ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TRƯƠNG XUÂN HIẾU XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI PARACETAMOL, CAFEIN VÀ PHENOBARBITAL TRONG THUỐC THẦN KINH D3 BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ HẤP THỤ PHÂN TỬ (UV-Vis) VÀ PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC). LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VẬT CHẤT THÁI NGUYÊN - NĂM 2014 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TRƯƠNG XUÂN HIẾU XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI PARACETAMOL, CAFEIN VÀ PHENOBARBITAL TRONG THUỐC THẦN KINH D3 BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ HẤP THỤ PHÂN TỬ (UV-Vis) VÀ PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC). Chuyên ngành: Hóa phân tích Mã số: 60.44.01.18 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VẬT CHẤT Hướng dẫn khoa học: TS. MAI XUÂN TRƯỜNG THÁI NGUYÊN - NĂM 2014 LỜI CẢM ƠN Luận văn này được thực hiện tại phòng thí nghiệm của Bộ môn Hóa học phân tích, Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên. Để hoàn thành được luận văn này tôi đã nhận được rất nhiều sự động viên, giúp đỡ của nhiều cá nhân và tập thể. Trước hết, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy giáo TS. Mai Xuân Trường đã tận tình chỉ bảo, động viên và giúp đỡ tôi trong quá trình học tập, nghiên cứu và thực hiện luận văn. Xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới các thầy cô giáo, người đã đem lại cho tôi những kiến thức bổ trợ vô cùng có ích trong những năm học vừa qua. Xin gửi lời cám ơn chân thành tới Ban giám hiệu, phòng Đào tạo, Khoa Hoá học và các cán bộ phòng thí nghiệm Khoa Hoá học Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên, đã tạo điều kiện cho tôi trong quá trình học tập, nghiên cứu và hoàn thiện luận văn. Cuối cùng tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè, đồng nghiệp những người đã luôn bên tôi, động viên và khuyến khích tôi trong quá trình thực hiện đề tài nghiên cứu của mình. Tôi xin chân thành cảm ơn ! Thái Nguyên, tháng 8 năm 2014 Tác giả Trương Xuân Hiếu i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: đề tài "Xác định đồng thời paracetamol, cafein và phenobarbital trong thuốc thần kinh D3 theo phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UV-Vis) và phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) " là do bản thân tôi thực hiện. Các số liệu, kết quả trong đề tài là trung thực. Nếu sai sự thật tôi xin chịu trách nhiệm. Thái nguyên, tháng 08 năm 2014 Tác giả luận văn Trương Xuân Hiếu XÁC NHẬN CỦA KHOA HOÁ HỌC TRƯỜNG ĐHSP- ĐHTN XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN TS. Mai Xuân Trường ii MỤC LỤC Lời cảm ơn i Lời cam đoan ii Mục lục iii Danh mục các từ viết tắt iv Danh mục các bảng v Danh mục các hình vi Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2 1.1. Tổng quan về paracetamol, cafein và phenobarbital 2 1.1.1. Paracetamol 2 1.1.2 Cafein. 5 1.1.3 Phenobarbital 9 1.2. Các định luật cơ sở của sự hấp thụ ánh sáng. 12 1.2.1. Định luật Bughe - Lămbe – Bia 12 1.2.2. Định luật cộng tính 13 1.2.3. Những nguyên nhân làm cho sự hấp thụ ánh sáng của dung dịch không tuân theo định luật Bughe – Lămbe – Bia 13 1.3. Một số phương pháp xác định đồng thời các cấu tử 15 1.3.1. Phương pháp Vierordt 15 1.3.2. Phương pháp phổ đạo hàm 16 1.3.3. Phương pháp mạng nơron nhân tạo 18 1.3.4. Phương pháp lọc Kalman 20 1.4. Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC 20 1.4.1. Nguyên tắc của phương pháp HPLC 21 1.4.2. Sơ đồ máy HPLC 22 1.4.3. Kết quả xác định một số chất theo phương pháp HPLC 22 Chương 2: THỰC NGHIỆM 24 iii 2.1. Nội dung nghiên cứu 24 2.1.1. Phương pháp HPLC 24 2.1.2. Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 24 2.2. Phương pháp nghiên cứu 25 2.2.1. Phương pháp nghiên cứu lý thuyết 25 2.2.2. Phương pháp thực nghiệm 25 2.3. Đánh giá độ tin cậy của quy trình phân tích 26 2.3.1. Giới hạn phát hiện (LOD) 26 2.3.2. Giới hạn định lượng (LOQ) 26 2.3.3. Đánh giá độ tin cậy của phương pháp 26 2.3.4. Đánh giá kết quả phép phân tích theo thống kê 27 2.4. Thiết bị, dụng cụ và hóa chất 28 2.4.1. Thiết bị 28 2.4.2. Dụng cụ 28 2.4.3. Hóa chất 28 2.4.4. Chế phẩm thần kinh D3 29 2.5. Chuẩn bị các dung môi để hòa tan mẫu 29 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 31 3.1. Xác định đồng thời paracetamol, cafein và phenobarbital theo phương pháp HPLC 31 3.1.1. Xây dựng điều kiện để xác định đồng thời 3 chất paracetamol, cafein và phenobarbital 31 3.1.2. Đánh giá phương pháp định lượng 34 3.1.3. Khảo sát độ đúng của phép xác định PRC, CFI và PNB theo phương pháp thêm chuẩn 41 3.2. Xác định đồng thời paracetamol, cafein và phenobarbital theo phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 43 3.2.1 Khảo sát phổ hấp thụ phân tử của paracetamol, cafein và phenobarbital.43 3.2.2. Khảo sát sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CFI và PNB vào pH44 3.2.3. Khảo sát sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CFI và PNB theo thời gian 45 3.2.4. Khảo sát sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CFI và PNB theo nhiệt độ 46 3.2.5. Khảo sát khoảng tuyến tính tuân theo định luật Bughe – Lambe – Bia của PRC, CFI và PNB. Xác định chỉ số LOD và LOQ. 48 3.2.6. Khảo sát và đánh giá độ tin cậy của phương pháp nghiên cứu trên các mẫu tự pha 54 3.2.7. Xác định hàm lượng PRC, CFI và PNB trong thuốc thần kinh D3 và đánh giá độ đúng của phép phân tích theo phương pháp thêm chuẩn 61 KẾT LUẬN 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO 69 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Tiếng việt Tiếng Anh Viết tắt Paraxetamon Paracetamol PRC Cafêin Cafein CFI Phenobabital Phenobarbital PNB Giới hạn phát hiện Limit Of Detection LOD Giới hạn định lượng Limit Of Quantity LOQ Sai số tương đối Relative Error RE Độ lệch chuẩn Standard Deviation S hay SD Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao High Performance Liquid Chromatography HPLC iv DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1. Giá trị các đại lượng đặc trưng của PRC, CFI và PNB 36 Bảng 3.2. Kết quả khảo sát thời gian lưu của PRC, CFI và PNB 36 Bảng 3.3. Kết quả khảo sát diện tích pic của PRC, CFI và PNB 36 Bảng 3.4. Mối tương quan giữa nồng độ và diện tích pic của PRC, CFI và PNB 37 Bảng 3.5. Kết quả khảo sát độ lặp lại 40 Bảng 3.6. Kết quả phân tích thuốc thần kinh D3 41 Bảng 3.7. Kết quả khảo sát độ đúng 42 Bảng 3.8. Độ hấp thụ quang của PRC, CFI và PNB ở các giá trị pH 44 Bảng 3.9. Sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CFI và PNB theo thời gian 45 Bảng 3.10. Sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CFI và PNB theo nhiệt độ 47 Bảng 3.11. Độ hấp thụ quang của dung dịch PRC ở các giá trị nồng độ 48 Bảng 3.12. Kết quả xác định LOD và LOQ của PRC 50 Bảng 3.13. Sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của CFI theo nồng độ 51 Bảng 3.14. Kết quả tính LOD và LOQ của CFI 52 Bảng 3.15. Sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PNB theo nồng độ 53 Bảng 3.16. Kết quả tính LOD và LOQ của PNB 54 Bảng 3.17. Pha chế các dung dịch hỗn hợp PRC và CFI 54 Bảng 3.18. Kết quả tính nồng độ, sai số của PRC và CFI trong hỗn hợp 55 Bảng 3.19. Pha chế các dung dịch hỗn hợp PRC và PNB 56 Bảng 3.20. Kết quả tính nồng độ, sai số của PRC và PNB trong hỗn hợp 57 Bảng 3.21. Pha chế các dung dịch hỗn hợp CFI và PNB 58 Bảng 3.22. Kết quả tính nồng độ, sai số của CFI và PNB trong hỗn hợp 58 Bảng 3.23. Pha các dung dịch chuẩn PRC, CFI, PNB và hỗn hợp 59 Bảng 3.24. Kết quả tính nồng độ, sai số của PRC, CFI và PNB 60 v Bảng 3.25. Kết quả tính nồng độ, sai số PRC, CFI và PNB trong mẫu thuốc thần kinh D3 62 Bảng 3.26. Thành phần các dung dịch chuẩn PRC, CFI và PNB thêm vào dung dịch mẫu thuốc thần kinh D3 Error! Bookmark not defined. Bảng 3.27. Kết quả xác định độ thu hồi của PRC, CFI và PNB trong mẫu thuốc thần kinh D3 64 [...]... "Định lượng đồng thời paracetamol, cafein, phenobarbital trong thuốc thần kinh D3 bằng phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UV- Vis) và phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) 1 Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan về paracetamol, cafein và phenobarbital 1.1.1 Paracetamol 1.1.1.1 Giới thiệu chung Paracetamol hay acetaminophen (tên được chấp nhận tại Hoa Kỳ) là thuốc có tác dụng hạ sốt và. .. cho phương pháp HPLC để định lượng đồng thời PRC, CFI và PNB Xử lý thống kê các kết quả thu được 2.2.2.2 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử Nghiên cứu các điều kiện tối ưu cho phép đo quang PRC, CFI và PNB - Tiến hành xác định đồng thời 2 chất trong các mẫu giả tự pha - Tiến hành xác định đồng thời 3 chất trong các mẫu giả tự pha - Tiến hành xác định đồng thời 3 chất trong mẫu thuốc thần kinh D3. .. được: - Khảo sát tính thích hợp của hệ thống - Khảo sát khoảng tuyến tính giữa nồng độ và diện tích pic của các chất - Khảo sát độ chính xác của phương pháp - Khảo sát độ đúng của phương pháp Xác định đồng thời PRC, CFI và PNB trong thuốc thần kinh D3 theo phương pháp HPLC 2.1.2 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử - Khảo sát trên toàn phổ từ 200 nm đến 900 nm để xác định bước sóng hấp thụ quang cực... đại có độ chính xác cao ngày càng được quan tâm Nhiều phương pháp có độ lặp và độ chính xác cao đã được ứng dụng như phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS), quang phổ hấp thụ phân tử (UV- Vis) Tuy nhiên các phương pháp mới chỉ định lượng một đến hai thành phần của thuốc Chính vì thế việc định lượng đồng thời các chất mà không phải tách riêng từng chất ra khỏi hỗn hợp là một phương pháp đang rất... nghiệm thuốc, máy phân tích HPLC là công cụ đắc lực trong phân tích các thuốc đa thành phần cho phép định tính và định lượng Phương pháp này ngày càng được sử dụng rộng rãi và phổ biến vì nhiều lý do: có độ nhạy cao, khả năng định lượng tốt, thích hợp tách các hợp chất khó bay hơi hoặc dễ phân hủy nhiệt 1.4.1 Nguyên tắc của phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao Sắc ký lỏng hiệu năng cao là một phương pháp. .. đó xác định giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ) - Định lượng đồng thời PRC, CFI và PNB trong các mẫu tự pha để xác định các sai số khi tỷ lệ hàm lượng PRC, CFI và PNB khác nhau - Xây dựng quy trình phân tích mẫu thuốc thần kinh D3, từ đó đánh giá độ tin cậy của phương pháp thông qua việc tính toán độ đúng và độ lặp lại của phép đo - Định lượng đồng thời PRC, CFI và PNB trong mẫu thuốc. .. 1%, với hỗn hợp 3 cấu tử có sai số nhỏ hơn 2% [10, 18, 19] 1.4 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao ra đời từ năm 196 7-1 968 trên cơ sở phát triển và cải tiến từ phương pháp sắc ký cột cổ điển Hiện nay phương 20 pháp HPLC ngày càng phát triển và hiện đại hoá cao nhờ sự phát triển nhanh chóng của ngành chế tạo máy phân tích Nó áp dụng rất nhiều trong các ngành kiểm... để xác định đồng thời paracetamol và clopheninamin maleat trong thuốc viên nén bằng cách đo độ hấp thụ quang ở các bước sóng 242 và 264 nm [2] Phương pháp Vierordt đơn giản, dễ thực hiện nhưng chỉ áp dụng được khi số cấu tử trong dung dịch hỗn hợp ít, phổ hấp thụ quang phân tử xen phủ nhau không nhiều, tính chất cộng tính độ hấp thụ quang được thoả mãn nghiêm ngặt, thiết bị đo quang tốt thì phương pháp. .. dung dịch đo phổ trong cuvet là không hằng định suốt trong thời gian đo Vì trong một mức độ nhất định độ hấp thụ quang A phụ thuộc vào nhiệt độ 1.3 Một số phương pháp xác định đồng thời các cấu tử 1.3.1 Phương pháp Vierordt Để xác định nồng độ của các cấu tử trong hỗn hợp, lần đầu tiên Vierordt đã đo độ hấp thụ quang của dung dịch hỗn hợp ở các bước sóng khác nhau, sau đó thiết lập hệ phương trình... quang phổ hấp thụ phân tử để xây dựng quy trình xác định đồng thời PRC, CFI và PNB trong thuốc thần kinh D3 trên thị trường 2.1.1 Phương pháp HPLC Lựa chọn các thông số của máy HPLC: - Thể tích bơm mẫu - Cột tách - Nhiệt độ Khảo sát để lựa chọn các điều kiện sắc ký: - Bước sóng thích hợp để phát hiện đồng thời 3 chất - Pha động: thành phần, tỷ lệ pha động, tốc độ dòng Đánh giá quy trình sắc ký đã xây . XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI PARACETAMOL, CAFEIN VÀ PHENOBARBITAL TRONG THUỐC THẦN KINH D3 BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ HẤP THỤ PHÂN TỬ (UV- Vis) VÀ PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC). . tài " ;Xác định đồng thời paracetamol, cafein và phenobarbital trong thuốc thần kinh D3 theo phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UV- Vis) và phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) ". " ;Định lượng đồng thời paracetamol, cafein, phenobarbital trong thuốc thần kinh D3 bằng phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UV- Vis) và phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) ”.