Kết quả nghiên cứu độc tính cấp và bán trường diễn của bài thuốc thân thống trục ứ thang trên thực nghiệm

27 1.1K 3
Kết quả nghiên cứu độc tính cấp và bán trường diễn của bài thuốc thân thống trục ứ thang trên thực nghiệm

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

1 Trường Đại học Y Hà Nội Cộng hoà xã hội chủ nghĩa Việt Nam Bộ môn Dược lý Độc lập - Tự do - Hạnh phúc Kết quả Nghiên cứu độc tính cấp và bán trường diễn của bài thuốc thân thống trục ứ thang trên thực nghiệm Nơi tiến hành nghiên cứu: Bộ môn Dược lý Trường Đại học Y Hà Nội Thời gian nghiên cứu: 4-6/2010 Cán bé tham gia nghiên cứu: 1. PGS. TS. Nguyễn Trọng Thông 2. PGS. TS. Nguyễn Trần Thị Giáng Hương 3. PGS. TS. Vũ Thị Ngọc Thanh 4. Ths. Phạm Thị Vân Anh 5. BS. Đậu Thùy Dương 6. KTV. Nguyễn Kiều Vân 7. KTV. Đinh Quang Trường 8. KTV. Đàm Đình Tranh 2 A. KẾT QUẢ THỬ ĐỘC TÍNH CẤP CỦA BÀI THUỐC THÂN THỐNG TRỤC Ứ THANG I. Nguyên liệu, đối tượng và phương pháp nghiên cứu 1.1. Nguyên liệu và đối tượng nghiên cứu 1.1.1. Nguyên liệu nghiên cứu Bài thuốc “Thõn thống trục ứ thang” - Công thức bài thuốc như sau: Tần giao 12g Xuyên khung 8g Đào nhân 12g Hồng hoa 12g Chích cam thảo 4g Khương hoạt 12g Một dược 6g Đương quy 12g Ngũ linh chi 12g Hương phụ chế 8g Ngưu tất 12g Địa long 6g - Tác dụng bài thuốc: hành khí hoạt huyết, khứ ứ thông lạc, thông tý chỉ thống. - Dạng thuốc sử dụng: thuốc sắc. - Nơi sản xuất: Khoa Dược, Bệnh viện YHCT Trung ương. Thuốc được bàn giao ngày 08/02/2010. Liều dùng trên người 116g/ngày. Dịch chiết được cô cách thủy đến đậm độ đặc nhất có thể cho chuột uống được bằng kim đầu tù chuyên dụng. Sau khi cô đặc nhất được cao đặc tỷ lệ 1:4 (1 ml cao chứa 4 gam dược liệu), dùng cao đặc để đánh giá độc tính cấp của thuốc thử và xác định LD 50 *Động vật thực nghiệm: Chuột nhắt trắng chủng Swiss, cả hai giống, khoẻ mạnh, trọng lượng 18-22g do Viện Vệ sinh dịch tễ TW cấp. Súc vật được nuôi trong phòng thí nghiệm 3 - 5 ngày trước khi nghiên cứu bằng thức ăn chuẩn (do Viện Vệ sinh dịch tễ TW sản xuất), uống nước tù do. 1.2. Phương pháp nghiên cứu: Xác định LD 50 của bài thuốc Thân thống trục ứ trên chuột nhắt trắng bằng đường uống theo phương pháp Litchfield - Wilcoxon. Trước khi tiến hành thí nghiệm, cho chuột nhịn ăn qua đêm. 3 Từng lô chuột nhắt trắng, mỗi lô 10 con, được uống thuốc thử theo liều tăng dần từ 120g dược liệu/kg đến liều 480g dược liệu/kg. Mỗi chuột uống 3 lần/24 giờ, cách nhau Ýt nhất 3 giờ. Tìm được liều cao nhất chuột không chết và liều thấp nhất gây chết 100% số chuột. Theo dõi tình trạng chung của chuột và số lượng chuột chết ở mỗi lô trong 72 giê. Sau đó tiếp tục theo dõi tình trạng chung của chuột đến hết ngày thứ 7 sau khi uống thuốc thử lần đầu. II. Kết quả nghiên cứu: Sau khi uống thuốc thử, ở lô dùng thuốc liều 120g dược liệu/kg, chuột không có hiện tượng gì đặc biệt: ăn uống, vận động bình thường, chuột không bị khó thở, đi ngoài phân khô. Ở những lô chuột uống thuốc thử liều cao trên 120g dược liệu/kg, chuột giảm vận động, có hiện tượng khó thở, đi ỉa lỏng và có chuột chết trong vòng 72 giê sau khi uống thuốc thử lần đầu. Các chuột bị chết đều xảy ra trong 24 giê sau uống thuốc lần đầu. Số lượng chuột chết trong vòng 72 giờ được ghi lại ở bảng sau. Số lượng chuột chết ở các lô chuột Liều dùng (g/kg) Số chuột chết /10con 240 0 300 1 330 2 360 3 390 5 420 5 435 6 450 8 465 9 480 10 4 Từ kết quả bảng trên vẽ được đường biểu diễn mối tương quan giữa liều dùng và số chuột chết. LD 50- Thân thống trục ứ y = 0.042x - 11.362 R 2 = 0.9301 -2 0 2 4 6 8 10 12 0 200 400 600 Liều dùng (g/kg) Số chuột chết (con) Từ đó tính được LD 50 = 389,57 ±21,21 (g/kg). III. Kết luận Mẫu cao láng Thân thống trục ứ gửi đến Bộ môn Dược lý Trường Đại học Y Hà Nội yêu cầu thử độc tính cấp theo đường uống, kết quả cho thấy: - Các chuột uống Thân thống trục ứ liều từ 120g dược liệu/kg trở xuống không có biểu hiện độc tính cấp. - Các chuột uống Thân thống trục ứ liều từ 120g dược liệu/kg có biểu hiện đi ỉa lỏng, ăn uống kém, gây sút, giảm vận động. - Xác định được LD 50 của cao láng Thân thống trục ứ trên chuột nhắt trắng theo đường uống là: LD 50 =389,57 ±21,21 (g/kg). 5 B. KẾT QUẢ THỬ ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN CỦA BÀI THUỐC THÂN THỐNG TRỤC Ứ I. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: 1.1. Đối tượng nghiên cứu: 1.1.1. Thuốc và các hoá chất nghiên cứu: * Thuốc nghiên cứu: Bài thuốc “Thân thống trục ứ thang” - Công thức bài thuốc như sau: Tần giao 12g Xuyên khung 8g Đào nhân 12g Hồng hoa 12g Chích cam thảo 4g Khương hoạt 12g Một dược 6g Đương quy 12g Ngũ linh chi 12g Hương phụ chế 8g Ngưu tất 12g Địa long 6g - Tác dụng bài thuốc: hành khí hoạt huyết, khứ ứ thông lạc, thông tý chỉ thống. - Dạng thuốc sử dụng: thuốc sắc. - Nơi sản xuất: Khoa Dược, Bệnh viện YHCT Trung ương. Thuốc được bàn giao ngày 20/5/2010. * Hoá chất và máy móc: - Kit định lượng các enzym và chất chuyển hoá trong máu: ALT (alanin aminotransferase), AST (aspartat aminotransferase), bilirubin toàn phần, albumin, cholesterol và creatinin của hãng Hospitex Diagnostics (Italy) và hãng DIALAB GmbH (Áo), định lượng trên máy Screen master của hãng Hospitex Diagnostics (Italy). - Dung dịch xét nghiệm máu ABX Minidil LMG của hãng ABX - Diagnostics, định lượng trên máy Vet abc TM Animal Blood Counter. - Các hoá chất xét nghiệm và làm tiêu bản mô bệnh học. 1.1.2. Động vật thực nghiệm: Thỏ chủng Newzealand White, lông trắng, cả 2 giống, khoẻ mạnh, trọng l- ượng 1,8 - 2,2kg do Trung tâm chăn nuôi Viện Kiểm nghiệm cung cấp. 6 Súc vật được nuôi trong phòng thí nghiệm của Bộ môn Dược lý từ 3 ngày tr- ước khi nghiên cứu và trong suốt thời gian nghiên cứu bằng thức ăn chuẩn của thỏ do công ty liên doanh Guyomarc’h-VCN sản xuất, uống nước tù do. 1.2. Phương pháp nghiên cứu: Thỏ được chia làm 3 lô, mỗi lô 10 con, mỗi con nhốt riêng một chuồng. - Lô chứng: uống nước cất 3ml/kg/ngày - Lô trị 1: uống Thân thống trôc ứ liều 7g/kg/ngày (liều có tác dụng tương đương liều dùng trên người, tính theo hệ số 3) - Lô trị 2: uống Thân thống trục ứ liều 21g/kg/ngày (gấp 3 lần lô trị 1) Thỏ được uống nước hoặc thuốc trong 4 tuần liền, mỗi ngày một lần vào buổi sáng. Sau 4 tuần uống thuốc, thỏ được ngừng uống thuốc. Các chỉ tiêu theo dõi trước và trong quá trình nghiên cứu: - Tình trạng chung, thể trọng của thỏ. - Đánh giá chức năng tạo máu thông qua số lượng hồng cầu, hàm lượng hemoglobin, hematocrit, thể tích trung bình hồng cầu, số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu và số lượng tiểu cầu. - Đánh giá chức năng gan thông qua định lượng mét số enzym và chất chuyển hoá trong máu: ALT, AST, bilirubin toàn phần, albumin và cholesterol. - Đánh giá chức năng thận thông qua định lượng creatinin huyết thanh. Các thông số theo dõi được kiểm tra vào trước lúc uống thuốc, sau 2 tuần uống thuốc và sau 4 tuần uống thuốc. - Mô bệnh học: Sau 4 tuần uống thuốc, thỏ được mổ để quan sát đại thể toàn bộ các cơ quan. Kiểm tra ngẫu nhiên cấu trúc vi thể gan, thận của 30% số thỏ ở mỗi lô. Các xét nghiệm vi thể được thực hiện tại Trung tâm nghiên cứu và chẩn đoán sớm ung thư, do PGS. TS. Lê Đình Roanh đọc kết quả. 1.3. Xử lý số liệu: 7 Các số liệu nghiên cứu được xử lý thống kê theo phương pháp t - test Student và test “trước - sau”(Avant - Après). Số liệu được biểu diễn dưới dạng : X ± SE Sự khác biệt có ý nghĩa khi p < 0,05. 2. Kết quả nghiên cứu: 2.1 Tình trạng chung và sự thay đổi thể trọng của thỏ: 2.1.1 Tình trạng chung: Trong thời gian thí nghiệm, thỏ ở lô chứng và lô trị 1 hoạt động bình thường, nhanh nhẹn, mắt sáng, lông mượt, ăn uống tốt, phân khô. Không thấy biểu hiện gì đặc biệt ở cả 2 lô thỏ trong suốt thời gian nghiên cứu. Riêng lô trị 2, thỏ ăn uống kém, đi ỉa lỏng, mệt mỏi, Ýt vận động, lông xù. 2.1.2 Sù thay đổi thể trọng thỏ: Bảng 2.1. Ảnh hưởng của Thân thống trục ứ đÕn thể trọng thỏ Thời gian Lô chứng Lô trị 1 Lô trị 2 p (t- test Student) Trọng lượng (kg) % tăng trọng lượng Trọng lượng (kg) % tăng trọng lượng Trọng lượng (kg) % tăng trọng lượng Trước uống thuốc 1,82 20 1,94 11 2,01 0,32 > 0,05 Sau 2 tuần uống thuốc 2,14 21 18,20 % 1,94 11 0% 1,94 37 -3,0% < 0,05 p (trước - sau) < 0,05 > 0,05 > 0,05 Sau 4 tuần uống thuốc 2,22 23 22,74 % 1,96 13 1,09 % 1,97 41 -2,0% < 0,05 p (trước - sau) < 0,05 > 0,05 > 0,05 8 Kết quả ở bảng 2.1 cho thấy: sau 2 tuần và 4 tuần uống thuốc, trọng lượng thỏ ở lô chứng tăng lên rõ rệt so với trước khi nghiên cứu (p<0,05). Trong khi đó ở lô trị 1, trọng lượng thỏ hầu nh- không thay đổi so với trước nghiên cứu (p>0,05). Lô trị 2 trọng lượng thỏ giảm so với trước khi dùng thuốc và so với lô chứng. 2.2. Đánh giá chức năng tạo máu: Bảng 2.2. Ảnh hưởng của Thân thống trục ứ đến số lượng hồng cầu trong máu thỏ Thời gian Sè lượng hồng cầu ( T/l ) p (t- test Student) Lô chứng Lô trị 1 Lô trị 2 Trước uống thuốc 4,83 0,27 4,84 0,51 > 0,05 Sau 2 tuần uống thuốc > 0,05 p (trước - sau) > 0,05 > 0,05 > 0,05 Sau 4 tuần uống thuốc 4,9 > 0.05 p (trước - sau) > 0,05 > 0,05 > 0,05 Bảng 2.3. Ảnh hưởng của Thân thống trục ứ đến hàm lượng huyết sắc tố trong máu thỏ Thời gian Số lượng huyết sắc tố (g/dl ) p (t- test Student) Lô chứng Lô trị 1 Lô trị 2 Trước uống thuốc > 0,05 Sau 2 tuần uống thuốc > 0,05 p (trước - sau) > 0,05 > 0,05 > 0,05 Sau 4 tuần uống thuốc > 0,05 p (trước - sau) > 0,05 < 0,05 > 0,05 9 10 Bảng 2.4.Ảnh hưởng của Thân thống trục ứ đến hematocrit trong máu thỏ Thời gian Hematocrit (%) p (t- test Student) Lô chứng Lô trị 1 Lô trị 2 Trước uống thuốc > 0,05 Sau 2 tuần uống thuốc > 0,05 p (trước - sau) > 0,05 > 0,05 > 0,05 Sau 4 tuần uống thuốc > 0,05 p (trước - sau) > 0,05 > 0,05 > 0,05 Bảng 2.5. Ảnh hưởng của Thân thống trục ứ đến thể tích trung bình hồng cầu trong máu thỏ Thời gian Thể tích trung bình hồng cầu ( fl ) p (t- test Student) Lô chứng Lô trị 1 Lô trị 2 Trước uống thuốc > 0,05 Sau 2 tuần uống thuốc 88 > 0,05 p (trước - sau) > 0,05 > 0,05 > 0,05 Sau 4 tuần uống thuốc > 0,05 p (trước - sau) > 0,05 > 0,05 > 0,05 [...]... xét và kết luận: Kết quả nghiên cứu độc tính bán trường diễn của bài thuốc Thân thống trục ứ thang cho thấy: Trên hai lô thỏ, lô trị 1 uống Thân thống trục ứ liều 7g/kg/ngày và lô trị 2 uống Thân thống trục ứ liều cao gấp 3 lần 21g/kg/ngày), liên tục trong 4 tuần kết quả cho thấy: 1 Trên tình trạng chung và trọng lượng: + Liều thấp 7g/kg/ngày thuốc thử không làm ảnh hưởng xấu đến tình trạng chung của. .. thể các cơ quan của thỏ - Ở cả 2 liều Thân thống trục ứ không gây tổn thương rõ rệt cấu trúc vi thể gan, thận của thỏ 26 KẾT LUẬN Mẫu thuốc thử Thân thống trục ứ được gửi đến Bộ môn Dược lý- trường Đại học Y Hà Nội yêu cầu thử độc tính bán trường diễn trên thỏ theo đường uống, kết quả cho thấy: - Mẫu thuốc thử Thân thống trục ứ không gây độc tính bán trường diễn trên thỏ khi cho thỏ uống liều 7g/kg/ngày... đánh giá chức năng gan (hoạt độ AST, ALT, nồng độ albumin, cholesterol và bilirubin toàn phần trong máu thỏ) ở cả lô trị 1 (uống Thân thống trục ứ liều 7g/kg/ngày) và lô trị 2 (uống Thân thống trục ứ liều 21g/kg/ngày) đều không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lô chứng và so với trước khi uống thuốc (p > 0,05) 14 2.4 Đánh giá chức năng thận: Bảng 2.14 Ảnh hưởng của Thân thống trục ứ đến nồng... bạch cầu và số lượng tiểu cầu) 3 Trên chức năng gan, thận: Ở cả 2 liều Thân thống trục ứ không làm thay đổi kết quả các xét nghiệm đánh giá chức năng gan (ALT, AST, bilirubin toàn phần, albumin, cholesterol) và chức năng thận (creatinin) 4 Trên giải phẫu đại thể và vi thể gan, thận thỏ: - Ở cả 2 liều Thân thống trục ứ Không gây tổn thương rõ rệt về mặt hình thái khi quan sát đại thể các cơ quan của thỏ... (mg/dl) Thời gian Lô chứng Lô trị 1 p Lô trị 2 Trước uống > 0,05 thuốc Sau 2 tuần > 0,05 uống thuốc p (trước - sau) > 0,05 > 0,05 > 0,05 Sau 4 tuần > 0,05 uống thuốc p (trước - sau) (t- test Student) > 0,05 > 0,05 > 0,05 Kết quả ở bảng 2.14 cho thấy: sau 2 tuần và 4 tuần uống thuốc liên tục, ở cả lô trị 1 (uống Thân thống trục ứ liều 7g/kg/ngày) và lô trị 2 (uống Thân thống trục ứ liều 21g/kg/ngày),... giá chức năng tạo máu (số lượng hồng cầu, hàm lượng huyết sắc tố, hematocrit, thể tích trung bình hồng cầu, số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu và số lượng tiểu cầu) ở cả lô trị 1 (uống Thân thống trục ứ liều 7g/kg/ngày) và lô trị 2 (uống Thân thống trục ứ liều 21g/kg/ngày) đều không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lô chứng và so với trước khi dùng thuốc (p > 0,05) 2.3 Đánh giá chức năng... 7g/kg/ngày (liều có tác dụng tương đương liều dùng trên người) trong 4 tuần liên tục: Tất cả các chỉ số theo dõi về tình trạng chung, cân nặng, chức năng tạo máu, chức năng gan, chức năng thận và mô bệnh học gan, thận đều nằm trong giới hạn bình thường, không có sự khác biệt rõ rệt so với lô chứng - Mẫu thuốc thử Thân thống trục ứ gây độc tính bán trường diễn trên thỏ khi cho thỏ uống liều 21g/kg/ngày (liều... hưởng của Thân thống trục ứ đến số lượng bạch cầu trong máu thỏ Thời gian Sè lượng bạch cầu (G/l) Lô chứng p Lô trị 1 Lô trị 2 (t- test Student) Trước 4 uống thuốc Sau 2 tuần > 0,05 > 0,05 > 0,05 Sau 4 tuần > 0,05 5 uống thuốc P (trước - sau) > 0,05 4 uống thuốc P (trước - sau) 1,56 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Bảng 2.7 Ảnh hưởng của Thân thống trục ứ đến công thức bạch cầu trong máu thỏ Công thức bạch... lượng của thỏ như lô chứng + Liều cao 21g/kg/ngày thuốc thử làm ảnh hưởng xấu đến tình trạng chung, gây ỉa chảy kéo dài, làm giảm trọng lượng của thỏ, gây suy kiệt 2 Trên chức năng tạo máu: Ở cả 2 liều Thân thống trục ứ không làm thay đổi kết quả các xét nghiệm đánh giá chức năng tạo máu (số lượng hồng cầu, hàm lượng huyết sắc tố, hematocrit, thể tích trung bình hồng cầu, số lượng bạch cầu, công thức... Ảnh hưởng của Thân thống trục ứ đến hoạt độ AST trong máu thỏ Thời gian Hoạt độ AST (UI/l) Lô chứng Lô trị 1 p Lô trị 2 Trước uống > 0,05 thuốc Sau 2 tuần > 0,05 uống thuốc p (trước - sau) > 0,05 > 0,05 > 0,05 Sau 4 tuần > 0,05 uống thuốc p (trước - sau) (t- test Student) > 0,05 > 0,05 12 > 0,05 Bảng 2.10 Ảnh hưởng của Thân thống trục ứ đến hoạt độ ALT trong máu thỏ Thời gian Trước uống thuốc Hoạt . Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: 1.1. Đối tượng nghiên cứu: 1.1.1. Thuốc và các hoá chất nghiên cứu: * Thuốc nghiên cứu: Bài thuốc Thân thống trục ứ thang - Công thức bài thuốc như. LD 50 của cao láng Thân thống trục ứ trên chuột nhắt trắng theo đường uống là: LD 50 =389,57 ±21,21 (g/kg). 5 B. KẾT QUẢ THỬ ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN CỦA BÀI THUỐC THÂN THỐNG TRỤC Ứ I Trường Đại học Y Hà Nội Cộng hoà xã hội chủ nghĩa Việt Nam Bộ môn Dược lý Độc lập - Tự do - Hạnh phúc Kết quả Nghiên cứu độc tính cấp và bán trường diễn của bài thuốc thân thống trục

Ngày đăng: 26/07/2014, 08:13

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan