i LỜI CẢM ƠN Trước tiên, tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô giáo Viện Công nghệ sinh học và môi trường, trường Đại học Nha Trang đã luôn quan tâm, chỉ bảo và giảng dạy nhiệt tình, giúp cho tôi có được những kiến thức quý báu trong suốt thời gian học tập tại trường. Tôi xin dành lời cảm ơn sâu sắc nhất đến TS. Nguyễn Văn Duy, Viện Công nghệ sinh học và môi trường, trường Đại học Nha Trang và TS. Nguyễn Thị Thu Huyền, Phòng Vi sinh vật dầu mỏ, Viện Công nghệ sinh học, Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam, đã định hướng, dìu dắt và tận tình hướng dẫn tôi trong suốt thời gian tôi thực hiện đồ án tốt nghiệp này. Tôi cũng xin chân thành cảm ơn PGS.TS. Lại Thúy Hiền cùng toàn thể cán bộ nghiên cứu Phòng Vi sinh vật dầu mỏ, Viện Công nghệ Sinh học, Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam đã tạo mọi điều kiện tốt nhất có thể cho tôi thực hiện tốt đồ án tốt nghiệp này. Tôi xin gửi lời cảm ơn trân trọng tới Phòng Kính hiển vi điện tử, Viện Vệ sinh dịch tễ đã tận tình giúp đỡ tôi trong thời gian thực hiện đồ án tốt nghiệp vừa qua. Cuối cùng tôi bày tỏ lòng biết ơn chân thành đến gia đình, bạn bè, những người luôn quan tâm giúp đỡ, động viên, đồng thời là chỗ dựa tinh thần rất lớn giúp tôi hoàn thành tốt mọi công việc được giao trong suốt thời gian học tập và thực hiện đồ án vừa qua. Nha Trang, tháng 6 năm 2010 Sinh viên Nguyễn Hoài Thu ii MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC ii DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC CÁC HÌNH vi MỞ ĐẦU 1 Chƣơng 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1. Thành phần, tính chất của dầu thô Việt Nam - Vũng Tàu 3 1.1.1. Thành phần nguyên tố của dầu thô 3 1.1.2. Tính chất vật lý của dầu thô 4 1.1.3. Thành phần hóa học của dầu thô 4 1.2. Khu hệ vi sinh vật trong các giếng khoan dầu khí 6 1.3. Vi khuẩn khử sunphat 8 1.3. 1. Môi trƣờng sống 8 1.3.2. Phân loại vi khuẩn khử sunphat 9 1.3.3. Quá trình trao đổi chất và năng lƣợng 11 1.3.4. Khả năng sử dụng dầu thô là nguồn cơ chất 14 1.3.5. Ảnh hƣởng của các yếu tố môi trƣờng đến sinh trƣởng của vi khuẩn khử sunphat 16 1.4. Vai trò của vi khuẩn khử sunphat trong thực tiễn cuộc sống 18 1.4.1 Ảnh hƣởng đến sinh thái và môi trƣờng 18 1.4.2. Ảnh hƣởng đến kinh tế và con ngƣời 19 Chƣơng 2 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1. Vật liệu 22 2.1.1. Nguyên liệu 22 2.1. 2. Môi trƣờng nuôi cấy 22 2.2. Phƣơng pháp nghiên cứu 23 2.2.1. Nghiên cứu khả năng sử dụng dầu thô của vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 23 iii 2.2.2. Đánh giá hàm lƣợng dầu tổng số bị sử dụng bởi vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 24 2.2.3. Phân lập đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt có khả năng sử dụng dầu thô 24 2.2.4. Nghiên cứu hình thái tế bào, nhuộm Gram và khả năng hình thành bào tử của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 25 2.2.5. Nghiên cứu khả năng chuyển hóa cơ chất của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 26 2.2.6. Nghiên cứu khả năng sử dụng dầu thô của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 26 2.2.7. Nghiên cứu ảnh hƣởng của nồng độ muối NaCl đến quá trình sinh trƣởng của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 27 2.2.8. Nghiên cứu ảnh hƣởng của pH đến quá trình sinh trƣởng của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 27 2.2.9. Nghiên cứu ảnh hƣởng của nhiệt độ đến quá trình sinh trƣởng của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt có khả năng sử dụng dầu thô 28 Chƣơng 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 3.1. Khả năng sử dụng dầu thô của vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt lấy từ giếng khoan dầu khí Vũng Tàu 29 3.2. Đánh giá hàm lƣợng dầu tổng số bị sử dụng bởi vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 31 3.3. Đặc điểm hình thái của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt có khả năng sử dụng dầu thô 32 3.3.1 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc 33 3.3.2. Đặc điểm nhuộm Gram 34 3.3.3. Khả năng tạo bào tử 34 3.3.4. Đặc điểm hình thái tế bào 35 3.4. Khả năng chuyển hóa cơ chất của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 39 3.5. Khả năng sử dụng dầu thô của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 40 iv 3.6. Ảnh hƣởng của nồng độ NaCl đến quá trình sinh trƣởng của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 44 3.7. Ảnh hƣởng của pH đến quá trình sinh trƣởng của đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 48 3.8. Ảnh hƣởng của nhiệt độ đến quá trình sinh trƣởng của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 52 3.9. Đặc điểm phân loại 53 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 57 PHỤ LỤC v DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1. Các cơ chất vi khuẩn khử sunphat sử dụng trong quá trình sinh trƣởng 13 Bảng 3.1. Khả năng sử dụng dầu thô của vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt phân lập từ giếng khoan dầu khí Vũng Tàu 29 Bảng 3.2. Hàm lƣợng dầu tổng số bị sử dụng bởi vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 32 Bảng 3.3. Đặc điểm hình thái khuẩn lạc của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 33 Bảng 3.4. Kết quả nhuộm Gram của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 34 Bảng 3.5. Khả năng chuyển hóa cơ chất lactat và axetat của đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 40 Bảng 3.6. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành các của đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt trên môi trƣờng có hàm lƣợng dầu thô khác nhau 41 Bảng 3.7. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt trên môi trƣờng có nồng độ muối khác nhau 45 Bảng 3.8. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt trên môi trƣờng tại các pH khác nhau 49 Bảng 3.9. Ảnh hƣởng của nhiệt độ đến sinh trƣởng của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 52 Bảng 3.10. Đặc điểm phân loại của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt có khả năng sử dụng dầu thô 53 vi DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 3.1. Ảnh đơn chủng 110G6_KL2 sinh trƣởng trở lại trong môi trƣờng dầu thô sau khi sốc nhiệt 35 Hình 3.2. Ảnh tế bào chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 70G3_KL1 đƣợc quan sát dƣới kính hiển vi điện tử 36 Hình 3.3. Ảnh tế bào chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 110G6_KL2 đƣợc quan sát dƣới kính hiển vi điện tử 36 Hình 3.4. Ảnh tế bào chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt ĐHG7 đƣợc quan sát dƣới kính hiển vi điện tử 37 Hình 3.5. Ảnh tế bào chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt 802G8_KL1 đƣợc quan sát dƣới kính hiển vi điện tử 37 Hình 3.6. Ảnh tế bào chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt Đ914_KL2 đƣợc quan sát dƣới kính hiển vi điện tử 38 Hình 3.7. Ảnh tế bào chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt Đ1008G10_KL1 đƣợc quan sát dƣới kính hiển vi điện tử 38 Hình 3.8. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của chủng 70G3_KL1 trên môi trƣờng có hàm lƣợng dầu thô khác nhau 42 Hình 3.9. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của chủng 110G6_KL2 trên môi trƣờng có hàm lƣợng dầu thô khác nhau 42 Hình 3.10. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của chủng ĐHG7 trên môi trƣờng có hàm lƣợng dầu thô khác nhau 43 Hình 3.11. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của chủng Đ914_KL2 trên môi trƣờng có hàm lƣợng dầu thô khác nhau 43 Hình 3.12. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của chủng 70G3_KL1 ở 55 o C trên môi trƣờng dầu thô 5% với các nồng độ NaCl khác nhau 46 Hình 3.13. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của chủng 110G6_KL2 ở 55 o C trên môi trƣờng dầu thô 0,5% với các nồng độ NaCl khác nhau 46 vii Hình 3.14. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của chủng ĐHG7 ở 55 o C trên môi trƣờng dầu thô 0,5% với các nồng độ NaCl khác nhau 47 Hình 3.15. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của chủng Đ914_KL2 ở 55 o C trên môi trƣờng dầu thô 0,5% với các nồng độ NaCl khác nhau 47 Hình 3.16. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của chủng 70G3_KL1 ở 55 o C trên môi trƣờng dầu thô 5%, NaCl 1% với các pH môi trƣờng khác nhau 50 Hình 3.17. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của chủng 110G6_KL2 ở 55 o C trên môi trƣờng dầu thô 0,5%, NaCl 3% với các pH môi trƣờng khác nhau 50 Hình 3.18. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của chủng ĐHG7 ở 55 o C trên môi trƣờng dầu thô 0,5%, NaCl 1% với các pH môi trƣờng khác nhau 51 Hình 3.19. Hàm lƣợng H 2 S tạo thành của chủng Đ914_KL2 ở 55 o C trên môi trƣờng dầu thô 0,5%, NaCl 1% với các pH môi trƣờng khác nhau 51 1 MỞ ĐẦU Vi khuẩn khử sunphat là nhóm vi khuẩn rất đa dạng có khả năng sử dụng sunphat làm chất nhận điện tử cuối cùng. Chúng là những vi khuẩn kị khí bắt buộc phân bố khá rộng trên Trái đất. Chúng có trong đất, trong các vùng trầm tích, bùn lắng ở các đáy ao tù, cống rãnh, sông hồ, biển, trong các vùng có điều kiện sống khắc nghiệt nhƣ áp suất cao, nhiệt độ cao, độ mặn cao, hay môi trƣờng quá kiềm, quá axit… và đặc biệt tồn tại với một số lƣợng lớn trong các mỏ dầu. Sự đa dạng cao của vi khuẩn khử sunphat đƣợc tìm thấy ở các trầm tích biển, nơi có nồng độ sunphat cao (28mM) [Cord-Ruwisch và cs, 1987]. Ngƣời ta biết đến loại vi khuẩn này sau khi Bejierink phân lập đầu tiên năm 1895. Từ đó đến nay vi khuẩn khử sunphat đƣợc các nhà khoa học thế giới đặc biệt quan tâm vì vai trò quan trọng của chúng trong chu trình địa hóa của carbon, lƣu huỳnh và quá trình hình thành dầu mỏ, cũng nhƣ những ứng dụng của nó trong việc loại bỏ kim loại nặng. Tuy nhiên, vi khuẩn khử sunphat cũng gây ra những rắc rối không nhỏ cho ngành công nghiệp và nông nghiệp, đặc biêt là ngành công nghiệp dầu khí. Kể từ khi bắt đầu sản xuất thƣơng mại dầu khí khoảng 140 năm trƣớc, các kỹ sƣ dầu khí và các nhà khoa học đã nhanh chóng nhận ra vi khuẩn khử sunphat là tác nhân sản sinh khí H 2 S trong các giếng khoan, là nguyên nhân hàng đầu làm giảm giá trị thƣơng mại của dầu thô. Sự có mặt của H 2 S không chỉ ảnh hƣởng đến sức khỏe công nhân tại các giàn khoan, gây ăn mòn kim loại trong điều kiện kị khí mà còn làm giảm hiệu quả tách nƣớc khỏi dầu, đồng thời gây nên mùi hôi khó chịu làm giảm chất lƣợng các sản phầm dầu mỏ. Hơn nữa, cặn FeS sinh ra khi khí H 2 S kết hợp với ion sắt có trong các thiết bị khai thác, vận chuyển và lƣu trữ các sản phẩm dầu mỏ sẽ gây tắc các thiết bị khoan và bơm ép nƣớc [Gibson, 1990; Lại Thúy Hiền và Lê Phi Nga, 1992; Rabus và cs, 1996; Lại Thúy Hiền và cs, 2003]. Với những thiệt hại to lớn mà chúng gây ra cho ngành công nghiệp dầu khí, vi khuẩn khử sunphat luôn là đối tƣợng nghiên cứu hàng đầu của các nhà khoa học trong lĩnh vực vi sinh vật dầu mỏ. 2 Ở nƣớc ta, những nghiên cứu về vi sinh vật dầu mỏ, đặc biệt là vi khuẩn khử sunphat luôn đƣợc quan tâm nghiên cứu song song với những bƣớc phát triển của ngành công nghiệp dầu khí nƣớc nhà. Các nghiên cứu khu hệ vi sinh vật nói chung và vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt nói riêng ở các giếng khoan dầu khí đã đạt đƣợc những thành tựu nhất định [Lại Thúy Hiền và Đặng Phƣơng Nga, 1998; Lại Thúy Hiền và cs, 1991; 2003]. Tuy nhiên, khoảng 15 năm trở lại đây, các nhà khoa học trên thế giới lần lƣợt chứng minh khả năng sử dụng dầu thô trong điều kiện kị khí của vi khuẩn khử sunphat, hơn thế nữa, điều này lại rất phổ biến trong giếng khoan trên thế giới [Aeckersberg và cs, 1991; Rueter và cs, 1994; So và Young, 1999; Harms và cs, 1999; Ehrenreich và cs, 2000; Kniemeyer và cs, 2003; Rios-Hernandez và cs, 2003; Cravo- Laureau và cs, 2004; Nakagawa và cs, 2008]. Nhƣ vậy, một lần nữa cho thấy tiềm ẩn mối nguy mà nhóm vi khuẩn này gây ra cho ngành công nghiệp dầu khí. Tại Việt Nam, các nghiên cứu về vi sinh vật sử dụng hydrocarbon dầu mỏ mới chỉ tiến hành trên các đối tƣợng vi sinh vật hiếu khí [Lại Thúy Hiền và cs, 1996; 1997; 1999]. Do đó, một câu hỏi đặt ra là các vi khuẩn khử sunphat trong các giếng khoan dầu khí Việt Nam cũng có khả năng sử dụng dầu thô làm nguồn cơ chất cho sự phát triển hay không? Vì vậy, chúng tôi đã đề xuất và tiến hành đề tài “Nghiên cứu vi khuẩn khử sunphat ưa nhiệt có khả năng sử dụng dầu thô phân lập từ giếng khoan dầu khí Vũng Tàu”. Đây là đề tài đầu tiên ở Việt Nam nghiên cứu khả năng sử dụng dầu thô của vi khuẩn khử sunphat. Hi vọng đề tài sẽ góp phần giải quyết khó khăn do vi khuẩn khử sunsphat gây ra cho nền công nghiệp dầu khí nƣớc nhà. 3 Chƣơng 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Thành phần, tính chất của dầu thô Việt Nam - Vũng Tàu Dầu thô là một hỗn hợp phức tạp, trong đó có hàng trăm các cấu tử khác nhau. Mỗi loại dầu đƣợc đặc trƣng bởi thành phần riêng, song về bản chất, chúng đều có các hydrocarbon là thành phần chính (chiếm 60 - 90% trọng lƣợng dầu), còn lại là các hợp chất không hydrocarbon nhƣ: hợp chất chứa oxy (axit, keton, rƣợu), hợp chất chứa nitơ (furol, indol, carbazol), hợp chất chứa lƣu huỳnh, hợp chất cao phân tử (hắc ín, bitum) và các nguyên tố vi lƣợng. Dầu thô lấy từ những vùng dầu khác nhau có thành phần hóa học khác nhau. Khi khảo sát thành phần của nhiều loại dầu mỏ, ngƣời ta thấy không có loại dầu nào giống loại dầu nào, có bao nhiêu mỏ dầu thì có bấy nhiêu loại dầu mỏ. Ngay trong một giếng khoan, dầu lấy từ những tầng chứa khác nhau cũng khác nhau [Đinh Thị Ngọ, 2001]. 1.1.1. Thành phần nguyên tố của dầu thô Các nguyên tố chính tạo nên dầu mỏ là carbon và hydro. Hàm lƣợng carbon và hydro trong dầu mỏ rất khác nhau, hàm lƣợng carbon có từ 83,5 - 87%, hàm lƣợng hydro có từ 11,5 - 14. Hàm lƣợng nitơ trong dầu mỏ thấp, từ 0,001 - 0,3%. hàm lƣợng oxy từ 0,1 - 0,3%. Hàm lƣợng lƣu huỳnh thay đổi trong khoảng rộng. Ngoài ra trong dầu mỏ còn chứa một số kim loại nặng, hàm lƣợng rất nhỏ nhƣ: vanadi, niken, sắt, magie, crom…[Đinh Thị Ngọ, 2001] Dầu thô Việt Nam thuộc loại dầu Parafinic có đặc điểm: nhẹ, sạch, chứa rất ít các độc tố, rất ít lƣu huỳnh, nitơ, kim loại nặng và là loại dầu chứa nhiều hydrocarbon parafin, đặc biệt chứa nhiều hydrocarbon n- parafin C10 - C40. Theo tiêu chuẩn phân loại của Liên Xô cũ thì dầu thô mỏ Bạch Hổ và mỏ Đại Hùng xếp loại 1/3, còn theo tiêu chuẩn xếp loại của Viện khoáng sản Mỹ thì dầu thô mỏ Bạch Hổ xếp loại 2/9 và dầu thô mỏ Đại Hùng xếp loại 5/9 [ Đinh Thị Ngọ, 2001]. [...]... mặt ở các mỏ dầu Liên Xô cũ thành 2 nhóm: nhóm vi khuẩn hiếu khí gồm vi khuẩn oxy hóa hydrocarbon, vi khuẩn Thiobacillus, vi khuẩn hoại sinh; nhóm vi khuẩn kị khí gồm vi khuẩn khử sunphat, vi khuẩn khử nitrat, vi khuẩn phân hủy xenluloza, vi khuẩn sinh metan và vi khuẩn tía Ở vùng dầu Tersko-Dagestan, số lƣợng vi khuẩn ở nƣớc vỉa có dầu (115.103 - 495.103 tế bào/ml) cao hơn hẳn vỉa không có dầu (8.103... loài của nhóm vi khuẩn khử sunphat Dựa trên trình tự phân tích rARN, vi khuẩn khử sunphat đƣợc chia thành bốn nhóm chính: vi khuẩn khử sunphat Gram âm ƣa ấm; vi khuẩn khử sunphat Gram dƣơng sinh bào tử; vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt và vi khuẩn khử sunphat cổ ƣa nhiệt [Castro và cs, 2000] Nhóm vi khuẩn khử sunphat Gram âm ƣa ấm gồm hai họ lớn là Desulfovibrioaceae (gồm hai chi Desulfovibrio và Desulfomicrobium)... THẢO LUẬN 3.1 Khả năng sử dụng dầu thô của vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt lấy từ giếng khoan dầu khí Vũng Tàu Các mẫu vi khuẩn khử sunphat (hỗn chủng) lấy từ bộ sƣu tập của phòng Vi sinh vật dầu mỏ, Vi n Công nghệ sinh học đƣợc nuôi cấy trên môi trƣờng khoáng Postgate B cải tiến bổ sung dầu thô với hàm lƣợng khác nhau (1, 3, 5%) là nguồn cơ chất duy nhất để thử nghiệm khả năng sử dụng dầu của chúng... sung dầu thô (0,5%; 1% và 3% môi trƣờng) làm nguồn cơ chất duy nhất Sự sinh trƣởng của các vi khuẩn khử 24 sunphat này trên dầu thô đƣợc theo dõi hàng ngày trong 1 tháng Mẫu nào thấy có sự sinh trƣởng của vi khuẩn khử sunphat trên môi trƣờng dầu thô thì chứng tỏ vi khuẩn khử sunphat của mẫu đó có khả năng sử dụng dầu thô làm nguồn cơ chất 2.2.2 Đánh giá hàm lƣợng dầu tổng số bị sử dụng bởi vi khuẩn khử. .. khuẩn khử sunphat thuộc chi Desulfovibrio, Desulfobacter trong các giếng khoan dầu khí Tây Đức lên đến 105 - 106 tế bào/ml [Cord-Ruwisch và cs, 1987] Khu hệ vi sinh vật trong các giếng khoan dầu khí đƣợc nghiên cứu nhiều ở Trung Quốc từ 60 năm nay Năm 1894, Wang công bố khu hệ vi sinh vật ở mỏ dầu Laojunmiao (20 - 36oC) gồm có vi khuẩn hoại sinh, vi khuẩn khử nitrat, vi khuẩn sử dụng hydrocarbon và vi khuẩn. .. lƣợng vi khuẩn oxy hóa acid béo Nếu sunphat có trong nƣớc bơm ép thì cùng với vi c tăng nhiệt độ trong giếng khoan, các axit béo này sẽ làm tăng số lƣợng vi khuẩn ƣa nhiệt trong giếng khoan [Lysnes và cs, 2009] 8 1.3 Vi khuẩn khử sunphat 1.3 1 Môi trƣờng sống Từ khi đƣợc Bejierinck phân lập đầu tiên vào năm 1895 từ ống dẫn nƣớc cho đến những nghiên cứu sau này về vi khuẩn khử sunphat đã cho thấy vi khuẩn. .. 2009] Lysnes gần đây đã phát hiện ra chủng khử nitrat ƣa nhiệt phân lập từ giếng dầu vùng biển Bắc sử dụng cơ chất axit béo lại có khả năng sinh trƣởng trên những nguồn cơ chất ƣa thích của vi khuẩn khử sunphat Điều này đã tạo cơ sở mở ra hƣớng ứng dụng mới: sử dụng nhóm vi khuẩn khử nitrat cho vi c ức chế sự phát triển của vi khuẩn khử sunphat trong các giếng khoan bằng phƣơng pháp sinh học thay cho... chi vi khuẩn khử sunphat ƣa ấm khác (nhƣ các cánh đồng lúa nƣớc nơi có sự xen kẽ của điều kiện có oxy và thiếu oxy do sự thay đổi mùa nƣớc lên) [Castro và cs, 2000] Hai nhóm vi khuẩn khử sunphat còn lại là nhóm vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt và nhóm vi khuẩn cổ ƣa nhiệt (Archaea) đều đƣợc phân lập tại các môi trƣờng có nhiệt độ cao nhƣ các giếng khoan sâu dƣới mặt đất có nhiệt độ lên tới 80oC Các vi khuẩn. .. minh có sự phân hủy alkane trong điều kiện kị khí nghiêm ngặt của một chủng vi khuẩn khử sunphat Sau đó, Rueter và cộng sự (1994) cũng đã phân lập đƣợc một loại vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt từ trầm tích giếng dầu vịnh Mexico cũng có khả năng sử dụng alkane Cùng với một loạt các nghiên cứu sau này [So và Young, 1999; Ehrenreich và cs, 2000; Cravo-Laureau và cs, 2004] đều đã chứng minh vi khuẩn khử sunphat. .. biến Tuy nhiên, về mặt phân hủy sinh học, parafin lại là cơ chất thích hợp cho vi sinh vật sử dụng [Đinh Thị Ngọ, 2001] Vì vậy, ta có cơ sở để nghĩ rằng, vi khuẩn khử sunphat phân lập từ các giếng khoan dầu khí Vũng Tàu cũng có khả năng sử dụng và chuyển hóa đƣợc hydrocarbon dầu mỏ • Các hợp chất không hydrocarbon của dầu thô Đây là những hợp chất mà trong thành phần của chúng có chứa oxy, nitơ, lƣu . Nghiên cứu vi khuẩn khử sunphat ưa nhiệt có khả năng sử dụng dầu thô phân lập từ giếng khoan dầu khí Vũng Tàu . Đây là đề tài đầu tiên ở Vi t Nam nghiên cứu khả năng sử dụng dầu thô của vi. chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt có khả năng sử dụng dầu thô 28 Chƣơng 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 3.1. Khả năng sử dụng dầu thô của vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt lấy từ giếng khoan dầu khí Vũng. khuẩn khử sunphat sử dụng trong quá trình sinh trƣởng 13 Bảng 3.1. Khả năng sử dụng dầu thô của vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt phân lập từ giếng khoan dầu khí Vũng Tàu 29 Bảng 3.2. Hàm lƣợng dầu