Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM VŨ DUY LONG I PARACETAMOL, CLOPHENINAMIN MALEAT VÀ PHENYLEPHIN HYDROCLORIT SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) VÀ PHƢƠNG PHÁP QUANG PHỔ HẤP THỤ PHÂN TỬ (UV-VIS) C Mã số: 60.44.01.18 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VẬT CHẤT Hƣớng dẫn khoa học: TS. MAI XUÂN TRƢỜNG THÁI NGUYÊN - NĂM 2014 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ LỜI CẢM ƠN Trong quá trình học tập và thực hiện luận văn tác giả đã nhận được nhiều sự quan tâm, động viên và giúp đỡ của các thầy giáo, cô giáo, bạn bè và gia đình. Tác giả bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: - - yên, các thầy cô giáo tham gia giảng dạy đã cung cấp những kiến thức giúp tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu. Đặc biệt tác giả xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo TS. Mai Xuân Trường người đã tận tình hướng dẫn chỉ bảo và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình nghiên cứu, thực hiện và hoàn thành luận văn. Cuối cùng tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè những người đã luôn bên tôi, động viên và khuyến khích tôi trong quá trình thực hiện đề tài nghiên cứu của mình. , chắc chắn luận văn không thể tránh khỏi những thiếu sót. Tác giả rất mong nhận được các ý kiến đóng góp chân thành từ các thầy giáo, cô giáo và bạn đọc. Xin chân thành cảm ơn ! Thái Nguyên, tháng 6 năm 2014 Tác giả Vũ Duy Long Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ MỤC LỤC Trang Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục các từ viết tắt của luận văn iv Danh mục các bảng của luận văn v Danh mục các hình của luận văn vi MỞ ĐẦU 1 Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2 1.1. Tổng quan về paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit 2 1.1.1. Paracetamol 2 1.1.2. Chlorpheniramin 6 1.1.3. Phenylephin hydroclorit 9 1.2. Các định luật cơ sở của sự hấp thụ ánh sáng 13 1.2.1. Định luật Bughe - Lămbe – Bia 13 1.2.2. Định luật cộng tính 14 1.2.3. Những nguyên nhân làm cho sự hấp thụ ánh sáng của dung dịch không tuân theo định luật Bughe – Lămbe – Bia 15 1.3. Một số phương pháp xác định đồng thời các cấu tử 16 1.3.1. Phương pháp Vierordt 16 1.3.2. Phương pháp phổ đạo hàm 18 1.3.3. Phương pháp mạng nơron nhân tạo 19 1.3.4. Phương pháp lọc Kalman 21 1.4. Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC 22 1.4.1. Nguyên tắc của phương pháp HPLC 22 1.4.2. Sơ đồ máy HPLC 23 1.4.3. Kết quả xác định một số chất theo phương pháp HPLC 23 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Chƣơng 2: THỰC NGHIỆM 25 2.1. Nội dung nghiên cứu 25 2.1.1. Phương pháp HPLC 25 2.1.2. Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 25 2.2. Phương pháp nghiên cứu 26 26 26 2.3. Đánh giá độ tin cậy của quy trình phân tích 27 2.3.1. Giới hạn phát hiện (LOD) 27 2.3.2. Giới hạn định lượng (LOQ) 27 2.3.3. Đánh giá độ tin cậy của phương pháp 27 2.3.4. Đánh giá kết quả phép phân tích theo thống kê 28 Chƣơng 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 32 3.1. Phương pháp HPLC 32 3.1.1. Xây dựng điều kiện để xác định đồng thời 3 chất PRC, CPM và PNH 32 3.1.2. Đánh giá phương pháp định lượng 35 3.1.3. Xác định PRC, CPM và PNH trong thuốc TIFFY 42 3.2. Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 43 3.2.1 Khảo sát phổ hấp thụ phân tử của paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit 43 3.2.2. Khảo sát sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CPM và PNH vào pH 44 3.2.3. Khảo sát sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CPM và PNH theo thời gian 45 3.2.4. Khảo sát sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CPM và PNH theo nhiệt độ 46 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 3.2.5. Khảo sát khoảng tuyến tính tuân theo định luật Bughe – Lambe – Bia của PRC, CPM và PNH. Xác định chỉ số LOD và LOQ 48 3.2.6. Khảo sát và đánh giá độ tin cậy của phương pháp nghiên cứu trên các mẫu tự pha 54 3.2.7. Xác định hàm lượng PRC, CPM và PNH trong 61 KẾT LUẬN 66 TÀI LIỆU THAM KHẢO 68 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT CỦA LUẬN VĂN Tiếng việt Tiếng Anh Viết tắt Paraxetamon Paracetamol PRC Clopheninamin maleat Chlorpheniramine maleate CPM Phenylephin hidrocloric Phenylephrine hydrochloride PNH Giới hạn phát hiện Limit Of Detection LOD Giới hạn định lượng Limit Of Quantity LOQ Sai số tương đối Relative Error RE Độ lệch chuẩn Standard Deviation S hay SD Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao High Performance Liquid Chromatography HPLC Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ DANH MỤC CÁC BẢNG CỦA LUẬN VĂN Trang Bảng 3.1. Giá trị các đại lượng đặc trưng 36 Bảng 3.2. Kết quả khảo sát thời gian lưu 36 Bảng 3.3. Kết quả khảo sát diện tích pic 36 Bảng 3.4. Mối tương quan giữa nồng độ và diện tích pic của PRC, CPM và PNH 37 Bảng 3.5. Kết quả khảo sát độ lặp lại 40 Bảng 3.6. Kết quả khảo sát độ đúng 41 Bảng 3.7. Kết quả phân tích thuốc TIFFY 42 Bảng 3.8. Độ 44 Bả PRC, CPM và PNH theo thời gian 45 Bả thụ quang của PRC, CPM và PNH theo nhiệt độ 47 Bảng 3. . 48 . 50 Bảng 3.13 50 Bảng 3.14. Kết quả tính LOD và LOQ của CPM 52 52 Bảng 3.16. Kết quả tính LOD và LOQ của PNH. 54 54 55 56 57 58 59 60 , CPM và PNH 60 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Bảng 3.25. Kết quả tính nồng độ, sai số PRC, CPM và PNH trong mẫu thuốc TIFFY 62 Bảng 3.26. Thành phần các dung dịch chuẩn PRC, CPM và PNH thêm vào dung dịch mẫu thuốc TIFFY 63 Bảng 3.27. Kết quả xác định độ thu hồi của PRC, CPM và PNH trong mẫu thuốc TIFFY 64 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ DANH MỤC CÁC HÌNH CỦA LUẬN VĂN Trang Hình 1.1. Công thức cấu tạo của paracetamol 2 Hình 1.2. Công thức cấu tạo của paracetamol dưới dạng không gian ba chiều . 2 1.3. Mô hình hoạt động của mạng nơron 20 1.4. Mô hình hoạt động của bộ lọc Kalman 21 Hình 1.5. Sơ đồ hệ thống máy HPLC 23 Hình 3.1. phổ pic của PRC (500 µg/mL) 33 Hình 3.2. phổ pic của CPM (8 µg/mL) 33 Hình 3.3. phổ pic của PNH (20 µg/mL) 33 Hình 3.4. Phổ các pic của PRC (3), CPM (1) và PNH (2) 34 Hình 3.5. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ và diện tích pic của PRC 38 Hình 3.6. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ và diện tích pic của CPM 38 Hình 3.7. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ và diện tích pic của PNH 39 3.8. Phổ hấp thụ của các dung dịch chuẩn PRC (1), CPM (2) và PNH (3) 43 Hình 3.9. Sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của PRC, CPM và PNH theo thời gian 46 47 Hình 3.11. Phổ hấp thụ quang của PRC ở các nồng độ 0,2 40,0 g/mL 48 3.12. 49 Hình 3.13. Phổ hấp thụ quang của CPM ở các nồng độ 0,2 40 g/mL 50 Hình 3.14. Đường hồi quy tuyến tính biểu diễn sự phụ thuộc của độ hấp thụ quang A vào nồng độ CPM 51 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Hình 3.15. Phổ hấp thụ quang của PNH ở các nồng độ 1,0 40,0 g/mL 52 H 53 [...]... phương pháp UV-VIS dùng phổ toàn phần kết hợp với kỹ thuật tính toán và ứng dụng phần mềm máy tính đã được nghiên cứu và cho nhiều ưu điểm như độ nhạy, độ lặp, độ chính xác, độ tin cậy của phép phân tích cao, phân tích nhanh, tiện lợi : "Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc TIFFY sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân. .. xác định đồng thời paracetamol và clopheninamin maleat trong thuốc viên nén bằng cách đo độ hấp thụ quang ở các bước sóng 242 và 264 nm, còn một số tác giả khác đã xác định đồng thời axit salixylic và chloramphenilcol bằng cách đo độ hấp thụ quang ở các bước sóng 278 và 297 nm Phương pháp Vierordt đơn giản, dễ thực hiện nhưng chỉ áp dụng được khi số cấu tử trong dung dịch hỗn hợp ít, phổ hấp thụ quang. .. công cụ đắc lực trong phân tích các thuốc đa thành phần cho phép định tính và định lượng Phương pháp này ngày càng được sử dụng rộng rãi và phổ biến vì nhiều lý do: có độ nhạy cao, khả năng định lượng tốt, thích hợp tách các hợp chất khó bay hơi hoặc dễ phân hủy nhiệt 1.4.1 Nguyên tắc của phƣơng pháp HPLC Sắc ký lỏng hiệu năng cao là một phương pháp tách một hỗn hợp chất lỏng dựa trên sự phân bố chúng... theo phương pháp HPLC 2.1.2 Phƣơng pháp quang phổ hấp thụ phân tử PRC, CPM và PNH - Tiến hành khảo sát sơ bộ phổ hấp thụ phân tử của PRC, CPM và PNH tro Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ - Khảo sát sự ổn định độ hấp thụ quang của PRC, CPM và PNH - Khảo sát khoảng tuyến tính của PRC, CPM và PNH từ đó xác định giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ) - PRC, CPM và. .. CPM và PNH - Xây dựng quy trình phân tích mẫu thuốc TIFFY, - Định lượng đồng thời PRC, CPM và PNH trong mẫu thuốc TIFFY Đánh giá độ tin cậy của phương pháp thông qua x h5, 8, 9, 18, 21, 22] 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu PRC, CPM và PNH PRC, CPM và PNH [3, 4, 7, 12- 16, 21, 24-26, 30-32] 2.2.2.1 Phương pháp HPLC Nghiên cứu các điều kiên tối ưu cho phương pháp HPLC để định lượng đồng thời PRC, CPM và PNH... tin cậy cao Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Phương pháp định lượng đồng thời paracetamol và axit mefenamic: phương pháp có độ chính xác cao (sai số tương đối 0,51% – 1,42%), độ đúng tốt (tỷ lệ thu hồi 98,16% – 99,16%) [20] Phương pháp định tính và định lượng đồng thời paracetamol và ibuprofen: phương pháp có độ lặp lại tốt (sai số tương đối 0,81% - 1,03%), độ đúng cao (tỷ lệ... 98,4%) [20] Phương pháp định lượng đồng thời paracetamol và cafein: phương pháp có độ lặp lại tốt (sai số tương đối 0,54% – 1,07%), độ đúng cao (tỷ lệ thu hồi 98,9% – 99,5%) [20] Phương pháp định lượng đồng thời paracetamol, phenylpropanolamin hidroclorit và clorphenylamin maleat: phương pháp có độ lặp lại cao (sai số tương đối của paracetamol là 0,47%; phenylpropanolamin hidroclorid là 0,67% và clorphenylamin... 23] 1.4 Phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC Phương pháp này ra đời từ năm 1967-1968 trên cơ sở phát triển và cải tiến từ phương pháp sắc ký cột cổ điển Hiện nay phương pháp HPLC ngày càng phát triển và hiện đại hoá cao nhờ sự phát triển nhanh chóng của ngành chế tạo máy phân tích Nó áp dụng rất nhiều trong các ngành kiểm nghiệm đặc biệt là ứng dụng cho ngành kiểm nghiệm thuốc, máy phân tích HPLC... hợp với thuốc khác 1.1.3 Phenylephin hydroclorit 1.1.3.1 Giới thiệu chung Phenylephin hydroclorit là một loại thuốc giảm sung huyết trong điều trị bệnh viêm mũi dị ứng theo mùa và cảm Phenylephin hydroclorit có tác dụng giãn phế quản và có trong một số thuốc dùng trong điều trị bệnh hen phế quản và viêm phế quản mạn Trong dạng thuốc nhỏ mắt, phenylephin hydroclorit được dùng để làm giãn đồng tử lúc... thu được có sai số trong khoảng 1,7 5% Trên thế giới, phương pháp phổ đạo hàm được ứng dụng để phân tích các chế phẩm dược dụng cũng như hỗn hợp các chất vô cơ, hữu cơ Hầu hết các kết quả đều cho thấy phương pháp có độ tin cậy cao Tuy nhiên phương pháp phổ đạo hàm chỉ được áp dụng khi số cấu tử trong dung dịch ít và phổ hấp thụ quang phân tử của chúng không trùng nhau 1.3.3 Phƣơng pháp mạng nơron nhân . VŨ DUY LONG I PARACETAMOL, CLOPHENINAMIN MALEAT VÀ PHENYLEPHIN HYDROCLORIT SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) VÀ PHƢƠNG PHÁP QUANG PHỔ HẤP THỤ PHÂN TỬ (UV- VIS) C Mã số: 60.44.01.18. phép phân tích cao, phân tích nhanh, tiện lợi. : " ;Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc TIFFY sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và. để xác định đồng thời 3 chất PRC, CPM và PNH 32 3.1.2. Đánh giá phương pháp định lượng 35 3.1.3. Xác định PRC, CPM và PNH trong thuốc TIFFY 42 3.2. Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 43