BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG & TRẦN THỊ TUYẾT LAN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA HAI LOÀI VI TẢO BIỂN THUỘC HAI CHI Chaetoceros và Tetraselmis LUẬN VĂN THẠC SỸ Nha Trang, 2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG & TRẦN THỊ TUYẾT LAN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA HAI LOÀI VI TẢO BIỂN THUỘC HAI CHI Chaetoceros và Tetraselmis Chuyên ngành: Nuôi trồng thủy sản Mã số: 60 62 70 LUẬN VĂN THẠC SỸ NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS. ĐẶNG DIỄM HỒNG TS. HOÀNG THỊ BÍCH MAI Nha Trang, 2011 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng, các số liệu thu thập được trong quá trình thực hiện đề tài là hoàn toàn đúng với thực tế; kết quả trình bày trong luận văn là trung thực và chưa được sử dụng để bảo vệ một học vị nào; các thông tin trích dẫn trong luận văn đều được chỉ rõ nguồn gốc. ii LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi tới Ban Giám hiệu, Ban Chủ nhiệm Khoa Nuôi trồng thủy sản, Phòng Đào tạo đại học và Sau đại học - Trường Đại học Nha Trang sự kính trọng và lòng tự hào được học tập tại trường trong thời gian qua. Xin bày tỏ lòng biết ơn tới PGS.TS. Đặng Diễm Hồng, TS. Hoàng Thị Bích Mai đã giúp đỡ, động viên và chỉ bảo tận tình tôi trong suốt thời gian tôi thực hiện đề tài. Xin chân thành cảm ơn Ban Quản lý Dự án Hợp phần Hỗ trợ phát triển nuôi trồng thủy sản bền vững (SUDA) – Chương trình FSPS – 2 đã hỗ trợ kinh phí cho tôi trong suốt khoá học. Cảm ơn các cán bộ của Phòng Công nghệ Tảo - Viện Công nghệ sinh học – Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam đã giúp cơ sở vật chất thí nghiệm, tài liệu và các kinh nghiệm quý báu trong suốt thời gian tôi thực tập tốt nghiệp. Cảm ơn Vụ Khoa học, Công nghệ và Môi trường - Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn đã tạo điều kiện cho tôi được học tập để nâng cao trình độ chuyên môn. Cám ơn Trường Cao đẳng Thủy sản đã hỗ trợ về cơ sở đào tạo để tôi hoàn thành khoá học. Cuối cùng, tôi xin cảm ơn các bạn bè, đồng nghiệp và gia đình đã động viên và tiếp sức cho tôi hoàn thành chương trình học tập cũng như việc thực hiện nghiên cứu đề tài. Nha Trang, tháng 06 năm 2011 Học viên Trần Thị Tuyết Lan iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Từ viết tắt Viết đầy đủ AA Axít Arachidonic (C20:4n-6, C20:4n-3) DHA Axít Docosahecxaenoic (C22:6n-3) DMSO Dimethylsufloxide EPA Axít Eicosapentaenoic (C20:5n-3) Erd Erdscheiber MĐTB Mật độ tế bào NTTS Nuôi trồng thủy sản OD Mật độ quang PUFAs (Polyunsaturated Fatty Acids), Axít béo không bão hoà đa nối đôi MUFAs (Monounsaturated fatty acids), Axít béo không bão hòa, 1 nối đôi SEM Kính hiển vi điện tử quét TB Tế bào TLK Trọng lượng khô TLT Trọng lượng tươi VTB Vi tảo biển iv MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TĂT iii DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC CÁC HÌNH viii MỞ ĐẦU 1 CHƯƠNG 1- TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 1.1. Tình hình nghiên cứu vi tảo ngoài nước 4 1.2. Tình hình nghiên cứu vi tảo trong nước 10 1.3. Tình hình nghiên cứu về chi Chaetoceros và Tetraselmis 13 1.3.1. Nghiên cứu đặc điểm sinh học của chi Chaetoceros và Tetraselmis 13 1.3.2. Ứng dụng của VTB C. gracilis và T. chuii trong NTTS 14 CHƯƠNG 2 - VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu 16 2.2. Vật liệu 16 2.2.1. Đối tượng nghiên cứu 16 2.2.2. Hoá chất 16 2.2.3. Thiết bị 16 2.3. Sơ đồ khối nghiên cứu 17 2.4. Phương pháp nghiên cứu 17 2.4.1. Phân lập, lưu giữ và định tên khoa học 2 loài VTB thuộc 2 chi Chaetoceros và Tetraselmis 17 2.4.1.1. Thu thập và phân lập 2 loài VTB 17 2.4.1.2. Chụp ảnh hình thái tế bào dưới kính hiển vi quang học và kính hiển vi điện tử quét (SEM) 20 2.4.1.3. Định tên khoa học hai loài VTB thuộc 2 chi Chaetoceros và Tetraselmis 21 v 2.4.1.4. Lưu giữ 2 loài VTB 21 2.4.2. Xác định điều kiện nuôi cấy thích hợp 2 loài VTB thuộc 2 chi Chaetoceros và Tetraselmis 26 2.4.2.1. Ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng 27 2.4.2.2. Ảnh hưởng của nồng độ muối 27 2.4.2.3. Ảnh hưởng của cường độ chiếu sáng 27 2.4.2.4. Ảnh hưởng của nhiệt độ 27 2.4.2.5. Ảnh hưởng của pH 27 2.4.2.6. Xác định sinh trưởng của VTB 28 2.4.3. Nuôi sinh khối 2 loài VTB thuộc 2 chi Chaetoceros và Tetraselmis trong điều kiện phòng thí nghiệm 29 2.4.3.1. Nuôi sinh khối loài C. gracilis Pantocsek 1982 29 2.4.3.2. Nuôi sinh khối loài Tetraselmis chuii Butcher 1959 30 2.4.3.3. Phân tích thành phần dinh dưỡng 2 loài VTB thuộc 2 chi Chaetoceros gracilis và Tetraselmis chuii 31 CHƯƠNG 3 - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 34 3.1. Phân lập, lưu giữ và định tên khoa học 2 loài VTB thuộc 2 chi Chaetoceros và Tetraselmis 34 3.1.1. Thu thập và phân lập 2 loài VTB 34 3.1.1.1. Loài Chaetoceros sp. 34 3.1.1.2. Loài Tetraselmis sp. 35 3.1.2. Định tên khoa học của 2 loài Chaetoceros sp. và Tetraselmis sp. 36 3.1.2.1. Tách chiết ADN tổng số 36 3.1.2.2. Kết quả nhân gen 18S rRNA của loài Chaetoceros sp. và Tetraselmis sp. 37 3.1.2.3. Tách dòng đoạn gien 18S rRNA của mẫu Chaetoceros sp. và Tetraselmis sp. 37 3.1.3. Lưu giữ Chaetoceros gracilis Pantocsek 1982 và Tetraselmis chuii Butcher 1959 41 3.1.3.1. Lưu giữ Chaetoceros gracilis và Tetraselmis chuii trên môi trường lỏng và ống thạch nghiêng 41 3.1.3.2. Lưu giữ Chaetoceros gracilis và Tetraselmis chuii ở vi nhiệt độ thấp (-80ºC) 43 3.2. Xác định điều kiện nuôi cấy thích hợp của loài C. gracilis và T.chuii 45 3.2.1. Xác định điều kiện nuôi cấy thích hợp của loài C. gracilis 45 3.2.1.1. Ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng 45 3.2.1.2. Ảnh hưởng của nồng độ muối 46 3.2.1.3. Ảnh hưởng của cường độ chiếu sáng 47 3.2.1.4. Ảnh hưởng của nhiệt độ 47 3.2.1.5. Ảnh hưởng của pH 48 3.2.2. Xác định điều kiện nuôi cấy thích hợp của loài T.chuii 48 3.2.2.1. Ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng 48 3.2.2.2. Ảnh hưởng của nồng độ muối 49 3.2.2 3. Ảnh hưởng của nhiệt độ 50 3.2.2.4. Ảnh hưởng của cường độ chiếu sáng 51 3.2.2.5. Ảnh hưởng của pH 51 3.3. Nuôi sinh khối loài C.gracilis và loài T.chuii trong điều kiện phòng thí nghiệm 52 3.3.1. Nuôi sinh khối loài C.gracilis 52 3.3.2. Nuôi sinh khối loài T.chuii 3.4.Thành phần dinh dưỡng của loài C. gracilis và loài T.chuii 53 3.4.1.Thành phần dinh dưỡng của loài C. gracilis 53 3.4.2. Thành phần dinh dưỡng của loài T. chuii 56 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 60 KẾT LUẬN 60 KIẾN NGHỊ 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO 62 PHỤ LỤC 72 vii [...]... thuộc Vi n Khoa học và Công nghệ Vi t Nam Mục tiêu của đề tài: 1 Mục tiêu chung: Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của hai loài VTB thuộc hai chi Chaetoceros và Tetraselmis phân lập ở Vi t Nam với mục đích ứng dụng trong NTTS 3 2 Mục tiêu cụ thể: 2.1 Có được bộ số liệu về phân lập, lưu giữ giống, định tên khoa học chính xác và một số đặc điểm sinh học của hai loài VTB thuộc hai chi Chaetoceros và Tetraselmis. .. ăn sống trong sinh sản nhân tạo các loài động vật biển gặp rất nhiều khó khăn, chưa khai thác được tiềm năng về vai trò của vi tảo, chưa đáp ứng được nhu cầu thực tế Xuất phát từ nhu cầu thực tế, tôi đã thực hiện đề tài: Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của hai loài vi tảo biển thuộc hai chi Chaetoceros và Tetraselmis Công vi c được thực hiện tại Phòng Công nghệ Tảo, Vi n Công nghệ Sinh học thuộc. .. khoa học chúng bằng các phương pháp truyền thống dựa trên các đặc điểm hình thái, các phương pháp sinh học phân tử, hiểu biết các đặc điểm sinh học chính của chúng để cho phép nuôi trồng thu sinh khối lớn, đáp ứng được yêu cầu thực tiễn đặt ra Chính vì vậy, chúng tôi đã thực hiện đề tài Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của hai loài vi tảo biển thuộc hai chi Chaetoceros và Tetraselmis Các kết quả nghiên. .. hợp 2 loài VTB thuộc 2 chi Chaetoceros và Tetraselmis Nuôi sinh khối 2 loài VTB thuộc 2 chi Chaetoceros và Tetraselmis trong điều kiện phòng thí nghiệm Kết luận và đề xuất ý kiến Hình 2.1 Sơ đồ khối nghiên cứu 2.4 Phương pháp nghiên cứu 2.4.1 Phân lập, lưu giữ và định tên khoa học 2 loài VTB thuộc 2 chi Chaetoceros và Tetraselmis 2.4.1.1 Thu thập và phân lập 2 loài VTB 18 Quy trình thu thập và phân... trung vào một loài vi tảo Nannochloropsis [23] Nghiên cứu đặc điểm sinh học của Dunaliella và Chlorella cũng đã được tiến hành nghiên cứu [10], [11] Quy trình lưu giữ một số VTB ở nhiệt độ thấp, ni tơ lỏng cũng đã được Vi n nghiên cứu NTTS I nghiên cứu và công bố Các nghiên cứu sử dụng phương pháp phân loại học phân tử dựa trên so sánh trình tự nucleotit của đoạn gen 18S rADN, ITS1-5,8S-ITS2 trong vi c... trình nghiên cứu đã khẳng định rằng Tetraselmis là nguồn thức ăn có chất lượng cao cho ấu trùng của các loại nhuyễn thể như trai, sò, ngao, hầu…[76] * Tình hình nghiên cứu đặc điểm sinh học của chi Chaetoceros và Tetraselmis Nguyễn Thị Hương (2001) [15] đã nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố sinh thái lên sự phát triển của quần thể C calcitrans Paulsen, 1905 nhập nội và thấy loài vi tảo này sinh. .. 2 loài VTB nêu trên có khả năng lưu giữ thuần chủng, nhân nhanh sinh khối có chất lượng dinh dưỡng phù hợp làm thức ăn cho NTTS Nội dung nghiên cứu của đề tài gồm: 1 Phân lập, lưu giữ và định tên khoa học 2 loài VTB thuộc 2 chi Chaetoceros và Tetraselmis 2 Xác định điều kiện nuôi cấy thích hợp 2 loài VTB thuộc 2 chi Chaetoceros và Tetraselmis 3 Nuôi sinh khối 2 loài VTB thuộc 2 chi Chaetoceros và Tetraselmis. .. trong và ngoài nước Từ năm 2008-2010 đề tài Nghiên cứu xây dựng tập đoàn giống vi tảo biển quang tự dưỡng, dị dưỡng của Vi t Nam và nuôi sinh khối một số loài tảo dị dưỡng làm thức ăn trong nuôi trồng thủy sản” thuộc Đề án phát triển và ứng dụng công nghệ sinh học trong lĩnh vực thủy sản cấp Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn do PGS.TS Đặng Diễm Hồng, Vi n Công nghệ sinh học, Vi n Khoa học Vi t... kiện phòng thí nghiệm Ý nghĩa khoa học và thực tiễn Kết quả nghiên cứu thu được trong Luận văn này là cơ sở khoa học cho vi c nghiên cứu sâu hơn nữa các loài vi tảo biển và bổ sung cơ sở dữ liệu cho tập đoàn giống vi tảo của Vi t Nam Kết quả nghiên cứu thu được có ý nghĩa thực tiễn đối với các trại sản xuất giống NTTS trong vi c chủ động nuôi, lưu giữ và thu sinh khối vi tảo làm thức ăn cho thủy, hải sản;... 10 lít; xô, chậu, máy nén và sục khí, đá sứ, quả sục, dây nhựa mềm, đèn nê-ông dài 0,6 và 1,2m … được sử dụng để chi u ánh sáng cho nuôi trồng tảo và một số dụng cụ khác 2.3 Sơ đồ khối nghiên cứu Sơ đồ khối nghiên cứu của đề tài được chỉ ra trên hình 2.1 Mục tiêu và nội dung nghiên cứu của đề tài Phân lập, lưu giữ và định tên khoa học 2 loài VTB thuộc 2 chi Chaetoceros và Tetraselmis Xác định điều . tài: Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của hai loài vi tảo biển thuộc hai chi Chaetoceros và Tetraselmis . Công vi c được thực hiện tại Phòng Công nghệ Tảo, Vi n Công nghệ Sinh học thuộc Vi n. BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG & TRẦN THỊ TUYẾT LAN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA HAI LOÀI VI TẢO BIỂN THUỘC HAI CHI Chaetoceros và Tetraselmis. GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG & TRẦN THỊ TUYẾT LAN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA HAI LOÀI VI TẢO BIỂN THUỘC HAI CHI Chaetoceros và Tetraselmis