BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ BẮC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ NANO POLYME CHỨA DICLOFENAC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2013 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ BẮC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ NANO POLYME CHỨA DICLOFENAC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn 1. ThS. Nguyễn Thị Mai Anh 2. DS. Đào Minh Huy Nơi thực hiện: Bộ môn Bào chế HÀ NỘI - 2013 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, với lòng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới: Th.S. Nguyễn Thị Mai Anh DS. Đào Minh Huy Là những người thày đã dìu dắt, hướng dẫn và giúp đỡ em trong suốt quá trình thực hiện, hoàn thành khóa luận tốt nghiệp. Em cũng xin gửi lời cảm ơn tới: Các thày cô, các anh chị kỹ thuật viên bộ môn Bào chế, bộ môn Công nghiệp Dược, bộ môn Dược lý đã luôn giúp đỡ, tạo điều kiện cho em khi thực hiện khóa luận này. Ban giám hiệu, các phòng ban, các thày cô và cán bộ nhân viên trường đại học Dược Hà Nội đã tận tình dạy dỗ, chỉ bảo em trong suốt thời gian học tập tại trường. Cuối cùng, em cũng xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè đã động viên, hỗ trợ em thực hiện và hoàn thành nghiên cứu khoa học này. Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 21 tháng5 năm 2013 Sinh viên Nguyễn Thị Bắc MỤC LỤC Danh mục các kí hiệu, các chữ viết tắt Danh mục các bảng Danh mục các hình vẽ, đồ thị ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 2 1.1. Một số nội dung về diclofenac 2 1.1.1. Công thức hóa học 2 1.1.2. Các đặc tính lý hóa. 2 1.1.3. Thuốc nhỏ mắt chứa diclofenac 4 1.2. Một số vấn đề về thuốc nhỏ mắt 5 1.2.1. Định nghĩa 5 1.2.2. Những hạn chế của thuốc nhỏ mắt và các biện pháp làm tăng sinh khả dụng 5 1.3. Tổng quan về nano polyme 6 1.3.1. Khái niệm nano polyme 6 1.3.2. Ứng dụng của hệ tiểu phân nano polyme trong dược phẩm. 7 1.3.3. Phương pháp bào chế nano polyme 8 1.4. Một số phương pháp đánh giá hệ nano polyme 11 1.4.1. Đặc tính lý hóa của hệ 11 1.4.2. Khả năng giải phóng dược chất in vitro 11 1.5. Các nghiên cứu về nano polyme chứa diclofenac 12 CHƯƠNG 2. NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1. Nguyên liệu và thiết bị 15 2.1.1. Nguyên liệu 15 2.1.2. Thiết bị 16 2.1. Nội dung nghiên cứu. 16 2.2. Phương pháp nghiên cứu. 16 2.2.1. Phương pháp khảo sát khả năng hòa tan của dược chất và polyme trong pha phân tán. 16 2.2.2. Phương pháp bào chế NP diclofenac. 17 2.2.3. Nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố công thức và quá trình 17 2.2.4. Phương pháp đánh giá một số đặc tính của hệ 18 2.2.5. Phương pháp định lượng 19 2.2.6. Phương pháp đánh giá khả năng giải phóng thuốc qua màng. 20 CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ NHẬN XÉT 23 3.1. Ảnh hưởng của các thông số kỹ thuật tới kích thước tiểu phân của hệ nano diclofenac . 23 Ảnh hưởng của nhiệt độ 23 3.1.1. Ảnh hưởng của lực phân tán 24 3.1.2. 3.2. Ảnh hưởng của một số tá dược trong công thức tới KTTP của hệ NP diclofenac 26 Lựa chọn hệ dung môi hòa tan dược chất và polyme 26 3.2.1. Khảo sát ảnh hưởng của PEG 400 27 3.2.2. Ảnh hưởng của nồng độ PVA 28 3.2.3. Ảnh hưởng của tỉ lệ dược chất và polyme tới sự thay đổi kích 3.2.4. thước tiểu phân hệ NP diclofenac 29 Ảnh hưởng của hệ đệm tới kích thước tiểu phân hệ NP diclofenac 3.2.5. 30 Ảnh hưởng của tỉ lệ giữa pha phân tán và môi trường phân tán tới 3.2.6. KTTP. 32 3.3. Đánh giá độ ổn định và một số đặc tính của hệ NP diclofenac 33 Hình dạng tiểu phân 34 3.3.1. Độ ổn định của hệ NP diclofenac 34 3.3.2. Xác định hàm lượng diclofenac trong mẫu NP diclofenac sau khi 3.3.3. bào chế 35 3.4. Xác định hàm lượng dược chất có trong mẫu NP diclofenac 35 3.5. Bước đầu đánh giá khả năng giải phóng và khả năng thấm dược chất in vitro của NP diclofenac. 37 3.5.1. Khả năng giải phóng và hấp thu dược chất qua màng thẩm tích 37 3.5.2. Khả năng giải phóng và hấp thu dược chất qua giác mạc thỏ 38 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 39 KẾT LUẬN 39 ĐỀ XUẤT 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO Danh mục các kí hiệu, các chữ viết tắt ADC Acid diclofenac DCM Dicloromethan DMSO Dimethyl sulfoxid DSC Phân tích nhiệt vi sai (Differential scanning calorimetry) EtOH Ethanol Eud Eudragit FTIR Phổ hồng ngoại chuyển dạng Fourier HPLC High performance liquid chromatography (Sắc ký lỏng hiệu nâng cao) KTTP Kích thước tiểu phân MeOH Methanol NaD Natri diclofenac NP Nano polyme PDI Chỉ số đa phân tán (Polydispersity index) PEG Polyetylen glycol PVA Polyvinyl alcol TEM Kính hiển vi điện tử truyền qua (Transmission electron microscope) Danh mục các bảng Bảng Tên bảng Trang 1.1 So sánh các đặc tính của NaD và ADC 3 2.1 Nguyên liệu sử dụng trong quá trình thực nghiệm 15 3.1 3.5 3.11 Công thức bào chế hệ NP diclofenac 23 27 34 3.2 Ảnh hưởng của nhiệt độ tới KTTP của hệ NP diclofenac 23 3.3 Ảnh hưởng của tốc độ đồng nhất hóa tới KTTP của hệ NP diclofenac 24 3.4 Khả năng hòa tan của hệ dung môi khác nhau đối với hỗn hợp NaD và Eud 26 3.6 Sự ảnh hưởng của PEG 400 đối với KTTP 27 3.7 Ảnh hưởng của nồng độ PVA tới KTTP 28 3.8 Ảnh hưởng của sự có mặt Eud tới KTTP của dược chất và hệ NP 29 3.9 Ảnh hưởng của tỉ lệ dược chất và polyme tới KTTP của hệ NP diclofenac 29 3.10 Ảnh hưởng các loại hệ đệm tới KTTP và thế Zeta. 31 3.12 KTTP trung bình (nm) của mẫu NP diclofenac mới bào chế và sau khi bảo quản ở điều kiện lạnh 2 tháng 35 Danh mục các hình vẽ, đồ thị Hình Tên hình Trang 1.1 Sơ đồ kỹ thuật nhũ hóa và bay hơi dung môi 9 1.2 Bình Franz 9 3.1 Ảnh hưởng của thời gian phân tán tới KTTP của hệ NP diclofenac 25 3.2 Hiệu suất bào chế khi sử dụng đệm với nồng độ khác nhau 32 3.2 Ảnh hưởng của tỉ lệ pha phân tán và môi trường phân tán tới KTTP 33 3.4 Ảnh TEM của mẫu NP diclofenac 34 3.5 Ảnh TEM của mẫu NP diclofenac sau bảo quản 2 tháng 35 3.6 Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ ADC và diện tích pic 36 3.7 Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ NaD và diện tích pic 37 3.8 Khả năng giải phóng invitro qua màng thẩm tích 38 3.9 Khả năng giải phóng và hấp thu dược chất in vitro qua giác mạc thỏ của hệ NP diclofenac 38 1 ĐẶT VẤN ĐỀ Những thập kỉ gần đây, nano polyme được nghiên cứu và ứng dụng để bào chế các dạng thuốc đem lại nhiều ưu thế trong điều trị. Từ khái niệm ban đầu về siêu vi tiểu phân kích thước nhỏ hơn 1 µm mang dược chất, và những nghiên cứu đầu tiên về nano polyme được thực hiện vào những năm 80 của thế kỷ XX, các nhà khoa học luôn không ngừng sáng tạo và tìm tòi để tạo ra ứng dụng nhiều hơn của nano polyme [11], [20]. Một trong những ứng dụng đầy triển vọng đó là hệ cung cấp thuốc cho mắt. Hệ nano polyme dùng cho mắt vừa có ưu điểm tăng khả năng bám dính thuốc vào trước giác mạc, vừa tăng khả năng thấm, vì vậy cải thiện sinh khả dụng và hiệu quả điều trị các bệnh ở mắt. Diclofenac là một hoạt chất chống viêm không steroid (NSAID), có các ưu điểm trong điều trị ở mắt như giảm đau trong chấn thương do tai nạn, điều trị viêm mắt sau phẫu thuật, ngừa co đồng tử khi mổ…[10]. Tuy nhiên, trên thị trường hiện nay chỉ có dạng dung dịch nhỏ mắt Natri diclofenac 1 mg/ml. Vì vậy, với mong muốn cải thiện các dung dịch thuốc thường có thời gian lưu trước giác mạc ngắn nên sinh khả dụng thấp, chúng tôi tiến hành đề tài “Nghiên cứu bào chế hệ nano polyme chứa diclofenac” với ba mục tiêu: - Nghiên cứu, xây dựng công thức hệ NP chứa diclofenac. - Đánh giá một số đặc tính của hệ NP diclofenac. - Bước đầu đánh giá khả năng thấm của dược chất qua giác mạc mắt thỏ. [...]... lực điều trị, mức độ độc tính, mức độ kích ứng nghiên cứu trên mắt động vật [14], [22], [26] 1.5 Các nghiên cứu về nano polyme chứa diclofenac Trong nghiên cứu bào chế hệ tiểu phân nano polymer kiểm soát giải phóng đối với dược chất tan trong nước , Mahesh D.chavanpatil và cộng sự sử dụng chất mang alginat, chất diện hoạt Aerosol OTTM Hệ nano được bào chế theo kỹ thuật tạo nhũ tương kép nước/dầu/nước... khỏi hệ nano polyme tuân theo động học Higuchi, điều này chứng tỏ khả năng kiểm soát giải phóng hệ nano polyme so với dung dịch NaD [9] Mohamad Barzegar – Jalali và cộng sự (năm 2011) tiến hành nghiên cứu so sánh đặc tính lý hóa và khả năng giải phóng dược chất của hệ tiểu phân nano Eudragit RS100 với hệ phân tán rắn chứa natri diclofenac Trong quá trình bào chế hệ nano polyme Eudragit RS100 chứa diclofenac, ... Một số cơ chế giải phóng thuốc từ hệ nano polyme chứa dược chất: Có nhiều cơ chế giải phóng thuốc từ hệ nano polyme như: khuếch tán dược chất từ hệ ra môi trường; xảy ra phản ứng hóa học như phân hủy polyme hoặc phân tách dược chất khỏi polyme (có thể do enzym hoặc nước); hoặc polyme trương nở, thay đổi khả năng thẩm thấu, làm dược chất khuếch tán khỏi hệ [15] 1.3.3 Phương pháp bào chế nano polyme Có... và cộng sự (năm 2009) nghiên cứu bào chế hỗn dịch nano copolyme poly (lactid-co-glycolid) và poly (lactid-co-glycolid-leucin) chứa natri diclofenac theo kỹ thuật nhũ hóa kết hợp bốc hơi dung môi Kích thước tiểu phân thu được từ 100 - 250 nm; hiệu quả nạp thuốc 95 % Đánh giá khả năng kích ứng mắt của hệ nano, và so sánh với mẫu trắng chỉ chứa polyme, cho thấy các tiểu 13 phân nano polyme này không gây... thuật tới kích thước tiểu phân của hệ nano diclofenac Dựa theo phương pháp bào chế nano polyme chứa diclofenac, với chất mang là Eudragit RS100 của Khosro Adibkia và cộng sự [7], của Mohamad Barzegar – jaladi [13], tiến hành các thí nghiệm lựa chọn kỹ thuật bào chế ban đầu theo công thức trong bảng 3.1, phương pháp trình bày ở mục 2.3.2 Bảng 3.1: Công thức bào chế hệ NP diclofenac Thành phần NaD Eud RS100... thước tiểu phân và thế Zeta Zetasizer Nano ZS90 – Malvern (Anh) - Cân phân tích, cân kỹ thuật, máy khuấy từ, cối mã não và các dụng cụ thủy tinh khác 2.1 Nội dung nghiên cứu - 2.2 Nghiên cứu xây dựng công thức và quy trình bào chế hệ nano diclofenac Đánh giá một số đặc tính của hệ Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp khảo sát khả năng hòa tan của dược chất và polyme trong pha phân tán - Chuẩn bị... này dao động khá rộng, và PDI kém ổn định hơn Hỗn dịch nano polyme poly (lactide-co-glycolide) và poly (lactide-coglycolide-leucine) chứa diclofenac được Agnihotri SM và cộng sự nghiên cứu bào chế với mục đích cải thiện sinh khả dụng đối với mắt của diclofenac Tác giả dùng kỹ thuật nhũ hóa và bay hơi dung môi Các kết quả thu được chứng minh hệ nano polyme này có kích thước tiểu phân thích hợp với mắt,... đích tác dụng nên có tiềm năng ứng dụng trong bào chế các thuốc điều trị ung thư và kháng sinh hướng đích - Hệ nano polyme có thể dễ dàng tích hợp với những dạng vận chuyển thuốc khác, như công nghệ mô [29] 1.3.2 Ứng dụng của hệ tiểu phân nano polyme trong dược phẩm Trong dược phẩm, các hệ tiểu phân nano polyme chứa dược chất được đưa vào nhiều dạng bào chế rắn khác nhau như cốm, viên nén, pellet, hoặc... thập kỷ qua, nano polyme được xem như một hệ giải phóng thuốc có kiểm soát Đặc điểm này giúp tăng hiệu quả điều trị và điều chỉnh tốt chế độ liều của thuốc trong điều trị Một số polyme được nghiên cứu ứng dụng trong các công thức kiểm soát giải phóng, dùng theo đường uống như poly (acid lactic) PLA, Eudragit [38]  Ứng dụng hệ tiểu phân nano polyme cho nhãn khoa Gần đây, hệ polyme được nghiên cứu rất nhiều... tế bào: sử dụng các chất làm tăng tính thấm của giác mạc với dược chất như chất tạo phức, chất diện hoạt…  Giảm khả năng kích ứng chảy nước mắt: sử dụng các hệ có kích thước tiểu phân nhỏ (hệ micro, hệ nano ), đảm bảo pH và đẳng trương, sử dụng các thành phần tương hợp sinh học [2], [30], [37] 1.3 Tổng quan về nano polyme 1.3.1 Khái niệm nano polyme  Khái niệm: Nano polyme là các tiểu phân polyme chứa . NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ NANO POLYME CHỨA DICLOFENAC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2013 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ BẮC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ NANO. nano polyme 6 1.3.1. Khái niệm nano polyme 6 1.3.2. Ứng dụng của hệ tiểu phân nano polyme trong dược phẩm. 7 1.3.3. Phương pháp bào chế nano polyme 8 1.4. Một số phương pháp đánh giá hệ nano. tài Nghiên cứu bào chế hệ nano polyme chứa diclofenac với ba mục tiêu: - Nghiên cứu, xây dựng công thức hệ NP chứa diclofenac. - Đánh giá một số đặc tính của hệ NP diclofenac. - Bước đầu đánh