BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI - - TRẦN THU TRANG ðẶC ðIỂM DỊCH TỄ CỦA DỊCH TIÊU CHẢY (PORCINE EPIDEMIC DIARRHEA – PED) VÀ BIỆN PHÁP CAN THIỆP DỊCH TẠI MỘT SỐ TRẠI LỢN Ở MIỀN BẮC VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ CHUYÊN NGÀNH : THÚ Y Mà SỐ 60.64.01.01 : NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS HUỲNH THỊ MỸ LỆ HÀ NỘI, 2013 LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan ñây công trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa ñược công bố công trình khác Các tài liệu tham khảo, trích dẫn ñều có nguồn gốc rõ ràng Hà Nội, ngày 10 tháng 10 năm 2013 Tác giả Trần Thu Trang Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… i LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn sợ giúp ñỡ thầy cô giáo Ban Quản lý ñào tạo Khoa Thú y – Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội ñã giành nhiều thời gian, công sức giúp ñỡ trình học tập thực ñề tài Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn TS Huỳnh Thị Mỹ Lệ, Bộ môn Vi sinh vật – Truyền nhiễm, Khoa Thú y trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội ñã tận tình giúp ñỡ, hướng dẫn trình thực hoàn thành luận văn Xin chân thành cám ơn thầy cô Bộ môn Vi sinh vật – Truyền nhiễm, ñã tạo ñiều kiện giúp ñỡ trình nghiên cứu thực ñề tài Tôi xin gửi lời cảm ơn tới người thân gia ñình, bạn bè, ñồng nghiệp ñộng viên, giúp ñỡ trình hoàn thành luận văn Hà Nội, ngày 10 tháng 10 năm 2013 Tác giả Trần Thu Trang Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… ii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục từ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục sơ ñồ, hình vii MỞ ðẦU 1.1 ðẶT VẤN ðỀ 1.2 MỤC TIÊU CỦA ðỀ TÀI 1.3 Ý NGHĨA KHOA HỌC 1.4 Ý NGHĨA THỰC TIỄN Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 MỘT VÀI NÉT VỀ DỊCH TIÊU CHẢY Ở LỢN (PED) 1.1.1 Căn bệnh 1.1.2 Dịch tễ học 1.1.3 Triệu chứng 14 1.1.4 Bệnh tích 15 1.1.5 Chẩn ñoán 16 1.1.6 Phòng bệnh 17 1.1.7 ðiều trị 19 1.2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU PORCINE EPIDEMIC DIARRHEA (PED) TRÊN THẾ GIỚI VÀ VIỆT NAM 20 1.2.1 Tình hình nghiên cứu Porcine Epidemic Diarrhoea (PED) giới 20 1.2.2 Tình hình nghiên cứu Porcine Epidemic Diarrhoea (PED) Việt Nam 22 Chương NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 ðỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 23 2.2 NỘI DUNG 23 2.3 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… iii 2.3.1 Nguyên liệu 23 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu 24 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 3.1 KẾT QUẢ THEO DÕI MỘT SỐ ðẶC ðIỂM DỊCH TỄ HỌC CỦA DỊCH TIÊU CHẢY Ở LỢN 31 3.1.1 Tình hình mắc PED theo ñịa phương 31 3.1.2 Tình hình mắc PED theo quy mô ñàn 36 3.1.3 Tỷ lệ mắc bệnh, tỷ lệ tử vong PED theo lứa tuổi 40 3.1.4 Tình hình mắc PED theo tháng 43 3.1.5 Triệu chứng, bệnh tích ñặc trưng PED 46 3.2 KẾT QUẢ CHẨN ðOÁN KHẲNG ðỊNH BỆNH BẰNG KỸ THUẬT CHẨN ðOÁN NHANH VÀ PHƯƠNG PHÁP RT – PCR 58 3.2.1 Kết chẩn ñoán khẳng ñịnh bệnh kỹ thuật chẩn ñoán nhanh 58 3.2.2 Kết chẩn ñoán khẳng ñịnh bệnh phương pháp RT – PCR 61 3.3 CAN THIỆP VÀ ðÁNH GIÁ HIỆU QUẢ CỦA CÁC BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG DỊCH TIÊU CHẢY Ở LỢN TẠI MỘT SỐ TỈNH PHÍA BẮC VIỆT NAM 63 3.3.1 Kết can thiệp ñối với ñàn lợn nái 63 3.3.2 Kết can thiệp ñối với ñàn lợn 65 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 68 I Kết luận 68 1.1 Một số ñặc ñiểm dịch tễ học PED: 68 1.2 Chẩn ñoán khẳng ñịnh kỹ thuật chẩn ñoán nhanh phương pháp RT - PCR 68 1.3 Can thiệp ñánh giá hiệu biện pháp phòng chống dịch tiêu chảy lợn số tỉnh phía Bắc Việt Nam 69 II ðề nghị 69 TÀI LIỆU THAM KHẢO 70 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… iv DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT cs Cộng ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay FAO Food and Agriculture Organization ORF Open Reading Frame PED Porcine Epidemic Diarrhea PEDV Porcine Epidemic Diarrhea Virus RNA Axit ribonucleic RT - PCR Reverse transcription polymerase chain reaction TGEV Transmissible Gastroenteritis Virus Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… v DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Thành phần phản ứng tổng hợp cDNA 28 Bảng 2.2 Trình tự mồi S 29 Bảng 3.1 Kết mắc PED trại 31 Bảng 3.2 Tỷ lệ mắc bệnh tỷ lệ tử vong PED ñịa phương 34 Bảng 3.3 Tình hình trại mắc PED theo quy mô ñàn 37 Bảng 3.4 Tình hình mắc bệnh tỷ lệ tử vong PED theo quy mô ñàn 39 Bảng 3.5 Tỷ lệ mắc, tỷ lệ tử vong theo lứa tuổi 41 Bảng 3.6 Tình hình mắc PED theo tháng 44 Bảng 3.7 Các triệu chứng ñặc trưng PED 46 Bảng 3.8 Một số triệu chứng theo dõi ñàn lợn mắc PED trại 47 Bảng 3.9 Một số bệnh tích ñại thể lợn nghi mắc PEDV 52 Bảng 3.10 Kết chẩn ñoán khẳng ñịnh bệnh kit chẩn ñoán nhanh 59 Bảng 3.11 Kết chẩn ñoán khẳng ñịnh bệnh phương pháp RT – PCR 61 Bảng 3.12 Kết can thiệp ñối với lợn nái nuôi 64 Bảng 3.13 Kết can thiệp ñối với ñàn lợn theo mẹ 66 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… vi DANH MỤC SƠ ðỒ, HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc Coronavirus (Kathryn V.Holmes, 2003) Hình 1.2 Sơ ñồ gen Coronavirus Hình 1.3 Bản ñồ ổ dịch tiêu chảy cấp PEDV quốc gia Hình 1.4 Cơ chế gây bệnh PEDV 14 Hình 3.1 Tình hình mắc bệnh PED trại theo ñịa phương 32 Hình 3.2 Tỷ lệ mắc bệnh tỷ lệ tử vong PED ñịa phương 35 Hình 3.3 Tình hình trại mắc PED theo quy mô ñàn 38 Hình 3.4 Tình hình mắc bệnh tỷ lệ tử vong PED theo quy mô ñàn 40 Hình 3.5 Tỷ lệ mắc bệnh, tỷ lệ tử vong mắc PED theo lứa tuổi 42 Hình 3.6 Tình hình mắc PED theo tháng 45 Hình 3.7 Lợn nằm chồng ñống lên 48 Hình 3.8 Lợn thích nằm bụng mẹ 49 Hình 3.9 Lợn bị tiêu chảy gầy còm, ốm yếu 49 Hình 3.10 Lợn nái nuôi bị tiêu chảy phân loãng, màu xi măng, hôi thối 50 Hình 3.11 Lợn chết PED, xác gầy còm, hậu môn dính phân 50 Hình 3.12 Dịch nôn sữa ñông vón không tiêu 51 Hình 3.13 Thành ruột non bị bào mỏng, chứa ñầy dịch lỏng màu vàng 54 Hình 3.14 Dạ dày chứa ñầy sữa ñông vón, không tiêu 54 Hình 3.15 Thành ruột mỏng, chứa ñầy 55 Hình 3.16 Não sung huyết, xuất huyết 55 Hình 3.17 Biến tĩnh mạch sữa “milk vein” màng treo ruột 56 Hình 3.18 Hạch hàm, hạch bẹn sưng, xuất huyết 56 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… vii Hình 3.19 Phổi xuất huyết, có hạt lao 57 Hình 3.20 Lách nhồi huyết màu ñen, rìa tù 57 Hình 3.21 Gan sưng, túi mật căng, dịch mật ñặc 58 Hình 3.22 Kết dương tính với PEDV 60 Hình 3.23 Kết âm tính với Rotavirus 60 Hình 3.24 Dương tính với PEDV, âm tính với TGEV Rotavirus 60 Hình 3.25 Kết phản ứng RT – PCR dương tính với PEDV 62 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… viii MỞ ðẦU 1.1 ðẶT VẤN ðỀ Chăn nuôi ngày có vị trí quan trọng cấu ngành nông nghiệp Sản phẩm ngành chăn nuôi nguồn thực phẩm thiếu ñược ñối với nhu cầu ñời sống người Chủ trương nhà nước phát triển ngành chăn nuôi thành ngành sản xuất hàng hóa thực nhằm tạo sản phẩm chăn nuôi có chất lượng cao phục vụ cho nhu cầu tiêu thụ nước phần cho xuất Nói ñến ngành chăn nuôi phải kể ñến chăn nuôi lợn tầm quan trọng ý nghĩa thiết thực ñối với ñời sống kinh tế xã hội nhân dân Chăn nuôi lợn ñã góp phần giải công ăn việc làm, xóa ñói giảm nghèo, tăng thu nhập hội làm giàu cho nông dân Theo thống kê tổ chức nông lương giới (FAO), Việt Nam nước nuôi nhiều lợn, ñứng hàng thứ giới, hàng thứ Châu Á vị trí hàng ñầu khu vực ðông Nam Á Theo kết ñiều tra Tổng cục Thống kê thời ñiểm 1/4/2013, tổng ñàn lợn nước có 26,98 triệu con, tăng 1,08% so với thời ñiểm 1/4/2012, ñó lợn nái chiếm 15,43% tổng ñàn, ñạt 4,16 triệu Cùng với việc chăn nuôi ñược mở rộng dịch bệnh yếu tố ñã ảnh hưởng không nhỏ ñến hiệu chăn nuôi Hiện nay, dịch bệnh ñang diễn phức tạp, có nhiều bệnh xuất khó kiểm soát gây thiệt hại lớn cho người chăn nuôi Trong ñó phải kể ñến bệnh như: tai xanh, bệnh Porcine Circovirus type 2, dịch tiêu chảy lợn Porcine Epidemic Diarrhea Virus (PEDV), dịch tả lợn, lở mồm long móng,… Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 3.2.2 Kết chẩn ñoán khẳng ñịnh bệnh phương pháp RT – PCR Dựa triệu chứng lâm sàng ñược chẩn ñoán sơ bộ, tiến hành kiểm tra 20 mẫu ñịa phương khác kỹ thuật RT – PCR kết luận xác nguyên nhân gây bệnh Với 20 mẫu kiểm tra, 20 mẫu ñều dương tính với PEDV Bảng 3.11 Kết chẩn ñoán khẳng ñịnh bệnh phương pháp RT – PCR Stt ðịa ñiểm Số mẫu kiểm tra Số mẫu dương tính Hải Phòng 2 Hải Dương 2 Hưng Yên 3 Hà Nam 2 Hà Nội 6 Vĩnh Phúc 1 Hòa Bình 3 Bắc Giang 0 Sơn La 1 Tổng hợp 20 20 Từ kết thấy ñược kết chẩn ñoán kit chẩn ñoán nhanh ñược khẳng ñịnh với kỹ thuật chẩn ñoán RT – PCR Do vậy, sử dụng kết hợp phương pháp chẩn ñoán ñể có biện pháp phòng chống PED kịp thời ñạt hiệu cao Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 61 Các mẫu bệnh phẩm lấy ñể chẩn ñoán PEDV mẫu dịch ruột non từ lợn theo mẹ mắc tiêu chảy ðiều chứng tỏ PEDV tồn chủ yếu ñường tiêu hóa lợn theo mẹ Nguyễn Tất Toàn cs (2012), tỷ lệ phát PEDV dương tính mẫu ruột non 58,14% (100/172) cao nhiều so với mẫu phân 16,96% (19/112) Tỷ lệ PEDV phân lập ñược tác giả chủ yếu ñường tiêu hóa, phù hợp với nghiên cứu Nghiên cứu tác giả Ishikawa cs (1997) phương pháp RT – PCR phương pháp xác ñịnh PEDV xác, mẫu thu ñược từ trang trại chăn nuôi lợn bị bệnh tiêu chảy, RNA PEDV ñã ñược phát bốn mẫu dương tính với PEDV số 11 mẫu ruột M Mẫu 651bp Hình 3.25 Kết phản ứng RT – PCR dương tính với PEDV Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 62 3.3 CAN THIỆP VÀ ðÁNH GIÁ HIỆU QUẢ CỦA CÁC BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG DỊCH TIÊU CHẢY Ở LỢN TẠI MỘT SỐ TỈNH PHÍA BẮC VIỆT NAM 3.3.1 Kết can thiệp ñối với ñàn lợn nái Khi dịch tiêu chảy xảy ra, lợn nái nuôi ñối tượng dễ bị mắc bệnh sau lợn sơ sinh Ngày thứ – thứ sau lợn có biểu tiêu chảy ñược xác ñịnh PED, lợn nái nuôi bắt ñầu có triệu chứng tiêu chảy Sau dùng mẫu kit thử nhanh kết xác ñịnh PEDV gây ra, ñã thực biện pháp phòng chống bệnh: Vệ sinh chuồng trại, phun sát trùng Sát trùng phương tiện vận chuyển, có khu nuôi lợn cách ly Công nhân người chăn nuôi lợn nên hạn chế tiếp xúc với lợn chưa bị bệnh Chúng ñã tiến hành can thiệp vào ổ dịch: ñối với lợn nái bao gồm: nái nuôi con, nái mang thai, nái chờ phối Vì nái nuôi tiếp xúc trực tiếp với mầm bệnh từ lợn mẫm cảm với PEDV nên chủ yếu nái nuôi bị mắc bệnh nái mang bầu nái chờ phối không bị nhiễm Một số nguyên nhân vệ sinh tiêu ñộc, khử trùng không tốt dẫn ñến lây lan mầm bệnh qua dụng cụ vệ sinh, quần áo… ñể lợn ñực giống lợn nái mang thai nái chờ phối bị mắc bệnh, tỷ lệ nhiễm bệnh thấp Do nghiên cứu khoảng thời gian ngắn, tiến hành theo dõi can thiệp ñối với ñàn lợn nái trại tỉnh Hưng Yên Với quy mô ñàn 600 nái, thời gian xảy PED trại có 87 nái ñang nuôi giai ñoạn: tuần tuổi, tuần tuổi tuần tuổi ñó có 34 nái có biểu triệu chứng tiêu chảy Chúng ñã tiến hành can thiệp, kết ñược thể bảng 3.12: Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 63 Bảng 3.12 Kết can thiệp ñối với lợn nái nuôi ðặc ñiểm Số can thiệp Số khỏi triệu chứng Số chết Nái nuôi tuần tuổi 29 29 Nái nuôi tuần tuổi 4 Nái nuôi tuần tuổi 1 Tổng hợp 34 34 Phương pháp can thiệp ñối với nái nuôi bị nhiễm PED ñược tiến hành sau: sử dụng kháng sinh như: Amoxyciline, Tetracyline, Tiamulin… ñể phòng bội nhiễm vi khuẩn kế phát, kết hợp thuốc bổ: B – complex, Tonophosphan, Aminofort, Glucoza 5% Can thiệp sau – ngày, lợn nái bắt ñầu ăn trở lại triệu chứng tiêu chảy giảm nhẹ từ từ dần ðối với nái mang bầu không mẫn cảm với tác nhân gây bệnh PEDV ñể phòng bệnh cho ñàn lợn sau sinh có miễn dịch, tạo kháng thể từ lợn mẹ sang lợn qua sữa, tiến hành gây miễn dịch cho toàn ñàn lợn nái mang thai trại từ tuần thứ ñến tuần thứ 14: Lấy ruột - lợn có triệu chứng ỉa chảy PED ñang sống, chưa ñược ñiều trị thuốc, có ñộ tuổi nhỏ ngày tuổi, cho vào máy xay sinh tố, xay nhỏ; Trộn hỗn hợp thu ñược với 1.000ml nước cất Lọc qua vải gạc lấy phần nước trong, cho vào 100g Colistin ñể diệt tạp khuẩn ðem dung dịch trộn với thức ăn toàn trại cho lợn nái, lợn hậu bị ăn (mỗi 10ml) Sau Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 64 ăn lợn xuất triệu chứng ỉa chảy ủ rủ, bỏ ăn ñạt yêu cầu; làm lại: Sau tuần kháng thể xuất hiện, ñối với nái mang thai tuần 15 - 16, lợn sinh chết PED Nếu phát hiện, xử lý nhanh sau tuần dập tắt ñược dịch bệnh toàn trại Sau cho nái ăn, theo dõi nái bị tiêu chảy nhẹ ñạt Còn trường hợp sau nái ăn chưa bị tiêu chảy phải cho ăn thêm với liều tăng dần ñến bị tiêu chảy Khi cho nái ăn chế phẩm ruột phải tiêm kháng sinh phòng kế phát chăm sóc tốt Nếu lợn nái sau ăn có sức khỏe tốt, cho ăn lại lần sau ngày Nái có miễn dịch sau có biểu tiêu chảy – tuần ðối với nái mang thai từ tuần 15 – 16 tuần tuổi không gây miễn dịch autovacxin không ñủ thời gian tạo ñược miễn dịch ñể truyền sang cho lợn 3.3.2 Kết can thiệp ñối với ñàn lợn Lợn theo mẹ ñối tượng bị tác ñộng mầm bệnh PEDV Khi trại xuất dịch, lợn theo mẹ lợn bị tác ñộng lớn Sau – ngày, dịch tiêu chảy lây nhiễm vào ñàn lợn trại, tỷ lệ lợn theo mẹ tiêu chảy cao Chúng tiến hành theo dõi can thiệp lợn lứa tuổi: – ngày tuổi, – 10 ngày tuổi lớn 10 ngày tuổi trại tỉnh Hưng Yên Kết ñược thể bảng 3.13: Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 65 Bảng 3.13 Kết can thiệp ñối với ñàn lợn theo mẹ ðặc ñiểm Số can thiệp Số khỏi triệu chứng Tỷ lệ khỏi triệu chứng (%) Số chết loại thải Tỷ lệ tử vong loại thải (%) Lợn – ngày tuổi 326 0 326 100 Lợn – 10 ngày tuổi 273 234 85,7 39 14,3 Lợn > 10 ngày tuổi 211 199 94,3 12 5,7 Lợn sơ sinh – ngày tuổi mẫn cảm với mầm bệnh nhất, sau – ngày mắc PED lợn chết tiêu chảy nước, chất ñiện giải Do tỷ lệ chết giai ñoạn cao, không tiến hành can thiệp trại loại thải hết ñàn lợn sơ sinh – ngày tuổi, tỷ lệ tử vong loại thải 100% Mặc dù, PED virus gây tăng cường sức ñề kháng cho ñàn lợn làm giảm triệu chứng bệnh ðối với lợn từ – 10 ngày tuổi lớn 10 ngày tuổi, tăng sưởi ấm cho ñàn vệ sinh chuồng trại sẽ, cung cấp ñiện giải cho lợn cách ngày pha Oresol cho lợn uống (nước uống phải ñạt 370C) Tiêm kháng sinh, cho uống (Amoxycilin, Colistin, Apramycin, ) ñể phòng nhiễm vi khuẩn kế phát Sau – ngày bắt ñầu bổ sung sữa Yought (1kg/2,5 lít nước ấm) ñể bổ sung men tiêu hóa cho lợn Tỷ lệ khỏi bệnh lợn từ – 10 ngày tuổi 85,7%; lợn > 10 ngày tuổi 94,3% Chúng ñã tiến hành biện pháp phòng trị bệnh cho ñàn lợn sau – ngày, lợn bắt ñầu có biểu giảm dần triệu chứng tiêu Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 66 chảy Và sau – 10 ngày, chết tiêu chảy nặng lợn bị tiêu chảy nặng chưa chết khả phục hồi loại khỏi ñàn lợn có dấu hiệu trở lại trạng thái bình thường nhanh nhẹn, bú trở lại Trong thời gian theo dõi can thiệp ñàn lợn bị mắc PED trại tỉnh Hưng Yên, tìm hiểu ñược biết rằng: trại bị mắc PED tiến hành biện pháp phòng chống dịch Tuy nhiên, tỷ lệ khỏi triệu chứng lâm sàng, tỷ lệ tử vong loại thải trại khác trình ñộ kỹ thuật viên, công tác quản lý, vệ sinh chăm sóc,… trại khác Các trại thực tốt biện pháp vệ sinh phòng bệnh, chăm sóc ñàn tốt, khả lây lan mầm bệnh ñược hạn chế giảm thiệt hại kinh tế Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 67 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ I Kết luận 1.1 Một số ñặc ñiểm dịch tễ học PED: - Tình hình mắc PED ñàn lợn nuôi tỉnh thành phía Bắc ñang diễn phổ biến (8/9 tỉnh theo dõi mắc PED), 38 trại theo dõi có 19 trại nhiễm PED chiếm tỷ lệ 50% Có khác tỷ lệ mắc bệnh tỷ lệ tử vong PEDV ñịa phương khác - Quy mô trại chăn nuôi lớn khả mắc PED lớn Tỷ lệ mắc cao trại có quy mô ñàn 100 – 500 nái (57,1%), tiếp ñến trại có quy mô > 1000 nái (55,5%) thấp trại có quy mô 50 – 100 nái (40%) - Dịch tiêu chảy lợn xảy chủ yếu lợn theo mẹ Tỷ lệ mắc tỷ lệ tử vong cao lợn từ – ngày tuổi (71,0%; 54,7%), tiếp ñến lợn từ – 10 ngày tuổi ( 51,6%; 24,5%) lợn > 10 ngày tuổi (16,1%; 15,2%) PED nhiễm nhẹ lợn nái lợn ñực giống (9,3% 1,0%), sau – ngày tự khỏi - Diễn biến PED thường xảy vào tháng 2, 3, 4, 5, 6, - Triệu chứng ñặc trưng PED tiêu chảy, phân lỏng, tanh, có màu vàng, sữa không tiêu, nôn mửa; lợn thích nằm bụng mẹ; xác chết gầy Bệnh tích ñặc trưng PED: ruột căng phồng, thành ruột mỏng, dày căng phồng chứa ñầy sữa ñông vón, không tiêu 1.2 Chẩn ñoán khẳng ñịnh kỹ thuật chẩn ñoán nhanh phương pháp RT - PCR - Kiểm tra 20 mẫu 19 trại nghi dương tính với PED test chẩn ñoán nhanh, kết 100% số mẫu ñều dương tính Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 68 - Kiểm tra 20 mẫu 19 trại nghi dương tính với PED kỹ thuật RT – PCR cho kết 100% số mẫu có kết dương tính 1.3 Can thiệp ñánh giá hiệu biện pháp phòng chống dịch tiêu chảy lợn số tỉnh phía Bắc Việt Nam - ðối với lợn nái bị tiêu chảy PED, theo dõi can thiệp 34 nái Nái khỏi triệu chứng lâm sàng tỷ lệ 100% cách tiêm kháng sinh (Amoxicilline, Tetracyline,…) kết hợp với chất bổ trợ: B – complex, Glucoza 5%,… ðối với nái mang bầu, gây miễn dịch cho ñàn nái mang thai từ tuần thứ ñến tuần thứ 14 Nái mang bầu từ tuần 15 – 16 không can thiệp gây miễn dịch autovacxin - ðối với lợn theo mẹ: cho uống Oresol hàng ngày, tiêm kháng sinh phòng bội nhiễm kế phát Sau – ngày bắt ñầu bổ sung sữa Yought (1kg/2,5 lít nước ấm) Lợn khỏi triệu chứng lâm sàng sau – 10 ngày ñiều trị Lợn từ – ngày tuổi, tỷ lệ tử vong loại thải 100% Lợn từ – 10 ngày tuổi lợn > 10 ngày tuổi, tỷ lệ tử vong loại thải 14,3% 5,7% II ðề nghị Tiếp tục ñiều tra tình hình mắc PED diện rộng ñể xây dựng ñồ dịch tễ PED Việt Nam Nghiên cứu sâu nguồn gốc phát sinh, ñường lây lan mối liên hệ dịch tễ phân tử virus nước qua phân tích ñặc trưng kiểu gen Giải trình tự gen PEDV tỉnh miền Bắc Việt Nam ðánh giá ñột biến gen PEDV tỉnh phía Bắc so với phía Nam Việt Nam nước khu vực ñể xác ñịnh nguồn gốc sinh bệnh PED ðánh giá hiệu sử dụng vacxin Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 69 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tham khảo nước Nguyễn Văn ðiệp Nguyễn Thị Lan (2013) “Bệnh tiêu chảy dịch lợn (Porcine Epidemic Diarrhea), thông tin cho công tác chẩn ñoán, phòng trị bệnh” Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XX, số 2, 2013, tr 83 – 94 Nguyễn Tất Toàn ðỗ Tiến Duy (2012) “ðặc trưng kiểu gien virut gây bệnh tiêu chảy cấp (PEDV) heo số tỉnh miền ðông Nam Bộ” Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XIX, số 7, 2012, tr 34 – 41 Nguyễn Tất Toàn ðỗ Tiến Duy (2013) “Một số yếu tố liên quan ñặc ñiểm bệnh học dịch tiêu chảy cấp heo theo mẹ số tỉnh phía Nam” Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XX, số 2, 2013, tr – 11 Nguyễn Tất Toàn, Nguyễn ðình Quát, Trịnh Thị Thanh Huyền, ðỗ Tiến Duy, Trần Thị Dân, Nguyễn Thị Phước Ninh Nguyễn Thị Thu Năm (2012) “Phát virut gây bệnh tiêu chảy cấp (PEDV) heo tỉnh miền ðông Nam Bộ” Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XIX, số 5, 2012, tr 26 – 30 Nguyễn Như Thanh, Lê Thanh Hòa (2011) Giáo trình Phương pháp nghiên cứu Dịch tễ học thú y Hà Nội, Nhà xuất Khoa học Tự nhiên Công nghệ II Tài liệu nước Bridgen A., Duarte M., Tobler K., Laude H., Ackermann M., (1993) "Sequence determination of the nucleocapsid protein gene of the porcine epidemic diarrhoea virus confirms that this virus is a Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 70 coronavirus related to human coronavirus 229E porcine transmissible gastroenteritis virus.” J Gen Virol 74: 1795 - 1804 Callebaut P., DeBouck P (1981) “Some characteritics of a new porcine coronavirus detection of antigen antibody by ELISA.” Proc 5th Int Congr Virol, p 420 Carvajal A., Diego R., Lanza I., Rubio P., Carmenes P Schwyzer M (1995) "Seroprevalence of porcine epidemic diarrhea virus infection among diferent types of breeding swine farms in Spain." Pre Vet Med 23: 33 - 40 Chae C., Kim O., Choi C., Min K., Cho WS., Kim J Tai JH (2000) "Prevalence of porcine epidemic diarrhea virus transmissible gastroenteritis virus infection in Korean pigs." Vet Rec 18: 606 608 Chasey D Cartwright S.F ( 1978) "Virus-like particles associated with porcine epidemic diarrhoea." Res Vet Sci 25: 255 - 256 Dae S Song, Bo K Kang, Jin S Oh, Gun W Ha, Jeong S Yang, Hyoung J Moon, Yong-Suk Jang, Bong K Park (2006) "Multiplex reverse transcription - PCR for rapid differential detection of porcine epidemic diarrhea virus, transmissible gastroenteritis virus porcine group A rotavirus." J Vet Diagn Invest 18: 278 - 281 DeBouck P., Callebaut P Pensaert M (1982) "Prevalence of the porcine epidemic diarrhea (PED) virus in pig population of different countries." Proc Congr Int Pig Vet Soc 7: 53 DeBouck P Pensaert M (1980) "Experimental infection of pigs with a new porcine enteric coronavirus CV777." Am J Vet Res 41: 219 223 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 71 Duarte, M Laude, H (1994) "Sequence of the spike porcine epidemic diarrhoea virus J Gen Virol 75 (5): 1195 - 1200 Duy, D.T., Toan, N.T, Puranaveja, S Thanawongnuwech, R (2011) "Genetic Characterization of Porcine Epidemic Diarrhea Virus (PEDV) Isolates from Southern Vietnam during 2009-2010 Outbreaks " Thai J Vet Med 2011 41(2): 55-64 Hofmann M Wyler R (1987) "Serolgische Untersuchung uber das Vorkommen der Epizootischen Virusdiarrhoe der Schweine (EVD) in der Schweiz." Schweiz Arch Tierheilkd 129: 437 - 442 Hofmann M Wyler R (1988) "Propagation of the virus of porcine epidemic diarrhea in cell culture." J Clin Microbiol 26: 2235 - 2239 Hofmann M Wyler R (1989) "Quantitation, biological physiochemical properties of cell cultures - adapted porcine epidemic diarrhea coronavirus (PEDV)." Vet Microbiol 20: 131 - 142 Hofmann M Wyler R (1990) "Enzyme - linked immunosorbent assay for the dectection of porcine epidemic diarrhea coronavirus antibodies in swine sera Vet Microbiol 21: 263 - 273 Hwang EK., Kim JH., Jean YH., Bae YC., Yoon SS., Park CK., Kwoen CH., Yoon YD Ackermann M (1994) "Current occurrence of porcine epidemic diarrhea in Korea." RDA J Agri Sci 36: 587 - 596 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 72 Ishikawa K, Sekiguchi H, Ogino T, Suzuki S (1997) "Direct and rapid detection of porcine epidemic diarrhea virus by RT-PCR." J Virol Methods 69(1-2):191-5 Kadoi K., Sugioka H., Satoh T Kadoi BK (2002) "The propagation of a porcine epidemic diarrhea virus in swine cell lines New Microbiol 25: 285 - 290 Kim S.Y., Song, D.S Park B.K (2001) "Differential detection of transmissible gastroenteritis virus porcine epidemic diarrhea virus by duplex RT - PCR J Vet Diagnos Invest 13: 516 - 520 Kocherhans, R., Bridgen, A., Ackerman, M Tobler, K (2001) "Completion of the porcine epidemic diarrhoea Coronavirus (PEDV) genome sequence" Virus Genes 23(2): 137 - 144 Kweon CH., Kwon BJ., Jung TS., Kee YJ., Hur DH., Hwang EK., Rhee JC An SH (1993) "Isolation of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) infection in Korea." Korean J Vet Res 33: 249 - 254 Lee HK., Yeo SG., (2003) "Biological physicochemical properties of porcine epidemic diarrhea virus Chinju99 strain isolated in Korea." J Vet Clin 20: 150 - 154 Maurice Pensaert (2005) "Porcine epidemic diarrhoea now enzootic in Asia" Pig Progress Enteric Diseases Special III Okjin Kim Chanhee Chae (2002) "Comparison of reverse transcription polymerase chain reaction, immunohistochemistry in situ hybridization for the detection of porcine epidemic diarrhea virus in pigs" Can J Vet Res 66(2): 112 - 116 Oldham, J (1972) " Pig Farming." Oct suppl 72 - 73 Park, S.J., Moon, H.J., Yang, J.S., Lee, C.S., Song, D.S., Kang, B.K Park, B.K (2007) "Sequence analysis of the partial spike Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 73 glycoprotein genc of porcine epidemic diarrhea viruses isolated in Korea." Virus Genes 35(2): 321- 332 Pensaert MB DeBouck P (1978) "A new coronavirus-like particle associated with diarrhea in swine." Arch Virol 58: 243 - 247 Pensaert MB Van Reeth K (1998) "Porcine epidemic diarrhea porcine respiratory coronavirus." Am Assoc Swine Pract 433 - 436 Puranaveja, S., Poolperm, P., Lertwatcharasarakul, P., Kesdaengsakonwut, S., Boonsoongnern, A., Urairong, K., Kittkoon, P., Choojai, P., Kedkovid, R., Teankum, K Thanawongnuwech, R (2009) "Chinese - like strain of porcine epidemic diarrhea virus, Thai Lan." Emerg Infect Dis 15(7): 1112 - 1115 Rodask L., Smid B., Valí cek L Smítalová Z (2004) "Elisa detection of group A rotavirus, transmissible gastroenteritis virus porcine epidemic diarrhoea virus in faeces of piglets Proc Congr Int Pig Vet Soc 1: 271 Shibata I., Tsuda T., Ono M., Mori M., Sueyoshi M Uruno K (2000) "Isolation of porcine epidemic diarrhea virus in porcine cell cultures experimental infection of pig of different ages Vet Microbiol 72: 173 - 182 Sueyoshi M, Tsuda T, Yamazaki K., Yoshida K., Nakazawa M., Sato K., Minami T., Iwashita K., Watanabe M Suzuki Y (1995) "An immunohistochemical investigation of porcine epidemic diarrhoea." J Comp Path 113: 59 - 67 Sun, R.Q., Cai, R.J., Song, C.X., Chen, D.K., Chen, Y.Q Liang, P.S., (2012) "Outbreak of porcine epidemic diarrhea in suckling piglets China." Emerging infectious disease Vol 18 No.1 161 - 163 Suphasawatt Puranaveja, Pariwat Poolperm, Preeda Lertwatcharasarakul, Sawang Kesdaengsakonwut, Alongkot Boonsoongnern, Kitcha Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 74 Urairong, Pravina Kitikoon, Porjit Choojai, Roongtham Kedkovid, Komkrich Teankum Roongroje (2009) "Chinese - like strain of porcine epidemic diarrhea virus, Thai Lan." Emerg Infect Dis Truy cập ngày 12/3/2013 from http://wwwnc.cdc.gov/eid/article/15/7/081256.htm35 Wood, E ( 1977) "An apparently new syndrome of porcine epidemic diarrhoea." Vet Rec 100: 243 - 244 Yongfei Pan, Xiaoyan Tian, Wei Li, Qingfeng Zhou, Dongdong Wang, Yingzuo Bi, Feng Chen Yanhua Song (2012) "Isolation characterization of a variant porcine epidemic diarrhea virus in China." Virology Journal 9:195 Zhili Li, Feng Chen, Yao Yuan, Xiduo Zeng, Zhongyan Wei, Ling Zhu, Baoli Sun, Qingmei Xie, Yongchang Cao, Chunyi Xue, Jingyun Ma Yingzuo Bee (2013) "Sequence phylogenetic analysis of nucleocapsid genes of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) strains in China." Arch Virol 2013 June; 158(6): 1267–1273 Published online 2013 February doi: 10.1007/s00705-012-1592-4 from http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3668129/ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 75 [...]... hiểu rõ tình hình PED ở Việt Nam, ñặc ñiểm dịch tễ học của bệnh và ñánh giá hiệu quả của các biện pháp phòng chống, chúng tôi thực hiện ñề tài: "ðặc ñiểm dịch tễ của dịch tiêu chảy (Porcine epidemic diarrhea – PED) và biện pháp can thiệp dịch tại một số trại lợn ở miền Bắc Việt Nam. " 1.2 MỤC TIÊU CỦA ðỀ TÀI Nghiên cứu một số ñặc ñiểm dịch tễ học của PED và ñánh giá hiệu quả can thiệp dịch 1.3 Ý NGHĨA KHOA... nghiên cứu của ñề tài này là cơ sở cung cấp một số thông tin về tình hình dịch tễ học của PED ở một số tỉnh miền Bắc Việt Nam Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 2 - Khẳng ñịnh sự có mặt của PEDV trên ñàn lợn ở một số trại miền Bắc, Việt Nam 1.4 Ý NGHĨA THỰC TIỄN - Xây dựng phác ñồ ñiều trị PED khi có dịch xảy ra - ðề xuất một số biện pháp phòng và ñiều... DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 ðỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU Dịch tiêu chảy (PED) ở ñàn lợn nuôi tại một số trại lợn miền Bắc – Việt Nam 2.2 NỘI DUNG 1 Theo dõi một số ñặc ñiểm dịch tễ học của dịch tiêu chảy ở lợn: - Tỷ lệ mắc, tỷ lệ tử vong theo ñịa phương, quy mô ñàn, lứa tuổi, theo các tháng trong năm - Triệu chứng, bệnh tích của PED 2 Chẩn ñoán khẳng ñịnh bệnh bằng kỹ thuật chẩn ñoán nhanh và phương pháp. .. chẩn ñoán nhanh và phương pháp RT – PCR 3 Can thiệp và ñánh giá hiệu quả của các biện pháp phòng chống dịch tiêu chảy ở lợn tại một số tỉnh phía Bắc Việt Nam 2.3 THỜI GIAN VÀ ðỊA ðIỂM NGHIÊN CỨU 2.3.1 Thời gian nghiên cứu: 10/2011 – 6 /2013 2.3.2 ðịa ñiểm nghiên cứu: - Mẫu bệnh phẩm lấy từ một số trại lợn miền Bắc Việt Nam - Các xét nghiệm thực hiện tại Bộ môn: Vi sinh – Truyền nhiễm, khoa Thú y, trường... trở thành dịch ñịa phương tồn tại ở lợn Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 8 6 – 10 tuần và ở lợn hậu bị mới nhập về trong thời gian ít nhất 1,5 năm kể từ khi bệnh bùng phát lần ñầu tiên Ở Tây Ban Nha, PED ñã ñược xác nhận là nguyên nhân gây dịch tiêu chảy ñịa phương tại 7 trong số 15 trại, với triệu chứng tiêu chảy kéo dài trên một số lợn nái tại một. .. tiên ở Việt Nam ñầu năm 2008 PEDV ở Việt Nam có sự khác biệt cao về một phần trình tự nucleotide của gen S so với các tài liệu ñã ñược công bố như PEDV phân lập ở châu Âu (Br1/87, CV777) và ở Hàn Quốc (Spk1, Chinju99, DR13 và KNU – 0801) Mối quan hệ của 2 gen protein S và M ñã chỉ ra rằng PEDV ở Việt Nam giống với dòng virus phân lập ở Trung Quốc (JX – 2004 – 2 và DX), ở Thái Lan (07NP01, 08NP02 và 08CB01)... lên của virus PED trong tế bào bàng quang và thận lợn Tiếp theo ñó, (Kadoi và cs 2002) ñã phân lập ñược dòng P – 5V sử dụng như một chủng vacxin nuôi cấy trong tế bào dòng lợn KSEK6 và IB – RS2 1.2.2 Tình hình nghiên cứu Porcine Epidemic Diarrhoea (PED) ở Việt Nam Hiện nay, ở Việt Nam có rất ít các nghiên cứu về PEDV Ở phía nam Việt Nam có nghiên cứu của các tác giả (ðỗ Tiến Duy, Nguyễn Tất Toàn và. .. ra vào trại; ñặc biệt là các xe và người vào bắt lợn, mua lợn vì ñây là nguyên nhân chính làm lây lan dịch bệnh - Có hàng rào ngăn cách giữa trong và ngoài trại, xe vào bắt lợn không ñược vào trong trại mà phải ñỗ ở ngoài trại ñúng nơi qui ñịnh - Xe vận chuyển trong trại sau khi vận chuyển lợn phải ñược rửa, sát trùng, ñể khô mới ñược vận chuyển lợn tiếp - Có chuồng bán lợn nằm sát vòng ngoài của trại. .. trong các quần thể lợn tại Bỉ, Anh, ðức, Pháp, Hà Lan, Thụy Sỹ, Bulgari, và ðài Loan (Hofmann và Wyler 1987) Ở vùng ðông Bắc Ấn ðộ 21,2% trong số 528 mẫu huyết thanh của lợn từ 2 – 6 tháng tuổi dương tính với kháng thể PEDV Virus ñã ñược phân lập ở hầu hết các nước chăn nuôi lợn tại châu Âu cũng như ở Trung Quốc Hiện chưa có báo cáo nào công bố về việc bùng phát PED ở vùng Bắc và Nam Mỹ Ở châu Âu, sự bùng... (G1 – 1, G2 – 1, G3 – 1) Phân tích của gen S cho thấy các chủng virus PED ở nhóm G1, có sự tương ñồng nucleotit với nhau từ 96,1 – 100%, và tương ñồng 93,5 – 96,7% và 88,7 – 91,5 lần lượt với các chủng virus ở nhóm G2 và G3 Mức tương ñồng nucleotit giữa các chủng PEDV nhóm G2 là 96,7 – 99,8%, và nhóm G2 tương ñồng 91,8 – 93,0% với các chủng PEDV ở nhóm G3 (Kim và cs 2001) ða số các chủng PEDV ở Hàn ... Việt Nam, ñặc ñiểm dịch tễ học bệnh ñánh giá hiệu biện pháp phòng chống, thực ñề tài: "ðặc ñiểm dịch tễ dịch tiêu chảy (Porcine epidemic diarrhea – PED) biện pháp can thiệp dịch số trại lợn miền. .. HIỆU QUẢ CỦA CÁC BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG DỊCH TIÊU CHẢY Ở LỢN TẠI MỘT SỐ TỈNH PHÍA BẮC VIỆT NAM 63 3.3.1 Kết can thiệp ñối với ñàn lợn nái 63 3.3.2 Kết can thiệp ñối với ñàn lợn ... phương pháp RT – PCR Can thiệp ñánh giá hiệu biện pháp phòng chống dịch tiêu chảy lợn số tỉnh phía Bắc Việt Nam 2.3 THỜI GIAN VÀ ðỊA ðIỂM NGHIÊN CỨU 2.3.1 Thời gian nghiên cứu: 10/2011 – /2013