BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI        MAI THỊ THANH NGA NGHIÊN CỨU MỘT SỐ CHỈ TIÊU SINH LÝ, SINH HÓA MÁU TRONG THỜI KỲ LÃO HÓA Ở KHỈ MACACA MULATTA NUÔI TẠI ðẢO RỀU - QUẢNG NINH LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : THÚ Y Mã số : 60.62.50 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS. PHẠM NGỌC THẠCH HÀ NỘI - 2010 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp i LỜI CAM ðOAN - Tôi xin cam ñoan rằng, số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn là trung thực và chưa ñược sử dụng ñể bảo vệ một học vị nào. - Tôi xin cam ñoan rằng, mọi sự giúp ñỡ cho việc thực hiện luận văn ñã ñược cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn ñều ñược chỉ rõ nguồn gốc. Tác giả luận văn Mai Thị Thanh Nga Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ii LỜI CẢM ƠN ðể hoàn thành luận văn này tôi ñã nhận ñược sự hướng dẫn rất nhiệt tình của thầy giáo hướng dẫn khoa học PGS.TS. Phạm Ngọc Thạch cùng với những ý kiến ñóng góp quý báu của các thầy cô trong bộ môn Nội chẩn- Dược- ðộc chất, Khoa Thú y trường ñại học Nông nghiệp Hà Nội. Tôi xin bày tỏ lòng cảm ơn chân thành và sâu sắc nhất tới những sự giúp ñỡ quý báu ñó. Với sự nỗ lực của bản thân trong quá trình thực hiện ñể tài tôi cũng luôn nhận ñược sự giúp ñỡ nhiệt tình của lãnh ñạo cùng toàn thể các cán bộ công nhân viên ở ñảo Rều- Quảng Ninh. Nhân dịp hoàn thành luận văn, một lần nữa tôi xin chân thành cảm ơn nhà trường, các thầy cô giáo, bạn bè ñồng nghiệp và người thân ñã tạo ñiều kiện, ñộng viên, giúp ñỡ tôi trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu thực hiện ñề tài. Hà Nội, Ngày 15 tháng 10 năm 2010 Tác giả luận văn Mai Thị Thanh Nga Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp iii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục các chữ viết tắt v Danh mục bảng vi 1 MỞ ðẦU 1 1.1 Tính cấp thiết của ñề tài 1 1.2 Mục ñích của ñề tài 3 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 2.1 Một số tư liệu về khỉ vàng 4 2.2 Các giả thuyết về quá trình lão hóa 14 2.3 Khái quát chung về quá trình lão hóa 21 2.4 Một số khái quát về huyết học 23 2.5 Một số nghiên cứu trong và ngoài nước trên khỉ vàng Macaca mulatta 32 3 ðỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 3.1 ðối tượng nghiên cứu 34 3.2 ðịa ñiểm nghiên cứu 34 3.3 Nội dung và phương pháp nghiên cứu 34 3.4 Phương pháp xử lý số liệu 38 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 40 4.1 Một số biểu hiện ở khỉ trong thời kỳ lão hóa 40 4.1.1 Thể trạng của khỉ Macaca mulatta trong thời kỳ lão hóa 40 4.1.2 Thân nhiệt 44 4.1.3 Tần số mạch 45 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp iv 4.1.4 Tần số hô hấp 47 4.2 Một số chỉ tiêu máu ở khỉ trong thời kỳ lão hóa. 47 4.2.1 Hệ hồng cầu 48 4.2.2 Hệ bạch cầu 53 4.2.3 Kích thước các loại tế bào máu 62 4.3 Một số chỉ tiêu sinh hóa máu khỉ Macaca mulatta trong thời kỳ lão hóa nuôi tại ñảo Rều- Quảng Ninh 64 4.3.1 ðộ dự trữ kiềm 67 4.3.2 Hoạt ñộ men sGOT và sGPT 67 4.3.3 Hàm lượng ñường huyết khi khỉ lão hóa 68 4.3.4 Protein tổng số và các tiểu phần protein huyết thanh ở khỉ trong thời kỳ lão hóa 69 4.3.4.2 Các tiểu phần protein huyết thanh và tỷ số A/G. 69 4.4 Nghiên cứu ảnh hưởng của giới tính tới sự lão hóa của khỉ vàng Macaca mulatta 75 4.4.1 Các biểu hiện bên ngoài của sự lão hóa ở khỉ theo tính biệt 75 4.4.2 Thân nhiệt, tần số mạch, tần số hô hấp của khỉ trong giai ñoạn lão hóa theo tính biệt 76 4.4.3 Số lượng hồng cầu, hàm lượng huyết sắc tố, tỷ khối huyết cầu, nồng ñộ huyết sắc tố và lượng huyết sắc tố bình quân hồng cầu theo giới tính ở khỉ lão hóa 77 4.4.4 Số lượng bạch cầu và công thức bạch cầu ở khỉ lão hóa 78 4.4.5 Một số chỉ tiêu sinh hóa máu ở khỉ lão hóa 79 5 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 81 5.1 Kết luận 81 5.2 ðề nghị 82 TÀI LIỆU THAM KHẢO 83 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Hb Hemoglobin LHSTbq Lượng hemoglobin bình quân NðHSTbq Nồng ñộ huyết sắc tố bình quân sGOT Serum - glutamate - oxaloaxetat -transminaza sGPT Serum - glutamat - pyruvat - transminaza SKTT Sức kháng tối thiểu SKTð Sức kháng tối ña TKHC Tỷ khối huyết cầu V h/c Thể tích bình quân của hồng cầu Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp vi DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang 4.1 Thể trạng của khỉ Macaca mulatta trong thời kỳ lão hóa 41 4.2 Thân nhiệt, tần số mạch, tần số hô hấp ở khỉ Macaca mulatta trong thời kỳ lão hóa 46 4.3 Số lượng hồng cầu, hàm lượng huyết sắc tố và tỷ khối hồng cầu ở khỉ Macaca mulatta trong thời kỳ lão hóa 49 4.4 Nồng ñộ huyết sắc tố trung bình, lượng huyết sắc tố bình quân của hồng , sức kháng hồng cầu và thể tích hồng cầu ở khỉ Macaca mulatta trong thời kỳ lão hóa 52 4.5 Số lượng bạch cầu và công thức bạch cầu ở khỉ Macaca mulatta trong thời kỳ lão hóa 54 4.6 Hướng nhân và thế máu ở khỉ Macaca mulatta trong thời kỳ lão hóa 58 4.7 Kích thước tế bào máu của khỉ Macaca mulatta trong thời kỳ lão hóa 63 4.8 ðộ dự trữ kiềm, hoạt ñộ men sGOT, men sGPT và hàm lượng ñường huyết ở khỉ Macaca mulatta trong thời kỳ lão hóa 65 4.9 Các tiểu phần protein huyết thanh và tỷ số A/G của khỉ khi lão hóa 71 4.10 Hàm lượng Natri, Kali của khỉ khi lão hóa 74 4.11 Một số biểu hiện ngoài của sự lão hóa theo giới tính ở khỉ Macaca mulatta nuôi tại ñảo Rều- Quảng Ninh 75 4.12 Thân nhiệt, tần số mạch, tần số hô hấp theo giới tính ở khỉ trong thời kỳ lão hóa 76 4.13 Số lượng hồng cầu, hàm lượng huyết sắc tố, tỷ khối huyết cầu, nồng ñộ huyết sắc tố và lượng huyết sắc tố bình quân hồng cầu ở khỉ lão hóa 77 4.14 Số lượng bạch cầu và công thức bạch cầu của khỉ ở khỉ lão hóa 78 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp vii 4.15 Hàm lượng protein tổng số và các tiểu phần protein huyết thanh ở khỉ lão hóa 79 4.16 ðộ dự trữ kiềm, hoạt ñộ men, hàm lượng ñường huyết ở khỉ lão hóa 80 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp 1 1. MỞ ðẦU 1.1 Tính cấp thiết của ñề tài Những năm gần ñây, ngành Thú y luôn phải ñối mặt với những dịch bệnh mới xảy ra không có tính quy luật nên rất khó kiểm soát và khống chế. Khi dịch bệnh xảy ra những ñộng vật non và già là những ñối tượng rất hay mắc. ðối với ñộng vật còn non ngoài việc nhận ñược kháng thể thụ ñộng từ mẹ, chúng ta còn chủ ñộng phòng ngừa bằng vaccine kết hợp với khả năng thích nghi tốt với ñiều kiện sống sẽ làm giảm mức ñộ của bệnh. Nhưng ñối với những ñộng vật già khả năng chống chọi với bệnh tật thường kém do vậy dịch bệnh xảy ra thường dai dẳng và rất khó kiểm soát. Nguyên nhân chủ yếu là do ở ñộ tuổi cao cơ thể của ñộng vật cũng như con người thường bước vào quá trình lão hóa và lão hóa là quá trình biến ñổi một cơ thể trưởng thành sang một cơ thể suy yếu mọi chức năng cơ quan, hệ thống làm cho cơ thể dễ cảm nhiễm với bệnh và tăng nguy cơ tử vong. Trên thế giới nghiên cứu về lão hóa ở ñộng vật chưa nhiều và ở Việt Nam vấn ñề này vẫn chưa ñược quan tâm ñặc biệt là khỉ. Việc nghiên cứu và xác ñịnh ñộ tuổi lão hóa trên ñộng vật là rất cần thiết, vì khi xác ñịnh ñược ñộ tuổi bắt ñầu lão hóa ở từng vật nuôi người ta sẽ có phương pháp chăm sóc nuôi dưỡng tốt mang lại hiệu quả trong chăn nuôi và làm giảm mức ñộ của dịch bệnh. Khỉ vàng tên khoa học là Macaca Mulatta thuộc họ khỉ Cercopi thecidae trong bộ linh trưởng Primates. Trên thế giới khỉ vàng phân bố ở Miến ðiện, Ấn ðộ, NêPan, Thái Lan, Lào và miền nam Trung Quốc…Ở Việt Nam khỉ vàng phân bố rộng ở các tỉnh miền núi, trung du (Tuyên Quang, Lạng Sơn, Hà Giang, Ninh Bình, Thanh Hóa,…) và một số hòn ñảo gần bờ (Hòn Mê, ñảo Rều,…) Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp 2 Khỉ là loài ñộng vật có giá trị lớn về nhiều mặt, là nguồn dược liệu quan trọng trong ðông và Tây y. Và là loài ñộng vật bậc cao rất gần gũi với con người về nguồn gốc và giải phẫu nên ñã ñược dùng làm ñối tượng nghiên cứu về hệ thần kinh, sự vận ñộng, khả năng sinh sản theo lứa tuổi, các bệnh ở hệ tim mạch, bệnh ñái ñường. Ở nước ta khỉ vàng ñược nuôi theo hình thức bán tự nhiên ở ñảo Rều - Quảng Ninh và nuôi nhốt kết hợp với việc bổ sung thêm hoa quả, mía, cơm,. . Mỗi năm, viện Vệ sinh dịch tễ thường dùng một số lượng lớn khỉ làm ñộng vật thí nghiệm ñể sản xuất vaccine Sabin phòng bại liệt cho trẻ em và các loại vaccine chống dịch sởi, viêm gan A, B, C gần ñây nhất, năm 2005 nước ta ñã sản xuất ñược vaccine chống virrut H5N1 thử nghiệm thành công trên ñộng vật và ñang xin phép thử nghiệm trên người. Như vậy, ñể ñảm bảo cho việc sản xuất vaccine thì khỉ ñược dùng làm ñộng vật phải hoàn toàn khỏe mạnh và có chứng nhận kiểm dịch của ngành thú y. Tuy nhiên, không phải ở lứa tuổi nào khỉ cũng ñược dùng ñể sản xuất vaccine nhất là những khỉ có ñộ tuổi cao. Bởi vì trong thời kỳ lão hóa, con người cũng như con vật thường giảm sút về thể lực, cơ thể kém chịu ñựng và kém thích nghi trước hoàn cảnh không thuận lợi của môi trường sống, vì vậy có thể dễ mắc bệnh và dễ tử vong. Cho nên, việc nghiên cứu, lựa chọn khỉ ở ñộ tuổi nào phù hợp cho việc sản xuất vaccine là vấn ñề quan trọng và ñặc biệt nghiên cứu về sự biến ñổi sinh lý bình thường khi cơ thể ở thời kỳ lão hóa là rất cần thiết cho việc chẩn ñoán lâm sàng và ñiều trị bệnh cho những con già ñể ổn ñịnh số lượng và chất lượng khỉ nuôi tại ñảo, mặt khác khỉ có thể sử dụng làm mô hình ñể nghiên cứu quá trình lão hóa ở người. Từ những lí do trên chúng tôi tiến hành thực hiện ñề tài “Nghiên cứu một số chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa máu trong thời kỳ lão hóa ở khỉ Macaca Mulatta nuôi tại ñảo Rều- Quảng Ninh” [...]...1.2 M c ñích c a ñ tài - Xác ñ nh nh ng bi u hi n lão hóa c a kh Macaca mulatta - Xác ñ nh s bi n ñ i m t s ch tiêu sinh lý, sinh hóa máu c a kh trong th i kỳ lão hóa - Xác ñ nh ñ tu i b t ñ u lão hóa c a kh Macaca mulatta - Bư c ñ u xác ñ nh nh hư ng c a gi i tính ñ tu i lão hóa m nh nh t c a kh Macaca mulatta Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ nông nghi p... gi thuy t v quá trình lão hóa Trong sinh h c, lão hóa (ti ng anh là Senescence, xu t phát t senex trong ti ng Latin có nghĩa là “Ngư i già”, “tu i già”) là tr ng thái hay quá trình t o nên tu i tác già nua Lão hóa t bào là m t hi n tư ng khi các t bào phân l p tr nên h n ch kh năng phân chia trong môi trư ng nuôi c y Lão hóa cơ th ñ c p ñ n quá trình trư ng thành và già nua c a sinh v t Nh ng quá trình... quát v huy t h c Máu là ch t d ch ñư c lưu thông trong tim và các h th ng m ch qu n Nó liên quan m t thi t v i các cơ quan b ph n trong cơ th ñ c bi t nên r t n ñ nh Lư ng máu thay ñ i theo t ng loài, t ng ñ tu i c a ñ ng v t T ng lư ng máu trong cơ th g m 54% máu lưu thông trong h tu n hoàn, 46% d ng d tr trong ñó: 20% d tr gan, 16% d tr lách, 10% d tr dư i da, Cù Xuân D n và c ng s [4] Máu là t m gương... t: Máu làm nhi m v v n chuy n nhi t, gi nhi t ñ cơ th ch thay ñ i trong m t ph m vi h p Khi g p l nh m ch máu ngoài da co l i d n máu vào trong gi m cho cơ th Khi nóng, m ch máu ngoài da dãn ra, máu t trong d n ra ñem nhi t th i b t ra ngoài * Ch c năng ñi u hòa và duy trì cân b ng n i môi: Máu ñi u hòa n ng ñ các ion (K+, Na+, H+,…), duy trì áp su t th m th u, ñ pH,… * Ch c năng ñi u hòa th d ch: Máu. .. u trung tính tăng trong máu m t cách t m th i hay lâu dài trong các b nh có viêm nhi m, trong trư ng h p m t máu và khi g p stress S lư ng b ch c u trung tính tăng nh và t m th i sau b a ăn hay v n ñ ng m nh, ho c b nhi m khu n c p tính, nh i máu cơ tim hay nh i máu ph i hay sau ph u thu t Ngư c l i, b ch c u trung tính s gi m trong th i kỳ ñ u c a b nh do siêu vi trùng hay th i kỳ sau c a các ca ng... m c ñ u th hi n theo quy lu t không ñ ng th i, không ñ ng t c, không ñ ng v Tuy nhiên vi c khó khăn là phân bi t s thay ñ i m c nào ñư c coi là trong gi i h n sinh lý, ñ n m c nào tr thành b nh cơ th lão hóa 2.3.1 Thay ñ i m c toàn thân Trong th i kỳ lão hóa, con ngư i cũng như con v t thư ng gi m sút v th l c, cơ th kém ch u ñ ng, kém thích nghi trư c hoàn c nh không thu n l i (nóng, l nh, ch n thương,…)... còn có con b ñói Nghiên c u quá trình sinh s n, sinh trư ng, phát tri n c a kh vàng (và các loài linh trư ng khác) ngoài t nhiên là vi c làm khó và không th xác ñ nh mùa sinh, ñ nh cao mùa sinh cũng như m t s nh n xét v sinh trư ng và phát tri n trong ñi u ki n nuôi nh t hay ngoài t nhiên khi có th Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ nông nghi p 9 Theo dõi quá trình sinh s n c a kh... là m t y u t thúc ñ y s lão hóa, nh ng ngư i hút thu c thư ng già nhanh hơn nh ng ngư i không hút Nguyên nhân gây lão hóa ñư c gi i thích b ng nhi u thuy t khác nhau như: thuy t di truy n, thuy t g c t do…Ngoài ra, hi n tư ng lão hóa có liên quan ñ n ñ t bi n gen còn gây ra h i ch ng già trư c tu i hay liên quan ñ n tu i th c a con ngư i Quá trình lão hóa di n ra m i cơ quan trong cơ th Trư ng ð i h... t sinh ra t cơ quan này ñ n cơ quan khác góp ph n vào s ñi u hòa trao ñ i ch t, sinh trư ng và phát tri n, ñ m b o s cân b ng n i môi và th ng nh t trong cơ th * Ch c năng b o v : Trong máu có nhi u lo i kháng th và các lo i b ch c u có kh năng ngăn c n, tiêu di t vi sinh v t và nh ng m m b nh xâm nh p vào cơ th Máu là ch t l ng, ñ c màu ñ g m có hai ph n là huy t tương và thành ph n h u hình Trong. .. tu i, Cleanthes 99 tu i Vi t Nam, lão hóa là m t trong nh ng v n ñ ñang ñư c quan tâm, tuy nhiên tài li u và thông tin v lão hóa còn r t gi i h n 2.2.1 Thuy t di truy n Thuy t di truy n có l là thuy t khoa h c nh t Theo thuy t này thì con ngư i có s n trong các t bào c a mình m t chương trình - mang trong các “gen” Các gen ho t ñ ng theo th t , b t di b t d ch: sinh, lão, b nh, t Các t bào soma c a . NGHIÊN CỨU MỘT SỐ CHỈ TIÊU SINH LÝ, SINH HÓA MÁU TRONG THỜI KỲ LÃO HÓA Ở KHỈ MACACA MULATTA NUÔI TẠI ðẢO RỀU - QUẢNG NINH LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : THÚ Y Mã số. biểu hiện lão hóa của khỉ Macaca mulatta - Xác ñịnh sự biến ñổi một số chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa máu của khỉ trong thời kỳ lão hóa. - Xác ñịnh ñộ tuổi bắt ñầu lão hóa của khỉ Macaca mulatta. . trong thời kỳ lão hóa 52 4.5 Số lượng bạch cầu và công thức bạch cầu ở khỉ Macaca mulatta trong thời kỳ lão hóa 54 4.6 Hướng nhân và thế máu ở khỉ Macaca mulatta trong thời kỳ lão hóa 58