Tổng hợp và thử tác dụng sinh học của một số acid hydroxamic mang khung 5 aryl 1,3,4 thiadiazol hướng ức chế histon deacetylase

100 478 1
Tổng hợp và thử tác dụng sinh học của một số acid hydroxamic mang khung 5 aryl 1,3,4 thiadiazol hướng ức chế histon deacetylase

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ BÍCH LAN TỔNG HỢP VÀ THỬ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA MỘT SỐ ACID HYDROXAMIC MANG KHUNG 5-ARYL-1,3,4-THIADIAZOL HƢỚNG ỨC CHẾ HISTON DEACETYLASE LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC HÀ NỘI 2014 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ BÍCH LAN TỔNG HỢP VÀ THỬ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA MỘT SỐ ACID HYDROXAMIC MANG KHUNG 5-ARYL-1,3,4-THIADIAZOL HƢỚNG ỨC CHẾ HISTON DEACETYLASE LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ DƢỢC PHẨM VÀ BÀO CHẾ THUỐC MÃ SỐ: 60720402 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Đào Thị Kim Oanh PGS.TS Nguyễn Hải Nam HÀ NỘI 2014 LỜI CẢM ƠN Trong trình thực luận văn, tơi nhận đƣợc hƣớng dẫn tận tình nhiều giúp đỡ quý báu thày cơ, đồng nghiệp, gia đình bạn bè Từ tận đáy lịng mình, tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành biết ơn sâu sắc tới TS Đào Thị Kim Oanh PGS.TS Nguyễn Hải Nam, ngƣời thày dẫn tơi tận tình tạo điều kiện tốt cho tơi hồn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn anh chị em làm việc thực đề tài mơn Hóa dƣợc, đặc biệt em Đỗ Thị Mai Dung Lƣơng Xuân Huy, ủng hộ giúp đỡ tơi nhiệt tình suốt q trình nghiên cứu Tơi nhận đƣợc phối hợp giúp đỡ từ cán làm việc Khoa Hóa – trƣờng Đại học Khoa học tự nhiên – Đại học quốc gia Hà Nội, Viện Hóa học hợp chất tự nhiên, Viện hóa học Việt Nam, Viện Khoa học Cơng Nghệ Việt Nam, tồn thể thày phịng, ban, thƣ viện Tôi xin chân thành cảm ơn Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình bè bạn – ngƣời sát cánh, động viên khích lệ tơi sống học tập Hà Nội, ngày 30 tháng 08 năm 2014 Học viên Trần Thị Bích Lan MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 HISTON DEACETYLASE (HDAC) 1.1.1 Khái niệm, phân loại 1.1.2 Cấu trúc HDAC 1.1.3 Mối liên quan ung thƣ bất thƣờng hoạt động HDAC 1.2 CÁC CHẤT ỨC CHẾ HDAC 1.2.1 Phân loại chất ức chế HDAC (HDIs) 1.2.2 Cơ chế tác dụng 1.2.3 Cấu trúc chất ức chế HDAC 1.3 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRÊN THẾ GIỚI VỀ CÁC ACID HYDROXAMIC ỨC CHẾ HDAC 1.4 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU Ở TRONG NƢỚC VỀ CÁC CHẤT ỨC CHẾ HDAC 15 Chƣơng NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU 19 2.1.2 Hóa chất 19 2.1.2 Các hóa chất dung mơi khác 19 2.2 THIẾT BỊ 19 2.3 NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.3.1 Nội dung nghiên cứu 20 2.3.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 21 Chƣơng THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 26 3.1 NGHIÊN CỨU DOCKING 26 3.2 TỔNG HỢP HÓA HỌC 27 3.2.1 Tổng hợp chất N1-[5-(furan-2-yl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl]-N8hydroxyoctandiamid (Va) 27 3.2.2 Tổng hợp chất N1-[5-(5-bromofuran-2-yl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl]-N8hydroxyoctandiamid (Vb) 31 3.2.3 Tổng hợp chất N1-hydroxy-N8-[5-(5-methylfuran-2-yl)-1,3,4thiadiazol-2-yl]octandiamid (Vc) 33 3.2.4 Tổng hợp chất N1-hydroxy-N8-[5-(thiophen-2-yl)-1,3,4-thiadiazol-2yl]octandiamid (Vd) 34 3.2.5 Tổng hợp chất N1-[5-(5-bromothiophen-2-yl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl]N8-hydroxyoctandiamid (Ve) 36 3.2.6 Tổng hợp chất N1-hydroxy-N8-[5-(5-methylthiophen-2-yl)-1,3,4thiadiazol-2-yl]octandiamid (Vf) 37 3.2.7 Tổng hợp chất N1-hydroxy-N8-[5-(pyridin-2-yl)-1,3,4-thiadiazol-2yl]octandiamid (Vg) 39 3.2.8 Tổng hợp chất N1-hydroxy-N8-[5-(pyridin-3-yl)-1,3,4-thiadiazol-2yl]octandiamid (Vh) 40 3.2.9 Tổng hợp chất N1-hydroxy-N8-[5-(pyridin-4-yl)-1,3,4-thiadiazol-2yl]octandiamid (Vi) 42 3.2 KIỂM TRA ĐỘ TINH KHIẾT 43 3.3 KHẲNG ĐỊNH CẤU TRÚC 44 3.3.1 Phổ hồng ngoại (IR) 44 3.3.2 Phổ khối lƣợng (MS) 46 3.3.3 Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân (1H-NMR, 13C-NMR) 46 3.5 HOẠT TÍNH SINH HỌC 50 3.5.1 Tác dụng ức chế HDAC 50 3.5.2 Hoạt tính kháng tế bào ung thƣ in vitro 51 Chƣơng BÀN LUẬN 52 4.1 TỔNG HỢP HÓA HỌC 52 4.2 KHẲNG ĐỊNH CẤU TRÚC 53 4.2.1 Phổ hồng ngoại (IR) 53 4.2.2 Phổ khối (MS) 54 4.2.3 Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân (1H-NMR, 13C-NMR) 55 4.3 HOẠT TÍNH SINH HỌC 58 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 64 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT AsPC-1: Tế bào ung thƣ tụy ngƣời 13 C - NMR: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 13C H - NMR: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 1H dd: Dung dịch HAT: histon acetyltranferase HDAC: Histon deacetylase H460: Tế bào ung thƣ phổi ngƣời HDI, HDIs: Histon deacetylase Inhibitor(s) IR: Phổ hồng ngoại MCF-7: Tế bào ung thƣ vú ngƣời MS: Phổ khối lƣợng MTT: (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromid) NCI-H460: Tế bào ung thƣ phổi ngƣời NST: Nhiễm sắc thể PC-3: Tế bào ung thƣ tiền liệt tuyến ngƣời Rt: khuấy SAHA: Acid suberoylanilid SKLM: Sắc ký lớp mỏng SW620: Tế bào ung thƣ đại tràng ngƣời TSA: Trichostatin A DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng STT Bảng 1.1: Các chất ức chế HDAC thử nghiệm lâm sàng Bảng 1.2: Tác dụng kháng tế bào ung thƣ in vitro N25 (IC50±SD [µM]) Bảng 1.3: Hoạt tính ức chế HDAC tuýp tác dụng kháng tế bào ung thƣ in vitro dẫn chất amido-lactam vị trí khung SAHA Bảng 1.4: Các acid hydroxamic mang khung 5-phenyl-1,3,4thiadiazol-2-yl độc tính số dịng tế bào Bảng 3.1: Kết docking chất Va-i với HDAC8 Bảng 3.2: Giá trị Rf T0nc chất Va-i Bảng 3.3: Số liệu phân tích phổ IR Va-i Bảng 3.4: Số liệu phân tích phổ khối lƣợng chất Bảng 3.5: Số liệu phân tích phổ 1H-NMR 10 Bảng 3.6: Số liệu phân tích phổ 13C-NMR 11 Bảng 3.7: Tác dụng ức chế HDAC dẫn chất tổng hợp 12 Bảng 4.1: Kết thử hoạt tính kháng tế bào ung thƣ ngƣời in vitro 13 Bảng 4.2: So sánh tác dụng kháng tế bào ung thƣ Va-d, Vf-h với số dẫn chất acid hydroxamic mang khung 5-phenyl-1,3,4-thiadiazol DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ HÌNH VẼ STT Tên hình Hình 1.1: Vai trị sinh học HDAC sinh lý tế bào ung thƣ Hình 1.2: Điều hịa phát triển sống sót tế bào chất ức chế HDAC Hình 1.3: Cơng thức cổ điển HDI Hình 1.4: HDIs có cấu trúc acid hydroxamic Hình 1.5: Các acid phenylthiazol hydroxamic tƣơng tự SAHA Hình 1.6: Một số acid phenylthiazol hydroxamic Hình 1.7: Các dẫn chất acid biphenyl-hydroxamic Hình 1.8: Các acid isoxazol-hydroxamic Hình 1.9: Các triazol-hydroxamic 10 Hình 1.10: Một số dẫn chất saccarin acid hydroxamic 11 Hình 1.11: Cơng thức số dẫn chất amido-lactam vị trí khung SAHA 12 Hình 1.12: Các acid hydroxamic mang khung benzothiazol, cầu nối carbon 13 Hình 2.1: Các dẫn chất hydroxamic mang khung 5-aryl1,3,4-thiadiazol dự kiến tổng hợp 14 Hình 3.1: Mơ hình tƣơng tác Va, Vg SAHA với HDAC8 15 Hình 4.1: Phổ hồng ngoại chất Vb 16 Hình 4.2: Phổ khối lƣợng chất Vb 17 Hình 4.3: Phổ 1H-NMR dãn rộng chất Vd 18 Hình 4.4: Phổ 13C-NMR chất Vb 19 Hình 4.5: Kết phân tích Western blot chất Va-i SƠ ĐỒ Tên sơ đồ STT Sơ đồ 1.1: Tổng hợp acid isoxazol-hydroxamic Sơ đồ 1.2: Tổng hợp acid triazol-hydroxamic (4) Sơ đồ 2.1: Tổng hợp dẫn chất hydroxamic mang khung 5-aryl-1,3,4-thiadiazol Sơ đồ 3.1: Quy trình tổng hợp chất Va Sơ đồ 3.2: Tổng hợp chất IIa Sơ đồ 3.3: Tổng hợp chất IIIa Sơ đồ 3.4: Tổng hợp chất IVa Sơ đồ 3.5: Tổng hợp chất Va Sơ đồ 3.6: Quy trình tổng hợp chất Vb 10 Sơ đồ 3.7: Quy trình tổng hợp chất Vc 11 Sơ đồ 3.8: Quy trình tổng hợp chất Vd 12 Sơ đồ 3.9: Quy trình tổng hợp chất Ve 13 Sơ đồ 3.10: Quy trình tổng hợp chất Vf 14 Sơ đồ 3.11: Quy trình tổng hợp chất Vg 15 Sơ đồ 3.12: Quy trình tổng hợp chất Vh 16 Sơ đồ 3.13: Quy trình tổng hợp chất Vi 17 Sơ đồ 4.1: Cơ chế phản ứng đóng vịng tổng hợp 2-amino5-aryl-1,3,4-thiadiazol 18 Sơ đồ 4.2: Cơ chế hoạt hóa CDI Phụ lục 2-1: Phổ khối lƣợng chất Va Phụ lục 2-2: Phổ khối lƣợng chất Vb Phụ lục 2-3: Phổ khối lƣợng chất Vc Phụ lục 2-4: Phổ khối lƣợng chất Vd Phụ lục 2-5: Phổ khối lƣợng chất Ve Phụ lục 2-6: Phổ khối lƣợng chất Vf Phụ lục 2-7: Phổ khối lƣợng chất Vg Phụ lục 2-8: Phổ khối lƣợng chất Vh Phụ lục 2-9: Phổ khối lƣợng chất Vi Phụ lục 3-1: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 1H-NMR chất Va Phụ lục 3-2: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 1H-NMR chất Vb Phụ lục 3-3: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 1H-NMR chất Vc Phụ lục 3-4: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 1H-NMR chất Vd Phụ lục 3-5: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 1H-NMR chất Ve Phụ lục 3-6: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 1H-NMR chất Vf Phụ lục 3-7: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 1H-NMR chất Vg Phụ lục 3-8: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 1H-NMR chất Vh Phụ lục 3-9: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 1H-NMR chất Vi Phụ lục 4-1: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 13C-NMR chất Va Phụ lục 4-2: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 13C-NMR chất Vb Phụ lục 4-3: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 13C-NMR chất Vc Phụ lục 4-4: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 13C-NMR chất Vd Phụ lục 4-5: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 13C-NMR chất Ve Phụ lục 4-6: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 13C-NMR chất Vf Phụ lục 4-7: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 13C-NMR chất Vg Phụ lục 4-8: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 13C-NMR chất Vh Phụ lục 4-9: Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 13C-NMR chất Vi ... ? ?Tổng hợp thử tác dụng sinh học số acid hydroxamic mang khung 5- aryl- 1,3, 4thiadiazol hướng ức chế histon deacetylase? ?? với hai mục tiêu: - Tổng hợp đƣợc số dẫn chất acid hydroxamic mang khung 5- aryl- 1,3, 4thiadiazol. .. GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ BÍCH LAN TỔNG HỢP VÀ THỬ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA MỘT SỐ ACID HYDROXAMIC MANG KHUNG 5- ARYL- 1,3,4- THIADIAZOL HƢỚNG ỨC CHẾ HISTON DEACETYLASE. .. 1.1: Tổng hợp acid isoxazol -hydroxamic Sơ đồ 1.2: Tổng hợp acid triazol -hydroxamic (4) Sơ đồ 2.1: Tổng hợp dẫn chất hydroxamic mang khung 5- aryl- 1,3,4- thiadiazol Sơ đồ 3.1: Quy trình tổng hợp

Ngày đăng: 25/07/2015, 15:54

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan