Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

71 774 0
Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

[...]... 1989) DGGE cho phép xác định cả những vi sinh vật không thể phân lập nuôi cấy đợc (Davies cs, 2004) 1.7.2 FISH (Fluorescence In Situ Hybridization) FISH là một trong số những phơng pháp cho phép xác định nhóm phân loại của vi khuẩn trong mẫu mà không qua nuôi cấy bằng cách lai với các đầu dò gắn huỳnh quang đặc hiệu cho rRNA pháp hiện trên kính hiển vi huỳnh quang FISH ứng dụng cho vi khuẩn... Muyzer cs công bố trong nghiên cứu về sinh thái vi sinh vật năm 1993 Cho đến nay kỹ thuật này đợc biết đến phổ biến trong nghiên cứu đa dạng di truyền vi sinh vật trong nhiều phòng thí nghiệm Ngày càng có nhiều công bố về ứng dụng PCR-DGGE trong nghiên cứu đa dạng di truyền 15 Chuyên ngành Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ khoa học Nguyễn Thị Tuyền - Cao học K16 vi sinh vật trong nhiều môi trờng sinh. .. dụng trong thí nghiệm sinh học phân tử: Hóa chất cần thiết để tách DNA, PCR, tinh sạch sản phẩm PCR, điện di biến tính, giải trình tự 2.1.3 Thiết bị, dụng cụ sử dụng trong nghiên cứu 18 Chuyên ngành Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ khoa học Nguyễn Thị Tuyền - Cao học K16 Nghiên cứu đợc thực hiện tại Vi n Vi sinh vật Công nghệ sinh học ĐHQGHN, sử dụng các thiết bị chuyên môn dùng trong vi sinh vật. .. chất một số kit dùng cho phân tích sinh học phân tử do các hãng Bioneer-Hàn Quốc, Fermentas-Đức, Qiagen-Mỹ, ABI-Mỹ, BioRad-Mỹ cung cấp - Hóa chất sử dụng nuôi cấy vi khuẩn: Các chất khoáng (bảng 1), vi lợng (bảng 2), vitamine (bảng 2), chất cho điện tử (FeSO 4 MnSO4), chất nhận điện tử (NaNO3), khí N2 CO2 - Hóa chất sử dụng trong phơng pháp quang phổ xác định hàm lợng sắt II, mangan II nitrate:... nguồn vi sinh vật (10%) từ ống 22 Chuyên ngành vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ khoa học Nguyễn Thị Tuyền - Cao học K16 MPN (nguồn phân lập) đợc sục khí N2 ủ ở t thế đảo ngợc đầu tại 28oC trong bóng tối Khuẩn lạc đơn phát triển trong các ống pha loãng đợc tách bằng pipet Pasteur chuyển sang môi trờng dịch thể thích hợp (nớc ngọt hay nớc lợ) 2.2.3 Tách DNA tổng số từ mẫu bùn trầm tích chủng. .. về trớc (Giovannoni cs, 1988; Delong cs, 1989; Amann cs, 1990), đợc đợc đánh dấu nh một bớc tiến vợt bậc trong lĩnh vực sinh thái vi sinh vật Phơng pháp này chủ yếu dựa trên trình tự của hệ tiểu đơn vị 16S rRNA, là trình tự đã đợc rất quan tâm trong nghiên cứu hệ thống phân loại của vi sinh vật (Woese cs, 1990; Ludwig Schleifer, 1994) Đây là phơng pháp duy nhất cho phép quan sát tính... cs, 1994; Martínez-Murcia cs, 1995; Lagacé cs, 2004) Phơng pháp này còn đợc sử dụng để đánh giá nhanh sự biến đổi về mặt di truyền trong quần xã qua thời gian hoặc là so sánh các quần xã trong các điều kiện môi trờng khác nhau (Frederic cs, 2000; Lagacé cs, 2004) hay nghiên cứu đa dạng di truyền các chủng đơn trong quần xã vi sinh vật (Moyer cs, 1994) 1.7.4 Giải trình tự tự động Các. .. tự dỡng (Straub cs, 1998) Vi khuẩn oxy hóa Fe(II), khử nitrate tự dỡng mới chỉ đợc biết đến với hai chủng Ferroglobus placidus, là một vi khuẩn cổ a nhiệt (Hafenbradl cs, 1996) chủng 2002, là vi khuẩn a ấm thuộc phân lớp -Proteobacteria (Weber cs, 2006 b) 1.4 Cơ chế phân tử của quá trình oxy hóa Fe(II) các gen liên quan Cho đến nay cha có bất cứ công bố nào về cơ chế phân tử của quá... hòa tan Tuy nhiên, ở pH trung tính cơ chất sản phẩm của quá trình chuyển hóa sắt lại ít hòa tan, điều này gây khó khăn cho vi c nghiên cứu (Straub cs, 2001) Hình 1 Chu trình sắt trong tự nhiên (Ehrlich Newman, 2008) 1 - Vi sinh vật trong môi trờng acid; 2 - Vi sinh vật kỵ khí ở môi trờng trung tính (khử nitrate, quang hợp kỵ khí); 3 - Quá trình hóa học trong môi trờng trung tính với nồng độ O2... ở dạng NH4+ tại pH acid trung tính Cố định nitơ không khí chuyển thành ammonium là quá trình tiêu tốn nhiều năng lợng Trong tự nhiên chỉ có một số loài vi khuẩn tảo lam có khả năng thực hiện phản ứng này nhờ sản sinh ra enzyme nitrogenase Các loài vi khuẩn cố định nitơ đợc chia vào hai nhóm (1) các loài sống cộng sinh trong nốt sần ở rễ của thực vật (Rhizobium) (2) các loài sống tự do trong 123doc.vn

Ngày đăng: 20/03/2013, 15:32

Hình ảnh liên quan

Hình 1. Chu trình sắt trong tự nhiên (Ehrlich và Newman, 2008). 1- Vi sinh vật trong môi trờng acid; 2 - Vi sinh vật kỵ khí ở môi trờng trung tính (khử nitrate,  quang hợp kỵ khí); 3 - Quá trình hóa học trong môi trờng trung tính với nồng độ O2  - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Hình 1..

Chu trình sắt trong tự nhiên (Ehrlich và Newman, 2008). 1- Vi sinh vật trong môi trờng acid; 2 - Vi sinh vật kỵ khí ở môi trờng trung tính (khử nitrate, quang hợp kỵ khí); 3 - Quá trình hóa học trong môi trờng trung tính với nồng độ O2 Xem tại trang 12 của tài liệu.
Hình 2. Chu trình nitơ trong tự nhiên. - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Hình 2..

Chu trình nitơ trong tự nhiên Xem tại trang 14 của tài liệu.
Hình 3. Cơ chế tạo năng lợng trong quá trình oxy hóa Fe(II) ở vi khuẩn A. - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Hình 3..

Cơ chế tạo năng lợng trong quá trình oxy hóa Fe(II) ở vi khuẩn A Xem tại trang 17 của tài liệu.
Hình 4. Mô hình mới nhất hiện nay về cơ chế dẫn truyền điện tử từ Fe(II) đến O2 trong quá trình oxy hóa Fe(II) ở A - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Hình 4..

Mô hình mới nhất hiện nay về cơ chế dẫn truyền điện tử từ Fe(II) đến O2 trong quá trình oxy hóa Fe(II) ở A Xem tại trang 18 của tài liệu.
Hỗn hợp Vitamine (bảng 2) 1 ml 1 ml Hỗn hợp vi lợng (bảng 2)1 ml1 ml Vitamin B1 (Thiamin)1 ml1 ml - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

n.

hợp Vitamine (bảng 2) 1 ml 1 ml Hỗn hợp vi lợng (bảng 2)1 ml1 ml Vitamin B1 (Thiamin)1 ml1 ml Xem tại trang 28 của tài liệu.
Bảng 1. Môi trờng khoáng kỵ khí nớc ngọt và nớc lợ cho vi khuẩn oxy hóa Fe(II), khử nitrate (Ratering, 1999). - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Bảng 1..

Môi trờng khoáng kỵ khí nớc ngọt và nớc lợ cho vi khuẩn oxy hóa Fe(II), khử nitrate (Ratering, 1999) Xem tại trang 28 của tài liệu.
Bảng 3. Phản ứng PCR gen 16S rDNA. - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Bảng 3..

Phản ứng PCR gen 16S rDNA Xem tại trang 31 của tài liệu.
Bảng 4. Phản ứng cắt gen 16S rDNA bằng các enzym giới hạn MspI và HaeIII. - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Bảng 4..

Phản ứng cắt gen 16S rDNA bằng các enzym giới hạn MspI và HaeIII Xem tại trang 32 của tài liệu.
Bảng 6. Các đầu dò sử dụng trong nghiên cứu. Tên đầu  - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Bảng 6..

Các đầu dò sử dụng trong nghiên cứu. Tên đầu Xem tại trang 34 của tài liệu.
Bảng 7. Chuẩn bị đệm lai và đệm rửa. - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Bảng 7..

Chuẩn bị đệm lai và đệm rửa Xem tại trang 35 của tài liệu.
Formamide % phụ thuộc vào từng đầu dò (bảng 6) - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

ormamide.

% phụ thuộc vào từng đầu dò (bảng 6) Xem tại trang 35 của tài liệu.
Hình 9. Phổ điện di biến tính (DGGE) phân tích đoạn 16S rDNA của quần xã vi khuẩn trong các ống MPN của các mẫu nghiên cứu - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Hình 9..

Phổ điện di biến tính (DGGE) phân tích đoạn 16S rDNA của quần xã vi khuẩn trong các ống MPN của các mẫu nghiên cứu Xem tại trang 41 của tài liệu.
Hình 10. Hình ảnh hiển vi của tế bào vi khuẩn trong các mẫu nghiên cứu bắt cặp với đầu dò huỳnh quang . - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Hình 10..

Hình ảnh hiển vi của tế bào vi khuẩn trong các mẫu nghiên cứu bắt cặp với đầu dò huỳnh quang Xem tại trang 43 của tài liệu.
Hình 13. Phân lập vi khuẩn oxy hoá Fe(II), khử nitrate đại diện tại các môi tr- tr-ờng nghiên cứu - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Hình 13..

Phân lập vi khuẩn oxy hoá Fe(II), khử nitrate đại diện tại các môi tr- tr-ờng nghiên cứu Xem tại trang 46 của tài liệu.
Hình 15. Cây phân loại thể hiện mối liên quan giữa các chủng IN2, IN7, IN12 và các loài gần gũi dựa trên trình tự gen 16S rDNA - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Hình 15..

Cây phân loại thể hiện mối liên quan giữa các chủng IN2, IN7, IN12 và các loài gần gũi dựa trên trình tự gen 16S rDNA Xem tại trang 49 của tài liệu.
Bảng 10. Đặc điểm sinh lý của hai chủng vi khuẩn IN2 và IN12. Ký hiệu: (−): không sinh trởng; (+ đến +++): các mức độ sinh trởng tăng dần - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Bảng 10..

Đặc điểm sinh lý của hai chủng vi khuẩn IN2 và IN12. Ký hiệu: (−): không sinh trởng; (+ đến +++): các mức độ sinh trởng tăng dần Xem tại trang 51 của tài liệu.
Hình 16. Hình thái tế bào và vị trí phân loại của hai chủng IN2 và IN12. Hình thái tế bào đợc quan sát trên kính hiển vi quang học, độ phóng đại 1000 lần  (đơn vị = 5 àm) - Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật hữu ích phục vụ cho việc sản xuất các chế phẩm probiotic dùng trong chăn nuôi

Hình 16..

Hình thái tế bào và vị trí phân loại của hai chủng IN2 và IN12. Hình thái tế bào đợc quan sát trên kính hiển vi quang học, độ phóng đại 1000 lần (đơn vị = 5 àm) Xem tại trang 53 của tài liệu.

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

Tài liệu liên quan