Nghiên cứu đặc tính sinh dược học của một số phân đoạn dịch chiết từ cây bông ổi

68 1.2K 1
Nghiên cứu đặc tính sinh dược học của một số phân đoạn dịch chiết từ cây bông ổi

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

1 MỞ ĐẦU 1. Lý do chọn đề tài Do sự phát triển của xã hội hiện nay kéo theo nhịp sống công nghiệp hiện đại của con người, sự không phù hợp về thay đổi lối sống, các chế độ ăn uống mất cân đối dinh dưỡng là nguyên nhân dẫn đến nhiều căn bệnh nguy hiểm như : bệnh đái tháo đường (Diabetes mellitus), bệnh béo phì (Obesity), ung thư, tim mạch. Trong đó đái tháo đường (ĐTĐ) là căn bệnh phát triển nhanh nhất hiện nay của xã hội. Đái tháo đường là một bệnh rối loạn chuyển hóa gây tăng đường huyết mãn tính do thiếu insulin tương đối hay tuyệt đối của tuyến tụy, nếu không kiểm soát tốt sau một thời gian tiến triển kéo dài có thể gây nhiều biến chứng nguy hiểm. Bệnh có tính chất dân tộc và chủng tộc đã và đang trở thành vấn đề mang tính xã hội, bởi sự bùng phát nhanh chóng, mức độ nguy hại đến sức khỏe, tốn kém cho người bệnh và kinh tế cộng đồng. Bệnh có tỷ lệ mắc ngày càng cao, là một trong 3 bệnh (ung thư, tim mạnh, đái tháo đường) phát triển nhanh nhất hiện nay của xã hội.[3], [32]. Theo Tổ chức Y tế thế giới (WHO): năm 1994, thế giới có 98.9 triệu người mắc bệnh đái tháo đường, cuối năm 2002 có khoảng 177 triệu người, con số này đã tăng lên 300 triệu người vào năm 2025. Riêng châu Á , số liệu công bố tại hội nghị đái tháo đường quốc tế tổ chức vào tháng 12 năm 1997 tại Singapo: Năm 1995 châu Á có khoảng 62 triệu người mắc bệnh ĐTĐ, cuối năm 2002 con số này là 89 triệu người. Theo đánh giá của Hiệp hội ĐTĐ quốc tế (IDF) năm 2005 số người mắc bệnh đái tháo đường tại châu Á tăng lên 1.7 lần. WHO đã cảnh báo có thể xuất hiện “đại dịch ĐTĐ” ở châu Á vào thế kỷ 21 [2], [3]. Việt Nam, năm 1990 tỷ lệ mắc bệnh ĐTĐ ở Hà Nội là 1.2%, Huế là 0.96% và thành phố Hồ Chí Minh là 2.5%, năm 2000 Viện Nội tiết Trung ương điều tra tại khu vực nội thành Hà Nội tỷ lệ ĐTĐ là 4% dân số và 7% ở tuổi > 35 tuổi. Cuộc điều tra do Viện Nội tiết tiến hành năm 2001 tại 4 thành phố Hà Nội, Hải Phòng, Đà Nẵng và 2 thành phố Hồ Chí Minh đã cho thấy tỷ lệ ĐTĐ trong độ tuổi 30- 64 tuổi là 4.9% [2], [3]. Sự gia tăng nhanh chóng tỷ lệ người mắc bệnh làm cho ĐTĐ trở thành một vấn đề lớn cho sức khỏe vì bệnh có tỷ lệ mắc, chết trầm trọng trong quá trình trị liệu lâu dài, đặc biệt là ĐTĐ type 2 một trong những bệnh phổ biến nhất trong bệnh ĐTĐ. ĐTĐ có thể mang nhiều biến chứng nguy hiểm như: biến chứng võng mạc, suy thận, biến chứng mạch máu lớn, tổn thương bàn chân dẫn đến cụt Vì vậy đại đa số người bệnh đều có nhu cầu chữa bệnh một cách an toàn. Mỗi năm nước Mỹ đã phải chi hàng tỉ đô la cho điều trị ĐTĐ bằng các thuốc do tổ chức an toàn thực phẩm và dược phẩm Mỹ phê chuẩn (Food and Drug Aministration - FDA) như: Metformin, Orlistat, Sibutramin, Ephedrin, Fenfluramin. Song hầu hết các thuốc này đều có nguồn gốc tổng hợp, thường có tác dụng phụ và đắt tiền. Trước tình hình đó ủy ban chuyên gia của (WHO) đã khuyến nghị nên sử dụng các thuốc có nguồn gốc thảo dược sẵn có, giá thành rẻ và ít độc tính [2], [3], [7], [11], [19], [22], [40]. Hiện nay trên thế giới chưa có công trình nghiên cứu về tác dụng hạ đường huyết của cây bông ổi. Từ thực tế đó, nhằm góp phần tìm kiếm và nghiên cứu thuốc điều trị đái tháo đường và thành phần hóa học cơ bản của cây Bông ổi (Lantana Camara L.) trên chuột nhắt gây bệnh ĐTĐ bằng streptozotocin (STZ), tôi quyết định chọn đề tài nghiên cứu “Nghiên cứu đặc tính sinh dược học của một số phân đoạn dịch chiết từ cây bông ổi (Lantana Camara L)”. 2. Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết của một số phân đoạn dịch chiết từ cây Bông ổi trên mô hình chuột ĐTĐ type 2 thực nghiệm. 3. Nhiệm vụ nghiên cứu 1. Khảo sát sơ bộ thành phần các hợp chất tự nhiên có trong cây bông ổi (Lantana Camara L.) 3 2. Định lượng polyphenol tổng số theo phương pháp Folin – Ciocalteau. 3. Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết của các phân đoạn dịch chiết cây bông ổi (Lantana Camara L.) trên mô hình chuột ĐTĐ mô phỏng type 2. 4 Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cây Bông ổi (Lantana Camara L.) 1.1.1 Thực vật học Cây cao từ 1.5-2 m, hay có thể hơn một chút. Cây bụi, thân gỗ. Thân có gai, cành dài hình vuông có gai ngắn và lông ráp. Lá mọc đối, khía răng, mặt dưới có lông. Cụm hoa là những bông co lại thành đầu giả mọc ở nách các lá ở ngọn. Lá hình trái xoan, nhọn đầu, xanh nhạt, mặt trên phủ lông ngắn, mặt dưới có lông mềm. Cuống ngắn, cụm hoa dạng tán hình cầu mang nhiều hoa sát nhau – hoa nở từ vòng ngoài lần lần vào trong. Hoa lưỡng tính, không có cuống, không đều, thoạt tiên vàng lợt rồi vàng kim, vàng tươi, sau cùng đỏ chói, ít khi toàn hoa trắng. Quả hạch hình cầu nằm trong lá dài, khi chín mầu đen, nhân gồm 1- 2 hạt cứng, xù xì [4] . Hoa thức và hoa đồ: 1.1.2 Phân loại, nguồn gốc và phân bố cây Bông ổi. Phân bố, sinh học và sinh thái: Gốc ở nhiệt đới Châu Mỹ, được thuần hóa trong tất cả các vùng nhiệt đới của thế giới. Ở nước ta, cây mọc khắp nơi từ Bắc vào Nam. Thường gặp trên đất hoang, dọc bờ đường, trên các dải cát của các sông và trong các ruộng khô, ở vùng thấp [4]. 1.1.3 Thành phần hóa học Lá chứa 0.2% tinh dầu; ở hoa khô chỉ có 0.07%. Tinh dầu có 8% terpenbicyclic và 10-12% L-a-phelandren. Tinh dầu bông ổi Ấn Độ chứa cameren, isocameren và 5 micranen. Trong vỏ có 0.08% lantanin, là một alcaloid. Lá trong thời kỳ có hoa chứa 0.31- 0.68% lantanin, còn có lantaden [4]. 1.1.4. Một số tác dụng Sinh - Dược và công dụng của cây bông ổi Lá có vị đắng, hôi, tính mát, hơi có độc, có tác dụng hạ sốt, tiêu độc, tiêu sưng. Hoa có vị ngọt, tính mát, có tác dụng cầm máu. Rễ có vị dịu, tính mát, có tác dụng hạ sốt, tiêu độc, giảm đau. Người ta biết lantanin, cũng như quinin, làm giảm sự tuần hoàn và hạ nhiệt. Công dụng, chỉ định và phối hợp: Rễ thường dùng trị sốt lâu không dứt, quai bị, phong thấp đau xương, chấn thương bầm giáp. Hoa dùng trị lao với ho ra máu và hạ huyết áp. Liều dùng 30-60g, dạng thuốc sắc. Lá dùng ngoài đắp vết thương, vết loét hoặc dùng để cầm máu; cũng dùng trị ghẻ lở, viêm da, các vết chàm và dùng chườm nóng trị thấp khớp. Thường dùng tươi giã đắp ngoài hay nấu nước để rửa. Hoa dùng làm thuốc trị ho với liều 12g, dạng thuốc sắc hay hâm nóng hoặc chế xi rô [4]. 1.2. Giới thiệu về một số hợp chất tự nhiên ở thực vật Ở thực vật, ngoài protein, saccarid, lipid, vitamin, còn có những chất khác có vai trò quan trọng trong đổi chất của cây được gọi là các chất thực vật thứ sinh (plant secondary metabolites). Căn cứ vào tính chất hóa học, các hợp chất thực vật thứ sinh được chia thành một số nhóm chính như: nhóm phenolic, nhóm terpen và nhóm alkaloid. Nhiều công trình nghiên cứu gần đây đã cho thấy các hợp chất polyphenol (thuộc nhóm hợp chất phenolic) ngày càng ứng dụng rộng rãi trong điều trị một số bệnh nan y như: ung thư, béo phì, tiểu đường … a. Các hợp chất phenolic từ thực vật Hợp chất phenolic là nhóm các chất khác nhau rất phổ biến trong thực vật. Đặc điểm chung của chúng là trong phân tử có vòng thơm (benzene) mang một, hai hay ba nhóm hydroxyl (-OH) gắn trực tiếp vào vòng benzene. Dựa vào thành phần và cấu trúc người ta chia hợp chất phenolic thành 3 nhóm nhỏ [42]: 6  Nhóm hợp chất phenolic đơn giản: Trong phân tử chỉ có một vòng benzene và một vài nhóm hydroxyl. Tùy thuộc vào số lượng nhóm OH mà chúng được gọi là các monophenol (phenol), diphenol (pyrocatechin, hydroquynone), triphenol (pyrogalol, oxyhydroquynol…).  Nhóm hợp chất phenolic phức tạp: Trong thành phần cấu trúc phân tử của chúng ngoài vòng thơm benzene (C 6 ) chúng còn có dị vòng, mạch nhánh. Đại diện nhóm này có axid cyamic, axid ceramic.  Nhóm hợp chất phenolic đa vòng: Là nhóm đa dạng nhất trong các hợp chất phenol, có cấu trúc phức tạp do sự liên kết hoặc trùng hợp của các đơn phân. Ngoài gốc phenol còn có các nhóm phụ dị vòng mạch nhánh hoặc đa vòng. Nhóm này có flavonoid, tannin và coumarin. Trong số các chất polyphenol tự nhiên, flavonoid là nhóm chất quan trọng nhất vì chúng phổ biến ở hầu hết các loài thực vật và mang nhiều hoạt tính sinh dược học có giá trị. b. Flavonoid Flavonoid là những sắc tố, phần lớn có màu vàng (flavus - nghĩa là màu vàng). Tuy nhiên một số sắc tố khác như xanh, đỏ, tím,…hoặc không màu cũng xếp vào nhóm flavonoid vì chúng có chung đặc điểm cấu tạo. • Cấu tạo hóa học và phân loại Về cấu tạo hóa học, khung cacbon của flavonoid là C 6 - C 3 - C 6 , gồm 15 nguyên tử cacbon, hai vòng benzene A và B nối với nhau qua dị vòng C, trong đó A kết hợp với C tạo khung chroman. 9 10 8 5 7 6 2 3 O 1 4 1' 5'6' 4' 3' 2' A C B Flavan (2-phenyl chroman ) 7 Tùy theo mức độ oxy hóa vòng pyran, sự có mặt hay không có mặt của nối đôi giữa C 2 với C 3 và nhóm cacbonyl ở C 4 mà có thể phân biệt flavonoid thành các nhóm phụ sau: Flavon và flavonol, flavanol (đihidro flavon), chalcol, aurol, leucoantoxianidin, catechin, isoflavonoid, rotenoid và neoflavonoid. • Hoạt tính sinh học của flavonoid * Tác dụng chống oxy hóa (antioxidant) Flavonoid có khả năng kìm hãm các quá trình oxy hóa dây truyền gây ra bởi các gốc tự do hoạt động. Tuy nhiên hoạt tính này mạnh hay yếu còn phụ thuộc vào đặc điểm của từng flavonoid cụ thể. Gốc tự do sinh ra trong quá trình sinh lý bình thường của cơ thể hay do tác động bên ngoài là nguyên nhân gây phá hủy ADN, protein, lipid làm phát sinh nhiều bệnh tật nguy hiểm và sự lão hóa cho cơ thể. Flavonoid có bản chất polyphenol nên dễ dàng biến đổi dưới tác động của các enzyme có trong tế bào động, thực vật. Đặc biệt flavonoid có nhóm hyđroxyl ở vị trí ortho dễ dàng bị oxy hóa bởi xúc tác của enzyme polyphenoloxydase và peroxydase tạo semiquynol hoặc quynol [24]. Đây là các gốc tự do bền vững chúng có thể nhận điện tử và trở thành dạng hidroquynol. Bởi vậy các chất này có khả năng phản ứng với các gốc tự do hoạt động và loại chúng ra khỏi cơ thể. Quá trình được tóm tắt qua sơ đồ sau: O 2 + Flavonoid (khử) Flavonoid (oxy hoá) (Hiđroquynol) (semiquynol hoặc quynol) Ngoài ra flavonoid còn có tác dụng bảo vệ các hệ thống sinh học nhờ khả năng tạo phức với các kim loại chuyển tiếp như Fe +2 , Cu +2 … hoạt hóa enzyme chống oxy hóa và ức chế sự oxy hóa. Polyphenoloxydase Peroxydase Polyphenoloxyase Peroxydase 8 * Tác dụng giảm béo phì và lipid máu Kết quả nghiên cứu của các nhà khoa học Nhật cho thấy khi chuột béo phì được điều trị bằng dịch chiết giàu flavonoid từ lá Bằng lăng (Lagerstroemia specciosa L.) thì có trọng lượng giảm đáng kể (~ 10% ) [59]. Thí nghiệm tương tự với flavonoid từ lá Kim ngân (Lonicera japonica Thunb.) đối với chuột cống trắng uống cholesterol cũng cho thấy có tác dụng làm giảm các chỉ số cholesterol, triglycerid, LDL-c đồng thời tăng HDL-c [32]. Naringin (C 17 H 32 O 4 ) và hesperidin (C 28 H 34 O 15 ) là những flavonoid có hàm lượng cao trên họ cam chanh (Rutaceae) đã được nhiều nhà nghiên cứu chiết xuất và thử tác dụng trên mô hình chuột béo phì cho kết quả tốt trong việc làm hạ các chỉ số lipid máu [33], [37]. * Tác dụng hạ glucose huyết Một số flavonoid được tách chiết từ nguyên liệu thực vật đã được chứng minh là có tác dụng điều hòa glucose huyết như: Quercetin có trong Đỗ trọng (Eucommia ulmoides Oliver.) [51], Hesperidin và Naringin có trong các cây thuộc họ Rutaceae [36], Genistein và Daidzein có trong Đậu nành (Glycine max L.) [15], Myricetin có trong cây Vông vang (Abelmoschus moschatus) [15]. c. Hợp chất coumarin Coumarin là dẫn chất của α- purone có cấu trúc C 6 - C 3 dị vòng chứa oxy. Coumarin kết tinh không màu hoặc màu vàng nhạt, vị đắng, cay, có mùi thơm [28]. Tính chất hóa học đặc trưng là dễ dàng kết hợp với đường glucose tạo thành glycosid dễ tan trong nước. Hiện nay chúng ta biết khoảng 1500 hợp chất coumarin khác nhau khi nghiên cứu 800 loài thực vật. Ta cũng dễ dàng tìm thấy coumarin trong tất cả các bộ phận khác nhau của cây như: áo hạt, quả, hoa, rễ, lá, thân…Coumarin cũng có vai trò là một nhóm chất phòng thủ hóa học hữu hiệu chống lại vi khuẩn và tác nhân có hại của môi trường. Tuy nhiên cho tới nay con đường tổng hợp coumarin vẫn chưa hoàn toàn sáng tỏ [37]. 9 O O Coumarin Trong y học dẫn xuất của coumarin có tác dụng chống co thắt, giãn nở động mạch vành, làm bền và bảo vệ thành mạch, ngăn cản đột quỵ [37]. Một số coumarin khác có tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm, kháng khối u, trừ giun sán và giảm đau. d. Alkaloid thực vật Alkaloid là hợp chất chứa nitơ, đa số có nhân dị vòng và có tính kiềm, thường gặp ở thực vật và động vật. Đa số các alkaloid trong thành phần có chứa oxy ở thể rắn (cafein), không có oxy thường ở thể lỏng dễ bay hơi (nicotin). Alkaloid thường không có màu, không mùi và vị đắng. Một số alkaloid có màu vàng như berberin, palmitin. Các alkaloid ở dạng base thường không tan trong nước [37]. N N N N C H 3 C H 3 CH 3 O O C a f f e i n O N H H OH OH M o r p h in e N N C H 3 N ico tin Trong y học nhiều thuốc chữa bệnh có thành phần alkaloid như thuốc gây kích thích hoặc ức chế hệ thần kinh trung ương, thuốc điều hòa huyết áp, chữa rối loạn nhịp tim…. Một số nghiên cứu gần đây cho thấy các alkaloid chiết từ thực vật cũng có tác dụng hạ glucose huyết như: Berberin (Tinosporacordifolia, Coptis sinensis), Casuarine 6-O-α- glucoside (Syzygium malaccense). 10 1.3. Bệnh béo phì (Obesity) 1.3.1. Khái niệm và phân loại béo phì [10] Tổ chức Y tế thế giới định nghĩa béo phì là tình trạng tích lũy mỡ quá mức và không bình thường tại một vùng cơ thể hay toàn thân đến mức ảnh hưởng tới sức khỏe. Béo phì là tình trạng sức khỏe có nguyên nhân dinh dưỡng. "Cân nặng nên có" của mỗi người thường ở vào độ tuổi 25-30. Hiện nay, Tổ chức y tế thế giới thườg dùng chỉ số khối cơ thể (Body Mass Index - BMI) để nhận định tình trạng gầy béo. Trong đó: W: Khối lượng (kg ) H: Chiều cao (m ) Bảng 1.1. Phân loại BMI của người trưởng thành châu Âu và châu Á [3] Mức độ thể trọng Người trưởng thành châu Âu Người trưởng thành châu Á Nhẹ cân < 18.5 < 18.5 Bình thường 18.5 – 24.9 18.5 - 22.9 Quá cân ≥ 25 – 29.9 ≥ 23 Béo phì độ 1 30 - 34.9 >23 - 24.9 Béo phì độ 2 35 - 39.9 25 – 29.9 Béo phì độ 3 ≥ 40 ≥ 30 1.3.2. Thực trạng béo phì trên thế giới và Việt Nam Theo tổ chức y tế thế giới (WHO) hiện nay số người béo phì đã lên tới 1.7 tỉ người [3], không chỉ gặp nhiều ở các quốc gia phát triển mà còn gặp cả ở các quốc gia đang phát triển. Mỹ là nước có số dân mắc bệnh cao nhất thế giới, khoảng 60 triệu người (chiếm 30% dân số), tăng gấp 3 lần so với điều tra năm 1991. Ở châu Âu, Anh là quốc gia đứng đầu bảng với 23% dân số. Tại châu Á tỉ lệ thừa cân béo phì ở một số [...]... đã làm với mẫu chuẩn acid gallic 2.2.3 Nghiên cứu tác dụng của dịch chiết các phân đoạn cây Bông ổi (Lantana Camara L.) lên trọng lượng và một số chỉ số hóa sinh máu của chuột béo phì thực nghiệm 2.2.3.1 Thử độc tính cấp, xác định LD50 Xác định LD50 của dịch chiết cây Bông ổi bằng đường uống theo phương pháp Lorke [53] Chuột nhịn đói trước 16h thí nghiệm được phân lô ngẫu nhiên N = 10 và cho uống theo... tổng số ethanol được hòa tan trong nước nóng và chiết lần lượt với các dung môi n-hexan, chloroform, ethylacetate cất dung môi dưới áp suất giảm thu được các cao phân đoạn dịch chiết tương ứng 2.2.2 Phương pháp khảo sát thành phần hóa học của cây bông ổi (Lantana Camara L.) 2.2.2.1 Định tính một số nhóm hợp chất tự nhiên [19], [37] 30 Cao các phân đoạn được hòa tan trong dung môi thích hợp với từng... nhiên từ mỗi nhóm ra 10 con chuột, lấy máu tổng số và phân tích một số chỉ số lipid máu Các số liệu được thu thập và tiến hành xử lý thống kê 35 Bảng 2.2 Thành phần thức ăn giàu lipid [65], [69] Thành phần Tỉ lệ % Hydratcacbon 41 Lipid 32 Protein 20 Cholesterol 1 Chất khoáng 4 Vitamin & acid amin 2 2.2.4 Phương pháp nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết của các phân đoạn dịch chiết cây Bông ổi (Lantana... thuật GM612, Đức - Máy quang phổ UV – VIS 1000 - Một số máy móc cần thiết khác như: voltex, máy ly tâm, máy khuấy từ, bếp 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp tách chiết mẫu nghiên cứu Từ 3kg cây Bông ổi (Lantana Camara L.) sấy khô được ngâm chiết với ethanol 90% ở nhiệt độ phòng 22oC trong vòng 45 ngày (quá trình được lặp lại 3 lần) Gộp các dịch chiết lại, lọc qua giấy lọc 3 lần và cất lại dung... cho uống cao các phân đoạn dịch chiết trong vòng 21 ngày Đường huyết trong các trường hợp trên đều được đo sau khi cho chuột nhịn qua đêm (12 giờ), chỉ cho uống nước 2.2.4.2 Thử khả năng hạ glucose huyết của các phân đoạn dịch chiết Các lô chuột ĐTĐ type 2 (5 con/lô) được ăn thức ăn thường và điều trị hằng ngày bằng cách cho uống cao các phân đoạn dịch chiết như bảng 2.3 Đường huyết của 36 các con chuột... (500mg/kg) thể trọng 4 Thức ăn béo STZ Điều trị cao phân đoạn ethanol (2000mg/kg) 5 Thức ăn béo STZ Điều trị cao phân đoạn n- hexan (2000mg/kg) 6 Thức ăn béo STZ Điều trị cao phân đoạn CHCl3 (2000mg/kg) 7 Thức ăn béo STZ Điều trị cao phân đoạn ethylacetate (2000mg/kg) 8 Thức ăn béo STZ Điều trị cao phân đoạn nước (2000mg/kg) 2.2.5 Một số kĩ thuật phân tích hóa sinh 2.2.5.1 Phương pháp định lượng glucose huyết... 50 ml acid acetic 10% Dung dịch B: thêm 0.5 ml dung dịch FeCl3 5% vào 50 ml acid sunfuric đặc - Cho cặn dịch chiết vào ống nghiệm Thêm 1ml dung dịch A lắc cho tan hết, nghiêng ống nghiệm từ từ cho dung dịch B vào Phản ứng dương tính khi xuất hiện vòng nâu đỏ giữa 2 lớp chất lỏng * Định tính alkaloid Mẫu thử được pha trong dung dịch acid acetic 2% với một lượng thích hợp để làm các phản ứng - Phản ứng... phân đoạn dịch chiết như bảng 2.3 Đường huyết của 36 các con chuột được đo vào cùng một thời điểm trong ngày và sau khi nhịn đói 12 giờ ở các ngày thứ 0 (trước khi điều trị), ngày thứ 5, thứ 10, thứ 15, thứ 21 khi điều trị Bảng 2.3 Mô hình nghiên cứu khả năng hạ glucose huyết của các phân đoạn dịch chiết từ cây Bông ổi (Lantana Camara L.) Lô Chế độ ăn trước điều trị Tiêm Mục đích 1 Thức ăn chuẩn Uống... hoại tử tế bào Hoạt tính alkyl hóa của STZ do hoạt động của nhóm nitrosourea của nó, đặc biệt là ở vị trí O6 của guanine STZ tạo ra nitric oxide (NO) làm tổn thương ADN của tế bào β Mặt khác, hoạt động của NO làm ức chế chu trình Krebs, giảm tiêu thụ oxy trong ty thể từ đó làm giảm mạnh sự sản xuất ATP và tổn hại đến các nucleotit của tế bào Đồng thời phân tử này còn ức chế hoạt tính enzyme aconitase... (Hình 2.1) Mẫu nghiên cứu là thân, rễ, lá cây Bông ổi (Lantana Camara L.) được thu hái vào tháng 12 năm 2010 tại huyện Lục Ngạn – Bắc Giang rửa sạch và tiến hành sấy khô ở 500C sau đó nghiền thành bột mịn Mẫu thực vật do Bộ môn Thực vật học - Trường ĐH Khoa học Tự nhiên Hà Nội giám định Hình 2.1 Lá và hoa cây bông ổi 28 2.1.2 Mẫu động vật Chuột nhắt trắng (Mus musculus) chủng Swiss 4 tuần tuổi (14-17g) . tài nghiên cứu Nghiên cứu đặc tính sinh dược học của một số phân đoạn dịch chiết từ cây bông ổi (Lantana Camara L)”. 2. Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết của một số phân. trình nghiên cứu về tác dụng hạ đường huyết của cây bông ổi. Từ thực tế đó, nhằm góp phần tìm kiếm và nghiên cứu thuốc điều trị đái tháo đường và thành phần hóa học cơ bản của cây Bông ổi (Lantana. một số phân đoạn dịch chiết từ cây Bông ổi trên mô hình chuột ĐTĐ type 2 thực nghiệm. 3. Nhiệm vụ nghiên cứu 1. Khảo sát sơ bộ thành phần các hợp chất tự nhiên có trong cây bông ổi (Lantana

Ngày đăng: 23/07/2015, 18:00

Từ khóa liên quan

Mục lục

  • MỞ ĐẦU

    • 1. Lý do chọn đề tài

    • 3. Nhiệm vụ nghiên cứu

      • a. Các hợp chất phenolic từ thực vật

        • b. Flavonoid

          • • Cấu tạo hóa học và phân loại

          • • Hoạt tính sinh học của flavonoid

            • * Tác dụng chống oxy hóa (antioxidant)

            • * Tác dụng giảm béo phì và lipid máu

        • c. Hợp chất coumarin

      • d. Alkaloid thực vật

    • 1.3. Bệnh béo phì (Obesity)

      • 1.3.1. Khái niệm và phân loại béo phì [10]

      • 1.3.2. Thực trạng béo phì trên thế giới và Việt Nam

      • 1.3.3.Tác hại và nguy cơ của bệnh béo phì

        • - Bệnh tim mạch: do mỡ tạng làm tim khó co bóp và mỡ máu làm xơ cứng mạch vành và các mạch máu khác gây nhồi máu cơ tim, tăng huyết áp.

        • - Rối loạn lipid máu: tình trạng này rất hay gặp ở người béo bụng và có biểu hiện đặc trưng là tăng triglycerid và lipid có hại (LDL-c), giảm lipid có lợi (HDL-c).

        • - Tiểu đường: béo phì toàn thân có nguy cơ mắc ĐTĐ type 2.

      • 1.3.4. Nguyên nhân và giải pháp phòng, điều trị béo phì [10]

        • - Nhóm có tác dụng lên hệ thần kinh trung ương.

        • - Nhóm tác dụng lên hệ tiêu hóa.

      • 1.3.5. Rối loạn trao đổi lipid máu

        • - Cholesterol toàn phần (2.9 – 5.2 mmol/l);

        • - Triglycerid (0.8 – 2.3 mmol/l);

        • - HDL-c (0.90 – 1.50 mmol/l);

        • - LDL-c (0.5 – 3.4 mmol/l).

      • 1.3.6. Mối quan hệ giữa béo phì và ĐTĐ

      • 1.4.4. Chuyển hóa glucose và sự điều hòa glucose huyết

  • Chương 2

  • ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

    • 2.1. Đối tượng nghiên cứu

      • 2.1.2. Mẫu động vật

      • 2.1.3. Dụng cụ, hóa chất thí nghiệm

        • * Hóa chất:

          • - STZ (streptozotocin) Sigma, ST. Louse

          • - Silicagel 60 (0.04- 0.063 mm) Merck

          • - Các loại dung môi hữu cơ như methanol, ethanol, n- hexan, chloroform, ethylacetat, toluen, aceton, ... là các hóa chất tinh khiết được mua của các hãng thương mại quốc tế có uy tín: Prolabo, Sigma, Merck, ...

        • * Các dụng cụ thí nghiệm:

          • - Bộ máy Soxhlet chiết mẫu của Đức

          • - Tủ sấy Memert, Đức.

          • - Phễu chiết, phễu lọc, giấy lọc ….

          • - Bình chiết 30 lít.

          • - Máy cô quay chân không RE 400 Yamato, Japan.

          • - Máy li tâm eppendorf, li tâm lạnh.

          • - Máy xét nghiệm tự động các chỉ số sinh hóa OLYMPUS AU 640, Nhật.

          • - Máy đo đường huyết tự động OneTouch Ultra và que thử, Mỹ.

          • - Micropipet và các dụng cụ đo đếm khác.

          • - Cân kĩ thuật GM612, Đức.

          • - Máy quang phổ UV – VIS 1000.

    • 2.2. Phương pháp nghiên cứu

      • 2.2.1. Phương pháp tách chiết mẫu nghiên cứu

        • 2.2.2.2. Định lượng pholyphenol tổng số theo phương pháp Folin- Ciocalteau

          • * Tiến hành xây dựng đường chuẩn acid gallic

        • 2.2.3.1. Thử độc tính cấp, xác định LD50

          • - Nhóm 1 – Nhóm đối chứng: các con chuột tiếp tục được chăm sóc bằng thức ăn bình thường (do viện Vệ sinh Dịch tễ cung cấp).

          • - Nhóm 2  Nhóm nuôi béo: các con chuột được chăm sóc bằng chế độ thức ăn giàu lipid và cholesterol do chúng tôi phối trộn các thực phẩm dinh dưỡng được tính toán với thành phần như bảng 2.2.

        • 2.2.4.2. Thử khả năng hạ glucose huyết của các phân đoạn dịch chiết

      • 2.2.5. Một số kĩ thuật phân tích hóa sinh

        • 2.2.5.1. Phương pháp định lượng glucose huyết

        • 2.2.5.2. Định lượng một số chỉ số lipid trong huyết thanh

        • * Định lượng cholesterol toàn phần

        • * Định lượng triglycerid

        • * Định lượng HDL-c

      • 2.2.6. Xử lý số liệu

  • Chương 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

Trích đoạn

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan