BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU CƠ BẢN TRONG KHOA HỌC TỰ NHIÊN BÁO CÁO TỔNG HỢP KÉT QUẢ THỰC HIỆN CỦA ĐỀ TÀI Tên đề tài: Nghiên cứu số nhóm vi khuẩn đóng vai trị chủ đạo chu trình Nitơ Phospho nhằm mục đích ứng dụng để xử lý nhiễm mơi trường Mã số: 621506 Lĩnh vực: Khoa học sống Chủ nhiệm đề tài: TS Đinh Thuý Hằng Đơn vị chủ trì: Viện Vi sinh vật Cơng nghệ sinh học Đại học Quốc gia Hà nội Hà nội, tháng năm 2009 MỤC LỤC I THÔNG TIN CHUNG VỀ ĐỀ TÀI…………………………………………… II KẾT QUẢ THỰC HIỆN CỦA ĐỀ TÀI……………………………………… 1 Kết nghiên cứu 1.1 Mô tả kết nghiên cứu………………………………………………….1 1.1.1 Vi khuẩn tham gia chu trình nitơ mẫu nghiên cứu……… 1.1.1.1 Vi khuẩn ơxy hố ammonium (AOB)………………………….1 1.1.1.2 Vi khuẩn khử nitrat (NRB)………………………… 1.1.1.3 Vi khuẩn cố định nitơ………………………… .7 1.1.2 Vi khuẩn tham gia chu trình phospho………………………… 1.1.2.1 Vi khuẩn tích luỹ phosphat hiếu khí………………………… 1.1.2.2 Vi khuẩn tích luỹ phosphat kỵ khí………………………… 11 1.2 Ý nghĩa khoa hoc kết nghiên cứu………………………… 11 1.3 Ý nghĩa thực tiễn khả ứng dụng kết khoa học…………… 11 Các sản phẩm khoa học………………………… 12 Kết tham gia đào tạo sau đại học………………………… 12 III TÌNH HÌNH TỔ CHỨC THỰC HIỆN ĐỀ TÀI ………………………… 13 IV ĐÁNH GIÁ, KIẾN NGHỊ………………………… 13 Đánh giá việc thực đề tài………………………… 13 Về nội dung nghiên cứu tiếp đề tài………………………… 13 Kiến nghị quản lý, tổ chức thực cấp………………………… 13 V PHỤ LỤC: Các cơng trình hồn thành cơng bố BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ THỰC HIỆN I THÔNG TIN CHUNG VỀ ĐỀ TÀI Tên đề tài: Nghiên cứu số nhóm vi khuẩn đóng vai trị chủ đạo chu trình Nitơ Phospho nhằm mục đích ứng dụng để xử lý ô nhiễm môi trường Mã số: 621506 Lĩnh vực: Khoa học sống Hướng: Vi sinh vật học Chủ nhiệm đề tài: TS Đinh Thúy Hằng Đơn vị chủ trì: Viện Vi sinh vật Công nghệ Sinh học - ĐHQGHN Địa chỉ: E2, 144 Xuân thủy, Cầu giấy – Hà nội Số điện thoại: 04 7547407 Danh sách cán tham gia chính: STT Họ tên Học vị Đinh Thúy Hằng TS sinh học Nguyễn Minh Giảng CN Công nghệ môi trường Thái Mạnh Hùng KS Công nghệ hóa thực phẩm Nguyễn Thị Tuyền CN Sinh học Chức danh Nơi công tác Chủ nhiệm ĐT Viện VSV & CNSH Thành viên Viện VSV & CNSH Thành viên Viện VSV & CNSH Thành viên Viện VSV & CNSH Thời gian thực phê duyệt: Năm bắt đầu: 2006 Năm kết thúc: 2008 Thời gian kết thúc thực tế: tháng năm 2009 Kinh phí thực hiện: 60 000 000 (sáu mươi triệu đồng) II KẾT QUẢ THỰC HIỆN CỦA ĐỀ TÀI Kết nghiên cứu 1.1 Mô tả kết nghiên cứu 1.1.1 Vi khuẩn tham gia chu trình nitơ mẫu nghiên cứu 1.1.1.1 Vi khuẩn ơxy hố ammonium (AOB) Đa dạng vi khuẩn tham gia chu trình nitơ nghiên cứu mẫu nước bùn đại diện cho dạng mơi trường sinh thái khác nhau, gồm có hồ Ba Mẫu (môi trường nước ngọt), bùn đáy đầm tôm Quảng ninh (môi trường nước lợ) dịch thu từ bể khí sinh học nhà máy bia Thanh hóa (mơi trường nhiễm hữu nặng) Hai nhóm vi khuẩn tập trung nghiên cứu khn khổ đề tài vi khuẩn ơxy hóa ammonium (AOB) vi khuẩn sinh trưởng kỵ khí khử nitrat Kết phân tích cho thấy số mẫu chọn để nghiên cứu, mẫu từ tầng nước mặt hồ Ba Mẫu có số lượng AOB cao (2,1 x 109 tế bào/ml), mẫu cịn lại có số lượng thấp nhiều, mẫu dịch đáy đầm tôm có x 103 tế bào/ml mẫu dịch từ bể xử lý kỵ khí nước thải nhà máy bia Thanh hóa hồn tồn khơng có AOB Như số lượng AOB tỷ lệ nghịch với nồng độ chất hữu cơ, hay nói cách khác số lượng AOB phụ thuộc rõ ràng vào nồng độ ơxy hịa tan mẫu (Bảng 1) Bảng Số lượng vi khuẩn AOB NRB mẫu nghiên cứu Mẫu nghiên cứu Hồ Ba Mẫu tầng mặt Hồ Ba Mẫu tầng đáy Đầm tơm Quảng ninh Bể xử lý kỵ khí Số lượng AOB (tế bào/ml) 2,1 x 109 KXĐ x 103 Số lượng NRB (tế bào/ml) Na-Lactat Na-Acetat Na-Benzoat KXĐ 2,4 x 108 2,4 x 108 2,4 x 108 2,4 x 108 x 106 x 105 Hai mươi chủng AOB phân lập từ mẫu khác dựa khác biệt đặc điểm hình thái khuẩn lạc Sau quan sát hình thái tế bào đánh giá sơ khả sinh trưởng môi trường ammonium, chủng phân thành nhóm khác (Bảng 2) Bảng Các nhóm vi khuẩn AOB phân lập nghiên cứu STT Chủng đại diện AOB AOB 10 AOB 12 AOB 13 Đặc điểm khuẩn lạc mơi trường phân lập Khuẩn lạc trịn, lõm, riềm trơn, màu trắng đục, mỏng, kích thước mm Khuẩn lạc trịn, mỏng, riềm nhăn-ướt, màu trắng, kích thước - mm Khuẩn lạc tròn, mỏng, riềm nhăn, kích thước 1-5 mm có phần lồi, phần ngồi lồi tạo thành vòng tròn phần ướt, màu trắng Khuẩn lạc trịn, mỏng, riềm nhăn, kích thước 1-5 mm, màu trắng, có phần lồi, phần ngồi lồi tạo thành vòng tròn phần ướt màu sẫm Sinh trưởng nhờ ơxy hóa NH4+ ++ ++ ++ + Khuẩn lạc tròn, lồi phần nhỏ giữa, riềm nhăn, khơ, kích thước 0,5 - 2,5 mm Khuẩn lạc trịn, trơn, bóng, phần màu nâu, phần riềm trắng đục, kích thước 0,5 – mm AOB 15 AOB 18 ++ + Hoạt tính sinh học chủng AOB đại diện đánh giá thông qua xác định thay đổi hàm lượng ammonium môi trường ni cấy theo thời gian Kết trình bày biểu đồ 12 10 Ammonium (mM) Control AOB-3 AOB-12 AOB-10 AOB-15 AOB 13 AOB-18 0 20 40 60 80 100 120 Thời gian (h) Hình Khả chuyển hóa ammonium chủng AOB đại diện Như hoạt tính sinh học chủng AOB khác Hai chủng có hoạt tính cao AOB3 AOB15 lựa chọn để tiến hành nghiên cứu đặc điểm sinh lý, sinh hóa phân loại dựa phân tích trình tự 16S rADN Quan sát hình thái kính hiển vi quang học, chủng AOB3 gồm tế bào trực khuẩn ngắn (kích thước 1 2-3 m), chủng AOB15 gồm tế bào trực khuẩn dài (kích thước 13-5 m) có xu hướng kết nối với tạo chuỗi giai đoạn sau q trình ni cấy (Hình 2) AOB3 AOB15 Hình thái tế bào hai chủng vi khuẩn AOB3 AOB15 quan sát Hình kính hiển vi quang học Điều kiện sinh trưởng tối ưu hai chủng vi khuẩn tiến hành nghiên cứu, kết tổng hợp bảng Bảng Điều kiện sinh trưởng tối ưu hai chủng vi khuẩn AOB3 AOB15 STT Chủng vi khuẩn Yếu tố sinh trưởng Nhiệt độ (C) pH môi trường Nồng độ muối (%) Mối tương quan với ôxy Nguồn nitơ AOB3 20 – 37 6–9 0–5 Hiếu khí NH4+, NO3, peptone AOB15 25 – 28 5–9 0–3 Hiếu khí NH4+, peptone Như hai chủng AOB3 AOB15 thuộc nhóm vi khuẩn ưa ấm điển hình Đáng ý chủng có khả sinh trưởng dải pH rộng, đặc biệt pH kiềm (8, 9), môi trường mà ammonium tồn dạng NH4+ Dựa trình tự 16S rADN chủng AOB3 xếp vào chi Delftia (độ tương đồng 96% với Delftia sp.), đặt tên Delftia sp.; chủng AOB15 xếp vào chi Thermomonas (độ tương đồng 96% với Thermomonas koreensis), đặt tên Thermomonas sp 1.1.1.2 Vi khuẩn khử nitrat (NRB) Khác với vi khuẩn AOB, vi khuẩn khử nitrat (NRB) có mặt với số lượng tương đối cao mẫu phân tích, đặc biệt mẫu bùn từ hồ Ba Mẫu đầm tôm Quảng ninh (Hình 3) Mẫu lấy từ bể xử lý kỵ khí có số lượng NRB thấp 100 lần, giải thích cạnh tranh cao nhóm vi sinh vật kỵ khí khác sinh metan hay khử sulfat dạng môi trường Na-lactat 300 Triệu TB/ml Na-benzoat 200 100 Hồ Ba Mẫu Bể xử lý nước thải Đầm tơm Quảng ninh Hình Số lượng NRB mẫu thu thập từ môi trường sinh thái khác Thông qua phương pháp làm dãy pha lỗng mơi trường kỵ khí thạch bán lỏng, phân lập 22 chủng vi khuẩn kỵ khí khử nitrat nguồn chất khác (Bảng 4) Bảng NRB phân lập nguồn chất khác STT Chất cho điện tử Na-lactat Na-Acetat Na-Benzoat Số chủng phân lập Môi trường nước Môi trường nước lợ 0 2 Phân tích tính đa dạng chủng NRB phân lập phương pháp RFLP sử dụng enzyme giới hạn HaeIII MspI cho thấy phần lớn chủng xếp vào nhóm di truyền khác nhau, không phụ thuộc vào nguồn gốc chất sử dụng để phân lập (Hình 4) Song song với việc xác định số lượng phân lập chủng đơn NRB, chúng tơi tiến hành ni tích lũy nhóm vi khuẩn hai nguồn chất khác Na-lactat Na-benzoat mẫu đáy từ hồ Ba Mẫu (là mẫu tự nhiên có số lượng NRB cao nhất) để nghiên cứu thay đổi quần thể NRB qua bước ni tích lũy đa dạng loài mẫu Cấu trúc quần thể mẫu làm giàu phân tích phương pháp PCR-DGGE đoạn gen 16S rADN (Hình 5) LF1 LF3 LF4 N1 N2 N3 LB2 LB4 BF1 BF3 BB2 BB3 M bp M LF1 LF3 LF4 N1 N2 N3 LB2 LB4 BF1 BF3 BB2 BB3 1500 1000 500 100 HaeIII MspI Phổ điện di 16S rADN 12 chủng NRB sau xử lý enzym giới hạn MspI HaeIII phân tích RFLP Hình L0 L1 L2 LF1 LF3 LF4 N1 N2 N3 LB2 LB4 B0 B1 B2 BF1 BF3 BB2 BB3 10 11 11 11 12 13 14 15 16 8 17 14 14 18 A B Hình 5.Phổ băng điện di biến tính (DGGE) mẫu ni tích lũy chủng đơn NRB (A) Na-lactat: L0-L2 kí hiệu mẫu ni tích lũy; LF1, LF3, LF4, N1, N2, N3, LB2, LB4 kí hiệu chủng đơn (B) Na-benzoat: B0-B2 kí hiệu mẫu ni tích lũy; BF1, BF3, BB2, BB3 kí hiệu chủng đơn 1-18: tên băng điện di Kết thu cho thấy số nhóm vi khuẩn tích luỹ trình làm giàu (được thể băng điện di lần làm giàu cuối cùng) Hai chủng LF1 (băng điện di số 8) BB3 (băng điện di số 14) đại diện cho nhóm vi khuẩn làm giàu hai nguồn chất khác Na-lactat Na-benzoat lựa chọn để tiến hành nghiên cứu sâu khả ứng dụng Xác định hoạt tính khử nitrat hai chủng theo thời gian (với nguồn chất tương ứng Na-lactat Na-benzoat) (Hình 6) cho thấy tốc độ khử chủng LF1 cao rõ rệt so với chủng BB3 Tuy nhiên điều khác chất dẫn đến, benzoat hợp chất có vịng thơm, khó bị ơxy hố so với lactat Ở hai chủng, hoạt tính khử nitrat cao ngày đầu nuôi cấy Cả hai chủng có tiềm ứng dụng việc xử lý nguồn thải nhiễm nitrat cao Nồng độ nitrat (mM/l) 4.200 LF1 BB3 3.500 2.800 2.100 1.400 0.700 0.000 24 48 72 96 120 144 168 192 216 Thời gian (h) Hình Khả khử nitrat hai chủng LF1 BB3 So sánh trình tự 16S rADN cho phép đặt tên chủng LF1 Ochrobactrum sp (loài gần Ochrobactrum cytisi, 99% tương đồng) chủng BB3 Paracoccus sp (loài gần Paracoccus sp KS-11, 96% tương đồng) Cả hai chi Ochrobactrum Paracoccus thuộc lớp α - Proteobacteria biết đến với nhiều lồi có khả hơ hấp với nitrat điều kiện khơng có ơxy 1.1.1.3 Vi khuẩn cố định nitơ Trong khuôn khổ đề tài tiến hành nghiên cứu đa dạng vi khuẩn cố định nitơ môi trường rừng ngập mặn, mơi trường cịn nghiên cứu nhóm vi sinh vật Mẫu trầm tích để nghiên cứu thu thập rừng phòng hộ Cần Giờ, Tp HCM Để đánh giá mức đa dạng vi khuẩn cố định nitơ sử dụng phương pháp thiết lập đánh giá thư viện gen nifH mã cho dinitrogenase reductase phức hợp enzyme nitrognase Phương pháp cho phép đánh giá đa dạng không qua bước phân lập nuôi cấy chủng đơn, đồng thời cho phép phát lồi cịn chưa phân lập phịng thí nghiệm Hai thư viện gen nifH với 60 clone thư viện thiết lập mẫu trầm tích bề mặt mẫu trầm tích độ sâu cm Kết phân tích thư viện gen cho thấy mức đa dạng cao vi sinh vật cố định nitơ hai mẫu (Hình 7) Khác với quần thể vi sinh vật cố định nitơ khu hệ rễ lúa hay họ đậu (do lồi hiếu khí Rhizobium, Agrobacterium chiếm ưu thế), quần thể vi sinh vật cố định nitơ rừng ngập mặn lồi kỵ khí Desulfovibrio, Geobacter chiếm ưu Tuy nhiên lồi quang dưỡng Cyanobacteria, Rhodobacter lại khơng tìm thấy 40% 40% – cm Hình VK cố định nitơ chưa phân lập Vibrio sp Pseudomonas sp Wolinella sp Desulfovibrio sp sp VK cố định nitơ chưa phân lập 0% Methylomonas sp 0% Dechloromonas sp 10% Wolinella sp 10% Spirochaete sp 20% Vibrio sp 20% Desulfovibrio sp sp 30% Geobacter sp 30% – 15 cm Đa dạng vi khuẩn cố định nitơ mẫu bùn rừng ngập mặn Cần theo phương pháp phân tích thư viện gen nifH 1.1.2 Vi khuẩn tham gia chu trình phospho Nhóm vi khuẩn tham gia chu trình phospho nghiên cứu đề tài vi khuẩn có khả tích lũy phospho dạng polyphosphat tế bào (hay gọi vi khuẩn poly P) Vi khuẩn polyP bao gồm lồi hiếu khí kỵ khí, có vai trị pha xử lý khác chu trình xử lý nước thải 1.1.2.1 Vi khuẩn tích luỹ phosphat hiếu khí Để phân lập chủng polyP hiếu khí, chúng tơi tiến hành ni tích lũy mơi trường khống có nồng độ phosphat cao (10 mM Ca3(PO4)2), sau phân lập mơi trường thạch đĩa tương ứng Ba chủng ký hiệu FW-Pp2, FW-Pp4 FW-Pp5 phân lập tinh Khả tích lũy phosphat chủng đánh giá cách định tính thông qua phương pháp nhuộm tế bào dung dịch toluidin xanh, cho phép phát hạt dự trữ poly P phân biệt với cấu trúc khác tế bào kính hiển vi quang học (Hình 8) Các chủng có tỷ lệ tế bào chứa hạt polyphosphat cao sau 48 h nuôi cấy 10 coi chủng có hoạt tính cao Trong số chủng phân lập, chủng FW-Pp5 thể khả tích luỹ phosphat cả, hai chủng lại lựa chọn để tiến hành nghiên cứu Hình Tế bào vi khuẩn FW-Pp2 sau nhuộm toluidine blue Khả tích luỹ phoshat hai chủng hiếu khí FW-Pp2 FW-Pp4 đánh giá cách định lượng thông qua phương pháp xác định thay đổi nồng độ phosphat môi trường nuôi cấy (Hình 9) Phosphate (mg/L) 250 FW4 FW2 200 Control 150 100 50 0 20 40 60 80 100 Thời gian (h) Hình Sự thay đổi nồng độ phosphat môi trường nuôi cấy hai chủng FW-Pp2 FW-Pp4 Như có mặt vi khuẩn Poly-P (chủng FW-Pp2 FW-Pp4), nồng độ phosphat môi trường nuôi cấy giảm rõ rệt so với đối chứng khơng có vi sinh vật 11 Đặc biệt trường hợp chủng FW-Pp2, nồng độ phosphat giảm tới 90% sau ngày ni cấy Đây kết phịng thí nghiệm cho thấy khả ứng dụng chủng vi khuẩn nghiên cứu vào việc loại phosphat từ nguồn nhiễm bên ngồi Bên cạnh đó, điều kiện sinh trưởng tối ưu hai chủng FW-Pp2 FW-Pp4 xác định để làm sở cho việc kiểm soát hoạt động chúng đưa môi trường (Bảng 5) Kết cho thấy hai chủng có khả sinh trưởng điều kiện nhiệt độ, độ pH nồng độ muối thay đổi biên độ lớn, yếu tố thuận lợi tạo điều kiện sống sót cạnh tranh cao chúng đưa môi trường bên Bảng Điều kiện sinh trưởng tối ưu hai chủng vi khuẩn FW-Pp2 FW-Pp4 Yếu tố sinh trưởng STT Nhiệt độ (C) pH môi trường Nồng độ muối (%) Mối tương quan với ôxy Nguồn nitơ Chủng vi khuẩn FW-Pp2 FW-Pp4 28 – 37 28 – 37 6–8 6–8 0–8 0–3 Hiếu khí Hiếu khí +  NH4 , NO3 , peptone NH4+, NO3, peptone Về hình thái, hai chủng FW-Pp2 FW-Pp4 gồm tế bào trực khuẩn ngắn (Hình 10), chuyển động chậm mơi trường dịch thể FW-Pp2 Hình 10 FW-Pp4 Hình thái tế bào hai chủng vi khuẩn tích luỹ phosphat FW-Pp2 FWPp4 quan sát kính hiển vi quang học So sánh trình tự 16S rADN hai chủng xếp vào chi Bacillus (loài gàn gũi B subtilis, độ tương đồng 97% 96% tương ứng) Hai chủng vi khuẩn polyP đặt tên Bacillus sp FW-Pp2 Bacillus sp FW-Pp4 12 1.1.2.2 Vi khuẩn tích luỹ phosphat kỵ khí Song song với vi khuẩn hiếu khí, vi khuẩn polyP kỵ khí khử nitrat ni tích tũy mơi trường khống chứa nitrat làm chất nhận điện tử, sau phân lập ống môi trường thạch bán lỏng Bằng phương pháp này, chủng polyP kỵ khí khử nitrat phân lập, hai chủng có nguồn gốc từ môi trường nước (FWPN2 FW-PN7) hai chủng có nguồn gốc tư mơi trường nước lợ (BW-PN2 BWPN9) Tuy nhiên thí nghiệm xác định khả tích luỹ phosphat định tính thơng qua phép nhuộm toluidin blue chủng chưa cho kết dương tính 1.2 Ý nghĩa khoa hoc kết nghiên cứu Trong đề tài chúng tơi tiến hành nghiên cứu nhóm vi khuẩn tham gia hai chu trình nitơ phospho dạng môi trường đại diện nước ngọt, nước lợ nước nhiễm hữu cao Kết thu đề tài thể số điểm so với nghiên cứu tiến hành trước sau: - Áp dụng số phương pháp sinh học phân tử (như RFLP, DGGE, thiết lập phân tích thư viện gen) để nghiên cứu tính đa dạng vi sinh vật mà không thông qua bước phân lập - Xác định tính đa dạng cao nhóm tham gia chu trình nitơ, đặc biệt vi khuẩn khử nitrat vi khuẩn cố định nitơ Bên cạnh xác định nhóm chiếm ưu nhóm chức - Bằng phương pháp vi sinh truyền thống phân lập tuyển chọn chủng vi khuẩn ơxy hố ammonium, khử nitrat tích luỹ phosphat đại diện - Đã xác định hoạt tính sinh học, nghiên cứu điều kiện sinh trưởng đặc điểm phân loại chủng vi khuẩn phân lập nhằm đánh giá khả ứng dụng chúng việc xử lý ô nhiễm môi trường 1.3 Ý nghĩa thực tiễn khả ứng dụng kết khoa học Nitơ phospho hai yếu tố hoá học quan trọng q trình xử lý nhiễm Việc làm cân bằn hai yếu tố với yếu tố xử lý khác nguồn cacbon, ôxy, định thành cơng q trình xử lý Trên sở đó, kết thu nghiên cứu có số ý nghĩa quan sau: 13 - Cung cấp thông tin đa dạng mật độ nhóm vi khuẩn đóng vai trị chu trình nitơ phospho mơi trường ô nhiễm hữu mức độ khác Đây thông tin cần thiết phải giải tốn xử lý nhiễm nói chung - Xây dựng giống vi khuẩn gồm lồi chủ chốt hai chu trình này, đặc biệt chủng có hoạt tính sinh học cao, làm sở cho nhà nghiên cứu phát triển sinh phẩm để ứng dụng vào việc xử lý ô nhiễm - Tạo điều kiện để cán Viện Vi sinh vật Công nghệ Sinh học tham gia thực đề tài có hội tiếp xúc làm việc với số phương pháp nghiên cứu mới, đặc biệt phương pháp SHPT phương pháp ni cấy vi sinh vật kỵ khí Các sản phẩm khoa học Các cơng trình hồn thành công bố: Nguyễn Thị Tuyền, Nguyễn Minh Giảng, Vũ Hoàng Giang, Đinh Thúy Hằng Đa dạng vi khuẩn khử nitrat số môi trường sinh thái Việt nam chủng đại diện Tạp chí khoa học - Khoa học tự nhiên công nghệ (Đại học Quốc gia Hà Nội) Đinh Thuý Hằng, Trần Triết Quá trình cố định nitow rừng ngập mặn Cần Giờ vi sinh vật tham gia Tạp chí công nghệ sinh học (Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam) Tổng hợp kết STT Kết công bố Tạp chí KH quốc tế Hội nghị KH quốc tế Tạp chí KH quốc gia Hội nghị KH quốc gia Sách chuyên khảo Số lượng cơng trình theo đăng ký thuyết minh Khơng Khơng Khơng Khơng Số lượng cơng trình thực Không Không Không Không Kết tham gia đào tạo sau đại học Học viên cao học đăng ký thực đề tài khơng tiếp tục kỹ thuật kỵ khí kỹ thuật sinh học phân tử phức tạp (đã xin rút báo cáo trung gian năm 2007) 14 III TÌNH HÌNH TỔ CHỨC THỰC HIỆN ĐỀ TÀI (tính đến thời điểm lập báo cáo) Tổ chức thực hiện: tương đối thuận lợi Sử dụng kinh phí: STT theo kế hoạch dự trù thực đề tài (năm 2006 2007) Nội dung chi Kinh phí Kinh phí thực duyệt (triệu đồng) (triệu đồng) Th khốn chun mơn 25 000 000 25 000 000 Nguyên vật liệu, lượng 30 000 000 22 592 000 Trang thiết bị Không có Khơng chi Chi khác 000 000 429 800 Tổng số 60 000 000 Ghi 45 021 800 IV ĐÁNH GIÁ, KIẾN NGHỊ Đánh giá việc thực đề tài Đề tài thực theo tiến độ, đảm bảo đầy đủ nội dung nghiên cứu đa đưa thuyết minh Về nội dung nghiên cứu tiếp đề tài Theo nhu cầu thực tế giải ô nhiễm môi trường, kiến nghị xin tiếp tục nghiên cứu ứng dụng nguồn vi sinh vật có đề tài để xây dựng thử nghiệm chế phẩm sinh học phục vụ cho xử lý nước thải có hàm lượng nitơ cao Kiến nghị quản lý, tổ chức thực cấp Hà nội ngày 12 tháng 01 năm 2009 Xác nhận quan chủ trì Chủ nhiệm đề tài (Ký tên đóng dấu) Đinh Thúy Hằng 15 ... THỰC HIỆN I THÔNG TIN CHUNG VỀ ĐỀ TÀI Tên đề tài: Nghiên cứu số nhóm vi khuẩn đóng vai trị chủ đạo chu trình Nitơ Phospho nhằm mục đích ứng dụng để xử lý ô nhiễm môi trường Mã số: 621506 Lĩnh... TÀI Kết nghiên cứu 1.1 Mô tả kết nghiên cứu 1.1.1 Vi khuẩn tham gia chu trình nitơ mẫu nghiên cứu 1.1.1.1 Vi khuẩn ơxy hố ammonium (AOB) Đa dạng vi khuẩn tham gia chu trình nitơ nghiên cứu mẫu... loại chủng vi khuẩn phân lập nhằm đánh giá khả ứng dụng chúng vi? ??c xử lý ô nhiễm môi trường 1.3 Ý nghĩa thực tiễn khả ứng dụng kết khoa học Nitơ phospho hai yếu tố hoá học quan trọng q trình xử lý