BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI LÊ THỊ THỦY NGHIÊN CỨU GÓP PHẦN PHÁT TRIỂN CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT HẠT GIĨNG CÀ CHUA LAI F1 TẠI VÙNG ĐỒNG BẰNG SÔNG HỒNG Chuyên ngành: Di truyền chọn giống trồng Mã số: 62 62 05 01 TĨM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ NƠNG NGHIỆP HÀ NỘI - 2012 Cơng trình hồn thành tại: TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI Người hướng dẫn: PGS.TS NGUYỄN VĂN HOAN TS TRỊNH KHẮC QUANG Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ hội đồng chấm luận án cấp trường họp tại: Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội Vào hồi , ngày tháng năm Có thể tìm hiểu luận án thư viện: - Thư viện Quốc gia Việt Nam - Thư viện Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài: Sản xuất hạt giống lai cà chua (Lycopersicon escumlentum L.) ngành mang lại lợi nhuận khổ ng lồ cho nhiều nước giới Ấn Độ, Trung Quốc, Thái Lan (Xuất hạt giống cà chua lai mang lại cho Thái Lan 800-900 nghìn baht năm (Jirasak, 2006) Trong đó, Việt Nam với lợi thổ nhưỡng, khí hậu, truyền thống canh tác cà chua 100 năm, phải nhập từ nước 4000 - 4500 kg hạt giống lai cà chua, hàng năm tiêu tốn khoảng 80-90 tỷ đồng (Trần Văn Lài cs, 2005) Đứng trước nhu cầu thực tế sản xuất, thời gian qua quan nghiên cứu nước cho đời số giống cà chua ưu lai HT7, HT42, HT160 FM20, FM29, lai số 9, HPT10, VT3 , với công nghệ sản xuất hạt giống ngày hoàn thiện Mặc dù vậy, suất chất lượng hạt giống đơi cịn thấp, giá thành sản xuất hạt lai cao từ 10 đến 30 lần so với hạt giống Điều tạo tâm lý hạn chế sử dụng giống lai người nơng dân Do đó, giảm giá thành sản xuất , nâng cao chất lượng hạt giống đòi hỏi thiết sản xuất Sử dụng dòng mẹ bất dục bào tử thể (ms), bất dục vị trí (ps, ps2) để cắt giảm cơng khử đực sản xuất hạt giống cà chua lai ứng dụng rộng rãi số quốc gia Cộng hòa Séc, Moldova, Ba Lan Bulgaria (Atanassova, 1999) Trong việc nghiên cứu sử dụn g dịng mẹ bất dục vòi nhụy dài hướng nghiên cứu nhiều hứa hẹn, nhiều nước giới theo đuổi Đề tài ”Nghiên cứu góp phần phát triển công nghệ sản xuất hạt giống cà chua lai F1" tiến hành nhằm lựa chọn dạng bất dục vịi nhụy vươn dài có kích hoạt bổ sung GA 3, phù hợp làm mẹ , để xây dựng quy trình cơng nghệ sản xuất hạt giống cà chua lai F1 hồn tồn khơng phải khử đực Mục tiêu đề tài Xác định dịng mẹ cà chua có vịi nhụy vươn dài, mẫn cảm với GA3 phù hợp cho sản xuất hạt giống cà chua lai F1 (không phải khử đực) vùng đồng sơng Hồng Bước đầu xây dựng quy trình công nghệ sản xuất hạt giống cà chua lai F1 khơng cần khử đực dịng mẹ thơng qua việc ứng dụng dịng mẹ có vịi nhụy vươn dài, mẫn cảm với GA3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học Đây cơng trình nghiên cứu có hệ thống Việt nam tính bất dục vịi nhụy vươn dài hoa cà chua Trên sở đánh giá biểu hình thái, kiểm định di truyền kiểu gen kiểm sốt độ dài vịi nhụy thị phân tử để lựa chọn dịng cà chua có vòi nhụy vươn dài phù hợp cho mục tiêu sản xuất hạt giống lai khơng cần khử đực dịng mẹ Kết nghiên cứu đề tài bổ sung t hêm cở sở khoa học cho việc ứng dụng dịng mẹ cà chua có vịi nhụy vươn dài mức vừa phải, có kích hoạt bổ sung GA3 để xây dựng công nghệ sản xuất hạt giống cà chua lai F1 khơng cần khử đực dịng mẹ, phù hợp với điều kiện sinh thái vùng đồng sông Hồng 3.2 Ý nghĩa thực tiễn Đề tài tuyển chọn dịng cà chua ưu tú có vịi nhụy vươn dài: D4, D5, D9, D16, D17; mẫn cảm với GA3 phù hợp để sử dụng làm mẹ sản xuất hạt giống lai F1 không cần khử đực, cho lai F1 bình thường Từ kết nghiên cứu đề tài thiết lập quy trình định hướng sản xuất hạt giống cà chua lai F1 không cần khử đực dòng mẹ phù hợp với sinh thái vùng đồng sông Hồng, giúp hạ giá thành sản xuất hạt giống Đối tượng p hạm vi nghiên cứu 4.1 Đối tượng nghiên u Đề tài sử dụng giống cà chua địa phương nước, dòng cà chua từ Trung tâm Nghiên Rau Thế giới (AVRDC), dòng phân lập từ giống lai F1 nhập nội 4.2 Phạm vi nghiên cứu - Đề tài giới hạn phạm vi nghiên cứu dịng cà chua có vịi nhụy vươn dài, sử dụng sản xuất hạt lai F1 không khử đực dịng mẹ - Q trình nghiên cứu nguồn vật liệu khởi đầu, q trình lai tạo, tuyển chọn dịng cà chua có vịi nhụy vươn dài mẫn cảm với GA3, thiết lập thông số kỹ thuật thử nghiệm quy trình sản xuất hạt giống lai thực Viện Nghiên cứu Rau Kiểm chứng lai F1 xây dựng mơ hình trình diễn địa phương Hưng Yên, Hà Nội Những đóng góp luận án - Phát chọn lọc s ố dịng cà chua có vị trí vịi nhụy so với bao phấn mức 3-2 ( mức độ vươn dài vòi nhụy 2mm có ý nghĩa nên nhà khoa học tiếp cận để khai thác ưu điểm dạng bất dục kết hợp với gen bất dục ps2 hay ms10, sử dụng dạng vòi nhụy vươn dài mức vừa phải 60% MTĐ98-4, CLN2768-21, CLN-VRQ7, Gadeeva 04-5, CLN2498E xem giống mẫn cảm với GA3, mẫu giống đươc lựa chọn, phân lập tạo nên dòng ký hiệu D4, D5, D9, D16, D17 để sử dụng m mẹ sản xuất hạt giống lai F1 3.1.4 Ứng dụng thị phân tử tìm hiểu gen kiểm sốt tính trạng vươn dài vịi nhụy mẫu giống cà chua có vịi nhụy vươn dài, mẫn cảm với GA3 Kết phân tích PCR bảng 3.20 cho thấy: Bảng 3.20 : Tỉ lệ cá thể có phản ứng dương với marker (%) Marker TG318 TMS33 T0958 80,0 60,0 70,0 40,0 33,0 90,9 80,0 60,0 0 90,9 80,0 30,0 80,0 50,0 66.7 33,0 81,8 T0635 TG131R T1480 Dòng D17 D9 D4 D16 CLN3024A Gadeeva 05-8 D5 100,0 80,0 70,0 40,0 22,2 90,9 100,0 80,0 70,0 40,0 0 90,9 80,0 50,0 50,0 30,0 33,0 16,7 90,9 Tất dòng nghiên cứu phản ứng dương với marker TG318 (nằm NST số loài L Histurum), đặc biệt dịng D17 D5 có tỷ lệ cá thể phản ứng dương với TG318 tương đối ca o từ 70-90%, D16 giống đối chứng lại cho tỷ lệ thấp 30-40% Điều chứng tỏ khả D17, D5 có quan hệ với lồi L histurum lớn Trong dòng giống nghiên cứu hầu hết có phản ứng dương với TG958, TG635 Tuy nhiên mức độ phản ứng dòng cá thể dòng khác phụ thuộc vào chất di truyền cá thể riêng biệt Dựa vào mức độ phản ứng với cặp primer, dịng nghiên cứu phân thành nhóm: 12 Nhóm 1: Khả cao có chứa gien bất dục, nhóm gồm D4, D5, D16, D17 Nhóm 2: Khả thấp có chứa gien bất dục, điển hình dịng CLN3024A Nhóm 3: Các dịng D9 Gadeeva 05-8 có tỉ lệ xuất phản ứng dương với PCR mức trung gian nhóm nhóm Kết qu ả cho thấy để phát triển nguồn vật liệu bất dục từ quần thể dòng nghiên cứu cần thiết phải áp dụng triệt để phương pháp chọn lọc cá thể tự thụ tuyệt đối, ngồi việc xuất cá thể có phản ứng đồng thời hầu hết marker điều kiện thuận lợi để phát triển dòng cà chua bất dục đực sau 3.2 Nghiên cứu xác định số thông số kỹ thuật cho việc xác lập quy trình định hướng sản xuất hạt giống lai cà chua sử dụng dịng mẹ có vịi nhụy dài , mẫn cảm với GA3 3.2.1 Ản h hưởng thời vụ điều kiện trồng trọt đến đặc điểm hoa mẫu giống cà chua có vịi nhụy vươn dài mẫn cảm với GA3 Thí nghiệm đánh giá dịng cà chua có vịi nhụy vươn dài, mẫn cảm với GA3 D4, D5, D9, D16, D17 chọn từ mẫu giống CLN2498E, CLN2768-21, CLN-VRQ7, Gadeeva 04–5, MTĐ-98-4 điều kiện đồng nhà lưới Bảng 3.16 Tỷ lệ hoa vươn dài vòi nh ụy dịng cà chua có vịi nhụy mẫn cảm với GA3 thời vụ khác điều kiện ngồi đồng (%) Dịng Nhiệt độ Tb Ẩm độ Tb D4 D5 D9 D16 D17 15/9 15/10 27,6±1,5 76,4±6,0 58,0±6,3 60,6±5,6 76,2±7,3 62,3±7,4 64,7±5,2 25,2±2,4 77,9±9,0 48,1±6,8 59,0±6,8 66,7±6,4 47±8,5 55,4±4,2 Thời vụ trồng 15/11 15/12 15/1 20,8±3,2 17,58±3,1 18,12±3,4 81±8,91 76,8±10,5 73,8±12,8 45,2±8,1 40,4±7,5 57,1±6,0 55,7±8,4 46,1±5,5 56,8±6,1 64,6±5,8 55,0±6,8 60,2±5,5 48,0±11,0 44,7±9,8 51,9±9,4 51,5±4,8 48,5±4,2 53,4±4,0 15/2 21,9±4,1 81,7±8,8 62,1±8,1 73,0±9,3 72,1±5,9 60,9±9,8 63,4±6,2 Kết theo dõi thể bảng 3.1 3.17 cho thấy: Tỷ lệ hoa có vịi nhụy dài tất dòng biến đổi mạnh theo thời vụ trồng điều kiện trồng Thời vụ trồng vào 15/9, 15/2 cho tỷ lệ hoa có vịi nhụy vươn dài đạt cao tất dòng từ 58 -76% Trong dòng cà 13 chua đánh giá dịng D9, D5 cho tỷ lệ hoa có vịi nhụy vươn dài cao tất thời vụ đạt từ 50 -75% Trong điều kiện nhà lưới tỷ lệ hoa có vịi nhụy vươn dài có xu hướng tăng cao so với điều kiện đồng Mức tăng trung bình từ -20% tất thời vụ trồng Trong thời vụ trồng, thời vụ trồng 15/12 cho độ vươn dài vòi cao nhất, điều dường trái ngược với tỷ lệ hoa có vịi nhụy nhụy vươn dài Có thể cường độ ánh sáng yếu thời vụ cuối đông, đầu xuân thúc đẩy vươn dài vòi n hụy Bảng 3.17 Tỷ lệ hoa có vịi nhụy vươn dài dịng cà chua có vịi nhụy mẫn cảm với GA3 thời vụ khác điều kiện nhà lưới (%) Dòng Nhiệt độ Tb Ẩm độ Tb D4 D5 D9 D16 D17 Thời vụ trồng 15/9 22,7±1,4 73,2±4,5 65,7±5,9 78,6±4,9 73,3±4,9 81,3±7,3 68,7±4,6 15/10 28,9±1,8 73,1±8,2 55,1±6,2 63,9±6,5 58,6±5,5 72,7±8,0 62,7±3,0 15/11 21,4±3,0 78,0±7,6 53,3±7,9 62,7±7,4 54,1±5,4 69,6±9,7 56,6±4,2 15/12 19,8±2,8 71,2±9,8 43,4±7,1 46,2±8,5 49,7±6,1 58,8±9,9 52,5±5,9 15/1 18,6±2,85 70,1±10,3 63,1±5,7 65,8±5,6 59,9±4,8 66,5±9,0 59,4±3,6 15/2 22,9±3,4 76,2±7,9 72,7±8,2 80,0±8,8 73,4±5,6 79,5±9,5 80,4±4,9 Bảng 3.18 Độ vươn dài vòi nhụy dòng cà chua có vịi nhụy mẫn cảm với GA3 điều kiện ngồi đồng nhà lưới Dịng 15/9 D4 D5 D9 D16 D17 1,5±0,2 1,7±0,1 1,6±0,2 1,7±0,2 1,7±0,2 D4 D5 D9 D16 D17 1,7±0,2 1,9±0,1 1,6±0,2 1,9±0,2 1,7±0,2 Thời vụ trồng 15/11 15/12 Điều kiện đồng 1,6±0,2 1,7±0,2 2,1±0,2 2,2±0,1 2,3±0,2 2,2±0,2 1,7±0,2 1,8±0,2 2,1±0,2 1,9±0,2 2,0±0,2 2,0±0,3 1,8±0,2 1,9±0,2 2,1±0,2 Điều kiện nhà lưới 1,7±0,2 1,8±0,2 2,3±0,2 2,1±0,1 2,3±0,2 2,5±0,2 1,7±0,2 1,8±0,2 2,1±0,2 2,0±0,2 2,1±0,2 2,4±0,3 1,8±0,2 1,8±0,2 2,3±0,2 15/10 15/1 15/2 1,8±0,2 2,2±0,2 1,7±0,2 1,9±0,2 1,7±0,2 1,6±0,2 2,2±0,1 1,6±0,2 1,8±0,2 1,7±0,2 2,3±0,2 2,3±0,2 2,2±0,2 2,3±0,2 2,1±0,2 1,7±0,2 2,3±0,1 1,7±0,2 2,0±0,2 1,8±0,2 Nhìn chung, dịng cà chua có xu hướng vươn dài vịi nhụy 14 nhà lưới ngồi đồng Các dịng D5, D16 dịng có vịi nhụy vươn dài đặc biệt thời vụ trồng 15/12, 15/1 mức độ vươn dài vịi nhụy đạt bình 2,2 -2,3mm Như vậy, thời vụ trồng điều kiện trồng trọt góp phần khơng nhỏ vào việc tăng tỷ lệ hoa có VNVD độ dài vịi nhụy Với dịng cà chua có VNVD, mẫn cảm với GA3 điều kiện thích hợp cho việc biểu tính trạng vòi nhụy dài thời vụ trồng sớm (15/9) muộn (15/2) điều kiện nhà lưới 3.2.2 Ảnh hưởng thời vụ điều kiện trồng trọt đến tỷ lệ thụ phấn tự nhiên dịng mẹ có vòi nhụy vươn dài, mẫn cảm với GA3 Nếu tiến hành lai điều kiện ngồi đồng tỷ lệ thụ phấn tự nhiên dịng mẹ trung bình đạt 14,06%, tỷ lệ giảm xuống 6,28% điều kiện nhà lưới Trong tỷ lệ thụ phấn tự nhiên đạt thấp nhà lưới dòng D5, D17 đạt cao dòng D9 Ngồi r a dịng D5, D17 cho tỷ lệ thụ phấn tự nhiên thấp hai điều kiện lai tạo 11,39%, 3,33% (ngoài đồng) 3,61%, 4,72% (trong nhà lưới) Bảng 3.20 Tỷ lệ thụ phấn tự nhiên dòng mẹ mẫn cảm với GA3 số thời vụ trồng % số có dạng bình thường THL Ngồi đồng 15/9 D4/ĐB11 D5/ĐB11 D9/ĐB11 D16/ĐB11 D17/ĐB11 TB 15/10 15/1 15/2 14,44 13,33 20,00 16,67 13,33 20,00 14,44 17,78 17,78 15,56 11,11 8,89 12,22 15,56 13,33 Trong nhà lưới TB 15/9 15/10 15/1 15/2 11,2214,19 6,70 11,11 8,89 11,39 4,44 4,45 13,3315,83 8,89 11,11 14,4415,56 11,11 8,89 8,89 13,33 5,56 6,67 15,55 17,11 12,22 11,3614,06 7,34 6,70 3,33 7,78 5,56 4,44 3,33 2,22 4,45 6,67 2,22 TB 6,96 3,61 8,06 8,06 4,72 8,45 5,56 3,78 6,28 3.2.3 Nghiên cứu xác định thời điểm thụ phấn phù hợp dịng mẹ có vòi nhụy mẫn cảm với GA3 sản xuất hạt giống cà chua lai 3.2.3.1 Đánh giá khả thụ phấn tự nhiên dịng mẹ có vịi nhụy vươn dài, mẫn cảm với GA3 vụ đông xuân 2009-2010 Sự tự thụ dòng mẹ D5 xảy sau hoa bắt đầu nở với tỷ lệ đậu thấp Kết thí nghiệm trình bày bảng 3.21 15 Bảng 3.21: Khả kết hạt đậu dòng D5 thời điểm khử đực khác nhau, điều kiện vụ đông xuân 2009 Tỷ lệ đậu Số quả/cây Số hạt TT Công thức (%) (quả ) (hạt ) đực hoa bắt đầu nở Kh 0 (7h sáng) Khử đực trước hoa nở 0 hồn tồn giị (8 sáng) Khử đực trư ớc hoa nở 0,72 0,13 3,27 hoàn toàn 1giờ (9 sáng) Khử đực hoa nở hoàn 5,1 3,83 9,2 toàn (10 sáng) Khử đực sau hoa nở hoàn 8,62 4,86 12,4 toàn (11 trưa) LSD 0,05 0,65 0,89 1,7 CV% 6,0 13,5 9,2 3.2.3.2 Đánh giá ảnh hưởng mức độ thành thục hoa dòng mẹ đến chất lượng hạt giống lai F1 vụ đông xuân 2009-2010 Bảng 3.23 Ảnh hưởng tuổi hoa dòng mẹ lai đến suất hạt lai tổ hợp lai D5x FM372C vụ đông xuân 2009 -2010 TT Công thức Thụ phấn trước hoa bắt đầu nở 12 Thụ phấn trước hoa bắt đầu nở 14 Thụ phấn trước hoa bắt đầu nở 16 Thụ phấn trước hoa bắt đầu nở 18 Thụ phấn trước hoa bắt đầu nở 20 Thụ phấn trước hoa bắt đầu nở 22 Thụ phấn trước hoa bắt đầu nở 24 Thụ phấn hoa bắt đầu nở (đ/c) LSD0,05 CV% Số hạt/quả Khối lượng Năng suất (hạt) hạt/cây (g) hạt (kg/ha) 62,43 4,02 95,72 83,56 5,10 129,18 84,25 5,27 135,49 73,26 4,14 119,65 66,53 4,03 111,06 54,56 3,41 93,34 54,40 3,35 94,76 84,05 5,94 135,23 6,94 0,37 5,03 5,5 4,7 2,4 Theo kết nghiên cứu (bảng 3.2 3) cho thấy: công thức thụ phấn cho hoa dòng mẹ trước hoa nở từ 18 -24 cho số hạt/quả tương đối cao 73,26; 66,53; 54,56 54,4 hạt; suất hạt lai đạt > 90kg/ha, song thụ phấn vào thời điểm trước hoa nở 16 cho số lượng hạt suất hạt lai cao đạt 84,25 hạt/quả, 5,27g hạt/cây suất 135,49 kg hạt/ha, tương đương với đối chứng th ụ phấn hoa nở (7 h sáng) Như thời điểm phù hợp để thụ phấn cho dịng mẹ cà chua có 16 vòi nhụy vươn dài, mẫn cảm với GA3 từ hoa bắt đầu nở đến trước hoa nở 16 3.2.4 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ GA3 đến biểu kiểu hình dịng mẹ có vịi nhụy mẫn cảm vụ xn hè 2010 Phun GA3 nồng độ có tác dụng làm tăng tỷ lệ hoa có VNVD dòng D5, D17 Việc phun GA3 lên chùm hoa với nồng độ 350 400ppm phù hợp nhất, làm tăng tỷ lệ hoa có VNVD đồng thời l àm giảm sức sống hạt phấn, góp phần giảm khả tự thụ, thuận lợi cho thao tác thụ phấn dòng mẹ ứng dụng sản xuất hạt lai không khử đực Bảng 3.25: Ảnh hưởng nồng độ GA3 đến tỷ lệ hoa có vịi nhụy dài dòng D5, D17 vụ xuân hè 2009 Dòng mẹ D5 D17 Tổng Số hoa Tỷ lệ Tổng Số hoa Tỷ lệ Nồng độ số hoa có hoa có số hoa có hoa có GA3 phun VND VND phun VND VND (ppm) (hoa) (hoa) (%) (hoa) (hoa) (%) 100 35,33 11,33 32,08 58,67 21,33 36,36 150 46,00 21,33 46,38 63,67 25,00 39,27 200 46,67 26,67 57,14 61,67 34,33 55,68 250 41,33 27,00 65,32 53,67 31,67 59,01 300 43,67 29,67 67,94 50,33 29,67 58,94 350 48,33 35,00 72,41 68,00 53,00 77,94 400 42,67 33,67 78,90 56,00 44,00 78,57 450 45,00 35,33 78,52 66,33 43,33 65,32 500 50,33 36,00 71,52 69,33 40,33 58,17 Nước 47,00 9,67 20,57 63,67 15,67 24,61 LSD0,05 8,4 5,56 Cv% 9,5 5,6 3.3.5 Nghiên cứu ảnh hưởng tuổi hoa số lần phun GA3 đến mức độ vươn dài vòi nhụy dòng mẹ có vịi nhụy mẫn cảm Số liệu bảng 28 rằng: tỷ lệ hoa có vịi nhụy dài bắt đầu tăng mạnh mẽ dòng D5 D17 phun GA3 trước hoa nở ngày đạt cao giai đoạn 9-10 ngày trước hoa nở Nếu cung cấp GA3 giai đoạn sớm trình phát triển làm tăng tỷ l ệ hoa có vịi nhụy vươn dài so với phun GA3 giai đoạn hoa phát triển hồn chỉnh Vì kết tốt nhất, với tỷ lệ hoa có vịi nhụy vươn dài lớn nên phun GA3 lần trước hoa nở từ -10 ngày , lần thứ cách lần thứ hai ngày 17 Bảng 3.28 Ảnh hưởng tuối hoa số lần phun GA3 đến tỷ lệ hoa có vịi nhụy dài (%) Số lần phun Phun GA3 lần Phun GA3 lần Thời điểm phun D5 D17 D5 D17 Trước hoa nở ngày 22,62 18,68 28,99 25,58 Trước hoa nở ngày 23,08 21,95 31,94 28,06 Trước hoa nở ngày 42,50 38,71 59,69 58,06 hoa nở ngày Trước 63,00 53,85 65,85 69,83 Trước hoa nở ngày 70,51 66,27 76,79 81,13 Trước hoa nở ngày 71,88 65,09 78,81 83,04 ớc hoa nở ngày Trư 72,04 67,68 80,45 86,99 Trước hoa nở 10 ngày 75,00 71,88 82,48 88,28 đ/c (khi hoa nở) 18,60 17,58 28,28 26,84 LSD0,05 6,98 7,07 7,17 5,29 CV% 7,9 8,7 6,7 5,1 3.2.6 Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian bảo quản hạt phấn dòng bố đến suất chất lượng hạt giống cà chua lai F1 Hạt phấn sau thu thập tỷ lệ hữu dục đạt 100% tất công thức tỷ lệ không giảm trình bảo quản (bảng 3.29) Bảng 3.29 Sức sống hạt phấn trước sau bảo quản Chỉ tiêu Không BQ BQ thường ngày BQ thường ngày BQ thường ngày BQ lạnh ngày BQ lạnh ngày BQ lạnh ngày LSD0,05 CV% Tỷ lệ hạt phấn hữu dục (%) sau bảo trước bảo quản quản 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 Tỷ lệ hạt phấn nảy mầm (%) trước bảo sau bảo quản quản 98,6 97,5 96,6 98,3 85,3 95,8 74,7 97,5 97,0 97,2 87,5 98,5 85,0 6,99 4,40 Tuy nhiên tỷ lệ nảy mầm hạt phấn mơi trường nhân tạo lại có sai khác rõ rệt trước sau bảo quản, giảm từ 98,6% cơng thức khơng bảo quản xuống cịn 74,7% cơng thức bảo quản nhiệt độ phịng ngày Mặc dù công thức bảo quản hạt phấn nhiệt độ mát từ 5-100C đảm bảo sức sống hạt phấn thể tỷ lệ nảy 18 mầm hạt phấn đảm bảo từ 85 -97% Để chủ động cho công tác lai tạo hạn chế ảnh hưởng điều kiện khí hậu miền bắc vụ đơng, tiến hành thu thập phấn hoa dòng bố từ trước, bảo quản nhiệt độ mát từ 2-3 ngày để thụ phấn cho dịng mẹ mà khơng ảnh hưởng đến suất c hất lượng hạt lai 3.3 Kiểm chứng lai F1 sản xuất quy trình , khơng khử đực dịng mẹ có vòi nhụy vươn dài, mẫn cảm với GA3 3.3.1 Ảnh hưởng mức độ vươn dài vòi nhụy dòng bố mẹ đến lai F1 3.3.1.1 Con lai dịng bố có vịi nhụy thấp dịng mẹ có vịi nhụy vươn dài, mẫn cảm với GA3 Bảng 3.31 Ảnh hưởng độ vươn dài vòi nhụy dòng mẹ đến mức độ vươn dài vòi nhụy lai F1 ươn dài Độ vươn dài Độ vươn Độ v Giá trị Giá trị Dòng VN dòng VN dịng dài VN củ a trung bình F1 so với mẹ mẹ+SE bố +SE F1 +SE bố mẹ TB bố mẹ (mm) (mm) (mm) (mm) (mm) D4 1,92±0,13 -1,87±0,1 0,70±0,05 0,025 0,675 D5 2,07±0,12 0,62±0,02 0,1 0,52 D9 1,74±0,11 0,77±0,03 -0,065 0,835 D16 1,66±0,14 0,32±0,03 -0,105 0,425 D17 1,95±0,12 0,60±0,02 0,04 0,56 Các dịng mẹ có độ vươn dài vòi nhụy khác từ 1,66 – 2,07mm, dịng bố có dạng vịi nhụy thấp, cho lai có độ vươn dài vịi nhụy từ 0,32 0,77mm, cao trung bình bố mẹ từ 0,41 đến 0,82mm Nhìn chung: tất F1 có mức độ vươn dài vịi nhụy thấp 40 tấn/ha, tỷ lệ hoa có vịi nhụy vươn dài 70% vị trí vòi nhụy so với bao phấn từ -2, phù hợp để sử dụng làm mẹ sản xuất hạt giống cà chua lai F1 khơng cần khử đực dịng mẹ Sử dụng dịng mẹ có vịi nhụy vươn dài mức vừa phải D4, D5, D9, D16, D17, kích hoạt vịi nhụy dịng mẹ vươn dài GA3, kết hợp với dịng bố có vịi nhụy ngắn PT18, TLB184, FM372C, CA4; tạo tổ hợp lai cà chua có khả đậu s uất tương đương giống lai bình thường, đồng thời khơng phải khử đực dịng mẹ q trình sản xuất hạt giống lai F1 Xử lý GA3 với nồng độ từ 350-400ppm lên chùm hoa dịng mẹ có vịi nhụy vươn dài, mẫn cảm với GA3 vào thời điểm trước hoa nở 9-10 ngày 6-7 ngày, sau thụ phấn cho chúng trước hoa bắt đầu nở tạo điều kiện thuận lợi cho trình sản xuất hạt giống cà chua lai F1, khơng phải khử đực dịng mẹ, suất chất lượng hạt giống đảm bảo Các tổ hợp lai THL D17/CA4, D5/FM372C tạo từ dịng mẹ có vịi nhụy vươn dài mẫn cảm với GA cho tỷ lệ hoa có vịi nhụy vươn dài thấp , độ dài vịi nhụy mức 2, tỷ lệ đậu đạt từ 6070%, cho suất tương đương với giống đối chứng, đạt 490-500 tạ/ha số vụ trồng vùng thử nghiệm Sản xuất hạt giống lai phương pháp khơng khử đực dịng mẹ cho suất tương đương với phương pháp sản xuất hạt giống lai bình thường, đạt 76,0 kg hạt giống/ha THL D17/CA4 77,2kg /ha với giống FM29, độ tỷ lệ nảy mầm hai phương pháp tương đương Chi phí sản xuất THL D17/CA4 giảm 35% so với quy trình sản xuất hạt giống lai FM29 Đề nghị Mở rộng nghiên cứu dạng bất dục cà chua, tìm kiếm thêm dạng bất dục đực chức có tính ổn định, khả phối hợp cao nhằm tạo nguồn vật liệu cho chọn tạo giống cà chua ưu lai, không cần khử đực dòng mẹ, phát triển bền vững sản xuất Xác định thêm số thông số kỹ thuật: vùng sinh thái, mùa vụ sản xuất hạt giống phù hợp, tiến tới hồn thiện quy trình sản xuất hạt giống cà chua lai F1, khơng khử đực dịng mẹ bất dục vòi nhụy vươn dài, mẫn cảm với GA3 DANH MỤC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG B Ố CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN DANH MỤC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ CỦA TÁC GIẢ Phạm Mỹ Linh, Ngơ thị Hạnh, Lê Thị Thủy, Vũ Thị Tình, Đặng Hiệp Hòa, Lê Thị Mai (2009) ”Nghiên cứu số yếu tố công nghệ để xây dựng sản xuất hạt giống rau lai” Tạp chí Khoa học cơng nghệ, Bộ Nông nghiệp PTNT, tháng 3/2009 Lê Thị Thủy, Vũ Thị Tình, Trần Khắc Thi, Trịnh Khắc Quang, Nguyễn Văn Hoan, (2010) ”Kết nghiên cứu chọn tạo giống cà chua FM10 -8” Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam Viện Khoa học Nông nghiệp Vi ệt Nam số (2010) Lê Thị Thủy, Nguyễn Văn Hoan, Trịnh Khắc Quang (2010) ”Ảnh hưởng thời điểm thụ phấn dịng mẹ có vịi nhụy mẫn cảm với GA3 đến suất chất lượng hạt giống cà chua lai F1” Tạp chí Khoa học Phát triển 2010 : Tập 8, số 5: 780 – 786 Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội Trần Khắc Thi, Lê Thị Thủy, Vũ Thị Tình, Dương Kim Thoa, Trương Văn Nghiệp (2010) Quy trình cơng nghệ sản xuất hạt giống số loại rau chủ lực Nhà xuất Nông nghiệp, 2010, 87 trang Lê Thị Thủy, Trần Khắc Thi, Vũ Thị Tình (2010) ”Kết sản xuất thử giống cà chua FM29” Kết nghiên cứu chọn tạo giống công nghệ sản xuất số loại rau (giai đoạn 2006-2010) Nhà xuất Nông nghiệp, 2010 Trang 15-17 ... Quy trình sản xuất hạt giống tổ hợp lai D17/CA4 Quy trình sản xuất hạt giống cà chua D17/CA4 dựa sở quy trình sản xuất hạt giống lai F1 khử đực thụ phấn tay Viện Nghiên cứu Rau đề xuất Bộ Nông... mẹ cà chua có vịi nhụy vươn dài đáp ứng mục tiêu sản xuất hạt giống lai không cần khử đực 3.1.1 Nghiên cứu đánh giá tập đoàn mẫu giống cà chua Tập đoàn giống cà chua gồm 312 mẫu giống nghiên cứu. .. việc nghiên cứu sử dụn g dòng mẹ bất dục vòi nhụy dài hướng nghiên cứu nhiều hứa hẹn, nhiều nước giới theo đuổi Đề tài ? ?Nghiên cứu góp phần phát triển cơng nghệ sản xuất hạt giống cà chua lai F1"