3233 18,1467 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000 Trung bình bình phương = 0,479 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Phụ bảng 2.4 Trường ĐHCT Phân tích tỉ lệ nhiễm bệnh vào thời điểm 55 NSS Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Lặp lại Nhóm a Thuốc hóa học 1,9867 Phun qua 2,6933 Đối chứng Ngâm hạt Chủng vào đất Mức ý nghĩa b c d 2,6933 3,3233 3,3233 4,0033 4,0033 4,2067 0,068 0,099 0,078 0,570 Trung bình bình phương = 0,180 Phụ bảng 2.5 Phân tích tỉ lệ chồi nhiễm bệnh vào thời điểm 60 NSS Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a Thuốc hóa học Chủng vào đất Ngâm hạt Phun qua Đối chứng Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 0,213 Phụ bảng 2.6 b c d e 7,0833 12,8367 15,7167 23,1333 27,7667 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000 Phân tích tỉ lệ nhiễm bệnh vào thời điểm 60 NSS Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a b Thuốc hóa học Phun qua 2,8167 Chủng vào đất 2,8500 Ngâm hạt 3,0400 Đối chứng Mức ý nghĩa c 1,7267 7,9867 1,000 0,260 1,000 Trung bình bình phương = 0,048 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Phụ bảng 2.7 Trường ĐHCT Phân tích số bệnh diện tích vào thời điểm 50 NSS Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a b Đối chứng Chủng vào đất 0,9967 Phun qua 1,0367 Thuốc hóa học 1,1000 Ngâm hạt Mức ý nghĩa c 0,8367 1,1000 1,1800 1,000 0,123 0,202 Trung bình bình phương = 0,005 Phụ bảng 2.8 Phân tích số bệnh diện tích vào thời điểm 55 NSS Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a b Thuốc hóa học Ngâm hạt 1,0567 Chủng vào đất 1,1333 Phun qua Đối chứng Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 0,002 Phụ bảng 2.9 c d 0,8300 1,1333 1,2100 1,2100 1,2467 1,000 0,067 0,067 0,348 Phân tích số bệnh diện tích vào thời điểm 60 NSS Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a b Thuốc hóa học 0,8067 Chủng vào đất 0,9033 Ngâm hạt 1,0400 Phun qua 1,1100 Đối chứng Mức ý nghĩa c 1,2733 0,095 0,211 1,000 Trung bình bình phương = 0,004 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Phụ bảng 2.10 Phân tích hiệu phòng trừ sinh học nghiệm thức vào thời điểm 50 NSS Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a b Ngâm hạt Phun qua 5,7900 Chủng vào đất 9,3333 Thuốc hóa học Mức ý nghĩa c -7,4033 24,2467 1,000 0,489 1,000 Trung bình bình phương = 35,804 Phụ bảng 2.11 Phân tích hiệu phòng trừ sinh học nghiệm thức vào thời điểm 55 NSS Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Phun qua Chủng vào đất Ngâm hạt Thuốc hóa học Nhóm Lặp lại a 2,8000 9,0700 b 9,0700 15,2367 Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 20,369 c 33,3667 0,127 0,133 1,000 Phụ bảng 2.12 Phân tích hiệu phòng trừ sinh học nghiệm thức vào thời điểm 60 NSS Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a Phun qua 12,9733 Ngâm hạt 18,3633 Chủng vào đất Thuốc hóa học Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 36,438 b c 18,3633 29,0700 29,0700 36,5600 0,306 0,062 0,167 Phụ bảng 2.13 Phân tích tỉ lệ suất lúa Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Lặp lại Chuyên nghành Vi Sinh Vật học Nhóm Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT a b Đối chứng 5,1133 Ngâm hạt 5,3033 Phun qua 5,3833 Chủng vào đất Đối chứng c 6,2400 6,9233 Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 0,043 0,159 1,000 1,000 Phụ bảng 2.14 Phân tích tỉ lệ hạt lem Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a b Phun qua 9,1267 Chủng vào đất 9,3267 Đối chứng 10,9233 10,9233 Đối chứng 15,3100 15,3100 Ngâm hạt 19,4067 Mức ý nghĩa 0,163 Trung bình bình phương = 22,058 0,060 Phụ bảng 2.15 Phân tích tỉ lệ hạt lép Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nhóm Nghiệm thức Lặp lại Ngâm hạt Đối chứng Phun qua 3 a 15,8367 19,0033 20,5533 20,5533 Chủng vào đất 22,1733 22,1733 0,116 27,5967 0,079 Đối chứng Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 17,732 b Phụ bảng 2.16 Phân tích tỉ lệ hạt lem lép Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Duncan Nghiệm thức Nhóm Lặp lại a Phun qua 29,6800 Đối chứng 29,9267 Chủng vào đất 31,5000 Ngâm hạt Đối chứng Mức ý nghĩa Trung bình bình phương = 7,742 Chuyên nghành Vi Sinh Vật học b c 31,5000 35,2433 42,9067 0,462 0,130 1,000 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Phụ chương Nhật ký sử dụng phân bón thuốc bảo vệ thực vật ruộng An Giang Phụ bảng 3.1 Nhật ký sử dụng phân bón An Giang vụ Hè Thu năm 2014 (Kg/1000 m2) Ngày sau sạ 12 22 37 NPK 5 DAP 10 10 10 KALI Tổng 15 30 10 Phụ bảng 3.2 5 Nhật ký sử dụng thuốc hóa học An Giang vụ Hè Thu năm 2014 Ngày sau sạ Loại thuốc Đối tượng phun Nghiệm thức xử lý 30 50 75 Catfish 70 WP Kasumin 2L Tigon diamond Alvin 5SC 40 Takumi Ốc bưu vàng Đạo ôn Bệnh cháy bìa Lem lép hạt Sâu lá, Sâu đục thân Toàn ruộng Toàn ruộng Thuốc hóa học Toàn ruộng Toàn ruộng Phụ chương Nhật ký sử dụng phân bón thuốc bảo vệ thực vật ruộng Tiền Giang Phụ bảng 4.1 Nhật ký sử dụng phân bón Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 (Kg/1000m2) Ngày sau sạ URÊ DAP KALI 10 18 40 4 4 4 Tổng 12 12 Phụ bảng 4.2 Nhật ký sử dụng thuốc hóa học Tiền Giang vụ Hè Thu năm 2014 Ngày sau sạ Loại thuốc Đối tượng phun Nghiệm thức xử lý 30 50 Kasumin 2L Tigon diamond Đạo ôn Bệnh cháy bìa Toàn ruộng Thuốc hóa học 75 Alvin 5SC Lem lép hạt Toàn ruộng Chuyên nghành Vi Sinh Vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học [...]... ruộng lúa tại hai tỉnh An Giang và Tiền Giang, tạo tiền đề cho vi c nghiên cứu và sản xuất các loại thuốc sinh học mới có tác dụng phòng trị bệnh cháy bìa lá ở ĐBSCL nói riêng và Vi t Nam nói chung 1.2 Mục tiêu đề tài Mục tiêu tổng quát của đề tài là khảo sát được khả năng phòng trị bệnh cháy bìa lá lúa của vi khuẩn đối kháng B safensis trên ruộng lúa tỉnh An Giang và Tiền Giang Với mục tiêu này đề tài... ngành Vi sinh vật học 1 Vi n NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT 1 Khảo sát khả năng phòng trị bệnh cháy bìa lá lúa của biện pháp xử lý ngâm hạt với chủng vi khuẩn B safensis ở mật số 108 CFU/ml 2 Khảo sát khả năng phòng trị bệnh cháy bìa lá lúa của biện pháp xử lý phun qua lá với chủng vi khuẩn B safensis ở mật số 107 CFU/ml 3 Khảo sát khả năng phòng trị bệnh. .. chỉ tiêu bệnh cháy bìa lá trên lô thí nghiệm Hình 16: Lấy chỉ tiêu bệnh cháy bìa lá trên ruộng lúa Chỉ tiêu hiệu quả giảm bệnh cháy bìa lá lúa: Đếm tổng số chồi và tổng số chồi bị nhiễm bệnh cháy bìa lá trong khung Từ đó, tính tỉ lệ bệnh cháy bìa lá lúa theo công thức: Tỉ lệ chồi bệnh (%) = Số chồi bị nhiễm bệnh Tổng số chồi x 100 Đếm tổng số lá và tổng số lá bệnh trong khung Từ đó tính tỉ lệ bệnh theo... CHƯƠNG 2: LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Bệnh cháy bìa lá lúa Bệnh cháy bìa lá lúa hay còn gọi là bệnh bạc lá do vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae (Xoo) gây ra (Swings et al., 1990) Năm 1884, bệnh cháy bìa lá được phát hiện đầu tiên tại vùng Fukuoka, Nhật Bản Sau đó bệnh phát triển nhiều nước ở Châu Á, Châu Âu và Châu Phi (Ou, 1985) Trong số 8 loại bệnh do vi khuẩn gây hại trên lúa, bệnh cháy bìa lá được xem... lưới vi khuẩn Bacillus safensis có khả năng làm giảm bệnh cao và được đề nghị nghiên cứu tiếp tục trong điều kiện ngoài đồng với các biện pháp xử lý như ngâm hạt ở mật số 108 CFU/ml, phun qua lá ở mật số 107 CFU/ml, chủng vào đất ở mật số 107 CFU/ml Do đó, đề tài được thực hiện nhằm mục đích khảo sát khả năng phòng trị bệnh cháy bìa lá lúa của vi khuẩn đối kháng B safensis trên ruộng lúa tại hai tỉnh An. .. CFU/ml 3 Khảo sát khả năng phòng trị bệnh cháy bìa lá lúa của biện pháp xử lý chủng vào đất với chủng vi khuẩn B safensis ở mật số 107 CFU/ml 4 So sánh hiệu quả phòng trị bệnh cháy bìa lá lúa của vi khuẩn B safensis trong 3 biện pháp xử lý trên từ đó tìm ra cách xử lý tốt nhất để phòng trừ bệnh cháy bìa lá lúa trên đồng ruộng Chuyên ngành Vi sinh vật học 2 Vi n NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt... (Ou, 1985; Võ Thanh Hoàng 1993) 2.1.1 Triệu chứng Cháy bìa lá Vùng rìa lá nhiễm bệnh bị quăn queo và lan ra khắp lá, vết bệnh lan nhanh chóng xuống phần bẹ lá, lá bị khô nhanh chóng và cuộn lại, vết bệnh có màu vàng xám hoặc xám trắng bắt đầu từ ngọn lá chạy dọc xuống theo 2 bìa lá lúa (Shamar, 2006) Trần Quốc Tuấn Hình 1: Triệu chứng bệnh cháy bìa lá lúa ngoài đồng Bệnh phát triển dần ra và vùng mô tiếp... Thùng chứa vi khuẩn Bacillus safensis; C: Pha vi khuẩn Bacillus safensis vào bình phun; D: Phun vi khuẩn Bacillus safensis trên ruộng lúa Chuẩn bị nguồn bệnh Vi khuẩn được cấy chuyển trong môi trường đĩa thạch Sau đó, nuôi và nhân mật số vi khuẩn Xoo trong bình tam giác có chứa môi trường Wakimoto cải tiến (không chứa agar) và để trên A B máy lắc trong 24 giờ trước khi Hình 12: A: Vi khuẩn Xoo trên đĩa... triển trên cây trồng, đặc biệt là các bệnh do vi khuẩn gây ra Trên cây lúa, bệnh cháy bìa lá do vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae (Xoo) gây ra là bệnh nghiêm trọng nhất, gây thiệt hại từ 6-60% năng suất lúa (Lê Lương Tề và Vũ Triệu Mân, 1999) Hiện nay hầu hết nông dân sử dụng thuốc hóa học để phòng trị bệnh cháy bìa lá Mặc dù thuốc hóa học có khả năng phòng trị bệnh tương đối hiệu quả, tuy nhiên phương... khỏe con người và tăng chi phí sản xuất, mà còn dễ làm cho mầm bệnh kháng thuốc Do đó, hướng nghiên cứu sử dụng vi sinh vật (VSV) đối kháng để phòng trị bệnh cháy bìa lá lúa đang được quan tâm, tập trung nghiên cứu và bước đầu đã có những kết quả nhất định Võ Thị Phương Trang (2013) đã phân lập được nhiều chủng vi khuẩn có khả năng đối kháng mạnh với vi khuẩn Xoo gây bệnh cháy bìa lá lúa Trong điều