ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ THANH HOA NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ, XÁC ĐỊNH YẾU TỐ GÂY BỆNH CỦA VI KHUẨN E COLI TRONG BỆNH PHÙ ĐẦU Ở LỢN CON TẠI TỈNH PHÚ THỌ VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: Thú Y Mã số: 60.62.50 LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Người hướng dẫn khoa học: TS NGUYỄN VĂN SỬU THÁI NGUYÊN - 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ THANH HOA NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ, XÁC ĐỊNH YẾU TỐ GÂY BỆNH CỦA VI KHUẨN E COLI TRONG BỆNH PHÙ ĐẦU Ở LỢN CON TẠI TỈNH PHÚ THỌ VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP THÁI NGUYÊN - 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Các tài liệu tham khảo, trích dẫn có nguồn gốc rõ ràng TÁC GIẢ LUẬN VĂN Nguyễn Thị Thanh Hoa Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ii LỜI CẢM ƠN Trong q trình thực hồn thành luận văn, với nỗ lực thân, tơi ln nhận giúp đỡ tận tình trực tiếp Thầy, Cô hướng dẫn, xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới: - T.S Nguyễn Văn Sửu - Th.S: Nguyễn Thị Kim Oanh Đã tận tình bảo, hướng dẫn tơi hồn thành nội dung nghiên cứu đề tài mang lại kết ngày hôm Tôi xin chân thành cảm ơn tạo điều kiện giúp đỡ Lãnh đạo Trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên, Khoa sau đại học Trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên, Lãnh đạo tập thể cán Bộ môn Vi trùng, phòng ban chức Trung tâm chẩn đốn Thú y Cục thú y, lãnh đạo, phịng đào tạo khoa chăn nuôi thú y Trường Trung học Nông lâm nghiệp Phú Thọ Xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu tập thể lãnh đạo cán Chi cục Thú y tỉnh Phú Thọ, tập thể Lãnh đạo cán Trạm Thú y huyện: huyện Thanh Ba, huyện Phù Ninh, huyện Đoan Hùng anh, chị thú y viên sở, hộ chăn nuôi thuộc xã Khải Xuân, Võ Lao, Đông Thành, Phú Mỹ, Tiên Phú, Hạ Giáp, Chân Mộng, Minh Phú Vụ Quan Nhân dịp xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới gia đình, bạn bè đồng nghiệp giúp đỡ, động viên tơi q trình hồn thành luận văn Xin trân trọng cảm ơn! Thái Nguyên, tháng năm 2010 TÁC GIẢ LUẬN VĂN Nguyễn Thị Thanh Hoa Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tình hình nghiên cứu bệnh phù đầu 1.1.1 Tình hình nghiên cứu nước 1.1.2 Tình hình nghiên cứu nước 1.2 Một số hiểu biết chung bệnh phù đầu lợn 1.2.1 Khái niệm bệnh phù đầu lợn 1.2.2 Nguyên nhân gây bệnh phù đầu lợn 1.2.3 Dịch tễ học 1.2.4 Cơ chế gây bệnh 1.2.5 Triệu chứng 1.2.6 Bệnh tích 10 1.2.7 Chẩn đoán 11 1.2.8 Phòng bệnh 11 1.2.9 Điều trị 12 1.3 Một số nghiên cứu vi khuẩn E coli gây bệnh phù đầu lợn 13 1.3.1 Đặc điểm hình thái 13 1.3.2 Đặc điểm nuôi cấy 14 1.3.3 Đặc tính sinh vật học vi khuẩn E coli 15 1.3.4 Cấu trúc kháng nguyên E coli 15 1.3.5 Đặc tính gây bệnh vi khuẩn E coli 18 1.3.6 Vacxin phòng bệnh phù đầu lợn (E coli dung huyết) 29 CHƢƠNG 2: NỘI DUNG - NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Nội dung nghiên cứu 30 2.1.1 Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ bệnh phù đầu lợn tỉnh Phú Thọ 30 2.1.2 Xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli bệnh phù đầu lợn tỉnh Phú Thọ 30 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iv 2.1.2.6 Xác định độc tố VT2e kháng nguyên F18 phương pháp PCR 31 2.1.2.7 Xác định khả mẫn cảm kháng sinh vi khuẩn E coli phân lập 31 2.1.3 Thử nghiệm phác đồ phòng điều trị bệnh phù đầu lợn 31 2.2 Nguyên liệu dùng nghiên cứu 31 2.2.1 Mẫu bệnh phẩm 31 2.2.2 Các loại hóa chất mơi trường sử dụng nghiên cứu 31 2.2.3 Các loại kháng huyết chuẩn để định type vi khuẩn E coli phân lập được: Kháng huyết chế theo quy trình Nhật (JICA) Nhật Bản cung cấp 32 2.2.4 Các loại vacxin phòng bệnh phù đầu 32 2.2.5 Đối tượng, địa điểm thời gian nghiên cứu 32 2.2.6 Nguyên liệu dùng cho PCR 32 2.3 Phương pháp nghiên cứu 33 2.3.1 Phương pháp nghiên cứu dịch tễ học 33 2.3.2 Phương pháp phân lập vi khuẩn E coli 37 2.3.3 Phương pháp giám định số đặc tính sinh vật hóa học chủng vi khuẩn E coli phân lập phương pháp thường quy 39 2.3.4 Phương pháp xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn phân lập 42 2.3.5 Đánh giá hiệu sử dụng vacxin phòng bệnh phù đầu cho lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi 50 2.3.6 Thử nghiệm số phác đồ điều trị phù đầu cho lợn 51 2.3.7 Phương pháp xử lý số liệu 51 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 52 3.1 Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ bệnh phù đầu lợn Phú Thọ 52 3.1.1 Kết điều tra bệnh phù đầu lợn số huyện tỉnh Phú Thọ 52 3.1.2 Kết điều tra tình hình bệnh phù đầu lợn tỉnh Phú Thọ qua tháng năm 57 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn v 3.1.3 Tình hình bệnh phù đầu lợn tỉnh Phú Thọ theo giai đoạn tuổi 59 3.1.4 Kết điều tra tình hình bệnh phù đầu lợn tỉnh Phú Thọ theo phương thức chăn nuôi 62 3.1.5 Những biểu lâm sàng bệnh tích lợn mắc bệnh phù đầu 66 3.2 Xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli bệnh phù đầu lợn tỉnh Phú Thọ 70 3.2.1 Kết phân lập vi khuẩn E coli loại mẫu bệnh phẩm 70 3.2.2 Kết giám định số đặc tính sinh hố chủng vi khuẩn E coli phân lập 72 3.2.3 Kết xác định serotype kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập 74 3.2.4 Xác định khả gây dung huyết chủng E coli phân lập 76 3.2.5 Xác định độc tố đường ruột (Enterotoxin) vi khuẩn E coli phân lập 78 3.2.6 Xác định độc tố VT2e kháng nguyên F18 phương pháp PCR 80 3.2.7 Xác định khả mẫn cảm kháng sinh vi khuẩn E coli phân lập 82 3.2.8 Xác định độc lực chủng vi khuẩn E coli chuột bạch 85 3.3 Thử nghiệm phác đồ phòng điều trị bệnh phù đầu lợn 87 3.3.1 Kết qủa thử nghiệm vacxin phòng bệnh 87 3.3.2 Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh phù đầu lợn 88 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 92 Kết luận 92 Kiến nghị 94 TÀI LIỆU THAM KHẢO 95 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn vi KÝ HIỆU CÁC CHỮ VIẾT TẮT TRONG LUẬN VĂN olV : Colicin V cs : Cộng ETEC : Enterotoxigenic Escherichia coli EMB : Eosin Methylene Blue Agar E coli : Escherichia coli Hly : Heamolyzin LT : Heat-Labile enterotoxin ST (a,b) : Heat-Stable Enterotoxin (a, b) Kg : Kilogram ml : Mililit NXB : Nhà xuất PCR : Polymerase Chain Reaction RR : Relative Risk Stx : Shiga toxin Stx2 : Shiga toxin Stx2e : Shiga toxin 2e SLT : Shiga-like toxin SLT1 : Shiga-like toxin SLT2 : Shiga-like toxin n : Số lượng tr : Trang TSI : Triple Sugar Iron % : Tỷ lệ phần trăm VTEC : Verotoxigenic Escherichia coli VT2e : Veterotoxin 2e VP : Voges Pros Kaver Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1: Bảng đánh giá kết đường kính vịng vơ khuẩn theo tiêu chuẩn Hội đồng Quốc gia Hoa Kỳ 46 Bảng 2.2: Chu trình phản ứng PCR…………………………………… 49 Bảng 2.3: Sơ đồ bố trí thí nghiệm đánh giá hiệu phịng bệnh phù đầu Vacxin………………………………………………………… 50 Bảng 3.1: Kết điều tra bệnh phù đầu lợn số huyện tỉnh Phú Thọ 52 Bảng 3.2 So sánh nguy mắc phù đầu lợn huyện 54 Bảng 3.3 So sánh nguy chết lợn mắc phù đầu huyện 55 Bảng 3.4: Tình hình bệnh phù đầu lợn tỉnh Phú Thọ qua tháng năm (1/2009 - 1/2010) 58 Bảng 3.5: Tình hình bệnh phù đầu lợn tỉnh Phú Thọ theo giai đoạn tuổi 59 Bảng 3.6 So sánh nguy mắc phù đầu lứa tuổi lợn 61 Bảng 3.7 So sánh nguy chết lợn mắc phù đầu lứa tuổi lợn 62 Bảng 3.8: Kết bệnh phù đầu lợn tỉnh Phú Thọ theo phương thức chăn nuôi 63 Bảng 3.9 So sánh nguy mắc phù đầu phương thức chăn nuôi 64 Bảng 3.10 So sánh nguy chết lợn mắc phù đầu phương thức chăn nuôi 65 Bảng 3.11: Những biểu lâm sàng chủ yếu lợn bị phù đầu 66 Bảng 3.12: Bệnh tích chủ yếu lợn bị bệnh phù đầu 68 Bảng 3.13 Tỷ lệ phân lập vi khuẩn E coli từ bệnh phẩm 71 Bảng 3.14: Kết giám định số đặc tính sinh hố chủng vi khuẩn E coli phân lập 73 Bảng 3.15: Kết xác định Serotype kháng nguyên O chủng E coli phân lập 75 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn viii Bảng 3.16: Kết xác định khả gây dung huyết chủng E coli phân lập 77 Bảng 3.17: Kết xác định khả sản sinh độc tố đường ruột chủng E coli phân lập 79 Bảng 3.18: Kết xác định độc tố Vero (VT2e) kháng nguyên F18 vi khuẩn E coli phân lập 80 Bảng 3.19: Kết kiểm tra khả mẫn cảm với số kháng sinh chủng E coli phân lập 83 Bảng 3.20: Kết xác định độc lực chủng vi khuẩn E coli phân lập 86 Bảng 3.21 Kết qủa thử nghiệm vacxin phòng bệnh phù đầu lợn 87 Bảng 3.22 Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh phù đầu lợn 90 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 95 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Đặng Xuân Bình (2001) "Tình hình bệnh phù đầu lợn tỉnh Cao Bằng biện pháp phịng trị bệnh", Tạp chí khoa học công nghệ môi trường Sở KHCN & MT Cao Bằng, Số 4, 2001, Tr 19-20 Nguyễn Xuân Bình, Võ Hồng Ngun (2000), Bệnh phát sinh lợn, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, Tr 30-37 Nguyễn Xuân Bình (2002) Bệnh sưng mắt co giật phù nề (Edena Diase-ED) phòng trị bệnh lợn nái, lợn con, lợn thịt, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, Tr 93-96 Nguyễn Xn Bình, Võ Hồng Ngun, (2002), Bệnh phát sinh lợn NXB Nông Nghiệp, Hà Nội Tô Minh Châu, Nguyễn Ngọc Hải cs (1999), “Bước đầu phân lập định danh E coli gây bệnh phù đầu lợn sau cai sữa”, Tập san Khoa học kỹ thuật Nông lâm nghiệp, số 3, tr 60-63 Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phượng, (1986), "Bệnh gia súc non", tập II, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 30-36 Bùi Xuân Đồng (2002), “Bệnh phù đầu E coli gây lợn Hải Phòng biện pháp phịng chống”, Tạp chí KHKT thú y, tập IX, số 3, tr 98-99 Nguyễn Ngọc Hải, Tơ Minh Châu cs (2000), " Tìm hiểu ngun nhân hội chứng thần kinh phù mặt heo sau cai sữa", Tạp chí KHKT thú y, Tập VII, số 2, tr.27-35 Nguyễn Ngọc Hải Amilon (2001), “ứng dụng kỹ thuật PCR nghiên cứu vi khuẩn Escherichia coli gây phù heo cai sữa", Tạp chí KHKT Thú y, tập VIII, số 1, tr 27-30 10 Phạm Khắc Hiếu Bùi Thị Tho (1999) Một số kết nghiên cứu tính kháng thuốc vi khuẩn gây bệnh thú y Kết thử nghiên cứu KHKT khoa CNTY (1996-1998), NXB Nông nghiệp, Hà Nội, Tr 134-138 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 96 11 Phạm Trọng Hổ (2007) Bệnh phù đầu lợn Escherichia coli gây tỉnh Bình Định-Biện pháp phịng trị, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, năm 2007 12 Nguyễn Thị Kim Lan (2003), “Tình hình bệnh phù đầu lợn E coli số địa phương thuộc tỉnh Thái Nguyên”, Tạp chí KHKT thú y, tập X, số 1, tr 64-68 13 Nguyễn Thị Kim Lan (2004) “Thử nghiệm phòng trị bệnh E coli dung huyết cho lợn Thái Nguyên Bắc giang”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XI, số 3, Tr 35-39 14 Nguyễn Thị Kim Lan (2005), “Một số đặc điểm vi khuẩn E coli gây bệnh phù đầu lợn Thái Nguyên Bắc Giang”, Tạp chí KHKT Thú y, tập XII, số 3, tr.29-33 15 Nguyễn Đức Lưu, Nguyễn Hữu Vũ, (2002), Bệnh ỉa chảy phù thũng sau cai sữa lợn (Oedema Disease) Một số bệnh quan trọng lợn NXB VHTT, Hà Nội, tr 69-73 16 Martin Bergeland, Harold Kurtz, 2002, Bệnh phù thũng Cẩm nang chăn nuôi lợn công nghiệp NXB Nông Nghiệp, Hà Nội, 767-769 17 Trần Thị Phương Nga (2006), “Phân lập, xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli gây bệnh phù đầu lợn số tỉnh phía bắc đánh giá hiệu vacxin phòng bệnh”, Luận văn Thạc sĩ Nông nghiệp, tr 38 - 54 18 Lê Thanh Nghị cs (2005), "Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ học bệnh phù đầu lợn từ 21 ngày tuổi đến 90 ngày tuổi huyện Sóc Sơn, Hà Nội biện pháp phòng trị", Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp, tr 63-64 19 Nguyễn Khả Ngự (2000), “Xác định yếu tố gây bệnh E coli bệnh phù đầu lợn đồng Sơng Cửu Long, chế vacxin phịng bệnh”, Luận án tiến sĩ nông nghiệp, Viện Thú y Quốc gia, tr 68-69, 79, 80-92, 109, 115, 138-139 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 97 20 Trần Thanh Phong (1996), “Bệnh truyền nhiễm vi trùng heo”, Tủ sách trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh, tr.96, 101, 103-108 21 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Vũ Bình Minh, Đỗ Ngọc Thuý (2000), “Kết phân lập vi khuẩn E coli Samonella lợn mắc bệnh tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh hóa chủng vi khuẩn phân lập biện pháp phòng trị” Kết nghiên cứu KHKT thú y năm 1996-2000, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, tr 171-176 22 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Đỗ Ngọc Thuý cs (2004), “Bệnh phù đầu vi khuẩn E coli dung huyết gây Bình Định Hà tây Sử dụng vacxin phịng bệnh", Báo cáo khoa học chăn ni thú y, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, 2004, tr 123-136 23 Phạm Ngọc Thạch, Phạm Thành Nhưng (2004), “Một số đặc điểm bệnh lý lợn mắc bệnh phù đầu E coli biện pháp phòng trị”, Tạp chí KHKT thú y, tập XI, số 4, tr.42-48 24 Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (1974), “Giáo trình thực tập Vi sinh vật học thú y”, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, 1974, tr 81-98 25 Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (1997), “Giáo trình Vi sinh vật thú y”, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, 1997, tr 81-84.27 26 Nguyễn Như Thanh (2001), Dịch tễ học thú y, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr22-23 27 Trịnh Công Thành (1998), Thống kê ứng dụng nghiên cứu thú y, Trường Đại học Nơng Lâm Thành phố Hồ Chí Minh, tr 1-8 28 Nguyễn Văn Thiện (1997), Phương pháp nghiên cứu chăn nuôi, NXB Nông nghiệp Hà Nội 29 Nguyễn Văn Thiện, Nguyễn Khánh Quắc, Nguyễn Duy Hoan (2002), Giáo trình phương pháp nghiên cứu chăn ni, NXB Nơng nghiệp, Hà Nội Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 98 30 Nguyễn Quang Tuyên (2008), Vi sinh vật thú y, Nhà xuất Nông nghiệp Hà Nội 31 Trịnh Quang Tuyên, (2006), “Xác định yếu tố gây bệnh E coli bệnh tiêu chảy phù đầu lợn chăn nuôi tập trung”, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện thú y, tr 126-127 TIẾNG ANH 32 Aarestrup F.M., Jorsal S.E., Ahrens P., Jensen N.E Meyling A, (1997), “Molecular characterization of Escherichia coli strains isolated from pigs with edema disease”, J Clin Microbiol, P 20-24 33 Bergey, D H and Holt, J G (1994), “Bergey’s manual of determinative bacteriology”, 9th end Baltimore: Williams and Wilkins 34 Bertschinger, H.U., Eggenberger, U., Jucker, H., and Pfirter, H.P., (1978), "Evaluation of low nutrient, high fibre diets for the prevention of porcine Escherichia coli enterotoxaemia", Vet Microbiol, (3), pp 281 - 290 35 Bertschinger, H.U., Bachamann, M., Mettler, G., Pospischi, A., Schraner, E.M., Stamm, M., Sydler, T., and Wild, P (1990), “Adhesive fimbriae produced invivo by Escherichia coli O139:K12:H1 associated with enterotoxeamia in pigs”, Vet Microbio., (25), pp 267-281 36 Brad Bosworth (1998), “Hemoltyic E coli and Edema disease”, Healthy Hogs, 1998, P 1-4 37 Carter G.R, Chengapa.M.M, Rober T.S.A.W, 1995, Essentials of veterinary Microbiology A warerly Company, 1995, p.45-49 38 Clarence M Fraser, Asa Mays (1986), “The merck veterinary manual”, Sixth edition, Rahway, N.J., USA, P 186-187 39 Clugston, R.E Nielsen, N.O and Roe, W E (1974), “Experimental edema disease of swine (E coli enterotoxemia) The development of hypertension after the intravenous administration of edema disease principle”, Can J Comp Med , P.29-33 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 99 40 Dobercu, L (1983), “New biological effect of edema disease principle (Escherichia coli-neurotoxin) and its use as an in vitro assay for this toxin”, American Journal of veterinary Reseach 44, P.31-34 41 Docic M, Bilkei (2003), “Vaccination of weaned pigs against oedema disease”, Dtsch Tierarztl Wochenschr, 2003 nov: 110 (11), P 466 42 Evan D.G Evan D.J Gorbach S.L (1973), “Production of vascular permeability factor by enterotoxigenic Escherichia coli isolated from man” Infect Immum, V8, p 725-730 43 Fairbrother, J.M., Lariviere, S and Lallier, R (1986), “New fimbrial antigen F165 from Escherichia coli serogroup O115 strains isolated from piglets with diarrhoea”, Infection and immunity, P 10-15 44 Fairbrother, J.M (1992), “Enteric colibacillois diseases of swine”, IOWA state University press/amess, Iowa, USA, 7th Enterotoxin dibin P.489-497 45 Frank Mooller AA Restrup, Sven Frik Jornal, Peter Ahrens, Niels Einar, Jensen and Anders Meyling (1996), “Moleculer characterization of Escherichia coli strains isolated from pigs with edema disease”, Vet Laboratory, 1790 Copenhagen V Denmark, P 20-23 46 Frydendahl K (2002), “Prevalence of serogroups and virulence genes in Escherichia coli associated with postweaning diarrhoea and edema disease in pigs and a comparison of diagnostic approaches”, Vet Micro, P 169-182 47 Gannon V.J.P Gyles, C.L (1990), “Characteristies of Shigenlla-like toxin produed by Escherichia coli ssociated with porcine edema disease”, Veterinary Microbiology 24, 89-100 48 Gannon V.J.P Gyles, C.L Friendship R.W (1998), “Characteristic of Verotoxigenic Escherichia coli from pigs”, Can J Vet Res., P 331-337 49 Giannella, R A (1976), Suckling mouse model of detection of heat-stabe Escherichia coli enterotoxin: characteristics of the model Infection and Immunity 14, 95-99 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 100 50 Guimaraes W.V., J L Santos, M R Henriques, J I Muro-Abad and EF Araujo (2000), “Optimization of PCR technique for diagnosis of edema disease in swine”, Universidade Federal de Vicosa, Brasil, P 53-57 51 Gyles C L., de Grandis S A., Mackenzie C and Brunton J L (1988), “Cloning and nucleotide sequence analysis of the genes determining Verocytotoxin propuction in a porcine edema disease isolate of Escherichia coli”, Microbiol Pathog., P 419-426 52 Imberechts H., De Greve H., Schlicker C., Bouchet H., Pohl P.,Charlier G., Bertschinger H., Wild P., Vandekerckhove J.,Van Dame J., Van Montagu M Lintermans P (1992), “Characterization of F107 fimbriae of Escherichia coli 107/86, which causes edema disease on pigs and nucleotide sequence of the F107 major fimbrial subunit gene, Fed A” Infect Immun., P 60 53 Johansen M, Andresen LO, Jorsal SE, Thomsen LK, Waddell TE, Gyles CL (1997), “Prevention of edema disease in pigs by vaccination with Verotoxin 2e toxoid”, Can J Vet Res 1997, P 280 54 Karch H and Meyer T (1989), “Single primer pair for amplifying segments of distinct shiga-like toxins genes by polymerase chain reaction”, J Clin Microbio., P 2751-2757 55 Kashiwazaki et al (1981), “Vero cytotoxin produced by Escherichia coli strains of animal origin”, Nationnal Institute of animal Health Quarterly (Japan)21, 68-72 56 Konowalchuk, J., Speirs, J.I., Stavric, S (1977), "Vero response to a cytotoxin of Escherichia coli" Infect Immun., (18), pp 775 - 779 57 Kyriakis S.C., V K Tsiloyiannis, J Vlemmas, S Lekkas, E petridou and Sarris (1997), “The efficacy of Enrofloxacin in-feed medication by aPlying different programmes for the control of postweaning oedema disease in weaned piglets”, University of Thessaloniki, Greece, P 523-527 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 101 58 Macleod, D L and Gyles, C L (1991), “Immunization of pigs with a purified Shigalike toxin II variant toxoid”, Vet Microbiol 29, P 309 -318 59 Mailnil J.G (1991), “Les Verocytotoxines d’ Escherichia coli et leur diagnostic par sondes geneiques Ann Med.Vet P579-586 60 Markku Johansen, Lars Ole Andresen, Sven Erik Jorsal, Lars Krogsgard Thomsen, Thomas E Waddell and Carlton L Gyles (1996), “Prevention of edema disease in pigs by vaccination with Verotoxin 2e toxoid”, Can J vet Res 1997, P 280-285 61 Marques et al (1987), “Escherichia coli strain isolated from pigs with edema disease produce a variant of Shiga-like toxin II, Federation of European microbiological Societies Microbiology”, Letters 44, P.33-38 62 Martin Bergeland, Haraldkurtz (1996), “Cẩm nang chăn nuôi lợn công nghiệp”, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, Tr.767-769 63 Matise I.T., Cornick N.A., Booher S.L., Samuel J I., Bosworth B.T and Moon H.W (2001), “Intervention with Shiga toxin (Stx) antibody afther infection by Stx-production Escherichia coli”, J Infect Dis P 347-350 64 Methiyapun, S Pohlenz, J F L and Bertschinger, H.U (1984), “Ultrastructure of the intestinal mucosa in pigs experimentally inoculated with an edema disease producing strain of Escherichia coli (O139:K12:H1)”, Vet Pathol 21, P 516-520 65 Moon H W Issaacs.on R.E Pohlen (1979), “Mechanisms of assocication of enterobacthogenic Escherichia coli with intrstinal epithellins”, Ann J Clin Nutr 32, P 119-127 66 Nagy, B., Whipp, S.C., Imberechts, H., Bertschinger, H.U, Dean-Nytrom, E.A., Casey, T.A., Salajka, E (1997), "Biological relationship between F18ab and F18ac fimbriae of enterotoxigenic and verotoxigenic Escherichia coli from weaned pigs with oedema disease or diarrhoea", Microb Pathog., (22), pp - 11 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 102 67 Nagy, B., Fekete, P.Z (1999), "Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) in farm animals", Vet Res., (30), pp 259 - 284 68 Nielson, no (1986), “Disease of swine 6th edition”, IOWA, State university prees Ames, P 528-540 69 Orskov F, (1978), “Vilurence Factor of the bacterial cell surface”, J Infect., P 630 70 Parma A.E., Sanz M.E., Vinas M.R., Cicuta M.E., Blanco J.và Blanco M (2000), “Toxigenic Escherichia coli isolated from pigs in Argentina”, Vet Microbiol, P 269-276 71 Pollard D L., Johnson W M., Lior H., Tyler S D and Rozee K R (1990), “Rapid and specific detection of Verotoxin genes in Escherichia coli by the polymerase chain reaction “, J Clin Microbiol., P 540-545 72 Rippinger, P., Bertschinger, H.U., Imberechts, H., Nagy, B., Sorg, I., Stamm, M., Wild, P., and Wittig, W (1995), "Designations F18ab and F18ac for the related fimbrial types F107, 2134P and 8813 of Escherichia coli isolated from porcine postweaning diarrhoea and from oedema disease" Vet Microbiol., (45), pp 281 - 295 73 Ross P Cowart (1992), “An outline of swine diseases”, Iowa State University, P 80-81 74 Salajka, E Salajkova, Z Alexa, P and Hornich, M (1992), “Colonization factors different from K88, K99, F41 and 987P in enterotoxigenic Escherichia coli strains isolated from post-weaning diarrhoea in pigs’, Vet Microbiol, 32, P 163-175 75 Sanderfur P.D., Peterson J.W (1976), Neutralization of Salmonella toxininduced elongation of chinese-hanster-ovary cells cholerae antitoxin Ibid V15, pp.972-988 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 103 76 Sarmiento, J I., Casey, T A and Moon, H M., (1998), “Posweaning diarrhoea in swine: Experimental model of enterotoxigenic Escherichia coli infection”, Am J Vet Res., P 1154-1159 77 Sarrazin E, Bertschinger HU (1997), “Role of fimbriae F18 for actively acquired immunity against porcine enterotoxigenic Escherichia coli”, Vet Microbiol, 1997, P 133 78 Shanks, P L (1938), “An unusual condition affecting the digestive organs of the pigs”, Vet Rec 50, P 356-366 79 Smith H.W (1963), The haemolysins of Escherichia coli J pathol Bactevial, P 197-212 80 Smith H.W & Halls S (1967), Observations by the ligated segment and oral inoculation methods on Escherichia coli infections in pigs, calves lambs and rabbits Journal of Pathology and Bacteriology 93, 499-529 81 Sokol A., Mikula I., Sovac (1981a), “Neonatal coli infencia ich laboratorina diagnostina a prevencia” UOLV-Kosice, P 40-45 82 Timoney, J.F (1950), “Oedema desease of swine” Veterinary Record 62, P.748-755 83 Timoney, Korhonen (1980), “Structure and function of Enterobacterial Pili”, Department of General Microbiology University of Helsinki, P.5-8 84 Tsiloyiannis VK, Kyriakis SC, Vlemmas J, Sarris K (2001), “The effect of organic acids on the control of post-weaning oedema disease of piglets”, Res Veterinary science,2001 jun, 70(3), P.281 85 Uemura R, Sueyoshi M, Nagayoshi M, Nagatomo H (2003), “Antimicrobial susceptibilities of shiga toxin-producing Escherichia coli isolates fro pigs edema disease in Japan”, Vet Microbiol, P 57-61 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 104 86 Uemura R, Sueyoshi M, Taura Y, Nagatomo H, (2004), “Effect of antimicrobial agents on the production and release of shiga toxin by enterotoxaemic Escherichia coli isolates from pigs”, J Vet Science, P 899-903 87 Verdonck F, Cox E, Ampe B, Goddeeris BM, (2003), “Open status of pigbreeding farms is associated with slightly higher seroprevalence of F18+ Escherichia coli in northern Belgium”, Prev Vet Med, P.133 88 Wittig, W Klie, H Gallien, P Lehmann, S Timm, M and Tschape, H (1995), “Prevalence of the fimbrial antigens F18 and K88 and of enterotoxins and Verotoxins among Escherichia coli isolated from weaned pigs”, Zbl Bakt 283, P 95-104 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 105 MỘT SỐ HÌNH ẢNH CỦA ĐỀ TÀI Ảnh 1: Triệu chứng bệnh phù đầu lợn Phú Thọ Ảnh 3: Bệnh tích hầu sƣng tích dịch phù Ảnh 2: Đàn lợn Phú Thọ mắc bệnh phù đầu Ảnh 4: Bệnh tích ruột non căng phồng, chứa đầy dịch lỏng, gan sƣng Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 106 Ảnh 5: Màng treo ruột, ruột già, Ảnh 6: Dạ dày chứa đầy thức ăn hạch ruột viêm sƣng, thuỷ thũng căng phồng, mật gan sƣng Ảnh 7: Vi khuẩn E coli Ảnh 8: Hình thái vi khuẩn E coli mơi trƣờng Macconkey kính hiển vi Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 107 Ảnh 9: Phản ứng sinh hoá vi khuẩn môi trƣờng Ảnh 10: Vi khuẩn E coli môi trƣờng thạch máu ống nghiệm Ảnh 11: Tiêm độc tố canh khuẩn Ảnh 12: Thẩm xuất Evans Blue nội bì da thỏ Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 108 Ảnh 13, 14: Thẩm xuất Evans Blue da thỏ M 10 Ảnh 15: Các sản phẩm phản ứng PCR phức hợp sau q trình điện di Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 109 Ảnh 16: Khả mẫn cảm kháng kháng sinh chủng E coli phân lập đƣợc Ảnh 17: Tiêm canh khuẩn vào phúc xoang Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Ảnh 18: Chuột chết độc lực vi khuẩn http://www.lrc-tnu.edu.vn ... dựng biện pháp phòng chống bệnh phù đầu lợn vi khuẩn E coli gây ra, tiến hành nghiên cứu đề tài: ? ?Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ, xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli bệnh phù đầu lợn tỉnh Phú. .. LÂM NGUYỄN THỊ THANH HOA NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ, XÁC ĐỊNH YẾU TỐ GÂY BỆNH CỦA VI KHUẨN E COLI TRONG BỆNH PHÙ ĐẦU Ở LỢN CON TẠI TỈNH PHÚ THỌ VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ LUẬN VĂN THẠC SỸ... Nội dung nghiên cứu 30 2.1.1 Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ bệnh phù đầu lợn tỉnh Phú Thọ 30 2.1.2 Xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli bệnh phù đầu lợn tỉnh Phú Thọ