PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI SINH VẬT CÓ KHẢ NĂNG PHÂN HỦY HỢP CHẤT CHỨA CLO TẠI VIỆT NAM

69 1.1K 1
PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI SINH VẬT CÓ KHẢ NĂNG PHÂN HỦY HỢP CHẤT CHỨA CLO TẠI VIỆT NAM

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI SINH VẬT CÓ KHẢ NĂNG PHÂN HỦY HỢP CHẤT CHỨA CLO TẠI VIỆT NAM Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Hợp chất Halogen là những hợp chất quan trọng được sử dụng rộng rãi trong công nghiệp, nông nghiệp, y học…Bên cạnh những lợi ích mang lại thì việc sử dụng tràn lan và thải ra môi trường mà không có phương pháp xử lý triệt để đã và đang gây ra những hậu quả nghiêm trọng đến môi trường, hệ sinh thái và sức khỏe con người.

Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Nguyễn Thị Nhật Ánh PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI SINH VẬT CÓ KHẢ NĂNG PHÂN HỦY HỢP CHẤT CHỨA CLO TẠI VIỆT NAM Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60420114 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS. Nguyễn Quang Huy Hà Nội - 2013 Nguyễn Thị Nhật Ánh K20 Cao học 1 Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin gửi lời cảm ơn chân thành và lòng biết ơn sâu sắc nhất đến PGS. TS. Nguyễn Quang Huy, người Thầy đã tận tình hướng dẫn, chỉ bảo cho em những kĩ năng nghiên cứu cũng như những kiến thức cần thiết trong suốt thời gian học tập và thực hiện đề tài. Bên cạnh đó Thầy đã tạo điều kiện học tập và nghiên cứu tốt nhất cho em để em có thể hoàn thành tốt luận văn này. Tiếp đến em xin gửi lời cảm ơn tới các thầy cô giáo trong Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên đã nhiệt tình giảng dạy, hướng dẫn và cung cấp cho em những kiến thức bổ ích trong suốt khóa học. Em cũng xin gửi lời cảm ơn chân thành đến các thầy cô, các anh chị, các bạn, các em sinh viên trong Bộ môn Sinh lý thực vật và Hóa Sinh, phòng Enzyme và Phân tích hoạt tính sinh học, Phòng thí nghiệm Trọng điểm Công nghệ Protein và Enzyme đã hướng dẫn và giúp đỡ em rất nhiều trong thời gian em nghiên cứu tại phòng thí nghiệm. Đề tài được thực hiện với sự hỗ trợ kinh phí của đề tài mã số KLEPT 01-12 do PGS.TS. Nguyễn Quang Huy chủ trì được ĐHQG Hà Nội tài trợ, em xin trân trọng cảm ơn sự giúp đỡ quý báu đó. Cuối cùng, em xin bày tỏ lòng biết ơn tới gia đình và bạn bè đã luôn bên cạnh, động viên và ủng hộ em trong suốt thời gian học tập cũng như quá trình hoàn thành khóa luận này. Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2013 Học viên Nguyễn Thị Nhật Ánh Nguyễn Thị Nhật Ánh K20 Cao học 2 Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm MỞ ĐẦU Hợp chất Halogen là những hợp chất quan trọng được sử dụng rộng rãi trong công nghiệp, nông nghiệp, y học…Bên cạnh những lợi ích mang lại thì việc sử dụng tràn lan và thải ra môi trường mà không có phương pháp xử lý triệt để đã và đang gây ra những hậu quả nghiêm trọng đến môi trường, hệ sinh thái và sức khỏe con người. Việc áp dụng các phương pháp vật lý, hóa học để giải quyết tình trạng ô nhiễm gây ra bởi các hợp chất halogen cho hiệu quả cao song chi phí đắt cũng như đòi hỏi công nghệ hiện đại. Phương pháp sinh học sử dụng khả năng phân giải của vi sinh vật tự nhiên được đánh giá là tiềm năng cao không chỉ cho hiệu quả nhanh chóng mà còn mang tính bền vững, ít tốn kém, thân thiện với môi trường. Trong tự nhiên tồn tại các nhóm vi sinh vật có khả năng sử dụng hợp chất halogen như là nguồn cacbon để thực hiện các quá trình trao đổi chất, duy trì các hoạt động sống của cơ thể, từ đó các hợp chất halogen được phân giải trở nên ít độc hơn hoặc không còn độc với môi trường và con người. Việt Nam vốn là nước sản xuất nông nghiệp với khí hậu nhiệt đới nóng và ẩm thuận lợi cho sự phát triển của cây trồng song cũng thuận lợi cho sự phát sinh, phát triển của sâu bệnh, cỏ dại gây hại mùa màng, do vậy hàng năm chúng ta sử dụng một lượng lớn hóa chất bảo vệ thực vật có bản chất là hợp chất halogen mà chủ yếu là các hợp chất clo hữu cơ. Việc sử dụng tràn lan dẫn đến tồn dư các loại hợp chất này lớn đã gây ô nhiễm môi trường, ảnh hưởng đến sức khỏe cộng đồng. Ở Việt Nam hiện chưa có nhiều nghiên cứu cơ bản về việc ứng dụng vi sinh vật có hoạt tính phân giải hợp chất halogen để giải quyết ô nhiễm môi trường, đồng thời nhận thấy tiềm năng của phương pháp sinh học do đó chúng tôi đã tiến hành thực hiện đề tài: “PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI SINH VẬT CÓ KHẢ NĂNG PHÂN HỦY HỢP CHẤT CHỨA CLO TẠI VIỆT NAM” Nguyễn Thị Nhật Ánh K20 Cao học 3 Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm Chương 1 - TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Hợp chất halogen và hợp chất clo hữu cơ Các hợp chất halogen hữu cơ là một lớp lớn các chất hóa học tự nhiên và tổng hợp, có chứa một hoặc nhiều gốc halogen gồm Flo, Clo, Brom, Iot kết hợp với cacbon và các yếu tố khác. Hợp chất hữu cơ halogen được sử dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực quan trọng của đời sống như công nghiệp, nông nghiệp, y học,… Ngày nay cùng với sự phát triển của nền nông nghiệp hiện đại là thực trạng sử dụng nhiều các hóa chất bảo vệ thực vật có thành phần chính là hợp chất Halogen mà chủ yếu là hợp chất có chứa clo. Bên cạnh lợi ích to lớn như diệt trừ sâu bệnh, tăng năng suất… thì việc sử dụng các thuốc bảo vệ thực vật lại ảnh hưởng xấu đến môi trường, phá hủy sự bền vững của hệ sinh thái do tính độc hại, khó bị phân hủy, tích tụ trong đất, nước, động vật, thực vật, nghiêm trọng hơn còn gây ảnh hưởng đến sức khỏe con người. 1.1.1. Sự phổ biến của hợp chất halogen trong tự nhiên Số lượng các hợp chất halogen tự nhiên đã được biết đến từ 30 loại năm 1968 lên gần 3.900 loại trong đầu những năm 2000. Nhiều loại có cấu tạo giống với chất hóa học tổng hợp. Chúng được tổng hợp từ các sinh vật biển, vi khuẩn, nấm, thực vật, côn trùng và một số động vật có vú. Tảo, nấm, một số cây, thực vật phù du sản xuất ra chloromethane. Mối sản xuất ra chloroform. Một số loại rau sản xuất bromomethane. Một trăm loại hợp chất hữu cơ halogen đã được tìm thấy trong rong biển ăn được. Muối clo và muối brom thường xuất hiện trong thực vật, đất, và các mỏ địa chất; cháy rừng và núi lửa cũng sinh ra hợp chất halogen. Lượng chloromethane toàn cậu tạo ra từ sinh khối là 5 triệu tấn mỗi năm, trong khi đó lượng tổng hợp chỉ có 26.000 tấn mỗi năm. Núi lửa tạo ra khí hydro clorua (3 triệu tấn / năm) và hydro florua (11 triệu tấn / năm), cả hai chất này đều có thể phản ứng với các hợp chất hữu cơ để sản xuất ra hợp chất halogen. [Gribble, Gordon W. (1994). "Natural Organohalogens—Many More Than You Think!" Journal of Chemical Education 71(11):907–911.] Nguyễn Thị Nhật Ánh K20 Cao học 4 Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm 1.1.2. Ứng dụng của hợp chất clo hữu cơ Hợp chất hữu cơ halogen nói chung và hợp chất clo hữu cơ nói riêng được sử dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực khác nhau của đời sống. Trong công nghiệp chúng có nhiều ứng dụng quan trọng sau đây:  Chất dẻo Polyvinyl clorua (PVC) được trùng hợp từ vinyl clorua (CH 2 = CHCl), là loại nhựa nhiệt dẻo được sản xuất và tiêu thụ nhiều thứ 3 trên thế giới (Theo:CMAI). PVC là một thành phần không thể thiếu của vật liệu xây dựng, hàng tiêu dùng, thiết bị y tế, và nhiều sản phẩm dân dụng khác thường ngày. Hơn 2,2 tỷ kg (5 tỷ bảng Anh) của PVC được sử dụng hàng năm cho dây điện, dây cáp, và các ứng dụng điện khác. Clo trong PVC làm cho loại nhựa này chống cháy do đó nó là nguyên liệu lý tưởng cho các ứng dụng xây dựng và trang trí nội thất. [Vinyl Environmental Council(2007), PVC Leads Climate Change Mitigation and Risk Reduction for Sustainable Development, Japan.]  Dung môi Dung môi clo là dung môi phổ biến nhất trong số các dẫn xuất halogen. Trichloroethylene (CHCl = CCl 2 ) và tetrachloroethylene (CCl 2 = CCl 2 ) được sử dụng rộng rãi trong ngành công nghiệp sản xuất dung môi làm sạch khô. Sau đây là bảng tóm tắt các ứng dụng của một số hợp chất clo hữu cơ: Bảng 1: Ứng dụng của một số hợp chất clo hữu cơ [http://ec.europa.eu-Chlorine Industry Review 2007-2008] Hợp chất Lượng tiêu thụ (tấn) năm 2007 Ứng dụng 1,1,1 tricloetan 600.000 - Làm sạch kim loại ( chiếm 40% sản lượng tiêu thụ) - Ứng dụng trong sơn, chất kết dính, lớp bọc, chất dẻo, chất giặt tẩy, trong công nghiệp dệt và điện tử. 1,2,4- Triclobenzen 14.300 - Sản xuất thuốc diệt cỏ, thuốc nhuộm và Nguyễn Thị Nhật Ánh K20 Cao học 5 Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm chất nhuộm màu. Cacbontetracloride 59.700 -Sản xuất cao su và điều chế dược phẩm. Clorofom 240.260 - Dùng làm dung môi, điều chế các hóa chất khác, được sử dụng trong y tế. - Sản xuất polyvinyliden (PVDC). Trong sản xuất dược phẩm, 80% các dược phẩm và vitamin là liên quan đến clo, nhiều loại thuốc cần có clo để gây tác dụng. Ceclor và Lorabid được sử dụng để điều trị nhiễm trùng tai, Toremifene là một loại thuốc chống ung thư vú, và Vancomycin kháng sinh tự nhiên được sử dụng để chống lại nhiễm trùng kháng penicillin. Clorua benzyl được sử dụng để tổng hợp các loại thuốc phenobarbital, benzedrine, và demerol. Thuốc mê hô hấp bao gồm các organofluorines desflurane, sevoflurane, và enflurane (CHClFCF 2 OCHF 2 ). Các Perfluorocacbon, chẳng hạn như perfluorotributylamine ([CF 3 CF z CF 2 CF 2 ] 3 N), được sử dụng để thay thế máu hoặc "máu nhân tạo" và được sử dụng cho tạo hình động mạch vành. [http://www.chemistryexplained.com/Ny-Pi/Organic-Halogen- Compounds.html#ixzz2jjHntve1] Hình 1. Công thức một số thuốc là hợp chất halogen hữu cơ: (a) Lorabid, kháng sinh; (b) Toremifene, thuốc ung thư vú; (c) Mitotane, thuốc ung thư. Hợp chất hữu cơ halgen rất cần thiết cho sản xuất nông nghiệp và bảo vệ cây trồng vì nó là thành phần của thuốc diệt cỏ và thuốc trừ sâu. Việt Nam là nước sản xuất nông nghiệp, khí hậu nhiệt đới nóng và ẩm thuận lợi cho sự phát triển của cây Nguyễn Thị Nhật Ánh K20 Cao học 6 Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm trồng song cũng thuận lợi cho sự phát sinh, phát triển của sâu bệnh, cỏ dại gây hại mùa màng. Do vậy việc sử dụng thuốc bảo vệ thực vật (TBVTV) mà phần lớn có nguồn gốc từ các hợp chất clo để phòng trừ sâu hại, dịch bệnh bảo vệ mùa màng là một biện pháp quan trọng. Một số hóa chất như 2,2-Dichloropropionic acid, Trichloroacetic acid, 1,4-Dichlorobenzen là thành phần chính của thuốc diệt cỏ và thuốc trừ sâu. Bảng dưới đây thống kê một số loại thuốc BVTV có nguồn gốc clo. [Nguyễn Trần Oánh, Nguyễn Văn Viên, Bùi Trọng Thủy (2007), Giáo trình Sử dụng thuốc bảo vệ thực vật, Đại học Nông Nghiệp Hà Nội. , Rodriguez L. N. H. Khan F., Robins K. T., Meyer H. P. (2011), “Perspectives on biotechnological halogenation”, Scientific article, 1, pp. 31.]. Bảng 2. Một số loại thuốc BVTV có nguồn gốc Clo Tên thường gọi và thành phần chính Công thức hóa học DDT (2,2-bis[p- clophenyl]-1,1,1-Tricloroethane) HCH (hexaclorocyclohexane) Cyclodien thế clo (chlordane, aldrin, diendrin, endrin,…) 2,4-D (2,4-Diclophenoxyacetic acid) Nguyễn Thị Nhật Ánh K20 Cao học 7 Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm 2,4,5-T (2,4,5-Triclorophenoxyacetic acid) 2,3,6-TBA (2,3,6-Triclorobenzoic acid) 2,2-Dicloropropionic acid HCB (hexaclorobenzene) Pentaclorophenol 1.1.3. Sự ô nhiễm môi trường các hợp chất clo hữu cơ Các dung môi clo là những chất dễ bay hơi thoát vào khí quyển trong quá trình sản xuất, vận chuyển và sử dụng gây ra ô nhiễm không khí. Nhiều hóa chất clo nông nghiệp bốc hơi một phần khuếch tán đi xa tới cả các vùng cực mà ở đây không có sản xuất nông nghiệp Các quá trình công nghiệp (luyện kim, pha sơn, giặt khô, sản xuất giấy,…mcũng là một nguồn gây ô nhiễm môi trường. [http://www2.hcmuaf.edu.vn/]. Các hóa chất nông nghiệp có chứa clo khi sử dụng gây ô nhiễm cho đất, nước và nông sản. Do độ bền hóa học lớn nên các thuốc bảo vệ thực vật dễ tồn lưu trong đất đai, cây trồng, nông sản, thực phẩm. Chúng làm cho môi trường bị ô nhiễm trong một thời gian lâu dài. Thời gian phân hủy 95 % hoạt chất trong điều kiện tự nhiên của DDT là 10 năm; BHC là 6,5 năm; Dieldrin là 8 năm; Chlordane là 3,5 năm. Lượng thuốc lưu tồn không những làm cho phẩm chất, hình thức của nông Nguyễn Thị Nhật Ánh K20 Cao học 8 Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm sản bị xấu đi mà còn gây độc cho người hay gia súc sử dụng nông sản đó, như BHC thường để lại mùi khó chịu trên nông sản như khoai tây, rau, đậu [http://www.trangvangnongnghiep.com/bao-ve-thuc-vat/11009-thuoc-nhom-clo- huu-co.html] 1.1.4. Tác động của hợp chất clo hữu cơ đối với môi trường và con người Nhược điểm lớn nhất của các hợp chất clo hữu cơ là có tính hoá học bền, nên tồn lâu trong môi trường, gây ô nhiễm môi trường. Một số thuốc trong nhóm có khả năng tích luỹ trong cơ thể, gây trúng độc mãn tính cho người và động vật máu nóng, gây hiện tượng chống thuốc của sâu hại, ảnh hưởng xấu đến cân bằng sinh học, gây hại cho côn trùng có ích. [Giáo trình sử dụng thuốc và bảo vệ thực vật, PGS.TS. Nguyễn Trần Oánh (Chủ biên) TS. Nguyễn Văn Viên , KS.Bùi Trọng Thủy, trang 100] Hình 2: Tác động của thuốc BVTV đến môi trường và con đường mất đi của thuốc Nguyễn Thị Nhật Ánh K20 Cao học 9 Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm (Theo Richardson,1979; Dẫn theo Phạm Văn Biên và cộng sự, 2000) Trên thế giới ước tính có khoảng 39 triệu người có thể bị ngộ độc cấp tính hàng năm do ảnh hưởng của hóa chất bảo vệ thực vật. Trong đó có khoảng 3 triệu người bị ngộ độc cấp tính nghiêm trọng và 220 nghìn người tử vong mỗi năm. Đi đôi với số lượng hóa chất bảo vệ thực vật sử dụng tăng là số người ngộ độc hóa chất BVTV cũng tăng, đặc biệt là tại các nước đang phát triển, 99% trường hợp ngộ độc xảy ra ở các nước này, cho dù lượng tiêu thụ hóa chất bảo vệ thực vật chỉ chiếm 20%. Tuy nhiên, phần lớn người nông dân tại cá nước này chưa nhận biết đầy đủ về tác hại cũng như nguy cơ do hóa chất BVTV gây ra. [http://vietbao.vn/Khoa-hoc/]. Những nghiên cứu trong vài năm gần đây tại Việt Nam cũng đưa ra các số liệu đáng quan ngại. Theo báo cáo của tổ chức WHO (World Heath rganization), vào năm 2002, từng có 7.170 trường hợp nhiễm độc thuốc trừ sâu được ghi nhận tại Việt Nam. Kết quả xét nghiệm máu ngẫu nhiên của 190 nông dân ở khu vực đồng bằng sông Cửu Long cho thấy hơn 35% mẫu bị nhiễm thuốc trừ sâu cao và 21% bị nhiễm ở nồng độ thấp. [http://suckhoedoisong.vn/2010060404122443p0c14/thuoc-bao-ve-thuc-vat-dang- hoa-chat-loi-it-hai-nhieu.htm] Trong năm 2007 theo thống kê sơ bộ tại 38 tỉnh, thành phố đã xảy ra gần 4.700 vụ, với 5.207 trường hợp bị nhiễm độc hóa chất bảo vệ thực vật và 106 người đã tử vong. Năm 2009 có 4.372 vụ nhiễm độc với 4.515 trường hợp, trong đó 138 trường hợp tử vong, chiếm tỷ lệ 305% (Theo: Cục Y tế dự phòng và môi trường năm 2010). Số liệu qua các năm cho thấy, số ca bị nhiễm độc với thuốc bảo vệ thực vật là có giảm, nhưng không đáng kể. Điều tra nguyên nhân gây ngộ độc chủ yếu do tình trạng lạm dụng và sử dụng bừa bãi hóa chất BVTV trong đó 98% trường hợp lạm dụng hoặc pha đặc hơn so với hướng dẫn trên bao bì 2-3 lần; có từ 84,17% đến 93,23% không sử dụng đầy đủ phương tiện bảo vệ cá nhân khi phun hóa chất bảo vệ thực vật. [Lô Thị Hồng Lê (2003), Nghiên cứu thực trạng sử dụng hóa chất bảo vệ thực vật, tình hình sức khỏe của người chuyên canh chè tại nông trường Sông Cầu và xã Nguyễn Thị Nhật Ánh K20 Cao học 10 [...]... thành CO 2, H2O và một số chất khác Một số loài thuốc thường chỉ bị một số loài vi sinh vật phân hủy Nhưng có một số Nguyễn Thị Nhật Ánh 18 K20 Cao học Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm loài vi sinh vật có thể phân hủy được nhiều hợp chất BVTV trong cùng một nhóm hoặc ở các nhóm thuốc khá xa nhau Quá trình phân hủy hợp chất BVTV của sinh vật đất đã xảy ra trong môi trường có hiệu xuất... Chúng có khả năng phá hủy sự phức tạp trong cấu trúc hóa học và hoạt tính sinh học của hợp chất BVTV Tập đoàn vi sinh vật rất phong phú và phức tạp Chúng có thể phân hủy hợp chất BVTV và dùng thuốc như nguồn cung cấp chất dinh dưỡng, đó là cacbon, nitơ và năng lượng để chúng phát triển và phân chia Quá trình phân hủy của vi sinh vật có thể gồm một hay nhiều giai đoạn, để lại các sản phẩm trung gian và. .. Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm Các nghiên cứu phân hủy sử dụng hợp chất halogen từ vi sinh vật tập trung nhiều vào nhóm halogen có vòng thơm Vi c phân hủy nhóm hợp chất này cần có sự tham gia tập đoàn gồm nhiều nhóm vi sinh vật khác nhau Không có nhiều các công trình công bố cơ chế tác dụng từ của các chủng đơn lẻ Một số kết quả công bố mới về phân lập đánh giá khả năng phân hủy như: Chủng Desulfomonile... phân hủy hợp chất halogen Số lượng các công trình công bố trong nước về các enzym phân hủy hợp chất halogen chưa nhiều Nguyễn Thị Kim Cúc và Phạm Vi t Cường đã tiến hành phân lập và tuyển chọn một số chủng thuộc chi Pseudomonas có khả năng phân hủy được methyl parathion [Nguyễn Thị Kim Cúc; Phạm Vi t Cường; Nguyễn Thị Tuyết Mai (2000), Một số tính chất của vi khuẩn phân hủy methyl parathion phân lập. .. nhóm này từ vi sinh vật đã thu hút rất nhiều sự quan tâm của các nhà khoa học vì chúng có thể ứng dụng cho ngành công nghiệp hóa chất và công nghệ môi trường Hiện nay các nghiên cứu phân lập các chủng vi sinh vật phân hủy nhóm halogen này còn gặp nhiều khó khăn, vi c tinh sạch và nghiên cứu các đặc điểm từ các enzym của các chủng vi sinh vật này còn khó khăn hơn nhiều do sự đa dạng của các hợp chất, dẫn... 537-46.] Khả năng phát triển và tạo màu trên môi trường có bromothymol blue nhằm chọn lọc các Nguyễn Thị Nhật Ánh 35 K20 Cao học Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm chủng có khả năng phân giải tốt cơ chất do Bromothymol blue là chất chỉ thị màu cho khả năng phân giải hợp chất clo Có thể dễ dàng nhận ra sự phân giải cơ chất của các chủng vi sinh vật khi enzyme dehalogenase của vi sinh vật. .. môi trường và loại bỏ nó.[ Mowafy AM,] 1.5 Tình hình nghiên cứu sự phân hủy hợp chất halogen bằng vi sinh vật tại Vi t Nam Tại Vi t Nam vốn là một nước nông nghiệp và hàng năm chúng ta sử dụng một lượng lớn các hóa chất bảo vệ thực vật, bảo quản sản phẩm nông nghiệp trong nuôi trồng thủy sản hay sản xuất công nghiệp…Trong số các hợp chất này nhóm chất chứa halogen chiếm một tỷ lệ lớn Các chất độc này... khí ở Vi t Nam 1.6 Một số hợp chất clo hữu cơ Nhóm hợp chất clo hữu cơ rất đa dạng về thành phần và cấu tạo hợp chất Trong khuôn khổ của đề tài nghiên cứu, chúng tôi xin đi sâu tìm hiểu đối với 3 hợp chất sau đây 1.6.1 Hợp chất 1,2 - Dichloroethane (1,2 - DCE) Hợp chất hóa học 1,2-dichloroethan (hoặc 1,2 - DCE ) được tạo ra lần đầu tiên năm 1974 từ khí olefin và khí clo, là một hydrocacbon clo, có công... ĐHQGHN.] Gần đây mới có công bố của một số tác giả Vi n Công nghệ sinh học trong vi c nghiên cứu tính đa dạng của nhóm vi khuẩn kị khí khử clo hay phân lập các chủng vi sinh vật tổng hợp lacase ngoại bào, tuy nhiên với sự đa dạng của nhóm halogen, mức độ nguy hại của các nhóm hợp chất nay đối với môi trường thì các kết quả công bố hiện nay vẫn còn khiêm tốn cả về số lượng và chất lượng Do đó vi c phát hiện... kiếm các chủng vi sinh vật có hoạt tính mạnh phân huỷ các hợp chất này là cần thiết và sẽ góp phần tìm hiểu tính đa dạng của nhóm vi sinh vật có hoạt Nguyễn Thị Nhật Ánh 25 K20 Cao học Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm tính này Như vậy nghiên cứu này của chúng tôi có thể coi là những nghiên cứu mang tính định hướng đầu tiên góp phần vào vi c giải quyết ô nhiễm hay tồn dư hợp chất clo hữu . môi trường đất, nước, không khí, sức khoẻ con người và môi trường sinh thái. [http://luanvan.net.vn /luan- van/ tong-quan-cong-nghe-san-xuat-thuoc-bao-ve- thuc-vat-45645/] Nguyễn Thị Nhật Ánh K20. thường để lại mùi khó chịu trên nông sản như khoai tây, rau, đậu [http://www.trangvangnongnghiep.com/bao-ve-thuc-vat /110 09-thuoc-nhom-clo- huu-co.html] 1.1.4. Tác động của hợp chất clo hữu cơ đối. "Natural Organohalogens—Many More Than You Think!" Journal of Chemical Education 71 (11) :907– 911. ] Nguyễn Thị Nhật Ánh K20 Cao học 4 Luận văn thạc sĩ Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm

Ngày đăng: 03/08/2014, 19:59

Từ khóa liên quan

Mục lục

  • 1.3.2. Phương pháp hóa học

  • Quá trình phân hủy hợp chất BVTV của sinh vật đất đã xảy ra trong môi trường có hiệu xuất chuyển hóa thấp. Để tăng tốc độ phân hủy và phù hợp với yêu cầu xử lý, người ta đã tối ưu các điều kiện sinh trưởng và phát triển của vi sinh vật như: pH môi trường, độ ẩm, nhiệt độ, dinh dưỡng, độ thoáng khí, bổ sung vào môi trường đất chể phẩm sinh vật có khả năng phân hủy hợp chất BVTV. [I. C. MacRae , Martin Alexander (1965), "Herbicide Degradation, Microbial Degradation of Selected Herbicides in Soil”, J. Agric. Food Chem., 13 (1), pp 72–76.]

  • Sự phân giải các hợp chất thường không chỉ bởi một chủng vi sinh vật duy nhất mà thường bởi một nhóm các vi sinh vật khác nhau. Các nhóm sinh vật khá đa dạng và tồn tại trong các điều kiện sinh thái môi trường khác nhau [Marzorati M, Balloi A, Ferra F, Corallo L, Carpani G, Lieven W, Verstraete W Daffonchio D (2010), “Bacterial diversity and reductive dehalogenase redundancy in a 1,2- dichloroethane degrading bacterial consortium enriched from a contaminated aquifer, Microbial Cell Factories, 9, pp. 12.]. Chiba và cộng sự đã phân lập được các chủng vi sinh vật từ bùn ngoài biển [Chiba K., Yoshida T., Norihiro I., Nishimura H., Imada C., Yashuda H., Sako Y., (2009), “Isolation of bacterium possessing a haloacid dehalogenase from marine sediment core”, Microbes and Environments, 24(3), pp.276-279.], trong khi Hamid và cộng sự phân lập các chủng có sử dụng cơ chất 2,2- Dichloropropionate từ đất vùng núi lửa [Hamid AAA, Hamdan S, Ariffin AHZ, Huyop F. (2010), “Molecular prediction of dehalogenase producing microorganism using 16S DNA analysis of 2,2 dichloropropionate degrading bacterium isolated from volcanic soil”, Journal of Biology Science, 10(3), pp. 190-199.]. Habe và cộng sự đã phân lập hai chủng Pseudomonas sp. CA10 và Terrabacter sp. DBF63 có khả năng sử dụng 2,7- DCDD

    • Phương pháp nuôi cấy làm giàu

    • Phương pháp cấy gạt

    • Phương pháp nhuộm Gram

    • Chụp ảnh trên kính hiển vi điện tử quét

    • Giải trình tự gen 16S ARNr

    • Ảnh hưởng của nhiệt độ

    • Ảnh hưởng của nồng độ cơ chất

    • Khả năng sử dụng một số hợp chất clo

    • Khả năng phân hủy hợp chất 1,2-DCE

    • Khả năng phân hủy hợp chất 2,2-DCPS

    • 3.1. Phân lập các chủng vi sinh vật có khả năng sử dụng một số hợp chất clo

      • 3.4. Nghiên cứu đặc điểm sinh hóa các chủng nghiên cứu bằng sử dụng kit thử API

      • Kết quả thử kit API 50CHB ở bảng trên cho thấy chủng DE1 có khả năng sử dụng đa dạng các loại đường. Đây là cơ sở sinh hóa quan trọng để chủng vi sinh vật nghiên cứu có thể sử dụng được các cơ chất chứa clo hữu cơ khi bổ sung vào môi trường nuôi cấy, từ đó chuyển hóa từ các hợp chất có tính độc thành các chất không còn độc với môi trường.

      • 3.5. Phân loại các chủng nghiên cứu bằng phương pháp giải trình tự gen 16S ARNr

Tài liệu cùng người dùng

Tài liệu liên quan