Đang tải... (xem toàn văn)
ĐẶT VẤN ĐỀ Việt Nam nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa, nóng và ẩm, thích hợp cho sự phát triển hệ thực vật phong phú và đa dạng, trong đó đặc biệt phải kể đến nhóm tài nguyên cây thuốc. Theo kết quả điều tra của Viện Dược liệu năm 2006, Việt Nam có 3948 loài thực vật bậc cao, bậc thấp và nấm lớn được dùng làm thuốc. Tuy nhiên phần lớn các cây, con được sử dụng theo kinh nghiệm dân gian hoặc theo Y học cổ truyền mà chưa được nghiên cứu kỹ và đầy đủ. Cỏ Seo gà là một trong 280 loài thuộc chi Pteris L. 31, được phân bố rộng rãi ở các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới 14. Trong Y học cổ truyền Trung Quốc, cỏ Seo gà được sử dụng để điều trị các bệnh: eczema, thổ huyết, viêm ruột, lỵ trực khuẩn…20, bên cạnh đó cỏ Seo gà còn được biết đến với tác dụng chống ung thư và kháng khuẩn 21. Ở Việt Nam, cỏ Seo gà được dùng để chữa kiết lỵ mãn tính, lỵ trực khuẩn, viêm ruột, viêm đường tiết niệu, viêm họng, viêm tuyến nước bọt, sưng vú, mụn nhọt, lở ngứa, bệnh ngoài da…14. Nhận thấy, cỏ Seo gà là một cây thuốc dân gian cần được quan tâm, tuy nhiên những nghiên cứu hiện nay về cỏ Seo gà còn ít và chưa thực sự đầy đủ. Vì vậy, chúng tôi đã tiến hành thực hiện đề tài “Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây cỏ Seo gà” với những mục tiêu sau: 1. Nghiên cứu đặc điểm thực vật của cây cỏ Seo gà. 2. Nghiên cứu về thành phần hóa học của cây cỏ Seo gà. Để thực hiện được mục tiêu đã đề ra, đề tài được tiến hành với các nội dung sau: 1. Nghiên cứu đặc điểm thực vật của cây cỏ Seo gà: Mô tả đặc điểm hình thái, đặc điểm vi phẫu lá, thân rễ; đặc điểm bột lá, thân rễ. 2. Giám định tên khoa học mẫu nghiên cứu.
BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THANH HUYỀN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY CỎ SEO GÀ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2013 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THANH HUYỀN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY CỎ SEO GÀ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: 1. PGS.TS. Nguyễn Thái An 2. ThS. Nguyễn Duy Chí Nơi thực hiện: 1. Bộ môn Dược liệu - Đại học Dược Hà Nội 2. Trung tâm KN Dược Quân đội HÀ NỘI – 2013 LỜI CẢM ƠN Trong suốt quá trình làm khóa luận tốt nghiệp, tôi đã nhận được rất nhiều sự giúp đỡ từ thầy cô, gia đình và bạn bè. Những sự giúp đỡ quý báu ấy đã giúp tôi hoàn thành khóa luận này, đồng thời cũng cho tôi hiểu biết thêm nhiều điều về cách tư duy trong nghiên cứu khoa học. Nhân dịp này tôi xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc tới: PGS.TS. Nguyễn Thái An, cô đã tận tình chỉ bảo, tạo mọi điều kiện, trực tiếp hướng dẫn tôi hoàn thành khóa luận. Ths.Nguyễn Duy Chí, TS. Đỗ Thị Xuyến đã giúp tôi trong quá trình thực hiện khóa luận. Tôi cũng xin chân thành cảm ơn các thầy cô, các kỹ thuật viên trong Bộ môn Dược liệu, các phòng ban trong nhà trường đã giúp đỡ tạo điều kiện cho tôi thực hiện khóa luận này. Cuối cùng, tôi xin cảm ơn gia đình, bạn bè đã động viên, khích lệ tôi rất nhiều để tôi có thêm sự nhiệt tình và say mê trong nghiên cứu khoa học. Hà nội, ngày 21 tháng 05 năm 2013 Sinh viên Nguyễn Thanh Huyền MỤC LỤC Danh mục các ký hiệu, chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình ĐẶT VẤN ĐỀ……………………………………………………………… 1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN………………………………………………….3 1.1.VỊ TRÍ PHÂN LOẠI, ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ PHÂN BỐ…… 3 1.1.1.Vị trí phân loại của chi Pteris L…………………………………….3 1.1.2.Đặc điểm chung của họ Cỏ luồng (Pteridaceae)………………… 3 1.1.3.Đặc điểm thực vật chi Pteris L…………………………………… 3 1.1.4.Đặc điểm thực vật một số loài thuộc chi Pteris L………………… 4 1.1.5.Đặc điểm thực vật và phân bố của cây cỏ Seo gà (Pteris multifida Poir.)………………………………………………………………………6 1.2.THÀNH PHẦN HÓA HỌC…………………………………………….7 1.2.1.Thành phần hóa học của chi Pteris L………………………………7 1.2.2.Thành phần hóa học của cây cỏ Seo gà (Pteris multifida Poir.)……8 1.3.TÍNH VỊ VÀ TÁC DỤNG DƯỢC LÝ……………………………… 10 1.4.CÔNG DỤNG………………………………………………………….12 1.5.MỘT SỐ ĐƠN THUỐC…………………………………………… 12 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU……… 13 2.1.NGUYÊN LIỆU NGHIÊN CỨU…………………………………… 13 2.2.PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU ……………………………………13 2.2.1. Các trang thiết bị dùng trong nghiên cứu …………………………13 2.2.2. Hóa chất …………………………………………………………13 2.3.PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU…………………………………… 14 2.3.1. Nghiên cứu về thực vật……………………………………………14 2.3.2. Nghiên cứu về hóa học ……………………………………………14 CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ…………………………….15 3.1.NGHIÊN CỨU VỀ THỰC VẬT …………………………………15 3.1.1.Mô tả hình thái cây và giám định tên khoa học ……………15 3.1.2.Đặc điểm vi phẫu lá ……………………………………………17 3.1.3.Đặc điểm vi phẫu thân rễ . …………………………………………17 3.1.4.Đặc điểm bột lá ……………………………………………………17 3.1.5.Đặc điểm bột thân rễ ………………………………………………17 3.2.NGHIÊN CỨU VỀ HÓA HỌC. . ………………………………………20 3.2.1.Định tính các nhóm chất trong dược liệu bằng phản ứng hóa học 20 3.3.CHIẾT XUẤT …………………………………………………………28 3.3.1.Xác định độ ẩm của dược liệu. ……………………………………28 3.3.2.Chiết xuất. …………………………………………………………28 3.3.3.Định tính cắn toàn phần bằng sắc ký lớp mỏng …………………30 3.3.4.Định tính cắn các phân đoạn ………………………………………32 BÀN LUẬN…………………………………………………………………43 KẾT LUẬN…………………………………………………………… 45 ĐỀ XUẤT………………………………………………………………… 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ viết đầy đủ AST Ánh sáng thường dd Dung dịch dm Dung môi C Chloroform E Ethylacetat H n-hexan MeOH methanol SKLM Sắc kí lớp mỏng TLTK Tài liệu tham khảo TT Thuốc thử UV 254 Ánh sáng tử ngoại bước sóng 254nm UV 365 Ánh sáng tử ngoại bước sóng 365nm XDT Xanh da trời DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Tên bảng Trang Bảng 1.1 Một số hợp chất phân lập từ cây cỏ Seo gà 9 Bảng 1.2 N ồng độ ức chế tối thiểu của một số hợp chất phân lập từ cỏ Seo gà 11 Bảng 3.1 Kết quả định tính các nhóm chất trong cây cỏ Seo gà 27 Bảng 3.2 Hàm lượng cắn các phân đoạn chiết xuât từ cây cỏ Seo gà 28 Bảng 3.3 Kết quả định tính cắn toàn phần bằng SKLM 31 Bảng 3.4 Kết quả định cắn H bằng phản ứng hóa học 32 Bảng 3.5 Kết quả định tính cắn C bằng phản ứng hóa học 33 Bảng 3.6 Kết quả định tính cắn E bằng phản ứng hóa học 33 Bảng 3.7 Kết quả định tính cắn phân đoạn n-hexan bằng SKLM 35 Bảng 3.8 Kết quả định tính cắn phân đoạn chloroform bằng SKLM 37 Bảng 3.9 Kết quả định tính cắn phân đoạn ethylacetat bằng SKLM 39 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Tên hình Trang Hình 3.1 Ảnh cây cỏ Seo gà 16 Hình 3.2 Ảnh thân rễ cây cỏ Seo gà 16 Hình 3.3 Ảnh lá không sinh sản 16 Hình 3.4 Ảnh lá sinh sản mang túi bào tử 16 Hình 3.5 Ảnh cuống lá cỏ Seo gà 16 Hình 3.6 Ảnh vi phẫu lá cỏ Seo gà 18 Hình 3.7 Ảnh vi phẫu thân rễ cỏ Seo gà 18 Hình 3.8 Ảnh một số đặc điểm bột lá cỏ Seo gà 19 Hình 3.9 Ảnh một số đặc điểm bột thân rễ cỏ Seo gà 19 Hình 3.10 Sơ đồ chiết xuất cắn các phân đoạn từ cây cỏ Seo gà 29 Hình 3.11 Sắc kí đồ của cắn toàn phần khai triển với hệ dm số IV 40 Hình 3.12 Sắc ký đồ của cắn phân đoạn n-hexan khai triển với hệ dm số IV 40 Hình 3.13 Sắc ký đồ của cắn phân đoạn chloroform khai triển với hệ dm số VI 41 Hình 3.14 Sắc ký đồ của cắn phân đoạn ethylacetat khai triển với hệ dm số II 41 Hình 3.15 Sắc kí đồ cắn 3 phân đoạn 42 1 ĐẶT VẤN ĐỀ Việt Nam nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa, nóng và ẩm, thích hợp cho sự phát triển hệ thực vật phong phú và đa dạng, trong đó đặc biệt phải kể đến nhóm tài nguyên cây thuốc. Theo kết quả điều tra của Viện Dược liệu năm 2006, Việt Nam có 3948 loài thực vật bậc cao, bậc thấp và nấm lớn được dùng làm thuốc. Tuy nhiên phần lớn các cây, con được sử dụng theo kinh nghiệm dân gian hoặc theo Y học cổ truyền mà chưa được nghiên cứu kỹ và đầy đủ. Cỏ Seo gà là một trong 280 loài thuộc chi Pteris L. [31], được phân bố rộng rãi ở các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới [14]. Trong Y học cổ truyền Trung Quốc, cỏ Seo gà được sử dụng để điều trị các bệnh: eczema, thổ huyết, viêm ruột, lỵ trực khuẩn…[20], bên cạnh đó cỏ Seo gà còn được biết đến với tác dụng chống ung thư và kháng khuẩn [21]. Ở Việt Nam, cỏ Seo gà được dùng để chữa kiết lỵ mãn tính, lỵ trực khuẩn, viêm ruột, viêm đường tiết niệu, viêm họng, viêm tuyến nước bọt, sưng vú, mụn nhọt, lở ngứa, bệnh ngoài da…[14]. Nhận thấy, cỏ Seo gà là một cây thuốc dân gian cần được quan tâm, tuy nhiên những nghiên cứu hiện nay về cỏ Seo gà còn ít và chưa thực sự đầy đủ. Vì vậy, chúng tôi đã tiến hành thực hiện đề tài “Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây cỏ Seo gà” với những mục tiêu sau: 1. Nghiên cứu đặc điểm thực vật của cây cỏ Seo gà. 2. Nghiên cứu về thành phần hóa học của cây cỏ Seo gà. Để thực hiện được mục tiêu đã đề ra, đề tài được tiến hành với các nội dung sau: 1. Nghiên cứu đặc điểm thực vật của cây cỏ Seo gà: Mô tả đặc điểm hình thái, đặc điểm vi phẫu lá, thân rễ; đặc điểm bột lá, thân rễ. 2. Giám định tên khoa học mẫu nghiên cứu. 2 3. Nghiên cứu thành phần hóa học của cây cỏ Seo gà: Định tính các nhóm chất bằng phản ứng hóa học, sắc kí lớp mỏng đối với cắn toàn phần và cắn các phân đoạn của cây cỏ Seo gà. [...]... cứu về thực vật Phân tích hình thái thực vật Mô tả đặc điểm hình thái theo phương pháp ghi trong tài liệu Thực tập thực vật và nhận biết cây thuốc” Nghiên cứu đặc điểm vi học theo tài liệu: Thực tập thực vật và nhận biết cây thuốc [4] Thực tập dược liệu - Phần vi học [2] Quan sát cấu tạo vi phẫu lá, thân rễ và bột lá, bột thân rễ bằng kính hiển vi Chụp ảnh các đặc điểm vi học bằng máy... khoa học cho loài nghiên cứu, mẫu cây được thu hái vào mùa sinh sản; điều này giúp cho việc nhận biết các mẫu cây được chính xác Dựa vào các đặc điểm quan sát, phân tích về đặc điểm hình thái; đối chiếu với các tài liệu tham khảo và được sự giúp đỡ của TS Đỗ Thị Xuyến – Viện Sinh thái và Tài nguyên sinh vật, cây cỏ Seo gà dùng để nghiên cứu đã được giám định tên khoa học là Pteris multifida Poir., họ cỏ. .. ứng hóa học và bằng sắc ký lớp mỏng theo tài liệu: Bài giảng dược liệu, tập I và II [5], [6] Thực tập dược liệu - Phần hóa học [3] Phương pháp nghiên cứu hóa học cây thuốc [11] 15 CHƯƠNG 3 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 3.1 NGHIÊN CỨU VỀ THỰC VẬT 3.1.1 Mô tả hình thái cây và giám định tên khoa học 3.1.1.1 Mô tả hình thái cây Cây thảo, cao từ 40-50cm (hình 3.1) Thân rễ nhỏ, dài từ 4-5 cm, cong queo, cứng,... khoa học của mẫu nghiên cứu Đối chiếu với mô tả trong tài liệu chuyên sâu về thực vật như: Từ điển thực vật thông dụng [9] Từ điển cây thuốc [7] Cây thuốc và động vật làm thuốc [14] So sánh đối chiếu với mẫu tiêu bản tại phòng tiêu bản mẫu khô - Viện Sinh thái và Tài nguyên sinh vật 2.3.2 Nghiên cứu về hóa học Định tính các nhóm chất hữu cơ chính trong dược liệu bằng các phản ứng hóa học và. .. ngày chữa lỵ trực trùng [13] Chè tươi 100g, seo gà khô 24g, nước 150ml, đun sôi giữ sôi trong 30 phút Chia hai hay ba lần uống trong ngày chữa lỵ trực trùng [13] Chữa lỡ loét, bệnh ngoài ra: Toàn thân cây cỏ Seo gà đốt thành than, tán bột, trộn với dầu vừng rồi bôi Có thế dùng cây tươi giã đắp [14] 13 CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN LIỆU NGHIÊN CỨU Mẫu nghiên cứu cây cỏ Seo. .. 7-O-glucopyranoside và luteolin 7-O-gentiobioside [17] Năm 2010, từ Pteris semipinnata L., Shi và cs đã phân lập được một entkaurane diterpenoid glucoside là pteriside và 3 sesquiterpenoids là (2R)pterosin B; (2S, 3S)-pterosin C; pterosin C 3-O-β-D-glucoside [27] 1.2.2 Thành phần hóa học của cây cỏ Seo gà (Pteris multifida Poir.) Từ cây Seo gà, Okuno Masaaki và cs đã phân lập được β-sitosterol và β-sitosterol-β-glucosid... cứu cây cỏ Seo gà bao gồm: Mẫu cây tươi mang bộ phận sinh sản, để giám định tên khoa học Mẫu cây tươi mang lá, thân rễ để nghiên cứu về mặt thực vật Lấy cây tươi, phơi se, sấy trong tủ sấy ở 50° đến khô, làm nhỏ, bảo quản trong túi nilon kín, để chỗ mát làm nguyên liệu nghiên cứu về mặt hóa học Nơi thu hái: Ba Vì - Hà Nội Thời điểm thu hái mẫu: 10/ 2012 2.2 PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU 2.2.1 Các... nhiều u sần nhỏ [14] Cỏ Seo gà mọc phổ biến ở miền Bắc và miền Trung nước ta, thường gặp ở trên những vách đá, vách đất, xung quanh bờ giếng, ven đường đi, những nơi thoáng ẩm và mát Còn thấy mọc ở cả Trung Quốc, Nhật Bản [13], [14] 1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC 1.2.1 Thành phần hóa học của chi Pteris L Theo một số tài liệu cho thấy thành phần hóa học của chi Pteris L bao gồm: flavonoid glycosides [18], [25],... LOẠI, ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ PHÂN BỐ 1.1.1 Vị trí phân loại của chi Pteris L Theo [1], [8], [9] cây cỏ Seo gà thuộc chi Pteris L., họ Cỏ luồng (Pteridaceae), bộ Cỏ luồng (Pteridales), phân lớp Dương xỉ (Polypodiidae), lớp Dương xỉ (Polypodiopsida), ngành Dương xỉ (Polypodiophyta) Ngành Dương xỉ (Polypodiophyta) Lớp Dương xỉ (Polypodiopsida) Phân lớp Dương xỉ (Polypodiidae) Bộ Cỏ luồng (Pteridales) Họ Cỏ. .. TÍNH VỊ VÀ TÁC DỤNG DƯỢC LÝ Toàn cây cỏ Seo gà có vị ngọt nhạt, hơi đắng, tính lạnh, có tác dụng thanh nhiệt, lương huyết, lợi thấp, chỉ lỵ [14] Rễ có vị ngọt, đắng, hơi tê, mùi thơm hắc [14] Năm 2007, T.C.Wang và cs đã tiến hành nghiên cứu độc tính của dịch chiết nước của cây cỏ Seo gà trên chuột bằng cách đưa dịch chiết theo đường uống với liều 100, 500 và 1000 mg/ kg trọng lượng trong vòng 28 ngày Kết . Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây cỏ Seo gà với những mục tiêu sau: 1. Nghiên cứu đặc điểm thực vật của cây cỏ Seo gà. 2. Nghiên cứu về thành phần hóa học của cây cỏ Seo. NỘI - 2013 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THANH HUYỀN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY CỎ SEO GÀ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người. 1.1.4 .Đặc điểm thực vật một số loài thuộc chi Pteris L………………… 4 1.1.5 .Đặc điểm thực vật và phân bố của cây cỏ Seo gà (Pteris multifida Poir.)………………………………………………………………………6 1.2.THÀNH PHẦN HÓA HỌC…………………………………………….7