TR NG I H C C N TH KHOA NÔNG NGHI P & SINH H C NG D NG -oOo- VÕ MINH THÔNG KH O SÁT S V Y NHI M VI SINH V T TRÊN TH T HEO T I C S GI T M GIA SÚC T P TRUNG HUY N TRÀ CÚ T NH TRÀ VINH Lu n v n t t nghi p Ngành: THÚ Y n Th , 2013 TR NG I H C C N TH KHOA NÔNG NGHI P & SINH H C NG D NG -oOo- Lu n v n t t nghi p Ngành: THÚ Y Tên tài: KH O SÁT S V Y NHI M VI SINH V T TRÊN TH T HEO T I C S GI T M GIA SÚC T P TRUNG HUY N TRÀ CÚ T NH TRÀ VINH Giáo viên h ng d n: PGS.TS L u H u Mãnh Sinh viên th c hi n: Võ Minh Thông MSSV: 3092641 p: Thú Y - K35 n Th , 2013 i TR NG I H C C N TH KHOA NÔNG NGHI P VÀ SINH H C NG D NG MÔN THÚ Y tài: “Kh o sát s v y nhi m vi sinh v t th t heo t i c s gi t m gia súc t p trung huy n Trà Cú t nh Trà Vinh”, sinh viên Võ Minh Thông th c hi n t i phòng thí nghi m Vi sinh – Mi n d ch c a B môn Thú Y, khoa Nông Nghi p Sinh H c tháng 8/2013 ng D ng, tr ng i H c C n Th t n tháng 12/2013. n Th , ngày….tháng….n m 2013 Duy t B Môn n Th , ngày…tháng…n m 2013 Duy t Giáo Viên H ng D n u H u Mãnh n Th , ngày… tháng… n m 2013 Duy t Khoa NN&SH D ii IC MT Trong th i gian h c t p rèn luy n d i mái tr ng i h c C n Th , Th y Cô nh ng ng i ã dành bi t bao tâm quy t cho s nghi p tr ng ng i, ã truy n t cho bi t bao u quý báu làm hành trang v ng b c vào i. Hôm nay, c m c a ã thành s th t, v i s ph n u c a b n thân, ã hoàn thành lu n v n t t nghi p. Trong su t trình h c t p c ng nh th i gian làm lu n v n, ã nh n c s giúp c a r t nhi u ng i. Tôi không bi t nói n l i c m n chân thành nh t g i n nh ng ng i ã quan tâm, lo l ng giúp su t th i gian qua. Xin chân thành c m n: s d y d , ng viên c a cha m nh ng ng i thân gia ình ã t o u ki n ng h su t trình h c t p làm lu n v n t t nghi p; Ban ch nhi m Khoa Nông Nghi p Sinh H c ng D ng Tr ng i h c C n Th ; Quý th y cô B môn Thú y B môn Ch n nuôi, Khoa Nông Nghi p Sinh H c ng D ng, tr ng i h c C n Th ã truy n t cho nh ng ki n th c quý báu nh m trang b cho b c vào i; Th y L u H u Mãnh – ng i ã h t lòng ch b o, khuyên r n, giúp ng viên hoàn thành lu n v n t t nghi p; Xin chân thành c m n cô Nguy n Thu Tâm ng i ã h ng n, quan tâm giúp hoàn thành lu n v n; Các anh ch cao h c khóa 18 ã giúp trình th c hi n hoàn thành lu n v n này; Ban giám hi u tr ng i h c C n Th ; Ban lãnh o chi c c Thú Y t nh Trà Vinh ã h t lòng h tr , t o m i u ki n cho su t trình l y m u. Võ Minh Thông iii CL C Trang Trang t a .i Trang t .ii i c m t iii c l c .iv Danh sách ký hi u, ch vi t t t vii Danh sách b ng .viii Danh sách s ix Danh sách hình x Tóm l c .xi Ch ng Ch ng - L TV N . C KH O TÀI LI U . 2.1 Tình hình nghiên c u n c n c 2.1.1 Tình hình nghiên c u n c 2.1.2 Tình hình nghiên c u n c .4 2.2 c m m t s vi sinh v t th c ph m 2.2.1 Salmonella .5 2.2.2 Escherichia coli .9 2.2.3 Staphylococcus aureus . 13 2.2.4 ng vi s khu n hi u khí 16 2.3 NGU N LÂY NHI M VI SINH V T VÀO TH C PH M . 17 2.3.1 Lây nhi m t t nhiên 17 2.3.2 Nhi m vi sinh v t trình gi t m ch bi n . 18 2.3.3 Lây nhi m vi sinh v t v t môi gi i lây truy n . 18 2.4 Các ph ng pháp lo i tr ho c làm gi m s v y nhi m t i lò m . 19 iv 2.5 Tiêu chu n v ki m nghi m th t t Ch ng PH NG TI N VÀ PH i 19 NG PHÁP NGHIÊN C U 20 3.1 N i dung nghiên c u 20 3.2 Ph ng ti n nghiên c u 20 3.2.1 Th i gian a m th c hi n . 20 3.2.2 V t li u thí nghi m 20 3.3 Ph ng pháp nghiên c u 20 3.3.1 Ph ng pháp thu th p b o qu n m u . 20 3.3.1.1 L y m u . 20 3.3.1.2 B o qu n l u m u 22 3.3.2 Ph ng pháp phân tích m u . 23 3.3.2.1 Chu n b m u phân tích vi sinh v t . 23 3.3.2.2 Ph ng pháp nh l ng t ng s vi khu n hi u khí . 24 3.3.2.3 Ph ng pháp nh l ng Coliforms 25 3.3.2.4 Ph ng pháp nh l ng E. coli . 28 3.3.2.5 Ph ng pháp nh l ng Staphylococus aureus 30 3.3.2.6 Ph ng pháp nh l ng Clostridium perfringens 32 3.3.2.7 Ph ng pháp nh tính Salmonella spp . 34 3.3.3 Các ch tiêu theo dõi . 36 3.3.4 Ph Ch ng pháp x lý s li u . 36 ng K T QU VÀ TH O LU N . 37 4.1 K t qu kh o sát tình hình gi t m heo v sinh thú y t i lò m 37 4.2 K t qu kh o sát ch tiêu vi sinh v t c a y u t môi tr ng th t heo t i lò m 42 4.2.1 V n c s d ng 43 v 4.2.2 V sàn gi t m k pha lóc th t . 43 4.2.3 V th t heo t i lò m 44 4.3 So sánh ch tiêu vi sinh v t th t t Ch ng K T LU N VÀ i v i TCVN 7046:2009 . 46 NGH . 48 5.1 K t lu n 48 5.2 ngh . 48 TÀI LI U THAM KH O . 49 PH CH NG . 52 vi DANH SÁCH CH Ch vi t t t BGA BGBL BPA BPW CFU C. perfringens E. coli MPN MR MR-VP ml m g NA NB OIE QCVN RV S. aureus SC TBX TCVN TSVKHK TSI VP XLD VI T T T Ch vi t y Brilliant Green Agar Brilliant Green Bile Lactose Broth Baird Parker Agar Buffered Peptone Water Colony Forming Unit Clostridium perfringens Escherichia coli Most Probable Number Methyl Red MR-VP Broth Mililiter Meter Gam Nutrient Agar Nutrient Broth Office Internation des Epizooties Quy chu n Vi t nam Rappaport and Vassiliadis Staphylococcus aureus Simmons Citrate Agar Tryptone Bile X – Glucuronide Agar Tiêu chu n Vi t Nam ng s vi khu n hi u khí Tripple Sugar Irron Agar Voges- Proskauer Xylose Lysine Deoxycholate Agar vii Ý ngh a n v khu n l c nv ol nv ol nv ol ng ng ng DANH SÁCH B NG ng a b ng Các ch tiêu vi sinh v t c a th t t Ký hi u m u th i gian l y m u Trang i 19 22 u ki n b o qu n th i gian l u m u 23 K t qu kh o sát t l nhi m ch tiêu vi sinh v t c a y u t môi tr ng th t heo t i t i lò m 42 T l nhi m lo i vi sinh v t th t heo t 44 K t qu so sánh ch tiêu vi sinh v t th t heo v i TCVN 7046:2009 t i c s gi t m gia súc t p trung huy n Trà Cú t nh Trà Vinh viii i t i c s gi t m 46 DANH SÁCH S Tên s lây nhi m Salmonella t nhiên Trang S Pha loãng m u thành n ng Quy trình nh l ng t ng s vi khu n hi u khí (TCVN 7928:2008) 25 Quy trình nh l ng Coliforms (TCVN 6848:2007) 27 Quy trình nh l ng E. coli (TCVN 7924-1:2008) 28 Quy trình nh l ng vi khu n S. aureus (TCVN 4830-1:2005) 30 Quy trình nh l ng C. Perfringens (TCVN 4991: 2005) 32 Quy trình phân l p Salmonella spp. (TCVN 4829:2005) pha loãng 10-1, 10-2, 10-3 ix 24 35 l nhi m C. perfringens m c 54,16%, t l nhi m cao u ã ph n ánh c tình tr ng v sinh lò m . C. perfringens hi n di n ph bi n t nhiên, có th tìm th y loài vi khu n t, bùn l ng c bi t ru t c a ng i ng v t (Tr n Linh Th c, 2006). Vì v y, s có m t c a C. perfrngens th t trình gi t m b nhi m t phân gia súc, sàn gi t m , k pha lóc r i lây nhi m lên qu y th t. T l m u nghiên c u v ch tiêu C. perfringens c s gi t m huy n Trà Cú cao h n t l nhi m C. perfringens 60 m u th t (th t gà, th t bò th t heo) m t s lò m a bàn Tp. Hà i v i t l nhi m C. perfringens 8,3% ( Ng c Thúy et al., 2006). l nhi m Salmonella spp. 4,16%, t l nhi m c a ch tiêu th p h n nhi u so v i t l nhi m ch tiêu TSVKHK Coliforms 100%, Sta. aureus E. coli (87,50%), s khác bi t có ý ngh a th ng kê (P[...]... tin chung v an toàn v sinh th c ph m có ngu n g c ng v t, chúng tôi ti n hành th c hi n tài: “Kh o sát s v y nhi m vi sinh v t trên th t heo t i c s gi t m gia súc t p trung huy n Trà Cú t nh Trà Vinh c tiêu tài - Kh o sát m c nhi m vi sinh v t trên qu y th t heo, ngu n n t sàn gi t m và k pha lóc t i lò m c s d ng, b - So sánh các ch tiêu vi sinh v t trên th t v i tiêu chu n Vi t Nam TCVN 7046:2009,... ng v t Hi n nay trên a bàn t nh Trà Vinh có trên 40 lò gi t m gia súc, phân tán nhi u m khác nhau, nh ng quan tr ng và qui mô l n nh t là lò m thu c huy n Trà Cú t nh Trà Vinh Tính n th i m này ch a có m t công trình nghiên c u khoa h c nào c th c hi n t i Trà Vinh v l nh v c nhi m vi sinh t và an toàn v sinh th c ph m có ngu n g c t ng v t 1 Xu t phát t nh ng v n trên, v i ý t ng kh o sát th c a có... spp r a thân th t ng ôi ch nhân vi n thú y ki m d ch óng d u 35 36 41 41 x TÓM L C tài c ti n hành t tháng 8 n m 2013 n tháng 12 n m 2013 t i c s gi t gia súc t p trung huy n Trà Cú, t nh Trà Vinh M c tiêu c a tài nh m ánh giá m c nhi m vi sinh v t trên qu y th t heo, ngu n n c s d ng, sàn gi t m và k pha lóc t i lò m theo TCVN 7046:2009 thông qua vi c phân l p các vi khu n nh TSVKHK, Coliforms, E... i vi 2 khu n, phân gia súc có th ch a kho ng 10 vi khu n/g bao g m nhi u lo i vi khu n hi u khí và y m khí khác nhau Theo H V n Nam (1996), phân heo kh e 4 phân l p có t l m t s vi khu n r t cao nh E coli 100%, Salmonella spp 40 80% ngoài ra còn có Staphylococcus, Streptococcus, Bacillus Vi khu n t n t i trên da c a ng v t, n u không c v sinh t m r a tr c khi gi t m s không th lo i b ph n l n vi sinh. .. lông, da và lông c a gia súc nhi m Salmonella là nguyên nhân y nhi m vào th t (Hoàng Tích M ch và Hà Minh Khôi, 1997) y nhi m vi khu n trên b m t qu y th t b i vi khu n khu trú da, lông c ng chi m ph n quan tr ng Vi khu n khu trú da lông ph thu c vào ch ng lo i vi khu n sinh s ng trong t n i mà gia súc sinh s ng (Nguy n Ng c Tuân, 2002) 17 Lây nhi m t t t ch a m t l ng l n vi sinh v t có ngu n g c... v sinh công c ng, s phòng b nh truy n nhi m Vi khu n Salmonella có m t trong ng v t kh e m nh, khi gia súc m t hay ki t c tr c khi h th t các vi sinh v t s vào ru t, n th t và các c quan khác, khi th t do th t ti p xúc v i ch t ch a ru t, d dày, da lông, phân gia súc nhi m Salmonella là nguyên nhân v y nhi m vi khu n vào thân th t (Hoàng Tích M nh và Hà Huy Khôi, 1997) Trong u ki n gi t m gia súc Vi. .. phát trên c s thi u vitamin và m c b nh do virus và ký sinh trùng (Nguy n Nh Thanh et al., 1997) nh x y ra sau khi có s hi n di n s l ng vi khu n E coli n thi t sau khi chúng di chuy n n d dày và ru t non Chúng bám dính trên b m t niêm m c và gây vi m thành ru t Ph n ng vi m này gây ra b i các c t do vi khu n và c cho là nguyên nhân gây ra vi m i tràng xu t huy t ch gây ng c Khi c th b nhi m vi khu... vi khu n Salmonella , vi khu n ngu n này có th theo th c n, xâm nh p vào c th gây b nh cho heo Theo Barbara (2006), vi khu n s ng ho i sinh ru t, h ch lâm ba, túi m t,… khi p u ki n b t l i nh gi m s c kháng, stress, c bi t là quá trình v n chuy n gia súc t tr i n lò m b ng nh ng ph ng ti n không phù h p, kém v sinh là m t trong nh ng nguyên nhân làm phát sinh b nh T l nhi m Salmonella trong ru t heo. .. Trang 1 V trí l y m u trên thân th t heo (QCVN 01-04:2009/BNNPTNT) 21 2 Khu n l c TSVKHK trên môi tr ng NA 24 3 Khu n l c Coliforms trên môi tr ng VRBL 26 4 Ph n ng sinh hóa kh ng 5 Khu n l c E coli trên môi tr 6 Khu n l c S aureus trên môi tr 7 Ph n ng sinh hóa kh ng 8 Khu n l c C perfringers trên môi tr 9 Ph n ng sinh hóa kh ng 10 Khu n l c Salmonella spp trên môi tr 11 Ph n ng sinh hóa kh ng 12 Toàn... lò m bán th công theo tiêu chu n th t t i TCVN 7046:2009 ch tiêu c m quan, lý hóa và vi sinh v t t t 16,67%, lò m th công không có m u th t t theo tiêu chu n ch t l ng th t t i 2.2 c m m t s vi sinh v t th c ph m Trong các ch tiêu vi sinh v t gây ng c i v i th c ph m, ng i ta th ng quan tâm nhi u nh t n các vi khu n gây b nh nh Salmonella spp., S aureus, E coli, Coliforms Khi gia súc kh e m nh trong . tiêu vi sinh vt trên tht ti vi TCVN 7046:2009 46 Chng 5 KT LUN VÀ  NGH 48 5.1 Kt lun 48 5.2  ngh 48 TÀ I L IU THAM K HO 49 PH CHNG 52 vii DANH SÁCH CH VIT TT Ch vit tt. Quy trình nh lng Coliforms (TCVN 6 848: 2007) 27 5 Quy trình nh lng E. coli (TCVN 7924-1:2008) 28 6 Quy trình nh lng vi khun S. aureus (TCVN 483 0-1:2005) 30 7 Quy trình nh lng. trình nh lng C. Perfringens (TCVN 4991: 2005) 32 8 Quy trình phân lp Salmonella spp. (TCVN 482 9:2005) 35 x DANH SÁCH HÌNH Hình Tên hình Trang 1 V trí ly mu trên thân tht heo (QCVN 01-04:2009/BNNPTNT)