BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH LÊ MINH HUY NGHIÊN CỨU GIẢI PHẪU BỆNH VÀ HÓA MÔ MIỄN DỊCH CÁC YẾU TỐ TIÊN LƯỢNG CỦA CARCINÔM TẾ BÀO GAN LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC TP Hồ Chí Minh -2012 i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH  LÊMINHHUY NGHIÊN CỨU GIẢI PHẪU BỆNH VÀ HÓA MÔ MIỄN DỊCH CÁC YẾU TỐ TIÊN LƯỢNG CỦA CARCINÔM TẾ BÀO GAN  Chuyên ngành: Giải Phẫu Bệnh Mã số: 62.72.01.05 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: 1. PGS.TS. HỨA THỊ NGỌC HÀ 2. PGS.TS. NGUYỄN THÚY OANH TP Hồ Chí Minh -2012 ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu, kết quả nêu trong luận án là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác. Tác giả Lê Minh Huy iii MỤC LỤC Trang Trang phụ bìa i Lời cam đoan ii Mục lục iii Bảng đối chiếu thuật ngữ Việt-Anh iv Danh sách các chữ viết tắt v Danh sách bảng vi Danh sách biểu đồ viii Danh sách hình viii ĐẶT VẤN ĐỀ 1 Mục tiêu nghiên cứu: 2 CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1. Các đặc điểm có ý nghĩa tiên lượng của CTBG 3 1.2. P53 và CTBG 20 1.3. Ki-67 và CTBG 28 CHƯƠNG 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1. Đối tượng nghiên cứu 30 2.2. Phương pháp nghiên cứu 31 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 42 3.1. Các đặc điểm có ý nghĩa tiên lượng của CTBG 42 3.2. Biểu hiện của p53, Ki67 trên CTBG 60 3.3. Mối liên quan giữa các đặc điểm có ý nghĩa tiên lượng và biểu hiện của p53, Ki67 trên CTBG 64 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 81 4.1. Các đặc điểm có ý nghĩa tiên lượng của CTBG 81 4.2. Biểu hiện của p53, Ki67 trên CTBG 101 4.3. Mối liên quan giữa các đặc điểm có ý nghĩa tiên lượng và biểu hiện của p53, Ki67 trên CTBG 108 KẾT LUẬN 116 KIẾN NGHỊ 118 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC iv BẢNG ĐỐI CHIẾU THUẬT NGỮ VIỆT – ANH Biệt hóa rõ: well differentiated Biệt hóa vừa: moderately differentiated Biệt hóa kém: poorly differentiated Carcinôm tế bào gan: hepatocellular carcinoma Chết tế bào theo chương trình: apoptosis Chỉ số đánh giá hoạt tính mô học: Histological activity index Dạng bè: trabecular variant Dạng đặc: compact variant Dạng giả tuyến: pseudoglandular variant Dạng phiến sợi: fibrolamellar variant Dạng xơ hóa: scirrhous variant Dạng khối: massive Dạng nốt: nodular Độ mô học: Histological Grade Hóa mô miễn dịch: immunohistochemistry Kháng nguyên: antigen Kháng thể: antibody Không biệt hóa: undifferentiated Nghịch sản tế bào gan: liver cell dysplasia Nghịch sản loại tế bào lớn: Large cell dysplasia Tế bào khổng lồ: giant cell Tế bào sáng: clear cell Tế bào dạng phồng bào: oncocyte – like cell Tế bào hình thoi: spindle cell v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT VIẾT TẮT THUẬT NGỮ VIẾT AFP: Alpha-feto protein Anti – HbcAg: Anti – Hepatitis B core Antigen CTBG: Carcinôm tế bào gan HBV: Hepatitis B virus HCV: Hepatitis C virus HbsAg: Hepatitis B surface Antigen HE: Haematoxylin-Eosin HAI: Histological activity index HMMD: Hóa mô miễn dịch KT: Kháng thể KN: Kháng nguyên LCD: Large cell dysplasia MS: Mã số PB: Phân bào QTx400: Quang trường x400 lần vi DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1: Nồng độ AFP trong huyết thanh 45 Bảng 3.2: Phân loại mô học theo cấu trúc mô học 47 Bảng 3.3: Phân loại mô học theo hình thái tế bào 50 Bảng 3.4: Phân độ biệt hóa 52 Bảng 3.5: Xâm nhập mạch máu vi thể 54 Bảng 3.6: Biểu hiện phân bào 55 Bảng 3.7: Hiện tượng hoại tử u 56 Bảng 3.8: Tương quan giữa nghịch sản với mức độ viêm gan và xơ gan 60 Bảng 3.9: Biểu hiện của p53 trong khối u 61 Bảng 3.10: Biểu hiện của Ki67 trong chủ mô và trong khối u 64 Bảng 3.11: Tương quan p53 và hoại tử u 65 Bảng 3.12: Tương quan p53 và phân bào 65 Bảng 3.13: Tương quan p53 và độ biệt hóa 66 Bảng 3.14: Tương quan p53 và xâm nhập mạch máu 67 Bảng 3.15: Tương quan p53 và Ki-67 67 Bảng 3.16: Tương quan p53 và tuổi 68 Bảng 3.17: Tương quan p53 và giới 68 Bảng 3.18: Tương quan p53 và tình trạng viêm gan siêu vi 69 Bảng 3.19: Tương quan p53 và nồng độ AFP 69 Bảng 3.20: Tương quan p53 và vị trí u 70 Bảng 3.21: Tương quan p53 và số lượng u 70 Bảng 3.22: Tương quan p53 và kích thước u 70 Bảng 3.23: Tương quan p53 và cấu trúc mô học 71 Bảng 3.24: Tương quan p53 và tình trạng hoại tử u 71 Bảng 3.25: Tương quan Ki67 trong chủ mô và tình trạng nghịch sản tế bào gan 72 Bảng 3.26: Tương quan Ki67 và phân bào 73 Bảng 3.27: Tương quan Ki67 và độ biệt hóa 73 Bảng 3.28: Tương quan Ki67 và tuổi 74 Bảng 3.29: Tương quan Ki67 và giới 74 Bảng 3.30: Tương quan Ki67 và tình trạng nhiễm siêu vi 75 Bảng 3.31 : Tương quan Ki67 và nồng độ AFP 75 Bảng 3.32: Tương quan Ki67 và vị trí u 76 Bảng 3.33: Tương quan Ki67 và số lượng u 76 vii Bảng 3.34: Tương quan Ki67 và kích thước u 77 Bảng 3.35: Tương quan Ki67 và cấu trúc mô học 77 Bảng 3.36: Tương quan Ki67 và tình trạng xâm nhập mạch máu 77 Bảng 3.37: Tương quan Ki67 và loại tế bào u 78 Bảng 3.38: Tương quan Ki67 và tình trạng hoại tử u 79 Bảng 4.1: So sánh tuổi trung bình của bệnh nhân CTBG giữa các nghiên cứu 82 Bảng 4.2: So sánh tỷ lệ giới tính bệnh nhân CTBG với các tác giả 84 Bảng 4.3: So sánh tuổi trung bình nam, nữ với các nghiên cứu khác 85 Bảng 4.4: So sánh với các nghiên cứu khác về tỷ lệ nhiễm virút viêm gan 86 Bảng 4.5: So sánh tuổi trung bình bệnh nhân nhiễm HBV, bệnh nhân nhiễm HCV với các nghiên cứu khác 87 Bảng 4.6: So sánh kích thước u với các nghiên cứu khác 91 Bảng 4.7: So sánh cấu trúc mô học với các nghiên cứu khác 92 Bảng 4.8: So sánh độ biệt hóa với các nghiên cứu khác 94 Bảng 4.9: So sánh mức độ biểu hiện p53 trên mô u với các nghiên cứu khác 105 Bảng 4.10: So sánh tương quan giữa p53 và độ biệt hóa với các nghiên cứu khác 108 Bảng 4.11: So sánh tương quan giữa p53 và xâm nhập mạch máu với nghiên cứu khác 110 viii DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1. Phân bố tuổi của CTBG 42 Biểu đồ 3.2: Phân bố giới & tuổi của CTBG 43 Biểu đồ 3.3: Phân bố tỷ lệ nhiễm virút viêm gan 44 Biểu đồ 3.4: Vị trí u 45 Biểu đồ 3.5: Phân bố tỷ lệ kích thước u theo nhóm 47 Biểu đồ 3.6: Tình trạng nghịch sản của mô gan xung quanh u 57 Biểu đồ 3.7: Mức độ viêm của chủ mô gan trên bệnh nhân CTBG 58 Biểu đồ 3.8: Mức độ xơ hóa của chủ mô gan trên bệnh nhân CTBG 59 Biểu đồ 3.9: Mối tương quan p53 và các yếu tố có ý nghĩa tiên lượng khác …………………………80 Biểu đồ 3.10: Mối tương quan Ki67 và các yếu tố có ý nghĩa tiên lượng khác………… 80 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Đại thể dạng khối 07 Hình 1.2: Đại thể dạng nốt 07 Hình 1.3: Đại thể dạng lan tỏa 07 Hình 1.4: CTBG biệt hóa rõ 10 Hình 1.5: CTBG biệt hóa vừa 11 Hình 1.6: CTBG biệt hóa kém 11 Hình 1.7: CTBG không biệt hóa 11 Hình 1.8: Tế bào u xếp dạng bè 14 Hình 1.9: Tế bào u sắp xếp cấu trúc giả tuyến 14 Hình 1.10: Tế bào u sắp xếp cấu trúc đặc 14 Hình 1.11: CTBG dạng sợi mảnh 15 Hình 1.12: Cấu trúc gen p53 19 Hình 1.13: Cấu trúc protein p53 20 Hình 1.14: Biểu hiện dương tính của p53 trên CTBG so với mô gan không u 26 Hình 1.15; 1.16, 1.17, 1.18: Biểu hiện của p53 trên tiêu bản nhuộm hóa mô miễn dịch 27 Hình 3.1: CTBG với 1 khối u đơn độc trên nền mô gan không xơ 46 Hình 3.2: CTBG với 1 khối u đơn độc trên nền xơ gan 46 Hình 3.3: CTBG với 1 khối u lớn và nhiều nốt vệ tinh 46 Hình 3.4: CTBG với nhiều khối u 46 Hình 3.5: CTBG loại bè nhỏ 48 Hình 3.6: CTBG loại bè lớn 48 ix Hình 3.7: CTBG loại đặc 49 Hình 3.8: CTBG loại giả tuyến 49 Hình 3.9: CTBG loại xơ hóa 49 Hình 3.10: CTBG loại điển hình 50 Hình 3.11: CTBG loại tế bào sáng 51 Hình 3.12: CTBG loại tế bào hình thoi 51 Hình 3.13: CTBG loại phồng bào 51 Hình 3.14: CTBG loại hỗn hợp 52 Hình 3.15: CTBG biệt hóa rõ 53 Hình 3.16: CTBG biệt hóa vừa 53 Hình 3.17: CTBG biệt hóa kém 53 Hình 3.18: CTBG không biệt hóa 54 Hình 3.19: Xâm nhập mạch máu 55 Hình 3.20: Phân bào trong khối u 56 Hình 3.21: Hiện tượng hoại tử trong khối u 57 Hình 3.22: Nghịch sản tế bào gan ở chủ mô gan 58 Hình 3.23: Biểu hiện âm tính của p53 61 Hình 3.24: Biểu hiện dương tính 1+ của p53 62 Hình 3.25: Biểu hiện dương tính 2+ của p53 62 Hình 3.26: Biểu hiện dương tính 3+ của p53 62 Hình 3.27: Biểu hiện dương tính của Ki-67 trong chủ mô gan 64 Hình 3.28: Biểu hiện dương tính của Ki-67 ở tế bào u 64 [...]... nhiều yếu tố có giá trị tiên lượng khác nhau, vừa gồm các yếu tố kinh điển vừa có các yếu tố hóa mô miễn dịch, sinh học phân tử, vừa đánh giá tình trạng chủ mô gan Vì vậy, nghiên cứu sự biểu hiện của các dấu chứng sinh học p53, Ki67 trên hóa mô miễn dịch ở các bệnh nhân CTBG kết hợp với việc xác định mối tương quan với các yếu tố tiên lượng kinh điển cùng với việc đánh giá gián tiếp chức năng gan của. .. bao thật Các tế bào gan ung thư có thể xâm nhập vào mô gan xung quanh theo các xoang hình thành cấu trúc mô học dạng xoang Trong CTBG dạng thay thế, các tế bào u xâm nhập vào các bè tế bào gan và thay thế các tế bào gan bình thường, hình thành cấu trúc mô học đặc trưng với hình ảnh giới hạn rõ giữa tế bào u và mô gan bình thường xung quanh CTBG dạng có vỏ bao giả là loại mô học có các bó mô sợi mỏng,... dưới các tế bào nội mô Các tế bào nội mô không cùng loại với các tế bào nội mô bình thường ở các xoang gan mà cùng loại với loại tế bào nội mô của hệ thống vi mạch CTBG không có mô đệm phản ứng, đây là đặc điểm giúp giải thích lý do CTBG thường có mật độ mềm hơn so với hầu hết các trường hợp ung thư biểu mô khác Các bè tế bào u có thể chỉ có ít lớp tế bào (bè nhỏ) hay có thể có trên 20 lớp tế bào u... nghịch sản tế bào gan P53 dương tính trong 48% các trường hợp CTBG, trong khi đó chỉ có 3% trường hợp nghịch sản tế bào gan Theo tác giả Lee và cộng sự [81], tốc độ tăng sản tế bào của nghịch sản tế bào gan thấp (Ki-67 và PCNA) nhưng tỉ lệ chết tế bào theo chương trình của các trường hợp nghịch sản tế bào gan loại tế bào lớn (LCD) cao hơn tế bào gan bình thường Hình 1.14: Biểu hiện dương tính mạnh của p53... trong cùng một u, nhất là ở các khối u có kích thước lớn hơn 2cm Các tế bào gan ung thư tăng sinh quá nhanh làm cho các bè tế bào gan trở nên xoắn vặn và dày hơn bình thường Các bè tế bào gan ung thư được bao quanh bởi các tế bào nội mô mạch máu, cách nhau bởi các xoang mạch với rất ít hay không có mô liên kết nâng đỡ Các xoang mạch của u cũng chứa các tế bào Kupffer, tế bào sao nhưng có rất ít hay... viêm gan, xơ hóa được y văn ghi nhận [18], [20], [35], [36], [37] Điều trị và tiên lượng của bệnh nhân phụ thuộc vào giai đoạn bệnh lúc được chẩn đoán và những đặc điểm giải phẫu bệnh của khối ung thư và chức năng phần gan còn lại [27], [29], [61], [69], [86], [90], [125] Tuy nhiên, việc tiên lượng thời gian sống của bệnh nhân và sự tái phát của khối u sẽ chính xác hơn khi phối hợp nhiều yếu tố tiên lượng. .. biệt hóa và tiên lượng của bệnh nhân Bệnh nhân có độ biệt hóa càng cao tiên lượng càng xấu Tuy nhiên, cũng không ít trường hợp CTBG không theo qui luật này Ở các 12 bệnh nhân này, tiên lượng còn phụ thuộc vào nhiều yếu tố khác như tình trạng sức khỏe của bệnh nhân, tình trạng bệnh lý ở chủ mô gan, kích thước khối u, Do đó, độ biệt hóa không nên sử dụng riêng lẻ để tiên lượng mà phải phối hợp nhiều yếu. .. có tiên lượng sống tốt hơn so với các bệnh nhân CTBG nhiễm HBV (54% tái phát sau 5 năm) [93], [145] 5 Hầu hết các bệnh nhân CTBG chết do suy gan Tỉ lệ tử vong ở bệnh nhân CTBG không có xơ gan, viêm gan thấp hơn các bệnh nhân có CTBG xảy ra trên nền xơ gan, viêm gan Tình trạng viêm gan, xơ gan làm cho chức năng gan của bệnh nhân kém Các bệnh nhân có Child-Pugh B, C đều có tình trạng xơ hóa trên mô gan. .. giữa các epitop của protein p53 và các paratop của các kháng thể p53 có đánh dấu chất bắt màu Trong tế bào bất thường, protein p53 thường tập trung biểu hiện ở trong nhân tế bào, vì thế khi nhuộm hóa mô miễn dịch thì nhân tế bào sẽ bắt màu, trong khi ở các tế bào bình thường, lượng protein p53 biểu hiện ít nên không cho thấy sự bắt màu đặc trưng Như vậy các tế bào bắt màu với màu nhuộm trong các phân... nhân tế bào, là hậu quả của đột biến gen gây ra Nghiên cứu của tác giả Lunn [92] và cộng sự cho thấy, độ nhạy của phương pháp hóa mô miễn dịch cao hơn các phương pháp khác như PCR-SSCP, giải trình tự gen trong việc phát hiện đột biến p53 trên CTBG Hiện nay, nhuộm hóa mô miễn dịch là phương pháp phổ biến để nhận diện các tế bào bất thường dựa vào sự biểu hiện vượt mức protein p53 Nguyên tắc chủ yếu của . BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH LÊ MINH HUY NGHIÊN CỨU GIẢI PHẪU BỆNH VÀ HÓA MÔ MIỄN DỊCH CÁC YẾU TỐ TIÊN LƯỢNG CỦA CARCINÔM TẾ BÀO GAN LUẬN. GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH  LÊMINHHUY NGHIÊN CỨU GIẢI PHẪU BỆNH VÀ HÓA MÔ MIỄN DỊCH CÁC YẾU TỐ TIÊN LƯỢNG CỦA CARCINÔM TẾ BÀO GAN  Chuyên. sự phối hợp nhiều yếu tố có giá trị tiên l ượng khác nhau, vừa gồm các yếu tố kinh điển vừa có các yếu tố hóa mô miễn dịch, sinh học phân tử, vừa đánh giá tình trạng chủ mô gan. Vì vậy, nghiên