B GIÁO D C VÀ ÀO T O B TRƯ NG I H C DƯ C HÀ N I YT VŨ TH THU TRANG XÂY D NG PHƯƠNG PHÁP NH TÍNH NH LƯ NG M T S THÀNH PH N TRONG CAO HO T L C VƯƠNG LU N VĂN TH C SĨ DƯ C H C HÀ N I 2013 B GIÁO D C VÀ ÀO T O B TRƯ NG I H C DƯ C HÀ N I YT VŨ TH THU TRANG XÂY D NG PHƯƠNG PHÁP NH TÍNH NH LƯ NG M T S THÀNH PH N TRONG CAO HO T L C VƯƠNG LU N VĂN TH C SĨ DƯ C H C CHUYÊN NGÀNH KI M NGHI M MÃ S : 60720410 Nơi th c hi n C CH T tài: B môn Dư c h c c truy n Trung tâm ki m nghi m Hà N i Th i gian th c hi n: t 11/2012 n 09/2013 HÀ N I 2013 L I C M ƠN L i u tiên em chân thành g i l i c m ơn H ng Cư ng ã tr c ti p giúp n TS Tr n Vi t Hùng, TS Bùi em hoàn thành lu n văn Em c m ơn Ths Nguy n Th Thanh Phương, Ths Nguy n Thành t, cán b t i khoa Ki m nghi m Hóa lý - Trung tâm ki m nghi m Hà N i, th y cô b môn Dư c h c c truy n - Trư ng gian th c hi n i h c Dư c Hà N i ã giúp em th i tài Em c m ơn s quan tâm c a Ban giám hi u nhà trư ng, phòng Sau h c ã t o cho em nh ng i u ki n t t nh t i hồn thành q trình h c t p t i trư ng Cu i cùng, em c m ơn b n bè, gia ình, ng nghi p ã ln giúp viên, khích l em h c t p Em chân thành c m ơn ! Hà N i, tháng 10/2013 H c viên Vũ Th Thu Trang , ng TV N 1 T NG QUAN 1.1 Phương thu c Ho t l c vương 1.1.1 Qu chi 1.1.1.1 Thành ph n hóa h c 1.1.1.2 Tác d ng sinh h c .4 1.1.1.3 Tác d ng công d ng theo YHCT 1.1.2 Hương ph 1.1.2.1 Thành ph n hóa h c 1.1.2.2 Tác d ng sinh h c .5 1.1.2.3 Tác d ng công d ng theo YHCT 1.1.3 B ch thư c 1.1.3.1 Thành ph n hóa h c 1.1.3.2 Tác d ng sinh h c .7 1.1.3.3 Tác d ng công d ng theo YHCT 1.1.4 Xuyên Khung 1.1.4.1 Thành ph n hóa h c 1.1.4.2 Tác d ng sinh h c .7 1.1.4.3 Tác d ng công d ng theo YHCT 1.1.5 Sinh khương 1.1.5.1 Thành ph n hóa h c 1.1.5.2 Tác d ng sinh h c .8 1.1.5.3 Tác d ng công d ng theo YHCT 1.2 T ng quan v k thu t SKLM phân tích ki m nghi m .9 1.2.1 nh nghĩa .9 1.2.2 Các i lư ng c trưng 1.3 T ng quan v k thu t HPLC phân tích ki m nghi m .10 1.3.1 nh nghĩa 10 1.3.2 Các i lư ng c trưng .11 1.3.3 Cách ánh giá pic 14 1.3.3.1 ánh giá di n tích 14 1.3.3.2 ánh giá chi u cao 14 1.3.4 Cách tính k t qu 14 1.3.4.1 Phương pháp quy v 100 % di n tích 14 1.3.4.2 Phương pháp dùng chu n ngo i .15 1.3.4.3 Phương pháp dùng chu n n i 16 1.3.4.4 Phương pháp thêm chu n 17 1.4 K thu t chi t tách nguyên lý ng d ng phân tích ki m nghi m 17 1.4.1 Sai s x lý m u 18 1.4.2 M c tiêu c a x lý m u 18 1.4.3 K thu t x lý m u 18 1.4.4 Chi t l ng - l ng 19 1.4.4.1 Nguyên t c 19 1.4.4.2 Cơ ch chi t xu t 20 1.4.4.3 K thu t chi t xu t 20 1.4.4.4 ng d ng 20 1.5 Xây d ng th m nh quy trình phân tích .20 1.6 Cao thu c 23 1.6.1 nh nghĩa cao thu c 23 1.6.2 c i m c a cao thu c .23 1.6.3 Phân lo i cao thu c 23 1.6.3.1 Cao l ng 23 1.6.3.2 Cao c 24 1.6.3.3 Cao khô 24 1.6.4 Yêu c u ch t lư ng cao thu c 24 2.1 I TƯ NG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 25 i tư ng nghiên c u 25 2.2 Phương ti n nghiên c u 26 2.2.1 Thi t b 26 2.2.2 Hóa ch t, thu c th , ch t chu n 26 2.3 Phương pháp nghiên c u .27 2.3.1 nh tính m t s thành ph n hóa h c c a cao Ho t l c vương dư c li u i chi u 27 2.3.2 Xây d ng phương pháp nh tính, bán nh lư ng m t s v dư c li u cao Ho t l c vương b ng phương pháp SKLM 27 2.3.3 Xây d ng quy trình nh lư ng paeoniflorin cao Ho t l c vương b ng phương pháp HPLC .27 2.3.4 “D th o” tiêu chu n cao Ho t l c vương 28 2.4 Phương pháp x lý s li u 28 2.5 ánh giá k t qu 28 K T QU NGHIÊN C U 29 3.1 ánh giá m t s ch tiêu ch t lư ng c a m u cao Ho t l c vương 29 3.2 nh tính nhóm ch t cao dư c li u b ng phương pháp hóa h c 30 3.3 nh tính v dư c li u Qu chi, Hương ph , Xuyên khung, B ch thư c b ng phương pháp SKLM 32 3.3.1 nh tính Qu chi 32 3.3.2 nh tính B ch thư c 35 3.3.3 nh tính Hương ph , Xuyên khung 38 3.3.4 nh tính B ch thư c, Hương ph , Qu chi 42 3.4 nh lư ng paeoniflorin cao Ho t l c vương b ng phương pháp HPLC 45 3.4.1 Xác nh hàm lư ng paeoniflorin dư c li u B ch thư c .45 3.4.2 Kh o sát l a ch n i u ki n s c ký .49 3.4.3 Kh o sát l a ch n phương pháp x lý m u phân tích 50 3.4.4 L a ch n quy trình phân tích .51 3.4.5 Th m nh quy trình phân tích .51 3.4.5.1 Tính c hi u c a phương pháp 51 3.4.5.2 Tính thích h p c a h th ng .54 3.4.5.3 n tính kho ng xác nh 55 3.4.5.4 úng c a phương pháp .56 3.4.5.5 xác c a phương pháp 58 3.4.5.6 Gi i h n phát hi n (LOD) 58 3.4.5.7 Gi i h n 3.4.6 Xác nh lư ng (LOQ) .59 nh hàm lư ng paeoniflorin m t s m u cao Ho t l c vương .59 3.5 “D th o” tiêu chu n ch t lư ng cao c Ho t l c vương 61 3.5.1 D th o tiêu chu n ch t lư ng cao chi t ethanol 60 % 61 3.5.2 D th o tiêu chu n ch t lư ng cao chi t nư c 61 BÀN LU N 62 4.1 i tư ng nghiên c u 62 4.2 Phương pháp nghiên c u .63 4.3 K t qu nghiên c u 65 K T LU N VÀ KI N NGH .67 DANH M C CÁC KÍ HI U, CÁC CH CÁI VI T T T D VN IV : Dư c i n Vi t Nam IV YHCT : Y h c c truy n KLPT : Kh i lư ng phân t SKLM : S c ký l p m ng HPLC : S c ký l ng hi u cao MNC : M u nghiên c u RSD : SPE : Solid-phase extraction Rf* : : Rf x 100 TT : Thu c th CN : Cao chi t nư c Et60% : Cao chi t ethanol 60 % QC : Qu chi HP : Hương ph BT : B ch thư c XK : Xuyên khung DHCT : Dư c h c c truy n TTKN HN : Trung tâm ki m nghi m Hà N i l ch chu n tương i C NG HÒA XÃ H I CH NGHĨA VI T NAM c l p - T - H nh phúc D TH O TIÊU CHU N CƠ S Cao TRƯ NG H DƯ C HN B môn DHCT Quy t 1.1 S TC: c HO T L C VƯƠNG nh ban hành s : Có hi u l c t : ngày tháng năm YÊU C U K THU T Công th c bào ch 1.1.1 Dư c li u Qu chi Hai trăm gam 200 g Hương ph M t trăm năm mươi gam 150 g B ch thư c Năm mươi gam 50 g Xuyên khung Năm mươi gam 50 g Sinh khương Năm mươi gam 50 g Hai trăm gam 200 g Dư c li u khác (bán h ) 1.1.2 Dung môi chi t xu t Nư c tinh t 1.2 Chi t l n, cô d ch chi t n th ch t cao phù h p Nguyên li u, ph li u Qu chi Ramulus Cinnamomi t tiêu chu n D VN IV Hương ph Rhizoma Cyperi t tiêu chu n D VN IV B ch thư c Radix Paeoniae lactiflorae t tiêu chu n D VN IV Xuyên khung Rhizoma wallichii t tiêu chu n D VN IV Ligustici Sinh khương Dư c li u khác (Bán h ) Nư c tinh t Rhizoma Zingiberis t tiêu chu n s Rhizoma Pinelliae t tiêu chu n D VN IV Aqua purificata t tiêu chu n D VN IV Yêu c u ch t lư ng 1.3 1.3.1 Tính ch t: Th ch t 1.3.2 1.3.3 1.3.4 c quánh, ng nh t, màu vàng nâu, thơm mùi dư c li u m: Không 20 % tan: g cao c ph i tan hoàn toàn 20 ml nư c nh tính: Ch ph m th hi n phép th nh tính c a Qu , Hương ph , B ch thư c 1.3.5 Gi i h n nhi m khu n: t m c - D VN IV 1.3.6 Kim lo i n ng: Không 20 ppm PHƯƠNG PHÁP TH Tính ch t: B ng c m quan ch ph m ph i 2.1 t yêu c u ã nêu m: Th theo Dư c i n Vi t Nam IV, ph l c 11.3 - Phương pháp c t 2.2 v i dung môi tan: B ng c m quan, g cao 2.3 c ph i tan 20 ml nư c 2.4 nh tính 2.4.1 nh tính Qu : Phương pháp s c ký l p m ng a D ng c , thu c th : - B n m ng silica gel GF254 - n- Hexan, ethyl acetat, cloroform, ether ethylic (PA) - Dung d ch 2,4-dinitrophenyl hydrazin (TT) b Ti n hành: - B n m ng: Silica gel GF254 ã ho t hóa 100 ± oC 60 phút - Dung môi khai tri n: n-Hexan : cloroform : ethyl acetat (4 : : 1) - Dung d ch i chi u: L y kho ng g dư c li u Qu chi c t nh , cho vào bình nón 100 ml, thêm 30 ml nư c c t, un sôi cách th y 15 phút, ngu i, l c thu d ch l c Chuy n d ch l c vào bình g n 100 ml, chi t v i ether ethylic l n, m i l n 15 ml, t p trung d ch chi t ether ethylic, b c d ch chi t cách th y n c n Hòa tan c n 2ml ether ethylic c dung d ch ch m s c kí - Dung d ch th : L y g cao cho vào bình nón 100 ml, thêm 30 ml nư c c t, un sôi cách th y 15 phút, ngu i, l c thu d ch l c Chuy n d ch l c vào bình g n 100 ml, chi t v i ether ethylic l n, m i l n 15 ml, t p trung d ch chi t ether ethylic, b c d ch chi t cách th y n c n Hòa tan c n 2ml ether ethylic c dung d ch ch m s c kí - Cách ti n hành: Ch m riêng bi t lên b n m ng µl dung d ch i chi u µl dung d ch th Ti n hành s c ký theo Dư c i n Vi t Nam IV - Ph l c 5.4 Sau tri n khai s c ký, l y b n m ng khơ nhi t phịng Soi dư i èn t ngo i bư c sóng 254 nm sau ó phun dung d ch thu c th 2,4dinitrophenyl hydrazin (TT) - K t qu : S c ký c a dung d ch th ph i có v t có màu s c có giá tr Rf tương ương v i v t s c ký 2.4.2 c a dung d ch i chi u nh tính Hương ph : Phương pháp s c ký l p m ng c D ng c , thu c th : - B n m ng silica gel GF254 - Cloroform, toluen, aceton, acid formic, amoniac, ethanol (PA) d Ti n hành: - B n m ng: Silica gel GF254 ã ho t hóa 100 ± oC 60 phút - Dung môi khai tri n: Cloroform : Toluen : Aceton : acid formic (7 : : : 1,5) - Dung d ch i chi u: L y kho ng g dư c li u Hương ph tán nh cho vào bình nón 100 ml, thêm 50 ml nư c, un sôi 60 phút (b sung nư c n u c n thi t), ngu i, l c thu l y d ch l c Chuy n d ch l c vào bình g n 150 ml, ki m hóa b ng dung d ch ammoniac c n ph n ng ki m (pH = - 10), chi t v i chloroform (3 l n, m i l n dùng 30 ml), g n l y l p chloroform, b c cách th y n c n Hòa tan c n ml ethanol c dung d ch ch m s c kí - Dung d ch th : L y g cao cho vào bình nón 100 ml, thêm 20 ml nư c c t, un cách th y, ngu i, l c thu l y d ch l c Chuy n d ch l c vào bình g n 150 ml, ki m hóa b ng dung d ch amoniac c n ph n ng ki m (pH = - 10), chi t v i chloroform (3 l n, m i l n dùng 30 ml), g n l y l p chloroform, b c cách th y n c n Hòa tan c n ml ethanol c dung d ch ch m s c kí - Cách ti n hành: Ch m riêng bi t lên b n m ng µl dung d ch i chi u µl dung d ch th Ti n hành s c ký theo Dư c i n Vi t Nam IV - Ph l c 5.4 Sau tri n khai s c ký, l y b n m ng khô nhi t dư i èn t ngo i bư c sóng 254 nm 366 nm sau ó phịng Soi t b n m ng bình bão hịa amoniac (TT) - K t qu : S c ký c a dung d ch th ph i có v t có màu s c có giá tr Rf tương ương v i v t s c ký 2.4.3 c a dung d ch i chi u nh tính B ch thư c: Phương pháp s c ký l p m ng e D ng c , thu c th : - B n m ng silica gel GF254 - Toluen, ethyl acetat, acid formic, ethanol, n-butanol (PA) - Dung d ch vanilin acid sulfuric 10 % (TT) f Ti n hành: - B n m ng: Silica gel GF254 ã ho t hóa 100 ± oC 60 phút - Dung môi khai tri n: Toluen : ethyl acetat : acid formic (5 : : 1) - Dung d ch i chi u: L y kho ng g dư c li u B ch thư c c t nh cho vào bình nón 100 ml, thêm 60 ml ethanol, l c siêu âm 20 phút, l c Cô d ch l c cách th y n c n, hòa tan c n 20 ml nư c, chi t b ng n- butanol ã bão hòa nư c, l n, m i l n dùng 20 ml G p d ch chi t butanol, b c d ch chi t cách th y n c n Hòa c n ml ethanol c dung d ch ch m s c kí - Dung d ch th : L y g cao cho vào bình nón 100 ml, thêm 60 ml ethanol, l c siêu âm 20 phút, l c Cô d ch l c cách th y n c n, hòa tan c n 20 ml nư c, chi t b ng n-butanol ã bão hòa nư c, l n, m i l n dùng 20 ml G p d ch chi t butanol, b c d ch chi t cách th y n c n Hòa c n ml ethanol c dung d ch ch m s c kí - Cách ti n hành: Ch m riêng bi t lên b n m ng µl dung d ch i chi u µl dung d ch th Ti n hành s c ký theo Dư c i n Vi t Nam IV - Ph l c 5.4 Sau tri n khai s c ký, l y b n m ng khơ nhi t phịng, phun dung d ch vanilin acid sulfuric 10 % (TT) - K t qu : S c ký c a dung d ch th ph i có v t có màu s c có giá tr Rf tương ương v i v t s c ký 2.5 c a dung d ch i chi u Gi i h n nhi m khu n: Th theo Dư c i n Vi t Nam IV, ph l c 13.6 Th gi i h n nhi m khu n 2.6 Kim lo i n ng: Th theo Dư c i n Vi t Nam IV, ph l c 9.4.8 - Xác gi i h n t p ch t, phương pháp nh C NG HÒA XÃ H I CH NGHĨA VI T NAM c l p - T - H nh phúc D TH O TIÊU CHU N CƠ S Cao TRƯ NG H DƯ C HN B môn DHCT Quy t 1.1 S TC: c HO T L C VƯƠNG nh ban hành s : Có hi u l c t : ngày tháng năm YÊU C U K THU T Công th c bào ch 1.1.1 Dư c li u Qu chi Hai trăm gam 200 g Hương ph M t trăm năm mươi gam 150 g B ch thư c Năm mươi gam 50 g Xuyên khung Năm mươi gam 50 g Sinh khương Năm mươi gam 50 g Hai trăm gam 200 g Dư c li u khác (Bán h ) 1.1.2 Dung môi chi t xu t Ethanol 60 % 1.2 Chi t l n, cô d ch chi t n th ch t cao phù h p Nguyên li u, ph li u Qu chi Ramulus Cinnamomi t tiêu chu n D VN IV Hương ph Rhizoma Cyperi t tiêu chu n D VN IV B ch thư c Radix Paeoniae lactiflorae t tiêu chu n D VN IV Xuyên khung Rhizoma wallichii t tiêu chu n D VN IV Ligustici Sinh khương Dư c li u khác (Bán h ) Ethanol 60 % Rhizoma Zingiberis t tiêu chu n s Rhizoma Pinelliae t tiêu chu n D VN IV Dilutum ethanolum t tiêu chu n D VN IV Yêu c u ch t lư ng 1.3 1.3.1 Tính ch t: Th ch t 1.3.2 1.3.3 1.3.4 c quánh, ng nh t, màu nâu en, thơm mùi dư c li u m: Không 20 % tan: g cao c ph i tan hoàn toàn 20 ml ethanol 60 % nh tính: Ch ph m th hi n phép th nh tính c a Qu , Hương ph , B ch thư c 1.3.5 Gi i h n nhi m khu n: t m c - D VN IV 1.3.6 Kim lo i n ng: Không 20 ppm PHƯƠNG PHÁP TH Tính ch t: B ng c m quan ch ph m ph i 2.1 t yêu c u ã nêu m: Th theo Dư c i n Vi t Nam IV, ph l c 11.3 - Phương pháp c t 2.2 v i dung môi tan: B ng c m quan, g cao 2.3 c ph i tan 20 ml ethanol 60 % 2.4 nh tính 2.4.1 nh tính Qu : Phương pháp s c ký l p m ng a D ng c , thu c th : - B n m ng silica gel GF254 - n- Hexan, ethyl acetat, cloroform, ether ethylic (PA) - Dung d ch 2,4-dinitrophenyl hydrazin (TT) b Ti n hành: - B n m ng: Silica gel GF254 ã ho t hóa 100 ± oC 60 phút - Dung môi khai tri n: n-Hexan : cloroform : ethyl acetat (4 : : 1) - Dung d ch i chi u: L y kho ng g dư c li u Qu chi c t nh , cho vào bình nón 100 ml, thêm 30 ml nư c c t, un sôi cách th y 15 phút, ngu i, l c thu d ch l c Chuy n d ch l c vào bình g n 100 ml, chi t v i ether ethylic l n, m i l n 15 ml, t p trung d ch chi t ether ethylic, b c d ch chi t cách th y n c n Hòa tan c n 2ml ether ethylic c dung d ch ch m s c kí - Dung d ch th : L y g cao cho vào bình nón 100 ml, thêm 30 ml nư c c t, un sôi cách th y 15 phút, ngu i, l c thu d ch l c Chuy n d ch l c vào bình g n 100 ml, chi t v i ether ethylic l n, m i l n 15 ml, t p trung d ch chi t ether ethylic, b c d ch chi t cách th y n c n Hòa tan c n 2ml ether ethylic c dung d ch ch m s c kí - Cách ti n hành: Ch m riêng bi t lên b n m ng µl dung d ch i chi u µl dung d ch th Ti n hành s c ký theo Dư c i n Vi t Nam IV - Ph l c 5.4 Sau tri n khai s c ký, l y b n m ng khơ nhi t phịng Soi dư i èn t ngo i bư c sóng 254 nm sau ó phun dung d ch thu c th 2,4dinitrophenyl hydrazin (TT) - K t qu : S c ký c a dung d ch th ph i có v t có màu s c có giá tr Rf tương ương v i v t s c ký 2.4.2 c a dung d ch i chi u nh tính Hương ph : Phương pháp s c ký l p m ng c D ng c , thu c th : - B n m ng silica gel GF254 - Cloroform, toluen, aceton, acid formic, amoniac, ethanol (PA) d Ti n hành: - B n m ng: Silica gel GF254 ã ho t hóa 100 ± oC 60 phút - Dung môi khai tri n: Cloroform : Toluen : Aceton : acid formic (7 : : : 1,5) - Dung d ch i chi u: L y kho ng g dư c li u Hương ph tán nh cho vào bình nón 100 ml, thêm 50 ml nư c, un sơi 60 phút (b sung nư c n u c n thi t), ngu i, l c thu l y d ch l c Chuy n d ch l c vào bình g n 150 ml, ki m hóa b ng dung d ch ammoniac c n ph n ng ki m (pH = - 10), chi t v i chloroform (3 l n, m i l n dùng 30 ml), g n l y l p hloroform, b c cách th y n c n Hòa tan c n ml ethanol c dung d ch ch m s c kí - Dung d ch th : L y g cao cho vào bình nón 100 ml, thêm 20 ml nư c c t, un cách th y, ngu i, l c thu l y d ch l c Chuy n d ch l c vào bình g n 150 ml, ki m hóa b ng dung d ch amoniac c n ph n ng ki m (pH = - 10), chi t v i hloroform (3 l n, m i l n dùng 30 ml), g n l y l p hloroform, b c cách th y n c n Hòa tan c n ml ethanol c dung d ch ch m s c kí - Cách ti n hành: Ch m riêng bi t lên b n m ng µl dung d ch i chi u µl dung d ch th Ti n hành s c ký theo Dư c i n Vi t Nam IV - Ph l c 5.4 Sau tri n khai s c ký, l y b n m ng khô nhi t dư i èn t ngo i bư c sóng 254 nm 366 nm sau ó phịng Soi t b n m ng bình bão hịa amoniac (TT) - K t qu : S c ký c a dung d ch th ph i có v t có màu s c có giá tr Rf tương ương v i v t s c ký 2.4.3 c a dung d ch i chi u nh tính B ch thư c: Phương pháp s c ký l p m ng e D ng c , thu c th : - B n m ng silica gel GF254 - Toluen, ethyl acetat, acid formic, ethanol, n-butanol (PA) - Dung d ch vanillin acid sulfuric 10 % (TT) f Ti n hành: - B n m ng: Silica gel GF254 ã ho t hóa 100 ± oC 60 phút - Dung môi khai tri n: Toluen : ethyl acetat : acid formic (5 : : 1) - Dung d ch i chi u: L y kho ng g dư c li u B ch thư c c t nh cho vào bình nón 100 ml, thêm 60 ml ethanol, l c siêu âm 20 phút, l c Cô d ch l c cách th y n c n, hòa tan c n 20 ml nư c, chi t b ng n- butanol ã bão hòa nư c, l n, m i l n dùng 20 ml G p d ch chi t butanol, b c d ch chi t cách th y n c n Hòa c n ml ethanol c dung d ch ch m s c kí - Dung d ch th : L y g cao cho vào bình nón 100 ml, thêm 60 ml ethanol, l c siêu âm 20 phút, l c Cô d ch l c cách th y n c n, hòa tan c n 20 ml nư c, chi t b ng n-butanol ã bão hòa nư c, l n, m i l n dùng 20 ml G p d ch chi t butanol, b c d ch chi t cách th y n c n Hòa c n ml ethanol c dung d ch ch m s c kí - Cách ti n hành: Ch m riêng bi t lên b n m ng µl dung d ch i chi u µl dung d ch th Ti n hành s c ký theo Dư c i n Vi t Nam IV - Ph l c 5.4 Sau tri n khai s c ký, l y b n m ng khơ nhi t phịng, phun dung d ch vanillin acid sulfuric 10 % (TT) - K t qu : S c ký c a dung d ch th ph i có v t có màu s c có giá tr Rf tương ương v i v t s c ký 2.5 c a dung d ch i chi u Gi i h n nhi m khu n: Th theo Dư c i n Vi t Nam IV, ph l c 13.6 Th gi i h n nhi m khu n 2.6 Kim lo i n ng: Th theo Dư c i n Vi t Nam IV, ph l c 9.4.8 - Xác gi i h n t p ch t, phương pháp nh TÀI LI U THAM KH O Tài li u Ti ng Vi t Huy Bích, Trung Mãn, ng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguy n Thư ng Dong, àm, Ph m Văn Hi n, Vũ Ng c L , Ph m Duy Mai, Ph m Kim oàn Th Nhu, Nguy n T p, Tr n Toàn - Vi n Dư c li u (2009), Cây thu c ng v t làm thu c Vi t Nam, t p I, Nhà xu t b n Khoa h c k thu t, Hà N i, trang 158-161, 551-553, 877-882 Huy Bích, Trung Mãn, ng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguy n Thư ng Dong, àm, Ph m Văn Hi n, Vũ Ng c L , Ph m Duy Mai, Ph m Kim oàn Th Nhu, Nguy n T p, Tr n Toàn - Vi n Dư c li u (2009), Cây thu c ng v t làm thu c Vi t Nam, t p II, Nhà xu t b n Khoa h c k thu t, Hà N i, trang 545-553, 1133-1137 B môn Dư c h c c truy n - Trư ng i h c Dư c Hà N i (2006), Dư c h c c truy n, Nhà xu t b n Y h c, Hà N i, trang 90-91, 122-123, 124-125, 216217, 234-235, 253-254 B môn Dư c li u - Trư ng i h c Dư c Hà N i (2007), Bài gi ng Dư c li u, t p I, Nhà xu t b n Y h c, Hà N i, trang 335, 367-368 B môn Dư c li u - Trư ng i h c Dư c Hà N i (2007), Bài gi ng Dư c li u, t p II, Nhà xu t b n Y h c, Hà N i, trang 223-224, 235-236 B môn Dư c li u - Trư ng Trung tâm thư vi n Trư ng i h c Dư c Hà N i (1999), Th c t p dư c li u, i h c Dư c Hà N i, trang 57, 64-69 B Y t (1971), Dư c i n Vi t Nam I, in t i nhà máy in Ti n B , Hà N i, trang 733 B Y t (2009), Dư c i n Vi t Nam IV, Nhà xu t b n Y h c, Hà N i, trang 692-693, 792-793, 864-865, 934-935 Nguy n Văn àn, Nguy n Vi t T u (1985), Phương pháp nghiên c u hóa h c thu c, Nhà xu t b n Y h c Hà N i, Hà N i 10 Trình Nhu H i, Lý Gia Canh (2004), Trung Qu c danh phương toàn t p, Nhà xu t b n y h c, Hà N i, trang 12-13 11 ng Thanh Huy n (2011), Nghiên c u thành ph n hóa h c tác d ng ng huy t c a v thu c qu chi, qu nh c thu hái nghi p dư c sĩ 12 i h c, Thư vi n Trư ng Hà Giang, Khóa lu n t t i h c Dư c Hà N i T t L i (1999), Nh ng thu c v thu c Vi t Nam, Nhà xu t b n Y h c, Hà N i, trang 65-66, 366-368, 654-657, 857-863 13 Nguy n Vi t Thân (2003), Ki m nghi m Dư c li u b ng phương pháp hi n vi, Nhà xu t b n Khoa h c k thu t, trang 54-55, 145-146, 193-194, 251-252 14 B Y t (2006), K thu t bào ch sinh dư c h c d ng thu c, t p I, Nhà xu t b n Y h c, trang 204-222, 229-234 15 B Y t (2007), Hoá phân tích, t p 2, NXB Y h c, trang 168 - 169, 205- 210, 301-303 16 B Y t (2011), Ki m nghi m Dư c ph m, NXB Y h c, trang 84-86, 103-110 17 Tr n T An (2002), Phương pháp chi t ng d ng ki m nghi m thu c c ch t, Tài li u sau i h c, Trư ng i h c Dư c Hà N i 18 Tr n M nh Bình (2003), Phân tích c u trúc h p ch t h u cơ, Tài li u sau i h c, Trư ng i h c Dư c Hà N i 19 Vi n Ki m Nghi m Trung ương (2010), m b o ch t lư ng thu c m t s phương pháp ki m nghi m thu c, NXB Y h c 20 Phan Văn Ki m, Ph m H i Y n, Nguy n Xuân Nhi m, Nguy n H u Tùng, Tr n H ng Quang, Châu Văn Minh (2007), Paeoniflorin benzoylpaeoniflorin phân l p t B ch Thư c (Paeonia lactiflora pall.), T p chí Hóa h c 45(5), trang 570 - 574 21 Nguy n Tu n Anh, Nguy n Văn T u, Tr nh Văn L u (2007 ), Phân tích thành ph n hóa h c c a B ch thư c, M u ơn bì, Kim ngân hoa b ng phương pháp s c ký l ng hi u cao, K y u cơng trình nghiên c u khoa h c 2007 2011, Vi n ki m nghi m thu c TW, trang 120 - 124 22 T M nh Hùng, oàn Cao Sơn (2012), Hư ng d n chung th m nh quy trình phân tích b ng phương pháp HPLC, T p chí ki m nghi m thu c, s 4.2012, Vi n ki m nghi m thu c TW, trang 1-8 23 Khoa ki m nghi m ông dư c (2012), Th m nh quy trình phân tích s c ký l p m ng s c ký l ng hi u cao thu c ông dư c, Vi n ki m nghi m thu c TW Tài li u Ti ng Anh 24 Pharmacopoeia of the people’s republic of china 2010, volume I, p 306 - 308 25 Ali B.H., Blunden G., Tanira M.O., Nemmar A (2008), Some phytochemical, pharmacologycal and toxicologycal properties of Ginger (Zingiber officinale Rosc.): A review of recent research, Food and Chemiscal Toxicology, 46(2), p 409 - 420 26 Baliga M.S, Latheef L., Haniadka R., Fazal F., Chacko J., Arova R (2013), Ginger (Zingiber officinale Rosc.) in the Treatment and Prevention of Arthritis, Bioactive Food as Dietary Interventions for Arthritis and Related Inflammatory Diseases, Academic Press is an imprint of Elsevier, p 529 544 27 Baliga M.S., Shivashankara A.R., Haniadka R., Palatty P.L., Arora R., Fayad R (2013), Ginger (Zingiber officinale Rosc.): An Ancient Remedy and Modern Drug in Gastrointestial Disorders, Bioactive Food as Dietary Interventions for Liver and Gastrointestial Disease, Academic Press is an imprint of Elsevier, p 187 - 199 28 Zhang W., Dai S.M (2012), Mechanisms involved in the therapeutic effects of Paeonia lactiflora Palls in Rheumatoids arthritis, International Immunopharmacology, 14(1), p 27 - 31 29 Yang H.O., Ko W.K., Kim J.Y., Ro H.S (2004), Paeoniflorin: an antihyperlipidemic agent from Paeonia lactiflora, Fitoterapia, 75(1), p 45 49 30 Kamiya K., Yoshioka K., Saiki Y., Ikuta A., Satake T (1997), Triterpenoids and flavonoids from Paeonia lactiflora, Phytochemistry, 44(1), p 141 - 144 31 Yu H.S., Lee S.Y., Jang C.G (2007), Involvement of - HT1A and GABA receptors in the anxiolytic-like effects of Cinnamomum cassia in mice, Pharmacology Biochemistry and Behavior, 87(1), p 164 - 170 32 Sung Y.Y., Yoon T., Jang J.Y., Part S.J., Jeong G.H., Kim H.K (2011), Inhibitory effects of Cinnamomum cassia extract atopic dermatitis-like skin lessions induced by mite antigen in NC/Nga mice, Journal of Ethnopharmacology, 133(2), p 621 - 628 33 Yu T., Lee S., Yang W.S., Jang H.J., Lee Y.J., Kim T.W., Kim S.Y., Lee J., Cho J.Y (2012), The ability of an ethanol extract of Cinnamomum cassia to inhibit Src and spleen tyrosine kinase activity contributes to its antiinflammatory action, Journal of Ethnopharmacology, 139(2), p 566 - 573 34 Fu Y., Chen G., Wu J., Wu X., Luo C., He Y (2012), Compositional features of carbohydrate compound from Rhizoma Ligustici wallichii and ethanol extract of danshen and its bioactivity, Carbohydrate Polymers, 87(2), p 1224 - 1230 35 Rhyu M.-R , Kim E.-Y , Kim B (2004), Nitric oxide - mediated vasorelaxation by Rhizoma Ligustici wallichii in isolated rat thoracic aorta, Phytomedicine , 11(1), p 51 - 55 36 ManMohan Srivastava (2011), High - Performance Thin - Layer Chromatography (HPTLC), Springer 37 Kamaliroosta L, Gharachorloo M, Kamaliroosta Z and Alimohammad Zadeh K H (2011), Extraction of cinnamon essential oil and identification of its chemical compounds, Journal of Medicinal Plants Research 6(4), pp 609 614 38 Hakima Araar (2009), Cinnamon plant extracts: a comprehensive physicochemical and biological study for its potential use as a biopesticide, Collection Master of Science n 562 39 S Elumalai, R Kesavan, S.Ramganesh, R Murugasen (2011), Isolation, purification and identification of the antidiabetic components from Cinnamomum zeylanicum and Cinnamomum cassia bark oil extracts, Curr Bot 2(2), pp 12 - 17 40 Ju-Xiu He, Teruaki Akao, Tadato Tani (2002), Development of a Simple HPLC Method for Determination of Paeoniflorin - Metabolizing Activity of Intestinal Bacteria in Rat Feces, Chem Pharm Bull 50 (9), pp 1233 – 1237 41 Guan Ye, Yin-Zeng Li, Yan-Yan Li, Hong-Zhu Guo, De-An Guo (2003), SPE-HPLC method for the determination and pharmacokinetic studies on paeoniflorin in rat serum after oral administration of traditional Chinese medicinal preparation Guan-Xin-Er-Hao decoction, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 33, pp 521 -/527 42 Duan XiuJun; Pei MiaoRong; Fan ShuLong (2009), HPLC determination of paeoniflorin content in Shuangshenxiaoyin Capsule, World Journal of Integrated Traditional and Western Medicine (3), pp 173 - 174, 178 ... c Vương tài ? ?Xây d ng phương pháp nh tính, nh lư ng m t s thành ph n cao Ho t L c Vương? ?? c th c hi n v i m c tiêu sau: - Xây d ng phương pháp nh tính m t s v dư c li u cao Ho t L c Vương - Xây. .. h c c a cao Ho t l c vương dư c li u i chi u 27 2.3.2 Xây d ng phương pháp nh tính, bán nh lư ng m t s v dư c li u cao Ho t l c vương b ng phương pháp SKLM 27 2.3.3 Xây d ng... Vương - Xây d ng phương pháp nh lư ng paeoniflorin cao Ho t L c Vương - D th o tiêu chu n ch t lư ng c a cao c Ho t L c Vương Chương T NG QUAN 1.1 Phương thu c Ho t l c vương Thành ph n: [10]