B Y I TRUNGEi HC DUC H NI NGHlN CU v C VT, I6M THC THNH PHN Hún HC v MT S TC DNG SINH HC cn Hon TAM THT (KHểA LUNTT NGHIP Dc ụ I n c - KHểA 1995-2000) ( t l i tlu h iờ n : SV: Nguyn Hi Lý { ỏ o tiốtL Itiớú a (l u : GS TS Phm Thanh K ThS Quyờn ^ ỡr ới t i i ỳ h i n : B mụn Dc liu - Triớng H Dc H Ni a t t th u a I tỡờ u : T 01/03/2000 n 23/05/2000 ^ T B - N ;* H NI, 5-2000 \ V^ ^i LI CM N ^ ro tn q u ỏ trỡnh ớt iiờới Cè tf hon thnh Uhoỏ lu n tụ i n(jlii p, em n h n ii \ i i litỳUu (Lan, tn tỡnh, ca GS.TS Phm Thanh K ThS Quyờn Trờn th gii: H Araliaceae (Nhõn sõm, Ng gia, inh lng) cú khong 70 chi, 850 loi trờn ton th gii, phõn b ch yu vựng nhit i v ỏ nhit i, ch mt s ớt phõn b vựng ụn i a s cỏc chi, loi cú cỏc nc vựng ụng Nam , chõu ỳ c v vựng nhit i chõu M [7] > Vit Nam cỏc ti liu ó thng kờ 14 chi gm trờn 40 loi Riờng chi Panax hin ó bit ti 14 loi, c trng v mc hoang Mt s loi Panax mc hoang nhiu Sapa, Kontum, Qung Nam, v.v c bit, Kontum v Qung Nam cú mt loi mc hoang vựng nỳi Ngc Linh, mang tờn "Sõm Ngc Linh", c cỏc nh khoa hc Vit Nam v Liờn Xụ c xỏc nh l mt loi mi, t tờn khoa hc l Panax vietnamensis H et Grush [ ] 2.1.3 c im thc vt h Aralaceae [8] Cõy thng thuc mc, cú leo Lỏ mc so le, to ln, kộp lụng chim hoc kộp chõn vt, thng cú lỏ kốm v cú lỏ b Cm hoa tỏn n hay tỏn kộp, to ln Hoa nh bộ, u, lng tớnh Cú lỏ i, cỏnh hoa ri v rng sm, nh, bu h, -- lỏ noón, mi ụ ng noón, qu tht 2.1.4 c im thc vt ca mt s loi thuc chi Panax [1,6,14] 2.1.4.1 Panax vietnamensis H et Grush, Araliaceae (Nhõnsõm VitNam)[l] Cõy tho, sng nhiu nm, cao khong lm Lỏ mc vũng thng cú lỏ (ớt 3, 5, ) Lỏ kộp chõn vt, cú lỏ chột (ớt 6,7), lỏ di 7-12cm (ớt 15 cm), lỏ chột trờn cựng di 8-14 cm, rng 3-5 cm Cm hoa di 25cm, mang tỏn n c tn cựng, ụi cú thờm 1-4 tỏn ph hoc hoa n c Hoa mu lc vng nht Bu ụ, vũi nhy (cú ụ, vũi nhy) Qu chớn mu cha ht (cú ht) 2.1.4.2 Panax notoginseng (Burk) F.H Chen., Araliaceae (Tam tht, Sõm tam tht, Nhõn sõm Tam tht, Kim bt hoỏn) [14] Cõy tho, sng nhiu nm, cao khong 0,5 m Thõn n, lỏ kộp chõn vt, mc vũng - cỏi mt, cung lỏ di T cm; mi cung lỏ mang t -- lỏ chột hỡnh mỏc di, mộp lỏ cú rng ca nh, cung lỏ chột di 0,6 - , cm Cm hoa hỡnh tỏn mc u cnh hoa Cú hoa n tớnh, cú hoa lng tớnh cựng tn ti Lỏ i 5, mu xanh Cỏnh hoa 5, mu xanh nht Nh Bu h ngn Qu mng hỡnh thn, chớn cú mu , cú ht hỡnh cu 2.1.4.3 Panax ginseng C.A Mey., Araliaceae (Nhõn sõm) [14] Cõy nh, sng lõu nm, cao khong 0,6m Lỏ mc vũng, cú cung di, lỏ kộp hỡnh chõn vt gm nhiu lỏ chột Cm hoa hỡnh tỏn, mc u cnh Hoa mu xanh nht, cỏnh hoa, nh, bu h ụ Qu mng hi dt, chớn cú mu cha ht Ra hoa vo h 2.1.4.4 Panax bipinnatifidus Seem., Araliaceae (Tam tht v dip, Tam tht hoang, Tam tht lỏ x) [6] Cõy tho, sng nhiu nm R di cú nhiu t v nhng vt so thõn rng hng nm li Thõn mnh, cao 10 -- 20cm -r 50cm, thng li vo kh Lỏ kộp chõn vt, mc vũng cỏi mt mang -- lỏ chột mng, khụng lụng Mộp cú rng ụi cn hay sõu dng thu Hoa mu trng lc, xp 20 -- 30 cỏi thnh tỏn n trờn trc di 15 - 20cm ngn thõn Cung hoa c lcm Qu mng, chớn mu , cha - - ht Ra hoa thỏng B phn dựng: R c (Radix Panacis bipinnatiớidi) 2.1.5 Phõn b mt s loi thuc chi Panax [1,6,14] Panax notoginseng (Burk) F.H Chen., Araliaceae [14] Tam tht c trng t lõu vi mt lng ớt tnh H Giang, Lo Cai, Cao Bng, y.v thớch hp cao 1200 -- 1500m Tam tht c trng Trung Quc: Võn Nam, Qung Tõy, T Xuyờn, H Bc, Giang Tõy; Võn Nam trng nhiu nht Panax bipinnatiớidus Seem., Araliaceae [ ] Thớch hp cao 1.900 - 7- 2.400m rng m Loi ca Nam Trung Quc v Bc Vit Nam Panax ginseng C.A Mey., Araliaceae [14] Ch yu Triu Tiờn, Trung Quc, Liờn Xụ c v mt s ớt c trng Nht Bn, M Panax vietnamensis H et Grush., Araliaceae [14] Mi tỡm thy vựng nỳi Ngc Linh ( cao khong 1500m) 2.2 Thnh phn hoỏ hc ca cõy Tam tht [1,6,11,14] Theo ti liu [ ], cõy Tam tht Panax notoginseng (Burk) F.H.Chen., 1 Araliaceae cú thnh phn hoỏ hc ch yu l Saponin dammaran R c ca cõy Tam tht trng Vit Nam cng cha Saponin dammaran ch yu Cõy Tam tht c ghi vo Dc in Vit Nam t nm 1997: Panax pseudoginseng Wall., Araliaceae rt him, hu ht cỏc ph loi cha ch yu Saponin nhúm Olean, ớt Saponin nhúm Dammaran Theo [6,14] c Tam tht cha cỏc Saponin triterpen: Saponin A, B, c, D; axit Oleanolic; ng kh; 16 axit amin nh Phenyl alanin, Leucin; Iso leucin, Valin, Prolin, Histidin, Ly sin; Cystein; cỏc cht vụ c nh Fe, Ca Nm 1937 - 1941, hai tỏc gi Trung Quc: Triu Tha c v Chu Nhim Hong ó nghiờn cu v ly c t Tam tht c hai cht Saponin: Arasaponin A v Arasaponin B Arasaponin A (C H O 30 52 10 ) l mt cht bt, d tan ru Metylic, Etylic v Amylic, hi tan nc, khụng tan Ete v Aceton, chy 195 - 210c, nng sut quay cc +23, kt hp vi axit Acetic cho mt cht cú tinh th vi cụng thc C H O 30 10 (CH 7) cú chy 256 Thu phõn bng axit loóng s cho Arasapogenin A (C H O5) ng v hai cht cú tinh th: mt 30 45 cht cú chy 244, mt cht cú chy 252 Arasaponin B (C H38O10) cng l mt cht bt d tan nc v ru Metylic, hi tan ru Etylic 100 v ru Amylic, chy 190 - 200, quay cc + Thu phõn bng axit dung dch ru s cho Arasapogenin B C H cú chy 247 v ng ú cú Glucose 29 32 Nm 1950, Ha Thc Phng chit c t c Tam tht ba Saponin: Saponin A C H 48 50 tan ru Amylic núng v mt Saponin khụng tan 20 ru Amylic núng Kt hp vi axit Acetic khụ kit s c mt cht cú tinh th C H (CH CO) cú chy 2160 29 3 Theo ti liu [1], cỏc b phn khỏc nh r con, lỏ, hoa u cú Saponin dammaran Thnh phn hoỏ hc chớnh ca Tam tht l Saponin dammaran m phn aglycon l hai cht 20(S) Protopanaxadiol v 20(S) Protopanaxatriol Khi tỏc dng bi axit thỡ mch nhỏnh úng vũng li HO HO OH > R Panaxadiol Panaxatriol (genin gi) Protopanaxadiol R = H Protopanaxatriol R = OH (genin tht) 3.2.2.5.2 Phõn lp Saponin bng SKC Chun b ct sc ký: - Ct sc ký: ng kớnh o = l,5cm; chiu di = 40cm - Cht hp ph: Silicagel Merck, kớch thc ht 25 -r 40|im - Cõn khong g Silicagel, hot hoỏ t 30 phỳt n lgi, np t lờn ct - Cn P (trong S trờn) c trn vi mt ớt Silicagel ó hot hoỏ np lờn c t Dung mụi gii: CHC13 : MeOH (7: 1) Cho dung mụi chy vi tc 40 git/phỳt Hng dch vo ng nghiờm nh, mi phõn on 2ml Kim tra cỏc phõn on bng SKLM vi h dung mụi CHCI : Me0H:H20 ( ,5:3,5:1,0) Kt qu: Cỏc phõn on 22 - 26 ch cú vt Cỏc phõn on 64 - - 72 ch cú vt Gp cỏc ng cú Rf ging cho bc hi khụ thu c cht A , B 3.2.2.53 Kim tra tinh khit ca cht phõn lp c bng SKLM Cht Av B c kim tra bng SKLM vi h dung mụi: - H I: CHC13: MeOH: H20 - H II: n-Butanol: axit acetic:H20 - H III: CHC13 : MeOH Av B ch xut hin Kt qu cht 6,5: 3,5: 1,0 4: 1: 9:1 vt vic h dung mi,iu ú chng t cỏc cht phõn lp l tinh khit 3.2.2.5.4 Nhn dng cht A,B Cht A: Tớnh cht: Bt mu vng, d tan Methanol, Ethanol Ph V o Ethanol cú Xmax =225,556 nm v 202,222nm Ph 23 (MS); Cho [ M -1]+ = 391-ằ M+=392 S b nhn dng A cú th thuc cu trỳc Dammaran Cht B: Tớnh cht: Bt mu vng, d tan Methanol, Ethanol Ph uv o Ethanol cú max= 274,444nm; 221,1 lln m v 202,222nm 3.2.3 Th c tớnh cp Mu th: Dch chit : dng c sỏnh, mu nõu en ng vt thớ nghim: Chut cú trng lng - 2 gam, nhn n 16 gi trc thớ nghiờm Cỏch th: Cho chut ung bng kim cong u tự, a dch vo thng d dy Chut thớ nghiờm c chia thnh nhúm, mi nhúm - Nhúm 1: Ung nc ct 40 ml/kg chut Nhúm 2: Ung dch :1 ml/kg chut Nhúm 3: Ung dch :1 ml/kg chut Nhúm 4: Ung dch :1 30 ml/kg chut Nhúm 5: Ung dch :1 40 ml/kg chut Theo dừi tỡnh trng chut ngy sau ung dch th Kt qu: - Cỏc nhúm , 2, 3, 4: Chut hot ng, n ung bỡnh thng - Nhúm 5: Chut thớ nghim cú du hiu hi mt mi, hot ng chm khong gi sau ung dch th Sau ú dn tr li bỡnh thng Du hiu mt mi cú th phi ung mt lng quỏ ln dch chit nc 24 Kt lun: Dch chit hoa Tam tht (HTT) 2: vi liu 40ml/kg th trng (tng ng vi liu 80g dc liu / kg chut) khụng nhn thy biu hin ng c no thi gian theo dừi ( ngy) 3.2.4 Th tỏc dng chng oxy húa (antỡoxydant) Nguyờn tc: Tin hnh peroxy hoỏ lipit bng tỏc nhõn oxy húa dch ng th gan ti chut nht trng s to mt sn phm trung gian l Malonic dialdehyd (MDA) Xỏc nh MDA bng cỏch cho phn ng vi axit thiobarbituric to phc Trimethin cú mu hng v cú ph hp th cc i bc súng 530532nm o quang v tớnh MDA theo cụng thc : MDA = ^ x x = 30,8 X E 0,1 x K thut ny c miờu t bi: Jadwiga Robak Hot tớnh chng oxy húa c tớnh theo cụng thc: HTCO (%) = 100- MDA' X100 MDA0 Ghi chỳ: MDA ! Lng MDA to thnh ca dung dch cha cht th MDA0: Lng MDA to thnh ca dung dch khụng cha cht th Mu th: Dch chit nc : - Pha loóng 20 ln Tin hnh: > Bc 1: Dựng ng nghim theo bng sau 25 Ong nghim sụ Cht th / Dch th Dch ng th gan 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml Dch chit HTT 0,0 ml 0,1 ml 0,2 ml 0,3 ml 0,4 ml Mui Mohr (dd) 0,4 ml 0,4 ml 0,4 ml 0,4 ml 0,4 ml Axit Ascorbic (dd) 0,4 ml 0,4 ml 0,4 ml 0,4 ml 0,4 ml HC1 (dd) 0,4 ml 0,3 ml 0,2 ml 0,1 ml 0,0 ml > Bc 2: cỏc ng nghim 37c 30 phỳt Ly ra, cho thờm vo mi ng ml dung dch Tricloacetic Ly tõm 3.000 vũng /phỳt X 10 phỳt > Bc 3: Ly 2ml dch sau li tõm, thờm vo mi ng lml axit thiobacbituric 'r Bc 4: un sụi cỏch thu 20 phỳt ngui n nhit phũng > Bc 5: o quang trờn mỏy ELx 800 - ti bc súng X = 532nm Kt qu ghi Bng Bng : Kt qa th hot tớnh chng oxy hoỏ Dch Pha loóng 20 ln ng Trng E 0,000 0,860 0,852 0,809 0,759 0,700 MDA 0,000 26,49 26,24 24,92 23,28 21,50 0,00 1,00 6,00 12,00 19,00 HTCO 26 Nhn xột: - cựng nng pha loóng tng lng cht th, hm lng MDA to thnh gim - Hot tớnh chng oxy húa tng tng lng cht th Kt qu tớnh MDA, HTCO ca dch chit : pha loóng 20 ln c biu th Biu v Kt lun: Dch chit nc 2:1 pha loóng 20 ln cú tỏc dng chng oxy húa 27 3.2.5 Th tỏc dng khỏng khun Nguyờn tc: Da theo phng phỏp khuch tỏn trờn thch Tin hnh: 'r- Chun b mụi trng: Mụi trng thch gc, mụi trng thch dinh dng tit trựng 10c /3 > Vi khun kim nh: Chỳng tụi tin hnh vi 10 chng vsv t tiờu chun ca Vin Kim Nghim v Vin V Sinh Dch T {gm chng Gram(+) v chng Gram(-)}: Gram (+) Gram (-) Bacillus pumilus ATCC 10241 Pseudomonas aeruginosa VM 201 Bacillus cereus ATCC 9946 Escherichia coli DT 119 Bacillus subtilis ATCC 6633 Salmonella typhii DT 220 Staphylococcus aureus ATCC 12228 Shigella ớlexneri DT 112 Sarcina lutea ATCC 9341 Proteus mirabilis BV 108 > Khỏng sinh chun: - Penicillin G: Nng 30UI/lml - Gentamicin: Nng 20UI/lml ^ Mu th: - MI - Dch chit nc : (lOml) - M2 - Dch chit nc : (lOml) > Chun b khoanh giy lc ng kớnh đ = 0,6cm; tit trựng 70c /1 h > 20ml mụi trng thch dinh dng vo hp petri ó tit trựng, tit trựng latm/30 > Tm khỏng sinh chun, mu th theo S 2: 28 S 2: V trớ ca khoanh giy tm khỏng sinh chun v mu th Ký hiu: xl: Mu x2: Mu xKS: Khỏng sinh chun > t m 37c (thi gian 18-24 h) c kt qu o ng kớnh vũng vụ khun Kt qu ghi Bng (tớnh trung bỡnh ca vũng vụ khun) Bng 8: ng kớnh vũng vụ khun ca khỏng sinh chun v mu th ng kớnh vũng vụ khun (mm) - Tớnh trung bỡnh Vi sinh vt Penicillin Gentamicin Mu Mu Bp 9,70 14,35 15,22 Bc 13,13 14,10 13,95 Bs 10,70 17,93 18,68 Sta 14,45 13,70 14,68 Sar 11,60 12,18 13,10 Ps 10,32 13,27 13,45 Ecoli 12,48 16,80 17,78 Shi 11,88 11,78 12,43 Pro 15,20 16,63 16,80 Typhii 14,15 14,18 14,40 29 Nhn xột: - i vi chng Gram(+): C mu th u cú tỏc dng khỏng khun mnh hn Penicillin nng 30 Ul/ml Mu tỏc dng khỏng khun tt hn mu c bit chng Bacillus subtilis vũng vụ khun mu l 18,08mm vũng vụ khun ca Penicillin ch cú 10,7mm (Hỡnh 4) - i vi chng Gram(-): C mu th u cú tỏc dng khỏng khun mnh hn Gentamicin nng 20 l/ml Mu tỏc dng khỏng khun tt hn mu c bit chng Proteus mirabilis vũng vụ khun mu l 16,80mm vũng vụ khun ca Gentamicin ch cú 15,20mm (Hỡnh 4) Hỡnh 4: Kt qu th khỏng khun trờn chng p mirabilis v B subtilis 30 PHN III: KT LUN V XUT Kt lun: Trong thi gian thỏng nghiờn cu tụi thu c nhng kt qu sau: 3.1 V mt thc vt ó mụ t c: - V dc liu l hoa v cm hoa Tam tht ang c bỏn ph Lón ễng (H Ni) - Xỏc nh c im ca vi phu cung cm hoa - Xỏc nh c im bt hoa Tam tht 3.2 V mt húa hc Bng phn ng nh tớnh ng nghim ó xỏc nh hoa Tam tht cú Saponin, Flavonoid, axit hu c, axit Amin, Sterol, Tanin, ng kh; ú Flavonoid, Saponin l thnh phn ch yu Bng phng phỏp quang ph phỏt x tia X ó xỏc nh hoa Tam tht cú 19 nguyờn t vụ c; ú t l Si, K cao nht (>10%) Bng SKLM v SKG ó nh tớnh hai nhúm cht chớnh l Flavonoid v Saponin: nh tớnh Flavonoid bng SKLM v SKG cho thy thnh phn Flavonoid hoa Tam tht cú vt nh tớnh Saponin bng SKLM cho thy thnh phn Saponin hoa Tam tht cú vt Xõy dng quy trỡnh chit xut v bng phng phỏp sc ký ct ó phõn lp c Saponin A &B : 31 - Cn c vo ph xỏc nh c cht A cú M+ = 392m/z S b nhn dng A cú th thuc cu trỳc Dammaran Cht A o ph u v cho ,max = 225,556nm v 202,222nm Cht B mi o c ph u v cho Xmax = 274,444nm; 221,11 lnm v - 2 , 2 nm 3.3 Vờ mt sinh hc ó th c tớnh cp ca dc liu hoa Tam tht Kt qu khụng tỡm c liu LD liu 80g dc liu /kg th trng chut chng t dc liu cú an 50 ton cao ó th tỏc dng chng oxy húa t dch chit nc : v thy hm lng MDA gim t l thun, phn trm hot tớnh chng oxy húa tng t l thun vi nng dch chit hoa Tam tht Nh vy dc liu cú kh nng chng oxy húa ó th tỏc dng khỏng khun vi 10 chng vi sinh vt kim nh [5 chng Gram(-), chng Gram (+)] t dch chit nc : 1, : Kt qu cho thy c dch chit nc u cú tỏc dng khỏng khun vi chng vi khun th Dch chit 2:1 tỏc dng mnh hn dch chit : xut Tip tc nghiờn cu sõu v húa hc, tỏc dng sinh hc hiu rừ hn v dc liu hoa Tam tht 32 TI LIU THAM KHO B mụn Dc liu (Trng i hc Dc H Ni) Bi ging Dc liu (Tp I) - H Dc HN - 1998 B mụn Dc liu (Trng i hc Dc H Ni) Thc Dc liu - H Dc HN - 1999 B mụn Dc hc c truyn ( i hc Dc H Ni) Bi ging Dc hc c truyn H Dc HN - H Ni 1997 (Tr 1 ) B mụn Thc vt (i hc Dc H Ni) Bi ging thc vt hc NXB Y h c -H Ni 1991 B Y t Dc in Vit Nam II (Tp III) - NXB Y hc - H Ni - 1994 (Tr 263 - 264) Vừ Vn Chi T in cõy thuc Vit Nam NXB Y hc - 1997 (Tr 1092 1093) V Vn Chuyờn, Lờ Trn Chn, Trn Hp a lý cỏc h cõy thuc NXB Khoa hc & K thut - H Ni - 1987 (Tr 176) V Vn Chuyờn Túm tt c im cỏc h cõy thuc NXB Y hc - H Ni 1976 Trung m Phng phỏp xỏc nh c tớnh cp ca thuc NXB Y hc - H Ni 1996 10 Nguyn Vn n, Nguyn Vit Tu Phng phỏp nghiờn cu hoỏ hc cõy thuc NXB Y hc, H Ni - 1985 11 Nguyn Minh c, Nguyn Thi Nhõm, on T Tuyt Trinh Thnh phn hoỏ hc ca cõy Tam tht trng Vit Nam Tp Dc liu, Tp IV, s 3/1999 (Tr 68) 12 Phm Hong H Cõy c Vit Nam (Quyn II, Tp 2) NXB Montreal 1993 (Tr 640) 13 Trn Cng Khỏnh Thc hỡnh thỏi v gii phu thc vt NXB i hc v trung hc chuyờn nghip, 1981 14 Tt Li Nhng cõy thuc v v thuc Vit Nam NXB Khoa hc & K thut - H Ni - 1999 (Tr 289 - 291) 15 Ngụ Võn Thu Hoỏ hc Saponin Khoa Dc- H Y Dc Tp H Chớ Minh 1990 16 Encyclopedia o f common natural ingredients A Wiley-Interscience Publication.Second Edition 17 Lecomte, M.H : Flore general de Lindochine (Tome II) (Tr 1163) 18 Pharmacopoeia o f the peoples republic oChina English edition 1997 Volume I ABS ABS - 0.76607 1.87971 0.0001 NM NM 225.556 202.222 0 0 Nt1 : 0 0 -> 0 0 B asel ine Erase ieu R e-sca le zừừm 3!W3H~ .nhel More Use t h e q rapliics c u r s o r , t r a c k , s l o p ABS ABS ABS 0 0.13187 0.53538 1.59816 NM NM NM 274.444 221.111 202.222 n n 4 Mau B (S)/EtOH 1 Ga 111 109 SBU 23 May 2000 2.0 ACkfJ Q Q T m o em ftps _ : 0 0 -> 0 0 m NM : 0 0 -> 0 0 B a s e l in e Erase iew R e-sca le Zoon BTH3B Label More Use t h e qrap liics c u r s o r t r a c k s l o p _ C TH n o 00 ro o A O ro o ro o -C M m Q r- o -o ro tH 0M cr> Q ; o r- 00 -AO Cvớ CM C h o ro C (N tớ H d \1 n voô ó o sl C\i -C C\l CM UI -U o o CM Ch r U ") C\J (1 ) co rvo -I o -00 - o vo cn i z i M t~r I n* cỳ o o -CNJ ro o o o 11 o co rio n r-\ ( MI o [...]... vật > Rễ củ Tam thất có tác dụng làm tăng sức đề kháng của súc vật đối với yếu tố độc hại > Rễ củ Tam thất có khả năng kháng lại hiện tượng giảm lượng prothrombin trong máu thỏ và giảm khả năng máu đông gây thực nghiệm với dicumarol > Khác Nhân sâm, rễ củ Tam thất không có tác dụng gây tăng huyết áp > Có một số tác dụng nội tiết: Có tác dụng hướng sinh dục nam và không có tác dụng hướng sinh dục nữ... Phổ khối: Đo tại Viện Hóa học - Trung tâm KHTN và Công nghệ Quốc gia 9 3.1.2.3 Thử độc tính và một số tác dụng sinh học - Thử độc tính cấp tại Phòng Dược lý - Viện Kiểm nghiệm (Bộ Y tế) - Thử tác dụng chống oxy hoá tại phòng Đông Y thực nghiệm - Viện Y học Cổ truyền Việt Nam - Thử tác dụng kháng khuẩn tại phòng Vi sinh - Trường Đại học Dược HN 3.2 Thực nghiệm và kết quả 3.2.1 Về thực vật 3.2.1.1 Mô tả... khuẩn của Gentamicin chỉ có 15,20mm (Hình 4) Hình 4: Kết quả thử kháng khuẩn trên 2 chủng p mirabilis và B subtilis 30 PHẦN III: • KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT ■ Kết luận: Trong thời gian 3 tháng nghiên cứu tôi thu được những kết quả sau: 3.1 Về mặt thực vật Đã mô tả được: - Vị dược liệu là hoa và cụm hoa Tam thất đang được bán ở phố Lãn Ông (Hà Nội) - Xác định đặc điểm của vi phẫu cuống cụm hoa - Xác định đặc điểm. .. chiết hoa Tam thất Như vậy dược liệu có khả năng chống oxy hóa Đã thử tác dụng kháng khuẩn với 10 chủng vi sinh vật kiểm định [5 chủng Gram(-), 5 chủng Gram (+)] từ dịch chiết nước 1 : 1, 2 : 1 Kết quả cho thấy cả 2 dịch chiết nước đều có tác dụng kháng khuẩn với 1 0 chủng vi khuẩn thử Dịch chiết 2:1 tác dụng mạnh hơn dịch chiết : 1 • 1 Đề xuất Tiếp tục nghiên cứu sâu về hóa học, tác dụng sinh học để... cá; tiêm vào chó đánh mê bằng ete 1 - 20mg Arasaponin A hoặc B không thấy có sự thay đổi rõ rệt với huyết áp, với tim và hô hấp Đối với khúc ruột cô lập của thỏ và tử cung cô lập của chuột bạch không có sự thay đổi Đoàn Thị Nhu, Vũ Thị Tâm và Nguyễn Thị Thọ đã nghiên cứu tác dụng của Tam thất lên súc vật thí nghiệm và đi đến một số kết luận sau: Rễ củ Tam thất làm tăng khả năng hoạt động của súc vật... túi polyetylen hàn kín, mua ở số 28 phố Lãn Ông trong tháng 3 & 4/2000 Dược liệu được nhập từ Vân Nam Trung Quốc 3.1.2 Phương pháp nghiên cứu 3.1.2.1 Nghiên cứu về thực vật Cắt vi phẫu cuống cụm hoa: Cuống cụm hoa được ngâm trong cồn 25°, cắt, tẩy, nhuộm kép theo tài liệu [ ] 2 Soi bột hoa Tam thất: Dược liệu được sấy 70°c/lh, tán nhỏ thành bột 3.1.2.2 Nghiên cứu về hoá học - Định tính nhóm chất hữu... Xác định đặc điểm bột hoa Tam thất 3.2 Về mặt hóa học Bằng phản ứng định tính trong ống nghiệm đã xác định hoa Tam thất có Saponin, Flavonoid, axit hữu cơ, axit Amin, Sterol, Tanin, đường khử; trong đó Flavonoid, Saponin là thành phần chủ yếu Bằng phương pháp quang phổ phát xạ tia X đã xác định hoa Tam thất có 19 nguyên tố vô cơ; trong đó tỷ lệ Si, K cao nhất (>10%) Bằng SKLM và SKG đã định tính hai... tốt nhất cho thấy thành phần Havonoid trong hoa Tam thất có 4 vết Với SKG chỉ làm trên 1 hệ dung môi và thấy xuất hiện 3 vết Kết quả ghi ở Bảng 3 và 4: Bảng 3: Kết quả SKLM với hệ dung môi III Vết Rf Hiện màu /Quan sát Đô lớn AS thường uv 366nm AICI3 /AS th 1 0,67 +++ Không màu Không màu Vàng nhạt 2 0,60 ++ Vàng nhạt Nâu nhạt Nâu 3 0,45 +++ Vàng đậm Vàng đậm Vàng 4 0 , 2 0 ++ Vàng Vàng Vàng Bảng 4: Kết... 225,556nm và 202,222nm Chất B mới đo được phổ u v cho Xmax = 274,444nm; 221,11 lnm và - 2 0 2 , 2 2 2 nm 3.3 Vê mặt sinh học Đã thử độc tính cấp của dược liệu hoa Tam thất Kết quả không tìm được liều LD ở liều 80g dược liệu /kg thể trọng chuột chứng tỏ dược liệu có độ an 50 toàn cao Đã thử tác dụng chống oxy hóa từ dịch chiết nước 2 : 1 và thấy hàm lượng MDA giảm tỉ lệ thuận, phần trăm hoạt tính chống oxy hóa. .. và SKG đã định tính hai nhóm chất chính là Flavonoid và Saponin: Định tính Flavonoid bằng SKLM và SKG cho thấy thành phần Flavonoid trong hoa Tam thất có 4 vết Định tính Saponin bằng SKLM cho thấy thành phần Saponin trong hoa Tam thất có 6 vết Xây dựng quy trình chiết xuất và bằng phương pháp sắc ký cột đã phân lập được 2 Saponin A &B : 31 - Căn cứ vào phổ khối xác định được chất A có M+ = 392m/z Sơ ... Cm hoa hỡnh tỏn, mc u cnh Hoa mu xanh nht, cỏnh hoa, nh, bu h ụ Qu mng hi dt, chớn cú mu cha ht Ra hoa vo h 2.1.4.4 Panax bipinnatifidus Seem., Araliaceae (Tam tht v dip, Tam tht hoang, Tam. .. cm hoa di - 7- Cm hoa tỏn n, mu xanh lc nht cm, mnh, mu xanh Mi cm hoa cú t 80 -r 100 hoa Hoa nh, cung hoa mnh, di 0,1 - 0,5cm, cú lỏ i lin, cỏnh hoa lin, nh Bu di ụ, mi ụ cha lỏ noón Hỡnh 1: Hoa. .. dc liu l hoa v cm hoa Tam tht ang c bỏn ph Lón ễng (H Ni) - Xỏc nh c im ca vi phu cung cm hoa - Xỏc nh c im bt hoa Tam tht 3.2 V mt húa hc Bng phn ng nh tớnh ng nghim ó xỏc nh hoa Tam tht cú