BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH LÊ VĂN THOẠI NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH DƢ LƢỢNG THUỐC TRỪ SÂU NHÓM LÂN HỮU CƠ VÀ CÚC TỔNG HỢP TRONG MỘT SỐ RAU QUẢ TƢƠI TẠI TP.CAO LÃNH, TỈNH ĐỒNG THÁP BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ KHÍ GHÉP KHỐI PHỔ (GC/MS) LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC NGHỆ AN, 2014 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH LÊ VĂN THOẠI NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH DƢ LƢỢNG THUỐC TRỪ SÂU NHÓM LÂN HỮU CƠ VÀ CÚC TỔNG HỢP TRONG MỘT SỐ RAU QUẢ TƢƠI TẠI TP.CAO LÃNH, TỈNH ĐỒNG THÁP BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ KHÍ GHÉP KHỐI PHỔ (GC/MS) Chun ngành : Hóa phân tích Mã số : 60.44.0118 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Nguyễn Khắc Nghĩa NGHỆ AN, 2014 LỜI CẢM ƠN Trước tiên, e in g i ời i t n s u s c nh t Nguyễn Khắc Nghĩa ã tận tình hướng dẫn, h t gi p cho e ng tru n n ch n th nh hoa h a - Trường Đ i học Vinh ã dìu d t v trang t ki n th c v n t t quý th cô ki n th c cho e học v a qua Em c ng in ch n th nh nghiệp v PGS TS su t thời gian thực uận văn t t nghiệp Em c ng in ược g i ời hai nă n th ng d ng o Trung t thuật Th hoa học ông nghệ Đ ng Th p v c c ng nghiệp ã t o i u kiện thuận ợi, h t n ng gi p n ãnh v chia s nh ng kh khăn thời gian i học Sau ời n s u s c nh t n ẹ v vợ ã uôn t o i u kiện t t nh t su t qu trình học c ng thực uận văn này! Nghệ An ng th ng n m Ngƣời thực L V n Tho i DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT - ADI (Acceptable Daily Intake): ượng ăn v o h ng ng ch p nhận ược - BVTV: Bảo vệ thực vật - CI (chemical ionization): h ộ ion h a h a học GC/MS - DSPE (Dispersed Solid Phase Extraction): hi t pha r n ph n t n - ECD (Electron Capture detector): Đ u d t iện t - EI (Electron Ionization) : Ion h a ằng iện t G /MS - FID (Flame Ionization detector): Đ u d ion h a a - GC (Gas chromatography): S c ký kh - HPLC (High Performance Liquid Chromatography): S c ký ỏng hiệu cao - LD50 (Letal Dois) : i u g ch t trung ình - LC50 (Letal Concentration): N ng ộ g ch t trung ình - LOD (Limit of detection): Giới h n ph t - LOQ (Limit of Quantification): Giới h n nh ượng - MRL (Maximum Residue Level): Giới h n t i a dư ượng - MS (Mass Spectrometry): Đ u d kh i phổ - NPD (Nitrogen Phosphorous detector): Đ u d c nh g c Nit v Phospho - QuEChERS (Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged, and Safe): Nhanh, dễ, rẻ, hiệu quả, ổn nh, an toàn - RF (Fluorescence): Đ u d huỳnh quang - RSD (Relative Standard Deviation): Độ ệch chuẩn tư ng i - SEC (Size Exclusion): Phư ng ph p s c ký o i tr theo k ch thước - SD (Standard Deviation): Độ ệch chuẩn - TTS: Thu c tr s u - UV-VIS: Đ u d t ngo i – khả ki n DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Tên, công th c c u t o v dung ôi h a tan ột s hợp ch t nh ôi h a tan ột s hợp ch t nh nh uc Bảng 1.2: Tên, công th c c u t o v dung c c tổng hợp Bảng 1.3: Ion dư ng t c nh n ion h a h a học Bảng 1.4: Hướng dẫn ẫu rau tư i ể ph n t ch dư ượng thu c BVTV Bảng 3.1: Thời gian ưu, ion Bảng 3.2: S nh ượng v ion c nhận iệu n ng ộ v tỷ ệ diện t ch peak Bảng 3.3: Phư ng trình ường chuẩn v hệ s tư ng quan (R2) Bảng 3.4: t ộ ặp i chuẩn a c n ng ộ Bảng 3.5: t ộ ặp i n n ẫu cải Bảng 3.6: t ộ ặp i n n ẫu cải anh Bảng 3.7: t ộ ặp i n n ẫu rau ng t Bảng 3.8: t ộ ặp i n n ẫu rau Bảng 3.9: t ộ ặp i n n ẫu dưa eo Bảng 3.10: Hiệu su t thu h i ẫu cải Bang 3.11: Hiệu su t thu h i ẫu cải anh Bảng 3.12: Hiệu su t thu h i ẫu rau ng t Bảng 3.13: Hiệu su t thu h i ẫu rau Bảng 3.14: Hiệu su t thu h i u ng ẫu dưa eo u ng Bảng 3.15: Gi tr OD v OQ theo ường chuẩn Bảng 3.16: Gi tr OD v OQ theo kh i ượng Bảng 3.17: t ph n t ch ẫu rau DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ H nh 1.1: Hệ th ng s c ký kh gh p kh i phổ – GC/MS H nh 1.2: Bình kh he iu H nh 1.3: utosa p er c ng với Headspace H nh 1.4: Bu ng tiê H nh 1.5: ẫu sp it/sp it ess cột Hình 1.6 u t o cột s c ký kh Hình 1.7 ut o u d kh i phổ H nh 1.8: Khoảng n tính khoảng làm việc Hình 1.9: Đường chuẩn n n mẫu thực Hình 1.10: Đường chuẩn s d ng ch t nội chuẩn Hình 1.11: M i quan hệ gi a LOD, LOQ khoảng n tính Hình 2.1: S qu trình ý ẫu rau H nh 3.1: Phổ Scan chuẩn TTS i u kiện 1, 2, 3, H nh 3.2: Phổ Scan chuẩn TTS i u kiện 5, 6, 7, H nh 3.3: Phổ Si c a peak trif ura in H nh 3.4: Phổ Si c a peak diazinone H nh 3.5: Phổ Si c a peak disu foton H nh 3.6: Phổ Si c a peak ch orp rifos H nh 3.7: Phổ Si c a peak phenothrin H nh 3.8: Phổ Si c a peak phenothrin H nh 3.9: Phổ Si c a peak per ethrin H nh 3.10: Phổ Si Hinh 3.11: Đ th ường chuẩn c c ho t ch t TTS Hinh 3.12: Phổ ường chuẩn c c ho t ch t TTS Hình 3.13: Phổ ộ ặp i chuẩn 500μg/ Hình 3.14: Phổ ộ ặp i peak phenothrin Hình 3.15: Phổ c a peak per ethrin hiệu su t thu h i ẫu cải ẫu rau ngót c n ng ộ MỞ ĐẦU Ở nước ta, rau tư i r t a d ng v phong ph chia rau tư i th nh nhi u nh rau nh rau anh rau cải, rau u ng, rể c c r t, c cải, c su h o, c ch, rau c n,… nh : nh Nhìn chung ta c thể ậu,… cho c chua, dưa chuột, khổ qua,… nh Rau tư i h uh t thực phẩ ọi gia ình N h nh c c o i thi u a ăn h ng ng ngu n ổ sung c c vita in v kho ng ch t Nhu c u v vita in v kho ng ch t c a người ược cung c p hàng ngày qua rau tư i Rau tư i c t c d ng k ch th ch nhu ộng ruột v ti t d ch c a ruột hu t p v ngăn ng a ột s a ăn nh ch c tăng khả tiêu ho Ăn nhi u rau tư i gi p c thể tr nh ược c c ệnh v ti quan c a ch, ột quỵ, ổn nh ệnh ung thư, h n ch hiệu c c ệnh iên n ường ruột, ặc iệt viê ruột th a, g p ph n giả ớt ch ng t o bón Theo o c o c a c Bảo vệ Thực vật, nh u ng, rau ng t, cải anh, cải thảo, cải ngọt, d ng phổ i n to n thực phẩ a ăn ng nhiễ p cải,… c c o i rau ược nước ta c ngu c cao u dẫn n tình tr ng nh s d ng thu c ảo vệ thực vật, công t c qu ặt uk , công t c n, s d ng thu c ảo vệ thực vật, ặc iệt rau c n uông ỏng nhi u a phư ng.[20] H ng nă , Bộ Nông nghiệp v Ph t triển Nông thôn s t với nh ng nông sản ch tỷ ệ rau nhiễ 6,44% nă t an người sản u t chưa ho ch, tổ ch c sản u t, tiêu th rau an to n c n nhi u quản ý uôn rau dư ượng thu c ảo vệ thực vật vượt ngư ng cho ph p Ngu ên nh n ch thực t t qu rau ăn ực th t, rau, quả, th sản u ẫu gi t cho th thu c ảo vệ thực vật vượt qu giới h n cho phép 2009, 6,17% nă khoảng 4,5% nă 2012 Theo 2010, 4,43% nă nh gi 2011 v c c n cao so với c c nước ph t triển, vậ c quan ch c c ng ang c g ng tăng cường công t c quản ý v kiể Hiện na theo danh so t ể nhằ giả tỷ ệ n [20] c ã c 1643 ho t ch t thu c ảo vệ thực vật (BVTV) ược ph p s d ng, 13 ho t ch t h n ch s d ng v 29 ho t ch t c s d ng t i Việt Na sản phẩ [8] Đ ng Th p a rau, nhu c u s d ng c c o i thu c BVTV ể ph ng v tr c c o i d ch ệnh r t ớn việc kiể o i rau, c n ỏng ẻo v t i c c ph ng th nghiệ phẩ ột tỉnh nông nghiệp, sau ỏ ngõ, ên c nh tỉnh chưa ực kiể ng, c n tiêu th nga sau ảo t nh tư i c a sản phẩ Vì th c n c c c phư ng ph p ph n t ch dư ượng thu c BVTV nhanh ch ng v ch nh Các thi t nghiệ p ng H n n a nh ng sản rau tư i c thời gian ảo quản r t ng n, dễ thu ho ch ể ả so t ch t ượng c c c ph n t ch thu c BVTV phổ i n na S c ký kh (GC/FID/E D/NPD), S c ký kh ghép kh i phổ (GC/MS, GC/MS/MS,…), S c ký ỏng hiệu cao (HP /UV-VIS/RF), S c ký ỏng ghép kh i phổ (LC/MS, LC/MS/MS,…) Với hai o i thi t n h t c c thu c BVTV na , t ud c a nh v thuộc v o ộ chọn ọc kh c chọn ọc, ộ nh cao song chi ph việc ph n t ch c c thu c BVTV nh ằng s c ký kh gh p kh i phổ h n theo qui nh V ưu iể h a ph n t ch ược nhi u nh ột c a nh danh ch nh ph vận h nh thi t n ỗi thi t b u d kh i phổ ược e u tư an ur tt tk c ộ c ộ Nhìn chung, c o h u c , n h u c v c c tổng hợp n (MS) p ng t t c c c u v giới u d kh i phổ n thu c BVTV c ng h ng phổ cho ph p kh c p v c thể ph n t ch ược h u c thể chư ng trình c Song c ng với ng n c c c o i thu c chưa c chuẩn, chi c ng th p t t n dung ôi, h a ch t, ch t chuẩn, iện Xu t ph t t nh ng lý chọn t i: “Nghiên cứu xác định dư lượng thuốc trừ sâu nhóm lân hữu v cúc tổng hợp số rau tươi Th nh phố Cao Lãnh, tỉnh Đồng Th p Phương ph p sắc ký khí ghép khối phổ (GC/MS)” ể nghiên c u v c a ảo vệ uận văn th c sĩ ình Thực đề tài này, tập trung giải vấn đề sau: - Tổng quan v thu c tr s u (TTS) g c phư ng ph p - c n h u c , c c tổng hợp nh ch ng hảo s t i u kiện t ch hỗn hợp 02 chuẩn TTS g c nh uc v c c tổng hợp s c ký kh gh p kh i phổ với k thuật ion h a e ectron (EI) - hảo s t khoảng tu n t nh cho hỗn hợp 02 chuẩn TTS g c n h u c c c tổng hợp -X c nh ộ ặp i dung d ch chuẩn t i 03 iể -X c nh ộ ặp rau ng t, rau i dung d ch ẫu cho 05 n n: cải ngọt, cải anh, u ng, dưa eo - Đ nh gi hiệu su t thu h i 05 n n cải ngọt, cải anh v 01 iể - Tì thi t ẫu: 03 iể n ng ộ cho n n rau ng t, rau gi tr giới h n ph t ( OD) v giới h n X c nhận i gi tr n - ường chuẩn n n n ng ộ cho n n u ng, dưa eo nh ượng ( OQ) cho ẫu thực ng d ng c c k t nghiên c u phân tích dư ượng TTS g c n h u c v c c tổng hợp 25 ãnh, tỉnh Đ ng Th p ẫu rau tư i th trường Th nh ph ao NỘI DUNG CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 GIỚI THIỆU VỀ THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT 1.1.1 Định nghĩa: [3] 1.1.1.1 Thuốc bảo vệ thực vật: - Thuốc bảo vệ thực vật (sản phẩm nông dƣợc) : nh ng ch phẩm có ngu n g c hóa ch t, thực vật, ộng vật, vi sinh vật ch phẩm khác d ng ể phòng tr sinh vật gây h i tài nguyên thực vật G m ch phẩm d ng ể phòng tr sinh vật gây h i tài nguyên thực vật; ch phẩ i u h a sinh trưởng thực vật; ch t làm r ng hay khơ lá; ch phẩm có tác d ng ua uổi thu hút lo i sinh vật gây h i tài nguyên thực vật n ể tiêu diệt - Tài nguy n thực vật: g gia s c, c , sản phẩ c a c , nông sản, th c ăn sản ảo quản - Sinh vật gây h i tài nguy n thực vật: ao g khuẩn, cỏ d i, chuột v c c t c nh n g côn tr ng, n , vi h i kh c 1.1.1.2 Dƣ lƣợng thuốc bảo vệ thực vật (BVTV): Dư ượng thu c BVTV phẩ ph n c n i c a c c ho t ch t c c sản chu ển ho c a ch ng v c c th nh ph n kh c c thu c BVTV t n t i c tr ng, nông sản, t, nước sau s d ng thu c BVTV 1.1.1.3 Lƣợng n vào hàng ngày chấp nhận đƣợc (ADI): ADI không g ượng c a ột o i h a ch t ược ưa v o c thể h ng ng ảnh hưởng c t c h i n s c khỏe người n v t nh mg/kg thể trọng 1.1.1.4 Giới h n tối đa dƣ lƣợng (MRL) thuốc bảo vệ thực vật: ượng t i a cho ph p (Ma iu Residue i it- MR ) ột o i thu c BVTV ch p nhận t n t i nông sản, thực phẩ ượng t i a không Permethrin Permethrin Phenothrin Phenothrin Chlorpyrifos Diazinone Disulfoton 42 Hinh 3.12: Phổ đồ đƣờng chuẩn ho t chất TTS Nhận x t: Từ phương tr nh đư ng chu n v hệ số tương qu n R2 cho th c c hoạt ch t khảo s t có độ tu ến tính c o đ p ứng tốt yêu cầu phân tích định lượng c c hợp ch t TTS gốc lân hữu v cúc tổng hợp 3.5 ĐÁNH GIÁ ĐỘ L P LẠI TRÊN CHUẨN Độ ặp i chuẩn ược thực n ng ộ 100 (µg/L), Ở ỗi c n ng ộ 500(µg/L) v c n ng ộ ược ch ặp i 06 n sau c n ng ộ : c1 c n ng ộ 1750(µg/L) trung ình 06 n ặp i v t nh to n gi tr % RSD T phổ chuẩn c 100 (µg/L), 500(µg/L), 1750(µg/L), diện t ch peak chuẩn chia cho diện t ch peak nội chuẩn trif ura in ta ược tỷ ệ diện t ch, th v o phư ng trình ường chuẩn c a t ng ho t ch t ể ược n ng ộ tư ng ng t chi ti t ộ ặp i ược thể ảng 4: 43 Bảng 3.4 K t độ lặp l i tr n chuẩn a mức nồng độ Lần Lần Lần Lần Lần Lần 100 104,5 105,23 105,20 105,39 105,57 104,08 105,00 0,55 500 520,8 521,90 516,73 520,08 522,15 519,88 520,26 0,38 1750 1747,3 1761,58 1748,09 1753,71 1750,26 1757,84 1753,13 0,32 100 132,1 131,31 131,58 131,21 131,91 133,20 131,88 0,55 500 484,5 482,86 484,95 485,01 484,60 485,65 484,60 0,19 1750 1780,5 1775,32 1774,39 1784,24 1782,68 1777,79 1779,16 0,22 Chlorpyrifos 100 143,69 146,95 144,77 143,97 143,37 143,06 144,30 0,99 500 488,6 493,99 487,32 484,54 488,91 484,48 487,98 0,72 1750 1751,3 1769,31 1760,22 1768,84 1767,60 1783,53 1766,79 0,61 Phenothrin 100 154,7 155,38 153,40 154,49 156,47 154,91 154,89 0,66 500 507,6 510,90 508,83 509,60 512,24 511,59 510,14 0,34 1750 1853,9 1835,28 1835,48 1833,85 1860,03 1850,14 1844,78 0,61 Permethrin Nồng độ chuẩn lặp l i (µg/L) Trung bình (µg/L) 100 123,0 122,19 121,47 123,49 121,68 122,22 122,34 0,63 500 492,2 497,99 499,12 502,46 494,97 499,19 497,66 0,72 1750 1791,9 1785,69 1802,83 1809,41 1811,79 1799,69 1800,22 0,56 Disulfoton Diazinone Stt Tên C (µg/L) Dưới c t t phổ phổ ộ ặp i chuẩn c n ng ộ 500μg/ RSD (%) ược g c t i c c v tr peaks khảo s t, ược thể hình 13: Disulfoton Permethrin Phenothrin Diazinone Permethrin Phenothrin Chlorpyrifos 44 Hình 3.13: Phổ đồ độ lặp l i tr n chuẩn 500μg/L Nhận x t: Gi trị độ l p lại ( RS ) chu n gi o động từ đến cho th độ ổn định c thiết bị sắc ký khí ghép khối phổ r t tốt n n chu n TTS gốc lân hữu v cúc tổng hợp 3.6 ĐÁNH GIÁ ĐỘ L P LẠI TRÊN MẪU hảo s t ộ ặp rau ng t, rau i ược thực n n u ng, dưa eo), ỗi n n ẫu thực 06 ượng c n trung ình khoảng 10g/ ẫu Mẫu sau trif ura in n ng ộ g/ , thực ược khô v nh c i1 ý ẫu (cải ngọt, cải anh, ược thê n ặp 50µ nội chuẩn ẫu theo qu trình, ằng he ane Sau i, kh i ẫu sau ý ẫu ược ph n t ch G /MS theo i u kiện ã ược t i ưu h a Dựa v o tỷ ệ diện t ch peak ẫu v diện t ch peak nội chuẩn ta t nh ược n ng ộ c c ho t ch t theo phư ng trình ường chuẩn T n ng ộ (μg/ ) ta t nh to n ược n ng ộ theo kh i ượng (μg/kg) theo công th c sau: X (μg/ ) * V (ml) * Df (μg/kg) = (11) m (g) Trong đó: - X :H ượng ch t c n ph n t ch t nh theo ường chuẩn (μg/ ) 45 - V : Thể t ch nh c (ml) - Df : Hệ s pha oãng - m : h i ượng ẫu e ph n t ch (g) T kh i ượng c n, thể t ch chuẩn ta t nh to n ược c c k t nh c, n ng ộ ho t ch t theo ường ẫu ph n t ch ược ghi ảng n ảng 9: Bảng 3.5: K t độ lặp l i tr n n n mẫu cải Tên CẢI NGỌT (μg/kg) Lần Lần Lần Lần Lần Lần TB (μg/kg) RSD (%) Diazinone 3,54 3,51 2,96 3,62 3,70 3,73 3,51 8,08 Disulfoton 5,63 5,61 4,51 5,49 5,39 5,41 5,34 7,83 Chlorpyrifos 7,48 7,28 5,80 7,16 7,02 6,95 6,95 8,53 Phenothrin 13,83 13,88 12,06 13,83 14,06 14,16 13,64 5,75 Permethrin 1,72 2,19 2,13 1,90 1,83 1,82 1,93 9,66 Bảng 3.6: K t độ lặp l i tr n n n mẫu cải anh CẢI XANH (μg/kg) Tên Lần Lần Lần Lần Lần Lần TB (μg/kg) RSD (%) Diazinone 3,81 3,89 3,74 3,92 3,77 3,65 3,80 2,63 Disulfoton 5,42 5,38 5,26 5,23 5,43 5,35 5,35 1,55 13,12 13,11 12,61 12,97 12,88 12,73 12,91 1,59 Phenothrin 9,58 9,92 9,42 9,94 9,75 10,09 9,78 2,55 Permethrin 3,84 3,93 4,00 3,73 3,83 3,82 3,86 2,41 Chlorpyrifos Bảng 3.7: K t độ lặp l i tr n n n mẫu rau ngót RAU NGĨT (μg/kg) Tên TB (μg/kg) RSD (%) Lần Lần Lần Lần Lần Lần Diazinone KPH KPH KPH KPH KPH KPH KHP 0,00 Disulfoton KPH KPH KPH KPH KPH KPH KHP 0,00 Chlorpyrifos KPH KPH KPH KPH KPH KPH KPH 0,00 Phenothrin 14,10 15,03 14,56 13,67 15,92 16,10 14,90 6,55 Permethrin 2,02 1,84 2,12 2,00 1,91 1,82 1,95 6,04 46 Bảng 3.8: K t độ lặp l i tr n n n mẫu rau muống RAU MUỐNG (μg/kg) Tên Lần Diazinone Lần Lần Lần Lần Lần KPH KPH KPH KPH KPH KPH 8,55 Disulfoton Chlorpyrifos KPH 8,11 KPH 8,42 KPH 8,67 KPH 8,63 KPH 8,26 KPH TB (μg/kg) RSD (%) KPH 0,00 8,44 2,60 KPH 0,00 Phenothrin 17,40 17,39 16,53 18,60 17,74 17,22 17,48 3,88 Permethrin 5,61 6,02 5,33 6,04 5,49 5,94 5,74 5,28 Bảng 3.9: K t độ lặp l i tr n n n mẫu dƣa leo DƢA LEO (μg/kg) Tên TB (μg/kg) RSD (%) Lần Lần Lần Lần Lần Lần Diazinone KPH KPH KPH KPH KPH KPH KPH 0,00 Disulfoton KPH KPH KPH KPH KPH KPH KPH 0,00 Chlorpyrifos KPH KPH KPH KPH KPH KPH KPH 0,00 Phenothrin KPH KPH KPH KPH KPH KPH KPH 0,00 Permethrin KPH KPH KPH KPH KPH KPH KPH 0,00 Nhận x t: Kết độ l p lại (RS ) n n m u d o động từ 66 cho th qu tr nh chiết ổn định GC/MS đến Phenothrin 47 H nh 3.14: Phổ đồ độ lặp l i peak phenothrin tr n mẫu rau ngót 3.7 ĐÁNH GIÁ HIỆU SUẤT THU HỒI TRÊN NỀN MẪU Đ nh gi hiệu su t thu h i ược thực 05 n n iể n ng ộ cho n n cải ngọt, cải anh v 01 iể ng t, rau u ng, dưa eo N ng ộ chuẩn thê v 1500μg/ Mỗi trif ura in n ng ộ g/ , thực khô v n ng ộ cho n n rau c 100μg/ , 500μg/ c n ng ộ ược thực 06 n ặp i, kh i ượng c n trung ình khoảng 7-10g/ ẫu T t c c ược v oở ẫu: khảo s t 03 nh c i1 ý ẫu ược thê 50µ nội chuẩn ẫu theo qu trình, ằng he ane Sau ẫu sau ý ẫu ược ph n t ch G /MS theo i u kiện ã ược t i ưu h a Dựa v o tỷ ệ diện t ch peak ẫu thê chuẩn v diện t ch peak nội chuẩn ta t nh ược n ng ộ c c ho t ch t theo phư ng trình ường chuẩn T n ng ộ (μg/ ) ta t nh to n ược n ng ộ theo kh i ượng 3.6 (μg/kg) ph n 48 T n ng ộ (μg/kg) ta t nh hiệu su t thu h i theo công th c sau: (12) Trong đó: - R : Độ thu h i, % - Cm+c: N ng ộ ch t phân tích - Cm: N ng ộ ch t phân tích ẫu thêm chuẩn, (μg/kg) ẫu th , (μg/kg) - Cc: N ng ộ chuẩn thêm vào, (μg/kg) Sau ó tính ộ thu h i chung trung bình c a ộ thu h i l n làm lặp l i t ph n t ch c c ẫu trung ình c c ảng 10 n ảng 3.14 hình 3.15: Bảng 3.10: Hiệu suất thu hồi tr n mẫu cải Chuẩn Stt Tên Thêm vào (µg/L) CẢI NGỌT Hiệu suất thu hồi (%) Diazinone Chlorpyrifos Disulfoton Phenothrin Permethrin Lần Lần Lần Lần 89.17 91.47 87.67 86.78 88.25 86.89 88.37 1000 84.51 86.37 83,01 83,34 83,39 83,19 83,97 1500 88,44 88,38 86,65 83,66 81,66 82,76 85,26 500 Lần 500 Lần Trung bình (%) 74,76 76,42 74,88 91,54 88,37 84,64 81,77 1000 77,75 77,35 77,12 75,64 73,82 72,23 75,65 1500 75,67 74,71 73,28 70,67 71,04 70,51 72,65 500 90,23 88,21 88,47 87,61 87,29 87,36 88,20 1000 80,33 81,97 77,67 75,13 73,41 74,75 77,21 1500 77,46 77,69 77,51 75,88 77,52 77,92 77,33 500 71,93 74,81 70,36 73,55 70,04 72,38 72,18 1000 70,10 73,61 68,82 77,31 74,94 73,46 73,04 1500 74,72 67,74 74,42 77,94 79,81 79,04 75,61 500 94,65 91,99 89,49 87,22 81,67 85,10 88,35 1000 97,00 93,85 91,20 93,32 90,25 90,54 92,69 1500 86,54 87,33 83,58 84,66 86,81 85,82 85,79 49 Bảng 3.11: Hiệu suất thu hồi tr n mẫu cải anh Chuẩn Stt Tên Thêm vào (µg/L) CẢI XANH Hiệu suất thu hồi (%) Diazinone Chlorpyrifos Disulfoton Phenothrin Permethrin Lần Lần Lần Lần 80,32 80,76 76,36 79,89 81,44 75,26 79,01 1000 85,02 80,34 82,19 81,78 84,24 82,70 82,71 1500 89,73 89,22 84,75 86,50 85,28 85,54 86,84 500 Lần 500 Lần Trung bình (%) 85,31 85,78 84,45 86,88 83,92 82,92 84,88 1000 81,52 81,76 76,26 76,31 76,22 76,95 78,17 1500 72,66 73,70 74,05 73,34 72,25 74,24 73,37 500 76,77 76,66 76,27 77,24 75,07 77,08 76,51 1000 71,92 71,75 71,38 70,54 70,88 70,81 71,21 1500 72,79 73,70 72,46 74,48 71,54 72,47 72,90 500 78,46 76,34 80,24 78,65 78,22 76,76 78,11 1000 76,63 75,41 69,98 73,98 70,64 74,22 73,48 1500 73,73 74,54 74,66 80,67 78,06 79,54 76,87 500 88,92 87,30 83,87 83,89 84,19 79,76 84,65 1000 81,92 83,97 89,22 80,97 82,12 82,28 83,41 1500 89,79 84,49 85,59 82,33 85,32 88,00 85,92 Bảng 3.12: Hiệu suất thu hồi tr n mẫu Rau ngót Stt Tên Chuẩn Thêm vào (µg/L) RAU NGĨT Trung Hiệu suất thu hồi (%) bình Lần Lần Lần Lần Lần Lần (%) Diazinone 500 78,76 83,14 73,00 86,42 77,46 74,54 78,88 Disulfoton 500 73,87 79,96 76,92 85,90 81,18 81,54 79,89 Chlorpyrifos 500 87,34 82,59 83,68 83,98 84,87 84,03 84,42 Phenothrin 500 61,67 66,86 62,08 80,77 77,85 76,53 70,96 Permethrin 500 84,48 85,45 83,14 80,24 81,46 85,36 83,36 50 Bảng 3.13: Hiệu suất thu hồi tr n mẫu rau muống Stt Tên RAU MUỐNG Chuẩn Hiệu suất thu hồi (%) Thêm vào Lần Lần Lần Lần (µg/L) Diazinone 1000 90,23 87,82 86,82 88,47 82,65 87,00 87,17 Disulfoton 1000 82,36 79,58 77,14 70,28 70,11 69,50 74,83 Chlorpyrifos 1000 77,67 77,67 75,90 74,60 74,09 73,91 75,64 Phenothrin 1000 73,67 71,02 69,54 65,98 76,65 64,70 70,26 Permethrin 1000 82,33 84,87 81,28 80,79 83,73 82,92 82,65 Lần Lần Trung bình (%) Bảng 3.14: Hiệu suất thu hồi tr n mẫu dƣa leo Stt Tên DƢA LEO Chuẩn Hiệu suất thu hồi (%) Thêm vào Lần Lần Lần Lần (µg/L) Diazinone 1500 82,97 83,64 82,36 81,79 85,33 79,32 82,57 Disulfoton 1500 80,83 76,15 78,29 80,93 80,38 79,97 79,43 Chlorpyrifos 1500 84,94 80,53 81,19 83,62 83,41 82,19 82,64 Phenothrin 1500 75,72 73,59 74,06 77,67 75,81 75,63 75,41 Permethrin 1500 86,41 85,60 83,80 83,50 84,11 83,38 84,47 Lần Lần Nhận x t: Hiệu su t thu hồi n n m u đ u đạt từ u cho th Trung bình (%) đến 92,69% qu tr nh xử lý m u v u kiện tối ưu thiết bị GC/MS có độ ổn định v độ x c c o Disulfoton Diazinone 51 H nh 3.15: Phổ đồ hiệu suất thu hồi mẫu cải mức nồng độ 3.8 Giới h n phát (LOD) giới h n định lƣợng (LOQ) Trong t i n , c nh ường chuẩn Ti n h nh ch ặp ộ ệch chuẩn (SD) c a 10 n ặp to n gi tr OD v i iể OQ ược thực dựa chuẩn th p nh t 10 n, t nh gi tr i, dựa v o ộ d c c a ường chuẩn t nh OD, OQ theo công th c sau: 3,3 * SD LOD = 10 * SD (13) LOQ = a (14) a Trong đó: - SD : Độ ệch chuẩn c a 10 chuẩn n ng ộ 100μg/ -a : Độ d c c a ường chuẩn T công th c ta t nh ược gi tr OD v k t ược trung ình c c ảng 15 v OQ dung d ch chuẩn ảng 16: 52 Bảng 3.15: Giá trị LOD LOQ theo đƣờng chuẩn Tỷ lệ diện tích chuẩn / nội chuẩn Nồng độ 100μg/L Stt Diazinone 2,9219 2,9221 2,9499 2,9752 2,9741 2,9811 2,9875 2,9338 2,9497 2,8506 Chlorpyrifos 1,0493 1,0482 1,0379 1,0800 1,1247 1,0415 1,0338 1,0298 1,0615 1,0498 Phenothrin 5,6177 5,6303 5,5949 5,6317 5,5246 5,5836 5,6905 5,6064 5,5157 5,5823 Permethrin 4,0247 3,8980 3,9417 3,9117 3,8860 3,9585 3,8935 3,9129 3,8714 3,9426 2,9446 5,0792 1,0557 5,5978 3,9241 0,0408 0,0418 0,0282 0,0514 0,0448 0,036 3,74 11,34 10 Tỷ l Trung bình Độ lệnh chuẩn (%) Độ dốc LOD (μg/L) LOQ (μg/L) Disulfoton 5,0576 5,1062 5,0556 5,0731 5,0492 5,0943 5,1767 5,0937 5,0570 5,0281 0,064 2,16 6,53 0,0129 7,22 21,89 0,054 3,14 9,53 0,036 4,11 12,45 T gi tr OD t nh theo ường chuẩn ( sai s theo phư ng phư ng trình ường chuẩn ( ượng c n OD v nv μg/ ) cộng với gi tr nv μg/ ), c ng với kh i ẫu trung bình theo quy trình phân tích 10g, ta t nh ược gi tr OD theo kh i ượng ( nv μg/kg) ược trình ảng 3.16: Bảng 3.16: Giá trị LOD LOQ theo khối lƣợng Tổng nồng độ (μg/L) Stt Ho t chất m (g) Sai số (μg/L) Diazinone 10 22,58 3,742 26,32 1,00 2,63 7,98 Disulfoton 10 52,31 2,156 54,47 1,00 5,45 16,50 Chlorpyrifos 10 63,23 7,225 70,46 1,00 7,05 21,35 Phenothrin 10 52,08 3,144 55,22 1,00 5,52 16,73 Permethrin 10 13,53 4,108 17,64 1,00 1,76 5,34 X (μg/L) V (ml) DF LOD ( μg/kg) LOQ ( μg/kg) 53 Nhận x t: từ kết O phân tích theo bảng tính phù hợp v i c c gi trị kết n n m u đ khảo s t c đ t i 3.9 ỨNG DỤNG CÁC KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU PHÂN TÍCH DƢ LƢỢNG TTS TRONG MỘT SỐ MẪU RAU QUẢ TƢƠI TẠI THÀNH PHỐ CAO LÃNH, TỈNH ĐỒNG THÁP Phư ng ph p ph n t ch v a ược khảo s t c c i u kiện t i ưu ược ng d ng ể kiể c c tra dư ượng TTS g c ẫu rau ngo i th trường ch thực hiện: ti n h nh phân tích 25 ẫu quả) ược Th p, n h u c v c c tổng hợp ua t i ẫu ược cải ngọt, 05 ẫu rau (20 ẫu rau 05 hợ Nông sản – Phường – TP Cao Lãnh – Đ ng ua t i nhi u s p ẫu cải anh, 05 n rau-c -quả kh c ao g ẫu rau ng t, 05 ẫu u ng v 05 ẫu rau 05 ẫu dưa leo Mẫu sau ua v ược ý theo qu trình chi t t ch ẫu v ph n t ch theo i u kiện ược t i ưu s c ký kh gh p kh i phổ (G /MS) ph n t ch c c ẫu ược tổng hợp ảng 17: Bảng 3.17: K t phân tích mẫu rau mẫu mẫu mẫu - - 157,17 15,35 - Chlorfenvinphos 41,24 - - 32,67 28,80 Phenothrin 10,76 9,69 11,31 8,43 11,79 Permithrin - - - - - Cyfluthrin 105,21 - - - - Cypermethrin 216,19 74,83 255,91 - - Chlorpyrifos - - - - - Chlorfenvinphos 30,25 - - - - Phenothrin 13,59 - 8,94 - - Permithrin - - - - - Cyfluthrin 122,82 106,88 94,27 121,07 108,12 Cypermethrin - 114,68 - 118,78 - Chlorpyrifos - - - - - Ho t chất RA U CẢI XANH NG ÓT CẢI NGỌT Nồng độ mẫu (μg/kg) mẫu mẫu Chlorpyrifos N n mẫu t 54 26,59 - - - - 16,23 8,33 9,32 18,47 Permithrin - - - - - Cyfluthrin - - 72,24 72,72 73,66 Cypermethrin 616,52 100,29 687,50 109,04 180,23 Chlorpyrifos - - - - - Chlorfenvinphos 40,13 47,08 - - - Phenothrin - - 35,39 30,54 28,13 Permithrin - - - - - Cyfluthrin 125,91 116,31 109,93 120,06 97,85 Cypermethrin 171,73 - - - - Chlorpyrifos - - - - - Chlorfenvinphos 35,23 29,82 - - - Phenothrin - - - - - Permithrin 8,51 - - 15,02 29,19 Cyfluthrin 95,48 108,73 92,84 108,65 102,44 Cypermethrin DƢA LEO 47,47 Phenothrin RAU MUỐNG Chlorfenvinphos 168,87 219,14 212,30 172,14 147,41 Nhận x t: Từ bảng kết phân tích dư lượng c c hoạt ch t c c m u r u cho t c i nh n tổng qu t v mức độ nhi m TTS gốc lân hữu cúc tổng hợp là: Chlorop rifos có v / m u r u nhi m TTS (nồng độ μg/kg); phenothrin không phát m u ph t m u r u r t nhi u / m u mức nồng độ – μg/kg; permethrin không ph t m u r u lại ph t m u có / m u nhi m TTS mức nồng độ ch t khảo s t c n ph t thêm - μg/kg Ngo i hoạt hoạt ch t chlorfenvinphos, cyfluthrin, c permethrin có r u r t nhi u v nồng độ tương đối c o 55 KẾT LUẬN Xu t ph t t nhiệ v ặt c a t i, dựa v o k t nghiên c u thu ược, ch ng r t c c k t uận sau: Đã khảo s t v TTS g dựng ược ột phư ng ph p ph n t ch dư ượng 05 ho t ch t g c l n h u c v c c tổng hợp g : diazinone, disulfoton, chlorpyrifos, phenothrin, permethrin rau ằng s c ký kh gh p kh i phổ (G /MS) Đã khảo sát ch ng minh l i quy trình v thi t b phân tích với quy trình x lý mẫu c ản tuân th theo TCVN 9333:2012, AOAC 2007.01, hóa ch t s d ng theo Kit QuECHERS c a Phenomenex Đã tì ược i u kiện t i ưu s c ký khí ghép kh i phổ (GC/MS): nhiệt ộ Injector 250oC, t c ộ dịng 1,40ml/phút, ch ộ khơng chia dịng, t c ộ tăng nhiệt 7,0oC/phút, nhiệt ộ Interface: 280oC, nhiệt ộ Ion Source: 200oC, ch ộ Đã khảo s t tì nh ượng SIM với k thuật EI ược khoảng n tính c a ho t ch t có n ng n 1750 μg/ với hệ s tư ng quan R2 > 0,998 v gi tr ộ t 100 μg/ ộ ặp i chuẩn RSD < 1% , mẫu phân tích RSD < 10% Đã rau ng t, rau Đã c nh hiệu su t thu h i 05 n n u ng, dưa eo) với R > 70% c nh giới h n phát giới h n pháp với LOD = 1,76 ÷ 7,05 μg/kg v c u c ẫu (cải ngọt, cải anh, nh ượng c a phư ng OQ = 5,34 ÷ 21,35 μg/kg p ng yêu nh dư ượng thu c BVTV rau theo TCVN 5624-1:2009 [6] Đã ng d ng c c k t nghiên c u thu ược phân tích dư ượng TTS ột s ẫu rau t i th trường Th nh ph ao ãnh, tỉnh Đ ng Tháp cho k t quả: - Trên rau c 02/25 ẫu nhiễ chenothrin (khơng có quả) ch orop rifos, 14/25 ẫu nhiễ 56 - Trên c 03/25 ẫu nhiễ permethrin (khơng có rau) - Trên rau v không ph t diazinone v disu foton Ngoài 05 ho t ch t khảo s t c n ph t thê nhi u rau c ho t ch t chlorfenvinphos, cyfluthrin, cypermethrin với n ng ộ cao ặt 03 ... lý chọn t i: ? ?Nghiên cứu xác định dư lượng thuốc trừ sâu nhóm lân hữu v cúc tổng hợp số rau tươi Th nh phố Cao Lãnh, tỉnh Đồng Th p Phương ph p sắc ký khí ghép khối phổ (GC/ MS)? ?? ể nghiên c u v... DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH LÊ VĂN THOẠI NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH DƢ LƢỢNG THUỐC TRỪ SÂU NHÓM LÂN HỮU CƠ VÀ CÚC TỔNG HỢP TRONG MỘT SỐ RAU QUẢ TƢƠI TẠI TP. CAO LÃNH, TỈNH ĐỒNG THÁP BẰNG PHƢƠNG PHÁP... cyhalothrin, cyfluthrin Một s hợp ch t nhóm cúc tổng hợp nghiên c u bày bảng 1.2: t i ược trình 11 Bảng 1.2: T n, cơng thức cấu t o dung mơi hịa tan Một số hợp chất nhóm cúc tổng hợp [15], [17] Tên