SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip M U Vitamin C (Vit.C) hay cũn gi l axit L-ascobic l mt nhng loi hp cht quan trng i vi s sng ca ngi Vit.C úng vai trũ thit yu cỏc quỏ trỡnh sinh húa xy c th ngi, nú tham gia vo quỏ trỡnh trao i cht, iu tit quỏ trỡnh sinh tng hp hoormon, l cht khỏng cho c th sinh vt, cht chng lóo húa cỏc t bo Thiu Vit.C s gõy mt s bnh nguy him cú th dn n t vong Vit.C cũn c s dng cỏc ngnh cụng nghip thc phm vi vai trũ l cht chng oxi húa Nú giỳp cho cỏc sn phm gi c s ti ngon quỏ trỡnh bo qun Nhiu loi hng húa trờn th trng nh nc gii khỏt, nc ộp trỏi cõy úng hp, bt dinh dng cho tr em cha Vit.C nhm trỡ cht lng cng nh l mt tiờu qung cỏo sn phm Cỏc loi rau xanh v hoa qu l nhng ngun cung cp Vit.C t nhiờn, rt tt cho sc khe Ngoi Vit.C cng c tng hp theo ng nhõn to, ỏp ng nhu cu cao v vitamin ca c th ngi cng nh ca cỏc ngnh cụng nghip cú liờn quan Tuy nhiờn Vit.C l mt cht rt d b phõn hy iu kin nhit v ỏnh sỏng bỡnh thng Do ú vic xỏc nh nú cỏc i tng trờn mt cỏch chớnh xỏc, nhanh chúng l mt yờu cu hng u c t Vit Nam, phng phỏp xỏc nh Vit.C cỏc phũng thớ nghim ch yu l phng phỏp chun th tớch, cú chớnh xỏc v nhy khụng cao Theo nghiờn cu Vit.C l mt hp cht cú tớnh kh, cú th phõn tớch bng cỏc phng phỏp in húa c bit l phng phỏp von-ampe õy l mt nhng phng phỏp phõn tớch hp cht hu c nhanh v t c chớnh SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip xỏc cao, hn th na chi phớ cho mỏy múc v húa cht rt phự hp vi iu kin ca cỏc phũng thớ nghim Vit Nam Vỡ vy tụi chn ti nghiờn cu: NGHIấN CU XC NH HM LNG VITAMIN C TRONG MT S LOI RAU BNG PHNG PHP VON-AMPE Nhim v chớnh t ra: - Nghiờn cu quy trỡnh xỏc nh Vit.C bng phng phỏp von-ampe mt cỏch nhanh chúng, chớnh xỏc cao, chi phớ thp, d thc thi cỏc phũng thớ nghim Vit Nam - ỏnh giỏ tin cy ca quy trỡnh phõn tớch - ng dng xỏc nh Vit.C i tng trờn th trng: mt s loi rau SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip NI DUNG CHNG I: TNG QUAN TI LIU 1.1 I CNG V VIT.C 1.1.1 Cụng thc v nhn nh Vit.C l tờn thng gi ca axit L-ascobic, cú tờn quc t l: 2-oxo-L-threo-hexono-1,4-lactone-2,3-enediol hoc (R)-3,4-yhdroxy-5-((S)-1,2-dihydroxylethyl)furan-2(5H)-one Cụng thc phõn t C6H8O6 Khi lng phõn t 176,1 Nhit núng chy 1930C Cụng thc cu to CH2OH OH O O HO pK1 ( C3OH) 4,2 pK2 ( C2OH) 11,6 OH (*) Trong cụng thc cu to ca axit ascobic, C4* , C5* l cacbon bt i, vỡ vy tn ti ng phõn quang hc: axit L-ascobic, axit izo L-ascobic, axit Dascobic, axit izo D-ascobic Trong cỏc ng phõn ny ch cú axit L-ascobic v izo L-ascobic l cú tỏc dng cha bnh, cũn cỏc ng phõn D v izo D l cỏc antivitamin, tc l cht c ch tỏc dng ca vitamin Trong thiờn nhiờn ch tn ti dng axit L-ascobic, cũn cỏc ng phõn khỏc ch thu c bng ng tng hp SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip Axit ascobic rn l nhng tinh th n t, khụng mu, khụng mựi, cú v chua, núng chy 1930C Axit ascobic d tan nc, ớt tan hn ru v khụng tan cỏc dung mụi hu c khụng phõn cc Axit ascobic rt d b phõn hy di tỏc dng ca ỏnh sỏng, nhit vỡ vy cn bo qun axit ascobic búng ti v nhit thp 1.1.2.Tớnh cht húa hc a, Tớnh kh Axit ascobic l cht kh mnh, cú bỏn phn ng nh sau: CH2OH CH2OH OH OH O O O O HO + 2H+ + 2e OH O O Axit L-ascobic Axit L-ehiroascobic Th kh ca nú ph thuc nhiu vo PH ca mụi trng Axit ascobic dng khan khỏ bn vng, nhng phõn t cú nhúm OH ớnh vo C cha no (C2, C3) nờn b m t hoc dung dch nú rt d b oxi húa, c bi oxi khụng khớ, nht l cú mt cỏc ion kim loi ng, st, magie theo phn ng sau: CH2OH CH2OH OH OH O O O O + 1/2 O2 HO OH + H2O O O SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip Sn phm to l axit L- ehiroascobic, cht ny cng cú hot tớnh sinh hc tng t nh axit L-ascobic, nhng khụng bn, nú d b thy phõn phỏ vũng to axit 2,3-ixetogulonic CH2OH(CHOH)2COCOCOOH, l cht khụng cú tỏc dng sinh lý Tc oxi húa axit ascobic thnh axit L-ehiroascobic cng ln PH cng tng Cỏc cht saccaroz, carotenoit, flavonoit cú kh nng lm chm quỏ trỡnh oxi húa ca axit ascobic nờn c dựng lm cht n nh húa Vit.C C ch s phõn hy ca axit ascobic bi cht oxi húa cú th c biu din theo s sau: SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip CH2OH CH2OH COOH OH OH O C O O -2e, -2H+ H2O C O O O +2e, +2H+ OH HO COOH COOH H2O CHO OH HO O O OH HO CH2OH Axit L-ascobic Axit L-ehiroascobic CHO COOH OH [O] HO OH HO CH2OH CHO [O] Axit 2,3-ixetogulonic COOH [O] HO HO CHO [O] CH2OH COOH COOH CH2OH COOH CH2OH [O] C O [O] CH2OH C O CH2OH HO CH2OH [O] CH2OH CH2OH [O] C O CH2OH [O] COOH [O] C O CH2OH CH2OH Cú th thy, axit L-ascobic u tiờn b oxi húa thnh axit Lehiroascobic Di tỏc dng ca nc, axit L-ehiroascobic b thy phõn m vũng to thnh axit 2,3-ixetogulonic khụng cũn hot tớnh vitamin na Phn ng ny khụng thun nghch, tng nhanh theo PH v nhit ca dung dch Tip theo, axit 2,3-ixetogulonic b phõn hy thnh mt lot cỏc sn phm trung gian khỏc, cui cựng to axit oxalic Ngoi s phõn hy theo kiu oxi húa, axit ascobic cũn cú xu hng phõn hy theo kiu thy phõn mụi trng kim hoc axit mnh thnh fufurol v cỏc sn phm khỏc qua phn ng decacboxyl húa v dehydrat húa Tng t nh vy, axit ascobic d dng cho hiro cho cỏc peoxit, vỡ vy ngn khụng cho cỏc peoxit oxi húa cỏc hp cht khỏc Do ú ngi ta s dng axit ascobic lm cht chng oxi húa cụng nghip ch bin SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip b, Tớnh axit Trong dung dch nc axit ascobic l mt axit yu nc 1, pKa,1 = 4,2 tong ng vi quỏ trỡnh phõn ly H+ ca nhúm OH ớnh vo C3 (*), v rt yu nc 2, pKa,2 = 11,6 tng ng vi s phõn ly H+ ca nhúm OH ớnh vo C2 (*) Axit ascobic d dng phn ng vi dung dch baz mnh nh NaOH, KOH, Ca(OH)2 to mui CH2OH CH2OH OH OH O O O + NaOH OH HO O + H2O O O Cỏc mui ny d tan nc hn axit ascobic nờn cụng nghip h s dng dng mui ca axit ascobic lm cht bo qun cỏc dung dch nc qu Trong dung dch kim c, vũng -lacton b phỏ v to mui gluconat CH2OH OH O O + NaOH CH2OH-(CHOH)3-C-COONa + H2O HO O OH Tuy nhiờn axit húa v un nh thỡ vũng lacton li lp li c, Tỏc dng vi axit hu c to este Trong CTCT ca axit ascobic cú nhiu nhúm OH nh nhúm chc ru, cú kh nng to este vi cỏc axit hu c, c bit l cỏc axit bộo nh axit SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip panmitic, axit stearic Sn phm este dng 6-O-axyl L-ascobic (ascobyl panmitat, ascobyl stearat) cú mch cacbon di, d tan du Nhng este ny c tng hp dựng lm cht bo qun cht bộo cụng nghip ch bin Mt s dn xut khỏc ca axit ascobic cng c s dng l: CH2OH CH2OH OH OH O O R O O OR HO CH2OCOR OH 5,6-O-ankyliden axit ascobic CH2OH CH2OH OH OH O O O O OH 6-O-ankanoyl ascobat OH HO 3-O-ankyl axit ascobic OH HO O O RO 2-O-ankyl axit ascobic O O O O HO OCOR 2-O-ankanoyl ascobat ROCO OH 3-O-ankanoyl ascobat Trong ú, R l cỏc gc hirocacbon mch di, cú th no hoc khụng no, giỳp cho cỏc dn xut ca axit ascobic d tan du bộo hn 1.1.3 Tớnh cht sinh lý Vit.C cú tỏc dng tng cng sc khỏng cho c th, chng li cỏc hin tng choỏng hoc ng c húa cht, c tớnh ca vi trựng tớnh cht kh mnh ca Vit.C Vit.C tham gia vo quỏ trỡnh oxi húa kh khỏc ca c th nh: chuyn húa hp cht thm thnh phenol; quỏ trỡnh hydroxyl húa triptophan thnh colagen, nh cú quỏ trỡnh hydroxyl húa prolin thnh oxyprolin cn thit cho vic tng hp colagen, vỡ vy Vit.C lm cho vt thng mau lnh SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip Vit.C cú v trớ quan trng quỏ trỡnh hỡnh thnh cỏc hoormon ca tuyn giỏp trng v tuyn trờn thn Khi c th thiu Vit.C s xut hin cỏc triu chng bnh lý nh chy mỏu li, rng, l chõn lụng hoc cỏc c quan ni tng ú l thnh cỏc mch mỏu b mng C th bỡnh thng cú nhu cu Vit.C 24 gi l 6080 mg 1.1.4 Cỏc ngun cung cp Vit.C Trong t nhiờn, thc vt tng hp c Vit.C, ú Vit.C cú nhiu rau xanh c bit l t v cỏc loi rau ci, rau ngút , cỏc loi qu nh cam, chanh, bi, i, kh, tỏo, da hu Khụng thy xut hin Vit.C cỏc sn phm t ng vt nh tht, trng, sa Mt s c th sng cú kh nng tng hp Vit.C t D-glucoz nh tỏc dng ca enzim theo s sau: HO H [O] OH HO H HO H H O H enzim [H] H OH OH HO H H OH CH2OH H O HO enzim H H OH H OH OH H H COOH COOH CH2OH CH2OH enzim CH2OH [O] OH OH O O OH OH H H enzim O O HO OH Axit L - ascobic SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip Ngoi ngi tng hp Vit.C nhm cỏc mc ớch khỏc Cỏc ch phm dc ch cha Vit.C, hay cỏc viờn Vitamin tng hp ú cú Vit.C dựng mc ớch cha bnh, tng cng sc khỏng cho ngi m Cỏc loi nc hoa qu gii khỏt, bt dinh dng tr em, sa cha mt lng nh Vit.C, l mt tiờu qung cỏo cho sn phm Mt lng ln Vit.C lm cht bo qun thc phm Trong cụng nghip dc phm, Vit.C c tng hp qua cỏc giai on sau: OH H HO H H2/Ni H H H OH HO HO HO H C O oxi hoa H HO Acetobacter xylinum H HO H CH2OH CH2OH D-Glucoz H H+ HO C Tautome hoa H H CH2OH HO H+ OH O H +2H2O,H+ -2CH3COCH3 [O] O C H3C C O H3C H H2C CH3 O H 10 O H2C CH2OH Vitamin C H H H H H O H COOH H HO O H3C D-Soboz C O O C +2CH3COCH3 OC HO C O C H3C CH2OH D-Sobitol OC HO OH OH CH2OH CH2OH CH2OH CHO O C CH3 O CH3 C CH3 SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip pKa1 = 3,128 pKa1 = 3,036 pKa1 = 1,27 pKa2 = 4,761 pKa2 = 4,366 pKa2 = 4,25 pKa3 = 6,396 Tin hnh thc nghim kho sỏt nh hng ca chỳng lờn pớc ca Vit.C o ng cc ph ca Vit.C 2mg/L cú mt cỏc axit ú vi t l lng gp k ln Kt qu c a bng 3.7 Bng 3.7: Kt qu kho sỏt nh hng ca axit oxalic, axit xitric, axit tactric lờn súng cc ph ca Vit.C Axit Tactric Ca/C0 Ip(nA) %iP/i0P 115 0,00 25 109 5,50 50 108 6,48 200 102 12,75 400 99,5 15,58 500 98 17,35 Axit Xitric Ca/C0 Ca/C0 iP(nA) 114 0,00 25 103 9,65 50 103 9,65 100 102 10,53 300 101 11,40 400 98,3 13,77 500 97,8 14,21 Axit Oxalic Ca/C0 iP(nA) % iP/i0P 115 0,00 50 112 2,61 100 107 6,96 150 105 8,70 250 102 11,30 300 98,8 14,09 Nhn xột Kt qu cho thy cú mt cỏc axit hu c khỏc gp n hng trm ln v lng, pớc ca Vit.C nng mg/L cho kt qu tt, pớc cõn i, th dch chuyn ớt v phớa dng hn Chiu cao pớc cú b gim i Trng hp cú mt axit oxalic gp 200 ln v lng thỡ chiu cao pớc mi gim 10%, axit tactric l khong 150 ln cũn axit xitric l 100 ln Pớc ca Vit.C b gim ch hm lng cỏc axit oxalic, axit xitric v axit tactric ln, nht ca dung dch tng v lm gim h s khuch tỏn Phn t ca chỳng cng kng knh, linh ng ca dung dch cng kộm ú nú nh hng mnh hn n chiu cao pớc, cú th thy axit xitric kng knh hn axit oxalic nờn ch cn hm lng gp 100 ln ó gim pớc i 10% cũn axit oxalic thỡ phi lờn n 200 ln 52 SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip Tuy nhiờn vic gim chiu cao pớc khụng gõy khú khn cho phõn tớch nu phõn tớch nng 10-5M, mc ớch l súng cc ph ca Vit.C xut hin vi cht lng tt Hn na ta thy cỏc axit ny khụng cha nhúm chc d b oxi húa nh vit.C õy chớnh l mt nhng u im ca phng phỏp von-ampe l cú chn lc cao Cú th phõn tớch mt cht cú mt lng ln cỏc cht khỏc Kt qu ny cng phự hp vi kt qu a bi phng phỏp phõn tớch Vit.C bng in cc bin tớnh v in cc sinh hc 3.1.6.2 Kho sỏt nh hng ca ion clorua Trong cỏc loi thc phm thng cha mt lng nht nh ion clorua Ion ny cú mt nng ln cú th gõy cn tr quy trỡnh phõn tớch Vỡ vy tụi tin hnh kho sỏt gii hn nng cho phộp i vi ion clorua phng phỏp phõn tớch von-ampe Vit.C Theo ti liu nghiờn cu thỡ ion clorua nh hng ch yu n th oxi húa ca git thy ngõn, nng cng ln thỡ th oxi húa ca Hg cng chuyn v vựng õm hn, ngha l chuyn dch v phớa pớc ca Vit.C n mt nng no ú, ng cc ph ca Hg s bao trựm lờn pớc ca Vit.C Tin hnh o ng cc ph ca Vit.C 2mg/L, thay i nng ion clorua theo cỏc hm lng: 5, 10, 50,100, 250, 500 mg/L tng ng 1,4.10 -4 M; 2,8.10-4 M; 1,4.10-3 M; 7.10-3 M; 1,4.10-2 M Kt qu cho hỡnh 3.8 53 SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip Hỡnh 3.8: Súng cc ph ca Vit.C cú mt ion clorua vi nng tng dn Nhn xột: Khi hm lng ion clorua dung dch tng dn, giỏ tr th nh pớc ca Vit.C khụng thay i nhiu (t -47,6 mV khụng cú Cl- ln hn 100 mg/L), ú th oxi húa Hg chuyn dch theo chiu õm, gn pớc ca ca Vit.C nhng mỏy tớnh khụng th xỏc nh chiu cao pớc c na Cú th kt lun nng ion clorua nh hn 10 -2M thỡ cú kh nng phõn tớch Vit.C bng cc ph Thờm na hm lng ca ion clorua rau qu thc t khụng vt quỏ s ny Trong trng hp hm lng ion clorua quỏ ln, phi x lý vi bc nitrat v lc b kt ta 3.1.7 bn ca Vit.C cỏc mụi trng khỏc nhau: Vit.C l cht d b phõn hy, nht l dung dch, nờn luụn luụn phi pha mu chun theo ngy Tuy nhiờn mt ngy dung dch Vit.C cng cú th b phõn hy mt lng nh c bit l x lý mu rau, qu, 54 SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip quỏ trỡnh x lý mu buc phi lc ngoi khụng khớ, thi gian lc cú lỳc kộo di 10 n 15 phỳt, lng oxi khụng khớ nm cõn bng vi dung dch v cú th lm gim nng ca Vit.C gim ti a hiu ng ny, cn chn dung dch pha Vit.C, hay dung dch dựng chit Vit.C mu thc t cho bn ca Vit.C ú l ln nht Ngha l mụi trng ú phi hũa tan oxi kộm hn, kỡm hóm tc oxi húa axit ascobic Theo ti liu cho bit, Vit.C bn hn mụi trng pH thp ng thi mụi trng axit oxi cng hũa tan ớt hn Cú th pha dung dch m photphat, hoc l dung dch hn hp axit metaphotphat v axit axetic hay n gin l nc Tuy nhiờn c ch phõn hy Vit.C bi oxi rt phc vỡ vy tụi tin hnh kho sỏt b bn ca Vit.C cỏc mụi trng khỏc Do quy trỡnh phõn tớch cc ph Vit.C nn axetat nờn tụi chn mụi trng l dung dch axit axetic 0,1 M (pH=2,67), dung dch m axetat 0,1M (pH=4,66) v nc Tt c dung dch u pha bng nc ct hai ln, v ui oxi hũa tan trc pha mu Pha loóng ln dung dch Vit.C gc 1g/L bng cỏc dung dch ó ui oxi: a) dung dch axit axetic 0,1M; b) dung dch m axetat 0,1M (5:5); c) nc ct hai ln cỏc dung dch va pha tip xỳc vi khụng khớ Theo dừi nng Vit.C cỏc dung dch ny theo thi gian, sau phỳt, ly 0,1 mL tng dung dch, o súng cc ph ca Vit.C 10 mL dung dch m axetat theo quy trỡnh ghi bng 2.1, ghi li chiu cao pớc sau mi ln o t=0, 30, 60, 180, 240 phỳt Kt qu thu c bng 3.8 55 SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip Bng 3.8: Chiu cao pớc Vit.C theo thi gian cỏc mụi trng khỏc Thi gian Vit.C 200mg/L (phỳt) Trong HAx Trong m Ax Trong nc 69,5 66,9 69,7 30 70,8 67,1 68,6 60 70,7 64,7 68,9 180 70,9 57,8 69,2 240 69,7 54,0 68,0 Nhn xột: T thc nghim cho thy, sau 240 phỳt, Vit.C dung dch axit axetic v nc hu nh khụng h thay i, mc dự ngoi khụng khớ, cũn dung dch m axetat (5:5, pH=4,7) thỡ chiu cao pớc ó gim 5% sau 60 phỳt Vỡ vy pha dung dch Vit.C gc bng nc hoc bng dung dch axit axetic ó loi oxi m bo bn sut thi gian lm vic Tuy nhiờn n gin tụi chn dung mụi nc pha ch dung dch chun Trong trng hp chit Vit.C t mu rau qu thc t, kinh nghim cho thy nu chit mụi trng pH thp, thỡ cú u im l cỏc cht mu, cỏc cht hot ng b mt s b kt ta dng keo, dung dch chit hn, d lc hn Vỡ vy x lý mu tụi dựng dung dch axit axetic 0,1 M cú pH = 2,76 chit Vit.C, ng thi dch chit cha Vit.C thu c s bn quỏ trỡnh o 56 SVTH: Lờ Th Thu Huyn 80 Khúa lun tt nghip i (nA) a b c 60 40 20 50 150 100 200 t (phút) 250 Hình 3.9: Đ thịbiểu diễn độ bền dung dịch Vit.C theo thời gian tr- ờng hợ p c nhau: a Vit.C pha axit axetic 0,1M b Vit.C pha đệm axetat 0,1 c Vit.C pha n- c Túm tt iu kin ti u xỏc nh Vit.C: Qua kho sỏt tụi ó chn c iu kin ti u xỏc nh Vit.C bng phng phỏp von-ampe o súng cc ph ca Vit.C nn m axetat 0,1M cú pH=4,66 tng ng t l CHAx=CAx, thi gian ui khớ oxi hũa tan trc cho Vit.C vo bỡnh o l 90s Khong nng ti u phõn tớch rng, t 0,5 n 30 mg/L, tng ng 2.84.10-6M ữ 1,70.10-4M Chng trỡnh o trờn mỏy tớnh c chn ti u theo gi ý ca nh sn xut, theo ti liu tham kho, v kinh nghim thc t - Thi gian cõn bng trc quột th: 10s, giỳp cho dung dch tr li trng thỏi tnh, n nh sau khuy trn 57 SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip - Khong th quột t -250 mV n +100 mV: khong th ny thu c t kinh nghim thc t, khụng nờn quỏ hp vỡ s khụng quột c ht chõn ph, nhiờn cng khụng nờn quỏ rng s tn thi gian o - Biờn xung: 50 mV - Bc nhy th: mV - Thi gian cho mt xung: 40 ms - Thi gian mt bc nhy th: 0,4s - Tc quột: 15 mV/s Dung dch Vit.C gc v cỏc dung dch chun pha loóng t dung dch gc phi c pha theo ngy v pha bng nc ct hai ln ó loi oxi hũa tan Cỏc dung dch ny m bo bn thi gian phõn tớch Cỏc axit hu c nh axit oxalic, axit xitric, axit tactric v ion clorua khụng nh hng n súng cc ph ca Vit.C khong nng cho phộp Da trờn kt qu nghiờn cu c bn, tụi tin hnh nh lng Vit.C mu thc t Vi mi loi i tng u c kho sỏt s b a quy trỡnh x lý riờng phự hp vi phng phỏp phõn tớch 58 SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip 3.2 XC NH VIT.C TRONG MU THC T 3.2.1 Mu rau: 3.2.1.1 Rau ci xanh: Mu thc vt x lý phc hn, qua nhiu giai on: nghin; lc nhm loi b kt ta, cht nhy; chit nhiu ln ly ht Vit.C mu Vỡ vy khụng trỏnh mt mỏt Vit.C qua trỡnh x lý khc phc iu ny tụi tin hnh lm mu i chng, tớnh hiu sut thu hi Mu RC.1: Chit nhiu ln Vit.C 10 gam rau ci ti bng dung dch axit axetic, thu c 50 mL dung dch mu, nng Cml mg/L Mu RC.2: Thờm mL dung dch gc Vit.C 1g/L vo 10 gam mu ti, x lý tng t mu RC.1, nng Cm2 = (C01 + 20) mg/L; CLT = 20 mg/L Xỏc nh Vit.C hai mu rau ci bng phng phỏp thờm chun: thờm ln (x 0,1 mL) dung dch Vit.C chun 200 mg/L vo (10 mL m + 0,5 mL mu), lp ln thu c s liu bng 3.9: Bng 3.9: S liu xỏc nh nng Vit.C hai mu rau ci theo phng phỏp thờm chun Mu rau ci STT x Mu rau ci Y1 STT x Y2 0,00 53,1 48,1 50,5 49 0,00 73,8 69,9 72,9 66,9 1,89 94,4 89,4 92,7 88 1,89 117 109 115 108 3,74 133 3,74 159 151 158 152 135 126 134 X lý s liu trờn Excel: ng thờm chun: Y1 =(21,9 0,2)x + (50,1 0,7) Y2 =(22,5 0,8)x + (71 2) H s tng quan: r = r = 0,99989 Xm1 = (2,288 0,058) 59 xm2 = (3,141 0,205) mg/L SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip Cm1 = (48,0 1,2) mg/L Cm2 = (66,0 4,3) mg/L Sai s tng i: q = 2,55% q = 6,54% CTN = (Cm2 Cm1) = 18,0 Hiu sut thu hi: H% = 90% Da vo hiu sut thu hi tớnh c hm lng Vit.C 100 gam mu ti ban u l: %m = 48.0,05 100 100 = 26,67 mg/100g 10 90 Hỡnh 3.10: ng thờm chun xỏc nh Vit.C hai mu rau ci 3.2.1.2 Mu t ngt Chun b hai mu tớnh hiu sut thu hi O.1 v O.2 O.1: X lý 10 gam mu ti c 50 mL dung dch O.1, nng Cm1 mg/L O.2: Thờm 2,5 mL dung dch Vit.C gc 1000 mg/L vo 10 gam mu, x lý thu c 50 mL dung dch O.2, nng Cm2 = (Cm1 + 50) mg/L CLT = 50 mg/L 60 SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip Xỏc nh Vit.C hai mu t ngt theo phng phỏp thờm chun: thờm ln (x 0,1 mL) dung dch Vit.C chun 500 mg/L vo (10 mL m + 0,5 mL mu), o lp ln Kt qu thu c cho hỡnh 3.11 v bng 3.10 Hỡnh 3.11: Súng cc ph ca Vit.C mu t ngt, xỏc nh theo phng phỏp thờm chun Mu t ngt Mu t ngt STT X Y1 STT X 0,00 140 142 141 4,90 253 255 9,71 370 366 Y2 139 0,00 153 153 155 152 258 254 4,90 274 270 275 274 377 365 9,71 389 385 387 387 Bng 3.10: S liu xỏc nh nng Vit.C hai mu t ngt theo phng phỏp thờm chun 61 SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip X lý s liu trờn Excel: ng thờm chun: Y1 = (23,6 0,3)x + (140 2) Y2 = (24,1 0,5)x + (154 4) H s tng quan: r = 0,99998 r = 0,99995 xm1 = (5,9434 0,1746) mg/L xm2 = (6,3989 0,3116) mg/L Cm1 = (600 18) mg/L Cm2 = (646 32) mg/L Sai s tng i: q = 2,94% q = 4,87% CTN = (Cm2 Cm1) = 46 Hiu sut thu hi: H% = 92,00% Da vo hiu sut thu hi tớnh c hm lng Vit.C 100 gam mu t ngt ti ban u l: 326,22 mg/100g Nhn xột: Cú th thy hiu sut thu hi phõn tớch mu rau khong 90% nh hn so vi phõn tớch mu nc qu ộp Do quỏ trỡnh x lý mu mt phn Vit.C c gi li bó hoc b phõn hy quỏ trỡnh lc nghin Nu lm mu i chng dựng hiu sut thu hi tớnh li hm lng Vit.C ban u thỡ khụng cn thit phi chit n lỳc khụng cũn Vit.C bó ti Ch cn x lý mu nh thỡ cú th tin tng vo kt qu ca phng phỏp xỏc nh Vy i vi cỏc mu rau, hoc mu thc t m cn phi nghin, lc thỡ nht thit phi lm mu tớnh hiu sut thu hi Kt qu xỏc nh Vit.C hai mu rau cho bng 3.11 62 SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip Thớ nghim i chng Tờn mu C thờm vo theo C theo thc Hiu sut Hm lng H% Vit.C 100g mu lý thuyt (mg/L) nghim (mg/L) ti Rau ci t ngt xanh 0,0 48,0 20,0 66,0 0,0 600 50,0 646 90,0 26,67 mg 92,0 326,22 mg Bng 3.11: Kt qu xỏc nh Vit.C cỏc mu rau Nhn xột chung: Cỏc mu rau: õy l nhng mu phc nht, khú khn l phi thu hi c ti a Vit.C mu ti v dung dch Quỏ trỡnh chun b mu lõu hn, nhiờn khụng phi x lý phc tp, ch cn dựng dung dch axit axetic chit v lc nhanh l cú c dung dch mu Trỏnh trng hp cho mu vo bỡnh o, nn m axetat pH=4,7 cỏc cht nhy kt ta v gõy cn tr quỏ trỡnh khuch tỏn ca cht phõn tớch o cc ph khc phc s mt mỏt Vit.C quỏ trỡnh chun b, tụi dựng mu i chng tớnh hiu sut thu hi, kt hp vi o lp li nhiu ln, thu c kt qu ỏng tin cy Cng nh mu qu ti, phng phỏp von-ampe xỏc nh Vit.C nn m axetat cú th ỏp dng iu tra cht lng dinh dng ca sn phm nụng nghip mt cỏch hiu qu 63 SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip KT LUN Sau mt thi gian nghiờn cu ti liu, tin hnh thc nghim, phõn tớch s liu tụi thu c mt s kt qu nh sau: Xõy dng quy trỡnh xỏc nh hm lng Vit.C bng phng phỏp von-ampe vi cỏc iu kin ti u: o súng cc ph ca Vit.C nn m axetat cú nng CHAx = CAx = 0,05M; pH = 4,66 Loi nh hng ca oxi hũa tan ch sau 90s Quột th t -250mV n 100mV Tc quột 15 mV/s Biờn xung 50mV Pớc ca Vit.C xut hin khong -41,7mV n -37,5mV o trờn mỏy phõn tớch in húa a nng VA757 Computrace ca Metrohm, in cc git Hg treo, in cc so sỏnh Ag/AgCl Cht lng súng cc ph tt v n nh Xõy dng ng chun ph thuc chiu cao pớc vo nng Vit.C: ip (nA) = (24,754 0,007).CVit.C (mg/L) + (10 2), r = 0,9999; khong tuyn tớnh rng t 0,5 mg/L n 30 mg/L Kim tra ng chun ti hai nng 1,2 mg/L v 4,8 mg/L cú sai s tng i tng ng l 1,05% v 0,84% Gii hn phỏt hin ca phng phỏp tớnh theo ng chun l 0,2589 mg/L, phự hp vi thc nghim l 0,25 mg/L Kho sỏt cỏc axit oxalic, axit xitric, axit tactric gii hn nng gp 300 ln khụng nh hng ti súng cc ph ca Vit.C Hm lng ion clorua dung dch nh hn 10-2M cng khụng gõy nh hng n tớn hiu cc ph ca Vit.C 64 SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip Pha dung dch Vit.C gc v cỏc dung dch chun bng nc ct hai ln ó loi oxi m bo bn ca Vit.C khong thi gian mt ngy ng dng xỏc nh Vit.C mu thc t Cỏc mu rau, mu thc vt cn chit nhiu ln bng dung dch axit axetic 0,1M v lm thớ nghim i chng tớnh hiu xut thu hi Dung dch mu thi gian phõn tớch phõn hy khụng ỏng k Kt qu xỏc nh hm lng Vit.C mu thc t: Mu rau Thớ nghim i chng Tờn mu Hm lng C thờm vo C theo thc Hiu sut Vit.C 100g theo lý thuyt nghim H% mu ti (mg/L) (mg/L) 0,0 48,0 90,0 26,67 mg 20,0 66,0 t ngt 0,0 600 xanh 50,0 646 Rau ci 92,0 326,22 mg Do thi gian cú hn tụi mi dựng phng phỏp von-ampe xỏc nh Vit.C trờn mu rau ci v t ngt Tuy nhiờn cú th thy phng phỏp ny cú th ỏp dng cho nhiu loi i tng t t nhiờn n cỏc sn phm cụng nghip, nhiu khong nng khỏc v u cho kt qu tin cy Trong bn lun ny khụng trỏnh nhng thiu xút, em rt mong c s gúp ý ca thy cụ v bn bố Em xin chõn thnh cm n! 65 SVTH: Lờ Th Thu Huyn Khúa lun tt nghip TI LIU THAM KHO [1] Phm Lun, T Vng Nghi, C s lý thuyt mt s phng phỏp phõn tớch in húa hin i, Trng HTH 1990 [2] Lờ c Ngc, x lý s liu v k hoch húa thc nghim, HQGHKHTN, H Ni 1999 [3] Nguyn Duy i, Nguyn Tinh Dung, Trn Thnh Hu, Trn Quc Sn, Nguyn Vn Tũng, Mt s chn lc ca húa hc, Tp 3, NXBGD 2002 [4] Nguyn Tinh Dung, Húa hc phõn tớch, phn II, NXB Giỏo dc [5] Trn T Hiu, T Vng Nghi, Nguyn Vn Ri, Nguyn Xuõn 2000 Trung, Húa hc phõn tớch, Phn 2, cỏc phng phỏp phõn tớch cụng c, H Ni 2003, HQG-HKHTN [6] Nguyn Tinh Dung, Húa hc phõn tớch, Cõn bng ion dung dch , Sỏch cao ng s phm, NXB Giỏo dc 2001 66 [...]... c c chất ảnh hƣởng Tôi nhận thấy trong rau, quả ngoài Vit .C còn chứa một số chất c ng c hoạt tính c c phổ Vì vậy tôi tiến hành khảo sát m c độ ảnh hưởng c a c c chất đó đến p c của Vit .C Trong c c loại rau, quả, và nư c đóng hộp, c c chất c ảnh hưởng chủ yếu là glucozơ, c c loại axit hữu c kh c như axit xitric, axit oxalic, axit malic, axit tactric, c c loại muối natri clorua, canxi clorua Để x c. .. nghiệp 1.2 C C PHƢƠNG PHÁP X C ĐỊNH VIT .C Có thể chia c c phương pháp x c định Vit .C thành 2 nhóm lớn: - Nhóm c c phương pháp phân tích hóa h c - Nhóm c c phương pháp phân tích c ng c 1.2.1 Phƣơng pháp phân tích hóa h c Trong c c phương pháp phân tích hoá h c, phương pháp chuẩn độ oxi hóa khử đư c sử dụng nhiều nhất, dựa vào tính chất dễ bị oxi hóa thành axit đehiđroascobic c a axit ascobic Để oxi hóa... (NP) và c c phổ xung vi phân (DP) Thấy rõ ưu điểm c a phương pháp von- ampe từ vi c phân tích sóng c c phổ c dạng p c là tăng độ nhạy, tăng độ phân giải, độ chọn l c Vì vậy chúng tôi chọn phương pháp von- ampe (phương pháp phân tích c c phổ) để x c định hàm lượng Vit .C trong c c đối tượng th c tế Qua phân tích một số đ c điểm c a Vit .C và nhận thấy ưu điểm c a phương pháp von- ampe tôi tiến hành th c nghiệm... axetat, natri clorua, NaH2PO4.2H2O, K2HPO4.3H2O • Axit pecloric, axit oxalic, axit tactric, axit citric C c hóa chất đều thu c loại tinh khiết phân tích (PA) 25 SVTH: Lê Thị Thu Huyền Khóa luận tốt nghiệp C c dung dịch nghiên c u đều đư c pha từ lượng c n chính x c hóa chất chuẩn bằng bình định m c đã đư c kiểm tra độ chính x c thể tích 2.2 C C VẤN ĐỀ NGHIÊN C U 2.2.1 Nghiên c u c bản Trong bản luận... 10-9 M + Von ampe hòa tan anot dùng c c màng Hg 10-8 – 10-10 M trên c c rắn đĩa C thể thấy c c phương pháp phân tích điện hóa rất phong phú và đa dạng Phạm vi đối tượng nghiên c u rộng, c hợp chất vô c và hàng nghìn hợp chất hữu c c c loại Trong đó Vit .C là một trong những hợp chất hữu c đư c nghiên c u ứng dụng x c định theo nhiều c ch kh c nhau dưới lý thuyết c a c c phương pháp phân tích điện... giúp cho vi c x c định vị trí và chiều cao pic c a Vit .C một c ch rõ ràng và chính x c Điều này c nghĩa là c khả năng x c định tr c tiếp Vit .C trên điện c c giọt Hg mà không c n xử lý mẫu để loại những chất nền ảnh hưởng đến bản chất hóa h c của phương pháp Quy trình nhanh, chính x c, khả năng phân tích hàng loạt là c thể đạt đư c Vì vậy tôi chọn sử dụng điện c c giọt Hg treo trong phân tích Vit .C. .. đư c áp dụng tr c tiếp để x c định Vit .C trong dư c phẩm Tuy nhiên trong c c đối tượng kh c như rau quả, lương th c, th c phẩm thường chứa c c chất khử kh c nữa và dung dịch nghiên c u thường c màu và đ c, gây khó khăn cho vi c x c định điểm cuối chuẩn độ 11 SVTH: Lê Thị Thu Huyền Khóa luận tốt nghiệp Người ta c ng c thể chuẩn độ axit ascobic bằng dung dịch iot, với chất chỉ thị hồ tinh bột để x c định. .. đư c phản ứng tiếp Sau đó lại x c định lượng Br2 dư đó bằng phương pháp chuẩn độ iot bằng dung dịch natri thiosunphat chuẩn Tuy nhiên c c phương pháp chuẩn độ tiến hành khá ph c tạp, đồng thời c độ chọn l c, độ nhạy và độ chính x c không cao Vì vậy từ khi c c phương pháp phân tích c ng c ra đời, người ta đã kh c ph c đư c rất nhiều như c điểm c a c c phương pháp phân tích hóa h c 1.2.2 Nhóm c c phƣơng... đư c những yêu c u đó Đ c biệt, quy trình phân tích nhanh và đa số trường hợp không phải xử lý mẫu trư c đã giảm thiểu đư c sự mất mát Vit .C trong quá trình định lượng 12 SVTH: Lê Thị Thu Huyền Khóa luận tốt nghiệp C c phương pháp c ng c c thể x c định Vit .C gồm c c phương pháp phân tích quang h c và nhóm c c phương pháp phân tích điện hóa Trong đó hầu hết c c phương pháp đều x c định Vit .C một c ch... c a phương pháp là sử dụng hóa chất đơn giản, dễ kiếm, máy đo quang không đắt tiền, phổ biến trong c c phòng thí nghiệm Hơn nữa, theo nghiên c u thì c c chất kh c có mặt trong đối tượng nghiên c u c ng với Vit .C: c c hợp chất glucozơ, fructozơ, sucrozơ, lactozơ, saccarozơ; c c axit thường xuất hiện trong trái c y như axit xitric, axit oxalic, axit malic, axit tactric; c c muối natri clorua, canxi clorua; ... PHÁP X C ĐỊNH VIT .C Có thể chia phương pháp x c định Vit .C thành nhóm lớn: - Nhóm phương pháp phân tích hóa h c - Nhóm phương pháp phân tích c ng c 1.2.1 Phƣơng pháp phân tích hóa h c Trong phương. .. dịch nghiên c u pha từ lượng c n x c hóa chất chuẩn bình định m c kiểm tra độ x c thể tích 2.2 C C VẤN ĐỀ NGHIÊN C U 2.2.1 Nghiên c u Trong luận văn này, tập trung nghiên c u điều kiện tối ưu x c. .. axit izo L-ascobic, axit Dascobic, axit izo D-ascobic Trong đồng phân c axit L-ascobic izo L-ascobic c t c dụng chữa bệnh, đồng phân D izo D antivitamin, t c chất c chế t c dụng vitamin Trong