1. Trang chủ
  2. Luận Văn - Báo Cáo

Nghiên cứu nâng cấp tiêu chuẩn vị thuốc ba kích và khảo sát thành phần hóa học của dịch chiết ethanol ba kích

47 477 1
Nghiên cứu nâng cấp tiêu chuẩn vị thuốc ba kích và khảo sát thành phần hóa học của dịch chiết ethanol ba kích

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

1 Đ T VẤN ĐỀ Tiêu chu ẩn hóa và kiểm tra chặt ch ẽ nguồn nguyên liệu ban đầu là yếu tố sống còn đ ể đảm bảo hiệu lực và tác dụng của thuốc th ảo mộ c. Vì vậy công tác kiểm nghiệm dược liệu để xác định rõ nguồn g ốc, tránh nhầm lẫn, giả mạo là hết sức quan trọng. Đây cũng là một hư ớng phát triển của ngành Dư ợc và là một trong những giải pháp nh ằm hiện đ ại hóa n ền ydư ợc học cổ truyền Việt Nam. Ba kích là một cây thuốc quý có giá trị sử dụng trong và ngoài nước. Trên thế giới đã nghiên cứu v ề một số hợp chất trong rễ Ba kích có ứng dụng trong điều trị như Monotropein có tác dụng chống viêm 26, Oligosaccharid có tác dụng chống trầm cảm, chống tổn thương tế bào thần kinh do corticosteron 19, hay nhóm Anthraquinon và Polysaccharid có tác dụng trong ngăn ngừa và điều trị bệnh liên quan đến sự tiêu xương 31 . Hiện nay, chuyên luận Ba kích trong Dược điển Việt Nam IV và Dược điển Trung Quốc chưa c chỉ tiêu thành ph ần hóa học. Vì những lý do trên, đề tài “Nghiên cứu nâng cấp tiêu chuẩn vị thuốc Ba kích và khảo sát thành phần hóa học của dịch chiết ethanol a kích” được tiến hành v ới m ục tiêu: 1. Khảo sát thành phần monotropein trong dịch chiết ethanol Ba ch bằng phương pháp s c lỏng hiệu năng cao HPLC. 2. Nâng cao tiêu chuẩn h a chuyên luận Ba ch trong Dược điển Việt Nam IV.

B Y T I HC HÀ NI TRNH TH NGA NGHIÊN CU NÂNG CP TIÊU CHUN V THUC BA KÍCH VÀ KHO SÁT THÀNH PHN HÓA HC CA DCH CHIT ETHANOL BA KÍCH KHÓA LUN TT NGHI HÀ NI - 2013 B Y T I HC HÀ NI TRNH TH NGA NGHIÊN CU NÂNG CP TIÊU CHUN V THUC BA KÍCH VÀ KHO SÁT THÀNH PHN HÓA HC CA DCH CHIT ETHANOL BA KÍCH KHÓA LUN TT NGHI ng dn: TS. Trn Vit Hùng DS. Ph c hin: Viện Kiểm nghiệm thuốc TW HÀ NI  2013 LI C Tôi xin bày t lòng bic ti: TS. Trần Việt Hùng  Phó ving, Vin kim nghim thu ng d và to mu kin thun li trong sut quá trình hc tp và nghiên c hoàn thành khóa lun. DS. Phạm Thái Hà Văn, TS. Bùi Hồng Cường, Các thy cô giáo và cán b k thut viên B môn c hc c truyn - i hc Hà Ni; TS. Nguyễn Quốc Huy  B môn thc v i h c Hà Ni và DS. Trịnh Thị Hồng Thảo cùng các anh ch khoa V   ng - Vin kim nghim thu   n tình ch b   và tu kin tt nht trong quá trình thc hi tài khóa lun.  i li c     tôi trong sut quá trình hc tp ca mình. Hà N Sinh viên Trnh Th Nga  Trang Danh m    1 NG QUAN 2 1.1. Ba kích 2 1.1.1. Tên khoa hc 2 1.1.2. Mô t cây 2 1.1.3. Cây d nhm ln. 3 1.1.4. Phân b, thu hái và ch bin 3 1.1.5. Thành phn hóa hc 3 1.1.6. Tác dc lý 4 1.1.7. Công dng và liu dùng 6 1.1.8. Bài thuc có Ba kích 7 1.1.9. Mt s n bit Ba kích 8 1.2. Sc kí lng hi 11 1.2.1. Khái nim 11 1.2.2. Detector dùng trong HPLC 12 1.2.3. Các thông s a HPLC 12 1.3. Monotropein 14  16  16 2.1.1. Nguyên liu 16 2.1.2. Thit b, dng c và hóa cht 16  17 t xut 17 nh hiu sut chit 17 nh tính mt s nhóm cht hng phn ng hóa hc 18 2.2.4. Sc kí lng hi 19 2.2.5. Thnh  20  lý s liu 21  22 3.1. Kt qu thc nghim và nhn xét 22 3.1.1. Bào ch nh hiu sut 22 nh tính mt s nhóm cht hng phn ng hóa hc 23 3.1.3. Xây dng Monotropein bng HPLC 24 3.1.3.1. Quy trình chy sc kí 24 3.1.3.2. Th 25 3.2. Bàn lu 3.2.1. V ng nghiên cu 30 3.2.2. V u 31 t xut 31 HPLC 31 3.2.2.3. Khu kin sc kí 32 3.2.2.4. Th.33  34 Kt lun 34 Kin ngh 35  DANH MC CÁC KÍ HIU, CÁC CH VIT TT HPLC DAD MeOH EtOAc SKLM  BK   TT VKNTTW KL HA dd RSD Sc ký lng hiu  (High Performance Liquid Chromatography) Detector mng diot (Diod array detector) Methanol Ethylacetat Sc kí lp mng Phn ng Ba kích n Vit Nam IV n Trung Quc Thuc th Vin kim nghim thu Khng Hàm m Dung dch  lch chui (relative standard deviation) DANH MC BNG Bng Tên bng Trang Bng 1.1  10 Bng 3.1  23 Bng 3.2  24 Bng 3.3  25 Bng 3.4  27 Bng 3.5  28 Bng 3.6  29 Bng 3.7  30 DANH MC HÌNH V TH Hình Tên hình Trang Hình 1.1 Cây Ba kích (Morinda officinalis How) 2 Hình 1.2  9 Hình 1.3  9 Hình 1.4  9 Hình 1.5  11 Hình 1.6  14 Hình 2.1 Máy HPLC Agilient Technologies 1200 16 Hình 2.2  22 Hình 3.1  26 Hình 3.2   28 1 T V Tiêu chun hóa và kim tra cht ch ngun nguyên liu là yu t s m bo hiu lc và tác dng ca thuc tho mc. Vì vy công tác kim nghic li nh rõ ngun gc, tránh nhm ln, gi mo là ht sc quan trng.     ng phát trin c  c và là mt trong nhng gii pháp nhm hii hóa nn y-c hc c truyn Vit Nam. Ba kích là mt cây thuc quý có giá tr s dc. Trên th giiên cu v mt s hp cht trong r Ba kích có ng du tr Monotropein có tác dng chng viêm [26], Oligosaccharid có tác dng chng trm cm, chng t   bào thn kinh do corticosteron [19], hay nhóm Anthraquinon và Polysaccharid có tác du tr bnh liên n s ]. Hin nay, chuyên lun Ba kích trong n Vit n Trung Quc  tiêu thành phn hóa hc. Vì nh tài u nâng cp tiêu chun v thuc Ba kích và kho sát thành phn hóa hc ca dch chi c tin hành vi mc tiêu: 1.      trong       - HPLC. 2.  [...]... chất hữu cơ bằng phản ứng hóa học Mẫu nghiên cứu: bột Ba ch, cao đặc Ba kích * Định tính Iridoid Lấy 5g bột Ba kích cao cho vào bình cầu 100ml Thêm 10ml EtOH đun hồi lưu 10 phút Lọc bỏ bã Dịch lọc, thêm 1 lượng tương đương với nước Thêm 5ml dung dịch chì axetat 2% Lọc Dịch lọc acid hóa bằng H2SO4 để kết tủa PbSO4 Lọc, dịch lọc cô đặc, hòa vào ít cồn làm dung dịch thử 1 ml dung dịch thử + 1-2 giọt TT Trim... hiệu - Chuẩn bị mẫu chuẩn: Sử dụng dung dịch chuẩn của phần thử độ lặp lại - Chuẩn bị mẫu thử: Sử dụng dung dịch thử của phần thử độ lặp lại - Chuẩn bị mẫu trắng: Dung môi pha mẫu (MeOH) Chạy s c ý đồ của mẫu tr ng, mẫu chuẩn và mẫu thử theo điều kiện như trên, ghi lại diện tích pic và thời gian lưu * Kết quả: được trình bày ở hình 3.1 26 (A) (B) (C) Hình 3.1 Sắc k ý đồ của Monotropein (A): Mẫu chuẩn; ... bằng cao đặc Ba kích 2.2.4 Sắc ký lỏng hiệu năng cao (HP C) a Chuẩn bị mẫu + Mẫu chuẩn: pha dung dịch Monotropein trong methanol có nồng độ khoảng 250 µg/ml + Mẫu thử : Hòa tan cao Ba kích trong MeOH Dung dịch được lọc qua màng lọc 0,45µm b Khảo sát và tìm điều kiện sắc kí * Cột sắc kí Vì mẫu phân t ch là dược liệu có nhiều thành phần nên cần cần tách chất cần phân tích ra khỏi các thành phần khác trong... chống viêm của monotropein chủ yếu liên quan đến sự ức chế các biểu hiện của chất trung gian gây viêm thông qua hử hoạt t nh NF-κB và hỗ trợ vai trò chữa bệnh của n trong viêm ruột ết [15],[17].[26] 16 Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG V PHƢƠNG PH P NGHI N CỨU 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHI N CỨU 2.1.1 Nguyên liệu Mẫu dược liệu và dịch chiết Ba kích do VKNTTW cung cấp, được kiểm tra và đạt tiêu chuẩn dược liệu đầu vào 2.1.2... của NK-ҡB (nuclear factor kappa B ) và JNK (c-Jun N-terminal inases) đồng thời điều chỉnh tỉ lệ OPG/RANKL (Osteopro-tegerin / receptor activator of NF-ҡB ligand ) của tế bào tạo xương [17], [31] g) Độc tính cấp LD50 xác định trên chuột nh t tr ng bằng đường uống của Ba kích là 193g/kg Chứng tỏ Ba ch c độ độc t nh rất thấp [10] 1.1.7 Công dụng và liều dùng Theo Đông y, Ba ch là vị thuốc c t nh ôn, vị. .. ether.Lấy 1ml dịch chiết ether cho vào ống nghiệm nhỏ, thêm 1ml dung dịch NaOH 10%, l c nhẹ Lớp nước sẽ có màu hồng [8]  Định tính anthranoid toàn phần Lấy 0,5g bột Ba kích cho vào ống nghiệm 10ml Thêm 5ml dung dịch acid sulfuric 1N Đun trực tiếp trên nguồn nhiệt đến sôi Tiếp tục lọc và chiết như đối với dạng tự do Lấy 1ml dịch chiết ether, cho vào ống nghiệm nhỏ Thêm 1ml dung dịch NaOH 10% L c nhẹ Lớp nước... Vị đ ng, hơi ngọt - Từ 301,08g dược liệu thu được 62,83g cao đặc - Hiệu suất bào chế cao đặc đạt 25,56 ± 1,90 3.1.2 Định tính một số nhóm chất bằng phản ứng hóa học Tiến hành phản ứng theo phương pháp đã mô tả ở mục 2.2.2 Kết quả định tính hoá học được t m t t ở bảng 3.2: 24 Bảng 3.2 Định tính các nhóm chất trong vị thuốc và cao đặc Nh m chất STT Mẫu nghiên cứu Phản ứng định tính Bột Ba ch Cao Ba kích. .. (Thuốc thử Trim Hill: 10ml CH3COOH + 1ml dung dịch CuSO4 0,2% và 0,5ml HCl đặc) [9] * Định tính anthranoid (Phản ứng Borntraeger)  Định tính dạng tự do Lấy 0,5g Ba kích cho vào ống nghiệm 10ml Thêm 5ml nước cất Đun trực tiếp với nguồn nhiệt cho đến sôi Lọc dịch chiết còn nóng qua giấy lọc vào trong bình gạn dung tích 50ml Làm nguội dịch lọc Thêm 5ml ether L c nhẹ, gạn lấy lớp ether.Lấy 1ml dịch chiết. .. thống - Chuẩn bị mẫu chuẩn: là mẫu chuẩn trong phần độ lặp lại - Tiêm vào hệ thống s c ký 6 lần dung dịch chuẩn và ghi lại s c ý đồ, xác định các giá trị về thời gian lưu, diện t ch pic Độ lặp lại của hệ thống được biểu thị bằng độ lệch chuẩn tương đối RSD * Kết quả: Độ thích hợp của hệ thống được trình bày trong bảng 3.4 STT 1 Bảng 3.4 Độ thích hợp của hệ thống Thời gian lƣu của Diện tích pic Monotropein... lấy dịch lọc - Định t nh đường khử: Lấy 2ml dịch lọc, thêm 1ml TT Fehling A và Fehling B Đun cách thủy trong vài phút xuất hiện tủa đỏ gạch [8] - Định t nh acid hữu cơ: Lấy 2ml dịch lọc, thêm 1 t bột Na 2CO3 thấy c bọt khí bay lên [8] * Định tính alcaloid Cho 5 g bột Ba kích vào các bình n n 50ml, iềm h a bằng dd NH4OH, đậy n để trong 30 phút Thêm 20ml dd CHCl3, l c đều, ngâm trong 1giờ Lọc lấy dịch chiết . HC HÀ NI TRNH TH NGA NGHIÊN CU NÂNG CP TIÊU CHUN V THUC BA KÍCH VÀ KHO SÁT THÀNH PHN HÓA HC CA DCH CHIT ETHANOL BA KÍCH KHÓA LUN TT NGHI . HC HÀ NI TRNH TH NGA NGHIÊN CU NÂNG CP TIÊU CHUN V THUC BA KÍCH VÀ KHO SÁT THÀNH PHN HÓA HC CA DCH CHIT ETHANOL BA KÍCH KHÓA LUN TT NGHI ng. n Trung Quc  tiêu thành phn hóa hc. Vì nh tài u nâng cp tiêu chun v thuc Ba kích và kho sát thành phn hóa hc ca dch chi

Ngày đăng: 28/07/2015, 18:15

Xem thêm: Nghiên cứu nâng cấp tiêu chuẩn vị thuốc ba kích và khảo sát thành phần hóa học của dịch chiết ethanol ba kích, Nghiên cứu nâng cấp tiêu chuẩn vị thuốc ba kích và khảo sát thành phần hóa học của dịch chiết ethanol ba kích

Từ khóa liên quan

Trích đoạn

Thiết bị, dụng cụ và hóa chất

Tài liệu cùng người dùng

Tài liệu liên quan