BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI ũ LÊ QUANG THẢO ĐỊNH LƯỢNG ĐỚNG THỜI PARACETAMOL VÀ QUININ SULFAT TRONG VIÊN NÉN ANTIGRIP F BẰNG PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH ĐA CẤU TỬ (MCA) (KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP Dược sĩ KHĨA 1999-2004) Người hướng dẫn: TS.THÁI DUY THÌN DS.TRẦN VIỆT HÙNG Nơi thực hiện: Bộ mơn Hóa Dược Phịng hóa lý I-Viện kiểm nghiệm LỜI CẢM ƠN Khóa luận tốt nghiệp thực hoàn thành Bộ mơn Hóa Dược - Trường Đại học Dược Hà Nội Phịng Hóa Lý I - Viện Kiểm nghiệm Bộ y tế Trước tiên em xin chân thành cảm ơn hướng dẫn tận tình thầy giáo TS.Thái Duy Thìn - Bộ mơn Hóa Dược Trường Đại học Dược Hà Nội DS.Trần Việt Hùng - Viện Kiểm nghiệm - Bộ y tế Đồng thời em xin cảm ơn giúp đỡ thầy cô, kỹ thuật viên mơn Hóa Dược cán phịng Hóa Lý I - Viện kiểm nghiệm - Bộ y tế giúp em cố tài liệu tham khảo kỹ cần thiết đ ể hoàn thành đề tài khoa học thời gian ngắn Em xin cảm ơn Ban giám hiệu nhà trường, Phịng đào tạo, thầy giáo môn truyền đạt cho em kiến thức khoa học b ổ ích suốt năm học qua Em xin cảm ơn thư viện trường Đại học Dược Hà Nội cung cấp cho em giáo trình tài liệu liên quan thời gian học trường thực đ ề tài tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, tháng 05 năm 2004 SV: Lề Quang Thảo MỘT SỐ CHỮ VIẾT TẮT FSQ: Full Spectrum Quantitation (Định lượng toàn phổ), g: Gam HPLC: High Períormance Liquid Chromatography (Sắc ký lỏng hiệu cao) MCA: Multi-Component Analysis (Phân tích đa cấu tử) mg: Miligam Microgam ml: Mililit nm: Nanomet Para: Paracetamol Ptl: Phân tử lượng Quini: Quinin sulíat SKD: Sinh khả dụng SKS: Số kiểm soát UV-Vis: Ultraviolet - Visible (Tử ngoại - khả kiến) MỤC LỤC Trang ĐẶT VẤN ĐỂ PHẦN 1: TỔNG QUAN 1.1 Paracetamol 1.1.1 Đại cương 1.1.2 Các phương pháp định lượng 1.2 Quinỉn sulfat 1.2.1 Đại cương 1.2.2 Các phương pháp định lượng 1.3 Phương pháp phân tích đa cấu tử MCA .8 1.3.1 Một vài nét lịch sử phát triển phương pháp 1.3.2 Cơ sở lý thuyết phương pháp phân tích đa cấu tử MCA 10 1.3.3 Một số vấn đề cần lưu ý sử dụng phương pháp MCA phân tích dược phẩm 14 PHẦN 2: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ .16 2.1 Nội dung, đối tượng phương pháp nghiên cứu 16 2.2 Thuốc thử, hóa chất, dụng cụ 18 2.3 Xây dựng phương pháp định lượng đồng thòi Paracetamol Quinin sulfat hỗn hợp kỹ thuật phân tích đa cấu tử (MCA) 18 2.3.1 Khảo sát phổ hấp thụ ƯV lựa chọn bước sóng phân tích 18 2.3.2 Xác định khoảng nồng độ phân tích 20 2.3.3 Chuẩn bị dãy dung dịch chuẩn hỗn hợp 21 2.3.4 Đo độ hấp thụ quang dung dịch chuẩn hỗn hợp 22 2.3.5 Xây dựng đường chuẩn phần mềm máy tính 23 2.3.6 Phân tích mẫu thử Antigrip F 30 2.3.7 Đánh giá độ đúng, độ xác phương pháp 34 2.4 Đánh giá ưu, nhược điểm phương pháp sử dụng 37 2.5 Bàn luận 38 PHẦN 3: KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT 40 3.1 Kết luận 40 3.2 Đề xuất 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO 42 ĐẶT VẤN ĐỂ Ngày nay, vói phát triển vượt bậc công nghệ bào chế thuốc, dược phẩm có chứa nhiều thành phần ngày trở nên phổ biến giói Việt Nam Nhóm thuốc giảm đau, hạ nhiệt từ lâu sử dụng rộng rãi, hoạt chất nhóm có mặt nhiều cơng thức thuốc đa thành phần Một dạng phối hợp có mặt thị trường hỗn hợp gồm Paracetamol Quinin sulfat (viên nén bao đường Antigrip F Công ty Dược phẩm Vật tư Y tế Tiền Giang Tipharco) Để định lượng hai thành phần hoạt chất nó, phương pháp quang phổ thơng thường (UV-Vis) [18] sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) [17] sử dụng Định lượng hai thành phần phương pháp đo quang phổ ƯV thông thường, cần thiết phải chiết tách đo riêng chúng cực đại hấp thụ đặc trưng Phương pháp tốn nhiều thịi gian cơng sức, phải xử lý với nhiều mẫu Ngoài ra, việc sử dụng dung mơi hữu clororm, nhiều gây độc hại Phương pháp HPLC cho kết phân tích nhanh xác, song thiết bị chưa thật phổ biến sở kiểm nghiệm nước, chi phí dung mơi sắc ký tốn Kỹ thuật phân tích quang phổ UV-Vis MCA với trợ giúp máy tính điện tử cạnh tranh thay kỹ thuật HPLC số trường hợp cụ thể Nếu thuốc chứa thành phần có khả hấp thụ quang, phương pháp MCA cho phép phân tích nhanh chóng, xác, tốn hóa chất dung mơi Đường chuẩn lưu lại máy tính, sử dụng cho lần phân tích sau nên giảm nhiều thời gian công sức, đặc biệt phải phân tích định lượng hàng loạt mẫu thử giống - 1- Xuất phát từ lý em chọn đề tài “ Định lượng đồng thời Paracetamol Quinin suựat viên nén Antigrip F phương pháp phân tích đa cấu tử (MCA)” Với mục tiêu cụ thể sau: - Nghiên cứu xây dựng quy trình định lượng đồng thịi Paracetamol Quinin sulíat hỗn hợp thuốc phương pháp phân tích đa cấu tử (MCA) máy quang phổ thông thường, xử lý kết máy tính phần mềm tự xây dựng - Úng dụng phương pháp nêu để định lượng đồng thời hỗn hợp hai chất viên nén Antigrip F, so sánh kết thu vói phương pháp đo quang phổ hấp thụ tử ngoại thông thường Với mục tiêu em mong muốn giới thiệu phương pháp định lượng đơn giản dễ thực hơn, phù hợp vói trang thiết bị sở kiểm nghiệm Qua góp phần nhỏ xây dựng tiêu chuẩn chất lượng chế phẩm, phục vụ tốt công tác đảm bảo chất lượng thuốc PHẦN TỔNG QUAN 1.1.PARACETAMOL 1.1.1.Đại cương [1] [2] [6] [21] [23] • Nguồn gốc: Paracetamol sản xuất phương pháp tổng hợp HO • Tên chung: Paracetamol • Tên hóa học: N - (4 - hydroxyphenyl) acetamid • Tên khác: Acetaminophen (Dược điển Mỹ - USP), p-Hydroxyacetanilid, N-Acetyl-p-aminophenol, p-Acetamidophenol • Tính chất vật lý: Bột kết tinh trắng tinh thể không màu, không mùi, vị hoi đắng Dễ tan ethanol 96% (1/10), nước sôi (1/20), dung dịch kiềm mạnh (do tạo muối phenolat dễ tan) Khó tan nước (1/70), tan clorịrm, ether Nhiệt độ nóng chảy từ 168°c - 170°c • Tính chất hóa học: Tính chất nhóm -OH phenol: phản ứng với dung dịch kiềm mạnh (thể tính acid yếu) tạo muối phenolat dễ tan, tạo phức màu lam tím với dung dịch Fe3+ Tính chất nhóm amid: dễ bị thủy phân, Paracetamol khơng bền dạng dung dịch • Tác dụng chế: Tác dụng giảm đau mạnh kéo dài so vói Aspirin, ngồi cịn có tác dụng thư giãn Cơ chế: Paracetamol làm giảm tổng hợp Prostaglandin E2 làm giảm tính cảm thụ dây cảm giác vói chất trung gian hóa học gây đau phản ứng viêm Tác dụng hạ nhiệt êm dịu so vói Aspirin Cơ chế: Paracetamol ức chế q trình tổng hợp men Prostaglandin synthetase làm giảm tổng hợp Prostaglandin E l, E2 từ acid arachidonic vùng đồi, kết làm tăng trình thải nhiệt (giãn mạch ngoại biên, mồ hơi) lập lại cân cho trung tâm điều nhiệt vùng dưói đồi Paracetamol thuốc an tồn có tác dụng khơng mong muốn liều điều trị thường, dễ dung nạp khơng gây kích ứng dầy • Chỉ định: Dùng vói chứng đau vừa phải, có tính chất khu trú như: đau viêm dây thần kinh, đau cơ, đau răng, nhức đầu, đau chấn thương, thấp khớp mãn Dùng hạ sốt nguyên nhân: cảm sốt, cảm cúm • Liều dùng: 0,5 - lg/một lần, 4g/24 • Chống định: nên tránh phối hợp vói thuốc gây độc tính vói gan Khơng nên uống rượu, hút thuốc thời gian dùng thuốc • Dạng bào chế: viên nén (Panadol, Padol, Antigrip F, Alaxan ); viên sủi bọt (Efferalgan 500, Panadol hòa tan ); viên đặt (Efferalgan ) 1.1.2.Các phương pháp định lượng • Phương pháp đo quang: [4] [7] [ 18] [ 19] Dựa vào khả hấp thụ xạ u v Paracetamol methanol (cực đại hấp thụ 245nm) môi trường kiềm (cực đại hấp thụ 257nm) Tiến hành đo độ hấp thụ dung dịch chứa Paracetamol cực đại hấp thụ trên, tính nồng độ Paracetamol có dung dịch theo định luật Lambert-Beer (tính theo E dùng chất chuẩn) \ Phương pháp chuẩn độ Nitrit: [2] Thủy phân hoàn toàn Paracetamol dung dịch acid HC1 10% nhiệt độ, ta thu amin thơm bậc Định lượng amin vói dung dịch chuẩn NaN02 0, 1N mơi trường acid dựa sở phản ứng diazo hóa Để phát điểm tương đương ta dùng thị tropeolin-OO sử dụng điện kế Phương pháp đo Ceri: [2] [21] [22] Trong môi trường acid, Paracetamol bị thủy phân thành chất khử p - aminophenol, chất có khả phản ứng với chất oxy hóa Ceri IV tạo thành Ceri m Đến điểm tương đương, lượng Ceri IV dư oxy hóa Fe II thị Feroin thành Fe m làm cho thị chuyển từ màu đỏ (dạng khử) sang màu xanh (dạng oxy hóa) Định lượng Nitơ toàn phán phương pháp Kjeldahl: [2] [25] Tiến hành vơ hóa Paracetamol cách đun với H2 đặc, có S0 góp mặt Kali sulíat Natri sulíat Sau phản ứng ta thu nitơ dạng muối (NH4 ) S04, thêm NaOH dư vào hỗn hợp cất kéo NH3 giải phóng hoi nước vào bình nón có chứa sẵn lượng xác dư dung dịch chuẩn H2 0,1N Chuẩn độ lượng acid S0 thừa dung dịch chuẩn NaOH 0,1N với thị phenolphtalein Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC): [4] [16] [17] [26] Dựa vào phân bố khác Paracetamol pha tĩnh pha động trình sắc ký ta tách riêng Paracetamol khỏi hỗn hợp Kỹ thuật phát dựa vào tính chất hấp thụ xạ u v nêu — Xệp tin iố t ệ u Ehântích jsjxj Tham số tính tốn T[Ợflwp ũ i ỉ E l ẫ l l B T l*ì D u n ỹ d ic h ch u ần D urK )djch ch ọ n Nâng độ dung dịch chuẩn TC/TT Para 8.00* 5.86 7.00- 7.03 8.00- 7.97 9^00- 8.97 10.00* 9.68 DDT 735 Qurni 2.00- 2.04 1.80- 1.77 1.60- 1.84 1.40- L3S 1.20- 1.23 1.50 [ Ọ P h ần tích I lD :\Softw ar«\ M C A \250+314.txt Ịn k q u ả ị K ết thúc I c ấ u tử ' T c g iả T rần Viột Hùng v ằ c ố c cộ n g - Phò n g H óa L p lV iệ n k i / / 0 :5 PM Hình Loại bỏ dung dịch chuẩn íh r ỉ ứ n % ịt ìf i 'Ị&ú&t tic h ề ữ m tử X ệ p tin SốSệu P h ân tích Tham s ố tính tốn T rợaiú p ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■11111 ■ •-Ịg Ịx l D& B m^ i Jix| Phân tích kết D u n a d Ịc h c h u ln Dung d jch ch u ẩn ch ọ n _d -d Nông độ cõa dung dịch chuẩn TữTT 8.002 7.003 8.004 8.00DDT ĩx d Qũni 5.82 2.00- 2.02 7.08 1.80- 1.78 7.95 160* 1.64 8.86 1.40- 1.40 7.33 1.50 [ Ị p _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ i ĩ ỳ i l ^ 30/20041 ;56:25 PM 5/ M Ịn k g u iị I [ỹ lếchương tiinh phẫn lích icau iủ- Tẳc g« ĩiầri víệi Hung cẳc c< Hình 10 Tính tốn lại đường chuẩn - 29 - £ ể t lh ủ c Sau ta nhấp vào nút “Phân tích”, giá trị nồng độ tính tốn lại hình 10 Dựa vào thay đổi ta phát dung dịch chuẩn gây sai số loại bỏ d) Kiểm tra, đánh giá chất lượng đường chuẩn Dùng pipet xác để phối hợp từ hai dung dịch chuẩn gốc PG QG, sử dụng dung dịch HC1 0,1N làm dung mơi pha lỗng, pha dung dịch hỗn hợp kiểm tra có nồng độ thành phần gần giống dung dịch chuẩn Q , c 3, c Coi dung dịch thử, ta đo độ hấp thụ quang chúng, sau sử dụng đường chuẩn vừa xây dựng để tìm lại giá trị nồng độ, cuối đem so sánh chúng với giá trị nồng độ thực, đánh giá dựa sai khác Kết cho bảng Sự sai Nồng độ tính được(|ig/ml) khác(jig/ml) Dung dịch hỗn hợp kiểm tra Thành phần Nồng độ thực(|0 ,g/ml) KT1 Para Quini 7,000 1,800 6,978 1,790 -0,022 -0,010 KT2 Para Quini 8,000 8,010 0,010 1,600 1,619 0,019 KT3 Para Quini 9,000 1,400 8,983 1,409 -0,017 0,009 Bảng Kết kiểm tra, đánh giá chất lượng đường chuẩn Nhận xét: Kết cho thấy sai khác nhỏ, đường chuẩn xây dựng đánh giá có chất lượng tốt 2.3.6 Phân tích mẫu thử Antigrip F • Chuẩn bị mẫu thử: Cạo bỏ lớp vỏ bọc đường bên ngồi, cân 20 viên, tính khối lượng trung bình viên, nghiền kỹ thành bột mịn cối sứ Lấy xác lượng bột viên nghiền mịn tương ứng với khoảng 7,5mg Paracetamol - 30 I cho vào bình định mức lOOml, thêm 70ml dung dịch HC1 0,1N, lắc kỹ, để siêu âm 10 phũt, thêm HC1 0,1N vừa đủ, lắc Đem lọc, bỏ 20ml dịch lọc đầu, lấy xác lOml dịch lọc cho vào bình định mức lOOml, thêm HQ 0,1N vừa đủ, lắc đều, dung dịch thử • Đo độ hấp thụ quang mẫu thử: Đem dung dịch thử đo độ hấp thụ quang sáu bước sóng chọn, ghi lại giá trị độ hấp thụ quang để chuẩn bị nhập vào phần mềm, dùng đường chuẩn xây dựng để tính tốn kết • Cách tính kết quả: Hàm lượng Paracetamol Quinin sulíat viên tính theo công thức: mg/viên = c X 10 X — m (*) Trong đó: c nồng độ Paracetamol Quinin sulíat đọc máy (ng/ml) 10 hệ số pha lỗng M khối lượng trung bình viên (gam) m lượng bột viên cân định lượng (gam) • Kết phân tích mẫu Antigrip F: Sau phân tích máy tính ta thu giá trị nồng độ thành phần dung dịch thử (ng/ml) sử dụng cơng thức (*) phần để tìm hàm lượng hoạt chất viên - 31 - Tính tốn thống kê kết thu thực nhanh chóng cách sử dụng hàm thống kê (statistical) có sẵn phần mềm Microsoft Excel Vào phần mềm cách chọn biểu tượng desktop, chọn (cell), chọn Insert\Function Trong hộp thoại “Insert Function” chọn “Statistical” (hình 11) Một số hàm thơng dụng: Giá trị trung bình hàm Average Độ lệch chuẩn hàm Stdev Phương sai hàm Var So sánh hai phương sai hàm Ftest So sánh hai giá trị trung bình hàm Ttest 10 M icrost E xcel B ookl Bạta A T” B TT ± Ịi ii T WỊndow 1C sb ị Arial Rpws M Cplunns 147.93; 29.9 148.53- 29.43 147.69 28.85; 146.34; 30.1: 146.41; 29.69 148.51 30.13 147.57 29.68 0.961537: 0.235747: 0.98058 Q.485538 0664492 ^ ả V^orksheet ^ i* i Pw k *M 4Ịịị ĨVÍ-S tH p ị ! ■ I ỉ Diagr«n ; ị Li Search Por a functìon: Qtoect Hypertnk ?X he* rf s % > *&ã ; -iB ằôỉ » ► M\sheetl/sheet2/sheet3/ ịggsi Ready \ v n a ii- ế O J H J I J i _ , ■ ■ - ■■ ■ _ _ Hình 11 Xử lý thống kê Excel - 32 - Bảng Kết định lượng mẫu Antigrip F, SKS: 050801 Hàm lượng hoạt chất viên (mg) Quinin sulfat Paracetamol Số thứ tư 147,93 29,90 148,53 29,43 147,69 28,85 146,34 30,10 146,41 29,69 148,51 30,13 Tính thống kê Giá trị trung bình X 147,60 29,68 0,98 0,49 0,40 0,20 0,70 1,71 147,60 ± l,03mg 29,68 ± 0,5lmg Độ lệch chuẩn q _ - /'= 1 V n - ì Sai số chuẩn s - ±r ừx - v« Sai số tương đối jO/Q_ X Khoảng tin cậy Y x 's ± Ỵn - - n = 6; p = 0,95; t< = 2,57 x Nhận xét: Kết cho thấy độ lặp lại vói hai thành phần tương đối tốt, sai số tương đối tùy theo trường hợp 0,70% Paracetamol 1,71% Quinin sulíat Hàm lượng Paracetamol viên 147,60 - 33 - ± l,03mg Quinin sulfat 29,68 ± 0,5lmg vói mức tin cậy 95% Như phương pháp phân tích MCA sử dụng để phân tích mẫu Antigrip F, chế phẩm chứa hai thành phần có tỷ lệ gần giống 2.3.7 Đánh giá độ đúng, độ xác phương pháp • Nguyên tắc: Một phương pháp phân tích thường đánh giá cách khảo sát độ (accuracy) độ xác (precison) Độ xác thường xác định thông qua độ lặp lại phương pháp (cách thông thường xác định độ lệch chuẩn tương đối kết phân tích RSD - theo dược điển sai số tương đối) Cịn độ xác định thơng qua khả thu hồi kết phân tích dùng phương pháp thêm chuẩn Chúng ta đánh giá phương pháp phân tích (phương pháp A) cách so sánh kết phân tích vói phương pháp phân tích khác (được tiến hành phịng thí nghiệm khoảng thòi gian đánh giá chấp nhận, phương pháp B) Để đánh giá phương pháp MCA, thực nghiệm chọn phương pháp đo quang phổ tử ngoại định lượng riêng hai thành phần Paracetamol Quinin sulfat làm phương pháp so sánh [7] [18] Tiến hành so sánh độ xác độ hai phương pháp thông qua test F (so sánh hai phương sai) test T (so sánh hai giá trị trung bình) • Tiến hành: Hai thành phần Paracetamol Quinin sulíat tác giả định lượng phương pháp tách riêng hai thành phần sau đo quang phổ tử ngoại, tác giả khảo sát độ độ xác [18] Kết phân tích trình bày bảng - 34 - Bảng Kết khảo sát độ theo phương pháp B Paracetamol (kết trung bình lần thử) Quinin sulíat (kết trung bình lần thử) 99,00 % 99,03 % Bảng Kết khảo sát độ lặp lại mẫu thử theo phương pháp B STT Paracetamol (mg/viên) Quinin sulfat (mg/viên) 149,98 28,93 148,06 29,65 151,46 28,79 148,84 29,77 149,79 29,32 150,05 28,89 Kết so sánh phương pháp MCA phương pháp quang phổ thông thường (đã đánh giá) cho thấy khác khơng có ý nghĩa thống kê mức a = 0,05 (Bảng 9) - 35 - Bảng So sánh độ đúng, độ xác hai phương pháp Phương Paracetamol Quỉnin sulíat pháp u v (B) MCA (A) u v (B) MCA (A) X 149,67 147,60 29,23 29,68 n 6 6 s 1,35 0,96 0,18 0,24 Test F Fm — 0,71 < ^o,9;55 —5,05 5; ) s.;2 Testt tj-N = 1*17 < to o5;io - 5,05 h~N 1>94 < to.o5;io —2,23 ~ = 2,23 ; s2 _ ; ^(o,95;5;5) 0,49 1,38 T estF: TestT’ Fm — 1,33 < Fm = I ~Oị^lì ~ l l i j ĩ «! + n2 - ’ Sị.2 • t - ~ ^ 2ni'n2 I \«J + n2 Nhận xét: - So sánh hai phương sai test F cho thấy chúng khác khơng có ý nghĩa thống kê (P=0,95) - So sánh giá trị trung bình (test T) cho thấy kết định lượng hai phương pháp khác khơng có ý nghĩa thống kê hai thành phần Paracetamol Quinin sulíat (P=0,95) Như độ độ xác phương pháp MCA không khác so với phương pháp đo quang phổ hấp thụ tử ngoại định lượng riêng thành phần - 36 - 2.4 ĐÁNH GIÁ ưu, NHƯỢC ĐIỂM phương p h p ĐƯỢC SỬ DỤNG • Phương pháp phân tích đa cấu tử MCA: Ưu điểm: - Cho phép định lượng đồng thời hai thành phần hỗn hợp mà khơng địi hỏi phải qua giai đoạn chiết tách phức tạp, tốn nhiều thời gian cơng sức - Có thể thực máy quang phổ thơng thường, khơng địi hỏi máy quang phổ phải có sẵn phần mềm phân tích đa cấu tử - Thuận lọi phải phân tích nhiều mẫu giống nhau, đường chuẩn xây dựng sử dụng lại nhiều lần - Cho kết định lượng nhanh, xác - Khơng sử dụng dung môi hữu độc hại Nhược điểm: - Rất dễ bị ảnh hưởng tạp chất, tá dược, chất bảo quản có tính chất hấp thụ quang - Địi hỏi người thực phải có kinh nghiệm để chọn bước sóng tương tác, chọn dung mơi hịa tan chung, thích hợp cho tất thành phần • Phương pháp đo quang p h ổ hấp thụ tử ngoại: Ưu điểm: - Kỹ thuật đơn giản, thao tác dễ dàng, khơng địi hỏi trang thiết bị, máy móc đại - Dung mơi kiềm, acid sẵn có; giá thành thấp - Kết định lượng tin cậy Nhược điểm: - Không thể định lượng đồng thời hai thành phần hỗn hợp, phải qua trình tách chiết phức tạp, tốn thời gian dung mơi hố chất - Dễ xảy sai số q trình tách chiết, cần có tay nghề ổn định - Dung mơi clorịrm nhiều độc hại • Phương pháp sắc kí lỏng hiệu cao (HPLC): Ưu điểm: - Tiến hành nhanh chóng, dễ dàng áp dụng cho nhiều công thức thuốc đa thành phần - Kết định lượng xác cao - Định lượng đồng thời thành phần hỗn hợp mà qua giai đoạn chiết tách - Có thể sử dụng để định tính thành phần hỗn hợp Nhược điểm: - Trang thiết bị HPLC giá thành cao, chưa thực phổ biến nhiều trung tâm kiểm nghiệm nước - Các dung môi sử dụng phải tinh khiết đắt tiền 2.5 BÀN LUẬN Sự phát triển công nghiệp sản xuất bào chế thuốc cho phép kết hợp nhiều thành phần nhằm đạt hiệu điều trị tốt Thêm vào đó, vái đòi ngày nhiều dạng bào chế đòi hỏi khả phân tích khơng xác mà cịn phải nhanh chóng Phương pháp phân tích MCA có ưu điểm nhanh, xác, tiết kiệm cơng sức hố chất dung mơi Với hỗn hợp có chứa hai thành phần vừa nêu, cần đo độ hấp thụ - 38 - bước sóng máy quang phổ thơng thường định lượng đồng thời cách xác hàm lượng thành phần có cơng thức Phương pháp phân tích quang phổ đại MCA cịn đặc biệt thích hợp thuận lợi việc xác định hàm lượng hoạt chất giải phóng thử độ hịa tan việc nghiên cứu tốc độ giải phóng hoạt chất cho nhiều công thức dược phẩm Sự phát triển máy thử độ hòa tan kết nối với máy quang phổ đại mở hướng nghiẽn cứu là: áp dụng phương pháp phân tích đa cấu tử cải tiến nâng cao phân tích thử độ hịa tan cơng thức dược phẩm nhiều thành phần Hiện nay, phần mềm phân tích đa cấu tử MCA trang bị hầu hết máy quang phổ UV-Vis đại Tuy nhiên, nhiều sở kiểm nghiệm hiểu biết phương pháp phân tích MCA cịn hạn chế, số noi trang bị máy quang phổ hệ cũ nên áp dụng phương pháp Khi thực khóa luận chúng tơi mong muốn góp phần nhỏ việc nâng cao hiểu biết sở lý thuyết phương pháp phân tích MCA, giúp cho tiến hành kỹ thuật phân tích đa cấu tử máy quang phổ thơng thường khơng có sẵn phần mềm này, đồng thịi muốn góp phần vào chủ trương: áp dụng phát triển công nghệ thông tin lĩnh vực kiểm nghiệm Hy vọng rằng, vói mạnh mình, phương pháp phân tích MCA ngày quan tâm nghiên cứu đưa vào gần với thực tiễn công tác kiểm nghiệm đảm bảo chất lượng thuốc nước ta - 39 I PHẦN KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT 3.1 Kết luận Sau hồn thành khố luận tốt nghiệp em thu kết quả: • V ề kỹ năng: Biết cách vận dụng kiến thức học để tiến hành nghiên cứu, hoàn thành đề tài khoa học, rèn luyện nâng cao kỹ thực hành đảm bảo cho kết xác Biết cách tập hợp, tra cứu tài liệu liên quan tới nội dung nghiên cứu • V ề phương pháp: Nắm vững sở lý thuyết phương pháp phân tích đa cấu tử MCA, phương pháp phân tích đại, ngày quan tâm lĩnh vực kiểm nghiệm Đã tiến hành khảo sát xây dựng hồn chỉnh qui trình định lượng Paracetamol Quinin sulfat hỗn hợp thuốc phương pháp phân tích đa cấu tử MCA dựa phần mềm tự xây dựng Đã áp dụng phương pháp để định lượng chế phẩm lưu hành thị trường là: Viên nén bao đường Antigrip F, SKS: 050801 Công ty Dược phẩm Vật tư Y tế Tiền Giang (Tipharco) sản xuất, có hai thành phần Paracetamol Quinin sulíat Kết thu được: hàm lượng Paracetamol viên Antigrip F 147,60 ± l,03mg hàm lượng Quinin sulfat 29,68 ± 0,5 lmg vói độ tin cậy 95% So sánh kết phân tích thu vói phương pháp đo quang phổ uv thông thường để khẳng định: hai phương pháp MCA đo quang phổ u v có độ độ xác khơng khác với độ tin cậy 95% - 40 I Đánh giá ưu, nhược điểm phương pháp để chứng tỏ khả ứng dụng phương pháp MCA phân tích kiểm nghiệm, đồng thòi làm sở để lựa chọn phương pháp phân tích 3.2 Đề xuất • Với sở sản xuất: Đối vói số cơng thức thuốc đa thành phần cụ thể, hồn áp dụng phương pháp phân tích đa cấu tử MCA thay cho phương pháp đo quang phổ thông thường UV-Vis hay phương pháp HPLC, thu kết tương đương Đường chuẩn phương pháp lưu lại máy tính sử dụng cho loạt phân tích mẫu lần sau, thuận lọi cho việc thử độ hịa tan, hay phân tích bán thành phẩm trình sản xuất Nếu sở sản xuất khơng có máy quang phổ trang bị sẵn phần mềm phân tích đa cấu tử MCA có thực máy quang phổ thông thường, sử dụng phần mềm chúng tơi tự xây dựng • Vói hội đồng Dược điển: Hiện nay, thuốc hạ nhiệt giảm đau đa thành phần có chứa Paracetamol lưu hành rộng rãi thị trường Việc đưa thêm số chuyên luận dạng bào chế đa thành phần tương tự vào Dược điển Việt Nam (như số Dược điển khác) cần thiết Hy vọng kết nghiên cứu tham khảo áp dụng cho chuyên luận Dược điển Việt Nam lần xuất tói - 41 - TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ môn Dược Lý, Trường Đại học Y Hà Nội (2000), Dược lý học, Nhà xuất Y học, trang 184, 293 - 295 Bộ mơn Hóa Dược (2002), Hóa Dược, Trường Đại học Dược Hà Nội, Tập trang 90, Tập trang 302 Bộ mơn Hóa Dược (2002), Thực tập Hoá Dược, Trường Đại học Dược Hà Nội, trang 47 Bộ mơn Hóa Phân Tích (1998), Hóa phân tích, Trường Đại học Dược Hà Nội, Tập 1,2, trang 27 - 42,4 - 23 Bộ Y tế (2002), Dược điển Việt Nam III, Nhà xuất Y học Hà Nội, trang 245, 207 Bộ Y tế (1999), Từ điển bách khoa dược học , Nhà xuất từ điển bách khoa, trang 473,526 Công ty Dược phẩm Vật tư Y tế Tiền Giang, “Tiêu chuẩn sở viên nén bao đường Antigrip F” Trần Tứ Hiếu, Phạm Luận, Trần Thúc Bình, Xác định nồng độ hệ đa cấu tử cố p h ổ hấp thụ quang xen phủ theo phương pháp Phirod cải tiến sử dụng ngôn ngữ Pascal, Tuyển tập báo cáo hội nghị toàn quốc lần thứ hai tin học ứng dụng hoá học Trần Tứ Hiếu, Trần Thúc Bình, Đặng Văn Khánh, Xác định đồng thời s ố vitamin nhóm B hỗn hợp phương pháp p h ổ toàn phần, Tạp chí phân tích hố, lý sinh học số - 2002 10.Trần Việt Hùng, Một s ố thuật giải sử dụng kỹ thuật phân tích quang phổ MCA, Thơng báo kiểm nghiệm số 2-2002 11.Trần Việt Hùng, Đồn Cao Sơn, Trịnh Văn Quỳ, Định lượng đồng thời aspirin caýein c h ế phẩm thuốc hỗn hợp phương pháp định lượng toàn p h ổ FSQ, Thông báo kiểm nghiệm số 3-1999, trang 1014 12.TÙ Văn Mặc (1995), Phân tích hóa lý, Nhà xuất khoa học kỹ thuật, trang 52 - 84 - 42 - 13.Trinh Văn Quỳ, Trần Việt Hùng, Phương pháp định lượng tồn phổ FSQ-phân tích đa cấu tử máy quang p h ổ UV-vis Beckman DU series 650Ỉ, Thông báo kiểm nghiệm số -1997, trang 13-22 14.Trịnh Văn Quỳ, Trần Việt Hùng, Phân tích dược phẩm nhiều thành phần kỹ thuật quang p h ổ UV-Vis MCA - Một ứng dụng công nghệ thông tin kiểm nghiệm thuốc, Tạp chí dược học số 5-2002, trang 17-21 15.Thái Duy Thìn, Hồng Văn Đức (2002), Nghiên cứu định lượng đồng thời Paracetamol Ibuproýen viên nén phương pháp tồn phổ, Thơng báo kiểm nghiệm số 2-2003, trang 23-27 ló.Thái Duy Thìn, Nguyễn Thành Đạt (2002), Nghiên cứu định lượng Paracetamol Ibuproỷen thuốc hai thành phần, Hội nghị hóa học tồn quốc lần thứ tư, tháng 10-2003 17.TMÌ Duy Thìn, Nguyễn Thị Hướng (2003), Định lượng Paracetamol Quinin suựat viên nén Antigrỉp F phương pháp HPLC, Tạp chí Dược Học số 7-2003, trang 19-21 18.Trần Thị Thúy (2003), Định lượng Paracetamol Quinỉn sulỷat viên nén Antỉgrip F phương pháp đo quang p h ổ hấp thụ tử ngoại, Khóa luận tốt nghiệp Dược sĩ 19.Nguyễn Đình Triệu (2001), Các phương pháp phân tích vật lý hố lý, tậpl, Nhà xuất khoa học kỹ thuật, trang - 28, 169 - 246 20.Nguyễn Đình Trí (1998), Toán học cao cấp, Tập 1, Nhà xuất giáo duc, trang 89 - 136 lì.British Pharmacopoeia (1998), trang 994, 1129 22 European Pharmacopoeia II (1997), trang 1288,1416 23 Martindale The Extra Pharmacopoeia (1999), trang 72 - 74, 439 - 442 24 Pharmacopoeia o f The People’s Republic o f China (1997), trang 443, 520 25 The Pharmacopoeia O fJapanese (1991), trang 141,487 26 The United States Pharmacopoeỉa 24 (2000), trang 1458 - 1460 - 43 I ... suựat viên nén Antigrip F phương pháp phân tích đa cấu tử (MCA)? ?? Với mục tiêu cụ thể sau: - Nghiên cứu xây dựng quy trình định lượng đồng thịi Paracetamol Quinin sulíat hỗn hợp thuốc phương pháp phân. .. 2.3 XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG ĐỔNG THỜI PARACETAMOL VÀ QUININ SULFAT TRONG HỗN HỢP BẰNG KỸ THUẬT PHÂN TÍCH ĐA CẤU TỬ (MCA) 2.3.1 Khảo sát phổ hấp thụ u y lựa chọn bước sóng phân tích Cân xác... hấp thụ xạ u v nêu 1.3 PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH ĐA CẤU TỬ MCA 1.3.1 Một vài nét lịch sử phát triển phương pháp [14] Thực tế, sở lý thuyết phương pháp phân tích đa cấu tử (MCA) thuật tốn để giải