Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN THỊ PHƯƠNG LAN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ CÂY BÀN TAY MA HELICIOPSIS LOTABA (MERR.) SLEUM HỌ PROTEACEAE Ở CAO BẰNG LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC THÁI NGUYÊN - 2010 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM NGUYỄN THỊ PHƢƠNG LAN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ CÂY BÀN TAY MA HELICIOPSIS LOTABA (MERR.) SLEUM HỌ PROTEACEAE Ở CAO BẰNG Chuyên ngành : Hóa học Hữu cơ Mã số : 60. 44. 27 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS PHẠM VĂN THỈNH Thái Nguyên - 2010 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1: Các hệ dung môi triển khai SKLM. 27 Bảng 2.2: Khối lượng các cặn chiết thu được từ lá cây Bàn tay ma. 30 Bảng 2.3: Phát hiện các nhóm chất trong lá cây Bàn tay ma. 33 Bảng 2.4: Kết quả thử hoạt tính sinh học của dịch chiết từ lá cây Bàn tay ma. 34 Bảng 3.1 Số liệu phổ 13 C-NMR (CDCl 3 , 125Mhz) của một số sterol trong lá cây Bàn tay ma. 47 Bảng 3.2 Các số liệu phổ 1 H-NMR và 13 C-NMR của HL-3: 3-Axetyl-6-oxo-spirostan trong lá cây Bàn tay ma. 51 Bảng 3.3 Số liệu phổ 13 C-NMR (CDCl 3 , 125Mhz) và 1 H-NMR của HL-4 trong lá cây Bàn tay ma và phổ của Taraxerol . 59 Bảng 3.4 Số liệu phổ 13 C-NMR (CDCl 3 , 125Mhz) và 1 H-NMR của chất HL-5 trong lá cây Bàn tay ma. 67 Bảng 3.5 Số liệu phổ 13 C-NMR (CDCl 3 , 125Mhz) và 1 H-NMR của chất EL-2 trong lá cây Bàn tay ma . 75 SƠ ĐỒ Trang Sơ đồ 2.1: Sơ đồ ngâm chiết mẫu lá cây Bàn tay ma Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum. 29 DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Ảnh 1.1: Ảnh cây Bàn tay ma Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum. 22 Ảnh 1.2: Ảnh lá cây Bàn tay ma ……… 22 Hình 2.1 Đường kính vùng ức chế xung quanh giếng thạch. 35 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 3.1: Phổ 1 H- NMR của chất HL- 3 53 Hình 3.2: Phổ 13 H- NMR của chất HL- 3 54 Hình 3.3: Phổ DEPT của chất HL- 3 55 Hình 3.4: Phổ HSQC của chất HL- 3 56 Hình 3.5: Phổ HMBC của chất HL- 3 57 Hình 3.6: Phổ 1 H- NMR của chất HL- 4 61 Hình 3.7: Phổ 13 H- NMR của chất HL- 4 62 Hình 3.8: Phổ DEPT của chất HL- 4 63 Hình 3.9: Phổ HSQC của chất HL- 4 64 Hình 3.10 Phổ HMBC của chất HL- 4 65 Hình 3.11 Phổ 1 H- NMR của chất HL- 5 69 Hình 3.12 Phổ 13 H- NMR của chất HL- 5 70 Hình 3.13 Phổ DEPT của chất HL- 5 71 Hình 3.14 Phổ HSQC của chất HL- 5 72 Hình 3.15 Phổ HMBC của chất HL- 5 73 Hình 3.16 Phổ 1 H- NMR của chất EL-2 77 Hình 3.17 Phổ 13 H- NMR của chất EL-2 78 Hình 3.18 Phổ DEPT của chất EL-2 79 Hình 3.19 Phổ HSQC của chất EL-2 80 Hình 3.20 Phổ HMBC của chất EL-2 81 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT CC : Column Chromatography (Sắc ký cột) TLC : Thin-layer Chromatography (Sắc ký lớp mỏng) SKLM : Sắc ký lớp mỏng HPLC : High Performance Liquid Chromatography (Sắc ký lỏng hiệu năng cao) MS : Mass Spectrometry (Phổ khối lượng) LC-MS : Liqud chromatography –Mass Spectroscopy EI-MS : Electron Impact Mass Spectrometry (Phổ khối va chạm electron) (Bắn phá bằng chùm nguyên tử tốc độ cao) FT-IR : Fourier Transform Infrared Spectroscopy (Phổ hồng ngoại biến đổi Fourie) NMR : Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân) 1 H-NMR : Proton Magnetic Resonance Spectrometry (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton) 13 C-NMR : 13 C-Nuclear Magnetic resonance (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon-13) DEPT : Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HSQC : Heteronuclear Single - Quantum Coherence HMBC : Heteronuclear multiple - Bond Correlation Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 1 MỞ ĐẦU Việt Nam nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa nên được thừa hưởng nguồn thiên nhiên vô cùng phong phú và đa dạng sinh học với nhiều loài dược liệu quí. Ngay từ xa xưa, cha ông ta đã biết khai thác nguồn tài nguyên quý báu này để làm thực phẩm, thuốc chữa bệnh, vật liệu xây dựng và nhiên liệu phục vụ đời sống. Nền y dược học cổ truyền ở Việt Nam đã có lịch sử phát triển từ lâu đời. Từ nhiều thế kỷ nay, những chế phẩm y học cổ truyền được coi như một kho tàng dược liệu quí báu. Tiếp thu truyền thống quý báu của các thế hệ cha ông, ngày nay, Đảng và Nhà nước ta đã xây dựng một chiến lược phát triển lâu dài với nhiều chính sách ưu đãi tạo điều kiện cho ngành Y dược học cổ truyền tiếp tục kế thừa, bảo tồn đồng thời phát huy hết những khả năng tiềm ẩn nhằm xây dựng nền Y dược học Việt Nam ngày càng khoa học hiện đại góp phần đắc lực trong công tác chăm sóc sức khoẻ của nhân dân. Những hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học được phân lập từ cây cỏ từ lâu đã được ứng dụng rất nhiều trong các ngành công nghiệp, nông nghiệp, chúng được sử dụng để sản xuất thuốc chữa bệnh, thuốc bảo vệ thực vật, làm nguyên liệu cho ngành công nghiệp thực phẩm và mỹ phẩm… Chế phẩm thảo dược đều là hỗn hợp của nhiều hợp chất khác nhau và trong hầu hết các trường hợp đều chưa xác định rõ hoạt chất của từng chất. Vì vậy, những bài thuốc sử dụng thảo dược và bản thân các thảo dược là đối tượng cho các nhà khoa học nghiên cứu một cách đầy đủ về cấu trúc các chất có hoạt tính sinh học cao có trong cây cỏ. Từ đó định hướng cho việc nghiên cứu, chiết xuất để tìm ra các loại thuốc mới hoặc bằng con đường tổng hợp, bán tổng hợp để tạo ra những chất có hoạt tính cao góp phần trong việc phòng bệnh, chữa bệnh, giảm tỉ lệ tử vong, nâng cao tuổi thọ. Vì vậy việc nghiên Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 2 cứu thành phần hóa học từ những cây cỏ thiên nhiên có ý nghĩa khoa học và thực tiễn rất cao. Cây Bàn tay ma có tên khoa học Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum thuộc họ Proteaceae, là cây thuốc dân gian của Việt Nam. Nghiên cứu sơ bộ về tác dụng dược học cho biết, lá cây Bàn tay ma có tác dụng kháng sinh mạnh. Theo kinh nghiệm dân gian, lá cây có tác dụng tiêu độc, hay được nhân dân sử dụng để chữa bệnh thấp khớp, nấu nước tắm cho phụ nữ sau khi sinh đẻ cho khoẻ người và đỡ đau nhức, dùng để chữa lao hạch, chữa các bệnh lý về gan, thận, đặc biệt trong những trường hợp viêm gan cấp và mãn tính [1, 2]. Cây Bàn tay ma đã được dùng trong dân gian từ lâu, nhưng nghiên cứu thành phần hóa học cây Bàn tay ma thì chưa thấy có tài liệu nào công bố. Để góp phần làm rõ hơn về thành phần hóa học của cây Bàn tay ma, tạo thuận lợi cho việc dùng, sử dụng cây thuốc này làm dược liệu và nguyên liệu cho các mục đích khác, tôi mạnh dạn chọn đề tài: “Nghiên cứu thành phần hoá học của lá cây Bàn tay ma - Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum họ Proteaceae ở Cao Bằng”. Đối tượng nghiên cứu là lá cây Bàn tay ma, cây mọc hoang, thu hái quanh năm tại huyện Hòa An tỉnh Cao Bằng. Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 3 CHƢƠNG I: TỔNG QUAN 1.1- HỌ PROTEACEAE VÀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CHÚNG. 1.1.1- Giới thiệu về họ Proteaceae. Proteaceae là họ tương đối lớn, với khoảng 80 chi và 1.600 loài. Các chi được biết đến nhiều nhất bao gồm Protea, Banksia, Embothrium, Grevillea (trải bàn / ngân hoa), Hakea, Dryandra và Macadamia [24]. Họ này được hầu như tất cả các nhà phân loại học công nhận. Được thiết lập vững chắc trong phân loại học Linnaeus cổ điển, nó cũng được các hệ thống phân loại dựa trên miêu tả theo nhánh như hệ thống APG và hệ thống APG II công nhận. Trong các hệ thống này nó được đặt trong bộ Proteales, nhưng vị trí của bộ này lại không cố định. Proteaceae nói chung là các cây thân gỗ hay cây bụi, ngoại trừ một số loài thuộc chi Stirlingia là cây thân thảo. Lá của chúng thường xanh với sự dao động mạnh về kích thước, hình dáng và mép lá. Proteaceae là họ chủ yếu ở Nam bán cầu, với các trung tâm đa dạng chính ở Australia và Nam Phi. Nó cũng có tại miền trung châu Phi, Nam và Trung Mỹ, Ấn Độ, miền Đông và Đông nam châu Á, các đảo của châu Đại Dương . Chỉ có 2 loài tại New Zealand, mặc dù chứng cứ phấn hoa hóa thạch cho thấy trước kia tại đây có nhiều loài hơn. Họ Proteaceae hiện tại được chia ra thành 5 phân họ, bao gồm: Bellendenoideae, Persoonioideae, Symphionematoideae, Proteoideae và Grevilleoideae. Có nhiều loài cây thuộc họ Proteaceae được sử dụng trong y học dân gian nhiều dân tộc, ở các nước Châu Phi, Châu Mỹ La tinh, Châu Á và Đông Nam Á. Tại Chile và New Zealand, hai loài của chi Macadamia được trồng ở quy mô thương mại để lấy hạt ăn được. Gevuina avellana (phỉ Chile) được Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 4 trồng để lấy hạt, hạt này cũng ăn được và được sử dụng trong công nghiệp dược phẩm để dưỡng da do các tính chất giữ ẩm của nó, như là thành phần của kem chống nắng. Ở Chile có các loài Lomatia ferruginea, Lomatia hirsuta rất có giá trị vì chúng có thể tạo ra cảnh quan đẹp kỳ lạ kiểu nhiệt đới tại các khu vực có khí hậu ôn đới. Chúng đã được du nhập vào Tây Âu và miền tây Hoa Kỳ. Embothrium coccineum (cây lửa Chile hay Notro) có giá trị cảnh quan do nó có hoa màu đỏ thẫm, phát triển tốt trên Quốc đảo Anh và có thể thấy tại quần đảo Faroe ở vĩ độ 62° vĩ bắc. Nhiều loài Proteaceae được trồng trong vườn ươm, như là thực vật hàng rào cũng là vì tán lá và hoa nổi bật của chúng. Một vài loài có tầm quan trọng đối với ngành trồng hoa, đặc biệt một vài loài trong các chi Banksia và Protea. Các loài khác, nhỏ hơn nhưng cũng được trồng tại một vài nơi trên thế giới là Telopea speciosissima (waratah), từ các dãy núi tại New South Wales, Australia. Một vài loài trong khí hậu ôn đới cũng được trồng ở quy mô địa phương tại Australia vì vẻ đẹp của chúng: Persoonia pinifolia (geebung lá thông) vì hoa vàng chói lọi và quả giống như quả nho. Adenanthos sericeus (cây bụi lá quăn) được trồng vì lá mầu lòe loẹt và hoa nhỏ màu đỏ hay da cam của chúng. Hicksbeachia pinnatifolia được trồng vì quả và lá của nó ăn được [6-7], [10], [12-14], [17- 23] . 1.1.2. Những nghiên cứu hóa học thực vật họ Proteaceae. Cho đến nay đã có nhiều loài thực vật họ Proteaceae được nghiên cứu thành phần hoá học, đã phân lập và nhận dạng được một số chất, thuộc các nhóm chất khác nhau phổ biến là ancaloit, glucosit, axit hữu cơ, flavonoit, phenol và steroit [9], [11], [16]. 1.1.2.1- Các hợp chất ancaloit đƣợc phân lập từ họ Proteaceae. Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 5 Trong số các chất đã phân lập được từ các loài thuộc họ Proteaceae thì kiểu cấu trúc các hợp chất ancaloit được tìm thấy nhiều nhất. Chủ yếu là cấu trúc ancaloit khung tropan [9], [4]. Mười bốn ancaloit đầu tiên được biết đến trong họ Proteaceae được phân lập từ những búp non và hoa của loài Bellendena montanat tại Tasmania bởi các tác giả IRC Bick, Gillard JW và H Leow [25]. Trong đó, phổ biến là cấu trúc bellendine (1) và các dẫn xuất của nó bao gồm: 2,3- dihydrobellendine (2); 5,11-dihydroisobellendine(3); isobellendine (5); 2,3- epidihydrobellendine (4); 3 α -acetoxy-6 β- hydroxytropane (6); 6 β -acetoxy- 3 α -isobutoxytropane (7); 3α-acetoxy-6β-isobutoxytropane (8); darlingine (9); và 2,3-Dihydrodarlingine (10). [9]. O CH 3 O N H 3 C O CH 3 O N H 3 C 1. Dạng (+) Bellendinne. 2. (2,3-Dihydrobellendine). ON H 3 C CH 3 O O CH 3 O N H 3 C 3. ( 5,11-Dihydroisobellendine). 4. (2,3-Epidihydrobellendine). [...]... từ lá cây Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum, sẽ có 4 loại cặn chiết được ký hiệu là: HL EL BL ML Trong đó: HL: Cặn chiết n-Hexan của lá Heliciopsis lobata (Merr. )Sleum EL : Cặn chiết EtOAc của lá cây Heliciopsis lobata (Merr. )Sleum BL: Cặn chiết BuOH của lá cây Heliciopsis lobata (Merr. )Sleum ML : Cặn chiết MeOH của lá cây Heliciopsis lobata (Merr. )Sleum Kết quả thu nhận các dịch chiết từ lá cây Bàn tay. .. 6 '-[ (E) -3 '', 4''-Dihydroxycinnamoyl] arbutin 1.2. 1- Những nghiên cứu về cây Heliciopsis lotaba (Merr.) Sleum trong nƣớc Cây Bàn tay ma Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum là loài thực vật có ở Việt Nam, dân gian hay dùng lá cây này để chữa một số bệnh Song cho đến nay chưa thấy có tài liệu nào công bố về thành phần hoá học và tác dụng dược lý của cây này 1.2.2 - Cây Bàn tay ma- Heliciopsis lobata (Merr.). .. trúc hoá học của các chất phân lập được trong lá cây Bàn tay ma - Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum thu hái tại huyện Hòa An tỉnh Cao Bằng 2.1 ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1.1 Thu mẫu cây, xác định tên khoa học và phƣơng pháp xử lý mẫu Nguyên liệu để nghiên cứu là lá cây Bàn tay ma Mẫu cây tươi được thu hái vào tháng 11 năm 2009 tại huyện Hòa An tỉnh Cao Bằng Mẫu cây dùng để nghiên cứu hoá. .. 1,2,4-Benzenetriol ;1-O-[(3-Hydroxy-3phenylpropanoyl )-( 6 )- β -Dallopyranoside] O O HO OH O O OH OH OH OH O O HO O O OH OH HO 39 1,2,4-Benzenetriol;1-O-(6-OBenzoyl- β -D-glucopyranoside) 40 1,2,4-Benzenetriol;4-O-(6-O-Benzoyl-βD-glucopyranoside) OH HO OH O HO O O O OH HO O O HO O OH HO OH 41 3,4-Dihydroxybenzyl alcohol;4-O(6-O-Benzoyl- β -Dglucopyranoside) O 42 3,4-Dihydroxybenzyl alcohol;4-O-(6-OBenzoyl-... H3C 21 22 2-Benzyl-3,6-tropanediol 2-Benzyl-O-acetyltropanol O N O CH3 OH O O CH 3 N 23 24 2-Benzyl-3-O-benzoyltropanol 4-Benzyl-3,6-tropanediol; (3α,4α,6β)form- 3-( E-Cinnamoyl) Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 9 OH N CH3 OH N OH CH3 O O O O O O 25 26 2-( -Hydroxybenzyl )-3 ,6tropanediol; O6-Benzoyl 2-( -Hydroxybenzyl )-3 ,6-tropanediol; O6-Benzoyl, O3-cinnamoyl... Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum 1.2.2.1 Đặc điểm thực vật học – phân bố [1] Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 20 Cây Bàn tay ma có tên khoa học là Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum, thuộc họ Chẹo thui - Proteaceae Ngoài ra cây còn có tên gọi khác theo tiếng địa phương của người dân tộc Tày là cây Hang quang (đuôi nai ) Cây mọc trong rừng núi ở Bắc Kạn, Vĩnh Phúc,... năng thận suy giảm) - Rễ cây bàn tay ma: 20 gam - Thạch xương bồ : 10 gam - Rễ chua ngút : 10 gam - Cây chỉ thiên: 10 gam Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 23 - Rễ chua me : 10 gam - Bồng bồng rường : 10 gam - Long nha thảo : 20 gam - Thổ phục linh: 10 gam - Rễ dâu : 10 gam + Bài thuốc chữa viêm gan virus - Rễ thân cành cây Bàn tay ma thái lát Lấy 100 – 200... học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 13 O OH CH3 H3C H 3C OH O CH3 47 48 (Z )-5 -( 8-Tridecenyl )-1 , 3- (Z) 5-( 8-Tridecenyl )-1 ,3-dimethoxy benzenediol benzen HO OH HO CH3 OH CH 3 49 50 5-Nonadecyl-1,3-benzenediol 5-Pentadecyl-1,3-benzenediol OH H3 C HO OH CH 3 OH 51 52 5-( 8-Pentadecenyl )-1 , 3- 5-( 10-Pentadecenyl )-1 ,3-benzenediol; benzenediol; 8',9'Z-Didehydro 10',11' Z-Didehydro 1.1.2.4 Các hợp chất... (66): D-1-O-methyl-myo-inositol Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 17 OH OH HO O OH CH3 OH O O HO OH O OH (63): Myricitrin 5,7,3’,4’,5 - pentahidroxy – 3-O-β-glucopyrannozyl flavon OH OH OH O OH O OH O O HO O OH O (64): 5,7,4’-trihidroxy-3’,5 - dimethoxy -3 -O-β-glucopyrannozyl flavon H3C CH 3 H 3C CH3 CH 3 CH 3 HO (68): β-Sitosterol Số hóa bởi Trung tâm Học liệu... ngày - Bàn tay ma: 100 gam, vỏ xoan hồi: 100 gam Sắc nước uống thay nước hàng ngày + Bài thuốc chữa bệnh Gut - Lấy 200 gam bàn tay ma sắc nước uống thay nước hàng ngày Uống 1 đến 2 tháng liền Có thể thêm vào đó tầm gửi cây Xau xau hiệu quả càng cao Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 24 CHƢƠNG 2: THỰC NGHIỆM Cây Bàn tay ma - Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum . Bàn tay ma - Heliciopsis lobata (Merr. ) Sleum họ Proteaceae ở Cao Bằng . Đối tượng nghiên cứu là lá cây Bàn tay ma, cây mọc hoang, thu hái quanh năm tại huyện Hòa An tỉnh Cao Bằng. Số hóa bởi. 2 cứu thành phần hóa học từ những cây cỏ thiên nhiên có ý nghĩa khoa học và thực tiễn rất cao. Cây Bàn tay ma có tên khoa học Heliciopsis lobata (Merr. ) Sleum thuộc họ Proteaceae, là cây. http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM NGUYỄN THỊ PHƢƠNG LAN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ CÂY BÀN TAY MA HELICIOPSIS LOTABA (MERR. ) SLEUM HỌ PROTEACEAE